范文一：海川化工论坛_分析化学实验室用水的规格，制备和检验方法

分析化学实验室用水的规格，制备和检验方法

发布时间:2007-11-1 浏览次数:223次 分析化学实验室用于溶解，稀释和配置溶液的水，都必须先经过净化。

分析要求不同，对水质纯度的要求也不同。故应该根据不同的要求，采用不

同的净化方法制的纯水。

分析化学实验室用的纯水一般有蒸馏水，二次蒸馏水，去离子水，无二

氧化碳蒸馏水，无氨蒸馏水等。

1. 分析化学实验室用水的规格

根据中华人民共和国国家标准GB6682-92《分析化学实验室用水

的规格及试验方法》的规定，分析化学实验室用水分为三个级别:

一级水，二级水和三级水。

一级水用于有严格要求的分析实验，包括对颗粒有要求的实验，

如高效液相色谱用水。一级水可用二级水经过石英设备蒸馏水或

离子交换混合窗处理后，再0.2纳米微孔滤膜过滤来制取。

二级水用于无机痕量分析等实验，如原子吸收光谱人系用水。二

级水可用多次蒸馏或离子交换等制得。

三级水用于一般的化学分析实验。三级水可用蒸馏或离子交换的

方法制得。

实验室使用的蒸馏水，为保持纯净，蒸馏水瓶要随时加塞，专用

虹吸管内外应保持干净。蒸馏水附近不要放浓HCL等易挥发的试

剂，以防污染。通常用洗瓶取蒸馏水。用洗瓶取水时，不要取出

其塞子和玻管，也不要把蒸馏水瓶上的虹管插入洗瓶内。 通常，普通蒸馏水保存在玻璃容器中，去离子水保存在乙烯塑料容器内，用于痕量分析的高纯水，如二次亚沸石英蒸馏水，则需要保存在石英或聚乙烯塑料容器中。

2(各种纯度水的制备

(1)蒸馏水

将自来水在蒸发装置上加热气化，然后将蒸汽冷凝及得到蒸馏水。由于杂质离子一般不挥发，所以蒸馏水中所含杂质比自来水少的多，比较纯净，可达到三级水的标准，但还是有少量的金属离子，二氧化碳等杂质。

(2)二次亚沸石英蒸馏水

为了获得比较纯净的蒸馏水，可以进行重蒸馏，并在准备重蒸馏的蒸馏水中加入适当的试剂以抑制某些杂质的挥发。加入甘露醇能抑制硼的挥发，加入碱性高锰酸钾可破坏有机物并防止二氧化碳蒸出。二次蒸馏水一般可达到二级标准。第二次蒸馏通常采用石英亚沸蒸馏器，其特点是在液面上方加热，使液面始终处于亚沸状态，可使水蒸气带出的杂质减至最低。

(3)去离子水

去离子水是使自来水或普通蒸馏水通过离子交换树脂柱后所得水。配置时，一般将水一次通过阳离子交换树脂柱，阴离子交换树脂柱和阴阳离子交换树脂柱。这样得到的水纯度高，质量可达

到二级或一级水指标，但对非电解质及交替物质无效，同时会有微量的有机从树脂溶出，因此，根据需要可将去离子水进行重蒸馏一得到高纯水。

市售70型离子交换纯水器可用于实验室配置去离子水

范文二：单抗的制备方法(实验室Protocol)

单抗的制备方法

1,免疫

BALB/c小鼠的免疫 BALB/c小鼠的免疫按常规方法进行, 二免后一个星期分别 用断尾抽真空法采血 200μL 进行抗体检测,二免采血后让小鼠休息两周进行加强免 疫,三天后融合。

表 1 BALB/c小鼠的免疫方案

(供参考)

免疫次数 时间

免疫剂量(μg/ mL ) 免疫方法 佐 剂 首免 二免 加强

0d

21d

42d (融 合 前 三

天) 100 100 200 颈背部皮下 腹腔注射 腹腔注射 弗氏完全佐剂 弗 氏 不 完 全 佐 剂 不加佐剂

2, BALB/c小鼠的抗体检测

2.1 BALB/c小鼠血清的制备

将采集的全血样品于 37℃温箱放置 30min 后, 4℃放置半天,待血清析出后, 4 500r/min,离心 10min ,用移液器吸出血清, 4℃放置待检。

2.2 间接 ELISA 法的建立

BALB/c小鼠免疫后, 用间接 ELISA 法对其血清抗体水平进行检测, 间接 ELISA 法步骤如下:

包被: 4℃包被过夜。

洗板:弃去包被液,拍干,向酶标板内加入洗涤液,每孔 200μL , 3~5min 后 倒掉洗涤液,再拍干。如此重复三次。

加待检血清:将血清用 ELISA 洗涤液从 1:10 000开始进行倍比稀释 (即 1:10 000、 20 000、 40 000、 80 000、 160 000、 320 000、 640 000、 1 280 000),共 8个浓度。将稀释好的血清按浓度由低至高的顺序加入酶标板内,每孔 100μL ,每 只小鼠的血清做两列,在 37℃温箱内孵育 30min 。同时设阴性血清对照。

洗板:同上。

加 HRP 标二抗:工作浓度 1:10 000,每孔 100μL ,在 37 ℃温箱内孵育 30min 后,洗板三次。

显色:加底物 (TMB-过氧化氢脲 ) , 每孔 100μL , 37℃温箱放置 10min , 加 2mol/L H 2SO 4终止显色反应,每孔 50μL ,用酶标仪测定 OD 450值。

结果判定:P/N≥ 2,判为阳性 (P、 N 分别为待检和阴性血清的 OD

450

值 ) 。 2.3 SP2/0骨髓瘤的复苏 当血清效价高于 1:10 000时,开始复苏瘤细胞并注射一只 BALB/c小鼠,过 程如下:

2010.07.14药物部

将装有 SP2/0骨髓瘤细胞的纱布袋从液氮罐中取出, 用止血钳夹出一管, 将纱布袋放

回液氮罐,用止血钳夹着装有 SP2/0骨髓瘤细胞的冻存管在 37 ℃水浴中转动,直到

细胞解冻,用 RPMI-1640基础培养液 10mL , 1 200r/min, 5min ,洗细胞两次,用 8mL

完全培养液将细胞重悬后加入培养瓶中,在 CO

2

恒温培养箱中培养。待 SP2/0骨髓瘤

细胞长满瓶底 (培养 3天左右 ) ,将细胞吹洗下来,离心去上清,用 1mL 上清将细胞重

悬,取 0.5mL 注射到 BALB/c小鼠颈背部皮下,一周后开始观察注射部位是否有瘤子

长出。待到瘤子长到蚕豆大小时 (9天左右 ) ,对 BALB/c小鼠进行加强免疫,

三天后做融合。

2.4 细胞融合与培养

2.4.1 细胞融合器材与试剂的准备

小剪刀、小镊子 (各 10套 ) :用酒精棉球擦过后,晾干,装入小铝盒灭菌;

玻璃匀浆器 (至少三套 ) :检查是否破损、配套,装盒灭菌;

玻璃吸管 10mL 、 5mL(用定制的铝盒盛装,至少各一盒,约 40支 ) , 1mL(1支 )

用报纸卷好灭菌;

1mL 注射器 (1支,用报纸包好 ) 和 7号针头 (用小铝盒装 ) 灭菌,抽取 HAT 用;

50 mL离心管:4支,装少量三蒸水,包上报纸,用橡皮筋扎好,再把盖拧松,

装入 500 mL烧杯,用纱布盖口,灭菌;

吸水纸:剪成 10cm 见方的小块 (若干张 ) ,用报纸包好,灭菌,细胞融合时控干

水滴用;

无菌 96孔板四块;血球记数板 1块; 100mL 葡萄糖瓶 (2个 ) 灭菌,一个用来装

饲养细胞,另一个用来装 50mL RPMI-1640基础培养液并提前温育到 37℃;泡沫板

一块:15cm×25cm,解剖小鼠用;

