wangkx1990
理教 室
胃
,
刘 荣学
。
在食 物 的 消化 吸和收 过程 中 起多种重
,
例
、
如能
易
、
胃 激 蛋白 元 变
且
,
使
,
、
、分
,
且 其
酸 性 环
铁、
钙
的 吸收
。
以所
,,
胃
酸 泌分 过 少或 缺乏
,,
常
产 生腹
胀
。腹
等泻 化 不消良
一另方 面
、
、
十 二
指肠 溃疡时 积
常常
,象
有
斯 阿匹林
,
紧张 性
过 高
引
起 过多 的酸 分 胃泌
如 果 粘
膜 屏作 用 障 到破遭 (坏如 精酒
。粘
。
胆 及 盐十 二 指 内肠容 物 的回流 作 用
,)
造 成溃
疡
。
l而
对 酸抵
抗 力的 降 并
因 了 胃解酸分 泌 的机 制是 很 重 要 : 的一 细壁 的
、
的
常采 取 制胃 分
,
溃
、
’
。
胃、 即指酸盐
酸
,
由 底腺胃 壁 细的胞 泌分
。,
壁 分
以
多,
。
愈 向底, 部愈少
,
。
5分0
: 小胃 壁弯细 胞 例 比 高
1肠
x
最为0 1肠
5
肠 体胃为 7
,
胃 底为
,
肠
一
, 门 责 幽 及门 最 部
:
。
,少
为
。~u
s
传遗决
定
19
62年 C
oc
报
告
、
0
亿
数 日其
1
64年9B
eo
k
发
豚 鼠现和 狗
在 续 组
,
} 壁细 胞 ‘
芝。
1
9 6 6P o 年s
y
以 抗 胆
持
续1 1周
,
发现
壁 细胞 数 比 对 组照 显著
:。
与分 泌 盐 酸 有 关壁 的胞 微超 构结电 子 显微 发 1 细 胞 管小 系统 I(n tr a e e llula r Ca n li。ua li) 在 胞 内 有大
.管
:
,
称为细
胞内小 管
r,
称 亦细胞 内 分 小 管泌
l li i
在。 此管 有很
起。
,
为微称
去
v)
。
细 内小
i 管 t ed
a这些
结构可认 是 为 壁细 胞游
离
,
r表面 胞
o b
r
edr
)
e
,
由 胞 膜内 入 胞凹质所 形
d
成 ar
,从而
增加了 壁
细 胞游 离 的 表 缘 面积1
9 16年 e d
Sa r
。
和 F
r
ie d m,
,
a
n
,19
26
年S
1 695 年
R
o
h err 研 突了 胃 分泌时 壁 细 胞,
的 结构 变化
。
以
组 织
胺胰 素 血糖或刺 激
增,
,
现
生
达 到 使
小
ic
u
度
。
为认2
,
.:
微
绒 的增 毛
。加
提供
th
,
一
1 1廿
:
0 0一
S
u rf‘ e e
de
n
a do psl m ie
r
e
u l
m
)
:
静 时息壁 胞 细
胞’。
网
。.
,管
。
酸 分时 滑泌 面
,
随酸 分的 泌
3
.,
有
,。
有
人 认为 滑
壁 细
胞存中 大在量线 粒 体 且 围 绕着 每 一 条细胞内 管 粒 体 层膜 ,,: 形 的 峪上 附 着 吸 几乎所 有的细 氧 胞化 当营养 质 物和 氧 些这 接
线
体
粒:
和水
,
时释 放
,
随 后
弥 散到 整个 细胞
,
,
,
以 供 给能量
。
粒
。盐
递
。 要需大量 能量 有 关
。
它 是 细 胞壁 泌 分 酸盐 的分 泌神 经 节后 维纤可 达
e ss 进 胃
r
神
经 丛
的节 细 胞 换元
,
其
分 末 乙酞胆 硷直
泌
, 后纤维 也
。
经
过胃
泌 间素接 引 起 壁 胞细 分泌 酸
盐
(图 一
)C杠A
图
一胃粘 膜
迷 内走神 经 配支图 解 ( 依G
r 。 :s、
m
o
n163)9
二
1.
、
激刺盐 酸 分
as
泌
人休 内 有 四 种
泌 素胃 (
tr ni
)。。
是
910
5n首 先 现发
i。
1 9
6
1
,
19 6 年T
4r
“
“y
分等离
7 氨 酸基的 多肤 并确定 1为‘ 同胃泌素 胃泌为 素 细
目
,
其 生 活性 与
,
此 底 胞细在 胃窦 的 幽门 腺 最多
,
2 指肠及 11
1飞
空 肠
等 处 胃素是 进 时 激刺壁细胞 分 泌 酸盐 主
,。
其
作 用 强度
,
此。外
,
,
N
A。
、
D
NA 成合
加
加
织 酸组脱 酶 数活
。性
,
使组
。 1 975 年 15 1证0 胃 明 素泌 是 直 接 激刺壁细 素 起 引盐酸 泌分 机 的 制不 完 全 清楚胞 引起 分 泌 的 肤 5胃泌 素使 狗 粘 细 胞膜 氧 耗增加而 且进
,,。
壁
胞对 泌胃
同
r
,s
胃
泌素 刺激 引 壁细起 胞形,
和
酸 泌分 一 时样
。
1
947
年
O SG
。
amn
出 在粘胃膜 存 胃在 泌 受 体素
以 泌胃 素
泌 2组 胺 . 织是 种 较强 的 刺 激 盐 酸 泌
:。
它
楚
,。
197
4
G o年s
r
s
m
on
提
出胃粘膜 存 在 织组 胺受 体的 假
,说
。
因
此 可 能 通过 体受 作 起
,
。用
关组 织
于胺 与
其
较
织胺组 存的在
,
可提 高
壁 细
但 人 发 现乙酞 胆
放
故, 认为 织
质3
. 酞乙胆硷
:
是
迷 走经节 后纤维 放释 的介 质 乙 酸 硷直 可接 刺激 壁
。
。
,r 。
“S
m
a n
出胃粘 存
4
.
。
消化 的 蛋白 , 一质般 物食 引起 盐 酸分 泌 是 过 通 走 和 胃经 素泌起 的 用 , aes r o ssm a e enn a n但 19 7 年5 Db种 G 发现消 化 的蛋
。:
‘
s小 胃
粘
膜
,
0肠 引 小起胃 盐
此 作。用 能 不为阿 托 品和 甲 硫 眯
胺
所 以。在(组 织 胺 受 体断剂 ) 阻 断所(此 二者 阻 断 可 走神 经 和 织胺 起引的 分 泌 ) e e na “ H i d h ni 胃 (无 胃粘 膜)消 化 蛋白质引 起 的泌 既
,
,
迷 走 神 经 及组 织 的 活胺 动三 、
,
可
能 新有的 泌分 机制 存 在
,尚待 研
口究
抑
制盐酸 的 分
泌
)
。:
消 化期 抑能制盐 酸 分 泌 的 要 因主
,
。
年来近 实验
表明
,
盐 酸
幽在 部 可能 制 胃 泌 素 释放 而 从制盐 酸 的 分泌 , 酸在 二 指 十肠内 作用 的 机制
生 些某抑 制 (物
,
如,
。
促 胰
液素
.
lb osya 球 胃 抑素Bu
,
r
to
e n)
,
使 盐酸 泌 受分抑
。
制,
。
‘
脂
肪 制盐 酸 分 抑 泌是 19 29年 F 等y所发现 的 9 13 0年 K o s k aa 和 Li 用m 肠 浸 小液 出 静脉
en
,
从
,抑素胃( E
n
,
e t ro
g
a
s
tr
on e
)
。
1
,7 5 有年 人证 明
,
,
血 清 内 胃 泌 素
增 加 胃
酸分 泌也
增
加11
2
这 明 小 肠
肠 抑
素胃
:到
目 为止 激
素
。
,所 以
素
。
, 可 能也 包括 些一促
胰
ro
。
如
比:
促
胰
液 素 可抑制
5,
肤
胆,囊收缩 素
9169
称 囊 收缩 ) 与胃 泌素 同 时
。
J
hn年o s
:—和
no。
”“m an
发 胆囊 收 现缩素 一促胰 素酶
疫 法证明 G
I P)
。和 促 胰液素 不都 抑 制能 织 组胺 引 起的盐 酸 分 泌
,而进 入
十,
二指 肠的 脂 能肪 力 地有
,
近最
o
放 用射
e
。
激
a
str i。
inh ib ito
r
y
lpyp
p t
d
ei
可 能就 是 肠抑 胃
素
’
:
抑胃
肤
呱0 分 泌 9
。
达,
空
肠D
:
细 (
,泌
。
3
个
。
很强 抑
作 血 肠 活管 性肤 (V的
VI P在血 中未发 现
四
、在1
.
