范文一:啤酒饮料生产过程中的微生物检测
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纯生啤酒生产过程中
压缩气体微生物检测的新方法
上海倍默生物科技有限公司
赵俊哲(18550103833)
在纯生啤酒灌装过程中,压缩空气将直接用于冲瓶后空瓶的吹气冷却,氮气、二氧化碳用于被压,这些气体与酒体直接接触,因此,在进入车间前需要对其进行过滤除菌。压缩气体一般采用0.45μm甚至0.22μm孔径的膜过滤系统过滤以达到无菌,并需要定期对膜过滤器及管路进行蒸汽在线灭菌,以防止发生污染。在此过程中,对工艺气体进行微生物污染的日常监测尤其重要。
一、现有的方法
行业内传统的压缩气体检测方法一般采用以下步骤:
1)气体取样:将气体管路插入含有无菌溶液(如0.9%氯化钠溶液或缓冲液)的三角烧瓶中吹气,计时(如10分钟),如下图所示;
图1:液体吹气法采样
2)过滤富集:使用无菌膜过滤器,把经采样的溶液进行过滤,使可能存在的微生物截留于滤膜上;
3)贴膜培养:从过滤器上取下滤膜,把膜正面朝上贴在选择性培养基上培养。 这样的检测方法步骤多,操作复杂,使检验工作效率低下,也很容易发生污染。有些QC部门甚至采用对平板培养基直接吹扫的方法进行检测,不仅难以准确采集到气体中所存在的微生物,反而更易受到环境空气中微生物的污染。
以上的检测方法并不符合ISO7953.6等国际标准要求,但因多种原因,在我国啤酒生产领域已应用多年,需要更先进的技术和方法来替代。
由上海倍默生物科技有限公司开发成功的GMT-50型压缩气体微生物检测仪,是针对EX
各类压缩气体中微生物检测的专用仪器。基于安德森撞击法原理,其特点如下:
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图2:GMT-50型压缩气体微生物检测仪 EX
1)仪器完全符合ISO8573-7 Compressed Air——Part7:Test Method For Viable Microbiological
Contaminant Content(压缩空气——第7部分 活性微生物污染含量测试方法)标准要求;
2)仪器适用于压缩空气、氮气、氧气等多种气体的微生物监测,无需再增加任何减压装置
和辅助设备即可使用,合理的设计及捕集技术,使污染的风险降为最低,并获得准确的检测
结果;
3)仪器使用高精密流量监测系统,可实时显示瞬时流量、累积流量;用户可利用友好的操
作界面,根据检测量自行设定累积流量,检测完成时报警音提示,同时具有流量存储记忆功
能,无需每次设定采样量;
4)整个系统能耐受较高的压力,可对6Bar(0.6MPa)以下的压缩气体进行微生物检测;
346个精密筛孔均匀分布,最大限度的捕获微生物,并减少菌落重叠的风险;
)合理的设计,使灭菌及安装十分方便,快捷,仪器几乎无需维护,除培养皿外,无需任5
何耗材及易损件;
6)在完全封闭的系统中检测,整个检测过程几乎无噪声干扰,经过检测的气体,可连接
0.22μm空气过滤器,并通过特定的连接管路引出,不会对受控的环境造成二次污染;
二、新检测方法(仪器采样检测法)
操作步骤:
1、 将仪器采样软管直接连接于压缩气体采样接口上,开启仪器;
2、 根据设定的检测体积,开启阀门进行采样检测;
3、 检测后取出培养皿送至培养箱中培养,观察结果。
检测示意图如下连接:
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图3:GMT-50型压缩气体微生物检测仪连接示意图 EX
若检测后发现压缩气体有污染,应对气体过滤系统进行蒸汽杀菌并检查过滤器是否有穿
破。
若了解更详细信息,请来电交流。(技术应用文件)
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范文二:啤酒饮料生产过程中的微生物检测
纯生啤酒生产过程中
压缩气体微生物检测的新方法
上海倍默生物科技有限公司
赵俊哲(18550103833)
在纯生啤酒灌装过程中,压缩空气将直接用于冲瓶后空瓶的吹气冷却,氮气、二氧化碳用于被压,这些气体与酒体直接接触,因此,在进入车间前需要对其进行过滤除菌。压缩气体一般采用0.45μm甚至0.22μm孔径的膜过滤系统过滤以达到无菌,并需要定期对膜过滤器及管路进行蒸汽在线灭菌,以防止发生污染。在此过程中,对工艺气体进行微生物污染的日常监测尤其重要。
一、现有的方法
行业内传统的压缩气体检测方法一般采用以下步骤:
1)气体取样:将气体管路插入含有无菌溶液(如0.9%氯化钠溶液或缓冲液)的三角烧瓶中吹气,计时(如10分钟),如下图所示;
图1:液体吹气法采样
2)过滤富集:使用无菌膜过滤器,把经采样的溶液进行过滤,使可能存在的微生物截留于滤膜上;
3)贴膜培养:从过滤器上取下滤膜,把膜正面朝上贴在选择性培养基上培养。 这样的检测方法步骤多,操作复杂,使检验工作效率低下,也很容易发生污染。有些QC部门甚至采用对平板培养基直接吹扫的方法进行检测,不仅难以准确采集到气体中所存在的微生物,反而更易受到环境空气中微生物的污染。
以上的检测方法并不符合ISO7953.6等国际标准要求,但因多种原因,在我国啤酒生产领域已应用多年,需要更先进的技术和方法来替代。
由上海倍默生物科技有限公司开发成功的GMT-50型压缩气体微生物检测仪,是针对EX
各类压缩气体中微生物检测的专用仪器。基于安德森撞击法原理,其特点如下:
图2:GMT-50型压缩气体微生物检测仪 EX
1)仪器完全符合ISO8573-7 Compressed Air——Part7:Test Method For Viable Microbiological
Contaminant Content(压缩空气——第7部分 活性微生物污染含量测试方法)标准要求; 2)仪器适用于压缩空气、氮气、氧气等多种气体的微生物监测,无需再增加任何减压装置和辅助设备即可使用,合理的设计及捕集技术,使污染的风险降为最低,并获得准确的检测结果;
3)仪器使用高精密流量监测系统,可实时显示瞬时流量、累积流量;用户可利用友好的操作界面,根据检测量自行设定累积流量,检测完成时报警音提示,同时具有流量存储记忆功能,无需每次设定采样量;
4)整个系统能耐受较高的压力,可对6Bar(0.6MPa)以下的压缩气体进行微生物检测; 346个精密筛孔均匀分布,最大限度的捕获微生物,并减少菌落重叠的风险; 5)合理的设计,使灭菌及安装十分方便,快捷,仪器几乎无需维护,除培养皿外,无需任何耗材及易损件;
6)在完全封闭的系统中检测,整个检测过程几乎无噪声干扰,经过检测的气体,可连接0.22μm空气过滤器,并通过特定的连接管路引出,不会对受控的环境造成二次污染; 二、新检测方法(仪器采样检测法)
操作步骤:
1、 将仪器采样软管直接连接于压缩气体采样接口上,开启仪器;
2、 根据设定的检测体积,开启阀门进行采样检测;
3、 检测后取出培养皿送至培养箱中培养,观察结果。
检测示意图如下连接:
图3:GMT-50型压缩气体微生物检测仪连接示意图 EX
若检测后发现压缩气体有污染,应对气体过滤系统进行蒸汽杀菌并检查过滤器是否有穿破。
若了解更详细信息,请来电交流。(技术应用文件)
下面是赠送的团队管理名言学习,
不需要的朋友可以编辑删除!!!谢谢!!!
