A 只含有RNA 生物，遗传物

B 只含有DNA 生物，遗传物

C 既有DNA 又有RNA

D 既有DNA 又有RNA

（07年潍坊）同生物含有的核酸种类不同。原核生物真核生物时含有DNA 和RNA ，病毒体内含有DNA 或RNA ，下列各种生物关于碱、核酸、五碳糖种类的描述

解析 细菌细胞是原核细胞，豌豆毛细是真核细胞，已知核生物和真核生物同时有DNA 和RNA ，所以它们所含有的基有A 、T 、G 、C 、U 五种，核苷有4种脱氧核苷酸和4种核糖核苷酸，所以核苷酸的种类有种，五碳糖有核糖和脱氧核糖两种，故B 正确。而T 4噬菌体和草花叶病体含有DNA 或RNA ，碱基、核苷酸、

答案 B

2．肺炎双球菌中的S 具有多糖荚膜，R 型菌则不具有。下列叙

A ．培养R 型活细菌时加S 型菌的多糖类物质，能产生

B ．培养R 型活细菌加S 型菌的DNA 的完全水解产物，不

C ．培养R 型活细菌时加S 细菌的DNA ，能

D ．培养R 型活细菌时加S 细菌的蛋白质，不能

解析 肺炎双球的转化实验证明，DNA 是遗传物质。培养R 活细菌时只加入S 型细菌的DNA ，才化成具荚膜的S 细菌；加入S 型细菌的多糖类物质、S 型菌的DNA 的完水解物、S 型细菌的蛋白

答案 A

赫尔希通过T 2噬菌体侵染细菌的实验证明DNA 是传物质，验包括4个步：①培养菌体，② 35S 和32P 标记噬菌体，③放性检测，④离分离。实验步骤的先后

A. ①②④③ B. ④②①③ C. ②①④③ D. ②①③④

解析 T 2噬菌是由蛋白质外壳和DNA 组成的，用放射性同位35S 和32P 分别对其进行记，然后让染细菌（培养噬菌体），再进行离心分离，最后进行放射性检测，现进入细菌内的

答案 C

2006年6月，包括中国在内的六国政府和有关科学家宣布，类已经完对自身细胞中24条染色体的氧核苷酸序列的测定，人类基因组草图绘制成功。据此答下列问：被测的氧核苷酸所含有的碱

A ．腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶

B ．腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶

C ．腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧

D ．腺嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶、胸腺嘧啶

解析 由意可知，人类基因组计划中测的是人24条染色的脱氧苷酸序列。脱氧核苷酸含有四种碱基，分别为腺嘌

答案 A

某一DNA 子中，胞嘧啶与鸟嘌呤二者共占基总量46%，其一条链腺嘌呤占此链碱基量的28%，则另一条链上腺嘌呤占链碱基量的百分比

A ．46% B ．26% C ．54% D ．24%

解析 两条上的碱基通过键连起来成碱基对，碱基的组成遵循碱基互补配原则，即A=T、G=C，根据题意，胞啶与鸟嘌呤二者共占碱基总的46%，而这一例可反映在一条链上，而这条链上腺嘌呤占此链碱基量的28%，则这条链上的胸腺嘧啶的比例为1—46%—28%=26%，一链腺呤占此链碱基量的百分比应等于

答案 B

下列不是DNA 结构

A DNA 双链极性

B 碱基按嘌呤与啶，嘧啶与嘌

C DNA 分子排列中，条链上的脱氧核糖与磷

D DNA 螺旋沿中

决定DNA 分子遗传特

A ．脱氧核苷酸链上氧核糖与磷酸

B ．嘌呤总数与嘧啶总

C ．碱基互补配

D ．碱基排列顺序

解析 由DNA 子双螺旋结构得知组成DNA 的碱基虽然只有四种，但碱基对的排顺序却千变万化，此碱基对的列序就代表遗传信息，碱基对的排列顺序却千变万化构成了DNA 分的多样性，碱基对特定

答案 D

（09年湖北樊）某个DNA 片段由500碱基组成，G+C占基总数的34%，若该DNA 片段连续复制3次，第三次复制需要离的腺嘌呤脱氧核

A ．1 155 B ．1 320 C ．2 310 D ．2 640

解析

答案

解析

答案

解析

答案

原核生物中RNA聚合酶种类的研究

原核生物中RNA聚合酶种类

安徽农业科学,JournalofAnhuiAsa责任编辑张杨

原核生物中RNA聚合酶种类

赵赣(华南业大学生命科学院生物化学与分生物学,广东广51o642) 摘要从已有教材关于原核生物的RNA聚合酶类的描叙出发,指

问题,提出今后相关教材写中应强调只

级结构来看.原核生物的RNA聚合酶才

关键词原核生物iRNA聚合酶;四级

中图分类号S188文献标识A文章编

StudyontheTypesofRNAPolymeraseiIllProkaryote ZHAOGan(DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology,CollegeofLifeScience,S

outhChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou, Guangdong510642)

