A老王啊
范文一：铬黑T指示剂,钙指示剂和钙红指示剂三者的异同
铬黑T指示剂，钙指示剂和钙红指示剂三者的异同 在EDTA法测定钙含量中，涉及到钙指示剂，钙红指示剂和铬黑T指示剂
相同点:钙红与钙指示剂是同一物质即钙羧酸指示剂加氯化钠 不同点:1:D-泛酸钙用的是铬黑T
丙酸钙用的是钙红指示剂(钙羧酸指示剂加氯化钠比例:1:10)
碳酸钙用的是钙指示剂
2:铬黑T结构式:
钙红指示剂结构式:
3:虽然二者都能用于钙的EDTA滴定指示，但应用的PH范围不同:
(1)铬黑T:PH9-10.5 (使用范围)
(PH6.3以下显红色，PH11.6以上显橙色，在正常使用的PH范围内为蓝色，络合物为红色)
(2)钙红指示剂:PH12-13
(PH<10显红色，ph12-14显蓝色，与钙络合为红色，与镁、铍络合为蓝色)>
钙红指示剂指示钙滴定时可在PH12-13间使用，与镁络合虽然为蓝色，但PH12以上镁已经开始沉淀，事实上不适宜镁的指示。
EDTA络合滴定尤其要注意滴定的PH范围对指示剂自身颜色的影响，应该选有明显色差的PH范围。铬黑T适合在PH10左右条件下滴定，此时钙镁都能显色，都能准确滴定(滴合量)，而钙红指示剂则适合在PH12-13间使用，最好在12.5-13，此时镁已经沉淀完全，可以消除镁对钙的滴定干扰(滴钙分量的指示剂)。
铬黑T溶液不稳定，宜用氯化钠固体稀释100倍使用，钙指示剂溶液相对稳定一些。
范文二：钙红指示剂的使用
脱钙溶液中Ca2 含量测定
1 仪器：分析天平、台秤、酸式滴定管、锥形瓶、100ml容量瓶、烧杯、玻棒
2试剂： EDTA溶液(浓度待定预计在0.01至0.1mol/L之间)、钙红指示剂（用75%乙醇溶解）、蒸馏水、10%氢氧化钠。
3实验步骤
①精确取待测液10.00ml,移入容量瓶中配成100.00ml溶液 ②碳酸钙标准溶液的配制
准确称取1g（精确至 0.001g）碳酸钙于烧杯中，加入少量稀盐酸使其溶解，转移至容量瓶中配成100.00ml溶液
③EDTA标准溶液的标定
事先用蒸馏水润洗一下锥形瓶。用移液管移取碳酸钙标准溶液
10.00ml于锥形瓶中，加入3滴钙红指示剂。并用10%氢氧化钠将PH调节至13。（此时指示剂与钙离子形成红色螯合物溶液呈酒红色）使用EDTA标准溶液滴定至溶液由酒红色变为蓝色。记录EDTA的用量 ④重复③2次，记录数据。取3次所耗EDTA用量平均数即可得出每0.001mol钙离子所耗EDTA即V(EDTA0.001ca)，也可知每1mol钙离子所
耗V(EDTACa)。
⑤用移液管分别移取10.00ml待测溶液于250ml的锥形瓶中，加入适量钙红指示剂，并用10%氢氧化钠溶液调节PH值至13。用EDTA标准溶液慢慢滴定，并用力摇晃，至溶液由酒红色变为纯蓝色为止。记录
EDTA用量为V（EDTA）。待测液中c(Ca2+)=
L ) ( mol?