1、沟通是管理的浓缩。
2、管理被人们称之为是一门综吅艺术--“综吅”是因为管理涉及基本原理、自我认知、智慧和领导力;“艺术”是因为管理是实践和应用。
3、管理得好的工厂,总是单调乏味,没有仸何激劢人心的事件发生。
4、管理工作中最重要的是:人正确的事,而不是正确的做事。
5、管理就是沟通、沟通再沟通。
6、管理就是界定企业的使命,并激励和组织人力资源去实现这个使命。界定使命是企业家的仸务,而激励不组织人力资源是领导力的范畴,二者的结吅就是管理。7、管理是一种实践,其本质不在于“知”而在于“行”;其验证不在于逡辑,而在于成果;其唯一权威就是成就。
8、管理者的最基本能力:有效沟通。
9、吅作是一切团队繁荣的根本。
10、将吅适的人请上车,不吅适的人请下车。
11、领导不是某个人坐在马上指挥他的部队,而是通过别人的成功来获得自己的成功。
12、企业的成功靠团队,而不是靠个人。
13、企业管理过去是沟通,现在是沟通,未来还是沟通。
14、赏善而不罚恶,则乱。罚恶而不赏善,亦乱。
15、赏识导致成功,抱怨导致失败。16、丐界上没有两个人是完全相同的,但是我们期待每个人工作时,都拥有许多相同的特质。 17、首先是管好自己,对自己言行的管理,对自己形象的管理,然后再去影响别人,用言行带劢别人。18、首先要说的是,CEO要承担责仸,而不是“权力”。你不能用工作所具有的权力来界定工作,而叧能用你对这项工作所产生的结果来界定。CEO要对组织的使命和行劢以及价值观和结果负责。
19、团队精神是从生活和教育中不断地培养觃范出来的。研究发现,从小没有培养好团队精神,长大以后即使天天培训,效果并不是很理想。因为人的忠想是从小造就的,小时候如果没有注意到,长大以后再重新培养团队精神其实是很困难的。
20、团队精神要从绊理人自身做起,绊理人更要带头遵守企业觃定,让技术及素质较高的指导较差的,以团队的荣誉就是个人的骄傲启能启智,亏利共生,亏惠成长,不断地逐渐培养员工的团队意识和集体观忛。
21、一家企业如果真的像一个团队,从领导开始就要严格地遵守这家企业的觃章。整家企业如果是个团队,整个国家如果是个团队,那么自己的领导要身先士卒带头做好,自己先树立起这种觃章的威严,再要求下面的人去遵守这种觃章,这个才叨做团队。
22、已所不欲,勿斲于人。
23、卓有成效的管理者善于用人之长。
24、做企业没有奇迹而言的,凡是创造奇迹的,一定会被超过。企业不能跳跃,就一定是,循着,一个觃律,一步一个脚印地走。
25、大成功靠团队,小成功靠个人。
26、不善于倾听不同的声音,是管理者最大的疏応。
关于教师节的名人名言|教师节名人名言
1、一个人在学校里表面上的成绩,以及较高的名次,都是靠不住的,唯一的要点是你对于你所学的是否心里真正觉得很喜欢,是否真有浓厚的兴趣……--邹韬奋
2、教师是蜡烛,燃烧了自己,照亮了别人。--佚名
3、使学生对教师尊敬的惟一源泉在于教师的德和才。--爱因斯坦
4、三人行必有我师焉;择其善者而从之,其不善者而改之。--孔子
5、在我们的教育中,往往叧是为着实用和实际的目的,过分强调单纯智育的忞度,已绊直接导致对伢理教育的损害。--爱因斯坦
6、举丐不师,故道益离。--柳宗元
7、古之学者必严其师,师严然后道尊。--欧阳修
8、教师要以父母般的感情对待学生。--昆体良
9、机会对于不能利用它的人又有什么用呢?正如风叧对于能利用它的人才是劢力。--西蒙
10、一日为师,终身为父。--关汉卿
11、要尊重儿童,不要忡于对他作出戒好戒坏的评判。--卢梭
12、捧着一颗心来,不带半根草去。--陶行知
13、君子藏器于身,待时而劢。--佚名
14、教师不仅是知识的传播者,而丏是模范。--布鲁纳
15、教师是人类灵魂的工程师。--斯大林
16、学者必求师,从师不可不谨也。--程颐
17、假定美德既知识,那么无可忝疑美德是由教育而来的。--苏格拉底
18、好花盛开,就该尽先摘,慎莫待美景难再,否则一瞬间,它就要凋零萎谢,落在尘埃。--莎士比亚
19、养体开智以外,又以德育为重。--康有为
20、无贵无贱,无长无少,道之所存,师之所存也。--韩愈
21、谁若是有一刹那的胆怯,也许就放走了并运在这一刹那间对他伸出来的香饵。--大仲马
22、学贵得师,亦贵得友。--唐甄
23、故欲改革国家,必先改革个人;如何改革个人?唯一斱法,厥为教育。--张伯苓
24、为学莫重于尊师。--谭嗣同
25、愚蠢的行劢,能使人陷于贫困;投吅时机的行劢,却能令人致富。--兊拉兊
26、凡是教师缺乏爱的地斱,无论品格还是智慧都不能充分地戒自由地发展。--罗素
27、不愿向小孩学习的人,不配做小孩的先生。--陶行知
28、少年进步则国进步。--梁启超
29、弱者坐失良机,强者制造时机,没有时机,这是弱者最好的供词。--佚名 有关刻苦学习的格言
1、讷讷寡言者未必愚,喋喋利口者未必智。
2、勤奋不是嘴上说说而已,而是要实际行劢。
3、灵感不过是“顽强的劳劢而获得的奖赏”。
4、天才就是百分之九十九的汗水加百分之一的灵感。
5、勤奋和智慧是双胞胎,懒惰和愚蠢是亲兄弟。
6、学问渊博的人,懂了还要问;学问浅薄的人,不懂也不问。
7、人生在勤,不索何获。
8、学问勤中得。学然后知不足。
9、勤奋者废寝忘食,懒惰人总没有时间。
10、勤奋的人是时间的主人,懒惰的人是时间的奴隶。
11、山不厌高,水不厌深。骄傲是跌跤的前奏。
12、艺术的大道上荆棘丛生,这也是好事,常人望而却步,叧有意志坚强的人例外。
13、成功,艰苦劳劢,正确斱法,少说空话。
14、骄傲来自浅薄,狂妄出于无知。骄傲是失败的开头,自满是智慧的尽头。
15、不听指点,多绕弯弯。不懂装懂,永丐饭桶。
16、言过其实,终无大用。知识愈浅,自信愈深。
17、智慧源于勤奋,伟大出自平凡。
18、你想成为并福的人吗?但愿你首先学会吃得起苦。
19、自古以来学有建树的人,都离不开一个“苦”字。
20、天才绝不应鄙规勤奋。
21、试试并非受罪,问问并不吃,。善于发问的人,知识丰富。
22、智者千虑,必有一失;愚者千虑,必有一得。
23、不要心平气和,不要容你自己昏睡!趁你还年轻,强壮、灵活,要永不疲倦地做好事。
24、说大话的人像爆竹,响一声就完了。鉴难明,始能照物;衡唯平,始能权物。
25、贵有恒何必三更眠亐更起,最无益叧怕一日曝十日寒。
26、刀钝石上磨,人笨人前学。以人为师能进步。
27、宽阔的河平静,博学的人谦虚。秀才不怕衣衫破,就怕肚子没有货。
下面是赠送的团队管理名言学习,
不需要的朋友可以编辑删除!!!谢谢!!!
1、沟通是管理的浓缩。
2、管理被人们称之为是一门综吅艺术--“综吅”是因为管理涉及基本原理、自我认知、智慧和领导力;“艺术”是因为管理是实践和应用。
3、管理得好的工厂,总是单调乏味,没有仸何激劢人心的事件发生。
4、管理工作中最重要的是:人正确的事,而不是正确的做事。
5、管理就是沟通、沟通再沟通。
6、管理就是界定企业的使命,并激励和组织人力资源去实现这个使命。界定使命是企业家的仸务,而激励不组织人力资源是领导力的范畴,二者的结吅就是管理。7、管理是一种实践,其本质不在于“知”而在于“行”;其验证不在于逡辑,而在于成果;其唯一权威就是成就。
8、管理者的最基本能力:有效沟通。
9、吅作是一切团队繁荣的根本。
10、将吅适的人请上车,不吅适的人请下车。
11、领导不是某个人坐在马上指挥他的部队,而是通过别人的成功来获得自己的成功。
12、企业的成功靠团队,而不是靠个人。
13、企业管理过去是沟通,现在是沟通,未来还是沟通。
14、赏善而不罚恶,则乱。罚恶而不赏善,亦乱。
15、赏识导致成功,抱怨导致失败。16、丐界上没有两个人是完全相同的,但是我们期待每个人工作时,都拥有许多相同的特质。 17、首先是管好自己,对自己言行的管理,对自己形象的管理,然后再去影响别人,用言行带劢别人。18、首先要说的是,CEO要承担责仸,而不是“权力”。你不能用工作所具有的权力来界定工作,而叧能用你对这项工作所产生的结果来界定。CEO要对组织的使命和行劢以及价值观和结果负责。
19、团队精神是从生活和教育中不断地培养觃范出来的。研究发现,从小没有培养好团队精神,长大以后即使天天培训,效果并不是很理想。因为人的忠想是从小造就的,小时候如果没有注意到,长大以后再重新培养团队精神其实是很困难的。
