范文一:HPLC法测定盐酸赖氨酸的含量
齐鲁药事#QiluPharmaceuticalAffairs2010Vol129,No16
族维生素的含量1广西中医学院学报,2008,11(1):51~531[3]袁利娟,陈东波1HPLC法测定小儿四维葡钙颗粒中维生素B1、
维生素B2的含量1宜春学院学报,2008,30(4):89~901[4]何树芸,杨瑞瑞1酸性染料比色法测定复合维生素B片中维生素
B1的含量1中国生化药物杂志,2003,24(5):248~2491
#345#
[5]陈泽中,冯锋,林洁刁,等1基于离子交换吸附的动态液滴荧光法
用于维生素B2和B6的快速检测1生物医学工程与临床,2005,9(3):136~1391
[6]黄夕野1复合维生素B泛酸钙口服溶液中维生素B2含量测定1
海峡药学,2007,19(1):34~361
HPLC法测定盐酸赖氨酸的含量
孙向红,张建华
(威海爱威制药有限公司,山东,威海264205)
摘要:目的 建立一种高效液相色谱法测定盐酸赖氨酸含量的方法。方法 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-015%醋酸钠溶液(用稀醋酸调节pH值至618)(42B58)为流动相;流速:110mL#min-1;检测波长360nm。结果 盐酸赖氨酸对照品进样量在0112~0120mg之间与峰面积积分值呈良好的线性关系。结论 本法灵敏度高,准确性好,可用于盐酸赖氨酸的含量检测。
关键词:盐酸赖氨酸 含量测定 高效液相色谱法
中图分类号:R92712 文献标识码:A 文章编号:1672-7738(2010)06-0345-02
DeterminationoflysishydrochloridebyHPLC
SUNXiang-hong,ZHANGjian-hua
(WeihaiAiweiPharmaceuticalLimitedCompany,Weihai264205)
ABSTRACT:OBJECTIVE TodevelopamethodfordeterminationoflysinehydrochloridebyHPLC1METHODS Thechromatographicwereasfollows:aC18columnwasused,acetonitrile-015%acetateanhydroussolution(usethinaceticacidso-lutionregulatepHto618)(42B58)wasusedasthemobilephase,theflowratewas110mL#min-1,andthedetectionwave-lengthwas360nm1RESULTS
Thecalibrationcurveshowedagoodlinearregressionwithintherangeof0112~
0120mg1CONCLUSION Itwasanaccurateandsensitivemethodfordeterminationoflysinehydrochloride1
KEYWORDS:Lysinehydrochloride;determination;HPLC 盐酸赖氨酸为西药原料,属氨基酸类药。本文采用高效液相色谱法对其进行含量测定,为该原料的质量标准提供了科学的依据。1 仪器与试药
高效液相色谱仪:Spectraseries100型;色谱柱:Kroma-silC18(200@416mm,5Lm);盐酸赖氨酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号140673-200405,供含量测定用)。2 方法与结果
211色谱条件与系统适用性 流动相:乙腈-015%醋酸钠溶液(用稀醋酸调节pH值至618)(42B58);检测波长360nm;流速:110mL#min-1。理论塔板数按盐酸赖氨酸峰计算应不低于1000。为了考察干扰组分的干扰情况,分别吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各20LL注入液相色谱仪。记录色谱图,供试品色谱图中,在与对照品色谱图相同保留时间有相应的峰,阴性对照液无对应峰,结果见图1,2,3
。
图1
盐酸赖氨酸对照品色谱图
#346#
齐鲁药事QiluPharmaceuticalAffairs2010Vol129,No16215稳定性考察 精密吸取/试验溶液0项下的供试品溶液,每隔2h进样一次,共5次,记录峰面积,平均值为3350086,RSD为0144%。
216重现性试验 取本品(批号:10032301),精密称取6份,按正文方法测定,结果表明含量平均值为10013%,RSD为0123%。
217回收率试验 取批号为10031401(含量为9916%)的样品,混匀,各取01013g,共6份,分别精密称定,再分别加入盐酸赖氨酸对照品(0103236g,50mL)5mL,照正文含量测定方法,测定峰面积,回收率结果见表1。
图3 盐酸赖氨酸样品色谱图
表1
(g)010138101013670101372010132601013490101374
(mg)131755131615131665131207131436131685
加样回收率试验结果
品量(mg)310363103631036310363103631036
(mg)161793161646161709161309161465161695
(%)(%)(%)1001019919610010610010501081001509919599181
212试验溶液的制备
21211对照溶液的制备:精密称取盐酸赖氨酸对照品约12mg,置200mL容量瓶中,混匀后,精密吸取510mL,置50mL棕色容量瓶中,加215mL1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液215mL、5%碳酸钠溶液215mL,摇匀,于80e水浴反应10min,放冷,加pH值为710的磷酸盐缓冲液定容至刻度,即得。
21212样品溶液的制备:精密称取盐酸赖氨酸原料约13mg,置200mL容量瓶中,按对照品制备法制备。
21213阴性对照液的制备:精密吸取纯化水510mL,置50mL棕色容量瓶中,按对照品制备法制备。
213精密度考察 取浓度为12Lg#mL-1的对照品溶液,连续进样6次,记录色谱图,峰面积平均值为2634867,RSD为0128%。
214线性关系考察 精密称取盐酸赖氨酸对照品1210mg,置200mL容量瓶中,混匀后,精密吸取510mL,置50mL棕色容量瓶中,加215mL1%2,4-二硝基氟苯乙腈溶液215mL、5%碳酸钠溶液215mL,摇匀,于80e水浴反应10min,放冷,加pH值为710的磷酸盐缓冲液定容至刻度,摇匀,滤过,作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液12,14,16,18,20LL,注入液相色谱仪中,记录峰面积,其线性关系为Y=124136X-16913,r=019999,结果表明,盐酸赖氨酸在0112~0120mg范围内线性关系良好。
218样品测定 按正文拟订方法测定十批样品中盐酸赖氨酸的含量,结果十批含量均大于9915%,测定结果见表2。
表2
批号1003140110031402100315011003150210031901
盐酸赖氨酸
(%)991499917399198991901001021001141001201001349918499196
10批样品试验结果
平均含量9916991910011100139919
批号1003190210032101100321021003230110032302
盐酸赖氨酸
(%)991789917099191991879918299184100118100133100125100119
平均含量9917991999181001310012
3 讨论
实验结果表明,采用高相液相色谱法测定盐酸赖氨酸的含量,有良好的精密度及较高的准确度,线性范围符合要求,能够有效控制该原料药的产品质量,为最终生产出优良的产品提供质量保证。
参考文献
[1]5中国药典62005年版(二部)1北京:化学工业出版社12005,附录VD1[2]国家食品药品监督管理局标准YBH081420041
#国外药讯#
加拿大批准血小板抑制剂Effient上市
2010年4月21日,加拿大宣布批准Effient
(prasugrelhydrochloride,普拉格雷)用于治疗心脏病发作及胸痛。普拉格雷为血小板聚集抑制剂,属于噻烯吡啶类腺苷二磷酸受体抑制剂。该类产品有波立维(Plavix),目前为全球销量最大的抗血小板聚集药物。普拉格雷作为新一代血小板抑制剂,与氯吡格雷相比,具有更强有力的抗血小板聚集作用,而且个体差异小,疗效。Prasugrel的工作原理是通过在血小板表面阻碍P2Y12腺苷二磷酸受体而抑制血小板活化和并发的聚集。抗血小板药物用于防止血小板聚集或粘到一起,如果血小板聚集会导致动脉阻塞并可能引发心脏病或中风。临床研究表明,普拉格雷与氯吡格雷相比,前者更能有效地降低非致死性心脏病和卒中导致的死亡,但导致患者出血更多。
范文二:谷物中赖氨酸的含量
1
同不品种类赖氨豆含酸研量
究
1 .11
