我叫常冰川10319618
范文一：作用于VEGF信号通路的血管生成抑制剂
#综述与专论#
2010年第34卷 第6期 第 256页
do:i 10. 3969/.j issn . 1001-5094. 2010. 06. 003
256 2010, V ol . 34, N o. 6 Progress in Pha r ma ceu tica l Sciences
作用于VEGF 信号通路的血管生成抑制剂
万 博, 刘 煜
*
(中国药科大学生化教研室, 江苏南京210009)
[摘要] 分类介绍作用于血管内皮细胞生长因子信号通路的血管生成抑制剂研究近况以及该类药物存在的缺陷。血管生长促进因子和血管抑制因子的活性及其表达水平对肿瘤的发生和发展具有关键性的作用, 所以, 针对于血管生成, 尤其是靶向于血管内皮细胞生长因子的药物已成为近年来抗肿瘤药物研究的热点之一。[关键词] 血管内皮细胞生长因子; 靶向治疗; 血管生成抑制剂
[中图分类号] R 963; R 97911 [文献标志码] A [文章编号]1001-5094(2010) 06-0256-08
Va scu l a r Endo t he li a lG row th Fac tor S i g na li n g P a th w ay 2ta rge t e d
Ang i o ge ne s i s I nh ib it o rs
WAN Bo , LIU Yu
(D e part m e n t of B ioc he mistr y, China Phar mace u tic a l Universit y , N anjing 210009, Ch i n a )
[Abstract] V ascu lar endothelial gro wth f actor (VEGF ) si g na ling pathway 2targeted i n h i b itors were i n troduced . Tumor gro w t h , i n vasi o n and m etastasis are all blood vesse l 2dependent bu t the activity and
expressi n g leve l of b lood vesse l gro wth 2pro moti n g f actors and i n h i b iting f actors are considered to be the most i m portant to angiogenesis . I n recent years , the cancer therapy has f ocused on deve l o pi n g molecu lar tar geted dr ugs , especia lly angi o genesis 2targeted drugs , such as VEGF signali n g pathway 2tar geted inhibi 2tors . [Key w ord s] vascu lar endothelia l gro w t h factor ; tar geted therapy ; angiogenesis i n h i b itor 癌症正日益成为威胁人类健康的大敌。据2010年第二届中英癌症生物学前沿研讨会上公布的数据显示, 全球每年有1200万人被确诊为癌症, 约740万人死于癌症。而从2009年的中国肿瘤防治宣传周新闻发布会上获悉, 我国每年因癌症而死亡的人数已达180万, 近年来每年新发病例超过220万。
传统治疗癌症的药物主要是化疗药, 它们作用于肿瘤细胞生长的不同环节, 抑制或杀死肿瘤细胞。不过, 目前使用的化疗药在杀伤肿瘤细胞的同时, 也
[接受日期] 2010204214
[资助项目] 国家/重大新药创制0科技重大专项(No .
2009Z X091032654)
*
会杀伤正常组织的细胞, 从而造成两个方面的问题:
一是严重的不良反应, 二是由于杀伤与人体免疫有关的血液、淋巴组织等细胞, 导致免疫系统受到破坏, 从而进一步促进肿瘤的发展。因此, 近年来, 抗肿瘤药物的研究热点已从传统的化疗药转移到靶向治疗药物上。在2002年美国肿瘤学会(ASC O ) 年会上, 美国国立癌症研究所(NCI) 主席Eschenbach 就指出, 肿瘤治疗手段在20世纪是/寻找和破坏0, 而在21世纪则是/靶向和控制0。
靶向治疗药物通过作用于疾病发生所必需的特
通讯作者: 刘煜, 教授;
研究方向: 人源单抗药物的研制;
Te:l 025283271248; E 2m a i:l li uyuyaoda @163. co m
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定分子靶点来达到治疗目的, 许多著名研发公司如罗氏、施贵宝、阿斯利康等都在致力于该类药物的研究。针对肿瘤发生的靶向治疗药物主要有:1) 信号传导抑制剂
[1]
#综述与专论#
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原激活物受体(uP AR) 及抑制因子(T I M Ps) 的合成
[9]
与释放, 促进血管细胞外基质的降解, 或通过低氧诱导因子的作用诱导一氧化氮(NO ) 产生, 进一步激活VEGF 表达, 促进血管扩张和血流增加
[10]
; 2) 细胞生长周期和凋亡调节剂, 如。
NCI 筛选得到的flavop iri d o, l 可通过靶向抑制细胞周期蛋白(cycli n ) 依赖性蛋白激酶(CD K ) 活性, 将细胞周期阻断在G1期和G2期, 同时导致CDK9/cyc2li n T 复合物(PTEF 2b) 失活, 抑制RNA 聚合酶ò的
[2]
磷酸化, 阻断Cycli n D1的合成; 3) 血管生成抑制剂, 自1971年Folkman 首次提出肿瘤的生长浸润依赖于血管生成(N Engl J Me d , 1971年), /肿瘤饿死疗法0逐渐被越来越多的人所接受。该理论认为:肿瘤细胞能够通过新生血管提供氧气和养分来维持自身的不断扩散、增殖。由此推断, 若能抑制肿瘤制造血管的能力, 就有可能使肿瘤生长减缓甚至停止, 而肿瘤制造血管的过程与促血管形成因子和血管抑制因子的活性及表达水平有着密切的关系, 且其中血管内皮细胞生长因子(VEGF, 即VEGF 2A ) 起关键性作用。