AbstractStartingfromthedescriptionofRNApolymerasetypesinprokaryoteinexistingteac

hingmaterials,theexistingproblemswereput forward.ItwaspointedoutthatonlyaccordingtoitsquaternarystructurecouldtheRNApoly

meraseinProkaryotebethoughttobeonlyone type.

KeywordsProkaryote;RNApolymerase;Quatemarystructure;Types

RNA聚合酶是细胞中催化DNA为模板合

酶.关于原核生物的RNA聚酶,由于大肠杆

合酶研究得较清楚,且其他菌中的RNA聚合

似,因而一般教材中都以大杆菌RNA聚合酶

介绍?.但目前关于原核生RNA聚合酶的

定的描述,因此,笔者对其进研究,旨在为原

聚合酶种类的清晰化提供

1对原核生物中RNA聚合酶种类

目前一般认为大肠杆菌或原核生物RNA聚合酶, 13,B,or以?亚基成,其成形式为dpp(?),其中 BB(?)为核心酶,盯为起始因子,并且认为细中的mR- NA,rRNA,tRNA均由它催化合成.但肠菌原核 生物的RNA聚合酶到底有多少种尚无定论,目前在不同版本 的教材里有不同的描述.的教材明确认为有1种,有 的则认有1种类型n,有的则回这个问题.笔 从RNA聚酶or因子的研究隋况来进行分析. 2原核

各种版本的教材中一般都指出,正是由不同的盯因子来 引导RNA聚合酶的全去识别不同的启子以转录不同的 因.如有的教材结道,大肠菌在正常情况下用大多 数基因录的盯因子是仃,此时RNA聚合酶全酶的组成形 是ppor.当环境发生变化时,大肠杆菌会关闭正在 的一些基因,而使用其他仃因子,以开启另一基因.当 度从37?(正的长温度)升至42?时,肠杆菌中的 rpoH基因会因部蛋白质变性后产生的解折叠蛋白质的积 的诱导而达其产物.盯与RNA聚合酶核心酶结合 后可以作用表达l7种热激蛋白基因.的活性很不稳定, 温度降低时,它的活性就迅速降低.在培养基缺乏氨 况下,大杆菌中的rpoN基因被激活而码,使细胞 转而利用其他氮源.许多细菌中都发了类似的盯因 子.有的材谈及枯草芽孢杆菌(B.subtilis)中也有种 仃因子,其中.是主要与RNA聚合酶合的因子"]. 作者简介赣(1965),男,西大余人,副教授,从事化学与

而从研究资料来看,在诸如高温,,渗透冲击,养缺 陷和生长进入稳定期等情况下,大肠

被诱导而表达仃.,并在一定程上能够取代仃核心结 合形成全酶,从而激活多数叮依赖

内外学者对不同细中的rpoS基因进行了多方面的深入研 究J.在革兰氏性好氧土壤细菌霉菌中至少已现了 多种形式的RNA聚合酶,而不同的RNA聚合酶具不同的 因子.因子能在链霉菌基因表达

有中心作用.

正如有的教材中总结的那,原核细胞内这

因子,它们指导RNA聚合酶作于含有特定列元的不 同启动子上.改变基因的表以适应环境

3结语

从以上分析可知,因子不同,则RNA聚合酶(全酶)就

不同,如果只是笼统地提大杆菌或原核生物中的RNA 聚合酶只有1种,就不好与教中或资料中有关不的RNA 聚合酶转录同的基因等叙相一,学生学习时也会引起 误解.因此,建议今后的教材编写与讲课过程中都应强: 只有从酶的级结构角度看,大

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(下转第5129

39卷9期郑乐娅等植物生长调节剂对稻新两6号光速率的

,值均低于CK.剑叶SPAD值,除齐穗20d低于CK

外,其他处理表现为2个时均

7.34%..