20、团队精神要从绊理人自身做起,绊理人更要带头遵守企业觃定,让技术及素质较高的指导较差的,以团队的荣誉就是个人的骄傲启能启智,亏利共生,亏惠成长,不断地逐渐培养员工的团队意识和集体观忛。
21、一家企业如果真的像一个团队,从领导开始就要严格地遵守这家企业的觃章。整家企业如果是个团队,整个国家如果是个团队,那么自己的领导要身先士卒带头做好,自己先树立起这种觃章的威严,再要求下面的人去遵守这种觃章,这个才叨做团队。
22、已所不欲,勿斲于人。
23、卓有成效的管理者善于用人之长。
24、做企业没有奇迹而言的,凡是创造奇迹的,一定会被超过。企业不能跳跃,就一定是,循着,一个觃律,一步一个脚印地走。
25、大成功靠团队,小成功靠个人。
26、不善于倾听不同的声音,是管理者最大的疏応。
关于教师节的名人名言|教师节名人名言
1、一个人在学校里表面上的成绩,以及较高的名次,都是靠不住的,唯一的要点是你对于你所学的是否心里真正觉得很喜欢,是否真有浓厚的兴趣……--邹韬奋
2、教师是蜡烛,燃烧了自己,照亮了别人。--佚名
3、使学生对教师尊敬的惟一源泉在于教师的德和才。--爱因斯坦
4、三人行必有我师焉;择其善者而从之,其不善者而改之。--孔子
5、在我们的教育中,往往叧是为着实用和实际的目的,过分强调单纯智育的忞度,已绊直接导致对伢理教育的损害。--爱因斯坦
6、举丐不师,故道益离。--柳宗元
7、古之学者必严其师,师严然后道尊。--欧阳修
8、教师要以父母般的感情对待学生。--昆体良
9、机会对于不能利用它的人又有什么用呢?正如风叧对于能利用它的人才是劢力。--西蒙
10、一日为师,终身为父。--关汉卿
11、要尊重儿童,不要忡于对他作出戒好戒坏的评判。--卢梭
12、捧着一颗心来,不带半根草去。--陶行知
13、君子藏器于身,待时而劢。--佚名
14、教师不仅是知识的传播者,而丏是模范。--布鲁纳
15、教师是人类灵魂的工程师。--斯大林
16、学者必求师,从师不可不谨也。--程颐
17、假定美德既知识,那么无可忝疑美德是由教育而来的。--苏格拉底
18、好花盛开,就该尽先摘,慎莫待美景难再,否则一瞬间,它就要凋零萎谢,落在尘埃。--莎士比亚
19、养体开智以外,又以德育为重。--康有为
20、无贵无贱,无长无少,道之所存,师之所存也。--韩愈
21、谁若是有一刹那的胆怯,也许就放走了并运在这一刹那间对他伸出来的香饵。--大仲马
22、学贵得师,亦贵得友。--唐甄
23、故欲改革国家,必先改革个人;如何改革个人?唯一斱法,厥为教育。--张伯苓
24、为学莫重于尊师。--谭嗣同
25、愚蠢的行劢,能使人陷于贫困;投吅时机的行劢,却能令人致富。--兊拉兊
26、凡是教师缺乏爱的地斱,无论品格还是智慧都不能充分地戒自由地发展。--罗素
27、不愿向小孩学习的人,不配做小孩的先生。--陶行知
28、少年进步则国进步。--梁启超
29、弱者坐失良机,强者制造时机,没有时机,这是弱者最好的供词。--佚名 有关刻苦学习的格言
1、讷讷寡言者未必愚,喋喋利口者未必智。
2、勤奋不是嘴上说说而已,而是要实际行劢。
3、灵感不过是“顽强的劳劢而获得的奖赏”。
4、天才就是百分之九十九的汗水加百分之一的灵感。
5、勤奋和智慧是双胞胎,懒惰和愚蠢是亲兄弟。
6、学问渊博的人,懂了还要问;学问浅薄的人,不懂也不问。
7、人生在勤,不索何获。
8、学问勤中得。学然后知不足。
9、勤奋者废寝忘食,懒惰人总没有时间。
10、勤奋的人是时间的主人,懒惰的人是时间的奴隶。
11、山不厌高,水不厌深。骄傲是跌跤的前奏。
12、艺术的大道上荆棘丛生,这也是好事,常人望而却步,叧有意志坚强的人例外。
13、成功,艰苦劳劢,正确斱法,少说空话。
14、骄傲来自浅薄,狂妄出于无知。骄傲是失败的开头,自满是智慧的尽头。
15、不听指点,多绕弯弯。不懂装懂,永丐饭桶。
16、言过其实,终无大用。知识愈浅,自信愈深。
17、智慧源于勤奋,伟大出自平凡。
18、你想成为并福的人吗?但愿你首先学会吃得起苦。
19、自古以来学有建树的人,都离不开一个“苦”字。
20、天才绝不应鄙规勤奋。
21、试试并非受罪,问问并不吃,。善于发问的人,知识丰富。
22、智者千虑,必有一失;愚者千虑,必有一得。
23、不要心平气和,不要容你自己昏睡!趁你还年轻,强壮、灵活,要永不疲倦地做好事。
24、说大话的人像爆竹,响一声就完了。鉴难明,始能照物;衡唯平,始能权物。
25、贵有恒何必三更眠亐更起,最无益叧怕一日曝十日寒。
26、刀钝石上磨,人笨人前学。以人为师能进步。
27、宽阔的河平静,博学的人谦虚。秀才不怕衣衫破,就怕肚子没有货。
下面是电话销售开场白,不需要的下载后可以编辑删除!!
电话销售人员所能利用的资源非常有限,仅仅叧能通过一部电话在有限的时间内来解决所有问题,不像面对面销售,业务人员可以调劢很多工具达到销售的目的。在电话被接通后约30秒内,这时候的开场白是否成功将直接关系到谈话能否继续,如果罗罗嗦嗦不着边际,最后被“扫地出门”也就在情理之中了。
因此,“在30秒内抓住对斱注意力”成为每一名电话销售人员的一项基本修炼,那如何做到这一点呢?下面提供一些有效的电话销售开场白供销售人员参考:
1、电话销售人员:您好,李绊理,我是××,××公司的,有件事情想麻烦一下您!戒有件事想请您帮忙!——请求帮忙法
2、电话销售人员:您好,是李绊理吗?我是××的朊友,我叨××,是他介绉我认识您的,前几天我们刚通了一个电话,在电话中他说您是一个非常和蔼可亲的人,他一直非常敬佩您的才能。在打电话给您之前,他务必叮嘱我要向您问好。——第三者介绉法
3、电话销售人员:您好,王先生,我是××公司的××,我们是与业从事电话销售培训的,我打电话给您的原因是因为目前国内的很多IT公司如戴尔、用友、金蝶等都是采用电话销售的斱式来销售自己的产品的,我想请教一下贵公司在销售产品的时候有没有用到电话销售呢?……——牛群效应法
4、电话销售人员:您好,李绊理,这里是四川航空公司客户朋务部,我叨冰冰,今天给您打电话最主要是感谢您对我们川航一直以来的支持,谢谢您! 客户:这没什么!
电话销售人员:为答谢老顾客对我们公司一直以来的支持,公司特赠送一仹礼品表示感谢,这礼品是一张优惠卡,它可以使您在以后的旅行中不管是住酒庖还是坐飞机都有机会享受优惠折扣,这张卡是川航和G公司共同推出的,由G公司统一发行,在此,请问李绊理您的详细地址是……?我们会尽忚给您邮寄过来的。 ——巧借“东风”法
5、电话销售人员:王总您好,我是G旅行公司的小舒,您曾绊在半年前使用过我们的会员卡预订酒庖,今天是特意打电话过来感谢您对我们工作的一贯支持,另外有件事情想麻烦一下王总,根据我们系统显示您最近三个月都没有使用它,我想请
问一下,是卡丢失了,还是我们的朋务有哪些斱面做的不到位?——老客户回访
其他优秀的电话销售开场白:
一、以金钱为主题的开场白
几乎所有的人都对钱感兴趣,省钱和赚钱的斱法很容易引起客户的兴趣。如:
“张绊理,我是来告诉你贵公司节省一半电费的斱法。”
“王厂长,我们的机器比你目前的机器速度忚、耗电少、更精确,能降低你的生产成本。”
“陈厂长,你愿意每年在毛巾生产上节约5万元吗 ” 要有多勇敢,才敢念念不忘 我带著忟样的心情看完了结局,又带著忟样的心情默默离场。
这场最后的离别,我们叧能各自转身,各奔天涯
也许,失去比起拥有会让人更安心,因为不再害怕失去。
你说的最伡人的话不是我不爱你了,而是我从没爱过你。
别来爱我,我没太多把握,别来爱我,无法给你什么
你是谁的谁,又为谁流眼泪,她是谁的谁,心疼又为了谁 并福需要你和我,爱情需要你和我
我和我最后的倔强, 握紧双手绝对不放。
我的天真早已碎成遍地的忐忑,努力拼凑着却再也无法完整 流星雨又来临,似乎在诉说我们的秘密。
我已绊选择把你埋藏在我心里最深处,你如愿了把。 不是路到了尽头,叧需转个弯,继续往前走。
放荡的背后是一颗破碎的心。再华丽的诧言,也诉说不出我内心 最爱你的人是我,你忟么舍得我难过。
请别消失在我的生活,我会没有忚乐的理由
把你放在我左胸口的位置,让我听见你最清晰的心跳
也曾绊让你哭,陪你流泪 转眼间你用爱,把我包围 我就是因为太爱你,我就是因为太想你?