RPMI-1640基础培养液 1瓶; RPMI-1640培养完全液 1瓶; HAT(100×); 50%

PEG-1450用冻存管分装成每管 0.83mL 后, 4℃保存,融合当天取一管置 CO

2

恒温

培养箱内温育至 37℃,备用。

2.4.2 饲养细胞的制备

在制备饲养细胞时,本实验室采用 BALB/c小鼠的腹腔巨噬细胞和脾细胞的混

合细胞作为饲养细胞,其制备步骤如下:

脱颈椎处死空白 BALB/c小鼠 1只, 用 75%的酒精浸泡 5min 。 于超净工作台内,

将小鼠腹部朝上,用针头将 4个脚掌固定在垫有灭菌报纸的泡沫板上。用止血钳 (酒

精灯火焰烧过 ) 从铝盒中夹出一套小剪刀和小镊子, 用小镊子夹紧小鼠下腹部皮肤并

向上提起,用小剪刀在提起部位后剪一小口,将剪刀尖从小口伸进去,打开剪刀将

小口向两边撑开并向下按住小鼠的两后肢,将小镊子从撑开的小口伸进去,夹紧并

挂住剪开的皮肤向前撕扯,直到胸腹部完全暴露出来。换一套小剪刀和镊子,用小

镊子在小鼠腹中部捏住腹膜并向上提起, 用小剪刀在提起部位后剪一 3mm 左右的小

口,将小镊子搁在腹膜上,小剪刀搁在小铝盒盖沿备用。用 5mL 吸管吸取 2.5mL

RPMI-1640基础培养液,小镊子提起腹膜,吸管尖从剪开的小口伸进去,将培养液

注入小鼠的腹腔, 吹吸数次后, 将培养液吸出转移到 50mL 离心管中, 如此重复一次。

将小鼠两后肢交叉固定 (左后肢在上以便于脾脏的暴露 ) ,用小镊子在远离脾脏的部

位捏住腹膜并向上提起, 用小剪刀在提起部位后剪一小口, 将剪刀尖从小口伸进去,

2010.07.14

三天后做融合。

2.4.3 SP2/0骨髓瘤细胞的制备

本实验室将 BALB/c小鼠体内生长的 SP2/0骨髓瘤匀浆后制备 SP2/0骨髓瘤细胞, 然后再用于融合,其制备步骤如下:

将背部皮下长出骨髓瘤的 BALB/c小鼠脱颈椎处死,用 75%5 min在一支灭菌 50 mL离心管中事先加入 15 mL

照饲养细胞的制备方法,

匀浆制备骨髓瘤细胞。取 15 mL

注意:要保证两种液体呈分层状态,千万不能将液体混匀。 1 700 r/min,水平离心 10 min后,取出离心管可见,在骨髓瘤细胞悬液和淋巴细胞分离液的交界处有一层 白色的细胞,这就是骨髓瘤细胞,用 10 mL吸管吸走上层细胞悬液后,将中层的骨 髓瘤细胞悬液转移到另一支灭菌 50 mL离心管中, 用 15 mLRPMI-1640基础培养液, 1 200 r/min, 5 min洗细胞两次。用 10 mL RPMI-1640基础培养液重悬骨髓瘤细胞,用

血球计数板计数。骨髓瘤细胞浓度 =(四角+中央中方格的细胞数) ×5×10 4

个/毫升

2.4.4 免疫睥细胞的制备

将免疫小鼠的脾细胞分离出来并匀浆制备免疫睥细胞, 其方法同 2.2.2.6.2饲养细 胞制备时脾细胞的制备,只是免疫过的脾脏被大量结缔组织包裹分离起来比正常脾 脏困难一些,如果不能完整的分离,可以分小块分离。

2.4.5 免疫脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞的融合

本实验室用分子量为 1450的 50%PEG作融合剂进行细胞融合,细胞融合按常规 方法进行,其操作步骤如下:

取 1×10 7

个 SP2/0骨髓瘤细胞与免疫睥细胞混合,用 15 mL RPMI-1640基础培

养液重悬, 1 500 r/min, 5min 洗细胞两次。于超净工作台内取出灭菌的吸水纸,将 装有骨髓瘤细胞与免疫睥细胞混合细胞的 50 mL离心管上清倒尽后,倒扣在吸水纸 上控干水滴。用小铝锅装 2/3容积的水,于电炉上加热到 37℃后放进超净工作台;

从 CO

2

培养箱取出温育至 37℃的 50%PEG,用 1 mL的吸管吸取 0.8 mL,手持装有 混合细胞的 50 mL离心管,将其放置于 37℃水浴小铝锅中,将 PEG 缓缓加到混合 细胞上,边加边轻轻搅拌,持续 90Sec 后,将离心管插到离心管架上,移走小铝锅,

从 CO

2

培养箱取出温育至 37℃的 50 mL RPMI-1640基础培养液, 用吸管吸取 10 mL缓缓加到融合细胞上边加边轻轻搅拌 (千万不能吹打 ) ,使细胞团块分散,先加 1mL , 再加 2 mL,再加 3 mL,最后加完剩下的 4 mL,加完第一个 10 mL后,接着沿管壁 加完剩下的 40 mL,加完后,拧紧盖,反复颠倒几次,使细胞混匀。 1 500 r/min,离 心 5 min,弃上清,用重悬有饲养细胞的 72 mL含 1%HAT的 RPMI-1640完全培养 液将融合细胞重悬。注:动作要轻,将用吸管将细胞轻轻搅拌起来,不要吹打。将 重悬起来的细胞滴加到 96孔细胞培养板内, 2滴 /孔,置 CO

2

培养箱培养。融合后 第 4天即可观察到小集落;第 7天补加含 1%HT的 RPMI-1640完全培养液 1滴 /孔; 第 10天左右,集落长到占孔底 1/4大小,培养液变黄,即可进行抗体检测。

2010.07.14

2.5 阳性孔的筛选

2.5.1 集落孔的标记

融合后第 7天,在倒置显微镜下对培养板进行观察,在有集落出现孔的培养板 盖上方用记号笔打上小点,标明集落的位置,以便检测时取样以及原始孔的对号入 座。

2.5.2 筛选

采用间接 ELISA 方法对有杂交瘤细胞生长的培养孔进行筛选。

2.5.3 杂交瘤细胞的克隆 (有限稀释法 )

克隆采用有限稀释法进行,具体过程如下:

饲养细胞的制备:1只 BALB/c小鼠的腹腔巨噬细胞和脾细胞可铺 4~6块 96孔细胞培养板,最好只铺 4块。铺 24孔板时, 4滴 /孔,所用饲养细胞量和 96孔细 胞培养板相当。于超净工作台内取出若干灭菌小青霉素瓶,两个一组摆成两列 (每个 待克隆孔需两个小青霉素瓶 ) ,其中一列每瓶加 3.8mL 含 0.5%HT的 RPMI-1640完 全培养液,另一列每瓶加 6.2mL ;取出若干灭菌 1.5mL 离心管,四个一列摆成若干 列 (每个待克隆孔用一列 ) 。以后的克隆均使用不含 HT 的 RPMI-1640完全培养液。

稀释:用剪断尖端的 100 μL 枪头在待克隆孔内吹打数次使细胞重悬起来, 用血 球计数板对细胞计数,用移液器取 100 μL 加到第 1个 1.5 mL离心管中。细胞浓度

=25个中方格的细胞总数 ×104个 /毫升。 细胞浓度一般在 105数量级。 在第 1个 离心管内将细胞稀释成 1×10n 个 /毫升, 再将细胞进行 10×稀释, 直到细胞浓度为 1×10