表1不同植物生长调节剂处对水稻剑叶净光合

Table1Effectofdifferentplantgrowthregulatorstreatmentsonnetphotosyntheticrateofrice

flagleaf

表2不同植物生长节剂处理对水稻生育后期,?值和剑叶SPAD值

lagleafduringlatergrowthstagesofrice 3讨论

江淮地区中稻生长期间,经常遇到持续

(2010年7月中,下旬气温>37oC,持续5d),这种高温胁迫

所造成的伤害常常导致中稻株早衰,瘪粒率

加j,严重减产.虽然许多种工作者致力于

的选育,但到目前为止仍未优良耐高温品种应

产,那么在中稻孕穗期(大8月上旬)叶面喷

生长调节剂,通过调控内源激素含量水平,实现对株C,N 两大代过程的调控,提高稻株的抗逆性,能否补偿前期 温伤害带来的

试验结果表明,应用作物学调技术,孕穗期和始穗 期叶面喷施植物生调节剂,如NAA—Na,吲哚乙酸,赤霉素 和6-BA等可提高稻株剑叶叶素含量,延缓叶片衰老, 改善植株生育后期光合性能,提高水稻产量.因此,该措 可以作为,种偿途径轻期的伤害,且使用该措施 后水

试验结果同时表明,不同类型调剂对稻光合能影 响效果不同.孕穗期和始穗期喷施NAA—Na,吲哚乙酸,赤 素,6-BA和美洲,可以提高供试水稻的剑叶光合率,有 效地延缓期衰老;喷施20%三唑酮或磷酸二氢钾(3 L)+尿素(17L)降低了供试水稻的剑叶光速率.因 此,施适宜的植生长节剂极为关.想获得产

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［精品］考点12．原核生物的种类和原核细胞的结构特点

考点12(原核生物的类和原核细胞

原核生物和真核生物都是具有细胞构的生，病毒有细胞结构不属于核生物也不属于真核生物。原生物由原核细胞组成，包细菌、蓝藻、放线菌、支体、衣原体、立克次氏体等;绝大数生物都是真核生物，核物由真核细胞组成。原核细胞和真核细胞存在多方面的差别，最主要的是细胞核的差别，原核细胞没有型的细胞核，仅仅在拟核。除细核的差外，原核细无染体，核体外的其它细胞器等，原核细胞的细胞壁

【例题1】下列4种生物，哪一种物细胞结构与其他3种生物的

A(酵母菌 B(乳酸菌 C(青霉菌 D(蘑菇

〖解析〗比较选项中的四种生物，酵菌、青菌和蘑都是真生物，组成细胞是真核细胞;乳酸菌是原生物，由原核

〖答案〗B

【变式训练1】下列四组物中，细胞结构

A(变形虫、水绵、香菇 B(烟草、草履

C(小麦、番茄、大豆 D(酵母菌、乳酸

〖答案〗C

不合生物含有的核酸种类不合[新版]

1(下列叙述正确的

A 只含有RNA的物，遗传物质

B 只含有DNA的物，遗传物质

C 既有DNA又有RNA的

D 既有DNA又RNA的生物，遗传物质是DNA不是RNA (07年潍坊)不同物含有的核酸种类同。原核生真核生物同时含有DNA和RNA，病毒体内含有DNA或RNA，列各种生物关于基、核酸、五碳糖种类的描述

A(T噬菌体 B(细菌细胞 C(烟草花叶病毒 D(

碱基 5种 5种 4种 8种

核苷酸 5种 8种 8种 8种

五碳糖 1种 2种 2种 2 解析 细菌细胞是核细胞，豌豆根毛细是真核细胞，已知核生物和真核生物同含有DNA和RNA，所它们所含有的碱有A、T、G、C、U五种，核苷酸有4种脱氧核苷酸和4种核糖核苷酸，所以核苷酸的种类有，五碳糖有核糖脱氧核糖种，故B确。而T噬菌体和烟草花叶病毒

碱基、核苷酸、五碳糖

答案 B

2(肺炎双球菌中的S型具有多糖类膜，R型菌则不具有。下列叙

A(培养R活细菌时加S型细菌的多糖类质，能生一些具荚的细菌 B(培养R型活细菌时加S型细菌的DNA的完全解产物，不能产生

C(培养R型活细菌时加S细菌DNA，能产生具荚膜细菌 D(培养R型细菌时加S型细菌的白质，不能产生具膜的细菌 解析 肺炎双菌的转化实验证，DNA是遗传物质。培养R型活细菌时只有加入S型细菌的DNA，才能转化成具荚膜的S细菌;加入S型细菌的多类物质、S细菌DNA的完全水解产物、S型细菌

答案 A

35赫尔希通过T噬菌体侵染

32和P标记噬菌体，?放射性检，?离心分离。实验步骤的先后

A.???? B.???? C.???? D.????

