哈哈哈哈哈士奇
范文一：测定茶叶中咖啡因的含量
目的:建立HPLC法快速测定茶叶中的咖啡因。方法:甲醇+水=70+30(v/v);Agilent-C18柱(4.6 mm×300 mm,5μm);流速1.0 mL/min,柱温30?,检测波长286 nm,进样量10μL。结果:咖啡因在10~125μg/mL时,浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),加标回收率为98.40%~101.07%,最低检出限为1μg/mL,相对标准偏差RSD为0.08%~1.32%。 咖啡因又名咖啡碱,属甲基黄嘌呤化合物,具有提神醒脑等刺激中枢神经的作用。茶叶中多种药用成分的分析曾是国内外研究的热门。对于茶叶中咖啡因含量测定的常用方法有:紫外分光光谱法[ 2 - 3 ],高效液相色谱法[ 4 - 6 ]等。文献中用高效液相色谱法分析咖啡因时主要采用 C18色谱柱[ 4 - 6 ],使用 C8色谱柱的高效液相色谱法分析茶叶中成分的研究尚未见报道。笔者用 Zorbax2 C8 色谱柱的高效液相色谱法 (HPLC)测定了茶叶中的咖啡因。
1 材料与方法
1 . 1 材料 绿茶 (市售)。日本岛津高效液相色谱仪 (DGU24A脱气装置、 SPD2 10A紫外检测器、 LC2 10AD泵、 SCL2 10A系统控制器) ,甲醇、 DMF和 THF均为色谱纯,无水柠檬酸为分析纯 (香港产品) ,其他试剂均为分析纯,二次重蒸水。
1 . 2 色谱条件 色谱柱: Zorbax2C8 (4 . 6 mm × 250 . 0 mm,5 . 0μm) ;流动相: 0 . 04 mol /L柠檬酸水溶液 ? N,N2 二甲基甲酰胺 (DMF) ? 四氢呋喃 ( THF) = 90? 16? 4;流速: 1 . 00 ml /min;
柱温: 60 ?;检测波长: 280 nm;进样量: 10μl。
1 . 3 样品处理 将茶叶置于 80 ? 烘箱中烘干,然后将茶叶磨碎,准确称取一定量茶叶于 250 ml锥形瓶中,加入 100 ml沸蒸馏水,超声提取,静置过夜,取上清液定容于 500 ml容量瓶中,用 0 . 45μm有机相滤膜过滤,即得样品溶液,供 HPLC分析。称取一定量的茶叶,在 35,45 ? 水浴上用乙醇浸提 1h,蒸发浓缩得粗咖啡因,升华法纯化后作为标准品。
1 . 4 纯化咖啡因含量测定 称取升华所得咖啡因,用流动相配成一定浓度的溶液进样分析,并用归一化法计算咖啡因的纯度。
1 . 5 标准储备液的配制 准确称取升华的咖啡因 0 . 205 g,用流动相溶解并定容到 100 ml容量瓶中,摇匀。准确移取上述溶液 5 . 00 ml,用流动相定容到 50 ml容量瓶中,摇匀,即得标准储备液 (200 . 0μg/ml)。
1 . 6 标准系列溶液的配制和样品的测定 精密吸取标准储备液 0、 1 . 00、 2 . 00、 3 . 00、 4 . 00、 5 . 00 ml,分别加入 10 ml容量瓶中,用流动相定容至刻度,摇匀,即得浓度为 0、 20、 40、 60、80、 100μg/ ml的标准系列溶液,以 0 . 45μm有机相滤膜过滤。按上述色谱条件进样 10μl,以峰面积 A为纵坐标,标准品咖啡因的浓度为横坐标制标准曲线。
按上述色谱条件,注入样品溶液 10μl,测得峰面积,按标准曲线计算即得样品中咖啡因含量。
2 结果与分析
2 . 1 提取时间的选择 考察了超声提取时间 5、 10、 15、 20、25 min 5个不同时间所提取咖啡因的含量,得最佳超声提取时间为 15 min,故样品选用了超声 15 min提取咖啡因。
2 . 2 流动相的选择 分别以甲醇 ? 醋酸 = 40? 60,甲醇 ? 水 =70? 30,水? 磷酸? 乙腈? DMF = 859? 1? 120? 20, 0 . 04 mol /L柠檬酸水溶液? N,N2 二甲基
甲酰胺 (DMF) ? 四氢呋喃 ( THF) = 90? 16? 4 (体积比 )为流动相进行茶叶中成分分析,得到以 0 . 04mol /L柠檬酸水溶液 ? N,N2 二甲基甲酰胺 (DMF) ? 四氢呋喃(THF) = 90? 16? 4为流动相效果最佳。因为该测定条件下咖啡因与茶叶中的其他物质色谱峰都能很好地分开,互不干扰,咖啡因的色谱峰的保留时间为 5 . 078 min。(责任编辑:论文 2 . 3 标准曲线的线性范围 在上述测定条件下,在 20,100μg/ml的范围内,咖啡因的