VEGF 又称血管通透因子(vascu lar per m eability f actor , VPF) 或血管调理素(vasculotrop i n ), 由Ferrara 等于1989年率先从牛垂体滤泡星状细胞的体外培养液中纯化得到(Bioc he m BiophysRes Co mmun, 1989年), 其是内皮细胞的特异性有丝分裂原, 同时也是一种有效的促血管形成和增加血管通透性的诱导因子。人类VEGF 基因定位于染色体6p2113, 全长28kb, 其中编码区14kb , 由8个外显子和7个内含子组成。VEGF 是一种外分泌的同源二聚体糖蛋白, 由两条相同肽链通过二硫键连接成二聚体, 相对分子质量为36000~46000, 等电点815, 遇热、遇酸稳定。依据RNA 剪接的方式, VEGF 存在9种亚型, 各亚型在生物体内的含量、定位、活性等均有不同, 其中VEGF 165为主要的分泌形式, 也是主要的效应分子, 对内皮细胞的体外增殖和血管生成作用最强
[526][4]
[3]
所有参与VEGF 信号通路的因子均有可能成为抗血管生成药物作用的靶点。目前在研的该类药物主要有两类, 一类是直接以VEGF 为靶点, 另一类则靶向于VEGF 通路中其他信号传递分子。
图1 VEG F 信号通路F i gure 1 VEGF s i gna li ng path ways
1 直接靶向VEGF 的血管生成抑制剂111 VEGF 单克隆抗体
单克隆抗体是一种可直接作用于靶细胞抗原的/生物导弹0, 具有很强的选择性、特异性和杀伤力, 是市场潜力巨大的靶向性药物。2004年, 美国FD A 批准了世界上首个VEGF 抑制剂) ) ) Genentech 公司开发的单克隆抗体Avasti n (bevaciz umab, 贝伐单抗) 作为治疗晚期结直肠癌的一线药物正式上市。
Avasti n 属于人源化单抗, 由93%的人I gG 骨架和7%的鼠源区域结合而成, 能高亲合性地结合于VEGF 所有亚型, 阻止VEGF 与VEGFR 的结合, 阻断VEGF 信号通路, 从而抑制肿瘤新生血管的形成和生长。
在该药的临床研究中, 有一项针对转移性结直肠癌患者的随机、双盲、对照实验, 其中813名受试患者在接受常规I F L 疗法(伊立替康125mg #m 尿嘧啶500mg #m
-2
-2
。
VEGF 与血管内皮细胞上酪氨酸激酶受体(VEGFR) 的细胞外结合域结合后, 使每两个单体受
体分子在膜上形成二聚体, 并致受体细胞内结合域尾部酪氨酸残基发生磷酸化, 进而激活不同信号传导, 发挥一系列生物学效应(见图1) 。另外,
) [728]
+52氟
+亚叶酸钙20mg #m
-2
) 的基础
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组2为实验组, 加用Avastin 5mg #kg ; 安慰剂与A vasti n 均为每2周静脉滴注给药1次, 受试者持续用药直至死亡或因严重不良反应而停药。结果, 对照组受试者的中位总生存期(OS) 为1516周, 中位无进展生存期(PFS) 为614周, 总有效率35%; 而实验组的OS 和PFS 分别为2013和1016周, 总有效率45%
[11]
-1
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112 可溶性VEGFR 药物
可溶性VEGFR (s VEGFR ) 药物具有与VEGFR 细胞外结构域相似的结构, 能与VEGF 结合, 阻断VEGF 信号传导通路。如Sanofi 2A ventis 与Regeneron 公司开发的A flibercept (VEGF 2trap) 是由VEGFR1的第2个Ig 结构域与VEGFR2的第3个I g 结构域融合人I gG1的恒定区(Fc) 而得到, 其可按1B 1的比例与VEGF 的各亚型结合, 形成稳定复合物, 由于该复合物能在约2周内保持稳定, 故可在较长时间内阻断VEGF 信号通路
[18]
。表明Avastin 与I FL 疗法联用能有效治疗
转移性结直肠癌, 且疗效优于常规I FL 疗法。
在其后开展的一系列临床研究还发现, Avastin 对多种癌症均有疗效。在一项临床试验中, 878名晚期非鳞状细胞或非小细胞肺癌并伴有胸腔恶性积液的ób 期或肿瘤已转移的?期初治患者被随机分为两组, 其中对照组患者(444人) 接受标准化疗(卡铂+紫杉醇), 实验组患者(434人) 则在标准化疗的基础上每3周加用A vasti n 1次(15mg #kg , iv), 持续用药1年。结果, 实验组患者的OS 为1213个月, 而对照组为1013个月, 有统计学上的显著性差异(P =01013)
[12]
-1
。
在一项随机、双盲、多中心实验中, 55名化疗失败并伴有腹水的晚期卵巢癌患者被随机分为治疗组(29人) 和安慰剂组(26人), 治疗组患者每2周静脉注射A fli b ercept 1次, 剂量为4mg #kg , 连用6个月, 并以用药开始后至首次需要穿刺抽取腹水的时间作为评价药效的指标。结果, 治疗组患者的平均首次穿刺时间为55天, 而安慰剂组为23天, 两者差异具有显著性(P =010019)
[19]
-1
。。
在另一项有685名转移性乳腺癌患者参加的实验中, 对照组患者只接受紫杉醇治疗(1个疗程为4周, 前3周每周静脉滴注1次, 剂量为90mg #m , 第4周停药); 实验组的1个疗程同样为4周, 只是在接受紫杉醇治疗的基础上, 每疗程的第2和第
-1
4周再分别加用Avastin(10mg #kg , iv) 1次; 两组患者均持续治疗直至死亡或因严重不良反应而停药。结果, 实验组病人的PFS 显著高于对照组
[13]
(1113个月vs 518个月, P <010001)>
目前, Avasti n 已被批准用于治疗乳腺癌和侵袭性脑瘤, 并可与铂类化疗药联用治疗非小细胞性肺癌及与干扰素2A 联用治疗转移性肾细胞癌等。此外, 还有多项Avasti n 治疗卵巢癌、非小细胞性肺癌、肾细胞癌、多形性恶性胶质瘤等的研究正在进行中。尽管Avasti n 可有效治疗多种癌症, 但其也会产生较多的不良反应。如有报道指出, 在接受过Avas 2ti n 治疗的568名结直肠癌和473名其他肿瘤患者(其中单独使用Avastin 者157名, A vasti n 与化疗药联用者875名) 中, 最常见的不良反应为贫血、疼痛、腹泻、恶心、呕吐等, 严重程度可达3/4级; 并有人发生程度为1/2级的高血压以及出现血栓; 个别患者发生可逆性的后部脑病综合征(PRES) 、鼻
[15][16][17]
[14]
-2
用A fli b ercept 治疗其他多种癌症的实验也正在
进行中, 其中有两项ó期临床研究:一项是考察本品与化疗药联用作为二线治疗转移性结直肠癌和非小细胞性肺癌的方案的可行性, 另一项是验证本品用于一线治疗激素非依赖性前列腺癌的疗效; 此外, 还
[20221]
有针对进展期实体瘤的?期临床研究。113 VEGF 的反义寡核苷酸
反义寡核苷酸(ODN ) 是指一段可与特定靶标RN A 互补的碱基序列, 当它进入细胞后可与靶标序列形成双链结构, 导致靶基因沉默。Wu 等
[22]
给接