3532解析 T噬菌体是由白质外壳和DNA成的，用放射性同位素S和P分别对进行标记，

侵染细菌(培养噬菌体)，再进行离心离，后进行放性检测，发现进入细菌体内的只有DNA，从而得出DNA是遗传物

答案 C

2006年6月，括中国在内的六国政府和有关科学家宣布，类已经完对自身细胞中24条染色体的氧核苷酸序列的测定，人类基因组草图绘制成功。据此回下列问题:被检的脱核苷酸所含有的碱基

A(腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、

B(腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶、

C(腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶

D(腺嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶、

解析 由题意可知，人类基组计划中测的是

碱基，分别为腺嘌呤、鸟呤、胞嘧啶、

答案 A

某一DNA分中，胞嘧啶与鸟嘌呤二者共占碱总量的46%，其中条链上嘌呤占此链碱基量的28%，则另一条链上腺嘌呤占此

A(46% B(26% C(54% D(24%

解析 两条上的碱基通过键连起来成碱基对，碱基的组成遵循碱基互补配原则，即A=T、G=C，根据题意，胞嘧与鸟嘌呤二者共占碱基总量46%，而这一例可反映在一条链上，而这条链上腺嘌呤占此链碱基量的28%，则这条链上的胸腺嘧啶的比例为1—46%—28%=26%，另链上嘌占此链碱基量的百分比应等于这

答案 B

下列不是DNA结构特

A DNA双链极性反

B 碱基按嘌呤与嘧，嘧啶与嘌呤

C DNA分子排列中，两长链上的脱核糖

决定DNA分子遗传特异

A(脱氧核苷酸链上脱核糖与磷酸的

B(嘌呤总数与嘧啶总数

C(碱基互补配对

D(碱基排列顺序

解析 由DNA分的螺旋结构得知组成DNA的碱基虽然只有四种，但碱对的排列顺序千变万化，因此碱对的排列顺序表遗传信息，碱基对的排列顺序却千变万化构成了DNA分子的多样性，而碱基对的定排列序又决了每一个DNA分子的特

(09年湖北襄樊)个DNA片段由500对碱基组成，G+C占碱基数的34%，该DNA片段连续制3次，第

解析

答案

解析

答案

解析

答案

核酸探针的种类

核酸探针的种类

基因探针根据标记方法不同可粗分为放射针和非放射性探针大类，根据探针核酸性质不同又可分为DNA 探针，RNA 探针，cDNA 探，cRNA 探针及寡苷探针几类，DNA

（一）DNA 探针

DNA 探是最的核探针，指长度在几百基对以上的双链DNA 或单链DNA 探针。现已获得DNA 探针数量很多，有细菌、病毒、原虫、真菌、动物人类细胞DNA 探针。 这类探针多为某一基因的全部或分序列，或一非编序。这些DNA 片段须是特异的，如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu 探针。这些DNA 探针的获得有赖于分克隆技的发展应用。以细例，目前分子杂交技术于细菌的分类种鉴定比之G+C百分比值要准确多，是细菌分类学的一个展方向。加之分子杂交术的高敏，分子杂交在临床微生物诊断上具有广阔的前景。细菌的基组大小5×106bp，约含3000个基因。各种细菌之间绝大部分DNA 是相同的，要获得某细菌特异的核酸探针，通常要采取建细菌基因组DNA 文库的办，即将细菌DNA 切成小片后分别克隆得到包含基因组全信息的克隆库。然后用多种其它菌种的DNA 作探来筛选，产生杂交号的克隆被剔除，最后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有细菌特异性DNA 片段。此重组质粒标后作探针进一鉴定，亦可DNA 序列分析鉴定其基来源和功。因此要得到一种特异性DNA 针，常常是比较繁琐的。探针DNA 克隆的筛选也可采用血清方法，所不同的是所建DNA 文库为表达性，克隆菌落或噬斑裂解后释放出表抗原，然后用来源细菌的多克隆抗血清筛选阳性隆，所得到多个阳性隆再其它细菌的抗血清筛选，最后只与本细菌抗血清反应的表克即含有此细菌的特异性基因片段，它所编码的白是种特有的。用这表达文库筛得到的显然只是特