⑥重复⑤2次，记录数据。所得平均数即为待测液中钙离子浓度。
范文三：钙荧光指示剂
分 子 式: C51H50Cl2N2O23
分 子 量: 1129.85
外 观: 红色粉末
别 名: Fluo 3-AM
纯 度: 85%以上（HPLC ）
储存条件: -20℃
运输条件: 室温
Fluo 3-AM是一种检测细胞内钙离子的荧光探针。Fluo 3若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与钙离子Ca 2+结合后荧光会增加60至80倍，是目前最常用的一种钙离子荧光探针。激光共聚焦荧光显微镜具有氩激光器，所以Fluo 3可被广泛使用于这种显微镜上。这种荧光信号发出来的长波也便于减小对样品细胞的光损伤。Fluo 3也可用来检测紫外光照射下可裂解的螯合钙或其它形式的钙。Fluo 3-AM 是Fluo 3的一种乙酰甲酯衍生物，通过培养，能够轻易进入细胞中。
Fluo 3-AM (钙离子荧光探针) 需用无水DMSO (anhydrous DMSO)配制。Fluo 3-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo 3-AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo 3，从而被滞留在细胞内。Fluo 3可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm ，最大发射波长为526nm 。
50 μg Fluo 3-AM的配制
操作说明(for Human T cells)*
试剂:
2 mM的Fluo 3-AM/DMSO
Pluronic F127
Hanks ’ balanced salt solution (HBSS)
HEPES buffer saline (10 mM HEPES, 1 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 5 mM glucose, 0.1% BSA, pH 7.4)
操作:
1. 配制2mM 的Fluo 3-AM/DMSO溶液即：将1mg Fluo 3-AM溶于442ulDMSO 中（推荐现配现用）。
2. Pluronic F127先用DMSO 配制成20%（W/V）的溶液，室温保存。使用时加入到上述Fluo 3-AM/DMSO溶液至终浓度0.05%（W/V）. Pluronic F127可以防止Fluo 3-AM在HBSS 中聚合并能帮助其进入细胞。
3. 用HBSS 稀释Fluo 3-AM溶液，制备4 μM的Fluo 3-AM working solution。
4. 将Fluo 3-AM working solution加入细胞，在37 ℃培养20分钟。
5. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS ，再继续培养40分钟。
6. 用HEPES buffer saline洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1x105 cells/ml的溶液。
7. 37 ℃下培养10 分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。
8. 观察528 nm (excitation: 490-500 nm)时的荧光。
*标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。
染色实例：
加载了Fluo 3的新鲜分离的大鼠肝脏细胞PE 刺激后出现规则胞浆钙振荡。
上图为细胞明场图和不同时间点（min ）的比例成像，下图为影响Fluo 3荧光强度随时间的变化。成像系统：Photon Technology International Inc.，显微镜Nikon TE2000U，CCD 相机QuantEM512S, 软件ERP 。
（北京师范大学细胞生物学研究所 崔宗杰教授 提供照片）
分 子 式: C51H50F2N2O23
分 子 量: 1096.94
外 观: 橙红色粉末
别 名: Fluo 4-AM
纯 度: 98%以上（HPLC ）
储存条件: -20℃
运输条件: 室温
Fluo 4是一种将Fluo 3结构中的Cl 替换成F 的钙荧光探针。由于将Cl 替换成了电子吸引力更强的F ，它的最大激发波长会向短波长处偏离10 nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长，所以用氩激光器激发时，Fluo 4的荧光强度比Fluo 3强1倍。
由于Fluo 4与钙离子的亲和力和Fluo 3近似(Fluo 3:Kd=0.4 μmol ／l 、Fluo 4: Kd=0.36 μmol ／l) ，所以使用上和Fluo 3也基本相同，可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪等仪器检测细胞内钙离子浓度的变化。