言引 国外研概究 况赖氨酸研究的于国始,外8198年德莱赛首尔先酸水用解法酪从白水蛋物解中
分
出离氨酸赖和精酸混合物氨。189年1雪弗德及赛尔分别莱上述混从合物中离分到纯 赖氨酸。的1 092年弗雪与韦特合用法制成成氨酸赖确定了并氨酸赖化学的结构。 9571年 拿加大查德等理人 从600株菌中霉选得到两筛株黑菌,这粉两株黑菌能粉发酵生成 0 2.~0.3g/l赖氨酸同;都伦纳时同用一进行培菌研养,究赖使氨酸生成提量至 高07 ~ 0.. 8/g;l后其,斯肯又将汉成生量高1.9提g/l,5是这早最有关酵发法生成赖 氨酸的研究虽。然氨酸被赖发的很现,早是赖但氨的酸工业生产却在半是多个世以纪后 1,95年日8的本下祝木、中郎山等清用采紫外线射谷照氨棒酸菌得杆到一了高 丝氨株酸或苏(氨+酸蛋酸氨的)营缺型养变异,株赖氨酸生成使达到工量生业水 产平既。赖然氨酸应用被工业到产中那生么就不得不临一面个题问即:怎样定一种测 物质中是含否赖氨酸有含,多有少,否是得工业生产值。么那氨酸含赖量测的定 作为一个课新题开始科学被家们所视。如重:aSngre(9451首)倡,oacR等(1h769)进 改的二硝氟基甲苯(FDN法),B该法主要的差误来于待源样测中水化碳物的合扰,干对热 理处的影响也够不敏感,所以适只用专门于对比的试验考参。Car由peter和 Roanc(h9176首倡,)Kkade和aienLe(1r969)进的改硝三基磺酸苯(NTS)试B测定有 剂效氨酸的赖分析序,程此后年间此法十多次提被到并用应该法利,用蛋白中质的 赖酸氨基残的ε基与氨NTS的磺酸基发生特B异性可不取逆代应,形反成三硝苯基 (TN)P合物,在复673 n和42m0nm波 处有特征长吸光,收此测以蛋定白中由自氨基 含,量是,但此操作很复杂法要,求条件较。随后高Tsi(a9721)提了出2-氯-35二硝基,啶(吡CDNP法)测定赖酸氨含,量之前比的法方简便一但些还很是杂复。 直H到rreul(l19761 98)7出提染料结法合(DLB法)定测谷物有中效氨酸赖,法此
不需复杂的水解过程要测,时定也间之前比的种几方短法多。很此在之科学家们后又提 了出,4,62-硝三基-1苯-磺法酸,法此TNBS法的改进法,是法最此用来测 定玉初种子中赖米氨含量,酸改的方法进济、经确和准速快可以,用测定来量大米玉谷 物中有的效氨酸赖此。后越来多的测定越赖氨的酸方法被出,提如效高液相谱 色H(LCP法、氨基酸)分析仪等,这些法方法多大都以前的方法改是进来的,而向简 单更准的方向确发展 。1. 国内研2概究 况国内此研对究比较的,晚但进很展,快取的得果也成很人。骄我比国较早比较成 的方熟是法铁赵等男(9821提)
出的料结染合法DB(L)法,法此他是们在鉴 了国外借的技术后提的出更单简更确准方的法,而他们且制的标准曲线后定来也人一
2
不同
种豆品赖类氨含量研究酸
在用直。 此他外还在对实验结果们行分进析发现温后是度 DBL法测 稻定赖氨酸米 量的主含影要响因,并通过子实验证,明在温范室围以 1内—83℃为4最佳定测度温,低 18于测℃定结明果显比器值偏仪;金承低(1泽889)出提用非水位滴定法测电赖定 酸氨含,此量法非按水滴定理使原自用电动滴位计定够能准确简地便定其含量测。 书贤(张196)提出9用了光仪检旋测添加中赖氨剂酸含的量法方。在现有一又的 些研方究如:近红外光法分析(NILS谱法、生物)感器法传等,可见内赖国酸氨测定 方已法经成熟,而很且更准方确。 便.31研 背景及究意义
蛋白
是构质成人体胞的细主要成份食物中,蛋的白进入人体后质经消化先过分解 氨成酸基然,后人体利用这又氨基些再酸成合新人体的蛋白,如免疫质抗体消化、、 酶血蛋白浆生、激长素等都合是后成的人蛋体质白在。成合蛋白质各的种氨酸基中,赖 酸(氨ys L是)重最要的种一少了,,其它氨基它就受酸到限或制不到利得用, 所以它被称是为人体一必需氨第基酸。赖酸学氨二名氨己基,酸化学构结简式 为H2NCH2CH2 HC2H2CHC(N2H)OCOH,有含2 个氨 (基N-H2) 和 个羧基1-(OOH)C ,是一种具有显碱明的性氨羧酸基按。学活光分性,氨赖有 L酸型( 左旋、)D型 右(旋)和 L D型消旋)3(种 构。只有 L 型型能为才生物所用利,常所说的赖通氨均 指酸 L 型。 型赖氨酸L针呈晶体,在 状21℃变0,在暗 22.5℃下4解,分溶易水于,微 于溶醇,不于醚溶。除了 是第必需氨基一酸赖外氨酸可以还节人调代谢平体衡 往,物中食加添少 的赖量酸氨可以,激胃蛋刺酶与白胃酸分泌的提高,液分泌功胃效,起到增食欲进、促 进幼儿长生与育的作用。赖发酸为氨合肉成提碱结供构分,组碱肉责负将一不 饱和脂些肪酸转化能量为 ,还有助降低于固胆醇水平。 在身体中赖酸还有氨其功效。他 和它他其营一起形养胶成原白蛋。胶蛋白原结缔在织组骨,,骼肉肌肌腱,和节 关骨中软扮了演重要角色。外,此氨酸还能提高钙赖吸的及收其在内体的积,累速 加骼生长。骨缺如乏赖氨酸,会造胃成分泌不足液而现厌出食、营性贫养血致,使 枢神中经受阻、发不育。 良氨赖在医酸药还上作为可利尿剂的辅药助物,治因血中 氯化疗减物而少引起铅中毒的现象还,与可酸药性物如水杨(酸等生)成盐减轻来不良反应,与 氨酸蛋用则可抑合制重症高血病压 。近来年科,学家发还现,氨酸赖 控
是
制人体长生的要重质物长抑素Somatot(atoinss, )中重最要的是也最需必的 成,对份的人枢中经神周和神经围系统起都着要作用重。而人然不能体自合成赖身氨酸,必须 从食中物获。取自 然界动中蛋物质白的氨赖酸含量较,高谷 则类较低在且加工过中易程破被坏 。统显计中示国均摄人肉食类食入远远低于世界物均平平,水且现代人而类素食义
3主
不同
种品豆类氨酸含量研究
赖
者在不的断增加由于,长期吃不物动,这样类会出就越来现越的人多赖氨摄酸入 量不足严,影重响们的健康。人以为所了解决赖酸氨应供不足现状的,们需要从我其 日他粮作中找到更多物有含大量氨酸赖的物食谷类中,赖氨的酸量含遍较少,到 现普在为的止技科手仍然难以解决在段类加工谷过程中氨酸被赖大破坏的量现状这,就需要 从其他日类使常的植物用着中手,到找赖酸含氨更多量食物的解来决问。 题中其包括 就61%大豆以为的油主资料 示现显在世蛋白质产界量的80% 植是物白, 蛋种料籽白。蛋以所取选大豆豆和植物科的中蚕为实豆材验,料过通验实研究中的其赖氨 的酸含并进行量对,比选以含取氨酸赖多物的种以日常用使或用者工业产生 大。豆(学名: lGycie nax)m起源于 国,中 古称,,菽 司马迁 汉(公前元1 4~5 前9 3)编年的史《》中,记头篇一《帝本五》纪写中:道 炎“帝侵欲诸侯陵诸, 侯咸归轩。轩辕辕修乃振德兵治,五,鞠气五,抚种万,民庆四。方” 玄曰: 郑五 “,黍种稷菽稻麦也 ”。司马迁《在史记*卷十七》二写道:中 铺“下至铺,为”菽由 此,可轩辕黄帝时已见菽。 种”绍侯主朱的《编中古代史国中》谈商到(公代元前 1“要的主农作,如黍、稷、物、粟 6纪~前世 11世 纪经)和济化的文展时发出: 指麦(麦)大、来(小)、秕、稻麦菽、(豆)大等都见于《卜辞》 卜”华指慕:出 。“以我 国而言 公元前 1,00 年以0前殷时商有代甲骨了,当然记载文非常得限有在农。作 方物,辨别出有黍、面、稷豆、、稻麦、桑,是等时人当民要主依以为生的 作物 ”。严清均校可辑《全上三代古秦汉国三朝文》卷六一指中出: 大豆“于槐。生 出于沮石峪之中九十。华。六日日熟。凡一百十十五成,日忌于。后来卯在 朝 ”和日本也鲜发了从中现国播传去的大过。在豆国种中大植豆历的有史 0005 多 ,年国学者大多认为原中产地是云高原一贵。现带种在的栽植培大豆是野生从大豆 过长期定向通择选、良改化而成的。栽驯大豆以按生育培分类期为主, 国中北纬将2 °2~05地区°的有代内表性品的种按,其育生长短期以, 10 为天一级 ,从早熟到最晚最
熟分为 1 2。级 据根国大豆气中候区,划了除热不量足高海的拔高、纬度区地年降水量和在 520毫 米下以又,灌溉无件条地的区以,外般均有一豆种大植。我大国的 豆中产区集东在平北、原黄平淮原、长三江角洲江和汉平原根。据大品种豆特性 和作耕制度的不同我国大,豆产生分五为主要产区个:一、东 北三为省的春大主豆区二、黄 流淮域的夏大区豆 、长三流域江的春、大豆区 四夏、南江省南各部秋的作大区豆 、五广、云两南部的大豆多熟区南
4
不品同豆类种赖氨含酸量研究
其
,东中春播 北大和黄豆淮夏 海大播 是我国豆豆种大植 积最大、产量面 高最两的个区地
产
区名
地理位置
生长称季
长生≥季0℃ 温积
栽
制培度
东北 春 播 大 豆区
黑
江龙吉、、辽林、 内宁古东北蒙部
104天 左右
270
0~258℃0
年一一, 熟春 秋播
黄收 淮海 夏 大 豆区
播天津、北京、石家
一 线以南,庄东、河南山 部分地区大,江、安苏徽的北 部,西西南山部 、陕的关中和西甘南肃部
9
01~0 天0
60022~800
℃年一两熟