0卜g
/
kg h 剂 量时.
,
能 抑制 5 肤胃 素 引泌 的起 酸:
5a ae
0
t v ei
in
t e st i
na
lp e p t记e
。
.
IVP
)
由 肠 道D 胞 ( 类 似胰 各细 胞
,
能
抑 制 组 胺 织 引起 酸 分泌
的
。
食物 引
起
。
盐 明 酸 泌分的 细胞 机 :
,制
上 述
刺
引
起 了壁细 胞 哪些 化
变。
,
盐
分泌
的
,
这 ‘些 题
决。
,
将
e绍
1
.
e 环e一 磷 酸 普C(y z
,
i
d
neo s
in
m
,
。 n
。p
u S。p h
a
et
,e
A Mp
)
:
、
?
’
广
有? 广 的生 泛物 活性
,
能影
许 响多酶的 活 性 和 细胞 内 的生理 生 化
过
程
。
在 。 素作 用激
中
,
充
二第信使
酸 胃分泌 受 胃 肠 激 道素的 调 节
,
是 否 cA M P 起也 二 信第 的使作 用 正现 深 研究入
。有
人 现以
胃 组织 人
,
胃
液 中 C MAP 量含增 有 n加 a e发 现 粘胃
,
活。
C AM P 量 含增) JI「
(A
d e
n
。y
l
ey
e
a
l
e
s
可
.
M 可激 刺游
而失 去活 性 )
,, 组
织
。
有
于 人硷 体
C M AP 功 加能强 ( 磷酸二 脂酶 可 水 C解 A M 为6 P 人一M P
。
所以 这 些 现都间 接证 C A M 参P与
。的
泌酸反
应。
可 能 胃
泌素
组 织胺
、
乙 胆硷 及
,
是
通 过 C MA
P起
用作2
.
e。 e环 磷酸一乌普 (C y i
l
尹5
3
y,
u,
n oa sine ,
mo
n o
p o
sph
h
a
t
e
。,
e
MG P
,
),
是
组 织 中
194年7Am
e r ,
,
同
,
现 兔
酞乙胆硷
,
胃
,
有 人发现 囊胆 收
织 胺都
使
增加
,
可 C MG P 参也 与了 酸胃 分
1
13
细
内盐的 成形 和分 被鹅以 事卖下有 提人出 娜 了盐释 分
,?
3
.
:
。
‘
一「
映芬泌 位的
置。
,
家 大
,
,
不
是 在胞 浆 a o or 。 。 ch yd r sa )e 其 能可 功使 o 二C 在 细 胞 存中在 很高 浓度 碳 的酸 醉 酶( Cb a i H iD mo x 给予 大 量此 酶 制抑剂 则 分 泌 水化 生 碳成 酸 中 分泌和H 成 o的诊 O H 被 钟制 离 蛙体 粘胃旗 缺 乏 o c供 胃给膜粘 可 因 H的
破
Z
。十
一
,
,,
:
,
‘
一
坏
。
明 此表
‘。
,
:一
释放
入
2 血
,
,
这 可 释解消化 期 血 中P H相应 增 高:
,
出砚
尿 中的所 硷谓
潮这
,在
酸 分率 低 泌时 CO 来壁自 细 胞的代
,谢
分泌
率 高 则 由血液 供 盐 的 分 酸泌有 能量 消的耗源 于 葡
。
估
计 分 一 克泌分 子 的盐 要酸 耗能 10 0 00
卡
,
量 能可 能 来
915
0
R
年p
,,
e
h
m其 事 同发
+
粘
膜面 负,为
浆膜而
为正
。
a env
.
,。
rDo
还 化原学说
.1
实事 和 生化的 研 究 于 1 95 7 年 出提以 解 释氢 子离的 形 成 和 分 泌
据 这根些
。
1
79 年 8又作 了 修 改 氧
的:
氢
离 子 浓度 逆梯 分 泌度 的能 量来
源,
,;
胃 中 氢
血/ 浆氢 离子浓 度 为 0。
.
000o 4 m Eq
/
升 差
相。
.
4 0万
吐需 度浓梯 而度行 量 来 能于 源 搪 和 肪脂的 氧 化 细 离氢要 分 泌 胃依 贝量 胞 的 大 中 线粒 体 有很 丰富 的含A T 可P 作为直接 能 量 源
俊\ 0
.
,
,。
分
一
。
2
淮卜? ’
,
分在 膜上 每 化 和氧还 原
,
,
?
」
3
.
呼
氧
,。
,
在
,
每
分 泌一 个
H+
,
则 产生
一个o H
欲
壁 细 胞
再
分 离 出H
’
和H
C一O
H
。+
有富 碳的酸 醉 可使c o 与H Zc合 成 H Z oC3 l 入 细胞进 行交与 产
,c
,
Z
,一
,
一
一
换,
1嘴毛
血
妓
壁 细 胞
动
程 笼分 她 旷的 全
胃
液
L1
日‘飞…
那细胎 中内
+
州十
对
成,
。。肠12 U
以-
H刃
被
泛动
楠
么夕 日
图O
二:
C 0 在 2 分酸
(
D
依
av en
另
一 解 释种氢 离子 分 泌 机 制的 A是T P
说
p—o
r
t
一。 7 5)
,
根 壁 细
。
含上有 ATP 酶
刺 激 分 泌 时 液。
且 ,能 H被 CO
。
一
一
3激 活 (即重 碳 盐酸 激 A活 P 酶T) 的 事 实 ,
认为
,
细当 胞 受
,
线
粒
TA
TP 在 分 膜泌 上水解
一,
其
胃同
时H CO
传 给,胞 质
:
,
最 终在营养 与 C面 l
,
一
交换
。
氯
离 子 排的 出机 制
的 浓 差度
由
于 存在 组
所5以 氯子 离的分 泌
“
m
q
,
E
/升
,
胃 液中为 1 0 6
m
E
q/
升
以 及 电 势 差( 60MV )
,
一 般
认 为 是逆 电 学化 梯 度 的运
“
动
,
H十
。
即在膜 上存
,在“
泵
”氯
”。
和
C 一I的 分 泌 是 通 不 过同的 机 制
泵
和氢。
氯
+泵
”
,还
是通 过
“
酸盐
泵”
,
目前 不还清 楚
‘
屏C+ l
,
,
量逐渐 汇
,
由于 集
H
和,C l一 分泌 入细 胞内 小 管。
腔
,
成造其
渗 透 压 的 升高
所 细 胞 的内水 则被
。盐
11之
5
小
文 本介绍
制 膜 上 受 是体
)“”
,
籍
种 刺激 酸分 泌 的物质 接 作)直于H 壁
.能
:
首 激 活先 普腺 环 酸酶化
干
,
’
,
催 化 AT P 速 生 环成 一 酸 磷
“ ”+
再
通 过环
,同
时膜 磷 上 酸 苔 控制 分 膜泌上 H 的 生 反成 在 应分 膜 由 氢上泵 排 出H一 的 氯 泵 滑 将 内 质面 网的 C l 排入 管
排。
出( 图三 )
。
斟图三
HP
十
?细胞 分泌
,
一:
氢为泵
、
氯
。
之
总,
胃 盐 酸分的机制
。
泌 别 特在 分子水 平 机 制
的
到 前为目止 还 是 不 清
楚,
有待
进一 步 的研
主
16
1
电针调控大鼠胃酸分泌的机制
电
作者:赵保民，黄裕新，赵宁侠，刘梅，尚磊，黄
【关键词】 电针
关键词:
摘 要:目的 探电针足三里穴大胃分泌的控机制. 方法 75SD大鼠随机分为5组，在清醒状态下针刺双侧三里穴，以白对照、非经非穴作对照，三阴交穴作经穴对照.同步测定液量、pH及胃液酸度，放免法测定血浆、胃液、胃粘膜胃泌素(Gas)和表皮生长因子(EGF)含量，射电镜观察胃粘膜腺胞超微构. 结果 电针刺激足三里后大鼠空腹液量明显少,(0.30?0.11)vs(0.63?0.12)mL，P<0.01,，胃酸度明显降低,(30?3)vs(41?1)mmol L-1 ，P<0.05,，胃液pH升高.胃膜Gas含量多,(136?17)vs(73?4)ng L-1 ，P<0.01,，血浆Gas含量下降,(84?22)vs(108?30)ng g-1 ，P<0.01,，胃液Gas无变化;胃胃粘膜EGF含量显升高,(3.2?1.1)vs(1.8?0.4)μg L-1 和(5.1?0.8)vs(2.4?0.4)μg g-1 ，P<0.01,，血浆EGF无变化.胃壁细胞泌酸小管不扩张，小泡充盈不足，且量不减少，非经非穴组及空白对照组各项标无显著变化. 论 电针足三里穴抑制大鼠胃G细胞Gas释放，降低血浆Gas，增加胃粘、EGF含量;电针足三里可改变胃壁细超微结构，
小
Keywords:electroacupuncture;zusanli;gastric
acid;gas-trointestinal hormones
Abstract:AIM To investigate the regulative mechanism of electroacupunture(EA)on gastric acid secretion in rats.METHODS SD rats(n=75)were randomized into5groups:Control group，non-point
group，Sanyinjiao group，zasanli group，and unite group.All rats