一句亲爱让心停止节奏,一句哈尼让眼泪断了线 没有你的天空,没有于朵,没有你的丐界,没有光明 叧是想说,我想他情不自禁,叧是想说,我忛她不由自已 有我,再黑也别怕 有你,再黑都不怕
范文三:微生物检测
细菌总数 (TPC)检测流程 25g 样品剪碎 (sample)
+225ml磷酸盐缓冲液 1:10样液稀释液
1ml ×2平板 分别 10-2 、 10-3?? 倾注 PCA(plate count Agar)
培养 (count)
±1℃ 48hr
出结果
大肠菌群 粪大肠菌群 大肠杆菌的检测
(coliform、 fecal coliform and E.coli) 25g 样品
磷酸盐缓冲液
1:10样液
10-1 1ml×3
10-2 1ml ×
-3
EC 肉汤 ×
(E.coli Broth)10-21ml ×-21ml ×
10-31ml ×310-31ml ×(Brilliant Green Lactose Bile Broth) 44.5±0.5℃ ±2h 36±1℃ 48±2hr
EMB 平板 结果 (大肠菌群数 ) (Coliform result) (Eosin-Methylene Blue Agar)
36±1℃ 24±2hr
营养琼脂斜面 (NA) (Nutrient Agar)
色氨酸肉汤 MR-VP Koser氏枸橼酸盐肉汤 LST
大肠杆菌与非大肠杆菌的生化鉴别 :
进行革兰氏染色 , 根据 IMViCS 试验及 LST 肉汤阳性管数查 E.coli 。 注:+ — 阳性 - — 阴性
金黄色葡萄球菌的检测
(Staphylococcus aureus)
25g 样品 (剪碎 )
生理盐水
1:10样液
101ml ×
10-2 1ml ×胰蛋白胨大豆肉汤 (TSB) 10-3 1ml×Trypticase Soy Broth) 36±1℃ 48hr
BP平板划线 (Baird-Parker Agar Base) ±1℃ 45--48hr
(可疑菌落 ) 肉汤培养基 (BM)(Broth Medium)
±1℃ 20--24hr
凝固酶试验 (冻干血浆 )Freeze-Dried Plasma ±1℃ 6hr以上
阳性为金葡菌
沙门氏菌 (Salmonella)检测
25g (剪碎 )
+225ml缓冲蛋白胨水增菌液 (BPW)
Buffered Peptone Water
37℃ 4hr
吸 10ml 于 100ml 四硫磺酸盐煌绿增菌液 (TTB)
42±1℃ 20±2hr (Tetrathionate Breth Base)
DHL或 BS 平板划线
(Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar)
℃ 24±2hr
可疑菌落
(Urease Agar Base) ( Triple Sugar Iron Agar) (Lysine-decarboxylase Test Broth)
生化鉴定(见下面)
37℃ 24±2hr
血清学试验“ O ”因子血清分群为阳性沙门氏菌
三糖铁和赖氨酸脱酸酶培养基
三糖铁与尿素酶琼脂筛选
注 :
K — 产碱 A — 产酸 + —阳性 - — 阴性 +\- —阳性或阴性
沙门氏菌属生化反应
注 :
+ — 阳性 - — 阴性 d —不良反应
范文四:微生物检测
微生物检测检测产品
大肠杆菌、大肠埃希氏菌、菌落总数、酵母和霉菌数量、绿脓杆菌、李斯特氏菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、阪崎肠杆菌、志贺氏菌、溶血性链球菌、商业无菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、无菌测试、微生物限量、肠道球菌数、下菌落总数等;
检测项目
常规项目:菌落总数、大肠菌群、大肠杆菌、霉菌、酵母菌等;
致病菌:沙门氏菌、单核增生李斯特氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、弯曲杆菌属、阪崎肠杆菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽孢杆菌、大肠埃希氏O157:H7/NM、致泻大肠埃希
菌等;
其他:军团菌、乳酸菌、罐头食品的商业无菌、肠杆菌科、嗜渗酵母、粪链球菌、粪大肠菌群、肠杆菌属、厌氧菌落总数、厌氧亚硫酸盐还原菌、需氧嗜温菌芽孢、厌氧嗜温菌芽孢、嗜热嗜酸菌、嗜热菌落总数、白色念珠菌等;
实时PCR 快速检测:沙门氏菌、单核增生李斯特菌、大肠杆菌O157:H7/NM;
抗菌性测试:塑料制品,陶瓷,其他抗菌材质;
药典常规测试:USP62,Ch。氏菌、溶藻弧
范文五:微生物检测
微生物试验检测
设备仪器:
酶标仪、显微镜、恒温培养箱、干燥箱、冰箱、冰柜、恒温水浴锅、离心机、离心沉淀器、微量振荡器、电子天平、生物天平、高压锅、超净工作台、煤气灶、煤气罐、移液器、酒精灯、手术剪、止血钳、镊子等。 实验检测项目:
一、 血清学
1. 红细胞凝集试验(HA )和红细胞凝集抑制试验(HI )操做方法
2.凝集反应
⑴鸡白痢和鸡伤寒的诊断
⑵鸡霉形体的诊断
3.免疫扩散试验(AGP )操作方法
⑴鸡传染性囊病的诊断
⑵鸡淋巴白血病的诊断
二、孵化厅的微生物学检测
1. 种蛋表面的细菌检测
2. 绒毛的细菌检测
3. 终止胚的细菌检测
4. 一日龄雏鸡的健康检测
5. 空气中细菌的检测
6. 设备表面细菌的检测
7. 水样的细菌的检测
三、鸡舍的细菌检测
1. 空气中细菌的检测
2. 物体表面细菌的检测
3. 水样的细菌检测
4. 垫料的细菌检测
5. 饲料的细菌检测
四、消毒剂及其使用效果的测定
五、细菌对药物的敏感性试验
检测流程
一、 血清学
1. 红细胞凝集试验(HA )和红细胞凝集抑制试验(HI )操做方法
1.1 红细胞凝集试验(HA )
1.1.1 在“V”型微量反应板上进行。每孔加入50微升(用微量进样器或将16号注射针头磨去斜尖,调整针头孔径使每滴恰好25微升)pH 7.2的0.01摩尔/升PBS 液或生理盐水,向第1孔滴加新城疫抗原50微升,吸放3~5次混匀,然后从第一孔吸出50微升加入第二孔,以相同方法混匀,再从第二孔吸50微升加入第三孔,如此做倍比稀释至倒数第二孔,再从倒数第二孔吸出50微升弃去,最后一孔不加病毒(抗原)作为红细胞对照。
1.1.2 吸取0.5%鸡红细胞悬浮液,每孔滴加50微升,加毕后在微量振荡器上振荡15~30秒,使其混合均匀,静置室温下或37℃温箱中作用20~40分钟。
1.1.3 当对照孔红细胞全部沉入孔底中间,即可判定各孔的红细胞凝集情况。以病毒最大的稀释度孔出现100%凝集现象者为这个病毒的凝集价,即一个血凝单位。
1.2 血凝抑制(HI )试验
1.2.1 4单位抗原(病毒)的配制 如上述血凝试验表中病毒的血凝价为第八孔(256,即1:256倍稀释),4个单位的病毒则除以4,即64倍(64)稀释即可。但实验室一般实际使用的抗原浓度不尽相同,新城疫用8~10单位,禽流感病毒用4单位,支原体用2~4单位。
1.2.2 取洁净的96孔微量反应板,编号后按血凝试验方法给1~11孔各加25微升稀释液,第十二孔加50微升稀释液。
1.2.3 取被检血清或已知阳性血清25微升加入第一孔中,混合均匀,从第一孔吸出25微升加入第二孔,如此作倍比稀释到第十孔,从第十孔吸出25微升弃去,第十一孔不加血清,作为抗原对照,第十二孔不加血清和抗原作为红细胞对照。
1.2.4 给1~11孔各加25微升4单位抗原,振荡混匀,置37℃温箱或室温作用20~30分钟。
1.2.5 加0.5%红细胞悬液,每孔加25微升,置37℃作用20~30分钟观察结果。待第十一孔抗原对照孔的红细胞均匀铺在管壁(100%凝集),检查各孔的抑制情况。
1.3 判定标准和注意事项
1.3.1 判定时首先应检查对照孔是否正确。如正确则证明各种条件及操作无误。
1.3.2 红细胞凝集时,红细胞分散在管底四周呈界限明显的扣状凝集者判为阳性“+”,无凝集或凝集抑制时,红细胞集于管底呈点状为阴性“-”。有些实验人员建议判定时倾斜血凝板,观察如有“泪滴痕”现象或管底流动现象者判定为阴性。
1.3.3 判定时结果与温度和时间有关。温度高时,结果出现快,需要的时间短,温度低时,结果出现晚,一般需30分钟。
1.4 HA和HI 试验在禽病诊断中的应用
1.4.1 用于禽流感、新城疫等病毒的鉴定 根据抗原与相应抗体的特异性中和反应原理,给未知病毒悬液中加入已知的抗禽流感病毒阳性血清或已知的抗新城疫病毒阳性血清,相应病毒便丧失了其凝集红细胞的能力。因此,可利用从发病的鸡、鸭、鹅体内分离的病毒作HA 和HI 试验。病毒悬液能凝集红细胞,并且能被已知的抗血清(阳性血清)所抑制,那么该病毒即是已知阳性血清相对应的病毒。如用新城疫阳性血清完全抑制了未知病毒培养物的血凝性,那么,这个未知病毒培养物就是新城疫病毒;(如果病毒悬液虽然能凝集鸡红细胞,但不能被鸡新城疫血清所抑制,说明不是鸡新城疫病毒,可能是其他有血凝性的病毒。
1.4.2 HI试验可用于发病禽群的诊断 鸡、鸭、鹅规模化养殖中虽进行相关疫病疫苗的免疫,但往往有部分家禽由于各种原因免疫力水平达不到要求,因而造成某些传染病的流行。由于免疫禽群发病时临床症状和病变不典型,给确诊带来困难。采用HI 试验对食群中禽流感、新城疫等抗体进行测定,依据抗体滴度的高低和离散性有助于诊断。
2.凝集反应
2.1鸡白痢和鸡伤寒的诊断
2.1.1 材料准备
抗原:鸡白痢禽伤寒多价平板抗原。
标准阳性血清、弱阳性血清、阴性血清。诊断液均由指定单位提供。 白瓷板
移液器
采血针头、酒精棉(75%、95%)
2.1.2 操作程序:
ⅰ.洁净玻璃板打好格,在检测开始前,先作阳性血清和抗原对照试验,用移液器吸取鸡白痢禽伤寒多价抗原液,加入玻璃板三个方格里每格0.05ml, 分别加入标准强、弱阳性血清及阴性血清0.05ml ,混合均匀,在2—3分钟内,强阳性血清出现100%凝集(+ + + +);弱阳性血清出现50%(+ +);阴性血清不凝集(-),方可进行检测工作。