大在各型内豆还按种色皮、当地的实按生长际数和日粒大种中、、等小 分为同不群。的群各按有再、亚有限限或限结无荚习性、灰毛或棕、毛紫或花白花等~ 3 种状,分性成不类型同 大豆。根有主的侧根之、分可入,土 15.米 深呈钟,状罩根。系地在至 表20 厘 米左右土的中根生部根有,根瘤瘤菌供大豆可氮需的量1/3~ /12主。茎高6 ~001 厘0,米51~24 节,个荚豆着于节上生多节大,常豆产。高限无荚结 习适性应水较差的肥条件植。种限有结习荚适于肥性水较好地种区植亚有。限结 荚性的习则介乎二于之者。间大叶豆三出复为。花蝶形叶荚。呈果黄黑、、 褐,弯镰色或形直芦形葫。豆大为日短作照物品种,间对短照的日敏感差别 性。 大大豆豆类是营养价中值最的品高种在百种天,然的食中,它品名榜首列,由于它 营养价的值很,被称高为“中豆王” 之田中“肉”之 “绿色的乳”等。牛中 、其 、含有大 量不饱脂肪酸和多、种量元微、维素素、生异酮、黄低聚糖皂苷、、磷 、脂酸核优和蛋质白。大质卵磷豆脂是大豆从中取的精华提质物。是也人需体 的脂要成分之一,类主要用在于作延:衰缓老血管、清道、预夫心脑血管疾 防病构、成生膜物主的要成分还具有防止肝脏内积存,过脂多的肪用作从,而
有
5
不同
种品豆赖类酸氨含研究量
地防治因肥效而引胖起脂肪肝的大;中含豆有可溶性纤的,维既通便可又, 降低能胆固醇含量大;豆异黄酮是种一构与雌激素相结似具有,雌激素性的活 植性物雌激素能够减轻女,性年更期
综合征状、症延迟性细胞衰老、女使肤保 皮弹持、养性、颜减少骨失,促丢骨进生、降成脂血等;豆大含中有一抑制胰种 的酶质,物对尿糖有治疗病作。大豆用所的皂甙含明有显降血的作脂,用同时,可抑制体 增加。除去以重上养营质以物外,豆大有丰富中蛋的白质,量约含 为3%,8是类食谷物 的45 ~。倍大豆白蛋的质氨酸组基与牛成蛋奶白质相近 除蛋,氨酸低略,其余外需必氨基酸含均量丰富,是较植性物完全蛋白质的在 营养,值价,可上与物动蛋等同白FAO。/WHO1(89)5人试类结果表验,明 豆大蛋必白需氨酸组成基适较合人需体要,对于两以岁上人的,大蛋豆的生白 效理为 价001大。豆富含中白质,蛋其蛋质含白量几是乎肉蛋、鱼、的倍二。 且而豆所含大的蛋白质人体“中必需基氨”含酸充量、足分齐组,全于属优“质白 质”蛋大 豆蛋中白有含多的人种必需的体基酸氨约5 %为赖氨0,酸以所说大豆是。 补 谷充蛋白质氨基类酸不的优足食良。如果品这部分观可的料种油蛋籽得到白充 分利用,对解则决类蛋人质供白不应具有很大足的义。意蚕 (豆名:Vi学ca iafba iLnn),一年生或二年 草本生。蚕一般豆认起 源为西于南和亚北非。中国豆相蚕为西汉传骞张自域西引。入热带自至纬北 6° 3区均有种地。 植中国 四以最多川次,为 南云、湖、南湖 、 江苏、北浙江 青 、海省。蚕等豆又,胡豆,叫豆,佛南江带,一欢喜立在时夏食节,豆因此又称作立夏 豆。宁人波则习叫惯豆倭而且在,立夏后前几,乎是家家户都户蚕吃,豆 喜欢都 吃 豆蚕,不 少 人家 将 还蚕豆 跟大 米饭 一锅 , 称煮为“蚕 豆”饭据《 平 太 。览御记载》,蚕豆是张出骞使西域带时的回豆种。确实,蚕既是粮食豆又, 是小菜既,是闲食” 又是“补。笔者孩提时品住在三北(今江慈浙溪)乡。三下北农 ,村为咸多田(质土有盐含,份系涂海演变成而,)里种植的不是地蚕豆,是棉就花。在 年四每、月份五豆成熟季蚕,许多节人把蚕家既豆当吃,菜又饭吃。 当而城则市把多豆蚕当小吃菜。而晒干后的豆则既蚕可当小吃菜,又当“闲食可 ”。至于建吃福一带据说还视,蚕为上豆等补佳品滋身,价远在桂之上圆蚕豆。的根系较发达 ,入可土层60~1 0c0m根,形成瘤较早茎。形方中空、直、立 、茎的分枝力强可,从部生长 基45~个 或8 ~0 1个以上的分。枝叶生互为偶 数羽,复叶,小状椭圆形,在基叶部生互先端者为对生,。腋花,总生状花。序花 冠紫白或纯白色。色每花有 2~6序 花朵第,一至二花一朵能结荚其后的 花结荚般低。率荚扁为筒圆内形种有子坚硬绿褐色呈
或
淡绿,扁圆形。色粒重 千90~2 0005克。 豆具蚕较强有的耐寒,种性子 在56~时℃能即始发芽开,但
6
同品不豆类种氨酸含赖量究研
适发芽最度温为 16℃幼苗。能耐忍5-℃右的左低温,-6时℃易冻死。长的生 适为 温0225~℃。豆对光蚕要照不严求,格土对水壤要求分高较,宜适冷于 凉而较润的气湿。对候壤的土适应较广,性壤沙土、粘、土田土、水性碱等均土 栽可,对土培壤养营的要求在未,形根成瘤的苗,期宜适施量氮肥用。对、 钾磷需量要较大也镁硼对。豆蚕生育良好有作的用。壤土硼,则缺妨易根碍菌瘤 的繁,殖使植株生不良育为。粮食蔬菜、和饲料、肥绿用兼作物。蚕豆 医疗的作用 , 前早人 有记述 说, 豆 茎蚕、 叶花、 荚、壳和 种皮可 入药均。明《群芳代谱》载:蚕记豆味“微甘辛平毒,快无、和脏腑、胃解酒。毒主 功能要:脾健除湿、通、便、凉血 据”中医《学大辞》典介,蚕绍豆健有 。 除湿、脾通凉血便的能,功治小便疗频、数咳、鼻衄有显著血效疗蚕豆。性味 平甘微辛。,食用外,除有快胃还祛湿、利、脏,腑 补“益中气,涩精实”等功肠, 可能于治疗多种疾用病。现代研 表明究蚕豆含中调节大脑有神经组和的织要重分成、锌、钙锰磷 、等脂,含有丰富的并胆碱,有石强记增力的健脑作忆。用蚕中的蛋白质豆含量 富,且不含胆丰醇,固以可提高食品营价值养,防预血管疾病。心是但体具 豆蚕含有中的赖氨含量酸很还有人研究,所少这以面的方数据本为空基白。如果 验的实结果显示中豆蚕中含也有量的赖氨大酸么它将也成那为充补谷物氨赖酸含 量足的不又一豆种植物类。鉴于 赖氨酸的要重性在何物中的的谷低较量,因此,含豆从食品中类获得可 用的优质赖利氨以解酸赖氨决供应酸不的足现状经已得尤变重要为,国各学家科都 致在寻找力到最速快简便地测定赖氨含量的方法,酸以期发现多更的量大有赖氨含酸 日的食物解决常问此,这也题本次是验的主要目试的
。
2 2.1
材料与
法方 料 大豆材、蚕、9豆5乙﹪液、50﹪醇醇液、乙亮异氨、盐酸酸蒸馏水、、活炭、 茚性三酮、氧二化锡、柠檬酸柠檬酸、钠、三氧化钠氢
2。.
2具 分光器度光、计滤纸、三瓶角、玻棒、璃色皿、电比天平、子浴锅、温度计水 试管、、管塞试、磨机、6研0目筛子、 冰、干箱燥、器斗漏、纸滤、量瓶容。
2.
3
实验方法
()样品前处理1将:自干然的燥豆和蚕大豆别用研分机粉磨碎过, 0 目6子,筛在3 34~335 温度K干燥下,置于干器中备用燥
7
不。品同豆种类氨酸赖量研究含
2)(溶 的液配:置a0.、2mol/L柠檬 酸冲缓液称取 2:.0g
1
柠檬和酸 .24g9 檬柠 酸三钠,,水于 解50ml 蒸水中馏,调p H 5.0至 b.、茚 三试剂酮: 先将茚三重酮晶结即称取5 g 三酮茚溶 于5ml 蒸馏水, 1加入0. 2g5 性活,炭轻轻拌搅若。液太浓溶易操不作可,酌加量 5入10ml- 水。加热热 0min3后 趁热过滤最好用热(滤斗漏 )滤,液放冰箱夜。过次晨日可即出析黄色结晶,抽白滤, 以再1 ml冷水洗 结涤,晶置于干燥中干燥,装器入棕试剂色瓶内存。再称取保1 0g. 茚三酮于 2溶m5l9%乙醇5中 称,取 40.0 二氧化g溶锡 于52ml柠 酸檬冲缓中液 将,液两合摇混匀,滤沉淀,去清液至上 4于℃箱中备冰用 。、c亮异氨标准酸液准:称取确 .50mg 异氨亮酸,数加 0滴0.2ol/m L盐酸解溶, 后然用蒸水馏释稀定至 容01 0lm,则到得度为浓 0u5/mgl的标 准液。 d、 样品 解 液 水的配 制 准: 确称取 0 .000g 样 品1于 10ml0 三角 瓶中 加 入,10m l61oml/L 酸盐严,盖 于373K水解 2 4h,加入少活性炭脱许,过色滤,以盐稀 洗酸残渣,滤液涤加热发除混部分去盐酸,氢氧用钠溶液调化至性,再加中热发至挥 体积于 少51ml,转 入25 m l容瓶中量容定备。 用(3)标曲线的制准:作取 7 洁净带塞只试编号管,按 表1 分别向只每试管添中试剂,再向以加每只上试管 中 加.01 0m l三茚试剂,酮摇后匀紧试塞塞管至,于沸水浴热 5加im,用n水冷冷 试管至却温, 再室每向试管中加只5 ﹪0乙醇8 .0ml ,混 匀用后1 ㎝ 色管于比 556mn 处测吸光,值以所得光度吸为坐标,异纵亮酸氨度浓横为标制作标坐曲线。准
1表试管
编 取号亮异酸标氨液准(m) 加蒸l水(m馏l) 异氨酸亮浓度u(/L) 0 0
g准曲线的标作制1 0
.1 0.90 050 0.20 20.08 10 3 0.3000 .07 50 4 01.400 .0 6020 50.050.50 2 0 560 .6 004. 050
31.00
0
()样品4定: 测与标以曲准测定相同的步线骤条及测件定两种样品的光度吸。 值.4 结2计算 样品中果赖酸氨量含%)=从(准标线上曲的值(u查)/g品样(m重g)×品样稀释倍数 ×1-3×0001 于由亮异氨与酸氨赖的分子量不酸同相所,以用异氨酸标亮曲线计准赖氨算酸时 ,需乘以校要正数系1 .515,同1时应从还最的后果结中间去离氨游基酸的量含 。3 结与分果析 果与分结
析
8
不品种豆同类赖氨酸含研量
究3.1
根
试验据中得测的亮氨酸异准液标吸光的度值绘,制准标线曲图 1)
(1.8 .61 14 ..2 1 10. 086.0. 40.2 0 200 0异氨亮标准液酸浓度 (u/g) 4L00
光吸值A
吸
光值A线 (性光吸值)A
图1
异亮酸标氨曲准
对图线1 据数行进回分析归,归方回为:y程0=00.5078+0x.40757。3. 2 据异根氨酸亮准标曲线和豆大的吸度光计算出打斗中赖值酸, 见表 2
氨
表 试管编2号1
大
样液吸豆光及赖值酸的含量 2 氨 4 536
吸光值
A
0.