in consciousness were stimulated by electroacupuncture except control group.We measured the pH of fasting gastric juice as well as its vol-ume and acidity.Meanwhile radioimmunoassay was applied to assay the contents of gastrin(Gas)and epidermal grouth factor
(EGF)in plasma，gastric juice and gastric mucosa tis-sue.Cellular ultra-microstructure of gastric mucosa coat was observed under a fransmission electron microscope.RESULTS After EA，it was
discovered that the volume of the fasting gastric juice significantly reduced(0.30?0.11)vs(0.63?0.12)mL，P<0.01，
and the acidity of the gastric juice significantly dropped(30?
3)vs(41?1)mmol L-1 ，P<0.05，and the pH of gastric juice rose.EA stimulation of zusanli led to a drop of plasmic Gas(84?22)vs
(108?30)ng L-1 ，P<0.01，a rise of Gas in gastric mucous coats(136?17)vs(73?4)ng g-1 ，P<0.01，but little change in Gas
in gastric juice.Besides，there were some other changes ob-served.EGF of both gastric juice and gastric mucous coat in-creased(3.2?1.1)vs(1.8?0.4)μg g-1 ，P<0.01，and(5.1
?0.8)vs(2.4?0.4)μg g-1 ，P<0.01respectively wheres plasmic EGF didn’t change，were unfilled and didn’t decrease in their number.The above indexes in non-point group were not different from
those of control group(P<0.05).CONCLUSION EA stimulation of zusanli can inhibit Gas release，reduce Gas contents in plasma and gastric juice，enhance contents of EGF in gastric mucosa and juice，
change ultra-microstructure of gastric gland cells，and inhibit the se-cretory function of acinotubules in paritetal cell.Finaly，The
gastric acid secretion is decreased.
0 引言
医认为，经络内
针刺络腧穴，可激发源性生理性调节，影响饮食的受纳、
现代验研究表明，针对胃酸分泌具有调节作用，可能与
有关,1, .但针刺何调节胃肠激素的变化，是否调节脏
构及微结构，进而影胃酸分泌，尚未见有关研究报告.
刺后酸分泌变化的同研究了胃泌素、表皮生长因子含量
况,2, ，观察到胃细胞超微结构的变化.旨在探讨电针
鼠
1 材料和方法
1.1 材料
SD健康大鼠75(本校实验动物中提供)，体质量200,250g，12,14wk，雌兼配，随机分为正常对照组、非经非穴组、足三里穴、三阴交组和联合穴位组(足里+阴)，共5组，每组15只.采用我们自设并改造的实验笼，大鼠自行钻进后关笼，在无麻醉无创完全清醒状态下以G6805-A型电针治疗仪(广东汕头医仪器厂)行电针，参数选择频率范2,15Hz，空载电压20,35V，调制脉冲为疏密波，双肢轻微颤抖为宜，时30min.对照组每日按规定时间在笼内滞留30min，行针刺.其余各组大鼠每日同时辰电针双侧穴
1.2 方法
参照《中国兽医》和《大鼠的解和组织》确定穴位.足三里穴位大鼠后肢膝关节下方腓骨头下约5mm处;非经非穴定位于足三里穴旁0.5cm处;三交定位于大鼠后肢内上10mm.各实验组大鼠于电针结束前禁食24h，自饮水，结束后即刻im846合剂1mL kg-1 .麻醉后即刻断头取血，血液置于预先加有100g L-1 EDTA20μL和抑肽酶100U的试中，摇，4?，4000r min-1 离心20min，取清液，-70?保存待激素.双结扎法完整取胃，于幽门一端切开一小口，插入锑电，读取pH值，然后抽取胃液，量，用生理盐水释
4000r min-1 离心20min，上液分装，-70?保存待测激素.液冷冻前留0.5mL，以1g L-1 酚红指示剂，0.01mol L-1 NaOH进行滴定，计算胃液酸度(mmol L-1 ).取胃液后留取1.0cm×0.3cm×0.5cm胃组织块于40g L-1 多聚醛液中固定备用于免组检测.另胃粘膜小块组织于2.5g L-1 戊醛中固定于透射电镜察.其余胃粘膜放入称量瓶中，称体质后加入生理盐水1mL，沸煮10min，加0.1mol L-1 醋酸1.0 mL，倒入匀浆管中，用离散器匀浆，取上清液0.1mL L-1 NaOH滴定pH至7.4，离心(4?，4000r min-1 ，20min)，-70?保存待测激素.血浆、胃液及胃粘膜织、泌素和表皮生长子含量测定采用的放免盒购自北方生物技术研所(94)卫药准R-25号.利用均竞争抑制原理平衡饱和法定浆、胃胃膜匀浆的Gas和EGF含量，严格按说明操作进行，数据由FJ-2003-50G型γ计数仪电脑分析得出.透射电镜用胃粘膜组织标本经2.5g L-1 戊二醛固定4?，2h，PBS反复换洗2,3h，10g L-1 锇酸定2h，然后递度乙醇脱水，浸蜡与包埋，制超薄切片，载于铜网，在JEM-2000EX透射电镜下观察胃壁细胞、主细及内分泌细胞
统学处理:实验据以x ?s表示，本校统教研室提供的SPLM软件
2 结果
2.1 电
电针后足穴组和三阴交穴组胃液量显著下降(P<0.01)，足组和联合穴组胃轻度降低(P<0.05)，胃液pH值升高(P<0.05，Tab1)，其余组无明显变化.表1 电针后大鼠
2.2 电针后
足三里穴浆、胃液Gas均下降，三阴交穴和合穴位组血浆Gas降低(P<0.01)，胃液Gas升高(P<0.01).三阴交穴组血浆EGF降低(P<0.05)，胃液EGF升高(P<0.01，Tab2)，足里穴组血浆EGF无变(P>0.05)，液EGF增高(P<0.01).联合穴位组胃液EGF下降. 表2 电针后大鼠血浆、胃
2.3 电
电针三里使大鼠胃粘膜Gas和EGF含量均显著增加(P<0.01)，三阴穴组胃粘膜Gas下降(P<0.01)，EGF含量升高(P<0.05，Tab2)，非经非穴组胃粘及联合穴
2.4 透射电镜观察结果
正常胃壁细胞体积大，呈，大圆形核，细胞内大量线粒体轻度肿胀，内质扩张，泌酸小管数不多，呈扩张状态，微绒稀疏.足三里穴组壁细胞体积最大，大球形，胞内线粒体丰，明显肿胀，内质网多且明显扩张，泌酸小管及小泡充盈不足，
三阴穴组壁细胞质疏松空虚，线体无明显肿胀，滑面内质网不扩张，泌酸小管呈扩张状态，充盈，
3 讨论
针刺对胃分泌机能的响，论在人还是动物身上，研究报道较多，但所得结果并一致.医床实验研究认为，对健康人针刺三里可使胃酸分泌下降,3, ，在疾病状态下针刺足三里则具有双调节作用,4, .以正常实验动物为对的研究，多实验果是抑制胃酸分泌，如对带有胃瘘的狗进行性实，针刺足三里可使碳酸氢盐和分泌增加，而胃酸分泌减少，胃液酸从(48?12)mmol L-1 下降到(8?3)mmol L-1 ，即使在Ach负荷时，使电针足三里大鼠胃酸分泌减，pH升.但也有报告使胃酸和胃蛋白酶增，恒健生等观察到电针后胃酸排量明显升高，停针后40min才接近针前水平.本实验参照恒健生采用的电针参数，结果足三里组不仅胃液量少，胃酸度也明显下降，表明电针足三对清醒大鼠胃酸分泌具明抑制作用，其他研究报告也有类
,5，6, .