3个 /毫升。将 1×103

个 /毫升浓度的细胞取 200 μL 加到装有 3.8 mL培养液的小青霉素 瓶中 (细胞浓度为 50个 /毫升 ) ,混匀后,取 0.7 mL加到装有 6.2 mL培养液的小青霉 素瓶中 (细胞浓度约为 5个 /毫升 ) 。先将浓度约为 5个 /毫升的细胞加到铺好饲养细胞 96孔培养板的前 8列, 在将浓度约为 50个 /毫升的细胞加到同一块 96孔培养板的后 4列,每孔 100μL 。加完置 CO 2培养箱培养。一般克隆后第 4天即可见到小集落, 第 7天补液,第 9左右进行抗体检测,准备进行第 2次克隆。克隆一般要进行 3次 克隆,直到出现集落孔的阳性率为 100%。

2.5.4 小鼠腹水法生产单克隆抗体

本实验室采用灭菌液体石蜡预处理 BALB/c小鼠后,再注射杂交瘤细胞的方法 生产腹水,其具体过程如下:

BALB/c小鼠的预处理:用灭菌的液体石蜡处理小鼠,腹腔注射 0.5mL/只,十 天后即可注射杂交瘤细胞。

阳性孔的扩大培养:在 24孔细胞培养板加入饲养细胞, 4滴 /孔,将 96孔板内 的阳性细胞转到 24孔细胞培养板进行扩大培养。

注射:待到细胞长满孔底将 24孔板的细胞重悬, 1 200r/min,离心 5min ,细胞 计数, 用 RPMI-1640基础培养液稀释成 1~5×106

个 /毫升, 腹腔注射小鼠 0.5mL/只, 8天左右观察到小鼠腹部隆起,即可采集腹水。 2010.07.14药物部

2.5.5 细胞的冻存与复苏

在杂交瘤细胞进行扩大培养后, 应该冻存一部分细胞。 采集腹水后还应该用淋巴 细胞分离液将杂交瘤细胞分离出来再冻存一部分。细胞冻存几个月后要进行复 苏,对细胞活力和分泌抗体的能力进行检测。细胞冻存和复苏的具体方法如下:用 RPMI-1640基础培养液将杂交瘤细胞重悬, 1 200r/min,离心 5min ,洗细胞两 次,弃上清,用细胞冻存液将细胞重悬,用血球计数板对细胞进行计数,使细胞

浓度在 1~5×10 6

个 /毫升范围内, 将细胞转入冻存管, 每管 1.5 mL, 放进自制的双

层小纱布袋, 6管 /袋,先置液氮罐上气相或 -26 ℃冰箱 30 min,再置液氮罐下气 相过夜,最后将小纱布袋浸入液氮中长期保存。细胞复苏方法同 1.2.2.5 瘤细胞 复苏。

对细胞活力和分泌抗体的能力进行检测。细胞冻存和复苏的具体方法如下:用 RPMI-1640基础培养液将杂交瘤细胞重悬, 1 200r/min,离心 5min ,洗细胞 两次,弃上清,用细胞冻存液将细胞重悬,用血球计数板对细胞进行计数,使细胞

浓度在 1~5×10 6

个 /毫升范围内,将细胞转入冻存管,每管 1.5 mL,放进自制的双

层小纱布袋, 6管 /袋,先置液氮罐上气相或 -26 ℃冰箱 30 min,再置液氮罐下气相

过夜,最后将小纱布袋浸入液氮中长期保存。细胞复苏方法同 1.2.2.5

3. 单克隆抗体的鉴定

3.1 杂交瘤细胞染色体数的检测

在细胞传代培养 48h 后加入秋水仙素,使其最终浓度达到 0.04μg/mL,继续培养

2.0~2.5h 。终止培养后,将贴壁的细胞全部用吸管吹下,移入 10mL 的离心管,以

1 000r/min离心 10min ,弃去上清液。加入 37℃预温的 0.075mol/L的 KCL 低渗溶

液 5.0mL , 用吸管吹打均匀, 置 37℃水浴 15min ~20min 。 每管加入新鲜配制的固定

液 (甲醇:冰乙酸 =3:1)1.0mL 混匀,以 1 000r/min离心 10min ,去上清。再每管加

固定液 5.0mL ,轻轻混匀,静止 30min 后,以 1 000r/min离心 10min ,弃上清。再

次固定, 加固定液 5.0mL , 轻轻混匀静止 30min , 以 1 000r/min离心 10min , 弃上清,

用同样方法加固定液 5.0mL 打匀,封上管口于 4℃静止过夜。轻轻吸去上清液,留

下 0.5mL 左右的上清液,混匀使细胞悬浮,用滴管吸取细胞悬液 2~3滴,滴在已

用冰水浸泡的洁净的载玻片上,立即吹散,并在火焰上通过几次,促使细胞平铺于

载玻片上,自然干燥。以 10% Giemsa染液染色 10min ,洗去洗液自然干燥。最后于

显微镜下观察计数。

3.2 单克隆抗体亚型的鉴定

采用 HBT 公司的鼠源单抗亚类鉴定试剂盒 (Mouse Mab isotyping Kit)对单克隆

抗体亚型进行鉴定,操作过程如下:

将试剂盒内的缓冲液温育到 37℃,加 500μL 缓冲液到装有分型试纸卡 (κ轻链 )

的小试管内。 加 500μL 样品 (培养上清或稀释过的腹水, 一般用 PBS 做 1000倍稀释 ) ,

轻轻晃动小试管使试纸卡充分浸没。摇动装有大鼠抗小鼠 κ轻链抗体-胶体结合物

的试剂瓶 (大瓶 ) ,混匀后,取 1mL 加到小试管,保持试纸卡有字一面朝下。在 18~

25℃晃动小试管,直到两个小点出现 (重链同种型和 κ轻链 ) 。在晃动的过程中要始

终保持试纸卡浸没在溶液中,而且有字一面朝下。

2010.07.14

3.3 单克隆抗体电泳鉴定

将饱和硫酸铵粗提的单抗、葡聚糖凝胶 G-200纯化的单抗以及蛋白质 Marker 用浓度为 12%的分离胶进行 SDS-PAGE ,对单抗的蛋白质本质加以鉴定,并验证 G-200纯化效果。

4. 单克隆抗体的纯化

腹水的预处理 (二氧化硅吸附法 ) :取一定量的腹水,加等体积的巴比妥缓冲液, 加适量二氧化硅粉末,室温下,搅拌 30min ,然后 1 800r/min,离心 20min ,即得澄 清的腹水。 4.1 硫酸铵盐析法纯化单克隆抗体(少量提取) 用 50%的饱和硫酸铵 (按最终饱和度算 ) 粗提一次, 33%的饱和硫酸铵粗提两次, 用 1/2腹水体积的 PBS 将单抗溶解,装入透析袋,用 PBS 透析两天,用小青霉素瓶 分装,每瓶 2mL ,冻干,于 -26℃保存。使用时用 2mL 蒸馏水溶解。

葡聚糖凝胶 G-200纯化单抗:将葡聚糖凝胶 G-200用 PBS 于 4℃浸泡三天,装 柱,将粗提的单抗取 1mL 上样,用 PBS 洗脱, 20%磺基水杨酸检测,出现白色浑浊 后开始收集, 浑浊度较低时停止收集。 用小青霉素瓶分装成每瓶 2 mL, 冻干, 于 -26℃保存。

4.2 辛酸-硫酸铵盐析法纯化单克隆抗体(大量提取)

辛酸 -硫酸铵盐析法是一个经验的方法, 辛酸在偏酸条件下能将血清中除 IgG 外 的蛋白质都沉淀下来,上清中只有 IgG 。辛酸加入量因抗体的来源不同而不同,人 血清为 70μl/mL,兔血清中为 75μl/mL,小鼠血清为 40μl/mL,小鼠腹水为 33μl/mL。 这种方法 IgG 的回收率可达 90%,具体操作如下:

向一份预处理过的腹水中加入 2份 0.06mol/mL、 pH5.0的乙酸缓冲液,用 0.1mol/mL的 HCl 调 pH 至 4.5。于室温搅拌下在 30min 内逐滴缓慢加入辛酸,按每 毫升稀释前的腹水加 33μL , 4℃静置 2h , 15 000r/min离心 30min ,弃沉淀。上清经 砂芯漏斗或 125μm 的尼龙网过滤,加入 1/10体积的 0.1mol/L PB(pH7.4) 、