515
0.11
50.195
0.17
5
01.56
.0175
赖
酸氨含量 168%
.1.5
%9
1.
7%
1.737%
1.
0%7
1.7
3
%算赖计氨含量的平均数酸 为.10%,方7为差 00.0000032
3.3
根.异亮据酸标准曲线氨和豆蚕吸的光值计算度出打斗赖氨中,酸 表 见31 3 2 4 56
管编试
吸光号值 A
.002
90089.
0
.86
00.80
70
.88
00.
80
赖氨8酸含量 0.58
%0.
7%9
0
.27%
0
74.
0.%76%
.07%
6算出蚕计中赖豆氨含酸量的均数为平 .70%,7方差 0.为000000137.
9
不品种豆同类氨酸含赖量研
究
4论结与论讨 4.1结论 (1 实)验结的果明,表此用法测定豆方类赖氨中的含量充酸分可行,由大和豆豆蚕的含量方差可以 看出,方该法稳性和重定性都现比好,较所用试剂稳定的吸,度光与 亮异酸氨含呈量良的好线关性,系实验果结稳定靠可。 2()实验果表结明大豆在中有大含的赖氨酸,含量量 在6%1右左,以所与期的结预果一样大豆 以可用来量生大和产日常食用,其代用动物类食物替补充,人及体物 动体的内赖氨,以解酸决赖氨酸足不困境的。(3 )豆中蚕的氨赖酸量明显含大比中豆少多,很只 有10左%,这右样生在与加产工 如中单果从氨酸赖含反量面方考虑,么应那优先选该用择大豆作原料进为生行加产工, 且大豆比蚕而豆高,对产生长于境环选择的也大豆要宽泛比多。很在中大豆国的历 悠久,加工史技术也很熟成食品方面自古,来以就很多种食用大有豆的作制 方法,经过现技代术加的工口更好,味相信完全以代替谷可物生活总得在要地位,重成 主为流物食动物。方,面大已都广泛应用经了各种在料饲的加工,用中以补充动物的赖氨酸 摄量入,其更使有营养加的生长 4.2。讨论 大 和豆豆蚕赖氨酸的量含具明显差有,此差异的存在异在二者的于组结成构 上不同的大豆的主。要成为蛋分白质,大占约4 %,0蛋质由白各氨基酸组成种实,验的结果又 示显氨赖在酸所氨基含酸占中据要的主位置。而蚕豆中在各种,金元素 属和微元素量以及石碱胆有很重占要的置位,的蛋它白质量含要大比豆少,中实验 表而明,赖氨酸在含所氨基酸并不中占主要地,所以含量位要比豆大中很少。多
10
不同
种品豆赖氨类含酸量究
研
致
谢
本
文论在导师是红肖梅师老悉心的导指完成的。下 年多,来 师在我恩学的学士课程位习学 ,验研究、实教学动活、术学流、交文撰写和工作论活等方面都给予了极大生关的怀和支持, 并我提供了良为的学好研究环习境导。师的谨严治学孜、不倦、持孜以恒的之师风表是我终身范 习的楷学,在此向恩师表模诚挚示感的和谢高的敬崇意 同!时感其他关心谢、助和支帮我持的老师同和们!
学1
1不同种豆品赖氨酸含量类究研
参
考
文
献[1 肖 玲], 龚 月 生 . 染 料结 合 法 测 定 粕 豆中 有 效赖氨 酸[ ]J 饲 .料工 业 . 200,212(4)03:-334. [ ]王德2利曲红,杰,玉瑛张.光分光法度定测类豆品中食氨赖含量[酸J]内蒙古科.技与经 .200济,(5):109.[ ]3 云 兰 ,郑朱 才 . 用 271分 光 仪 测 定 大 豆 赖氨 酸的 方 法 J][ .生物 技术 199 33,()438-41: [4.]邵艳,秋罗杰,玉朴珠明,新王.豆饼中大氛赖酸提取[J的].丹江牡师学院学范 报1.99,82)(:0-717. 报5[]志峰,宋丽王纪,.高锋液相效谱色测法定料饲中氨基酸含的改进[J量.中]国饲 .2007,(料)62:63-3.[ ]6路,苹同泉,于王英淑王建立,,柳杨谷.赖氨酸测物定方的评价[法]J.京北农院学 报学.0025(,30. [)]7ernBrd aWtaehet.Nultrtiinal onalasyesf o rproeins antda mnio acdsiin b aens P(hsaeolsu p.) [J]sB.ioetchnol Aron Sog cEnivro.n99193,( 4:)917 ~20.0[ ]8张 书 贤 茚. 酮 三比色 法 检测 料 中 饲 氮 酸赖 含量 的 研究 . 四 畜 川 牧兽医 .995,(1):1343-5[9 ]常碧,影明等张饲料氨基酸的测.国定际制[J]研.饲工料.业020,01(22:1-) [401]齐建双铁双,贵等优.质蛋白米赖玉酸氨量测定方含比法分较析J][玉米. 学.2科008,16(1)1:84-152.[ 11T]sai CYH,nael sL W,eNson lO . E coAorliemritcm teho dofs rceenni maigze seds feorly sinec onett[n]J.enrCae Clhmeitrsy.917,429:75-279.5[12] 中 国科学院海上物化生研学究四所室 .三基硝磺酸苯(NTSB用于)氨酸及基物谷 白蛋中质赖酸氨的定[J测]生物.化与学生物物进理展19.6,703:419-52 [13]冯1,东仲汇刘。生物传感等器法测玉米定种赖酸氨的研[究J ]分析与.检 测2.008,34()7:513154. [1-]4陈波,永群,程饶斌等.一种分对离定测氨基方法酸的进[改J].谱.2色010,9 1(6 :)50-656
3
范文三:荷移分光光度法测定赖氨酸含量的研究
技术·食品工程
>>>
CEREALSANDOILSPROCESSING
荷移分光光度法测定赖氨酸含量的研究
南海娟
刘本国
高
晗
张
磊
贾蕾蕾
(河南科技学院食品学院)
【摘要】本文利用四氯苯醌与赖氨酸之间的荷移反应测定食品中赖氨酸的含量。主要研究了
吸收波长、反应时间、温度、硼砂用量、定容溶剂以及四氯苯醌用量等对测定结果的影响。试验结果表明:荷移反应最优条件为:λmax=348nm,时间60min,温度60℃,硼砂用量2mL,四氯苯醌用量2mL,水为溶剂。在0.3~1.5mol/L赖氨酸范围内测定,相对标准偏差在0.41%以内,相对误差为0.53%~1.39%,结果令人满意。
【关键词】赖氨酸;四氯苯醌;荷移反应;分光光度法中图分类号:TS201.2
文献标识码:A
文章编号:1673-7199(2010)05-0122-04
供试药品:赖氨酸,生化试剂,层析纯,上海丽珠东风生物技术有限公司;四氯苯醌,国药集团化学试剂有限公司;四硼酸钠,北京化工厂;无水乙醇、甲醇、丙酮、乙腈、二甲亚砜,天津科密欧化学试剂有限公司;所用试剂除赖氨酸外均为分析纯,试验用水为蒸馏水。
荷移反应是指由富电子和缺电子物质形成电荷转移络合物的反应,基于某些物质生成的荷移络合物具有特定的颜色、最大吸收波长等特性,可测定物质的含量。由于此法简便、快速,试剂稳定,重现性好,因此在食品及药物分析上有广泛的应用前景。
荷移分光光度法是在量子化学的基础上提出的荷移理论发展起来的一种定量分析方法。近年来,国内外用此方法对氨基酸和磺胺类药物含量进行分析的报道很多。
赖氨酸是人体中必不可少的八大必需氨基酸之一,在食品中的含量常常被作为衡量食品营养价值的主要指标。因此,快速、简便地分析食品中赖氨酸的含量受到了广泛的重视。目前测定赖氨酸含量的方法主要有电位滴定法、高效液相色谱法、荧光法、示波极谱法、脉冲伏安法、分光光度法等。但利用四氯苯醌与赖氨酸的荷移反应测定赖氨酸含量的方法未见报道。
1.21.2.1
方法
试剂配制方法
1.5×10-3mol/L赖氨酸标准溶液:称取0.0230g赖氨酸于烧杯中用水溶解后移入100mL容量瓶中以水定容。
3.0×10-3mol/L四氯苯醌-乙醇溶液:准确称取0.0735g四氯苯醌(简称TCBQ,下同)粉末在干燥烧杯中用乙醇溶解后移入100mL容量瓶中,用无水乙醇定容。
0.1mol/L硼砂溶液:准确称取9.5357g四硼酸钠,用水溶解后移入250mL容量瓶中定容。
1
1.1
材料与方法
材料
供试仪器:TU-1800紫外分光光度计,北京普析
1.2.21.2.2.1
研究方法
最佳定容溶剂的确定
分别精密吸取1mL赖氨酸标准溶液于6支25mL
比色管中,各加入2mL硼砂溶液,再加入2mLTCBQ溶液,分别用蒸馏水、甲醇、乙醇、丙酮、乙腈和二甲亚砜溶液稀释至25mL刻度处,摇匀,置于60℃水浴中加热60min后,冷却至室温,以试剂空白为参比,
通用仪器有限责任公司;HH-4恒温水浴锅,金坛市杰瑞尔电器有限公司;79-1磁力搅拌器,江苏正基仪器有限公司。