浓度与色谱峰面积有很好的线性关系,其线性回归方程为: y = 27 634x - 603 . 62,回归系
数: r =0 . 999 9,标准曲线见图 1。
2 . 4 纯化咖啡因含量测定 在上述测定条件下得色谱图,如图 2所示。用归一化法
计算升华得咖啡因的纯度为97 . 41%。
2 . 5 精密度试验 按上述样品处理和测定对该方法进行精密度试验 ,咖啡因的5
次测定结果依次为71. 4、 71. 3、 71. 0、责任编辑 李菲菲 责任校对 卢瑶 安徽农业
科学, Journal of Anhui Agri . Sci . 2010, 38 (17) : 8942 - 8943? 1994-2010 China
Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.http://www.cnki.net图 1 咖啡因标准曲线Fi g . 1 Standard curve of caffei ne图 2 纯化咖啡因色谱图Fig . 2 Chromatogram of subli ma ti ng caffe i ne
图 3 样品色谱图Fig . 3 Chroma togram of s ample71 . 1、 71 . 2μg/ml,平均值为
71 . 2μg/ml。图 3为样品色谱图,变异系数 (CV)为 0 . 23%。
2 . 6 方法的回收率试验 在样品中分别加入咖啡因 20、 30、40μg,测定其回收率
(5次) ,结果见表 2。结果显示,回收率在 98 . 9%,102 . 3%。
表 2 回收率测定结果
Table 2 Results of recovery rate ( n =5)项目Item本底值? μgBackgroundvalue加标量? μgAddedamount回收率?%RecoveryrateRSD1 35 . 6 20 98 . 9 2 . 12 35 . 6 30 100 . 1 1 . 73 35 . 6 40 102 . 3 1 . 53 结论该研究建立了以 0 . 04 mol /L柠檬酸
水溶液? N,N2 二甲基甲酰胺 (DMF) ? 四氢呋喃 ( THF) = 90? 16? 4为流动相,
Zorbax2C8 (4 . 6 mm × 250 . 0 mm, 5 . 0μm)为色谱柱分析茶叶中咖啡因的高效液相色
谱法。对方法的精密度、 稳定性、 重复性和回收率进行考察,结果证明该法有良好的线性、
精密度和回收率。此法快速、 可靠、 简单,适用于茶叶和茶饮料中咖啡因含量的测定。
范文二：茶叶中咖啡因的含量
样品号 标样 1 标样 2 标样 3 标样 4 茶 叶
浓度/ mg· L-1 20.0 40.0 60.0 80.0 c
保留时间/s 3.763 3.749 3.794 3.748 3.747 表1
峰面积 1880164 3526744 5513553 6910772 3184627
1．根据咖啡因标准系列溶液的色谱峰面积，绘制咖啡因峰面积与其浓度的关系曲线。
8000000 7000000 6000000 y = 85393x + 188150 R 2 = 0.996
峰面积
5000000 4000000 3000000 2000000 1000000 0 0 20 40 60 80 100 浓度/ mg?L-1 图1 咖啡因峰面积与其浓度的关系曲线
由图 1 可知，咖啡因峰面积与浓度的关系曲线方程为：y = 85393x + 188150 （1） 2．据样品中咖啡因色谱峰的峰面积，由工作曲线计算茶叶中咖啡因含量 c。 由表 1 可知，茶叶的保留时间≈标样的保留时间，所以茶叶中含有咖啡因。且茶叶中咖 啡因的峰面积为 3184627，由式（1）得： 当 y=3184627 时，x=35.09 即：茶叶中咖啡因的含量为 c=35.09 mg· L-1
范文三：饮料中咖啡因含量的测定
?36?