8.5%NaCl(用 1mol/L的 NaOH 调 pH 至 7.4) 。 在 4℃冰浴下于 30min 内加入 0.277g/mL的硫酸铵, 使成 45%饱和度, 静置 1h 以上。 4℃下 12 000r/min离心 30min , 弃上清。 沉淀溶于适量 137mmol/L NaCl、 2.6mmol/L KCl、 0.2mmol/L EDTA的 PBS(pH7.4)中,对 50~100倍的上述 PBS 于 4℃透析过夜。 4℃下 12 000 r/min离心 30min ,除 去不溶性沉渣。

该法主要用于 IgG2b 和 IgG1的纯化, 对 IgA 和 IgG3的回收率及纯化效果都较 差。 辛酸 -硫酸铵盐析法纯化单克隆抗体可获得 95%的纯度, 其中鼠 IgG 纯度达 98%以上。

附录:

所用试剂及溶液: 细胞培养溶液

双抗:取青霉素 G 钠 100万单位和硫酸庆大霉素 1g 溶于 100mL 三蒸水,过滤除菌 后分装小青霉素瓶,于 -26℃保存。

2010.07.14

2010.07.14

基础培养液:RPMI-1640粉剂一袋,补加 2.0g 碳酸氢钠(NaHCO 3

),于 1 000mL容量瓶内用三蒸水溶解, 在即将定容前摇匀并先用 1.0 mol/L HCl调 pH 至 7.0~7.2, 后 定容至 1 000mL。过滤除菌,分装小瓶。

完全培养液:基础培养液补加 20%灭活补体的新生牛血清和 1.0%双抗, 混匀后, 4℃保存。

HAT 选择培养液:完全培养液补加 1.0%商品化 HAT ,融合当天现配现用。 HT 选择培养液:完全培养液补加 1.0%商品化 HT ,混匀后, 4℃保存。

50倍 8-杂氮鸟嘌呤溶液:8-杂氮鸟嘌呤 10mg , 1.0mol/L NaOH 2mL,用无菌三 蒸水定容至 10mL 。过滤除菌,分装小瓶, -26℃保存。

1.0mol/L HCl:量取 82mL 浓盐酸,加水定容至 1 000mL。

1.0mol/L NaOH:称取 40g NaOH,溶解后加水定容至 1 000mL。

细胞冻存液:新生小牛血清和 DMSO 以 9:1的比例混合,混匀后,于 4℃保存。 ELISA溶液

包被液(0.05mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液):Na 2CO 3 1.59g , NaHCO 3

2.93g ,加蒸 馏水定容至 1 000mL。

洗涤液(含 0.05%吐温 -20的 0.01 mol/L pH7.4 PBS):NaCl 8.0g, KCl 0.2g, Na 2HPO 4·12H2O 2.9g, KH 2PO 4

0.2g ,吐温 -20 0.5 mL,加蒸馏水至 1 000mL。 封闭液:含 0.5%BSA的 PBST 。

底物缓冲液:柠檬酸 ·H2O 4.91g, Na 2HPO 4·12H2

O 19.38g, 加三蒸水至 1 000mL。 底物 A 储存液:TMB 100mg,无水乙醇 50mL , 4℃避光保存。

底物 B 储存液:过氧化氢脲 75mg ,三蒸水 10mL , 4℃避光保存。

底物(10 mL):底物缓冲液 9.5mL ,底物 B 储存液 32μL ,底物 A 储存液 0.5mL , 混匀即可,现配现用。

终止液(2mol/L H2SO 4):量取浓 H 2SO 4

55.5mL ,加入到 400mL 蒸馏水中,冷 却后,定容至 500mL 。

2010.07.14

2010.07.14

范文三：氧气的实验室制备方法

龙文教育一对一个性化辅导教案

宋嘉宝同学2015年8月21日学案【第5次】

课题:制取氧气

一、 导入新课Vs温故知新

1. 在实验室取用块状固体应用；加热物质一般用给试管中的液体加

热时，要用 夹持，而且液体不能超过试管容积的 ，试管口不能 ；加热前应 ．

2．称量物质一般用 ，称量时砝码应放在 盘上．

3．用量筒量液体时，量筒必须，视线要与量筒内液体的仰视的话，将会使读数 ． 4．取用药品时，试剂瓶塞拿下应 放在桌上，取液体药品时，瓶上的标签应向着 ，瓶口应 容器口， 地倒进容器中．取完药品后，要 盖紧瓶塞，把瓶子放回 ，并使标签 ．

5．熄灭酒精灯时不能用，必须用积的 ；不准向 的酒清灯里添加酒精．洗过的玻璃仪器内壁附着的水既 ，也 时，表示仪器已洗干净．

6. 下列玻璃仪器名称错误的是（ ）

A.普通漏斗B．锥形瓶 C．集气瓶 D．长颈漏斗

7. 如图所示的化学实验基本操作正确的是（ ）

A. 称量氯化钠 B．点燃酒精灯C．取用固体 D．加热液体

8.

请你根据以下实验要求从中选出所需合适仪器的编号，并写在横线上．

（1）镁条燃烧时，夹持镁条用

．

（2）配制一定溶质质量分数的硝酸钾溶液用 ． （3）粗盐提纯时蒸发滤液所用到的仪器是 ． （4）在（2）、（3）两组实验操作中都缺少的一种仪器是（填名称） ．

9. 为什么磷常用来做军事中烟幕弹的原料？

二、 新课教学

?

【知识点1】氧气的实验室制法

1. 药品：过氧化氢与二氧化锰、高锰酸钾

⒉反应原理：高锰酸钾加热

锰酸钾

+二氧化锰+氧气

过氧化氢水 + 氧气

二氧化锰

氯酸钾氯化钾 + 氧气

加热

二氧化锰

⒊实验装置：包括发生装置和收集装置（见书本P37）

⒋收集方法：

a) 排水法：因为氧气不易溶于水。

b) 向上排空气法：因为氧气密度比空气略大。

⒌用高锰酸钾制氧气，并用排水法收集。实验步骤可以概括如下： ⑵ 检查装置的气密性；

⑵将药品装入试管中，试管口放一团棉花（目的是防止高锰酸钾粉末进入导管），用带导管的单孔胶塞塞紧试管；

⑶ 将试管固定在铁架台上；（注意：试管口应略向下倾斜） ⑷ 点燃酒精灯，先均匀受热后固定加热；

⑸ 用排水法收集氧气（当导管口产生连续、均匀的气泡时才开始收集）；

⑹ 收集完毕，将导管移出水槽；这样做的目的是：防止水槽中的水倒吸入试管使试管炸裂。 ⑺ 熄灭酒精灯。

⒍检验方法：用带火星的木条伸入集气瓶内，如果木条复燃，说明带瓶内的气体是氧气。 ⒎验满方法：

⑴用向上排空气法收集时，用带火星的木条伸入集气瓶口，如果木条复燃，说明带瓶内的氧气已满；

⑵用排水法收集时，当气泡从瓶外冒出时，说明该瓶内的氧气已满。

? 【知识点2

】氧气制取反应装置和收集装置的选择

1. 反应装置选择依据：反应物的状态和反应条件。若反应物都是固体，需要加热，选择图1；若反应物是固体和液体，不需要加热，选择图2 或者图3。

2. 收集装置的选择依据：气体的溶解性、密度、是否与水反应等。若气体不溶于水且不与水发生化学反应，即可用排水法收集，此法收集的气体比较纯净，但是不干燥，如图4所示；若气体的密度比空气大，且不与空气中的成分反应，即可用向上排空气法，如图5；若气体的密度比空气小，且不与空气中的成分反应，即可用向下排空气法，如图6。