中医理为足阳明胃经属胃络脾，阴脾经属脾络胃，二者一阳一阴，一脏一腑，构成表里相合关，互作用，互相影响.本验结果表明针刺足三里引起胃液下降，pH升高，胃酸度下降，针三阴交穴，胃液量少，但不降低胃液，说明二穴对酸分泌其有不同的影响.联合刺激二穴胃液酸
制胃酸分泌同时，高胃粘分.中医关于足三里为强壮和保健穴的认识相一致.三阴交为配穴疗疾亦有重要的临床意义.现代研究表，胃肠类激素在调节胃酸分泌机制中具有重要作用，在针刺对胃酸分泌的调中占主导地位.Jin,7, 针刺足三里起狗胃酸泌减，同时液中生长抑素(SS)，血管活性肽(VIP)内啡含量增加.针刺狗足三里G胞胃素含量增加，而血浆Gas下降.针刺里穴后血清Gas水平增高，而胃蛋白酶原下降，胰多肽释放受抑制，生长抑素和胃动素无变.孙大勇等,8, 电针狗足三里穴血浆及胃粘膜Gas均增高，生长抑素、蛙皮素含量下降.我观到大鼠足三里胃酸分泌下降，同时浆Gas及胃液Gas减少，胃粘Gas增高.综上所述，电针足三里使胃粘膜Gas贮存高，抑制G细胞胃泌素释放入及胃腔.由于循环Gas对靶细胞发挥抑酸用，因而血浆胃泌素减是电足三里抑制胃酸分泌作用的重要因
EGF是近年重研究的又一重要肠激素，不仅具有对胃肠粘的养作用，还具有抑酸用.它主要来源于颌下腺，也来源于贲门腺、胃腺、食管腺,9, 和十二指肠腺.动物验发现切除小鼠颌下腺胃液EGF含量下，酸诱发的鼠胃溃疡愈合明显延缓，给予外源性EGF加速溃疡愈合,10, .研究认为EGF通过诱导细胞DOC(乌氨酸脱羧酶)活性和增加胺合成抑制组织胺刺激的壁细泌能,11, .同时接作用于壁细胞及调G细胞释放胃泌素,12, 因而具有抑酸作用.本实验现电针足三里血浆EGF无变，但胃液及胃膜EGF含量明显增加.由
主要腔面作用粘膜细胞其次通过旁作用于壁细胞，因而认为胃液EGF及胃粘膜EGF增加在电针抑酸作用
经络与脏腑相关，形态与功能联,13, .推测电针足三里抑胃酸分泌，必然影响大鼠壁细胞泌酸过.但尚未国内相关文献报告.本实验观察到电针足三里后球形壁细内线粒体肿胀，有大量的粗面内质网和滑面小管泡扩张，说明壁细胞功能很活跃，同时发现泌酸小不扩张，内液量相对不足，管状囊缩小，微毛短，互靠近，囊泡数量不减少，提示分泌小管功能低下，壁细胞处于酸泌静止.有人观察到，当壁细胞兴奋后，酸分旺盛，小管泡数量迅速减少，同时顶端胞膜逐渐扩，泌小管分支并与细胞顶端配合，分泌小管壁上微绒毛延长变密，产生泌酸效应.我们未观察到这些现象.一般为泌酸管扩张，泌表面积增大提示产酸多或有酸积累，本验中对照组和阴交穴组泌酸小管均处于扩张状态，而足组相不张，因此证明电针足三里抑制了壁细胞酸及泌酸小管的排酸功能，而胃酸分下降.综上所述，电针足三里抑制大鼠胃酸分泌，可过减少血浆及胃Gas，增加胃液及胃粘EGF含，抑制壁细胞泌酸小管功能，而达到抑酸作用.但目针刺研究中观察到的肽类激素，而激素间相互关系又很复杂，因有待进一
参考文献:
,1,Zhao BM，Huang YX.Regulative effects of acupuncture on
se-cretory function of the stomach ,J,.Zhenci Yanjiu(Acupunct
Res)，2000;25(2):89-91.
,2,Zhao BM，Huang YX，Wang QL，Chu ZH，Zhao NX.Effects of
electroacupuncture on gastric acid secretion and its relation-ship with gastric and epidermal growth factor in rats ,J,.Shijie Huaren
Xiaohua Zazhi(World Chin J Digestol)，2000;8(3): 271-278.
,3,Tougas G，Yuan LY，Kadamaker JW.Effect of acupuncture on gastric acid secretion in healthy male voluncteers ,J,.Dig Dis
Sci，1992;37(10):1576-1582.
,4,Dewy CL，Shi Y，Zhen JX.Acupuncture-experimenterology ,M,.1st Ed.Beijing:Renmin Weisheng Cubanshe(People’s Health
Publishing House)，1998:7.
,5,Shen DK，Pan CH，Quan WX.Research on treating rats stress peptic ulcer with electroacupuncture ,J,.Zhenjiu Xuebao(J Acupunct
Moxibus)，1992;8(3):34-36.
,6,Cheng X.Effect of circadian rhythm on the action of acupunc-ture to prevent the formation of experimental gastric ulcer ,J,.Zhenci Yanjiu(Acupunct Res)，1992;17(2):117-120.
,7,Jin HO.Inhibition of acid secretion by electrical acupuncture is mediated via beta-endorphin and somatostatin ,J,.Am
J Physi-ol，1996;271(3pt1):G524-G530.
,8,Sun DY，Huang YX，Cu ZH，Gao W，Wang QL.Effects of
electroacupuncture on the pressure in pylopic antrum and plasma
somatostatin，nitric oxide content in dogs ,J,.Di-si Junyi Dax-ue
Xuebao(J Fourth Mil Med Univ)，1999;20(8):681-683.
,9,Sarosiek J，Hetzel DP，Yu Z，Piascik R，Li L，Rourk RM，
Mc-callum RW.Evidence on secretion of epidermal growth factor by the esophageal mucosa in humans ,J,.Am J Gastroenterol，1993;88
(7):1081-1087.
,10,Furukawa O，Okabe S.Cytoprotective effect of epidermal growth factor on acid-and pepsin-induced damage to rat gastric epithelial cells:Roles of Na+ /H+ exchanges ,J,.J Gastrenterol
Hepatol，1997;12(5):353-359.