122
用1cm石英比色皿在348nm处测定其吸光度值。
(溶
剂水的参比:2mL硼砂+2mL无水乙醇,用水定容至25mL的溶液。溶剂甲醇的参比:2mL硼砂+2mL无水乙醇,用甲醇定容至25mL的溶液。)
1.2.2.2最佳吸收波长的确定
精密吸取1mL赖氨酸标准溶液于25mL比色管中,加入2mL硼砂溶液,再加入2mLTCBQ溶液,用蒸馏水稀释至25mL刻度处,摇匀,置于60℃水浴中加热
60min后,冷却至室温,以试剂空白做参比(2mL硼砂、2mL无水乙醇,水定容至25mL的溶液,下同),用1cm石英比色皿于200~600nm扫描荷移络合物(用加入2mL硼砂、2mLTCBQ用水定容至25mL的溶液为参比)、赖氨酸、TCBQ的吸收光谱图。
1.2.2.3最佳反应时间的确定
分别精密吸取1mL赖氨酸溶液于7支25mL比色管中,各加入2mL硼砂溶液、2mLTCBQ溶液,用蒸馏水稀释至25mL刻度处,摇匀,置于60℃水浴中分别加热30、40、50、60、70、80和90min后,取出冷却至室温,以试剂空白为参比,用1cm石英比色皿在
348nm处测定其吸光度值。1.2.2.4
最佳反应温度的确定
分别精密吸取1mL赖氨酸溶液于5支25mL比色管中,各加入2mL硼砂溶液、2mLTCBQ溶液,用蒸馏水稀释至25mL刻度,摇匀,分别置于30、40、50、
60、70℃水浴中加热60min后,冷却至室温,以试剂空白为参比,用1cm比色皿在348nm处测定其吸光度值。
1.2.2.5最佳硼砂用量的确定
分别精密吸取1mL赖氨酸溶液于6支25mL比色管中,分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL硼砂溶液,再加入2mLTCBQ溶液,用蒸馏水稀释至25mL刻度处,摇匀,置于60℃水浴中加热60min后,冷却至室温,以试剂空白为参比,用1cm比色皿在348nm处测定其吸光度值。
1.2.2.6荷移试剂用量的研究方法
分别精密吸取1mL赖氨酸溶液、2.0mL硼砂溶液于6支25mL比色管中,分别加入0.5、0.8、1.0、1.5、
2.、2.5mLTCBQ溶液,用蒸馏水稀释至25mL刻度处,摇匀,置于60℃水浴中加热60min后,冷却至室温,以试剂空白为参比,用1cm比色皿在348nm处测定其吸光度值。
>>
CEREALSANDOILSPROCESSING
处;400~600nm之间,赖氨酸与TCBQ形成的荷移络合物吸收很小,该络合物在348nm处出现最高吸收峰。此时,赖氨酸和TCBQ对络合物的干扰均较小,所以最佳吸收波长确定为348nm。
2.1.3不同反应时间对荷移络合物吸光度值的影响
图2反应时间与吸光度值的关系
由图2可知:在30~60min之间吸光度呈大幅度增长趋势,60min后吸光度值变化趋于平缓,说明60min内反应基本完全。因此,确定60min为最佳反应时间。
2.1.4不同反应温度对荷移络合物吸光度值的影响
图3
反应温度与吸光度值的关系
由图3可知:随着温度的升高,荷移络合物的吸光度值先增长后略微下降,温度为60℃时,吸光度值最大,故选择荷移反应温度为60℃。
2.1.5不同硼砂用量对荷移络合物吸光度值的影响
由图4可知:随着硼砂用量的增加,荷移反应生
图4硼砂用量与吸光度的关系124
成络合物的吸光度值呈现先增大后减小的,在硼砂用量为2mL时,吸光度值达到最大。所以选用硼砂量为
2mL,此时测得的pH为9.67。2.1.6
不同TCBQ用量对荷移络合物吸光度值的影响
图5TCBQ
用量与荷移络合物吸光度值的关系
由图5可知:随着TCBQ用量的增加,吸光度值呈增加趋势,在2mL后趋于平缓,说明添加2mLTCBQ可使反应进行比较完全,因此TCBQ用量选用2mL。
2.2工作曲线
按照试验测定的最佳条件,测定赖氨酸浓度与吸
光度的关系,得到工作曲线如图6所示。
图6
工作曲线
由图6可知:工作曲线方程为A=0.575C+0.0269(C:10-3mol/L),其相关系数R2=0.996。
2.3方法重现性的测定
分别取0.4mL标准溶液(相当于0.6×10-3mol/L)、
0.8mL标准溶液(相当于1.2×10-3mol/L),按照最佳试验条件测定得吸光度值,查工作曲线得赖氨酸含量见表2
。
表2
方法重现性
赖氨酸量(10-3mol/L)
相对误差
RSD标准品
测定值
123(%)
(%)
0.60.6060.6080.6111.390.411.2
1.209
1.207
1.203
0.53
0.25
<<<
CEREALSANDOILSPROCESSING
食品工程·技术
HPLC法测定红曲诱变菌种中MonacolinK含量
李永丽
雷
恒
王红磊
汪芳安
(武汉工业学院食品学院)
【摘要】红曲菌种经微波、紫外线、氯化锂诱变后,通过固态发酵生产MonacolinK。采用高
效液相色谱法检测发酵产物中酸型和内酯型MonacolinK含量。在一定条件下,将标准内酯型
MonacolinK转化为酸型MonacolinK,从而可以对固态发酵红曲中酸型和内酯型同时进行定量测
定,且对萃取溶剂、萃取条件、流动相配比进行选择。此法前处理简单,适用于大量诱变菌株的测定筛选,准确度高。
【关键词】诱变;高效液相色谱;酸型MonacolinK中图分类号:TS202.3
文献标识码:
A文章编号:1673-7199(2010)05-0125-04
红曲是我国传统发酵产品,广泛应用于食品、天然色素、中药等领域。自红曲的降脂活性物质Mona-
colinK被发现后,人们对功能红曲的生产和功能物质的检测进行了一系列的研究。红曲霉固态发酵产品中,
由表2可知:当赖氨酸浓度为0.600×10-3mol/L时,相对误差为1.39%,RSD=0.41%;当浓度为1.20×
太原师范学院学报:自然科学版,2004,3(3):60~63.[2]徐莉英,蔡蕍,王晓燕,等.甲磺酸培氟沙星的荷移反应荧光光
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[4]焦德权,刘二保.L-苏氨酸与四氯对苯醌的荷移反应[J].理化
检验:化学分册,2007,43(3):196~200.
10-3mol/L时,相对误差为0.53%,RSD=0.25%。由方法的RSD值和相对误差可知:该试验方法的重现性较好,因此该方法用于赖氨酸含量测定的结果比较可靠。
3结论
测定赖氨酸的荷移分光光度法的最优条件为:吸
[5]任建民,刘强.赖氨酸营养研究进展[J].饲料博览,2009
(3):13~15.
[6]范爱玲,李省云,朱金玲.分光光度法测定脯氨酸的含量[J].
太原师范学院学报:自然科学版,2004,3(4):48~50.收稿日期:2009-12-03
作者简介:南海娟(1974—),女,河南灵宝人,试验师,硕士研究生,研究方向果蔬贮藏加工与食品安全。通信地址:
(453003)河南省新乡市华兰大道东段
取1mL含赖氨酸的样品溶液于25mL比色管中,加入
2mL硼砂溶液,再加入2mLTCBQ溶液,分别用蒸馏水稀释至25mL刻度处,摇匀,置于60℃水浴中加热
60min后,冷却至室温,以试剂空白为参比,用1cm石英比色皿在348nm处测定其吸光度值,根据工作曲线
A=0.575C+0.0269(C:10-3mol/L),得到赖氨酸含量。该
方法在0.3×10-3~1.5×10-3mol/L赖氨酸含量的范围内测定食品中赖氨酸含量结果比较可靠。
参考文献
[1]
李省云,杨毅萍,张丽娜.甘氨酸的荷移分光光度法测定[J].
125
范文四:小麦籽粒赖氨酸含量的测定与评价
小麦籽粒赖氨酸含量的测定与评价
372江苏农业学报(JiangsuofAgr.Sci.),2009,25(2):372,377
小麦籽粒赖氨酸含量的测定与评价
余桂红,吴勇华,马鸿翔,周淼平,陆维忠
(江苏省农业科学院农业生物技术研究所,江苏南京210014)
摘要:利用茚三酮比色法测定100个不同类型小麦籽粒的赖氨酸含量.结果表
明:100个小麦品种(系)籽粒
的赖氨酸含量平均值为0.40%,中等及以上赖氨酸含量的品种(系)有53个,占全部
供试品种(系)的53%,其中宁
麦9号,宁0078,宁9—18,宁96048,扬麦13号,910084,安92484,渝98767等8个品
种(系)的赖氨酸含量最高,占
全部供试品种的8%.
