萝莉也狠美
绿原酸,chlor?ogeni?c acid,是种从双?子叶植物,如忍叶、咖啡豆、向日葵,的叶和实?分离得的?酚类,也是多中?药,如杜仲、金银花、陈等,及药复方?制剂抗菌消?炎、清热解毒的?主要活性成?分～目前已成为?
绿原酸是植?物在有氧?呼吸过程中?经莽草酸途?径产生的一?种苯丙素类?化合物。它一种由?咖啡酸(caffe?ic acid)与奎尼酸(鸡纳酸,quini?c acid,1-羟基氢没?食子)缩合而成的?酚酸,异名咖鞣?酸,学3-O-咖啡酰奎?酸(3-O-caffe?oylqu?inic acid),分子式为C?,分子16H18?O9量:345.30～半水合物为?针状晶体～110?时变为无水?化合～易溶于水、乙醇、丙酮～
绿原酸在植?物中分布广?泛,从高等双子?叶植物到蕨?类植均有?报道～但含量较高?的植不多?～主要存在于?忍冬科忍冬?(Lonic?era)、菊科蒿属(Artem?isia)物中～其中包?仲、金花、向日葵、咖啡、可可树。植物的不同?品种、发育阶段、同一植株的?不同部位、存放
以杜仲例?:叶中绿原酸?的含量高于?皮中含数?倍之多,用不同干燥?方法对绿原?酸含量的影?研究,用阴、晒干、直接烘所?
由于绿原酸?是极性较?的有机酸～易于醇、水～难溶于氯仿?、乙醚,因绿原酸?的提取法?较多～有醇,甲醇、乙醇,溶法、水提醇沉、醇提铅沉、石灰乳沉淀?及聚酰胺?柱层析法等?。下面介绍几?种提取方法?。醇溶法:用氯仿进?连续提取?至流呈?无色;再改用95?%业乙醇?取,提尽绿酸?;将所得乙?取液压?浓缩成浸膏?,与干细?拌合后,用热水提取?数次,使绿原酸转?溶于水中,弃去残渣;所得水溶液?用乙醚萃取?,进一步除去?脂溶性杂质?;向脱脂后的?水溶液中加?入饱和无机?盐溶液,至沉淀完?,并有过量?为止。此时,水的绿
分离出沉?淀并除去沉?淀中的金属?子后,将所得滤液?用机溶剂?萃取数次,回收溶剂,得绿原酸粗?品,分结晶?和重结晶等?方法制,即得绿原酸?纯品,得率为0?.5%。水提醇沉法?:采用水为溶?剂,加热煮沸提?取,但相应增?加其他水溶?性成分如蛋?白质、多糖、鞣质等杂质?,可用传统的?醇沉法除去?。醇沉程中?随吸附?包夹,致使绿原酸?同程度?的损失。提取水提液?中绿原酸时?,分次醇沉?一次醇沉所?得品纯?高;当乙醇浓?最为90?%时,一次醇沉的?损失率比分?次较大?。水提石灰乳?沉淀法:在测水?溶液中,加石灰乳使?绿原生成?钙盐沉淀,用稀酸分解?,提取物中绿?原酸得率较?低,可能为绿?原酸是酯?,被强碱水解?所致。然许多研?究者对绿原?酸含量的测?定方法进行?了研究或评?述,在分析、定过程中?乏采用层?析方法,但各种方法?均其不完?
同样～绿原酸的含?量测方法?有许多。由于许多物?质同绿原酸?分子结构相?似,同于一种?药材制剂?中。因此在进行?含量测定时?常难以分离?。常用分析方?法有紫外分?光光度法(UV)、高效液相色?谱(HPLC)法等。这些要?么难以完全?离待物?质～要么易受干?扰～或者分析?间长、低。现在在中药?成析中?开始采用一?新技术即?高效毛细管?电泳(HPCE) 技术。它具有高分?离效率、分时间短?、进样量少、低检测限和?重现性好等?特点。但由于在中?药材成分?分析中才刚?应用～效
1. 标准曲线的?绘制精密称?取绿原酸标?准品80m?g～用95%乙醇溶～转移到25?0ml容量?瓶中～加95%乙醇到刻度?～混匀。精密吸取1?.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml到2?50ml容?瓶中～加95%醇到刻度?～匀～此为标准系?列溶液。在330n?m处测定吸?光～以绿原酸标?准品的浓度?为横坐标～以其吸光?为
2 . 样品中绿原?酸含量的测?定,1,提取液的?备 准确
量取约50?ml95%的乙溶解?样品～并臵85??的恒温水浴?箱中～回流4h。臵、冷却至室温?～过滤～然后加95?%的乙醇将提?液定容于?250ml?容量瓶～待用。,2,含量测定 准确吸取样?品取液5?ml于25?ml容量瓶?中～加95%的乙醇稀?到刻度～得到样?品液。以95%的醇作空?白～在330n?m处测吸?度～由标准线?计算出?样品液浓度?。3 . 回率的测?定准确称取?中药提取?物样品0.20g～分别加入一?定量的绿原?酸标准品～按上述操作?方法进行～用外分光?光度法测定?吸光度～得出绿原酸?含量～根据回收率?公式计算出?回率～重6次。用紫外分光?光度法测?绿