第4卷第2期
200112
Beverage Industry Vol 14 No. 2
饮料工业
饮料中咖啡因含量的测定
邱莉璇
厦门市产品质量检验所 福建厦门 361004
摘要:采用HPLC 法, 以水为溶剂, 0102mol/L 醋酸铵溶液—甲醇(75:25) 为流动相
, 在254nm 波长下, 含量。回收率>97%, 与按国家标准G B/T16344—1996测定值比较, <2%, 关键词:饮料;="" 咖啡因;="">
0 前言1121试剂
, ,3,7三甲基黄嘌呤, 分子式:8H 10N 4O 2?H 2O 。具有提神醒脑, 刺激中枢神经的作用, 但易上瘾。因此, 目前为止, 我国仅允许可乐型饮料加入咖啡因, 且含量不得超过150mg/kg 。咖啡因的测定主要有紫外分光光度法
甲醇, 醋酸铵, 醋酸, 咖啡因(熔点237℃标准品) 。11212 溶液配制
1121211 咖啡因标准储备液、精密称取010500g
咖啡因标准品加水溶解, 定容100ml , 该储备液浓度为015mg/ml 。
1121212 标准系列配制:取咖啡因标准储备液适
和高效液相色谱法。国家标准G B/T16344-1996中高效液相色谱法是利用咖啡因的甲醇液在286nm 的波长下有最大吸收且吸收值的大小与咖啡因浓度成正比来进行定量, 流动相采用甲醇∶乙晴∶水=57∶29∶14(每升流动相中加入018mol/L 乙醇液50ml ) 。
量, 加水配成每毫升含咖啡因5, 10, 15, 20, μg 的标准溶液, 各取10ml , 用微孔滤膜过滤, 25
弃去最初5ml , 保留5ml 备用。113 样品制备
本文利用咖啡因的水溶液在254nm 的波长下有最大吸收且吸收值大小与咖啡因浓度成正比这一关系, 对饮料中咖啡因成分进行测定, 采用0102mol/L 醋酸铵-甲醇(75∶25) 为流动相, 方法快速简便, 同样取得良好效果。1 实验部分111 仪器及色谱条件
PE785高效液相色谱仪
称取可乐型饮料100g (精确至0101g ) 于200ml 烧杯中, 加热微沸10min , 并经常用玻璃棒
搅拌以除气, 冷却后, 用蒸馏水补足至原来的质量, 搅匀。吸取该制备液10ml , 加水定容至50ml 。乌龙茶饮料直接用水稀释。取10ml , 用微孔滤膜过滤, 弃去最初5ml , 保留5ml 备用。114 工作曲线制作
固定相为NOVAPA K C -18的不锈钢柱(319×150mm ) ;
流动相为0102mol/L 醋酸铵溶液-甲醇(75:25) ;
μ 吸取上述标准系列10l , 在所选择的色谱条件下, 注入HPLC 仪, 记录色谱图(图1) , 咖啡因保留时间为917min , 峰面积与浓度进行回归求得工作曲线。
μg/ml ) =11011×C (10-4A +111485 r =019986 n =5115 样品测定
检测波长为254nm 流速:110ml/min 112 试剂及溶液配制
收稿日期:2000-05-19 最终改稿日期:2000-11-03
第4卷第2期
邱莉璇:饮料中咖啡因含量的测定
Vol 14 No 12
?37?