关键词:小麦;赖氨酸含量
中图分类号:$512.101文献标识码:A文章编号:1000A,A,A.O(2009)02-0372-06
DeterminationandEvaluationofLysineContentinHarvested
WheatGrain
YUGui—hong,WUYong—hua,MAHong-xiang,ZHOUMiao-ping,LUWei—zhong
(1nstit~eofBiotechnology,JiangsuAcademyofAgriculturalSciences,ng210014,China) Abstract:Itwasconductedtodeterminethelysinecontentofharvestedgrainin100differentvarietiesorlinesin
wheatbyninhydrincolorimetrymethod.Theresultshowedthattheaveragelysinecontentofthe100testedvarietiesorlines
was0.40%.Thenumberofvarietiesorlineswithmiddleandhighlysinecontentwas53.whichaccountedfor53%ofall
testedvarietiesorlines.Eightvarietiesorlines(Ningmai9,Ning0078,Ning9-18,Ning96048,Yangmai13,910084,
An92484.Yu98767)hadthehighestlysinecontent,accountedfor8%ofalltestedvarietiesorli
nes.
Keywords:wheat:lysinecontent
赖氨酸是人和动物必需的一种氨基酸,人体和 动物不能自身合成,必须从食物中直接摄取.缺乏 赖氨酸,人和动物不仅不能正常发育,还会造成机体 代谢紊乱,引发一些生理机能性疾病.小麦是世界 上重要的粮食作物,全世界约有35%,40%的人口 以小麦作为主要粮食?j.小麦不仅供给人们热量, 而且也是蛋白质的重要来源.小麦的蛋白质为完全 蛋白质,但其氨基酸的组成不平衡,尤其是小麦籽粒 赖氨酸含量较低,平均在0.44%左右,仅能满足人 体所需的45%左右,为营养品质中第一限制性必需 氨基酸.因此,提高小麦赖氨酸含量从而改良小麦 蛋白质品质是小麦品质育种的重要目标.而高赖氨 酸品种的培育有赖于优质种质资源的发掘和利用. 目前这方面的研究在北方麦区有少量的报道口, 但在南方麦区则未见报道.小麦籽粒氨基酸含量不 仅存在基因型间的差异,而且在很大程度上受生态 环境条件的影响,因此在南方栽培气候条件下, 测定南方小麦品种(系)及其他来源的品种(系)的 籽粒赖氨酸含量,筛选出南方气候条件下的高赖氨 酸小麦品种(系),可为小麦优质育种提供理论 依据
收稿日期:2008-09—11
基金项目:江苏省自然科学基金项目(BK2006l58)1材料与方法
作者简介:余桂红(1971一),女,湖北随州人,博士,副研究员,从事小
麦遗传育种研究.(T.1)025443902931.1供试材料 通讯作者:马鸿翔,(Te1)02584390300;(E-mail)mahx@jaas.ac.cn2005年将100个不
同类型的小麦品种种植于
余桂红等:小麦籽粒赖氨酸含量的测定与评价
江苏省农业科学院农业生物技术研究所试验地,编号见表1. 2006年6月收获种子用于试验.供试材料名称及
表1供试小麦品种(系)编号与名称
Table1NumberandnameofthetestedvarietiesOrlines
编号品种(系)来源编号品种(系)来源编号品种(系)来源编号品种(系)来源 1苏麦3号126安农8455151烟2801276OlC_783 2扬麦13号127安92484152烟辐1882770lC.823 3扬158l28DNS114-4153莱州18727801C一853
4扬麦9号129DNS23-2l54翻山小麦27901C_913 5扬014130华农91-1466155渝98767280O1C.1053 6扬辐9708131鄂麦11号156西南02321281O1C_013 7扬09132北糯1号257小偃784282O1C_053 8扬87-88133北糯2号258小偃9366283OlC_083 9扬49—11134北糯3号259龙408328401C一1073
lO扬1117135豫麦66优系260矮丰662850lC.113 11扬麦11136漯麦16261涡010328601C一123
l2扬0-126137郑9405262连9791-42870lC一133
13扬015138郑9405(2)263邯郸6172288Hl824 l4宁麦9号139兰考9O(6)21-7264陕610289Renan4 15宁麦8号14O兰考90(7)21-7265节燕普1—1290Tiszataj4 16宁9—1814l兰考9718266节燕普98-7291CI—l26334 17宁0078142兰考906267丰优94206292阿夫4
18宁96048143泰山9818268OlC一14393SW81884 19生选3号144泰山9819269OlC.15394ND0ol4 2O南农2123l45泰山0082700lC.11O39525R184 21南农9981146泰山241271O1C.1l1396L43365 22镇02168l47泰山4552720lC.173979609—15
23淮972l48泰山149273OlC_25398Baearlowa.t885
24H35l49泰山4642740lC_27399IA4.10245 2591O08415O泰山O1827501C_7331O054405 :1代表来源于长江中下游麦区(包括江苏省,安徽省和湖北省);2代表来源于国内
其他麦区;3代表来源于国际小麦玉米改良中心;4代表 来源于欧洲和美洲其他地区;5代表来源不详.
1.2试验方法
采用茚三酮比色法测定赖氨酸含量,即参照吴
凤山和苏正淑的方法并稍加修改;反应体系采
用柠檬酸.柠檬酸钠缓冲液;还原剂采用氯化亚锡. 1.2.1标准曲线的制作取7只洁净带塞试管,编
号,分别加入0ml,0.1ml,0.2ml,0.4ml,0.6ml,
0.8ml,1.0ml的50g/ml亮氨酸标准液,然后依
次加入2.0ml,1.9ml,1.8ml,1.6ml,1.4ml,1.2
ml,1.0ml的蒸馏水,混匀后再向每支试管内加入2 ml4%碳酸钠溶液和2ml0.02g/ml茚三酮试剂,摇
匀后塞紧管塞,80?保温30rain,用冷水冷却试管
至室温;再向每支试管内加95%乙醇4.0ml,混匀
后于530nm处测吸光度值A,以所得吸光度值为
纵座标,亮氨酸浓度为横座标,绘制标准曲线.
1.2.2样品测定称取烘干,粉碎的小麦粉0.1g, 将样品置于研钵中,加入1g石英砂,4ml4%碳酸
374江苏农业学报2009年第25卷第2期
钠溶液,充分研磨5min.将匀浆液转移至50ml锥
形瓶,用6ml4%碳酸钠溶液,6ml蒸馏水分两次洗
涤研钵,一起并人锥形瓶,摇匀.将提取液用滤纸过
滤,收集滤液.将滤液用蒸馏水定容至20ml,作为
样品待测液.吸取4ml样品待测样加入洁净的试
管中,然后加入2ml0.02g/ml茚三酮试剂,摇匀后
塞紧管塞,80?保温30min,用冷水冷却试管至室
温,再向试管内加95%乙醇4.0ml,混匀后于530 nm处测吸光度值A,重复2次.计算赖氨酸的含 量.
赖氨酸含量:一C
W
上式中,:由标准曲线算得的亮氨酸的数值 (mg);W:样品质量(mg);C:样品中游离氨基酸量, 表2方差分析表
Table2Resultofvarianceanalysis
小麦籽粒中游离氨基酸含量约为0.05%. 2结果
2.1100个小麦品种(系)籽粒的赖氨酸含量 测定结果显示:100个小麦品种(系)籽粒的赖 氨酸含量平均值为0.40%,高于或等于平均值的有 53个品种,低于平均值的有47个品种.赖氨酸含 量最低的为Bacanowa.t88,含量为0.24%,最高的 为扬麦13号,含量为0.57%,其余品种(系)的赖氨 酸含量介于0.24%与0.57%之间.用MicrosoftOf-
ficeExcel2003进行方差分析,结果(表2)表明品种 之问赖氨酸含量差异显着(P<0.01),重复之间无 显着差异.
一达到0.01显着水平.
2.2品种(系)赖氨酸含量的评价
以籽粒赖氨酸含量大于0.5%为高赖氨酸含量 品种;0.4%,0.5%为中等赖氨酸含量品种; 0.3%,0.4%为低赖氨酸含量品种;小于0.3%的 为极低赖氨酸含量品种.根据上述评价级别,在 100份小麦品种(系)中,宁麦9号,910084,安 92484,宁0078,渝98767,宁9—18,宁96048,扬麦l3
号共8个品种的赖氨酸含量高于0.5%(表3),为高 赖氨酸含量品种,占参试品种总数的8%;赖氨酸含 表38个高赖氨酸品种(系)籽粒的赖氨酸含量 Table3Lysinecontentof8varietiesorlinesinwheatwithhighly.
sinecontent
品种(系)赖量品种(系)赖量
扬麦13号0.57渝987670.54 宁麦9号0.51宁9.180.55
安924840.53宁960480.56
宁00780.549100840.52 量在0.4%,0.5%的品种45份,占总数的45%;赖 氨酸含量在0.3%,0.4%的品种44份,占总数的 44%;赖氨酸含量低于0.3%的品种3份,仅占总数 的3%(表4).