种W alker 2256肿瘤细胞的肝癌模型大鼠使用VEGF 的OD N, 并评价了该OD N 的抗肿瘤活性。他们将模型大鼠随机分为两组, 分别在其肝动脉注射3个OD 值(1个OD 值指体积为1mL 的OD N 溶液在内径1c m 的比色杯中的吸光度值为1, 此时ODN 约为33mg) 的该ODN 溶液(溶于012mL 碘化油中) 或012mL 生理盐水。结果, 用RT 2PCR 和免疫组化法测得的用药组大鼠肝癌及其周边组织中VEGF 水平明显低于生理盐水组; 而组织微血管密度计数发现, 用药组大鼠的微血管密度亦显著下降, 为5311? 1814, 明显低于生理盐水组的7312? 2014, 两组间有统计学差异(P <0105);>
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(14011? 3318)%, 而生理盐水组为(40319? 6914)%。表明该ODN 确有抗肿瘤活性。114 抗VEGF 核酶
核酶是一段具有催化活性的RNA , 而抗VEGF 核酶可通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应, 参与VEGF RN A 剪切、加工过程, 特异性切割靶RNA 序列, 因此现在常被设计为靶基因表达的阻断剂。Ciafr 等针对VEGF mRNA 的5c 端结构, 合成了一段发夹状的抗VEGF 核酶基因, 其能特异性阻断VEGF 的分泌。将其转染至U87人恶性胶质瘤细胞后, 细胞外基质中VEGF 的分泌量比未转染该基因的肿瘤细胞下降了56%; 该基因还能抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 的增殖。表明该技术可作为一种有效的基因治疗手段应用于胶质瘤等肿瘤的治疗, 但目前该技术还仅处于体外实验阶段。115 VEGF 2si R NA
si R NA 是一段长度为20~25个核苷酸的双链RNA , 能结合并降解与之同源的mRNA , 使该基因沉默。根据这一原理构建的VEGF 2si R NA , 可特异性
[24]
结合并降解VEGF mRNA 。R askop f 等从体内、体外两方面评价了VEGF 2si R NA 对VEGF 蛋白表达的影响, 其中体外实验采用的是H epa129和S VEC4210细胞, 给这两种细胞分别转染VEGF 2si R NA 后, 观察其各自的VEGF 表达情况, 结果发现, 转染两天后, 两种细胞中VEGF 表达量分别比未转染细胞降低了70%和48%; 另外, 与未转染细胞相比, 转染了VEGF 2si R NA 的S VEC4210细胞的增殖和管状结构的形成分别减少了23%和38%。在体内实验中, 先将C3H 小鼠分为3组, 组1小鼠接种转染VEGF 2si R NA 的H epa129肿瘤细胞; 组2小鼠接种未经转染的H epa129细胞, 并在接种后24小时开始腹腔注射VEGF 2si R NA , 每2日1次, 每次200L g #kg ; 组3为对照组, 接种未经转染的H epa129细胞。实验开始14天后评价各组小鼠的肿瘤生长情况, 结果显示, 与组3相比, 组1和组2小鼠体内的肿瘤体积分别缩小了83%和63%, VEGF 的表达量下降了29%和44%, 微血管密度下降了34%和39%。上述两项实验结果提示, VEGF 2si R N A 有可能成为有效的抗肿瘤药物。
与一般小分子药物相比, si R NA 的优点在于选, , -1
[23]
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纳米粒的形式将si R NA 药物直接运送到靶细胞是目前抗癌药物研究的热点, 现今已有多家公司在进行该方面的研发, 其中A l n yla m 公司开发的AL N 2RS V01和Calando 公司开发的CAL AA 201等相关药物已进入临床研究, 预计能在5年内上市。2 作用于VEGF 通路中其他信号传递分子的血管生成抑制剂
211 VEGF 受体酪氨酸激酶抑制剂
VEGF 的作用主要是通过作用于血管内皮细胞上高亲和力的VEGFR 来实现的(见图1) 。但是肿瘤的发生通常是多信号通路多水平交互作用的结果, 所以早期开发的只对单一激酶的活性有抑制作用的药物, 如表皮生长因子受体(EGFR) 抑制剂易瑞沙(ge fitinib) 和特罗凯(erlotinib), 往往不足以遏制肿瘤的发展, 反而可能引起基因突变导致肿瘤耐药和逃逸究趋势。
Soraf en i b (Nexavar , 索拉非尼) 是世界上第一个被批准用于临床的多靶点抗肿瘤药物, 其具有双重抗肿瘤效应:一是通过抑制Raf 磷酸激酶, 阻断PKC /RAF/MEK/ERK信号传导通路, 直接导致肿瘤细胞死亡; 二是通过抑制VEGFR 和血小板源性生长因子受体(PDGFR), 阻断肿瘤新生血管的形成。
在一项ó期临床试验中, 903例经Motzer 评分(一项关于转移性肾细胞癌的预后危险因素的评分, 其中包括身体功能、血清钙离子等多项指标) 被认定为中低度, 且在过去8个月内经历过一次系统抗癌治疗失败的晚期肾细胞癌患者被随机分为治疗组(451例) 和安慰剂组(452例), 两组病人分别口服sora f en i b (400mg , b i d ) 或安慰剂, 并持续用药直至死亡或因不良反应而停药, 其主要药效指标为PFS 。中期分析结果显示, 治疗组患者的PFS(518个月) 比安慰剂组(218个月) 延长了1倍, 且该组患者的生活质量明显改善。此后, 尽管安慰剂组患者转而接受sora f enib 治疗, 但最终统计分析显示, 安慰剂组病人的OS 为1519个月, 治疗组为1913个月,
[26227]
两组间仍存在显著性差异(P =01015) 。正是基于这一结果, 美国FD A 于2005年通过快速审批程序批准了sorafenib 用于治疗转移性肾细胞癌[25]
。故多靶点抗癌药物已成为当前的研
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另一项有602位晚期肝癌患者参加的随机、双盲、多中心的临床实验中, 治疗组(299人) 和安慰剂组(303人) 患者分别口服soraf en i b (400mg , b i d ) 或安慰剂, 以肿瘤进展时间(T TP) 和OS 为考察指标。结果:安慰剂组患者的OS 和T TP 分别为719和218个月; 治疗组患者的OS 和T TP 分别为1017和515个月, 分别延长了218和217个月; 所有可评价的病例对药物均有良好的耐受性, 生活质量有所提高。故在2007年, soraf en i b 又被批准用于晚期肝癌的治疗
[28]
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点和作用途径, 该项临床实验的研究者E ichelberg