? 【知识点3】分解反应

分解反应：_________________________________________ ? 【知识点4】催化剂

催化剂和催化作用：催化剂是指在化学反应中能改变其他物质的反应速率，而本身的质量和化学性质在化学反应前后都没有改变的物质。催化剂所起的作用叫催化作用。起促进反应速率的是正催化剂，减慢反应速率的是负催化剂（防橡胶老化，用负催化剂）。

? 【知识点5】工业法制氧气

氧气的工业制法——分离液态空气（物理变化）

【例题1】

1. 下列叙述中正确的是（）

A. 催化剂只能加快其他物质的反应速率 B．催化剂在反应前后质量和化学性质不变 C．催化剂并不参加化学反应

D. 过氧化氢分解的催化剂一定是二氧化锰

2.实验室用加热高锰酸钾的方法制取氧气，并用排水法收集，主要有以下步骤：①将药品装入试管；②检查装置的气密性；③给试管加热，④将装置固定在铁架台上；⑤熄灭酒精灯；⑥收集气体；⑦将导管从水槽中取出．正确的操作顺序是 （ ） A．①②④③⑥⑤⑦ B．②①④③⑥⑦⑤ C．②①④③⑥⑤⑦ D．②①④③⑦⑥⑤

【梯度推进】

1. 要证明集气瓶内盛的是空气还是氧气，最简单的方法是（ ）。

A．测量密度，密度大的是氧气 B．能使细铁丝燃烧的是氧气

C．能跟硫燃烧，发出蓝紫色火焰的是氧气 D．能使带火星的木条复燃的是氧气

2. 用氯酸钾和过氧化氢分别制取氧气的实验，共同点有

A．都必须加热 B．都是分解反应 C．反应物都是氧化物 D．发生装置相同

【考试链接】

1.

根据下图回答问题

⑴实验仪器a的名称是________。

⑵实验室用高锰酸钾制取氧气的文字表达式为______________________________，所选用的发生装置是____(填字母序号，下同)。

⑶实验室用过氧化氢溶液和二氧化锰制取氧气是，二氧化锰起__________作用，所选用的收集装置是____或E。

⑷用排空气法收集一瓶氧气，验满时将带火星的木条放在瓶口，若观察到__________，说明瓶中已充满氧气。

三、课堂小结

四、初显身手：

1.实验室里利用加热氯酸钾和二氧化锰固体混合物来制取氧气，在该反应中，二氧化锰作了氯酸钾反应的催化剂，下列说法中正确的是（）

A．二氧化锰的质量和化学性质在反应前后不改变 B．二氧化锰可以作为各种化学反应的催化剂 C．加入二氧化锰增加了生成氧气的质量 D．不加入二氧化锰，加热氯酸钾不会生成氧气

2.

下列有关玻璃导气管的使用图示正确的是（省略夹持和加热装置）

3. 催化剂在化学反应中的作用是（ ）

归纳总结：

五、课后巩固（分数：100分，时间：40分钟） 教师寄语：路就在前方！

一． 选择题 （每题4分，共 32 分）

1. 下列示意图分别是实验室氧气制备、收集、验满、验证性质的操作，其中正确的是

A B C

D

2. 小明同学采用加热氯酸钾的方法制取氧气，错把高锰酸钾当作二氧化锰放入氯酸钾内，其结果与只加氯酸钾相比，正确的是（ ）

3. 有关催化剂的说法错误的是（ ） 4. 实验操作和目的对应关系不正确的是（ ）

5. 某学生在实验室设计了五种制取氧气时使用药品的方案，其中可行的是（ ） ①用氯酸钾和二氧化锰混合加热②将氯酸钾加热③将高锰酸钾加热④将高锰酸钾和氯酸钾混合加热⑤将二氧化锰加热

A.①②③ B.③④⑤ C.①③④ D.②③⑤

6. 某同学制氧气时，试管炸裂了，造成试管炸裂的原因可能是下列中的（ ） ①没有给试管均匀预热 ②试管外壁潮湿 ③试管口没有略微向下倾斜 ④忘了在试管口加一团棉花 ⑤加热时试管与灯芯接触 ⑥收集完氧气，先撤酒精灯 ⑦高锰酸钾中混有可燃物

A. 全部 B. 除④外 C. 除⑥⑦外 D. ①②③⑤

7. 从安全、环保、节能、简便等方面考虑实验室制取氧气的最佳方案是（ ）

A. 氯酸钾受热分解 B. 过氧化氢溶液分解 C. 分离液态空气法 D. 高锰酸钾受热分解

8. 下列变化中不属于化学变化的是 （ ） A、加热氯酸钾制氧气 B、加热高锰酸钾制氧气 C、工业上用分离空气法制氧气 D、氧气使带火星木条复燃

二．填空题 （共 68分,每空4分）

1. 拉瓦锡为了研究空气的成分，曾把汞放在密闭容器中加热，得到了红色粉末氧化汞，又把这一种红色粉末加热，得到了汞和氧气。写出上述两个反应的文字表达式：_______________________； _________________________。

2. 人人都应关心和保护人类生存的环境。为监测空气质量，江苏省淮安市建立了“城市环境空气质量日报制”，日报：总悬浮颗粒（粉尘）、二氧化硫、二氧化氮三项指标。其中，_____________超标，主要是大规模不规范的城市建设造成的；_____________超标，主要是煤的燃烧造成的；_________超标，主要是大量汽车、助力车等排放的尾气造成的。

3. 回忆实验室用氯酸钾制取氧气的过程，结合右图回答问题： ⑴写出标有字母的仪器名称：a________；

⑵氯酸钾制取氧气的文字表达式为_____________；

⑶停止加热时要先将导管移出水面是为了______________；

（4）如果采用过氧化氢与二氧化锰混合制取氧气，反应的文字表达式为______________。

4. 氧气是人类生存必需的物质,通过化学变化得到氧气的方法有很多。

实验室制取氧气，若选用如图所示的装置制取氧气,文字表达式为____________________________。

5. 实验室常用高锰酸钾粉末制取氧气（装置A），也可用过氧化氢溶液和催化剂二氧化锰粉末来制取氧

气（装置B）。装置B中的仪器a是分液漏斗，通过活塞的“开”、“关”可以随时滴加过氧化氢溶液，从而控制得到氧气的质量

。

（1）写出一种实验室制取氧气的文字表达式：_________________________________。

（2）从所需的药品状态和反应条件比较装置A和B的差异：

（3）用向上排空气法收集氧气，并用带火星的木条放在集气瓶中，检验氧气是否收集满，这是利用

了氧气的________________________、__________________________性质。

范文四：常用实验室纯水的制备方法

常用实验室纯水的制备方法

霉甩技本

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常用雾劈室讫水的剐刍掇jl0_》I|ll ll_?_0|_

纯水是化学分析的基本条件之一 在开展分析监测之前.首先要制备出合 平分析要求的纯水纯水的制备是将原 水中的悬浮性杂质,可溶性杂质和非可 溶性杂质全部除净的水处理方法制备 纯水有多种方法.根据不同的分析方 法,分析对象和分析质量对纯水的纯净 度,离子含量的不同要求.有蒸馏法,亚 沸法,离子交换法等.一般实验室通常 采用的是蒸馏法和离子交换法 1.蒸馏法

蒸馏法纯化水的机理是根据水与 杂质的不同沸点.利用杂质不和水蒸气 一

同蒸发而达到水与杂质分离的效果 专用蒸馏器采用蒸馏器内电阻加热.代 替外部电炉,煤气,煤炉加热.可减少环 境污染和热量损失蒸馏器的种类较 多.普通蒸馏水的蒸馏器一般是用铜或 玻璃制造另外.还有适用于特殊用途