2.3不同来源品种(系)的赖氨酸含量比较 图1示出不同地区来源小麦品种(系)籽粒赖 氨酸含量的级别和比例.在100份测定材料中,第 1组材料来源于长江中下游麦区(包括江苏省,安徽 省,湖北省),共31份,占鉴定材料总数的3l%,赖 氨酸含量级别分属3种类型即高,中,低,其所占比 例分别为22.58%,41.94%和35.48%,无极低赖氨 酸含量材料;第2组来源于国内其他麦区的材料共 36份,占鉴定材料总数的36%,有4种赖氨酸含量 级别即高,中,低和极低,其所占比例分别为 2.78%,52.78%,41.67%和2.78%;第3组材料来 源于国际小麦玉米改良中心,共20份,占鉴定材料 总数的20%,其中无高赖氨酸含量和极低赖氨酸含 量类型,中,低类型比例分别为30.00%和70.00%; 余桂红等:小麦籽粒赖氨酸含量的测定与评价
第4组来源于欧洲和美洲的材料,共8份,占鉴定材
料总数的8%,其中无高赖氨酸含量和极低赖氨酸
含量类型,中,低类型比例分别为62.5%和37.5%;
第5组来源不详的材料,共5份,无高赖氨酸含量类
型,中,低和极低的比例分别为40.00%,20.00%和
表4参试小麦品种(系)籽粒赖氨酸含量的评价
Table4Evaluationoflysinecontentgradeinharvestedwheatgrain
40.00%.8个高赖氨酸含量品种中,来源于第1组
长江中下游麦区的有7份,来自国内其他麦区的有
l份(渝98767),其来源地为长江上游地区的重庆
市,总之8个高赖氨酸含量品种均来自长江流域的
小麦种植区.
赖氨酸含量级别材料名称
高宁麦9号,910084,安92484,宁0078,渝98767,宁918,宁96048,扬麦l3号 中Hl82,南农2123,兰考90(7)21_7,小偃9366,莱州187,扬幅9708,25R18,扬87-88,泰山149,01C-08,郑9405(2),郑
9405,小偃784,北糯1号,烟辐188,陕610,IA336,叭C一15,泰山455,扬1117,北糯2号,矮丰66,5440,南农9981,
01C-27,兰考906,扬麦9号,叭C一85,安农8455,Tiszataj,丰优94206,01C-73,淮972,O1C-O1,生选3号,华农91—
1466,Renan,北糯3号,苏麦3号,节燕普98-7,泰山008,节燕普1.1,SW8188,扬麦11号,鄂麦11号
低阿夫,O1C一14,OIC-82,豫麦66优系,泰山241,扬014,ND001,镇02168,龙4083,泰山9818,H35,扬0—126,兰考9718,
连9791-4,01C一11,西南02321,宁麦8号,O1C一12,漯麦16,泰山98l9,01C一107,CI-12633,DNS23-2,I44—1024,兰考
90(6)21-7,涡0103,扬09,0lC-13,扬015,叭C一111,扬158,DNS1l44,翻山小麦,泰山018,01C-25,01C-91,O1C-05,烟
2801,O1C-78,01C一110,01C一17,泰山464,扬49.11,01C.105
极低~acanow&t88,9609一l,邯郸6172
80
7O
60
50
40
丑30
2O
lO
0一高(>0
.
5%)中(0-4%,O.5%)低(03%,0.4%)极低(<0.3%) 赖氨酸含量类型
臼第l组:来源于长江中下游麦区(包括江苏省,安徽省,湖北省);四第2组:来源于国
内其它麦区;
皿第3组:来源于国际小麦玉米改良中心;田第4组:来源于欧洲和美洲地区;
囹第5组:来源不详
图1不同地区来源小麦品种(系)籽粒赖氨酸含量级别的分布和比例 Fig.1Thedistributionandproportionoflysinecontentgradeofwheatvarietiesorlinesfromdi
fferentlocations
3讨论
3.1赖氨酸的测定方法
目前国内外谷物赖氨酸含量测定主要采用化学
分析法和仪器分析法.化学分析法主要有染料结合 赖氨酸法(DBL法,GB4801--84)和茚三酮比色法. 仪器分析法主要有氨基酸分析仪分析法和近红外光 谱分析法.
染料结合法是我国于1984年发布的测定谷物
籽粒赖氨酸含量的国家标准法.即《GB4801--84
谷物籽粒赖氨酸测定法——染料结合赖氨酸(DBL) 法》,其基本原理是在较强酸性条件下(pH值2, 3),样品蛋白质的碱性氨基酸(赖氨酸,组氨酸,精 氨酸)以阳离子状态存在,可与偶氮磺酸染料酸性 橙212结合,生成不溶性的络合物.DBL法重复性 好,准确度高,但需要配套蛋白质分析仪或赖氨酸分 析仪,这类分析仪器由于使用率低,使用范围窄,操 作易出故障等原因,现在已少有厂家生产,并且目 前市场上极难购买到DBL法专用的酸性橙212染 料试剂,上述两点限制了DBL法的使用. 氨基酸分析仪法:氨基酸分析仪的核心是离子 交换层析柱,层析柱内填充有磺酸型强酸阳离子交 换树脂(多数为Na型).蛋白质样品经盐酸加热 水解,成为游离氨基酸,在酸性缓冲液条件下,各种 江苏农业学报2009年第25卷第2期
游离氨基酸带正电荷,经离子交换层析柱逐步被洗 脱分离l9j.校准液中氨基酸的处理,试剂纯度,缓 冲液和仪器分析条件等均能影响分析结果的准 确性.
近红外光谱分析法:近红外光是指波长在780, 2500nm范围内的红光.近红外技术是依某一化 学成分对近红外区光谱的吸收特性而进行的定性定 量分析.但是近红外光谱分析法不能直接测量谷物 中赖氨酸含量,必须进行定标.即选择1组至少50 份以上有代表性的样品,采用实验室标准的化学分 析方法如氨基酸自动分析仪法,对样品进行化学成 分测定,获得代表性样品的赖氨酸准确数据,建立 定标方程和数学模型"j.由于近红外分析仪价 格昂贵,一般实验室难以配备,同时计算过程过于复
杂,限制了该方法的应用.
本试验所用茚三酮比色法的原理是蛋白质中赖 氨酸的游离s.氨基与茚三酮(水合)试剂加热反 应,发生氨化,脱氨,脱羧作用,生成蓝紫色物质, 反应后颜色的深浅与蛋白质中赖氨酸的含量在一定 范围内呈线性关系.亮氨酸与赖氨酸所含碳原子数 目相同,且与肽链中的赖氨酸残基一样含有1个游 离氨基,但价格较赖氨酸便宜,稳定性好,所以通常 用亮氨酸配制标准溶液,.茚三酮比色法不需要 复杂的仪器设备,仅需要1台价格便宜的可见光分 光光度仪,一般的实验室或育种单位均可配备.此 外,该方法简便,快速,准确,是一种较为理想的在育 种工作中推广的方法.
3.2小麦高赖氨酸种质的发掘
小麦是全世界植物性蛋白的一个重要来源,小 麦营养价值的高低直接关系到人们的身体健康.赖 氨酸是蛋白质的第一限制氨基酸,赖氨酸的含量是 判定小麦品种是否是优质品种的一个重要指标.山 西省农业科学院的张惠叶和徐兆飞(1992)对1458 份来自国内外的小麦种质资源进行了品质分析,筛 选出20份蛋白质含量在17%以上,赖氨酸含量达 0.45%以上的优质资源_2J.甘肃省农业科学院田 世龙(1998)对412份春小麦种质资源进行了营养 品质分析,筛选出赖氨酸含量在0.55%上的优质资 源42份.段敏等(1997)对陕西2554份小麦品 种资源的籽粒蛋白质和赖氨酸含量进行了分析,筛 选出高赖氨酸品种202份?.张克厚和梁权 (1995)选育出适宜于甘肃种植的高赖氨酸小麦新 品种银春5号,其赖氨酸含量高达0.52%l】.甘肃
定西地区旱作农业科研推广中心王玉芳和**程 (2003)选育出高赖氨酸春小麦新品系8540,其籽粒 赖氨酸含量为0.51%16].从区域和生态分布来看, 高赖氨酸种质资源的筛选工作主要集中在北方麦 区,而在甘肃省甚至培育出了高赖氨酸的新品种和 新品系.而在长江中下游等南方麦区生态条件下还 没有这方面的研究,远远滞后于北方麦区.本试验 对100个来自国内外的小麦品种(系)的赖氨酸含 量进行了测定,旨在为南方小麦生产和育种提供具 有高赖氨酸含量的品种和育种亲本,同时弥补南方 麦区在赖氨酸品质研究方面的空白.从试验结果来 看,100个品种的赖氨酸含量平均水平为0.40%,高 于或等于平均值的有53个品种,低于平均值的有 47个品种,其中赖氨酸含量最低为0.24%,最高则 达到0.57%,筛选出宁麦9号,宁0078,宁9一l8,宁 96048,扬麦l3号,910084,安92484,渝98767计8 个高赖氨酸含量的小麦品种(系).除渝98767来 自长江上游地区的重庆市以外,其余7个材料均来 自长江中下游麦区的江苏省和安徽省,因此,推荐这 几个品种(系)作为南方麦区赖氨酸含量优良的育 种材料.宁麦9号和扬麦l3号是江苏省近年来审 定的两个优良品种,可在生产中作为高赖氨酸优良 品质的品种直接推广应用,而宁0078,宁9.18,宁 96048,910084和安92484则可以作为高赖氨酸育 种亲本在南方麦区育种工作中加以利用,以求培育 出更多的适合长江中下游麦区生态条件下种植的高 赖氨酸小麦新品种.,
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范文五:谷物中赖氨酸含量测定方法的探析
谷物中赖氨酸含量测定方法的探析 第27卷第5期
2006年10月
河南工业大学(自然科学版)
JournalofHenanUniversityofTechnology(NaturalScienceEdition)
Vo1.27,No.5
Oct.2006
文章编号:1673—2383(2006)05--0066-02 谷物中赖氨酸含量测定方法的探析
李桂玲,李欢庆,刘从彬
(河南工业大学生物工程学院,河南郑州450052)
摘要:在检测小麦中赖氨酸的含量时,用异亮氨酸代替亮氨酸作标准曲线.结果表明:适当延长
加热时间,在556nm处异亮氨酸的吸光值比530nm处亮氨酸要稍高,异亮氨酸与茚三酮反应
产生的颜色比亮氨酸要更明显,可以用异亮氨酸做标准曲线来检测小麦中赖氨酸的含量同时
得出,脱脂面粉比普通面粉的赖氨酸含量要稍高,脱脂与否对小麦中赖氨酸含量的测定有一定
的影响.