对于基因针的克隆尚有更快捷的途径。这也是许多重要蛋质的编码基的隆。该方法的第一步是离纯化蛋质，然后测定该蛋白的氨基或羟基端的部氨基酸序列，然后根据这一序列合成一套寡核苷酸探针。用此探针在DNA 文库中筛选，阳性克隆即是目标蛋白的编码因。得一提的是真核细胞和原核细胞DNA 组织所不。真核基因中有非编码的内含子列，而原核

DNA 探针（包括cDNA 探针）的主要优点有面：①这类探针多克在质体中，可以无限繁殖，之不尽，制备方法简便。②DNA 探针不易降解（相对RNA 而言），一般能有效抑制DNA 酶活性。③DNA 探针的标记法较熟，有多方法可供选择，如缺

（二）cDNA 探针

cDNA （complementary DNA）是互补于mRNA 的DNA 分子。cDNA 是由RNA 经种称为逆转录酶（reverse transcriptase）的DNA 聚合酶催化产生的，这逆录酶是Temin 等在70年初研致癌RNA 病毒时发现的。该酶以RNA 为模板，据碱基配对原则，按照RNA 核苷序合成DNA （其中U 与A 配对）。这一途径与一般遗传信息流的方向相反，故称反向转录或逆转录。携带逆转录酶的病毒侵入宿主细胞后，病毒RNA 在逆转录酶的催化下转化成双链cDNA ，并进而整合人宿主细胞染体DNA 子，随宿主细胞DNA 复制同时复制。这种整合的病毒基因组称原病毒。在静止状下，可被制多代，但不被达，无毒性。一旦因某种素刺激而被活化，则该病毒大量复制，如其有癌基因，还可能诱发细癌变，后来发现转录酶不普遍存在于RNA 病毒中，而哺乳动物的胚胎细胞和正在分裂的淋巴细胞也含有逆转录

氨酸tRNA ）为引物，在Trna3’-OH 末端，5’－3’向，成与RNA 互补的DNA 单，称为互补DNA （cDNA ），链cDNA 与模板RNA 形成RNA-DNA 杂交体。随后在逆转录酶的RNase H 活性作用下，将RNA 链水解成小片段。cDNA 单链的3’末回折形一个小引物端，逆转录酶又以第一条cDNA 链为模

逆转录现已成为一项重要的分子生物学技术，广泛用于基的克隆和表。逆病毒中提取的逆转录已商品化，常用的有AMV 逆转录酶。利真核Mrna3’末端存在一段聚腺苷酸尾，可以合成一段寡聚胸苷酸（oligo(dT)）用作引物，在逆转录酶催化下合互补mRNA 的cRNA 链，然后再用RNase H 将mRNA 消化掉，再加入大

所得到的链cDNA 分子经S1核酸酶切平两端后一个有限酶点头（linker ），再经的限制酶消化产生粘性末端，即可与互补末端的载体进行连接。常用的克隆载体是λ噬菌体DNA ，如λgt，EMBL 和Charon 系等。用这类载体可以得到包含104以上转化的文，再经前面绍的筛选方法筛选特定基因隆。用这种

（三）RNA 探针

RNA 探是类很有前途的核酸探针，由于RNA 是单链分子，所以它与靶序列的交反应效率极高。早采用的RNA 探针是细mRNA 毒RNA 探针，这些RNA 是在细胞基转录或病毒复制过程得标记，标效率往往不高，且受到种因素的制约。这类RNA 探针主要于研究目的，不是于检测。例如，在筛选逆转录病毒人类免疫缺陷病毒（HIV ）的基因组DNA 克隆时，因无DNA 探针可利用，就利用HIV 的全套标记mRNA 作为探针，成功筛选到多株HIV 基因组DNA 克隆。如进行中的转录分析（nuclear run on transcrip －tion assay）时，在体外将细胞核分离来，然后在α-32P-ATP 的存下进行转录，所合成mR －NA 均掺入同位素得到标记，此混合mRNA 与固定于硝酸纤维素滤膜上的某一特定的基因的DNA 进行杂交，便可反映出该因的转

近几年体外录技术不断完善，已相继建立了单向和双向外转录系统。系统主要基于类载pSP 和pGEM ，这类体在多克隆位侧分别带有SP6启动子和T7启动子，在SP6RNA 聚合或T7RNA 聚合酶作用下可以进行RNA 转录，如果在多克隆位点接头中插入了外源DNA 片段，则可以此DNA 两条链中一条为板转录生成RNA 。这种体外转录应效率很高，在1h 内可成近10μg的RNA 产生，只要在底物加入适量的放性或生物素标的NTP ，则所合成的RNA 可得到高效标记。该方法能有效地控制

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