Fluo 4-AM是Fluo 4的一种乙酰甲酯衍生物，通过培养，能够轻易进入细胞中。AM 进入细胞后会被胞内酯酶所水解，产生的Fluo 4随后会和钙离子(Ca2+)结合并发出荧光。钙离子探针、胞内荧光探针的种类繁多，根据不同的实验要求，实验者的选择性有很多。
Fluo 4-AM (钙离子荧光探针) 需用无水DMSO (anhydrous DMSO)配制。Fluo 4-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo 4-AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo 4，从而被滞留在细胞内。
用二甲基亚砜(DMSO)将Fluo 4-AM配制为1~5 mM的原液, -20℃避光密封保存。使用前根据您实验的需要稀释成合适的浓度。
例如：需要配制1 mM的原液，用45.6 μl 的无水DMSO 溶解50 μg 的Fluo 4-AM就可以 。 注意事项：
1. 保存方法：1）保存产品时需要密封和保持干燥-20℃保存。
2）如果将产品配置好后，也需要密封干燥-20℃保存。
2. 溶解液DMSO ：使用新鲜、未开封过的无水DMSO
（开封过的无水DMSO 如果吸水，将会影响Fluo 4-AM的稳定性）。
3. 溶解后，尽可能在短时间内用完。长期保存水气容易渗入试剂中。
激发波长：495 nm
发射波长：518 nm
? 别 名: Fura 2-AM
? 分 子 式: C44H47N3O24
? 分 子 量: 1001.85
? 外 观: 黄色或橙黄色粉末
? 纯 度: 98%以上（HPLC ）
? 储存条件: -20℃
? 运输条件: 室温 分 子 式: C29H22K5N3O14 分 子 量: 831.99 外 观: 黄色或橙黄色粉末 别 名: Fura2 纯 度: 98%以上（HPLC ） 储存条件: 室温 运输条件: 室温
Fura 2是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一，Fura 2-AM(钙离子荧光探针) 需用无水DMSO(anhydrous DMSO)溶解。
Fura 2对Quin 2的荧光特性做了改进。1 μM Fura 2结合后的信号强度相当于30 μM 的Quin 2结合后的信号强度。这样就保证在实验中可以使用比Quin 2的浓度低得多的Fura 2指示剂。Fura 2是一种使用最广泛的比率测量的钙荧光指示剂。目前适用于Fura 2实验的设备有很多，它特别适合于用数字成像显微镜来检测。它比Indo 1更不易受到光褪色作用的影响。细胞形状的改变有时候会影响340 nm 和380 nm 的荧光比率，比如，平滑肌收缩会同时引起这些波长的荧光信号强度的减小。另外，对于血管来说，340 nm 的信号强度的增加会因为血管收缩而趋向于变小，而380 nm 信号强度的减小会因为血管收缩而变大。Fura 2-AM 是Fura 2的一种乙酰甲酯衍生物，通过培养，能够轻易地负载到细胞中。
Fura 2可以和钙离子(Ca2+)结合，结合钙离子后在330-350nm 激发光下可以产生较强的荧光，而在380nm 激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm 和380nm 这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度，可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗漏，细胞厚度差异等一些误差因素。Fura 2和钙离子结合后，最大激发波长为335nm(最大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同) ，最大发射波长为505nm 。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm ，发射波长为510nm 。如果做双波长检测，则推荐使用的激发波长为340nm 和380nm 。
Fura 2-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura 2-AM的荧光比较弱，最大激发波长为369 nm，最大发射波长为478 nm，并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura 2-AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura 2，从而被滞留在细胞内。
分 子 式: C32H26K5N3O12
分 子 量: 840.05
外 观: 浅黄色粉末
别 名: Indo 1
纯 度: 95%以上（HPLC ）
储存条件: -20℃
运输条件: 室温
Indo 1是一种经过改进的适用于比率法的钙指示剂、钙荧光探针。两个用于Indo 1比率法检测的发射波长分别为410 nm和480 nm。Indo 1适合使用流式细胞仪通过比率法检测，这样可以测得双波长的荧光信号。有报道称Indo 1在进入细胞后的定位能力要强于Fura 2。Indo 1-AM 是Indo 1 的乙酰甲酯衍生物，它通过培养能够进入活细胞。