的高纯水蒸馏器.包括石英蒸馏器,银 蒸馏器,聚四氟乙烯和铂蒸馏器由于 普通实验室的蒸馏器多为铜制蒸馏器. 蒸馏所得水质电阻率较低为了提高蒸 馏水的纯度.可采用增加蒸馏次数,减 小蒸馏速度,采用高纯材料蒸馏器,勤 清洗蒸馏器等办法但单纯采取重复蒸 馏和减小馏出速度的方法.不但产量 低.成本高.而且受到环境和容器材质 的污染.制得纯水的纯度有限.高纯材 料蒸馏器如石英蒸馏器等成本高又不 能满足大量用水的需求.相比之下.离 子交换法更具有实用性

2.离子交换法

用离子交换树脂处理原水.所获得 的水称为去离子水.或离子交换水此 法设备可大可小,操作简便,出水量大, 树脂经过处理可常年使用.因此比蒸馏 法成本低,适合大量用水的场合. 2.1离子交换法制备纯水的原理 离子交换法制备纯水的原理.是利 用氢型和氢氧型的离子交换树脂层中 可游离交换的离子与水中同性离子间 的离子交换作用.将水中各种离子减少 到最低程度甚至全部去除从实质上 看.带有活动性离子的固体树脂与周围 溶液中的离子进行交换.对交换剂本身 结构并没有物理性变化.只是一种吸附 现象.在制出一定量合格的水之后.树

脂吸附饱和.可以通过酸碱对树脂进行 再生即解吸,使树脂恢复交换能力.再 次制水阴,阳树脂经如此循环可常年 使用.也正体现了它的经济性

2.2新树脂的选择

在制备去离子水的过程中.影响水 质纯度的因素有很多.但是其中最关键 的就是如何根据原水中离子的组成和 对水的纯度的要求.正确地选择离子交 换树脂现在市售的常用树脂主要有弱 酸(弱碱)型树脂和强酸(强碱)型树脂 两种.相比较而言,在同性(阳性或阴 性)树脂中,弱型树脂比强型树脂交换 容量大.每个交换周期制取的水量大. 但弱型树脂只能去除水中交换吸附能 力强的离子.而强型树脂更能去除水中 交换吸附能力弱的离子根据这两种树 脂各自的特点.结合树脂的物理特性. 实验当中常选用含水率50%左右,粒度 2040目,球状,交换能力强,强度较好 的强酸(强碱)型树脂制备去离子水. 2.3新树脂的精制

离子交换树脂出厂时离子形式是 不符合制水要求的,而且在生产,贮存, 收稿日期:2008—03—24

作者简介:李欣,女,满族,河北省水环境监测中心承德分中心,助理工程师.

运输等环节中.常常会带人各种杂质. 当树脂与水,酸,碱接触时,这些杂质就 会转入水中,影响水质因此,必须对新

树脂进行精制.清除杂质并转型: 漂洗.将阳,阴树脂从塑料袋中取 出,分别倒人两只搪瓷(须完好无创伤) 或塑料面盆中.用水反复清洗出杂质. 至无色,无异味后.用蒸馏水浸泡24h. 醇浸泡当蒸馏水中无明显浑悬物 时,将水排尽.分别用95%的乙醇溶液 浸没树脂,搅拌均匀,浸泡24h或加倍. 以除去醇溶性物质

阳树脂的动态处理将阳树脂盆中 的乙醇溶液排尽.用蒸馏水反复漂洗至 无色无味.加入7%的盐酸溶液至浸没 树脂层(液面高出树脂lcm).不时搅拌. 浸泡4h后.排尽盐酸.用蒸馏水漂洗至 pH3,4;再用8%的氢氧化钠溶液同法浸 泡4h.最后用蒸馏水漂洗至pH8,9为 止.

阴树脂的动态处理将阴树脂盆中 的乙醇溶液排尽.用蒸馏水反复漂洗至 无色无味.加入8%的氢氧化钠溶液至 浸没树脂层(液面高出树脂lcm).不时 搅拌,浸泡4h后,排尽氢氧化钠,用蒸馏 水漂洗至pH89;再用7%的盐酸溶液同 法浸泡4h.最后用蒸馏水漂洗至pH34 为止.

2.4树脂的装柱和联结

经过精制处理的树脂.即可装入交 换柱内备用.交换柱可自制.也可选用 市售的离子交换纯水机装柱时先注入

半柱水.再将树脂带水一同倒人柱中 树脂高度宜在交换柱2/3处.各柱要装 置平均值得注意的是.装柱时一定要 保持柱内水面高度高于树脂高度.防止 树脂间形成气泡.影响交换量和流速 交换柱的联结一般是将阳离子交换柱 ;oos

寨甩技

和阴离子交换柱进行串联.具体根据树 脂量和所需纯水纯度而定

除新树脂外.经过长时间使.失

去再生能力无法解吸的老树脂也按以 上步骤进行活化后.方可进行下面的常 规处理

2.5树脂的再生

树脂的再生即解吸.以单级复床为 例.

阳离子树脂柱的再生..将阳离子交 换柱串联.用7%的盐酸溶液自进水嘴 通人柱内.缓慢流经阳离子树脂流速 控制在每min50,60m1.用量应为再生全 部树脂所需理论酸量的1.5倍以上.以 达到再生完善使用者也可根据树脂的 体积和饱和度.自行控制盐酸用量.但 必须保证树脂与酸接触时间在lh以上. 并且流出酸的浓度与加入酸的浓度相 近.

阴离子树脂柱的再生将阴离子交

换柱串联.用8%的氢氧化钠溶液进 水嘴通人柱内.缓慢流经阴离子树脂 流速控制在每min50,60m1.用量应为再 生全部树脂所需理论碱量的2,3倍以 上.以达到再生完善使用者也可根据 树脂的体积与饱和度.自行控制氢氧化 钠用量.但必须保证树脂与碱接触时间 在1.5h以上.并且流m碱的浓度与加入 碱的浓度相近每次再生处理时.可选 取浓度最高阶段的酸碱废液加以收集. 下一次再生处理时可先加入废液.再加 入新配制的溶液树脂经动态再生后. 最少要停放lh以上.如果能停放过夜最 佳.这样可以对动态再生起到补充作 用.达到再生完善值得注意的是.整个 再生过程不可间歇或中断.以避免南于 再生剂与某些阳离子生成沉淀而使柱 内树脂受到堵塞

树脂的淋洗由于氢型和氢氧型树 脂在过高或过低的DH介质中制取的纯 水都不能或不完全能达到最佳纯度.cj;=I

此必须将树脂层中过高浓度的再生剂 加以稀释阳离子交换柱的淋洗可使用 自来水.在可能的情况下.最好选用蒸 馏水或去离子水,阴离子交换柱的淋洗 必须使用去离子水或蒸馏水.没有的情 况下应使用再生好的阳床水

树脂的冉隹是再生剂向树脂内缓 慢渗透的过程.淋洗是使其向外缓慢扩

散的过程.二者在作用形式上相反.但 为_『反应充分都要求缓慢进行一因此.淋 洗的流速也不宜太快.在替换出大部分 酸碱液后.流速应控制在150n1l/min.淋 涮toos

洗终点用DH值试纸检验阳离子树脂交 换柱流出液的浓度应为DH3,4,阴离子 树脂交换柱流出液的浓度应为DH8,9. 或二者均为中性

2,6制水

失去吸附能力的树脂.经过以上步 骤的处理即可制取纯水为了保证纯水 的水质纯度.使树脂的利用率更高.应 使用一次蒸馏水作为原水制取去离子 水,

3,几种特殊用水的制备方法

3,1无氨水的制备

一

是适量的蒸馏水或离子交换水. 用碳酸氢钠调至弱碱性(DH8,9),将水 煮沸至原体积的1/4.即可得无氨水 二是蒸馏水中加人数毫升再生好 的阳离子交换树脂振摇数分钟.即可除 氨.或者将蒸馏水通过阳离子交换柱也 可除氨

三是蒸馏用水中加入硫酸至DH< 2.使水中各种形态的氨或胺最终都能 转换成不挥发的盐类.收集馏出液即可 (为避免实验室空气中含有氨而污染.