μ吸取10l 样品制备液, 在所选择的色谱条件下, 注入HPLC 仪, 记录色谱图(图2) , 计算测定结果(表1) 。211 与国家标准方法比较
按G B/T16344-1996规定方法测定该两种样品的咖啡因含量, 并与本文方法测定值比较, 计算两种方法的相对偏差。见表1。从计算值得出, 两种方法的相对偏差<2%。按g b/t18344—1996规定;=""><5%。可见,>
结果与讨论
表1 样品测定结果
样品
咖啡因含量μg/ml
HPLC 法(Xi ) G B/T16344紫外法(A 法)
(X )
HPLC 法(B 法) X
可乐饮料931292159314
乌龙茶饮料325193241232310
两种方法的相对偏差=
×100%
与A 法比=0176%与A 法比=0152%与B 法比=1117%与B 法比=0196%
在已知含量的可乐饮料制备液和乌龙茶饮料中
, 定容, 取5ml , 保留5ml 。
HPLC 仪, , (表2) 。
表2 回收率测定结果
可乐饮料
加入量
(μg/ml ) 1#2#3#4#5#
25102510251025102510
测得量
(μg/ml ) 24152415241724192414
回收率
%98109810981899169716
平均回收率%
RSD (%)
9814n =5
0180
乌龙茶饮料
加入量
(μg/ml )
测得量
(μg/ml ) 48154910481548124818
回收率
%97109810971096149715
平均回收率%
RSD (%)
图1
标准溶液色谱图
1#2#3#4#5#
50105010501050105010
9712n =5
0175
从表2中可以看出, 两种样品回收值均>97%。方
法准确度高。213 注意事项:实验用水应为超纯水, 进样前应用微孔滤膜过滤以免损坏仪器。3 结论
本文采用0102mol/L , 醋酸铵溶液-甲醇(75∶25) 为流动相, 以水为溶剂, 方法快速, 简便。与按国家标准G B/T16344—1996规定方法的测定
图2 可乐饮料色谱图
值比较, 两种方法的相对偏差<2%, 回收率="">
(下转41页) 97%。方法准确, 有实用价值。
第4卷第2期
王绍胜, 李燕, 任建军:原辅材料检验方法
Vol 14 No 12
?41?
用游标卡尺分别对肩部、跟部、颈部进行测量。
315 塑料分布
30度跌落于地面上, 检查瓶子及底托是否破裂,
分离或松动。
3111 轴向拉力(2片瓶) :
瓶身不少于013mm , 瓶底012mm , 注瓶点l 13mm 。
瓶子与底托粘合后, 可承受9kg 最低拉力。3112 扭力(2片瓶)
测量同一水平高度的厚度变化。316 灌注点高度变化
将瓶子放在转距测试仪上, 拧紧, 旋转瓶身, 测试瓶子与底托间的粘合力, 可承受最低815牛顿?米扭力。
3113 乙醇含量(AA 值)
测试瓶子灌注后随3～4kg/cm 2压力的高度变化, 加压速度是每秒015kg/cm 2。317 CO 2保存
μg/L 白瓶:≤310L ≤4g/L :≤121μg/L 103114 口味测试
测试灌注后的饮料, 12周后的气体损失百分比。
318 热稳定性(22℃:
319 顶压力
分别在6、12、18、24周进行口味比较。3115 应力开裂(1片瓶) :
考验瓶子须承受30kg 平均顶压力或20kg 最低顶压力。3110 冲击压强度
测试传送带润滑油对一片瓶瓶底的影响。3116 凸底测试(1片瓶) :
将灌注后的瓶子冷却至313℃, 从2m 高倾斜 测试一片瓶瓶底承受高温与高内压强度。
The detection methods for ra w and auxiliary m aterials
Wang Shaosheng
Dalian Coca -Cola B everage Co. , Ltd. Dalian , Liaoning 116033
Li Y an