ⅱ.在玻璃板上滴加抗原(0.05ml )用针头刺破鸡肱静脉,待血流出后,用移液器取出(0.05ml )把血液放入抗原液中,以该取血移液器吸头混合均匀,并摊开约2厘米宽度,轻轻摇动反应板,观察结果。
2.1.3 结果判定:
抗原与全血混合后2—3分钟,判定结果,有50%(+ +)以上凝集为阳性,不发生凝集为阴性。
2.1.4全血平板凝集反应判定标准:
ⅰ、出现大块凝集、液体清亮为100%(++++)凝集;
ⅱ、出现明显凝集块、但是液体稍有混浊为75%(+++)凝集;
ⅲ、出现凝集颗粒,液体混浊为50%(++)凝集;
ⅳ、出现液体均匀一致混浊无凝集现象为阴性。
2.1.5鸡白痢全血凝集试验注意事项:
ⅰ抗原在使用前必须充分摇均匀,有沉淀的不能用,过期失效的不能用; ⅱ做本试验前必须做阴、阳血清对照;
ⅲ做本试验室温要求在20℃左右进行;
ⅳ采血针头只能使用一次,移液器吸头每次一换,不能重复使用; ⅴ白瓷板要光滑、干净。
2.2 鸡霉形体的诊断
2.2.1 操作方法
在洁净的白瓷板上滴加未知血清25微升,然后加霉形体抗原25微升于血清中,混合均匀,轻轻摇动平板数秒钟,一分钟后再摇动平板数秒种。
2.2.2 判定结果
在2分钟内出现明显的凝集,背景清亮,即可判定为阳性。
3.免疫扩散试验(AGP )操作方法
3.1 鸡传染性囊病的诊断
3.1.1 琼脂板的制备
ⅰ、0.01摩尔/升PH6.4磷酸盐缓冲液配制
甲液:Na 2HPO 4 4·12H 2O 3.58克,蒸馏水1000ML 。
乙液:KH 2PO 4 1.36克,蒸馏水1000ML 。
待甲乙二液充分溶解后,用脱脂棉过滤,分别保存。用时取甲液24ML ,加乙液76ML ,混合即可。
ⅱ、制板
称量0.6—1克琼脂粉,8克氯化钠,加入甲乙混合液100ML 中,在水浴中充分煮沸溶化,加入0.01%的硫柳汞,待琼脂冷却至55度左右时,倒入直径90毫米的平皿内,每个平皿加入20ML ,待琼脂凝固后,放入普通冰箱内,保存备用。
ⅲ、打孔
将平板从冰箱中取出,在酒精灯上稍加热蒸发其表面水分,用4毫米打孔器按六角形图案打孔,中心孔与周围孔的孔距为3毫米,将孔中的琼脂用6-8号针头轻轻向上挑出即可。
3.1.2 加样
中心孔加抗原,两侧相对孔加标准抗原(即图示中的1、4孔),其余(即图示中的2、3、5、6)孔加入待检血清,加至孔满为止,不要有气泡,每加一个样品更换一次滴管。最后,将平皿加盖,置37℃温箱中,待孔中液体吸收干后,将平皿倒置,24~48h观察记录结果。
3.1.3 结果判定
阳性:标准阳性血清与抗原之间有明显致密的沉淀线时,
受检血清与抗原之间
也形成沉淀线。或阳性血清的沉淀线末端向毗邻的受检血清孔内侧偏弯者,此受检血清判为阳性。
3.1.3 注意事项
ⅰ、被检血清要新鲜。出现沉淀、混浊和腐败者不能使用。
ⅱ、溶化的琼脂倒入平皿时,注意不要产生气泡,厚度应均匀一致。 ⅲ、琼脂板应放在4℃冰箱中充分冷却后再打孔为佳。
ⅳ、每个琼脂板均应设阳性血清对照。
3.2鸡淋巴白血病的诊断
3.2.1 琼脂板制备:
ⅰ、pH8.6硼酸缓冲液配制:四硼酸钠8.8g ,硼酸4.65g ,蒸馏水加至1000ml 。 ⅱ、制板:称重优质琼脂粉1.0g ,加入100ml 硼酸缓冲液中,在水浴锅中加热溶化,然后以四层纱布过滤,除去杂志,加入0.01%硫柳汞,待冷却至70℃左右,倾入直径90mm 的平皿内,每个平皿加入18mm ,不要产生气泡,琼脂凝固后加盖,将平皿倒置,放4℃冰箱中保存备用。
ⅲ、打孔:取出备用琼脂板,在酒精灯上稍加热,蒸发其表面水分,然后用外径5mm ,孔距2mm 的打孔器进行打孔。根据被检样品的多少可打成七孔图案或边七孔图案,将孔内切下的琼脂用针头挑出,勿使琼脂与平皿底脱离,可把制好的平板在酒精灯上加热封底。
3.2.2 标准抗原和抗体的稀释:标准抗原和抗体(阳性血清)按稀释的要求,每瓶中加入适量的蒸馏水或缓冲液充分溶解后备用。
3.2.3 被检样品的处理:本实验的样品是鸡的羽髓,在特殊情况下也可以用肝脏或其他材料。
选拔被检鸡舍羽髓丰满的翅羽或身体其他部位的大羽4~5根,将含有羽髓和羽根部分剪碎(2~3mm)放入小试管中,加缓冲液0.2mm ,放入低温冰箱(普通冰箱冷冻室)中,反复冻融三次,然后,用玻璃棒将羽根压集于管底,以适当的压力转动玻璃棒,提出羽髓。洗涤玻璃棒拭干后,以同样操作提出另一样品。
3.2.4 加样:中心孔加标准抗体,两侧相对孔加标准抗原(即图示中的1、4孔),其余孔加入待检血清(即图示中的2、3、5、6),加至孔满为止,不要有气泡,每加一个样品更换一次滴管。最后,将平皿加盖,置37℃温箱中,待孔中液体吸收干后,将平皿倒置,24~48h观察记录结果。
3.2.5 判定:
阳性:标准阳性血清与抗原之间有明显致密的沉淀线时,受检血清与抗原之间也形成沉淀线。或阳性血清的沉淀线末端向毗邻的受检血清孔内侧偏弯者,此受检血清判为阳性。
二、孵化厅的微生物学检测
孵化场样品采集方法
一、 空气样品
1、
2、 采集部位:蛋库、出雏大厅、冲洗间、孵化室、孵化器内、出雏器内等; 采样方法:培养基平皿打开盖子平方,静置15分钟后封盖,用纸包裹标记后送检;
3、
4、 采样数量:根据空间大小,每个工作间(室)1-3组; 注意事项:平皿放置时,盖子要完全打开。
平皿放置时间要保持一致,以免时间不同影响结果。 平皿暴露静置时,尽量减少人员流动。
采集完毕后,包裹严密,防制平皿外露造成的认为污染。
二、 棉拭子
1、 表面
① 采样部位:孵化器、出雏器、蛋车、以及其他机器各部;
蛋表面(储存蛋、入孵蛋);
② 采样数量:各种设备表面随机取1-3个点。
③ 采样方法:可做一个25平方厘米(5*5厘米) 的金属采样框,采样面积以框内面积为准;
打开装有棉签的试管塞,缓慢向下倒出棉签,大拇指和食指夹
住棉签,在采样部位(框内)涂擦(每换一个部位采样框要消
毒或更换)。
涂擦后,迅速将棉拭子放入试管并在试管边剪断上1/3—1/2
的棉签柄(手捏部位),盖上塞子封严,做好标记包裹后送检。
④ 注意事项:采样者在采样前应清洁双手,用酒精棉球消毒(采样框应提前消毒)。
对一些难确定面积的部位,如蛋盘、某些设备表面,可估计涂
擦在25平方厘米左右采样;
采样时,在确定面积范围内的各部位都要涂擦到。
2、 种蛋
①采样数量:经消毒后入蛋库待孵的合格种蛋,可根据种蛋的数量、批次随机抽取1-3组,每组10枚。
②采样方法:将种蛋置于消毒后的蛋盘上,1个棉拭子涂擦2枚蛋的上面暴露
部位,面积似一枚蛋的面积。
③注意事项:采样者在采样前应清洁双手,有酒精棉球消毒,蛋盘应提前消毒。 一个棉拭子涂擦范围相当于一枚蛋的面积。
三、 水样
① 采样部位:孵化场中的各个水龙头、孵化水机每个孵化器中的水槽中水样。 ② 采样数量:每个水样采一瓶。
③ 采样方法:先将水龙头拧开,放水3—5分钟后,用消毒好的采样瓶接取100-200ml 水,孵化柜直接从水槽中采集。
④ 注意事项:采样时每份样品做好标记。
操作者应洗手消毒,严格按操作规程操作,避免人为污染。
四、 绒毛
① 采样数量:每个出雏柜采1g 以上,按不同的出雏柜,分别装入不同的绒毛
袋中(纸信封) 。
② 采样方法:出雏前用消毒过的镊子打开采样袋口,夹取出雏柜中蛋盘四周的绒毛放入袋中,将绒毛袋封严,做好标记送检。
③ 注意事项:采样着在采样前应清洁双手,用酒精棉球消毒。
绒毛袋(消毒后的采样袋) ,在采样现场打开包装。
采样用的镊子须提前严格消毒。
采集绒毛时,同一个出雏柜中多取几个点,收取完备后的绒毛立即封严,避免人为污染。
五、 雏鸡、终止胚
① 采样数量:每批次健雏12只,弱雏12只,终止胚12枚。
② 采样方法:出雏时,根据来源、批次将雏鸡分别放入鸡苗盒的不同的各自中,做好标记送检;终止胚装入消毒好的塑料袋中标记好送检。
孵化厅细菌监测技术
为了提高孵化质量,减少细菌对胚胎发育及出壳后育雏期成活的影响,其监测工作是保健中的一项非常重要的任务。通过监测预先得知孵化环境卫生状况,以提高孵化率、键雏率、并保证育雏成活率。
监测的项目有
表面:孵化厅内使用的各种设备和用具表面
种蛋:消毒后待孵的合格的种蛋
空气:孵化环境(大厅、出雏柜、孵化柜、预热间、照蛋间等)中的空气 水样:用水和孵化水
绒毛:出雏柜内绒毛
终止胚和雏鸡
1、种蛋表面的细菌检验
1.1准备:采样的培养基及器械(皿)必须经过高压和干热灭菌处理和包装,数量根据采样计划准备。
1.1.1培养基
A·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、 C·高盐甘露醇琼脂(MSA )、 D·沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、E ·霉菌琼脂(MM)。
将上述5种培养基按要求配制,经高压灭菌冷却到50—60℃,分别倒入消毒后的平皿(90mm 中,经24小时37℃培养,无细菌生长作为备用。以上五种培养基各取一个为一组,根据被检种蛋数量准备若干组。
1.1.2器械 记号笔
1.2 采样
经消毒后入蛋库待孵的合格种蛋,可根据种蛋的数量、批次、存放部位随机抽取若干组,每组30枚,放入灭菌袋内,封口送检。
1.3 接种培养基 必须在超净工作台内或无菌室进行,下同。
1.3.1操作人员必须消毒手,更换工作服、鞋、帽,带口罩进入无菌室。
1.3.2 接种培养基
每组培养皿中的每个平板用6枚种蛋在培养基表面滚动,使种蛋小头表面充分与培养基表面接触,然后在平皿上标记被检种蛋的编号,放入培养箱内37℃培养。或用棉拭子涂抹(检验方法同下的设备表面) 。
1.4. 结果判定
1.4.1 菌落计数
培养24小时后取出营养琼脂、麦康凯琼脂、霉菌琼脂、高盐甘露醇琼脂培养基。
A ·营养琼脂计所有菌落为总菌数;
B ·麦康凯琼脂计红色菌落数为大肠杆菌数(可通过生化鉴定);
C ·霉菌琼脂再置于室温下24小时计霉菌数;
D ·高盐甘露醇琼脂也置于室温下24小时计黄色、圆形、光滑、隆起的菌落为葡萄球菌数(可通过镜检);
E ·48小时后取出沙门氏志贺氏琼脂通过菌落形态(细小、透明菌落)、生化鉴定及血清试验是否有沙门氏菌。
1.4.2评分判定
标准:大肠杆菌 0; 沙门氏菌 0; 葡萄球菌 0; 绿脓杆菌 0.