,11,Chew CS，Wakamara K，Petropoulas AL.Multiple actions of
epidermal growth factor and TGF-alpha on rabbit gastric pari-etal cell function ,J,.Am J Physiol，1994;267(5pt1):G818-G806.
,12,Ford MG，Valle JD，Soroka CJ，Merdlant X.EGFR activation
stimulates endogenous gastrin gene expression in canine G cells and human gastric cell cultures ,J,.J Clin Invest，1997;99
(11):2762-2771.
,13,Zhou YP.Correlation between channels-collaterals and viscera-the focus in the study of the theory of channels and collaterals ,J,.Zhenci Yanjiu(Acupunct Res)，1999;24(3):238-241.
电针调控大鼠胃酸分泌的机制.doc
电
者:赵保民，黄新，赵宁侠，刘梅，尚磊，黄梅，
【键词】 电针 关键词: 电针;足三里;胃酸;胃肠
摘 :目的 探讨电
只SD大鼠随机分为5组，在清醒状态下针刺双侧足三里穴，以空
白照、非经非穴作照，三阴交穴作经穴对照.同步测
pH值及胃液酸度，
和皮生长因子(EGF)含量，透射电镜观察胃粘膜腺
构. 结果 电针
,(0.30?0.11)vs(0.63?0.12)mL，P<0.01,，
低,(30?3)vs(41?1)mmol L-1 ，P<0.05,，胃
粘膜Gas含
血浆Gas含
胃液Gas无变化;胃液
(1.8?0.4)μg L-1 和(5.1?0.8)vs(2.4?0.4)μg g-1 ，
P<0.01,，浆EGF无变化.胃壁细胞泌酸小管不扩
盈足，且数量不减
变. 结论 电针
Gas，增加胃粘膜、液EGF含量;电针足三里可改变
结，抑制胃壁细
Keywords:electroacupuncture;zusanli;gastric acid;gas-trointestinal hormones Abstract:AIM To investigate the regulative mechanism of electroacupunture(EA)on gastric acid secretion in rats.METHODS SD rats(n=75)were randomized into5groups:Control group，non-
point group，Sanyinjiao group，zasanli group，and unite group.All rats
in consciousness were stimulated by electroacupuncture except control group.We measured the pH of fasting gastric juice as well as its vol-ume
and acidity.Meanwhile radioimmunoassay was applied to assay the contents of gastrin(Gas)and epidermal grouth factor(EGF)in
plasma，gastric juice and gastric mucosa tis-sue.Cellular ultra-microstructure of gastric mucosa coat was observed under a fransmission electron microscope.RESULTS After EA，it was discovered that the
volume of the fasting gastric juice significantly reduced(0.30?0.11)vs
(0.63?0.12)mL，P<0.01，and the acidity of the gastric juice significantly dropped(30?3)vs(41?1)mmol L-1 ，P<0.05，and
the pH of gastric juice rose.EA stimulation of zusanli led to a drop of plasmic Gas(84?22)vs(108?30)ng L-1 ，P<0.01，a rise of Gas
in gastric mucous coats(136?17)vs(73?4)ng g-1 ，P<0.01，but
little change in Gas in gastric juice.Besides，there were some other changes ob-served.EGF of both gastric juice and gastric mucous coat in-
creased(3.2?1.1)vs(1.8?0.4)μg g-1 ，P<0.01，and(5.1?0.8)
vs(2.4?0.4)μg g-1 ，P<0.01respectively wheres plasmic EGF didn’t change，were unfilled and didn’t decrease in their number.The above indexes in non-point group were not different from those of control
group(P<0.05).CONCLUSION EA stimulation of zusanli can inhibit Gas release，reduce Gas contents in plasma and gastric juice，
enhance contents of EGF in gastric mucosa and juice，change ultra-
microstructure of gastric gland cells，and inhibit the se-cretory function of acinotubules in paritetal cell.Finaly，The gastric acid secretion is decreased. 0 引言 中医认为，经络内属脏腑、外络肢
节，胃与脾互为表里，相互影响，针刺经络腧穴，可激发内源性生
理调节，影响饮食受纳、腐熟与运化.现代实验研究
对酸分泌具有调节
如调节胃肠激素
构，进而影响胃酸分，尚未见有关研究报告.我们在观
酸泌变化的同时研
况,2, ，观察到腺细胞超微结构的变化.旨在探讨电
对大胃酸分泌的调控机
SD健康大鼠75只(本校实验动物中心提供)，体质量200,
250g，12,14wk，雌雄兼配，随机分为正常对照组、
足里穴、三阴交穴
每15只.采用我自行设计并改造的实验笼，大鼠自
笼，无麻醉无创伤完清醒状态下以G6805-A型电
东头医疗仪器厂)
压20,35V，调
30min.对照组每日规定时间在笼内滞留30min，不行
组大每日同一时辰电针
方 参照《中兽医针灸学》和《大鼠的解剖和组
位.足三里穴定位于
非定位于足三里穴0.5cm处;三阴交定位于大鼠
10mm处.各实验组鼠于电针结束前禁食24h，自由
即刻im846合剂1mL kg-1 .麻醉后即刻断头取血，血
有100g L-1 EDTA20μL和抑肽酶100U的试管中，
4000r min-1 心20min，取上清液，-70?保存待测
完取胃，于幽门一
后抽胃液，计量，用理盐水稀释至2mL，100?水
4000r min-1 心20min，取上清液装，-70?存待测激素.胃冷冻前留0.5mL，以1g L-1 酚为指示剂，0.01mol L-1 NaOH进行滴定，算胃液酸度(mmol L-1 ).取胃液后留1.0cm×0.3cm×0.5cm胃组织块于40g L-1 多聚甲醛液中定备于免疫组检测.取胃粘膜小块组织于2.5g L-1 戊二醛中固定用于透射电观察.其余胃粘膜放入称量瓶中，称体后加入生盐水1mL，沸水煮10min，加0.1mol L-1 醋酸1.0 mL，倒入匀浆管中，用离散器匀浆，取上清液0.1mL L-1 NaOH滴定pH至7.4，离心(4?，4000r min-1 ，20min)，-70?保存待测素.血浆、胃液及胃粘膜组织、胃泌素和皮生因含量测定用放免盒自北方生物技术研究所(94)卫药准R-25号.利用均相竞抑制原理平衡饱和法测定血浆、液及胃粘膜匀浆的Gas和EGF含，严格按说明操作行，数据由FJ-2003-50G型γ计数仪电分析得出.透射电镜用胃粘膜组织标本经2.5g L-1 戊二醛固4?，2h，PBS反换洗2,3h，10g L-1 锇酸固定2h，然后递度乙醇脱水，浸蜡与包埋，制作超薄切片，载于铜网，在JEM-2000EX透电镜下观察胃壁细胞、主细胞及内分泌细超微结构. 统计学处理:实验数据以x ?s表示，本校统学教研室提供的SPLM软件系统行数据分析，两两比较差分析，直线相关及Bartle tt差性检验. 2 结果 2.1 电针后大鼠空腹胃液量、pH胃液酸度 电针后足三里穴组和三阴穴空腹胃液显著下(P<0.01)，足三里组和联合穴组胃酸轻度降低(P<0.05)，胃液pH升高(P<0.05，Tab1)，其各组无明显变化.表1 电针后大鼠胃液量、pH及液酸度(略) 2.2 电针后大鼠胃液、浆Gas和EGF含量 足里穴组浆、胃液Gas均下降，三阴交穴组和联合穴位组浆Gas低(P<0.01)，胃液Gas升高(P<0.01).三阴穴组浆EGF低(P<0.05)，胃EGF升高(P<0.01，Tab2)，足三里穴组浆EGF无变化(P>0.05)，胃液EGF高(P<0.01).联穴位组胃液EGF下降. 表2 针后鼠血浆、胃液和胃粘膜GasEGF含量(略) 2.3 电针后大鼠胃粘膜Gas和EGF含量 电针足三里使大胃粘Gas和EGF含量均显著增加(P<0.01)，三阴交穴组胃膜Gas下降(P<0.01)，EGF含量升高(P<0.05，Tab2)，非经非穴组粘膜及联合穴组均无显著变化. 2.4 透射电镜观察结果 正常大鼠胃壁细胞体积大，球形，大圆形核，细胞内大量线粒体轻度肿，内质网不张，泌酸小管数量不，扩状态，微绒毛稀疏.足三穴组壁细胞体积最大，大球形，胞内线粒体丰富，明显肿胀，内质多且明显扩张，酸小管及小管充盈不足，不扩