Dalian Foodstuff R esearch I nstitute Dalian , Liaoning 116031
Ren Jianjun
Staff Off ice of Foodstuff , Liaoning Provincial School of G rains Shenyang , Liaoning 110036
Abstract :The quality standards for raw and auxiliary materials used in large -scale beverage factories are described based upon practi 2cal experiences , and the detection methods for sugar , CO 2and PE bottles discussed. K ey w ords :raw and auxiliary materials ; sugar ; CO 2; detection method
(上接第37页)
〔2〕G B/T16344-1996饮料中咖啡因的测定方法〔3〕分析化学手册(6) 1液相色谱分析11999
参考文献
〔1〕G B/T10792-1995碳酸饮料(汽水)
The determination of the content of caffeine in beverages
Qiu Lixuan
Xiamen Product Q u ality I nspection Station Xiamen , Fujian 361004
Abstract :The content of caffeine in beverages is determined by HPLC at 254nm with water as the solvent and 0. 02mol/L ammoni 2
um acetate solution —methanol (75:25) as the fluid. The reclamation rate is over 97%.The relative error between the results of this method and G B/T16344—1996is less than 2%.The method is proved to be easy and practical. K ey w ords :beverage ; caffeine ; determination
范文四：饮料中咖啡因含量测定 杨
饮料中咖啡因含量测定 杨
CHANGSHA UNIVERSITY OF SCIENCE & TECHNOLOGY
实验设计
题目: 饮料中咖啡因含量测定
学 生 姓 名: 杨 晶
学 号: 12109030936
专业(全称): 食品科学与工程
指 导 教 师: 张 玲 教授
2012年11月16日
饮料中咖啡因含量测定
一、实验目的
1、了解高效液相色谱法测定咖啡因的基本原理;
2、掌握高效液相色谱仪的操作;
3、掌握高效液相色谱法进行定性及定量的基本方法;
4、掌握标准曲线定量法。
二、实验原理
咖啡因又名咖啡碱，属甲基黄嘌呤化合物，化学名称为1,3,7-三甲基黄嘌呤，具有提神醒脑等刺激中枢神经作用，但易上瘾。
咖啡因的甲醇溶液在286nm波长下有最大吸收，其吸收值的大小与咖啡因浓度成正比，从而可进行定量。
三、仪器、样品和试剂
仪器:高效液相色谱仪;色谱柱(C18);微量进样器(10uL);超声清洗器;
移液管;容量瓶(50mL)6支;胶头滴管;玻璃棒;
烧杯;电子天平;漏斗;滤纸;滤膜(0.45um);自动进样瓶(2mL)。
样品:可口可乐(瓶装)
试剂:甲醇:色谱纯;
实验用水:超纯水;
咖啡因标准品(雀巢):纯度98%以上;
咖啡因贮备液(1mg/mL):将咖啡因在110?下烘干1小时，准确称取0.1000g咖啡因，用超纯水溶解，转移至100mL容量瓶中，定容至刻度，待用。