应在无氨气的实验室中进行蒸馏) 3.2无二氧化碳水的制备

将蒸馏水或离子交换水煮沸至少 10min(水多时).或使水量蒸发l0%以 上(水少时).即得无二氧化碳水.待水 冷却后.用带碱石灰管的胶塞盖紧瓶 口.以防吸收空气中的二氧化碳. 3.3重蒸馏水的制备

用硬质玻璃或石英蒸馏器.在每升 蒸馏水或去离子水中加入50ml碱性高锰 酸钾溶液(每l1含8gKMnO4+300gKOH),

重新蒸馏.弃去头尾各1/4容积.收集中 段的重蒸馏水.称二次蒸馏此法去除 有机物较好.但不宜做无机痕量分析之 用.也可以直接在二次蒸馏水器中制 备,第二个蒸馏瓶中不JJflKMnO. 3.4无氧水的制备

将水注入平底烧瓶中.煮沸lh后立 即用装有玻璃导管的胶塞塞紧.导管与 盛有焦性没食子酸的碱性溶液的洗瓶 连接冷却

3.5无氯水的制备

加入亚硫酸钠等还原剂将算来水 中的余氯还原为氯离子.用附有缓冲球 的全玻璃蒸馏器进行蒸馏抽取.检验: 取实验用水l0ml于试管中.加入2,3滴 (1+1)硝酸,2,3滴0.1rno1/1硝酸银溶液. 混匀.不得有白色混浊出现

36无酚水的制备

一

是活性炭吸附法将粒状活性炭 加热至150,170qc烘烤2h以上进行活 化.放人干燥器内冷却至室温后.装入 预先盛有少量水(避免碳粒间存留气 泡)的层析柱中.使蒸馏水或去离子水 缓慢通过柱床.按柱容量大小调节其流 速.一般以每min不超过100ml为宜开 始流出的水(略多于装柱时预先加入的 水量)必须再次返回柱中.然后正式收 集.次柱所能净化的水量.一般约为所 用碳粒表观容积的1000倍

二是加碱蒸馏法加入氢氧化钠至 水的DH>Il(可同时加入少量高锰酸钾 溶液使水呈紫红色).使水中酚生成不 挥发的酚钠后移人全玻璃蒸馏器电加 热蒸馏.集取馏出液即可

3.7不合有机物的水

将碱性高锰酸钾溶液加入水中再 蒸馏.在再蒸馏过程中应始终保持水中 高锰酸钾的紫红色不得消退.否则应及 时补加高锰酸钾.口

(接第20页)

5.加强监管,注重长效.确保工程 长期发挥效益

为确保群众能够长期饮用既方便 又安全的自来水.一是严格水源选择. 坚持把选择合格水源作为工程建设的 首要环节.每项工程开工前都对水源,

水量和水质进行充分论证.由职能部门 m具水质监测报告.水源水质不合格的 坚决不开_T同时.把新建的24111~饮水 专用井划定为水源保护区.在水源地保 护区内严禁开发活动和排污行为二是 严格设备材料采购所有工程设备公开 招标,集中采购,择优采用,杜绝了只讲 价格,不讲质量的问题三是严把施工 质量关统一施工技术.统一施工标准. 并聘请监理人员.全程监控.保证了工 程质量和进度

"村村通自来水T程"实施后.不仅 解决了群众饮水不安全问题.提高了农 民的生活质量和健康水平.而且解放了 缺水村大批的拉水劳动力.为他们投入 经济发展创造了条件.还促进了农村产 业结构调整.促进了农民增收和农村经 济的增长口

范文五：氧气的实验室制备方法

龙文教育一对一个性化辅导教案 学生 宋嘉宝 学校 广大附中 年级 新初三 次数 第4次

2015-08-21 科目 化学 教师 赵丹 日期 时段 10-12

课题 制取氧气

1. 氧气的实验室制法; 教学2. 实验室制备氧气实验中，催化剂的作用;

3. 分解反应; 重点 4. 工业制氧气

教学1. 氧气的实验室制法(原理、实验装置、操作步骤、收集方法、验证等注意

事项)(每年中考必考考点) 难点

1. 掌握氧气的实验室制法以及学会应用和解题; 教学2. 知道实验室制备氧气过程中催化剂的作用;

3. 了解分解反应的特点; 目标 4. 了解氧气的工业制法。

一、新课导入Vs温故知新

二、内容讲解 教 1. 实验室制取氧气

2.分解反应 学 3.催化剂作用

步 三、 课堂小结

骤 四、 初显身手

及 五、 课后巩固

教 六、 化学常识

学

内

容

管理人员签字:日期:年月日

1、学生上次作业评价:?好?较好?一般?差

备注:

2、本次课后作业: 作

业

布

置

家

长

建

议

家长签字:日期:年月日

宋嘉宝同学2015年8月21日学案【第5次】 课题:制取氧气

一、 导入新课Vs温故知新

1. 在实验室取用块状固体应用 ;加热物质一般用 做热源，给试管中的液体加

热时，要用 夹持，而且液体不能超过试管容积的 ，试管口不

能 ;加热前应 (

2(称量物质一般用 ，称量时砝码应放在 盘上(

3(用量筒量液体时，量筒必须 ，视线要与量筒内液体的 保持水平，如果采用仰视的话，将会使读数 (

4(取用药品时，试剂瓶塞拿下应 放在桌上，取液体药品时，瓶上的标签应向着 ，瓶口应 容器口， 地倒进容器中(取完药品后，要 盖紧瓶塞，把瓶子放回 ，并使标签 (

5(熄灭酒精灯时不能用 ，必须用 ;给酒精灯添加酒精时，不准超过酒精灯容

;不准向 的酒清灯里添加酒精(洗过的玻璃仪器内壁附着的水积的

既 ，也 时，表示仪器已洗干净(

6. 下列玻璃仪器名称错误的是( )

A.普通漏斗B(锥形瓶 C(集气瓶 D(长颈漏斗

7. 如图所示的化学实验基本操作正确的是( )

A. 称量氯化钠 B(点燃酒精灯C(取用固体 D(加热液体

8. 请你根据以下实验要求从中选出所需合适仪器的编号，并写在横线上(

(1)镁条燃烧时，夹持镁条用 (

(2)配制一定溶质质量分数的硝酸钾溶液用 (

(3)粗盐提纯时蒸发滤液所用到的仪器是 (

(4)在(2)、(3)两组实验操作中都缺少的一种仪器是(填名称) (

9. 为什么磷常用来做军事中烟幕弹的原料,

二、 新课教学

, 【知识点1】氧气的实验室制法

1. 药品:过氧化氢与二氧化锰、高锰酸钾

加热 ?反应原理:高锰酸钾 锰酸钾+二氧化锰+氧气

二氧化锰过氧化氢 水 + 氧气

二氧化锰氯酸钾 氯化钾 + 氧气

加热

?实验装置:包括发生装置和收集装置(见书本P37)

?收集方法:

a) 排水法:因为氧气不易溶于水。

b) 向上排空气法:因为氧气密度比空气略大。

?用高锰酸钾制氧气，并用排水法收集。实验步骤可以概括如下:

? 检查装置的气密性;

?将药品装入试管中，试管口放一团棉花(目的是防止高锰酸钾粉末进入导管)，用带

导管的单孔胶塞塞紧试管;

? 将试管固定在铁架台上;(注意:试管口应略向下倾斜)

? 点燃酒精灯，先均匀受热后固定加热;

? 用排水法收集氧气(当导管口产生连续、均匀的气泡时才开始收集);

? 收集完毕，将导管移出水槽;这样做的目的是:防止水槽中的水倒吸入试管使试管

炸裂。

? 熄灭酒精灯。

?检验方法:用带火星的木条伸入集气瓶内，如果木条复燃，说明带瓶内的气体是氧气。 ?验满方法:

?用向上排空气法收集时，用带火星的木条伸入集气瓶口，如果木条复燃，说明带瓶内的氧气已满;