2、绒毛的细菌检验
2.1准备
2.1.1培养基
A·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、 C·高盐甘露醇琼脂(MSA )、 D·霉菌琼脂(MM)。
E ·沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、F ·四硫磺酸钠增菌液(TTB )
2.1.2器械
镊子、天平、酒精灯、火柴、记号笔、三角瓶(50-100ml )、平皿(90mm )、
生理盐水、各规格的刻度吸管、取液泵等。
2.2采样
出雏时,在出雏器的不同部位用消毒过的镊子取约1克绒毛装入经消毒过的牛皮纸袋中,注意不要混入其它杂物,封口、标记、送检。
2.3实验室操作
2.3.1每份绒毛样品称取0.3-0.5克绒毛(先放消毒过的三角瓶于电子天平
上回零,用火焰消毒过的镊子夹取绒毛)放入三角瓶内,盖好,瓶壁上标上绒毛重量和编号。
2.3.2每份样品加入100倍生理盐水(30-50ml ),加盖摇匀,浸泡5分钟,
即制成1:100的绒毛液。
2.3.3用5ml 吸管在三角瓶内连续吹吸数次,然后取液体加入4个平皿(90mm )
中,每个平皿1ml 。
2.3.4 倾倒培养基:将事先配制、消毒好的NA 、Mac 、MSA 、MM4种培养基冷却
道48-52℃时(培养基可放在55-56℃的水浴锅中待用),分别倾注于4个加入绒毛液的平皿中,每个平皿15-18ml ,并摇匀。
2.3.5 待平皿冷却凝固后,倒置于37℃恒温箱中培养。
2.3.6 增菌:取绒毛液15-20ml 加入15-20ml 双倍的四硫磺酸钠于三角瓶中
(绒毛液和四硫磺酸钠液1:1的比例),置37℃恒温箱内培养24小时后,再用接种环转接在S ·S 培养基上,37℃培养24-48小时。
2.4 结果判定
2.4.1 菌落计数
培养24小时后取出营养琼脂、麦康凯琼脂、霉菌琼脂、高盐甘露醇琼脂培养基。
A ·营养琼脂计所有菌落为总菌数;
B ·麦康凯琼脂计红色菌落数为大肠杆菌数(可通过生化鉴定);
C ·霉菌琼脂再置于室温下24小时计霉菌数;
D ·高盐甘露醇琼脂也置于室温下24小时计黄色、圆形、光滑、隆起的菌落为葡萄球菌数(可通过镜检);
E ·沙门氏志贺氏琼脂培养24-48小时后取出,通过其菌落形态(细小、透明菌落)、生化鉴定及血清试验是否有沙门氏菌。
每一种平皿上的菌落数乘以100 ,即为每克绒毛的含菌量。
2.4.2 判定标准
判定标准:(本项中的数值均为常用对数值)
致病菌判定:细菌总数:1=最佳;2=优秀;3=好;4=一般;5=较差;6=差。 大肠杆菌≤2; 沙门氏菌0; 葡萄球菌≤1; 霉菌0
3、终止胚细菌检验
3.1 准备
3.1.1登记 接到样品后,首先进行清点,并记录场名、栋别、批次、数量、
出雏柜号及日期。
3.1.2 培养基准备
①直接接种用培养基(3种):A·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、C ·高
盐甘露醇琼脂(MSA )、
②增菌用的培养基 D·沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、E ·四硫磺酸钠增菌液(TTB )
3.1.3编号 将NA 、Mac 、MSA 琼脂平板各取一块为一组,根据终止胚数量配成
若干组,将每块平板底面用记号笔从中心均匀化5等份,从第一组开始,依次标号,第一组1-5号,第二组6-10号,依次类推,每组三块平板上的号码相对应,每枚终止胚标一个号。
3.1.4器械(皿) 剪刀、镊子、铂耳环、酒精灯、酒精棉、记号笔、蛋盘(托)、
污物盆。
3.2 操作
3.2.1胚蛋小头向上(便于取卵黄)置于蛋盘(托)上。
3.2.2用镊子取酒精棉球(95%)点燃后,在每个胚小头上边擦边烧进行消毒。
3.2.3用火焰消毒后的镊子和剪刀敲开小头蛋壳,夹出卵黄并剪开,每换一个
胚蛋,剪刀和镊子要用火焰消毒一次。
3.2.4用铂耳环蘸取卵黄,分别在三种培养基(NA 、MSA 、Mac )相对应的号码
位置上划线接种,接种完毕后置于37℃恒温箱中培养24小时观察结果。
3.2.5沙门氏菌增菌培养:将不同栋别或批次的终止胚归为一组,每组取卵黄
约10克放入盛有TTB (50ml )的三角瓶中增菌,在37℃培养箱中培养24小时后转接在S ·S 培养基上,在将S ·S 放入37℃培养箱中培养24-48小时后,鉴定沙门氏菌。
3.3判定
3.3.1结果观察
①在营养琼脂(NA )与麦康凯琼脂(Mac )两种培养基经37℃24小时候生长的菌落,通过菌落形态、颜色、生化反应鉴定大肠杆菌、绿脓杆菌或其它细菌(杂菌)。
②高盐甘露醇琼脂(MSA )通过37℃24小时培养,在常温下再放24小时
后观察菌落形态、染色镜检鉴定葡萄球菌。
③S ·S 培养基上生长的菌落通过其形态、生化及血清反应,鉴定沙门氏菌。
④计算出致病菌的胚胎与被检总数的比例,填写报告。
3.4.2判定标准
标准:大肠杆菌 0; 沙门氏菌 0; 葡萄球菌 0; 绿脓杆菌 0.
4、一日龄雏鸡的细菌检验
4.1准备
4.1.1登记 接到样品后,首先进行清点,并记录场名、栋别、批次、数量、
出雏柜号及日期。
4.1.2培养基准备
①直接接种用培养基(3种):A·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、C ·高盐甘露醇琼脂(MSA )、
②增菌用的培养基:D · 沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、E ·四硫磺酸钠增菌液(TTB )
4.1.3编号 将NA 、Mac 、MSA 琼脂平板各取一块为一组,根据雏鸡数量配成若
干组,将每块平板底面用记号笔从中心均匀化5等份,从第一组开始,依次标号,第一组1-5号,第二组6-10号,依次类推,每组三块平板上的号码相对应,每只雏鸡标一个号。
4.1.4器械(皿) 剪刀、镊子、铂耳环、酒精灯、酒精棉、记号笔、消毒液 、
消毒盆,方瓷盘,污物桶。
4.2 操作
4.2.1 首先心脏采血,作母源抗体监测。
4.2.2 将雏鸡放入盛有消毒液的盆中浸湿,以防止绒毛飞落和消毒。
4.2.3 左手抓着雏鸡鸡头及颈部,右手抓雏鸡双翅向胸部对折,腹部朝下撕开
小鸡,翻开卵黄囊平放在瓷盘上,用酒精棉球分别烧烙肝表面、卵黄囊,并剪开。
4.2.4 用铂耳环分别勾取卵黄囊或肝组织在同编号的Mac 、MSA 、NA 琼脂板上
划线接种,接种完毕后置于37℃恒温箱中培养24小时观察结果。
4.2.5 沙门氏菌增菌培养:将不同栋别或批次的雏鸡归为一组,每组取卵黄约
10克放入盛有TTB (50ml )的三角瓶中增菌,在37℃培养箱中培养24小时后转接在S ·S 培养基上,在将S ·S 放入37℃培养箱中培养24-48小时后,鉴定沙门氏菌。
4.3判定
4.3.1结果观察
①在营养琼脂(NA )与麦康凯琼脂(Mac )两种培养基经37℃24小时候生长的菌落,通过菌落形态、颜色、生化反应鉴定大肠杆菌、绿脓杆菌或其它细菌(杂菌)。
②高盐甘露醇琼脂(MSA )通过37℃24小时培养,在常温下再放24小时后观察菌落形态、染色镜检鉴定葡萄球菌。
③S ·S 培养基上生长的菌落通过其形态、生化及血清反应,鉴定沙门氏菌。
④计算出有致病菌的雏鸡与被检总数的比例,填写报告。
4.4.2判定标准
标准:大肠杆菌 0; 沙门氏菌 0; 葡萄球菌 0; 绿脓杆菌 0.