四、实验步骤
1、色谱条件:
柱温:室温;
流动相:甲醇,水,60:40
流速:1.0mL/min
检测波长:275nm
2、咖啡因标准系列溶液配制: 分别用移液管吸取1000μg/mL咖啡因储备液1.0、2.0、2.0、4.0、5.0mL于5只50mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，浓度分别为20、40、60、80、100 μg/mL
3、样品前处理: ?将25mL可口可乐置于100mL烧杯中，剧烈搅拌30min或
用超声波脱气5min，以赶净二氧化碳。 ? 准确称取咖啡0.2g，用水溶解定容至50mL。? 将2份样品溶液分别进行干过滤(即用干漏斗、干滤纸过滤)，弃去前过滤液，取续滤液，待用。 ? 分别取5mL可乐、咖啡溶液用0.45 μm 的滤膜过滤，然后注入2mL自动进样瓶备用。
4、绘制工作曲线: 待液相色谱仪基线平直后，分别注入咖啡因标准系列溶液10μl，重复两次，要求两次所得的咖啡因色谱峰面积基本一致，记下峰面积与保留时间。
5、样品测定:分别注入样品溶液10μl，根据保留时间确定样品中咖啡因色谱峰的位置，重复两次，记下咖啡因色谱峰峰面积。
五、结果处理:
1、确定标准样咖啡因和样品中咖啡因的保留时间及记录不同浓度下其峰面积;
2、根据咖啡因标准系列溶液的色谱图，绘制咖啡因峰面积与其浓度的关系曲线。
3、根据样品中咖啡因色谱峰的峰面积，由工作曲线计算可口可乐、咖啡中咖啡因含量(分别用μg/mL和mg/g表示)
六、注意事项:
1、液体样品必须经过处理，不能直接进样，虽然操作简单，但会影响色谱柱的寿命。
2、不同牌号的茶叶、咖啡中咖啡因含量不大相同，称取样品可酌量增减。
3、为获得良好结果，样品和标准溶液的进样量要严格保持一致
范文五：可乐中咖啡因含量的测定
可乐中咖啡因含量的测定
食品加工技术081班 0811306118 邱正光
： 咖啡因是一种具有药理活性的物质，在通常的饮料如咖啡、茶和可乐以
及头痛药、止疼药中都发现有咖啡因的存在。适量食用咖啡因有祛除疲劳、兴奋
神经等作用，临床上用于神经衰弱、伤风、偏头痛等疾病的治疗，但大量或长期
摄取咖啡因有损人体的健康，如咖啡因自身的毒性，引发心脏病，对人体骨骼状
况及钙平衡产生不利影响等状况及钙平衡产生不利影响等本文介绍两种常用的
咖啡因检测法，即高效液相色谱法、离心萃取紫外光谱法。并比较两种方法的优
缺点，得出测定咖啡因的最佳检测法。
高效液相色谱法，紫外光谱法，检测 一、
咖啡因又称咖啡碱，是由茶叶或咖啡中提取而得的一种生物碱，它属黄嘌呤
衍生物，化学名称为1,3,7-三甲基黄嘌呤。咖啡因能兴奋大脑皮层，使人精神兴奋。
咖啡中含咖啡因约为1.2~1.8%，茶叶中约含2.0~4.7%。可乐饮料、APC药片等中
均含咖啡因。其分子式为CHON，结构式为： 81024
OCH3HC3NN
NON
CH3
当前，各种可乐饮料已经成为人们饮食当中摄取咖啡因次数和频率较高的一
个重要来源。因此，发展简便、快速、可靠、分析成本低的分析方法来对可乐饮
料中咖啡因含量进行测定非常重要。通常采用色谱、色谱/质谱联用、毛细管电泳、分光光度和流动注射等分析方法检测可乐饮料中的咖啡因测定方法。本文采
用高效液相色谱法与离心萃取紫外光谱法测定可乐中咖啡因的含量。
1
1.1
用反相高效液相色谱法将饮料中的咖啡因与其它组分（如：单宁酸、咖啡
酸、蔗糖等）分离后，将已配制的浓度不同的咖啡因标准溶液进入色谱系统。如
1
流动相流速和泵的压力在整个实验过程中是恒定的，测定它们在色谱图上的保留
时间t和峰面积A后，可直接用t定性，用峰面积A作为定量测定的参数，采用RR
工作曲线法（即外标法）测定饮料中的咖啡因含量。
1.2仪器和试剂
1、Agilent 1100高效液相色谱仪或上海通微EasySepTM－1010液相色谱仪。
2、色谱柱：Kromasil C18，5μ 150×4.6mm。
3、流动相：30%甲醇（色谱纯）+70%高纯水；流动相进入色谱系统前，用