等仍认为, 两种药物很可能会产生交叉耐药性。这有待于进一步临床实验的验证。212 缺氧诱导因子抑制剂
有研究表明, 缺氧导致肿瘤细胞高表达VEGF , 主要是通过缺氧诱导因子(H I F 21A ) 而实现:在VEGF 的5c 端增强子内存在着能与H I F 21A 结合的低氧反应元件(HRE ), 其在低氧条件下, 可与H I F 21A 结合, 增强VEGF 的转录和表达, 增加血管生成, 从而增加对缺氧部位的供血
[31]
。。L i u 等
[32]
分别构
另一个已批准上市的抗癌药sun iti n i b (Suten, t S U 11248, 索坦, 苹果酸舒尼替尼) 对VEGFR1~3、PDGFR 2p 、KI T 、FL T3、RET 的酪氨酸激酶活性均有抑制作用。在一项为期6周、有750例晚期肾细胞癌患者参加的临床实验中, 受试者随机分为两组, 分别接受sun iti n ib 和A 2干扰素治疗, sun itinib 组病人在前4周每日1次口服suniti n i b 50mg , 后2周停药; A 2干扰素组病人每周3次皮下注射A 2干扰素, 第1周剂量为3M U (m illion units) /次, 第2周为6MU /次, 后4周为9MU /次。结果, A 2干扰素组中肿瘤进展或死亡的人数为154, 占4111%, PFS 为2210周, 而suniti n i b 组的相应数据为96例、2516%和4713周, 两组间这些数据的差异均具有统计学意义(P <01001), 表明suniti="" n="" i="" b="" 对晚期肾细胞癌的疗效优于a="">
[29]
建了H I F 21A 的重组质粒(Ad2/H I F 21A /FL、Ad2/H I F 21A /VP16)和对照质粒(Ad2/CMVEV ), 并将这
3种质粒分别转染大鼠胶质瘤细胞C6后, 于低氧条件下培养, 观察VEGF 表达量的变化。结果, 与转染了Ad2/CMVEV 质粒的细胞相比, 转染了重组质粒Ad2/HI F 21A /VP16(感染复数MO I=200) 的细胞在低氧环境中的VEGF 表达量增加了约19倍, 而转染了A d2/H I F 21A /FL(MOI=2000) 的细胞的VEGF 表达量则增加了约26倍; 另外, 在转染两种重组质粒的细胞中, VEGF mRNA 的半衰期分别延长至313和217h , 而在转染了对照质粒的细胞中, VEGF mRNA 的半衰期(42m in) 则无明显变化。由此推断, H I F 21A 的表达可促进VEGF 表达, 而抑制H I F 21A 表达亦可能抑制VEGF 的表达, 从而达到抑制肿瘤血管生成的目的。
此外, 部分癌基因和抑癌基因也可通过调节H I F 21A 而影响VEGF 的表达。肿瘤细胞中存在着的大量活性氧簇(ROS) 可导致野生型p53基因发生突变或缺失。Khro mova 等
[33]
。该药现已被批准用于晚期肾细
胞癌和胃肠道间质肿瘤。
值得注意的是, soraf en i b 和sun iti n ib 可按照序贯治疗的方式用于同一位患者。如在2005-2008年间的一项针对晚期肾细胞癌的临床实验中, 30名接受sora f enib(400mg , bid) 治疗的患者在经放射学检查并根据RECI S T (实体瘤反应评价标准) 判定肿瘤发展后, 即转而接受sun itinib 治疗(1个疗程为6周, 前4周每日1次口服suniti n i b 50mg , 第2周停药, 直至肿瘤再次发展) 。结果, 截止公布数据时, 接受序贯治疗者的PFS 达到1713个月, 仅接受soraf en i b 治疗者的PFS 为817个月, 而Kap lan 2M eier 生存曲线(一种对病例随访资料进行生存分析的方法, 在对应于每一实际观察事件时点上, 评价其生存率) 分析显示, 单用suniti n i b 的患者的PFS 为1013个月。由此可见, 两药序贯疗法的效果优于两药[30]
将野生型(p53)
+
H CT116细胞(人结肠癌细胞) 和一系列突变型
-4
(p53)HCT116细胞按3@10的密度分别接种6孔板, 常规培养30天后, 用RT 2PCR 和Western b lot 法分别检测细胞中p53、H I F 21A 、VEGF 的水平。结果
-发现, 在(p53)H CT116细胞中, H I F 21A 水平上调, VEGF mRNA 表达提高。故认为, 若能降低体内ROS 含量, 抑制p53基因的突变, 就有可能下调VEGF 水平, 抑制肿瘤血管生成。213 环氧合酶22抑制剂
W ang 等
[34]
在对大鼠肝星状细胞(HSC 2T6) 的
研究中发现, H S C 细胞可高表达环氧合酶22(COX 22
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损肝组织形成新生血管。另有研究表明:在结肠癌细胞中, C OX 22可通过前列腺素E 2途径促进VEGF 的上调, 导致肿瘤的生长、侵袭和转移
[35]
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胞癌的临床研究也对soraf en i b 组和安慰剂组发生的
不良反应进行了统计分析, 结果显示, 两组的不良反应(发生率) 为:腹泻(43%vs 13%) 、皮疹/脱屑(3316%vs 13%) 、疲乏(37%vs 28%) 、手足综合征(30%vs 7%) 、高血压(17%vs 2%) 、恶心和食欲不振(1411%vs 1017%) 、感觉神经病变(1012%vs 316%) 、瘙痒(1619%vs 414%) 、低磷血症(13%vs 3%) 、脂肪酶升高(12%vs 7%) 、白细胞减少(3%vs 1%) 、淋巴细胞减少(13%vs 7%) 和中性粒细胞减少(5%vs 2%)
[26]
。此外,
COX 22还与诱导型一氧化氮合酶(i N OS) 有协同作
用, 能提高基质金属蛋白酶的活性, 参与肿瘤的血管形成过程。因此, COX 22抑制剂也被认为是可作用于VEGF 信号通路的肿瘤血管生成抑制剂
[37]
[36]
。最
近, Cuzick 等撰文指出, 长期服用COX 22抑制剂阿司匹林可降低患癌症的风险; 鉴于可导致癌症的一些身体损伤通常在45岁左右显现, 因此在40多岁时服用阿司匹林, 10年后该药预防癌症的效果可达到最佳, 而在这个时期服用阿司匹林面临的不良反应也比在15~20年后服用要小得多。但是, 对于阿司匹林的最低使用剂量、起始给药年龄限制以及最佳给药方案等尚待进一步研究。
3 作用于VEGF 通路的血管生成抑制剂目前存在的问题
尽管从理论上来说, 靶向VEGF 信号通路的肿瘤血管生成抑制剂有着很大的优势, 但在实际研发中仍存在许多问题, 比如靶向性不强、抗体具有异质性、部分肿瘤对血管的新生依赖性不强、突变及肿瘤信号传导的代偿性导致的耐药、不良反应和毒性等。311 耐药性