?用排水法收集时，当气泡从瓶外冒出时，说明该瓶内的氧气已满。

, 【知识点2】氧气制取反应装置和收集装置的选择

1. 反应装置选择依据:反应物的状态和反应条件。若反应物都是固

体，需要加热，选择图1;若反应物是固体和液体，不需要加热，

选择图2 或者图3。

2. 收集装置的选择依据:气体的溶解性、密度、是否与水反应等。

若气体不溶于水且不与水发生化学反应，即可用排水法收集，此

法收集的气体比较纯净，但是不干燥，如图4所示;若气体的密

度比空气大，且不与空气中的成分反应，即可用向上排空气法，

如图5;若气体的密度比空气小，且不与空气中的成分反应，即

可用向下排空气法，如图6。

, 【知识点3】分解反应

分解反应:_________________________________________

, 【知识点4】催化剂

催化剂和催化作用:催化剂是指在化学反应中能改变其他物质的反应速率，

而本身的质量和化学性质在化学反应前后都没有改变的物质。催化剂所起

的作用叫催化作用。起促进反应速率的是正催化剂，减慢反应速率的是负

催化剂(防橡胶老化，用负催化剂)。

, 【知识点5】工业法制氧气

氧气的工业制法——分离液态空气(物理变化)

【例题1】

1. 下列叙述中正确的是()

A. 催化剂只能加快其他物质的反应速率

B(催化剂在反应前后质量和化学性质不变

C(催化剂并不参加化学反应

D. 过氧化氢分解的催化剂一定是二氧化锰

2.实验室用加热高锰酸钾的方法制取氧气，并用排水法收集，主要有以下步骤:?将

药品装入试管;?检查装置的气密性;?给试管加热，?将装置固定在铁架台上;?

熄灭酒精灯;?收集气体;?将导管从水槽中取出(正确的操作顺序是 ( )

A(??????? B(??????? C(??????? D(???????

【梯度推进】

1. 要证明集气瓶内盛的是空气还是氧气，最简单的方法是( )。

A(测量密度，密度大的是氧气 B(能使细铁丝燃烧的是氧气

C(能跟硫燃烧，发出蓝紫色火焰的是氧气 D(能使带火星的木条复燃的是氧气

2. 用氯酸钾和过氧化氢分别制取氧气的实验，共同点有

A(都必须加热 B(都是分解反应 C(反应物都是氧化物 D(发生装置相同

【考试链接】

1.根据下图回答问题

?实验仪器a的名称是________。

?实验室用高锰酸钾制取氧气的文字表达式为______________________________，所选用的发生装置是____(填字母序号，下同)。

?实验室用过氧化氢溶液和二氧化锰制取氧气是，二氧化锰起__________作用，所选用的收集装置是____或E。

?用排空气法收集一瓶氧气，验满时将带火星的木条放在瓶口，若观察到__________，说明瓶中已充满氧气。

三、课堂小结

四、初显身手:

1.实验室里利用加热氯酸钾和二氧化锰固体混合物来制取氧气，在该反应中，二氧化锰作了氯酸钾反应的催化剂，下列说法中正确的是()

A(二氧化锰的质量和化学性质在反应前后不改变 B(二氧化锰可以作为各种化学反应的催化剂 C(加入二氧化锰增加了生成氧气的质量 D(不加入二氧化锰，加热氯酸钾不会生成氧气

2.下列有关玻璃导气管的使用图示正确的是(省略夹持和加热装置)

3. 催化剂在化学反应中的作用是( )

A( 加快化学反应速率 B( 减慢化学反应速率

C( 改变化学反应速率 D( 增加生成物的产量

归纳总结:

五、课后巩固(分数:100分，时间:40分钟)

教师寄语,路就在前方，

一( 选择题 (每题4分，共 32 分)

1. 下列示意图分别是实验室氧气制备、收集、验满、验证性质的操作，其中正确的是

A B C D

2. 小明同学采用加热氯酸钾的方法制取氧气，错把高锰酸钾当作二氧化锰放入氯酸钾内，

其结果与只加氯酸钾相比，正确的是( )

A ( 反应速率加快，生成氧气的质量不变

B ( 反应速率不变

C ( 反应速率加快，生成氧气的质量增加

D ( 生成氧气的质量不变

3. 有关催化剂的说法错误的是( )

A ( 反应前后本身质量肯定不变 B( 反应前后化学性质肯定不变

C ( 反应前后物理性质肯定不变 D( 可能减慢化学反应速率

4. 实验操作和目的对应关系不正确的是( )

A ( 加热试管时，先均匀加热后集中加热,防止试管炸裂

B ( 检查装置的气密性,防止装置漏气

C ( 用过氧化氢溶液制氧气时，加入少量二氧化猛,增加氧气生成的量

D ( 铁丝在氧气中燃烧时，集气瓶底部预先放少量水,吸收热量

5. 某学生在实验室设计了五种制取氧气时使用药品的方案，其中可行的是( )

?用氯酸钾和二氧化锰混合加热?将氯酸钾加热?将高锰酸钾加热?将高锰酸钾和氯酸

钾混合加热?将二氧化锰加热

A.??? B.??? C.??? D.??? 6. 某同学制氧气时，试管炸裂了，造成试管炸裂的原因可能是下列中的( )

?没有给试管均匀预热 ?试管外壁潮湿 ?试管口没有略微向下倾斜 ?忘了在试

管口加一团棉花 ?加热时试管与灯芯接触 ?收集完氧气，先撤酒精灯 ?高锰酸钾

中混有可燃物

A. 全部 B. 除?外 C. 除??外 D. ????

7. 从安全、环保、节能、简便等方面考虑实验室制取氧气的最佳方案是( )

A. 氯酸钾受热分解 B. 过氧化氢溶液分解 C. 分离液态空气法 D. 高锰酸钾受

热分解

8. 下列变化中不属于化学变化的是 ( )

A、加热氯酸钾制氧气 B、加热高锰酸钾制氧气

C、工业上用分离空气法制氧气 D、氧气使带火星木条复燃

二(填空题 (共 68分,每空4分)

1. 拉瓦锡为了研究空气的成分，曾把汞放在密闭容器中加热，得到了红色粉末氧化汞，又把这一种红色粉末加热，得到了汞和氧气。写出上述两个反应的文字表达式:_______________________; _________________________。

2. 人人都应关心和保护人类生存的环境。为监测空气质量，江苏省淮安市建立了“城市环境空气质量日报制”，日报:总悬浮颗粒(粉尘)、二氧化硫、二氧化氮三项指标。其中，_____________超标，主要是

大规模不规范的城市建设造成的;_____________超标，主要是煤的燃烧造成的;_________超标，主要是大量汽车、助力车等排放的尾气造成的。

3. 回忆实验室用氯酸钾制取氧气的过程，结合右图回答问题:

?写出标有字母的仪器名称:a________;

?氯酸钾制取氧气的文字表达式为_____________;

?停止加热时要先将导管移出水面是为了______________;

(4)如果采用过氧化氢与二氧化锰混合制取氧气，反应的文字表达式为______________。

4. 氧气是人类生存必需的物质,通过化学变化得到氧气的方法有很多。

实验室制取氧气，若选用如图所示的装置制取氧气,文字表达式为____________________________。

5. 实验室常用高锰酸钾粉末制取氧气(装置A)，也可用过氧化氢溶液和催化剂二氧化锰粉末来制取氧

气(装置B)。装置B中的仪器a是分液漏斗，通过活塞的“开”、“关”可以随时滴加过氧化氢溶液，

从而控制得到氧气的质量。

(1)写出一种实验室制取氧气的文字表达式:_________________________________。

(2)从所需的药品状态和反应条件比较装置A和B的差异:

装置A 装置B

所需药品状态

反应条件

(3)用向上排空气法收集氧气，并用带火星的木条放在集气瓶中，检验氧气是否收集满，这是利用

了氧气的________________________、__________________________性质。

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