超声波发生器脱气10min。
4、 000mg/L咖啡因标准贮备溶液：将咖啡因在110?下烘干1h。准确称取0.1000g咖啡因，用二次蒸馏水溶解，定量转移至100mL容量瓶中，并稀释至刻度。
5、 测饮料试液：可乐，茶叶，速溶咖啡。
6、 平头微量注射器。
1.3
-11 标准贮备液配制质量浓度分别为20、40、60、80μg?mL的标准系列溶液。
2 普仪器条件：泵的流速：1.0mL/min；检测波长：275nm；进样量：10μL；柱温：室温
3 仪器基线稳定后，进咖啡因标准样，浓度由低到高。
4 样品处理如下：（1）将约25mL可口可乐置于一100mL洁净、干燥的烧杯中，剧烈搅拌30min或用超声波脱气5min，以赶尽可乐中二氧化碳。（2）准确称取0.04g速溶咖啡，用90?蒸馏水溶解，冷却后待用。（3）准确称取0.04g茶叶，用20mL蒸馏水煮沸10min，冷却后，将上层清液，并按此步骤再重复
一次，将茶叶全部转移至50mL容量瓶中。将上述三种样品分别转移至50mL容量瓶中，并定容至刻度。
5 上述三份样品溶液分别进行干过滤（即用干漏斗、干滤纸过滤），弃去前
过滤液，取后面的过滤液，备用。
6 别取5mL可乐、咖啡饮料和茶叶水用0.45μm的过滤膜过滤后，注入2mL样品瓶中备用。
7 “Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程”分析饮料试液。
1.4
1．测定每一个标准样的保留时间（进样标记至色谱峰顶尖的时间）。
2. 确定未知样中咖啡因的出峰时间。
3. 求取样品中咖啡因的浓度。
4
2
序标样浓度μg?保留时间色谱峰面色谱峰高度 -11 20 号 mLt 积S H R
2 40
3 60
4 80
5 速溶咖啡
6 茶叶
7 可乐
2
2.1
SPECORD 200分光光度计（德国耶拿分析仪器股份公司）；KQ50B型超声清洗器（昆山超声仪器有限公司）；Anke TDL4型离心机（上海安亭有限公司）；
MettlerToledo AB104N电子天平（瑞士梅特勒
司）；100 μL微量进样器（美国安捷伦科技有限公司）；5 mL注射器（上海医疗器械有限公司）。三氯甲烷（分析纯,上海振兴化工一厂）；咖啡因（分析纯,Fluka公司）；各种可乐饮料（购自当地超市）。
2.2
取少量可乐饮料用超声清洗器在常温下超声脱气1～2 min，用100 μL微量进样器准确量取100 μL超声脱气后的可乐饮料至5 mL离心试管中，加入2 mL三氯甲烷，以2500 r/min离心3 min，用5 mL注射器吸取下层清液进行紫
外光谱分析。按以上方法处理市售的娃哈哈无咖啡因儿童可乐饮料制备参比溶
液，并以此为空白。在278 nm处测定经同样方法处理过的样品溶液中咖啡因的
吸光度值,通过标准曲线计算其含量。
2.3
精确称取咖啡因标准样品0.0500 g于100 mL容量瓶中，用三氯甲烷溶解后定容得浓度为500 mg/L的储备液。实验前用三氯甲烷稀释，配成0.5、2、5、10、15、20和30 mg/L的系列标准溶液。以三氯甲烷作空白溶液，测定其在278 nm处的吸光度值，绘制标准曲线。
2.4
实验结果表明，咖啡因浓度在0.50～30 mg/L范围内与吸光度呈良好
的线性关系，线性回归方程为y=0.0491x+0.0019，相关系数r=0.9999；按照空白（娃哈哈无咖啡因儿童可乐饮料）的3倍标准偏差计算得本法检出限
为0.001 mg/L。
3
采用高效液相色谱法往往存在有机溶剂消耗多，分析时间长，分析成本
相对较高等缺点。而采用紫外光谱分析方法通过简单的背景校正和微型化的样品
前处理，建立了一种快速、准确、价格低廉、溶剂消耗少的测定可乐饮料中咖啡
因含量的分析方法，并将大相比离心萃取应用于仪器分析样品制备过程，取得了
满意的结果
所以采用离心萃取紫外光谱法测定可乐中咖啡因含量为最佳方法。
4
转载请注明出处范文大全网 » 测定茶叶中咖啡因的含量