肿瘤细胞对作用于VEGF 信号通路的血管生成抑制剂可能存在耐药性的原因主要有以下几种:1) VEGF 的功能和作用可被VEGF 家族其他成员, 如VEGF 2C 、VEGF 2D 等所替代; 2) 肿瘤生长时缺氧的微环境使得其他细胞因子, 如白细胞介素、血管生成素等出现高表达, 这些因子也能促使血管生成和肿瘤入侵; 3) 整合素信号传导途径对肿瘤血管生成和侵袭有促进作用; 4) 肿瘤细胞可通过血管生成(vascu l o genesis) 的方式生成新生血管; 5) 血管内皮细胞遗传性状并非绝对稳定, 可能发生突变, 从而导
[38239]
致细胞产生耐药性。312 不良反应
虽然相对于传统化疗药, 作用于VEGF 通路的血管生成抑制剂的不良反应发生率略低, 但仍不可忽视。该类药物常见的不良反应主要包括贫血、疼痛、腹泻、呕吐、食欲减退、口腔炎、便秘、鼻衄、剥脱, 。鉴于该类药物可导致血压升
高, 有专家建议, 临床上使用此类药物时, 应特别注意用药者的血压和心功能的监测, 包括治疗前的评
估、治疗过程中的动态监测以及治疗结束后的随访, 如果发现血压不能有效控制, 应暂停或停止使用该类药物。另外, 还有报道称, 有患者在使用了Avas 2tin 后, 循环系统中VEGFR2水平升高, 生理性VEGF 功能被破坏, 进而引发肾小球血栓性微血管病4 结语
随着对VEGF 信号通路在肿瘤发生发展中所起作用的认识, 抑制VEGF 信号通路, 从而抑制肿瘤血管生成, 成为近年来抗肿瘤新药的研发思路之一。但作用于VEGF 信号通路的抗肿瘤药物的研发思路不应局限在这一条通路上, 因为除了VEGF 信号通路中重要的信号传递分子之外, NO 、NOS 、前列腺素等分子也在一定程度上影响着VEGF 的表达。另外, 与VEGF 通路密切相关的其他一些信号通路, 如Notch 通路等对肿瘤的发生也有一定的影响, 研究发现, 血管内皮细胞可表达2种Notch 受体和4种Notch 配体, 其中一种配体D ll4具有内皮细胞特异性; VEGF 可诱导D ll4的表达, D ll 4再与邻近细胞上的Notch 受体结合, 降低邻近细胞上VEGFR 的数量, 减少这些细胞对VEGF 的响应, 抑制新生血管
[40241]
的发生, 从而抑制肿瘤生长。这一发现引起了广泛的关注, 2009年的Na ture 杂志上已刊载多篇关于N otch 通路的文章。随着对该通路研究的深入, 将有可能研发出通过该路径间接靶向VEGF 的抗肿瘤药物, 而使用这类药物还有利于解决因长期使用VEGF 抑制剂而导致的耐药性问题。
血管生成除可影响肿瘤的发生外, 在其他一些[16]
。
#综述与专论#
2010年第34卷 第6期 第 262页
子宫内膜异位症等的发生中也起重要作用, 因此抑制血管新生的药物也同样适用于这些疾病。目前已有两种抗血管生成药物Lucenti s (雷珠单抗) 和M acugen(哌加他尼钠) 上市, 用于治疗老年性黄斑变性。
目前, 在笔者所在的实验室正在开展人源化VEGF 单克隆抗体的研究工作, 通过用VEGF 165蛋白直接免疫五特征小鼠(即敲除了鼠源Ig H 和I g J 基因并插入人源Ig H 、I g J 和I g K 基因的转基因小鼠), 以杂交瘤技术制备了具有特异性抗VEGF 165的全人源单抗, 同时对该单抗进行了基因工程化改造。初步研究发现该人源抗VEGF 165单抗对裸鼠的胃癌原位模型具有靶向治疗作用, 现正在对该单抗进行药理、药效学的进一步研究, 相关研究结果将另文报道。
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范文二：notch通路
Notch基因最早发现于果蝇，部分功能缺失导致翅缘缺刻。Notch信号通路是进化中高度保守的信号转导通路，其调控细胞增殖、分化和凋亡的功能涉及几乎所有组织和器官。Notch是一类穿膜受体，广泛存在于所有已知动物细胞中。Notch介导细胞与细胞间的局部信号传递及相应的信号级联反应。
在无脊椎动物和脊椎动物发育过程中，Notch信号对细胞的命运决定起关键作用。通过Notch受体的信号传递能够扩大并固化相邻细胞之间的分子差异，最终决定细胞的命运。
Notch信号途径由Notch、Notch配体(DSL蛋白)和CSL(一类DNA结合蛋白)等组成。Notch及其配体均为单次跨膜蛋白，当配体(如Delta)和相邻细胞的Notch结合后，Notch被蛋白酶体切割，释放出具有核定位信号的胞质区ICN(intracellular domain of Notch)，进入细胞核与CLS结合，调节基因表达。可概括为:Delta?Notch?酶切?ICN?进入细胞核?CLS-ICN复合体?基因转录。
(Scimall科学在线)
本信号转导涉及的信号分子主要包括:
Epsin，Endosome，DeltaJagged，Neur，Mib，Notch，ADAM，TACE，γ-Secretase，Complex，Nicastrin，Pesenilin，APN-1，PEN-2，NICD，NUMB，α-adaptin，Fringe，Furin，O-Fut，Deltex，NEDD4，NICD，CtBP1，CIR，HDAC，SMRT，SHARP，KDM5A，CSL，HAT，MAML，S1 S2 S3 Cleavage等。
范文三：QS 11_ARFGAP1抑制剂,Wntβ-连环蛋白通路调节剂_944328-88-5_Apexbio
产品名 : QS 11修订日期 : 6/30/2016产品说明书
化学性质
产品名 :
QS 11
Cas No.:
944328-88-5 分子量 :
567.68 分子式 : C36H33N5O2
化学名 :
(S)-2-((9-([1,1'-biphenyl]-4-ylmethyl)-2-((2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)oxy)-9H-purin-6-yl)amino)-3-phenylpropan-1-ol SMILES:
OC[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC2=NC(OC3=CC=C4CCCC4=C3)=NC5=C2N=CN5CC6=CC=C(C7=CC=CC=C7)C=C6 溶解性 :
Soluble in DMSO > 10 mM 储存条件 :
Store at +4°C 一般建议 : For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37°C
and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be
stored below -20°C for several months.