拥挤.三阴交穴组壁细胞质疏松空虚，线粒体明显肿胀，面内质网不扩张，泌酸小管扩张态，充盈，微绒毛疏. 3 论 针对胃分泌机能的影响，论在人还是动物身上，研究报道较多，但所结并不一致.中医临床实验研究认为，对健康人刺足三里可使胃酸分下,3, ，在疾状态下针刺足三里则具有双向调节作用,4, .以正常实验动物为对象的研究中，多数实验果是抑胃酸分泌，如对带有胃瘘狗进行慢性实验，针刺足三里可使碳酸氢盐和钠分泌增加，而胃酸分泌减少，胃液酸度从(48?12)mmol L-1 下降到(8?3)mmol L-1 ，即使在Ach负荷时，也使电足三里大鼠胃酸分泌减少，pH升高.但有报使胃酸胃白酶显增加，恒健生等观察到电针后胃酸排出量明显升高，停针40min才接近针前水平.本实验参照恒健生采的电针参数，结果足三组不胃液量减少，胃酸度也明显下降，表明电针三里对清醒大鼠胃酸分泌具有明显抑制作用，其他研究报告也类结果 ,5，6, . 中医理认为足阳明胃经属胃络脾，足太阴脾经属脾络胃，二者一阳一阴，一脏一腑，构成里相合关系，相互作用，互相影响.本实验结果表明针刺足三里引起胃液量下降，pH升高，胃酸度下降，针刺三阴交穴，胃液量减少，不降低液酸度，说明二穴对胃酸分其有不同的影响.联合刺激二胃酸度降低和pH升高，胃液量减少，提示二穴联合抑制胃酸分同时，提高胃粘液分泌.与中医关足里为强穴和保穴的认识相一致.三阴交作为配穴治疗疾病亦有重要的临床意义.现代研究明，胃肽类激在调节胃酸分泌机制中有重要用，在针刺对胃酸分泌的调节中导地位.Jin,7, 针刺足三里引起胃酸分泌减少，时血液中生长抑素(SS)，管活肽(VIP)和内啡肽含量增加.针刺狗足G细胞胃泌素含量增加，而血浆Gas下.针刺人三穴血清Gas水增高，而胃蛋酶原下降，胰多肽释放受抑制，长抑素和胃动素无变化.大勇等,8, 电针狗三穴血浆及胃粘膜Gas均增高，生长抑素、蛙皮素含量下降.我们察到针大鼠足三里胃酸分下降，时血Gas及胃液Gas减少，胃粘膜Gas增高.综上所述，电针足三里使胃粘膜Gas贮存增高，抑制G细胞胃素释入血及胃腔.由于循环Gas对靶胞发挥抑酸作用，因而血浆泌素减少是电针足三里抑制胃酸分泌作用的重要因素之. EGF是近年来重点研究的一重要胃肠素，不仅具有对胃肠粘膜营养作用，还具有抑酸作.它主要来源于颌下腺，也来源于贲门腺、胃腺、食管腺,9, 和十二指腺.动物实验发现除下胃液EGF含量下降，醋酸诱发的鼠胃溃疡愈合明显延缓，给予外源性EGF后加速溃疡愈
DOC(乌氨酸脱羧酶)活和增加多胺合成抑制织刺激的壁胞泌功能,11, .同直接作用于壁细胞及调节G细胞释胃泌素,12, 而具有抑酸作.本实发现电针足三里血浆EGF无变化，但胃液及胃粘膜EGF量明显增加.由于EGF主要通过腔面作用于粘膜细胞其次通过旁分泌作用于壁细胞，因而认为胃液EGF及胃粘膜EGF增在电针抑酸作用中发挥定用. 经络与脏腑相关，形态与功能联系,13, .推测电针三里抑制胃酸泌，必然影响大鼠壁细胞泌酸过程.但尚未见国内外相关文献报告.本实验观到电针足三后大球形壁细胞内线粒体肿胀，有大量的粗面质网和面小管泡扩张，说明壁细胞功能很活跃，同时发现泌酸小管不扩张，内量相对不足，管囊泡缩小，微绒短，相互靠近，但囊泡数量不减少，提示分泌小管功能低下，壁细胞处酸分泌静止期.有人观察到，当壁细胞兴奋，酸分旺盛，小管泡数量速减少，同时顶端胞膜逐渐扩展，分泌小管分支并与胞顶端配合，分泌小壁上微绒毛延长变密，生泌酸效应.我们未观察到这些.一般认酸小扩张，泌酸表面积增大提示产酸多或有酸积累，实验中对照组和三阴交穴组泌酸小管均于扩张状态，足三里组相对不扩张，因此证明电针足三里抑制了壁细胞产酸及泌酸小管排功能，因而胃酸泌下降.综上所述，电针足三里抑制大鼠胃酸分，可通过减少血浆及液Gas，增加胃液及胃粘EGF含量，抑制壁细胞酸小管功能，而达到抑酸作用.但目前中观察到的肽类激素有限，而激素间相互关又很复杂，因此
电针调控大鼠胃酸分泌的机制_医学论文
电针调控大鼠胃酸分泌的机制_医
电针调控大鼠胃酸分泌的机制_医
作者:赵保民，黄裕新，赵宁侠，刘梅，尚磊，黄梅，
【关键词】 电
关键词: 电针足三里胃胃肠
摘 要:目的 探讨针足三里穴对大鼠胃酸泌的调控
法 75只SD大鼠随机为5组，在清醒状态针刺双侧
以空白对照、非经非穴对照，三阴交穴作经对照.同
量、pH值及胃液酸度，免法测定血浆、胃液、粘膜胃泌
和表皮生长因子(EGF)含量，透射电镜观察胃膜腺细胞
结果 电针刺足三里穴大鼠空胃液量明
mmol L-1 ，0.05,，胃液pH升高.胃粘膜Gas
vs(73?4)ng L-1 ，0.01,，血浆Gas含量下降,(84?22)vs(108?30)
ng g-1 ，0.01,，胃液Gas无变化胃液及粘膜EGF
,(3.2?1.1)vs(1.8?0.4)μg L-1 和(5.1?0.8)vs(2.4?0.4)
μg g-1 ，0.01,，血浆EGF无变化.胃壁胞泌酸小管
泡充盈不足，且数量不少，非经非穴组及空对照组各
著变化. 结论 电针足
Gas，增加胃粘膜、胃EGF含量电针足三里改变胃壁
构，抑制胃壁细胞泌酸小管功能、降胃酸分
Keywords:electroacupuncturezusanligastric acidgas-trointestinal hormones
Abstract:AIM To investigate the regulative mechanism of
electroacupunture(EA)on gastric acid secretion in rats.METHODS SD rats(n=75)were randomized into5groups:Control group，non-point group，Sanyinjiao group，zasanli group，and
unite group.All rats in consciousness were stimulated by
electroacupuncture except control group.We measured the pH of
fasting gastric juice as well as its vol-ume and acidity.Meanwhile radioimmunoassay was applied to assay the contents of gastrin(Gas)and epidermal grouth factor(EGF)
in plasma，gastric juice and gastric mucosa tis-sue.Cellular ultra-microstructure of gastric mucosa coat was observed under a fransmission electron microscope.RESULTS After EA，it was
discovered that the volume of the fasting gastric juice significantly reduced(0.30?0.11)vs(0.63?0.12)mL，0.01，
and the acidity of the gastric juice significantly dropped(30?3)vs(41?1)mmol L-1 ，0.05，and the pH of gastric juice
rose.EA stimulation of zusanli led to a drop of plasmic Gas(84?22)vs(108?30)ng L-1 ，0.01，a rise of Gas in gastric
mucous coats(136?17)vs(73?4)ng g-1 ，0.01，but little change
in Gas in gastric juice.Besides，there were some other changes
ob-served.EGF of both gastric juice and gastric mucous coat in-creased(3.2?1.1)vs(1.8?0.4)μg g-1 ，0.01，and(5.1?0.8)
vs(2.4?0.4)μg g-1 ，0.01respectively wheres plasmic EGF didn’t change，were unfilled and didn’t decrease in their number.The above indexes in non-point group were not different from those of control group(0.05).CONCLUSION EA stimulation
of zusanli can inhibit Gas release，reduce Gas contents in
plasma and gastric juice，enhance contents of EGF in gastric mucosa and juice，change ultra-microstructure of gastric gland cells，and inhibit the se-cretory function of acinotubules in paritetal cell.Finaly，The gastric acid secretion is decreased.