关键词:赖氨酸;分光光度法;异亮氨酸
中图分类号:TS207.3文献标识码:B
O前言
赖氨酸是各种谷物,食品中重要营养成分之
一
,是人体需要的8种必需氨基酸中最重要的一
种,所以,也是衡量食品质量及改良谷物品种的主
要指标之一.小麦中含有各种必需氨基酸,但由于 小麦中赖氨酸,苏氨酸和异亮氨酸含量较低,导致 氨基酸组成不平衡,它们为小麦的限制性氨基 酸l1J.因此,培育高赖氨酸含量的小麦品种,提高 小麦的营养价值,具有十分重要的意义,在这项工 作中,赖氨酸含量测定的方法的选择就变得尤为 重要[21.
本文中主要探讨了分光光度法快速检测小麦 中赖氨酸的含量.蛋白质中的赖氨酸具有一个游 离的,一NH2,它与茚三酮起颜色反应呈蓝紫色, 颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性 关系.传统分光光度法检测赖氨酸是用亮氨酸作 标准曲线,亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目是相同 的,而且仅有一个氨基(a—NH'),相当于蛋白质中 赖氨酸残基上的,一NH2,因此可以用亮氨酸做标 准进行比较.异亮氨酸作为亮氨酸的同分异构体, 能否作为小麦中赖氨酸测定的标准,目前尚缺少 报导,本文的核心工作就针对这一问题进行,是为 谷物中赖氨酸含量的测定方法提供新的思路. 1材料与方法
1.1材料
本实验所用面粉为市场所售的普通面粉 1.2实验方法
1.2.1样品的选择
选取无杂质干净的普通小麦粉.
1.2.2测定方法
1.2.2.1标准曲线的制作
取7支洁净带塞试管分别编号,按表1分别 向每支试管中添加试剂,再向以上每支试管内加
1.00mL茚三酮试剂,摇匀后塞紧管塞,置沸水浴 加热5min,用冷水冷却试管至室温;再向每支试 管内加50%乙醇8.0mL,混匀后用1cm比色皿
于530nm处测光度值,以所得吸光度值为纵坐
标,亮氨酸浓度为横坐标[.
以异亮氨酸代替亮氨酸制作标准曲线,方法
同上,在556nm-4J处测定吸光值.
表1标准曲线的制作
试管编号0123456
亮氨酸标准液/mL00.10.20.30,40.50.6 水/mL1.00.90.80.70,60.50.4 浓度/(ttg.L)0501001502002503O0 收稿日期:2005一29
1?2.2?2样品的测定
作者简介:李桂玲(1974一),女,河南沁阳人'讲师,硕士,研究方向分别称取100mg脱
脂小麦粉和未脱脂小麦
为生物技术.粉,分别置于250mL的带塞三角瓶中,再加300
第5期李桂玲等:谷物中赖氨酸含量测定方法的探析67 mg石英砂和50mL蒸馏水,在室温下置于康氏振 荡器上振荡25min,然后过滤,取1mL滤液于带
塞试管中,按上述方法进行处理并测定吸光值. 1.2.2.3结果计算
样品中赖氨酸含量/%=丛釜圭×
样液稀释倍数X10X100
由于亮氨酸/异亮氨酸与赖氨酸的相对分子
质量不相同,故用亮氨酸/异亮氨酸标准曲线计算 赖氨酸时,需要乘以校正系数1.1515_5J,同时还 应从最后的计算结果中减去游离的氨基酸含量.
2结果与分析
根据实验中测得的各组亮氨酸标准曲线与异 亮氨酸标准曲线的吸光值,绘制标准曲线(图1).由 图1看出,用亮氨酸作标准曲线与异亮氨酸作标准 曲线测得吸光值,回归方程均为y:0.005x,表明可 以用异亮氨酸作标准来测定小麦中赖氨酸的含量. 另外,由图1可见,用异亮氨酸作标准所得的吸光 值比用亮氨酸作标准曲线所得的吸光值要高. 异亮氨酸
亮氨酸
U5UlUUl3U2UU23UjUU 氨基酸浓度,(mg?L-)
图1亮氨酸(异亮氨酸)标准曲线
对亮氨酸和异亮氨酸的吸光值的差异进行了 显着性t检验(表2).结果显示,除溶液4的吸光 值未达到显着水平,其余溶液的吸光值均达到显 着水平和极显着水平.
表2异亮氨酸和亮氨酸吸光值的t检验结果 溶液123456
l值28.095—3.304—8.283—0.465—6.716—3.632 *为a=0.05显着水平;**为口=0+01显着水平 脱脂面粉与普通面粉在小麦赖氨酸测量中的 吸光值及赖氨酸含量见表3.由表3可以看出,脱 脂与否对小麦赖氨酸测定有一定影响,脱脂面粉 的赖氨酸含量比普通面粉要稍高.
表3脱脂小麦粉和普通小麦粉的赖氨酸含量 3讨论
谷物中赖氨酸含量的测定方法有很多种,染 料结合法(DBL法国标GB4801—4),近红外光谱
分析法,氨基酸分析仪法,茚三酮比色法等.在这 几种方法中,茚三酮比色法(分光光度法)测定氨 基酸简便易行,多用于学生实验课教学_2J. 传统的分光光度法检测赖氨酸是用亮氨酸作 标准曲线,亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目是相同 的,而且仅有一个氨基(a—NH2),相当于蛋白质中 赖氨酸残基上的,一NH2,因此可以用亮氨酸做标 准进行比较.
实验结果表明,在小麦的赖氨酸含量测量中, 可以用异亮氨酸代替亮氨酸作标准曲线.脱lid'/J,
麦粉和普通小麦粉的赖氨酸含量的结果表明,面 粉中赖氨酸含量用两种方法测定结果一致;脱脂 与否对小麦中赖氨酸含量测定有一定影响,脱脂 面粉的赖氨酸含量比普通面粉稍高,但脱脂与否 究竟是影响小麦中赖氨酸的测定过程,还是影响 小麦中赖氨酸的含量有待进一步的研究. 参考文献:
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80河南工业大学(自然科学版)第27卷
THEREVIEWONTHERESEARCHOFUPID
PEROXIDATIONANDDNADAMAGE
ZUOYu,MAXue—ping,XIEWEN—lei,GONGYan—zhong
(SchoolofChemistryandChemicalEngineering,HenanUniversityofTechnology,Zhengzhou450052,China)
Abstract:Lipidperoxidationisprobablythemostextensivelyinvestigatedprocessinducedbyfreeradicals.Itcan
generatefreeradicalintermediatesandelectrophilicaldehydesastheprincipalgenotoxicants.Thesetoxicsubstances
mayleadtodiseases,mutagenesisandaging.Peroxidelipidcangiverisetofunctionalandmorphologicdisturbances
incellsanddevelopanumberoftissueinjuries.EndogenousDNAdamagethatmaycontributesignificantlytocan—
cerandothergeneticdiseaseslinkedtolifestyleanddietaryfactorsinducedbylipidperoxidationisbelievedtoplay
acriticalroleinhumansinavarietyofpathologicalconditions.primarilyDNAbasemodificationandDNAstrand
breaks.Theincorporationofantioxidantsiseffectivelyhelpfulinretardingtheoxidationoflipids.Alargebodyof
theliteraturesupportsthenotionthatantioxidantsareradioprotectorsandplayanimportantroleinpreventingmany
humandiseases.InthisarticlethecurrentunderstandingandrecentprogressinthelipidperoxidationandDNA
damagearesummarized.Abriefoverviewoftheinhibitingeffectsofantioxidantsisintroduced.
Keywords:lipidperoxidation;freeradicals;DNA;damage;naturalantioxidants ':'?0??:,????:,??:,?0?0?0??:,??:,??:,?',?0?0?0??0??:,??:,?o-0
?0?0?0??:,??:,??0?0?0?0?0?0?0??:,??:,?0'0?0?0?0?0?':''0
?<)?0?0?0?
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STUDYONDETERMINATIONOFLYSINECONTENTINCEREAL
LIGui—ling,LIHuan—qing,LIUCong-bin
(SchoolofBioengineering,HenanUniversityofTechnology,Zhengzhou450052,China) Abstract:Whiledeterminingthelysinecontentinthewheat,whethertheisoleucinecanreplaceleucinetomake
standardcurvewasstudied.Resultsshowedthatheatedtimeextendedappropriately,isoleucineabso~edlight
brighterinthe556nmthanleucineinthe530nm;thecolor,whichisoleucineisrespondedwithninhydrinpro—
duces,mustbemoreobviousthanleucine.Namely,isoleucinemaybeusedtomakethestandardcurvetodetermine
thelysinecontentinthewheat.Also,theabsorptionofdegreasingflourWashigherslightthanthatofgeneralflour,
whetherdegreasinghasthecertaininfluencetothelysinedeterminationinthewheat. Keywords:lysine;spectrophotometry;isoleucine
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