运输条件 :
Evaluation sample solution : ship with blue ice
All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
生物活性
靶点 :
信号通路 :
产品描述 :
QS11在 ARFGAP1酶实验和作为 Wnt 信号增效剂的 EC50值分别为 1.5 μM[1]和 0.5 μM[2]。 嘌呤衍生物 QS11是一种 Wnt 信号增强剂,抑制 ADP 核糖基化因子 GTP 酶激活蛋白 1
(ARFGAP1) 。 ARFGAP1促进 ARF1结合的 GTP 水解,在膜运输和 /或囊泡运输中起着关键作 用。
体外:在 HEK293细胞和人原代成纤维细胞中, QS11有效地增强 Wnt 活性(EC50值分别为 0.5 μM 和≥ 10 μM ) , 而无显著细胞毒性。 在含 Wnt-3a 的培养液中, 2.5 μM QS11更能 有效地激活 Super(8X)TOPFlash报告基因(高约 200倍) 。当 QS11与重组 Wnt-3a 蛋白(10 ~ 200 ng/ml)联合使用时,也可以观察到其协同作用 [2]。
体内:在 Wnt 信号通路模型中,给予胚胎注射 QS11、 XWnt-8 RNA或 QS11 + XWnt-8 RNA。 相对于单一使用 QS11和 XWnt-8 RNA, XWnt-8 RNA和 QS11联合使用显著地促进完整 (20.9%) 和部分(30.2%)双轴形成 [2]。
临床试验:到目前为止,暂无可用的临床研究数据。
参考文献 :
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产品仅用于研究,
不针对患者销售,望谅解。
每个产品具体的储存和使用信息显示在产品说明书中。 ApexBio 产品在推荐的条件下是稳定 的。 产品会根据不同的推荐温度进行运输。 许多产品短期运输是稳定的, 运输温度不同于长 期储存的温度。 我们确保我们的产品是在保持试剂质量的条件下运输的。 收到产品后, 按照 产品说明书上的要求进行储存。
ApexBio Technology
范文四：SD 1008_JAK2STAT3信号通路抑制剂,细胞凋亡诱导剂_960201-81-4_Apexbio
产品名 : SD 1008修订日期 : 6/30/2016产品说明书
化学性质
产品名 :
SD 1008
Cas No.:
960201-81-4 分子量 :
329.35 分子式 : C18H19NO5
化学名 :
(1R,5R,6S,7R)-dimethyl 8-benzyl-2-oxo-8-azabicyclo[3.2.1]oct-3-ene-6,7-dicarboxylate SMILES:
O=C([C@H]1[C@@H]2C(C=C[C@@H](N2CC3=CC=CC=C3)[C@H]1C(OC)=O)=O)OC 溶解性 :
Soluble in DMSO > 10 mM 储存条件 :
Store at RT 一般建议 : For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37°C
and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be
stored below -20°C for several months.
运输条件 :
Evaluation sample solution : ship with blue ice
All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
生物活性
靶点 :
JAK/STAT Signaling 信号通路 :
JAK 产品描述 :
JAK2/STAT3 signaling pathway inhibitor. Inhibits activation of STAT3, JAK2 and Src. Induces apoptosis in cell lines expressing constitutively active tyrosine-phosphorylated STAT3.
参考文献
:
特别声明
产品仅用于研究,
不针对患者销售,望谅解。
每个产品具体的储存和使用信息显示在产品说明书中。 ApexBio 产品在推荐的条件下是稳定 的。 产品会根据不同的推荐温度进行运输。 许多产品短期运输是稳定的, 运输温度不同于长 期储存的温度。 我们确保我们的产品是在保持试剂质量的条件下运输的。 收到产品后, 按照 产品说明书上的要求进行储存。
ApexBio Technology
范文五：胰蛋白酶抑制剂对Wnt信号通路的作用
?３３８?
国匿胜擅堂盘盍垫！Ｑ生』旦筮１２鲞筮§翅』丛蜊：丛型垫！Ｑ：丛２２，丛垒§
ｔｕｍｏｒ
ｄｏｒｍａｎｃｙｏｆｓｏｌｉｔａｒｙｃｅｌｌｓｂｅｆｏｒｅｉＩＩｌＩｉｂｉ矗ｎｇｎｇｉ啦ｉｅＩⅫｌ诚Ｃａｎｃｅｒ
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Ｅ印Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ，
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ｄｏｒｍａｎｃｙ
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ｃａｎｃｅｒ
ｃｅｌｌ＆Ｊｔｒａｎｓｉｅｎｔａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ
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ｃｅｄｅｓ
ｎｕｄｅ
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（收稿日期：２００９．１Ｉ．２６修回日期：２００９－１２．１４）
综述
胰蛋白酶抑制剂对Ｗｎｔ信号通路的作用
伊凤双综述李卓玉审校
【摘要】ｗｍ信号通路中的蛋白质分子在多种肿瘤的发生发展过程中扮演着重要角色，它们不仅调节细胞分裂，且与细胞骨架运动紧密相关。胰蛋白酶抑制剂能通过影响肿瘤细胞间的黏附及运动对肿瘤细胞的发生、浸润和转移起到抑制作用。它还可通过提高凋亡酶活性而加速细胞凋亡；通过细胞膜上钙黏蛋白下调Ｂ一连接蛋白在细胞质中的含量，抑制Ｗｎｔ信号通路的异常激活。
【关键词】
肿瘤；信号传导；胰蛋白酶抑制剂
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ｓｉｇｎａｌｉｎｇ
Ｗｎｔ信号通路（ｗｎｔ
ｐａｔｈｗａｙ，Ｗｎｔ）中ｐ
发展起十分重要的作用‘１１。Ｗｎｔ信号通路中的结肠腺瘤息肉蛋白（ａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓ
ｐｏｌｙｐｏｓｉｓ
－连接蛋白（Ｂ－ｃａｔｅｎｉｎ）是中心分子，对肿瘤的发生和
ｃｏｉｌ，ＡＰＣ）可以
通过它的Ｃ．端与微管蛋白结合，参与微管蛋白的组
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍｓ．ｊ．ｉＭｎ．１６７３—４２２Ｘ．２０１０．０５．００６作者单位：０３０００６太原，山西大学生物技术研究所