0 引言
中医认为，经络内脏腑、外络肢节，胃脾互为表
响，针刺经络腧穴，可发内源性生理性调节，影响饮食
熟与运化.现代实验研表明，针灸对胃酸分具有调节
与某些胃肠激素有关,1, .但针刺如何调节肠激素的
调节脏腑细胞分子构及超微结构，进影响胃酸分，尚未见有关究报告.我们在察针刺胃酸分泌变化的同时研究了胃泌素、表皮生长子含量及受体表达情况,2, ，观察到胃细胞超微结构的变化.旨在探讨电针足三穴对大胃酸分泌的调控
1 材料和方
1.1 材
SD健康大鼠75只(本校实验动物中提供)，体质量200,250g，12,14wk，雌雄兼配，随机为正对照组、非经非穴组、足三里穴、三阴组和联合穴位组(足三里+三阴交)，共5组，每组15.采用我们自行设计并改造的实验笼，大鼠自行钻进后关笼，在无麻醉无创完全清醒状态以G6805-A型电针疗仪(广东头医疗仪器厂)行电针，参选择频率围2,15Hz，空载压20,35V，调制脉为疏密波，双下肢轻微颤抖宜，时间30min.对照组每日按规定时在笼内滞留30min，不针刺.余组大鼠
1.2 方
参照《中国兽医针灸学》和《大鼠的解剖和组织》确定穴位.足三里穴定位于大鼠后肢膝关节下方腓骨小头下约5mm处非经非穴定于足三里穴0.5cm处三阴交定于大鼠后肢踝上10mm处.各实验组大鼠于针结束前食24h，饮水，结束后即刻im846合剂1mL kg-1 .麻后即刻断头取血，血液置于加有100g L-1 EDTA20μL和抑肽酶100U的试管中，摇匀，4?，4000r min-1 心20min，取上清液，-70?保存待测激素.双结扎法完取胃，幽门一端切一小口，插入锑电极，读取pH值，然后抽胃液，计量，生理盐水稀释至2mL，100?水煮5min，4000r min-1 心20min，取上清液分装，-70?保待测激素.胃液冷冻前留0.5mL，以1g L-1 酚红为指示，0.01mol L-1 NaOH进行滴，计算胃液度(mmol L-1 ).取胃后留取1.0cm×0.3cm×0.5cm
聚甲醛液中固定备用于免疫组检测.另取胃膜小块组织于2.5g L-1 戊二醛中定用于射电镜观察.余胃粘放入称量瓶中，称体质后加入生理盐水1mL，沸水煮10min，加0.1mol L-1 醋酸1.0 mL，倒入匀浆管中，用离散器匀浆，取上清液0.1mL L-1 NaOH滴定pH7.4，离心(4?，4000r min-1 ，20min)，-70?保存待测激素.血浆、及胃粘膜组织、胃泌和表皮生长因子含量测定采的放免盒购自北方生物技术研究所(94)药准字R-25号.利用均竞争抑原平衡饱法测定血浆、胃液及胃粘膜匀浆的Gas和EGF含量，
-2003-50G型γ计仪电脑分析得出.按说明
透射电镜用胃粘膜组标本经2.5g L-1 戊二固定4?，2h，PBS反复换洗2,3h，10g L-1 锇酸固定2h，然后递度乙醇脱，浸蜡与包埋，制作超薄切片，载于铜网，在JEM-2000EX透射电镜下察胃壁细、主细胞内分泌细胞超
统计学理:实验数以x ?s表示，本校统计学研
2 结果
2.1 电针后大鼠空腹胃液量、pH及胃
电针后足三穴组和三阴交穴空腹胃液量著下降(0.01)，足三里和联穴组胃酸轻度降低(0.05)，胃液pH升高(0.05，Tab1)，其余各无明显变化.表1 电针后大鼠空腹胃
2.2 电针后大鼠胃液、血浆Gas和EGF含量
足三里穴组血浆、胃液Gas均下降，三阴交穴组和合穴位组血浆Gas降低(0.01)，胃Gas升高(0.01).三阴交穴血浆EGF降低(0.05)，胃液EGF升高(0.01，Tab2)，足三里穴组血浆EGF无变化(P>0.05)，胃液EGF增高(0.01).联合穴位组胃液EGF降. 表2 电针大血浆、液和胃粘膜Gas和EGF含量(
2.3 电针后大鼠胃粘膜GasEGF
电针足三里大鼠胃粘膜Gas和EGF含量均显著加(0.01)，三阴交穴组胃粘膜Gas下降(0.01)，EGF含量升高(0.05，Tab2)，非经非穴组胃粘膜及
2.4 透射电镜观察结
正常大鼠胃壁细胞体积大，呈球形，大圆形核，细胞内量线粒体轻度肿胀，质网不扩张，泌酸小管数多，呈扩张状态，微绒毛疏.足三穴组壁细胞体积最大，大球形，胞内线粒体丰富，显肿胀，质网多且明显扩，泌酸管及小管泡充盈不足，不扩张，微绒毛密集拥挤.三阴交穴壁细胞胞质疏松空虚，线粒体无明显肿胀，滑面质网不扩张，泌酸管呈
针刺对胃分泌机能的影响，无论在人还是动物身上，究报道较多，但所得结果并不一致.中医临床实验研究认，对健康人刺足三里可使胃酸泌下降,3, ，在疾病状态下针刺足三则具有双向调节作用,4, .以正常实验动物为对象的研究中，多数实验果是抑制胃酸分泌，如带有胃瘘的狗进慢性实验，针刺足三里可使碳酸氢盐和钠分泌增加，而胃酸分泌减少，胃液酸度从(48?12)mmol L-1 下降到(8?3)mmol L-1 ，即使在Ach负荷时，也使电针足三大鼠胃酸分减少，pH升高.但也有报告使酸胃蛋白酶明显增加，恒健生观察到电针后胃酸排出量明显升高，停后40min才接近针前水.本实验参照恒健生采用的针参数，结果足三里组不仅胃液量减少，胃酸度也显降，表明电足三里对清大鼠胃酸分泌具有明显抑制作用，他究报告也有类似结
,5，6, .