5、空气中细菌的检验
5.1准备
5.1.1培养基
A·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、 C·高盐甘露醇琼脂(MSA )、 D·沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、E ·霉菌琼脂(MM)。
以上5种培养基各一块为一组,根据采样计划准备若干组,用消毒好的牛皮纸包好,放入采样桶中。
5.1.2器械 记号笔等。
5.2 采样
5.2.1 五种培养基各一个为一组,根据孵化室、出雏室房间面积采3-5个点,
每个孵化柜采一个点。
5.2.2 将每组培养基平皿打开,在空气中暴露15分钟,盖好平皿盖子,打包、
填单、送检。
5.2.3将采样好的平皿放入37℃恒温箱中培养。
5.3 结果判定
5.3.1 菌落计数
培养24小时后取出营养琼脂、麦康凯琼脂、霉菌琼脂、高盐甘露醇琼脂培养基。
A ·营养琼脂计所有菌落为总菌数;
B ·麦康凯琼脂计红色菌落数为大肠杆菌数(可通过生化鉴定);
C ·霉菌琼脂再置于室温下24小时计霉菌数;
D ·高盐甘露醇琼脂也置于室温下24小时计黄色、圆形、光滑、隆起的菌落为葡萄球菌数(可通过镜检);
E ·沙门氏志贺氏琼脂培养24-48小时后取出,通过其菌落形态(细小、透明菌落)、生化鉴定及血清试验是否有沙门氏菌。
每一种平皿上的菌落数乘以100 ,即为每克绒毛的含菌量。
5.3.2 判定标准
判定标准:总菌数≤30;大肠杆菌≤5;霉菌数≤2;葡萄球菌≤2
6、设备表面(棉拭子)检验
6.1准备
6.1.1棉拭子的准备 将卫生棉签装入玻璃试管中,用硅附塞塞紧,高压蒸汽
灭菌备用。
6.1.2采样器(用塑料板制成5×5厘米空心面积),酒精灯。
6.1.3 培养基
A ·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、 C·高盐甘露醇琼脂(MSA )、 D ·霉菌琼脂(MM)。E ·沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、F ·四硫磺酸钠增菌液(TTB )
6.1.4 器械
水浴锅、刻度吸管(2、5ml )、平皿、灭菌盐水、试管架、液泵、记号
笔、塑料桶等。
6.2 采样
①采样部位 孵化器、出雏器、蛋车、鉴别台、鸡苗箱、蛋盘、暖风机等各部
位;出雏大厅、冲洗间、孵化室、出雏室、蛋车、等各室地面;墙壁、种蛋表面等。
②采样数量 各种设备和各室地面、墙壁随机取2-3个点。
③采样方法 首先消毒采样者手和采样器,在酒精灯火焰边打开装有棉拭子的试管,倾斜,倒出棉拭子,蘸取适量灭菌生理盐水,在25平方厘米(5×5厘米)的采样器面积内涂擦(或相当于25平方厘米的设备面积),涂擦完毕后,不松手,迅速将棉拭子放入试管内,用酒精火焰烧断棉签把,或在试管边襞断棉签把,烧烙试管口,加上塞子封严。作好标记,送检。
6.3 检验
6.3.1 登记、编号,依次排在试管架上。
6.3.2稀释 在超净工作台或无菌室内将试管塞全部拔掉,每管内加入4ml 灭
菌生理盐水,浸泡5-10分钟。
6.3.3标号 在4个平皿上标上棉拭子相对应的编号。
6.3.4 加样 用5ml 吸管在浸有棉拭子的试管中反复吸打数次使之均匀,然后
吸取2ml 稀释液,分别加入对应编号的四个平皿内,每个平皿0.5ml 。
6.3.5分组 加样完毕,将全部平皿分成四组放置,使每组编号完全一样。
6.3.6倾注培养基 将事先配制、消毒好的NA 、Mac 、MSA 、MM4种培养基冷却
道48-52℃时(培养基可放在55-56℃的水浴锅中待用),分别倾注于4组平皿中,每个平皿15-18ml ,并摇匀。
6.3.7 待平皿冷却凝固后,倒置于37℃恒温箱中培养。
6.3.8 增菌: 按场别或采样部位,将棉拭子10-20支为单位分成若干组,分
别把剩下的稀释液15-20ml 加入到盛有双倍的四硫磺酸钠(15-20ml )
的三角瓶中(稀释液和四硫磺酸钠液1:1的比例),置37℃恒温箱内培养24小时后,再用接种环转接在S ·S 培养基上,37℃培养24-48小时。
6.4 结果判定
6.4.1 菌落计数
培养24小时后取出营养琼脂、麦康凯琼脂、霉菌琼脂、高盐甘露醇琼脂培养基。
A ·营养琼脂计所有菌落为总菌数;
B ·麦康凯琼脂计红色菌落数为大肠杆菌数(可通过生化鉴定);
C ·霉菌琼脂再置于室温下24小时计霉菌数;
D ·高盐甘露醇琼脂也置于室温下24小时计黄色、圆形、光滑、隆起的菌落为葡萄球菌数(可通过镜检);
E ·沙门氏志贺氏琼脂培养24-48小时后取出,通过其菌落形态(细小、透明菌落)、生化鉴定及血清试验是否有沙门氏菌。
每一种平皿上的菌落数乘以8,即为每个棉拭子的含菌量。
6.4.2 判定标准
判定标准:总菌数≤32;大肠杆菌≤8;沙门氏菌0;葡萄球菌≤8 ;霉菌≤8。
7、水样检验
7.1准备
7.1.1 采样瓶的准备 :250ml 玻璃采水瓶经过160℃2小时的干热灭菌,盖好
塞子备用。
7.1.2培养基
A·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、 C·高盐甘露醇琼脂(MSA )、 D·霉菌琼脂(MM)。E ·沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、F ·四硫磺酸钠增菌液(TTB )
7.1.3器械 :
试管、刻度吸管(5ml 、10ml )、90mm 平皿;水浴锅、灭菌生理盐水、试管架、液泵、记号笔、PH 试纸、塑料桶等。
7.2采样:采样者消毒手后用采水瓶采集水样。
7.2.1 采样部位 孵化场中的各水龙头和每个孵化柜的水槽中的水样。
7.2.2采样方法
先将水龙头拧开,放水5-10分钟,然后接取100-200ml 水,孵化柜直接从水槽中采集。
7.3检验
7.3.1登记、编号:
收到样品后,首先进行清点,登记其场别、采样部位、数量、送检日期等;并编号,同时将对应的编号用记号笔标记在采水瓶上。
7.3.2标号
拿6个灭菌平皿重叠一起,底朝上将水瓶上的编号依次写在平皿底上(如1#标记1、1、1、1-1、1-2、1-3),标记完后,将平皿一起翻转,盖朝上。
7.3.3稀释、加样
①在试管架上放多支试管,每个水样用3支,将每支试管内加入9ml 灭菌生理盐水。
②将水样摇匀,在超净台或无菌室内打开瓶塞,用5ml 吸管从水样瓶中吸4ml 水样,从下到上,先依次放1ml 在下面的同编号的3个平皿中(如1#的1、1、1编号平皿),吸管中剩下的1ml 水样放在盛有9ml 盐水的试管内反复吸打使之均匀,取出2ml ,1ml 加在一个平皿中(如1#的1-1编号平皿),另1ml 放入第二支试管内反复吸打数次,又取出2ml ,1ml 加在一个平皿中(如1#的1-2编号平皿),另1ml 放入第三支试管反复吸打数次,最后取1ml 加在一个平皿中(如最上面1#的1-3编号平皿),此3个稀释度分别为,10-1、10-2和10-3。
7.3.4分组
加样完毕,将全部平皿分成四组放置,10-1、10-2和10-3平皿为一组,作倾注营养琼脂用;剩下3个平皿各为一组,分别倾注Mas 、MSA 、MM 培养基用。
7.3.5倾注培养基
将事先配制、消毒好的NA 、Mac 、MSA 、MM4种培养基冷却道48-52℃时(培养基可放在55-56℃的水浴锅中待用),分别倾注于4组平皿中,每个平皿15-18ml ,并摇匀。
7.3.6待平皿冷却凝固后,倒置于37℃恒温箱中培养。
7.3.7增菌: 按场别或采样部位,将水样5-10瓶为单位分成若干组,取水
样(原液)分别加入含双倍的四硫磺酸钠20ml 的三角瓶中(水样和四硫磺酸钠液1:1的比例),置37℃恒温箱内培养24小时后,再用接种环转接在S ·S 培养基上,37℃培养24-48小时。
7.3.8菌落计数
培养24小时后取出营养琼脂、麦康凯琼脂、霉菌琼脂、高盐甘露醇琼脂培养基。
A ·营养琼脂计总菌数;(见水质检验细菌总数的计算方法)
B ·麦康凯琼脂计红色菌落数为大肠杆菌数(可通过生化鉴定);
C ·霉菌琼脂再置于室温下24小时计霉菌数;
D ·高盐甘露醇琼脂也置于室温下24小时计黄色、圆形、光滑、隆起的菌落为葡萄球菌数(可通过镜检)
E ·沙门氏志贺氏琼脂培养24-48小时后取出,通过其菌落形态(细小、透明菌落)、生化鉴定及血清试验是否有沙门氏菌。
Mac 、MSA 、MM 每个平皿上的菌落数即为每毫升水中的含菌量。
7.3.9 判定标准
判定标准:细菌总数≤102;大肠杆菌数≤0;霉菌数≤0;沙门氏菌数≤0.