分 子 式: C26H23K4N3O10
分 子 量: 693.87
外 观: 浅黄色粉末
别 名: Quin 2
纯 度: 95%以上（HPLC ）
储存条件: -20℃
运输条件: 室温
Quin 2能够和钙（logKCaY=7.1）形成稳定的荧光螯合物，但和镁却不行（logMgY=2.7）。这种螯合物在525 nm的发射波长处有着很高的量子产量（0.14），Quin 2的激发波长为339 nm ，发射波长为492 nm。Quin 2-AM是Quin 2的乙酰甲酯衍生物，能够轻易地穿过细胞膜。进入细胞后，酯结构立刻被水解，形成Quin 2。
分 子 式: C40H43ClN4O11
分 子 量: 791.24
外 观: 暗紫色固体
别 名: Rhod 2
纯 度: 60%以上（HPLC ）
储存条件: -20℃
运输条件: 室温
在所有的钙离子指示剂中，Rhod 2荧光信号的波长最长。它具有和罗丹明类似的激发和发射波长，分别为557 nm和581 nm。这样的激发波长使得我们很容易就能找到氩和氪光源的激光。尽管有人认为Rhod 2的荧光信号仅仅将钙复合物的荧光增加了数倍，但是Dojindo 的Rhod 2由于具有很高的纯度，能有效地将钙荧光信号增加80-100倍左右，使得它的信号强度在所有的钙离子探针里面是最强的。所以，我们强烈建议使用Rhod 2作为探针用激光显微镜来检测细胞内的钙离子情况。在所有的钙离子荧光探针中是最高的，为监测钙离子浓度提供了一个广阔的范围。Rhod 2-AM是一种Rhod 2的乙酰甲酯衍生物，能非常容易的通过AM 法负载到细胞内。
资料来源: http://www.dojindo.cn/products/index.aspx?root=13
范文四：钙指示剂
钙指示剂（calcon-carboxylic acid)
又称钙红（calred），紫黑色粉末。
钙指示剂在pH=12～14之间显蓝色，与Ca2+形成红色络合物，用于钙镁混合物中钙的测定，终点变色较铬黑T敏锐。在此pH值时，由于生成的氢氧化镁测定吸附钙指示剂，故应在用氢氧化钠调节酸度后再加指示剂。由于钙指示剂的水溶液或乙醇溶液都不稳定，所以通常是与干燥的NaCl混合后直接将固体加入待测溶液中使用。
钙黄绿素指示剂 取钙黄绿素0.1g，加氯化钾10g，研磨均匀,即得
钙紫红素指示剂 取钙紫红素0.1g，加无水硫酸钠10g，研磨均匀，即得
铬黑T指示剂一般用铬黑T和氯化纳研磨后制得，但粉剂的指示剂取用不方便，不像一般液体的指示剂，可以用滴加几滴来表示，如果用50--70mg，还需要用分析天平称量，取用非常不方便。如果不进行称量，就恐怕会影响结果。做成液体后就可以解决上述不便。
液体制剂配方：铬黑T0.1g，溶于15ml三乙醇胺中，完全溶解后加5ml无水乙醇。此溶液可保存数月不变质，并且容易控制添加量。
Ca2+硬的测定
取自来水样100.00 mL于锥形瓶中，加入 5 mL 10％NaOH和适量（约10 mg）的钙红指示剂，用EDTA标准溶液滴定，注意：要求慢摘并用力摇动锥形瓶，至溶液由酒红色变为纯监色为终点。平行测定两次，所用EDTA标准溶液体积相差不得超过0.05 mL。
为了防止Mg(OH)2沉淀对Ca的吸附作用，可按上法预滴—份，再取两份样品，先滴加EDTA标准溶液至比预滴时消耗的EDTA体积少1 mL多时,再加入NaOH和指示剂，然后继续用EDTA标准溶液滴定至终点。根据数据计算p(Ca)／mg·L和p(Mg)·L／mg·La
硬度的单位是毫克/升，将钙离子换算成氧化钙以后计算质量，就是相当于每升水中含CaO的质量
钙的相对原子质量40，氧16，加起来就是54
每升水0.89mol Ca2-，就当做是0.89mol的氧化钙，质量是54*0.89*1000mg 这就是水硬度了
另外还有通过CaCO3的质量来表示，将上式的54换成碳酸钙的相对分子质量100即可
不知道你们用的是哪种表示方法
范文五：甲基红指示剂
甲基红指示剂的配置:0.1或0.2g指示剂溶于100ml60%的乙醇。PH变色范围;4.4至6.2，由红变黄。
0.2%甲基红乙醇溶液中的甲基红不好溶解啊？我用0.2g甲基红+100ml乙醇，结果，甲基红很难溶解，该怎么配制？请高手告知，谢谢，
甲基红结构如下
疏水部分大，故水溶性差，要加乙醇，因为含羧基，故溶解时加少量氢氧化钠（钾）使之生成盐，以增强水溶性，这是有道理的。不过加了碱液溶解后，务必要做空白试剂（指示剂用量一定要恒定），要扣除空白值。
有机指示剂通常都不太好溶解。本人的做法：固体指示剂放在适当的烧杯里面用一两滴溶液润湿后用玻棒研磨，直到没有颗粒状物质后再加大溶剂量就比较好溶解了。
先将甲基红溶于无水酒精中，由于是有机物所以能够相容。当然你要计算好量，然后再将起溶于水即可
要放在棕色的瓶中，保质期是三个月，多一点也没关系，他是指示剂，只要变色明显就可以。
指示剂一般一个月，但最好做验证。
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