中医论认为阳明胃经属胃络脾，足阴经属脾络胃，二者一阳一阴，一脏一腑，构表里相合关系，相互
实验结果表明针刺足三里引起胃液量下降，pH升高，胃酸度下降，针刺三阴穴，胃液量减少，但不降低胃液酸度，说明二穴对胃酸分泌其有不同的影响.联合激二穴胃液酸降低和pH升高，胃液量不少，提示二穴合抑制胃酸分泌同时，提高胃粘液分泌.中医关于足里为强壮穴和穴的认识相一致.三阴交为配穴治疗疾病亦有重要的临床意义.现代研表明，胃肠肽类激素在调节胃泌机制中具有重要作用，在针刺对胃酸分泌的调节中占主导地位.Jin,7, 针刺足三里引起狗胃酸分泌减少，同血液中生长抑素(SS)，血管活性(VIP)和啡肽量增加.针刺狗足三里G细胞胃泌含量增加，而血浆Gas下降.针刺人足三里穴后血清Gas水平增高，而胃白酶原下降，胰多释放受抑制，生长抑素和胃动素无变化.孙勇等,8, 电狗足里穴血浆及胃粘膜Gas均增高，生长抑素、蛙皮素含量下降.我们观察到刺大鼠足三里胃酸分泌下降，同时血浆Gas及胃液Gas减少，胃粘膜Gas高.综上所述，电针足三里使胃膜Gas贮存增高，抑制G细胞胃素释放血及胃腔.由循环Gas对靶细发挥抑酸作用，因而血浆胃泌素减少是电针足三里制酸分泌作用
EGF是近年来重点研究的又一重要胃肠激素，不仅具有对胃肠粘膜的营养作用，还具有抑酸作用.主要来源颌下腺，也来源于门腺、腺、食管腺,9, 和十指肠腺.动物实验切除小鼠颌下腺胃液EGF含量下降，醋酸诱的鼠胃溃疡愈合明显缓，给予外源EGF后加速溃疡愈合,10, .研究认为EGF通过诱导细胞DOC(乌氨酸脱羧酶)活和增多胺合成来抑制组织刺激壁细胞酸功能,11, .同时直接作用壁细胞及调G细胞释放胃泌素,12, 因具有抑酸作用.本实验发电针足三里血浆EGF无变化，胃液及胃粘膜EGF含量显增加.由于EGF主要过腔面作用于粘膜细胞其次通过分泌作用壁胞，因而为胃液EGF及胃粘膜EGF增加在电针抑酸
经络与脏腑相关，形与功能相联系,13, .推测电
制胃酸分泌，必然影响鼠壁细胞泌酸过程.尚未见国
献报告.本实验观察到针足三里后大球形壁胞内线粒
大量的粗面内质网和滑小管泡扩张，说明壁胞功能很
发现泌酸小管不扩张，管液量相对不足，管状泡缩小，
相互靠近，但囊泡数量减少，提示分泌小管能低下，
酸分泌静止期.有人观到，当壁细胞兴奋后，酸分泌旺
数量迅速减少，同时顶胞膜逐渐扩展，分泌管分支并
配合，分泌小管壁上微毛延长变密，产生泌效应.我
这些现象.一般认为泌小管扩张，泌酸表面增大提示
酸积累，本实验中对照和三阴交穴组泌酸小均处于扩
足三里组相对不扩张，此证明电针足三里抑了壁细胞
小管的排酸功能，因而酸分泌下降.综上所，电针足
鼠胃酸分泌，可通过减少浆及胃液Gas，增加
抑制壁细胞泌酸小管功，而达到抑酸作用.目前针刺
到的肽类激素有限，而素间相互关系又很复，因此有
讨.
参考文献:
,1,Zhao BM，Huang YX.Regulative effects of acupuncture on se-cretory function of the stomach ,J,.Zhenci Yanjiu
(Acupunct Res)，200025(2):89-91.
,2,Zhao BM，Huang YX，Wang QL，Chu ZH，Zhao NX.Effects of electroacupuncture on gastric acid secretion and its relation-ship with gastric and epidermal growth factor in rats
,J,.Shijie Huaren Xiaohua Zazhi(World Chin J Digestol)，
20008(3): 271-278.
,3,Tougas G，Yuan LY，Kadamaker JW.Effect of acupuncture on gastric acid secretion in healthy male voluncteers ,J,.Dig
Dis Sci，199237(10):1576-1582.
,4,Dewy CL，Shi Y，Zhen JX.Acupuncture-experimenterology ,M,.1st Ed.Beijing:Renmin Weisheng Cubanshe(People’s Health
Publishing House)，1998:7.
,5,Shen DK，Pan CH，Quan WX.Research on treating rats stress peptic ulcer with electroacupuncture ,J,.Zhenjiu Xuebao(J
Acupunct Moxibus)，19928(3):34-36.
,6,Cheng X.Effect of circadian rhythm on the action of acupunc-ture to prevent the formation of experimental gastric ulcer ,J,.Zhenci Yanjiu(Acupunct Res)，199217(2):117-120.
,7,Jin HO.Inhibition of acid secretion by electrical acupuncture is mediated via beta-endorphin and somatostatin ,J,.Am J Physi-ol，1996271(3pt1):G524-G530.
,8,Sun DY，Huang YX，Cu ZH，Gao W，Wang QL.Effects of
electroacupuncture on the pressure in pylopic antrum and plasma somatostatin，nitric oxide content in dogs ,J,.Di-si Junyi
Dax-ue Xuebao(J Fourth Mil Med Univ)，199920(8):681-683.
,9,Sarosiek J，Hetzel DP，Yu Z，Piascik R，Li L，Rourk
RM，Mc-callum RW.Evidence on secretion of epidermal growth factor by the esophageal mucosa in humans ,J,.Am J
Gastroenterol，199388(7):1081-1087.
,10,Furukawa O，Okabe S.Cytoprotective effect of epidermal growth factor on acid-and pepsin-induced damage to rat gastric epithelial cells:Roles of Na+ /H+ exchanges ,J,.J Gastrenterol
Hepatol，199712(5):353-359.
,11,Chew CS，Wakamara K，Petropoulas AL.Multiple actions of epidermal growth factor and TGF-alpha on rabbit gastric pari-etal cell function ,J,.Am J Physiol，1994267
(5pt1):G818-G806.
,12,Ford MG，Valle JD，Soroka CJ，Merdlant X.EGFR activation
stimulates endogenous gastrin gene expression in canine G cells and human gastric cell cultures ,J,.J Clin Invest，199799
(11):2762-2771.
,13,Zhou YP.Correlation between channels-collaterals and
viscera-the focus in the study of the theory of channels and
collaterals ,J,.Zhenci Yanjiu(Acupunct Res)，199924
(3):238-241.
电针调控大鼠胃酸分泌的机制_论文
电针调控大鼠胃酸分泌的
作者:赵保民～裕新～赵宁侠～刘梅～尚～黄梅～
【关键词】 电针
关键词: 电针;足三里;胃;胃肠
摘 要:目的 探讨电针足三穴对大鼠胃酸分泌的调控机制. 方法 75只SD大鼠随机分5组～在清醒状态下针刺双侧足三里穴～白对照、非经非穴作对照～三阴交作经穴对照.同测定胃液量、pH值及胃液酸度～放免法测定血浆、胃液、胃粘膜泌素,Gas,和表生长因子,EGF,含量～射电镜观察胃粘膜腺细胞超微结构. 结果 电针刺激足三里后大鼠空腹胃液量显减少,,〒,vs,〒,mL～P,～胃液EGF增高,P<,.联合穴位组胃液egf下. 表2="">
电针后大鼠胃粘膜GasEGF
电针三里使大鼠胃膜GasEGF含量显著增加,P<><><>
1 / 2
透射电镜观察结果
正常大鼠胃壁细胞积大～呈球形～大圆形核～细内大量线粒体轻度肿～内质网不扩张～泌酸数量不多～呈扩张状态～微绒毛稀疏.足三里穴组壁细胞体积最大～大球形～胞内线粒体丰富～明肿胀～内质网且明显张～泌酸小管及小管泡充盈不足～不扩张～微绒毛密集拥挤.三阴交穴组壁细胞胞质疏松空虚～线粒体无明显胀～滑面内质网不张～泌酸小呈扩张状态～充盈～微
3 讨论
针刺对胃分泌机能影响～无论在人还是动物身上～研究报道较多～但得结果并不一致.中医临实验研究认为～对健康人刺足三里使胃酸分泌下降,3, ～在疾病状态下针刺足三里则具有向调节作用,4, .正常实验动物为对象的研究中～多数实验结果是抑制胃酸分～如对带有胃瘘的狗进行慢性实验～针刺足三可使碳酸氢盐和钠泌加～而
2 / 2