附:水质检验细菌总数计数方法
1、平板菌落数的选择:
在求同稀释度的平均菌落数时,若其中一个平板有较大片状菌落生长时不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,则可计算半个平板后乘以2以代表全平板菌落数。
2、稀释度的选择:
A·应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见
表例1);
B·若有两个稀释度,其生长菌落均在30-300之间,则应视二者之比值来
决定,若其比值小于2,应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数字(见表例2和例3);
C ·若所有平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表例4);
D ·若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表例5);
E ·若所有稀释度平均菌落数均不在30-300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300地平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表例6);
F ·若所有稀释度菌落数均不可计数,则以最高稀释倍数无法计数报告之(见表例7)。
3、菌落数的报告:菌落数在100以内时,按实有数报告,大于100时,按四舍五入的方法,保留2位有效数字乘以10得指数报告之。
三、鸡舍的细菌检测
鸡舍的清洁卫生,直接影响着鸡群的健康生长及生产性能的发挥。所以鸡舍的消毒效果检查也是十分重要的。鸡舍的环境卫生监测,主要是对新鸡舍投入使用前和旧鸡舍鸡只出栏后通过消毒封闭再次使用前的消毒效果检验。检验有水样、消毒液、空气、表面棉拭子、垫料、饲料等;鸡舍养鸡过程中抽检水样和消毒液。
1、空气检验:(检验方法同孵化厅)
2、表面检验:墙壁(1米以下)、地面、可视设备表面等(检验方法同孵化厅)
3、水样:水源、水箱、水池、鸡舍内水线(前、中、后三点)。水箱水池要求取水面10厘米以下的水(检验方法同孵化厅)。
4、饲料:取样同垫料、绒毛(检验方法同水样)。
5、垫料:
分新垫料(消毒后鸡舍新铺垫料)
旧垫料(正在使用中的垫料)。
5.1准备:
5.1.1采样袋 经高压消毒的牛皮纸袋。
5.1.2培养基
A ·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、 C·高盐甘露醇琼脂(MSA )、D ·霉菌琼脂(MM)。E ·沙门氏志贺氏琼脂(S·S) 、F ·四硫磺酸钠增菌液(TTB )
5.1.3器械
镊子、天平、酒精灯、火柴、记号笔、三角瓶(50-100ml )、水浴锅、
试管架、平皿(90mm )、生理盐水、各规格的刻度吸管、取液泵等。
5.2 采样
①采样部位及数量:每栋鸡舍采地面和蛋窝垫料,随机采样,每栋5-10份,每份3-5克。
②采样方法:先清洗消毒双手,用消毒的镊子夹取不同深度的垫料入采样袋中,每采一点后,再用消毒镊子采下一点,采后立即封严,并注明标记。
5.3 检验
5.3.1登记、编号:
收到样品后,首先进行清点,登记其场别、采样部位、数量、送检日期等;并编号,同时将对应的编号用记号笔标记在采样袋上。
5.3.2称样
将垫料用镊子夹入灭菌的三角瓶中(可将三角瓶放在电子天平上回零),称量,新垫料称1g/份,旧垫料称0.5g/份,并将编号标于三角瓶上。
5.3.3标号
拿6个灭菌平皿重叠一起,底朝上将垫料的编号依次写在平皿底上,新旧垫料稀释倍数不一样,标号有所不同(如新垫料1#标记1、1、1、1-1、1-2、1-3;旧垫料2#标记2、2、2、2-4、2-5、2-6),标记完后,将平皿一起翻转,盖朝上。
5.3.4稀释、加样
①在试管架上放多支试管,每个新垫料用2支,旧垫料用4支,将每支试管内加入9ml 灭菌生理盐水。
②新垫料在三角瓶内用灭菌生理盐水做10-1稀释、再用两支试管做10
-2和10-3稀释,每个稀释度取1ml 加入一个平皿中,作总菌数计数用; 再从10-1三角瓶中取3ml ,分别加入3个平皿中,每个平皿1ml ,作大肠杆菌、葡萄球菌、霉菌计数用。
③旧垫料首先在三角瓶内用灭菌生理盐水做10-2稀释,然后取出1ml 用4支试管进行10-3、10-4、10-5、10-6稀释。稀释后,分别从10-4、10-5、10-6稀释管中各取1ml 加入平皿中,作总菌数计数用;再从10-2三角瓶中取3ml ,分别加入3个平皿中,每个平皿1ml ,作大肠杆菌、葡萄球菌、霉菌计数用。
5.3.5分组
加样完毕,将全部平皿分成四组放置,10-1、10-2和10-3(或10-4、10-5、10-6)平皿为一组,作倾注营养琼脂用;剩下3个平皿各为一组,分别倾注Mas 、MSA 、MM 培养基用。
5.3.6倾注培养基
将事先配制、消毒好的NA 、Mac 、MSA 、MM4种培养基冷却道48-52℃时(培养基可放在55-56℃的水浴锅中待用),分别倾注于4组平皿中,每个平皿15-18ml ,并摇匀。
5.3.7待平皿冷却凝固后,倒置于37℃恒温箱中培养。
5.3.8增菌: 按场别或采样部位,将三角瓶中的垫料5-10瓶为单位分成若干组,取剩下释液分别加入含双倍的四硫磺酸钠20ml 于三角瓶中(稀释和四硫磺酸钠液1:1的比例),置37℃恒温箱内培养24小时后,再用接种环转接在S ·S 培养基上,37℃培养24-48小时。
5.3.9菌落计数
培养24小时后取出营养琼脂、麦康凯琼脂、霉菌琼脂、高盐甘露醇琼脂培养基。
A ·营养琼脂计总菌数;(见水质检验细菌总数的计算方法)
B ·麦康凯琼脂计红色菌落数为大肠杆菌(可通过生化鉴定);
C ·霉菌琼脂再置于室温下24小时计霉菌数;
D ·高盐甘露醇琼脂也置于室温下24小时计黄色、圆形、光滑、隆起的菌落为
葡萄球菌(可通过镜检)
E ·沙门氏志贺氏琼脂培养24-48小时后取出,通过其菌落形态(细小、透明菌落)、生化鉴定及血清试验是否有沙门氏菌。
Mas、MSA 、MM 每个平皿上的菌落数乘以相应的稀释倍数即为每克垫料的含菌量。
5.3.10 判定标准
判定标准:
新垫料:总菌数≤1.0×105;大肠杆菌-;萄球菌-;沙门氏菌0;曲霉菌 0旧垫料:总菌数≤1.0×108;大肠杆菌-;葡萄球菌-;沙门氏菌0;曲霉菌 0
四、消毒剂及其使用效果的测定
1准备
1.1 采样瓶的准备 :250ml 玻璃采水瓶通过160℃2小时的干热灭菌,盖好塞
子备用。
1.2培养基
A·营养琼脂(NA )、 B·麦康凯琼脂(Mac)、 C·高盐甘露醇琼脂(MSA )、
D·霉菌琼脂(MM)。
试管、刻度吸管(5ml 、10ml )、90mm 平皿;水浴锅、灭菌生理盐水、试管架、液泵、记号笔、PH 试纸、塑料桶等。
2采样:采样者消毒手后用采水瓶采集。
2.1采样部位:鸡舍门口脚踏消毒盆,生产和生活区过道消毒池。
2.2采样方法:直接从消毒盆和消毒池中灌取消毒液200ml 。
3检验
3.1登记、编号:
收到样品后,首先进行清点,登记其场别、采样部位、数量、送检日期等;并编号,同时将对应的编号用记号笔标记在采样瓶上。
3.2标号 :
在4个平皿上标上消毒药相对应的编号。
3.3加样:用5ml 的刻度吸管吸取消毒液4ml ,分别加入对应编号的四个平皿
内,每个平皿1ml 。
3.4分组 加样完毕,将全部平皿分成四组放置,使每组编号完全一样。
3.5倾注培养基 将事先配制、消毒好的NA 、Mac 、MSA 、MM4种培养基冷却道
48-52℃时(培养基可放在55-56℃的水浴锅中待用),分别倾注于4组平皿中,每个平皿15-18ml ,并摇匀。
3.6 待平皿冷却凝固后,倒置于37℃恒温箱中培养。
4 结果判定
4.1 菌落计数
培养24小时后取出营养琼脂、麦康凯琼脂、霉菌琼脂培养基、高盐甘露
醇琼脂。
A ·营养琼脂计所有菌落为总菌数;
B ·麦康凯琼脂计红色菌落数为大肠杆菌(可通过生化鉴定);
C ·霉菌琼脂再置于室温下24小时计霉菌数;
D ·高盐甘露醇琼脂也置于室温下24小时计黄色、圆形、光滑、隆起的菌落为葡萄球菌(可通过镜检);
NA 、Mas 、MSA 、MM 每个平皿上的菌落数即为每毫升消毒液中的含菌量。
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