装和稳定，调节细胞骨架运动‘２１。
蛋白酶抑制剂（ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＰＩ）是在动植
万方数据
物及微生物体内广泛存在的一种对蛋白水解酶活性有抑制作用的小分子量蛋白质。在已发现的各种蛋白酶抑制剂中，胰蛋白酶抑制剂（ｔｒｙｐｓｉｎ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，
ＴＩ）种类最多，分布也广。已经有研究证实多种胰蛋白酶抑制剂，如大豆胰蛋白酶抑制剂、养麦胰蛋白酶抑制剂都具有明显的抗肿瘤的功效旧４Ｊ。
ｌ
Ｗｎｔ信号通路的异常激活与肿瘤的发生
Ｗｎｔ信号通路主要由以下几种蛋白构成：Ｗｎｔ分
泌糖蛋白（Ｗｎｔ）、结肠癌腺瘤息肉蛋白（ＡＰＣ）、糖原合成酶激酶－３Ｂ（ｇｌｙｃｏｇｅｎ
ｓｙｎｔｈａｓｅ
ｋｉｎａｓｅ一３Ｂ，Ｇｓｋ一
ｏｒ
ｃｏｎｄｕｃｔｉｏｎ）、ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ、核内转录因子（Ｔｃｅｌｌｆａｃｔｏｒ，ＴＣＦ）和泛素蛋白（Ｕｂｉｑｕｉｔｉｏｎ，Ｕｂ）等∞刮。作为Ｗｎｔ信号通路的正调控因子，Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ在正常细胞内大部分和跨膜Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ结合，Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ是上皮细胞上皮型钙黏附蛋白介导细胞黏连系统的膜下成员ｏｈ８｜。部分Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ与轴蛋白一结肠腺瘤样息肉蛋白．糖原合成酶激酶．３ｐ（Ａｘｉｎ．ＡＰＣ．Ｇｓｋ－３Ｂ）等形成复合物后而被磷酸化，进而被泛素蛋白降解，以此来维持细胞质内Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ的较低水平一Ｊ，抑制Ｗｎｔ信号通路的异常激活。
在Ｗｎｔ信号通路中，与人类肿瘤关系最密切的是ＡＰＣ。大约８５％散发性结肠癌中可检测到ＡＰＣ基因缺失突变或失活，而ＡＰＣ基因的缺失或失活被认为是结肠癌发生的早期事件。ＡＰｃ突变后不能有效地与Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ、ＧＳＫ一３Ｂ和Ａｘｉｎ结合而形成复合物，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ降解受阻并在胞内累积，随即进入核内，激活靶基因的表达。同时，Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ氨基端的Ｓｅｒ／Ｔｈｒ磷酸化位点突变也可影响其降解过程，造成ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ胞内水平升高，从而激活Ｗｎｔ信号通路。Ｂ－ｃａｔｅｎｉｎ进入细胞核内与ＴＣＦ的复合物可以激活ｃ—ｍｙｃ的表达。２０年前已经发现，ｃ—ｍｙｃ的激活与Ｂｕｒ－ｋｉｔｔ’８淋巴瘤、肺癌、结肠癌等多种人类肿瘤相关。而Ｃ．ｍｙｅ与Ｗｎｔ信号通路的整合，表明Ｗｎｔ信号通路在人类肿瘤发生发展中的重要作用不容忽视。目前虽无明确证据表明Ｗｎｔ基因异常能直接导致人类肿瘤的发生，但已有大量的研究报道显示二者关系密切，如Ｗｎｔ．２在大肠癌发展的多阶段都有过表达；Ｗｎｔ．５ａ在乳腺癌、大肠癌、肺癌、前列腺癌、黑色素瘤中过表达，在乳腺癌及早期乳腺增生中过表达更为明显，因此Ｗｎｔ．５ａ具有癌基因的某些特性。值得一提的是，还有研究报道，在缺失Ｗｍ．５ａ的膀胱癌细胞株及肾癌细胞株中导入Ｗｎｔ．５ａ基因可使恶性转化细胞表型逆转，说明Ｗｎｔ一５ａ在泌尿道肿瘤中很可能又是一个抑癌基因。所以，Ｗｎｔ．５ａ作为一个重要的
万方数据
生长调节基因，在不同的组织细胞中可能发挥不同的生理功能和作用。
２胰蛋白酶抑制剂与肿瘤
胰蛋白酶抑制剂是具有胰蛋白酶抑制活性的小分子多肽或蛋白质，能与相应的蛋白水解酶形成一定的动态平衡，调节生物体内许多重要的生理活动，是维持体内环境稳定的重要因素。胰蛋白酶抑制剂属于丝氨酸蛋白酶抑制剂，可以和胰腺分泌的丝氨酸蛋白酶系（如胰蛋白酶、糜蛋白酶等）发生反应。胰蛋白酶抑制剂与其靶酶的相互作用，通常如酶和底物之间的相互作用一样，属于互补型作用机制。两者反应时，抑制剂暴露在外的活性中心与靶酶的活性中心通过氢键相连，形成稳定的共价型复合物，从而导致酶活性中心的闭锁，使靶酶的活性丧失。与通常的酶催化反应相比，蛋白酶与抑制剂之间反应的米氏常数（Ｋｍ）很低，故蛋白酶与抑制剂的亲和力大，二者可以迅速结合成复合物。与一般酶的底物不同，抑制剂与酶结合后其活性中心的肽键并不裂解或裂解速度极慢。因此，该复合物虽然可以分解成游离的酶和变性或未变性的抑制剂，但解离速度非常缓慢。已有研究表明，蛋白酶抑制剂能够在肿瘤形成初始阶段逆转其发展过程，这可能是通过阻断因接触癌因素而启动的某个过程来实现的。
大多数肿瘤患者死亡的主要原因是恶性肿瘤的侵袭和转移。肿瘤的侵袭和转移机制较复杂，是一个多环节、多步骤的过程，涉及细胞与细胞间、细胞与基质问的作用，以及多种基因改变等过程，其中肿瘤细胞穿透细胞外机制尤其重要。肿瘤细胞对基底膜浸润的３个步骤是黏附、溶解和转移。其中，溶解主要的原因是肿瘤细胞下方的基底膜被蛋白酶降解。利用可降解细胞外基质的蛋白酶抑制剂来抑制肿瘤的侵袭和转移已经引起人们极大的兴趣，其中胰蛋白酶抑制剂备受瞩目¨引。研究证明，在人体很多肿瘤细胞上都有胰蛋白酶抑制剂的受体，胰蛋白酶抑制剂与受体的结合能够调节蛋白酶的活性，抑制其对基底膜的浸润，阻断肿瘤细胞的转移。Ｋｏｂａｙａｓｈｉ等制备了小鼠ｌ＿ｅｗｉｓ肺癌模型，用尿胰蛋白酶抑制剂（ｕｒｉｎａ－
ｒｙｔｒｙｐｓｉｎ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＵＴＩ）进行抗肿瘤治疗。发现尿胰
蛋白酶抑制剂对原位癌的作用不明显，但可以有效抑制肿瘤细胞的转移。尿胰蛋白酶抑制剂和牛肺胰蛋白酶抑制剂对小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌的转移有明显的抑制作用。Ｋｅｎｎｅｄｙ在１９９３年报道大豆胰蛋白酶抑制剂对动物结肠癌有１００％抑制作用。虽然有多个报道关于胰蛋白酶抑制剂对肿瘤细胞凋亡起作用，但是分子机制尚不很明确。胰蛋白酶抑制剂还可影响某些
３Ｂ）、轴蛋白或转导蛋白（ａｘｉｎ
癌基因，如ｃ．ｍｙｃ的表达，而ｃ．ｍｙｃ是ｗｎｔ信号通路下游的靶癌基因。经重组养麦胰蛋白酶抑制剂处理癌细胞，可明显增强凋亡酶的活性，促进癌细胞的凋亡，对肿瘤起到治疗作用¨卜１２Ｊ。
３胰蛋白酶抑制剂与Ｗｎｔ信号通路
基于胰蛋白酶抑制剂对癌症发生和发展广泛的抑制作用，Ｗｎｔ信号通路在肿瘤细胞中常被异常激活，因而研究胰蛋白酶抑制对Ｗｎｔ信号通路的抑制作用，具有十分重要的意义。但目前关于胰蛋白酶抑制剂与ｗｎｔ信号通路的相关报道很少，且不够确切，归纳为以下几个方面。３．１蛋白激酶Ｃ
蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＰＫＣ）是一种参与信号转导和肿瘤发生的酶。有报道认为抗癌蛋白酶抑制剂具有抑制ＰＫＣ活性的作用¨３｜，而当ＰＫＣ活性增加时可下调Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达０１４－１６１。在正常情况下，Ｅ—Ｃａｄｈｅｆｉｎ与Ｂ－ｅａｔｅｎｉｎ结合在一起，Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达下调会导致ｔ３－ｃａｔｅｎｉｎ在细胞质中大量积累，激活Ｗｎｔ信号通路。胰蛋白酶抑制剂对ＰＫＣ活性的抑制，将会大大减少Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ在细胞质中的积累，抑制Ｗｎｔ信号通路的异常激活。
在结肠癌中，ＡＰＣ基因发生截短突变并引起ｓｕｒｖｉｖｉｎ的过表达，抑制细胞凋亡，促使细胞增殖，这可能是结肠癌形成的关键步骤之一【１７Ｊ８ｌ。而且在结肠癌细胞中ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因表达可受ＴＣＦ．１３．ｃａｔｅｎｉｎ刺激增加６—１２倍，增强细胞增殖和抗凋亡能力ｕ引。同时截短后的ＡＰＣ将失去与微管蛋白及ＥＢｌ（ａｎ
ｅｎｄｉｎｇｂｉｎｄｉｎｇ
ｐｒｏｔｅｉｎ）的结合位点，使得微管组装和
细胞骨架运动受到影响旧Ｊ。３．２黏着斑激酶
黏着斑激酶（ｆｏｃａｌ
ａｄｈｅｓｉｏｎ
ｋｉｎａｓｅ，ＦＡＫ）是一种
重要的非受体蛋白酪氨酸激酶，具有调节细胞与细胞外基质黏附的功能。Ｗｉｔｈｅｒｓ等研究显示，ＦＡＫ活性与其酪氨酸磷酸化水平密切相关。在肿瘤中ＦＡＫ酪氨酸磷酸化水平升高，活性增强。研究表明ＦＡＫ的活性提高可通过Ｓｃｒ．介导作用致使Ｅ—Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达下调ⅢＪ，从而使ｐ．ｅａｔｅｎｉｎ在胞质内积累，异常激活Ｗｎｔ信号通路。而胰蛋白酶抑制剂可能通过提高Ｃａｓｐａｓｅ活性来降低ＦＡＫ的活性，使Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ正常表达，有利于对１３．ｃａｔｅｎｉｎ的黏附作用，抑制Ｗｎｔ信号通路的异常激活。３．３凋亡酶
细胞增殖失控和凋亡受阻是肿瘤发生发展的主要原因，有效抑制肿瘤细胞的恶性增殖和促使肿瘤细胞凋亡，对肿瘤的治疗具有重要意义。胰蛋白酶抑制
万方数据
剂可通过提高Ｃａｓｐａｓｅ的活性来促进细胞凋亡。已知Ｃａｓｐａｓｅ通过裂解具有细胞骨架调节功能的蛋白质达到间接的重组细胞骨架结构，使细胞骨架发生结构和形态的变化，导致细胞骨架结构破坏【２１｜。Ｃａｓｐａｓｅ活化后，可使多种作为细胞骨架的底物蛋白发生裂解，进而从细胞黏附的基质或周围细胞群中脱离，形成凋亡小体。Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ在调节细胞相互黏附时对细胞钙离子浓度影响很大，有研究表明在细胞凋亡过程中钙离子浓度也会发生明显变化，因此推测Ｅ—Ｃａｄｈｅｒｉｎ还可能通过对钙离子浓度的影响参与细胞凋亡过程。３．４其他作用
肿瘤的转移是恶性肿瘤的恶性特征之一，是大多数实体瘤患者死亡的主要原因。Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ是重要的上皮黏附分子，其胞质结构域可直接与Ｂ－ｃａｔｅｎｉｎ结合，形成稳定的Ｅ—Ｃａｄｈｅｒｉｎ／１３．ｃａｔｅｎｉｎ复合物，维持上皮细胞黏附哺Ｊ。Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ仅在上皮细胞中表达，Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ的缺失将不能维持细胞．细胞间的紧密结合，使得肿瘤细胞易从原发部位脱落，这一现象可能在肿瘤的扩散中起关键作用。大豆胰蛋白酶抑制剂具有明显抑制肿瘤细胞降解基质膜的作用，从而能够抑制肿瘤细胞离开原发部位，向周围正常细胞侵犯【ｌ０｜。胰蛋白酶抑制剂可以通过抑制ＰＫＣ活性上调Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达，增加细胞间的黏附作用，抑制肿瘤细胞的侵袭和转移；可抑制酪氨酸激酶的活性，使Ｅ．Ｃａｄｈｅｒｉｎ介导的细胞．细胞间黏附增强。４结语
胰蛋白酶抑制剂具有多种生物学功能，有较强的抗肿瘤活性。目前对于胰蛋白酶抑制剂的研究国内外有一定距离。某些国家已经分离出纯度较高、相对
分子量较小、活性较明显的天然胰蛋白酶抑制剂，而且已经借助分子生物学的手段，使其在体外进行了表达。我国对于它的研究大多局限于分离纯化及其多种生物活性的研究阶段，所获得的胰蛋白酶抑制剂的分子量较大，对于其结构功能的研究较少。研究胰蛋白酶抑制剂对Ｗｎｔ信号通路及其相关分子表达的影响，目的在于深入探索胰蛋白酶抑制剂对肿瘤细胞和肿瘤浸润抑制作用的分子机制，为开发针对ｗｎｔ信号通路的抗肿瘤药物提供理论数据。
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（收稿日期：２００９—１２—０４修回日期：２０１０—０３—１６）
综述?
血小板反应蛋白１与紫杉醇耐药机制的研究
姚晓峰综述张仑审校
【摘要】
血小板反应蛋白ｌ（ＴＳＰｌ）因其抗血管生成及诱导凋亡的作用而被人们广泛关注。近期
研究表明，ＴＳＰｌ与紫杉烷类的耐药有着紧密的关系，ＴＳＰｌ表达下调会导致肿瘤细胞对紫杉醇的敏感性降低，而ＴＳＰｌ的下调可能是由一种新发现的紫杉醇耐药基因ｌ（Ｔｘｒｌ）介导的，这为临床解决紫杉烷类耐药问题提供了新的研究方向。
【关键词】
肿瘤；紫杉烷类；微管蛋白
Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ一１ａｎｄｔａｘｏｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅＹＡＯＸｉａｏ一如ｒｉｇ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅ矗ａｎｄＮｅｃｋＳｕｒｇｅｒｙ。ＣａｎｃｅｒＨｏｓ－
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ｔａｘｏｌ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍｅ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４２２Ｘ．２０１０．０５．００７
作者单位：３０００６０天津医科大学附属肿瘤医院头颈一科天津市肿瘤防治重点实验室
万方数据
胰蛋白酶抑制剂对Wnt信号通路的作用
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：
伊凤双， YI Feng-shuang
山西大学生物技术研究所,太原,030006国际肿瘤学杂志
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本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_gwyx-zlxfc201005006.aspx
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