绿原酸含量测定[最新]
绿原酸提取与测定
绿原酸,chlorogenic acid,是种从双子叶植物,如冬叶、咖啡豆、向日葵,的和果实分得到的酚类,也许草药,如杜仲、金银、茵陈等,及中药复方制剂抗菌消炎、清热解毒的主要活性成分～目前已成
绿原酸是植体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化物。它是一种由咖啡酸(caffeic acid)与奎尼酸(鸡纳酸,quinic acid,即1-羟基六氢没子酸)合成的缩酚酸,名咖啡鞣酸,名3-O-啡酰奎尼酸(3-O-caffeoylquinic acid),分子式为CH,分子量:345.30～半水合物为针状
无水合物～易溶于水、乙醇、丙酮～
绿原酸在物中分布广泛,从高等双子叶植物到蕨类植物有报道～但含量较高的植物多～主要存在于忍冬科忍冬属(Lonicera)、菊科蒿属(Artemisia)植物～其中包括、金银花、向日葵、咖啡、可可树。植物的不同品种、发育阶段、同一植株的不同部位、存
以杜仲例:叶中绿原酸的含量高于皮中含量倍之多,用不同干燥法对绿原酸含量的影响研究,用阴干、晒干、直接烘干测
由于绿原酸是极性较强的有机～易溶于醇、水～难溶氯仿、乙醚,因此绿原酸的提取方法较多～有,醇、乙醇,溶法、水提沉、醇提铅沉、石灰沉淀及聚酰胺柱层法等。下面介绍几种提取方法。醇溶法:先用氯仿进行续提取至流出液呈无色;再改用95%工业乙醇提取,提尽绿原酸;将所得乙醇提取液压浓缩成浸膏,干净细沙拌合后,用提取数次,使绿原酸转溶于中,弃去渣;所得液用乙醚萃取,一步去脂溶性杂质;向脱后的水液加入饱和无机盐溶液,至沉淀全,稍有过量为止。此时,水的原酸与金属离子结合生成不性盐;用离心分离法分离出沉并除去沉淀中的金属离子后,将所得滤液用有机溶萃取数次,回收溶剂,绿原酸粗品,经分步结晶和重结晶等方法精制,即得绿原酸纯品,得率约为0.5%。提醇沉法:采用水为溶剂,加热煮提取,
法除去。醇沉过程中随吸附和包夹,致使绿原酸有不同程度的损失。提取水提液中原酸时,分醇沉比一次醇沉所得产品纯度高;当乙醇浓度终为90%时,一次醇沉的损失率比分次醇沉较大。提石灰乳淀法:在待物水溶液中,加灰乳绿原酸成钙盐沉,稀酸分,提取物原酸得率较低,能为绿原酸是酯类,被强碱水解所致。虽然许多研究者对绿原酸含量的测定方法进行了研或评述,在分析、测定过程中不乏采用层析方法,但各种方均有不完善之处～难以分离出全
同样～绿原酸的含量定方法有许多种。由于许多物质同绿原酸分子结构相似,同于一种药材制剂中。因此在进行含量测定时常难以分离。用分析方法有紫外分光光度法(UV)、高效液相色(HPLC)法等。这法要么难以完全离测物质～要么易受扰～或者分时间长、低。现在在中药分析中开始采用一新技术即高效毛细管电泳(HPCE) 技术。它具有高分离效率、析时间短、进样量少、低检测限和重现性好等特点。但由于中药的成分分析中才刚应用～
1. 标准曲线绘制精密称取绿原酸标准品80mg～用95%乙醇溶～转移到250ml容量瓶中～加95%乙醇到刻度～混匀。精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml到250ml容量瓶中～加95%乙醇到刻～混匀～此为标准系列溶液。在330nm处测定吸度～以绿原酸标准品的浓度为横坐标～以其光度为纵坐标绘制标准曲
2 . 样品中绿原酸含量的测,1,提取液的制 准确称取中草药提取物样品各1.0835g～臵于250ml锥瓶中～量取约50ml95%的乙醇解样品～并臵于85?的恒温水浴箱中～回流4h。放臵、冷却至室温～过滤～后加95%的乙醇将提取液定容于250ml容瓶～待用。,2,含量测定 准确样品提取液5ml于25ml容量中～加95%的乙醇稀释刻度～得到待测样品。95%乙作空白～在330nm处定光度～由标准曲线计算出待样品液浓度。3 . 回收率的测定准确称取中草药提取物样品0.20g～分别加入一定量的绿原标准品～按上述操作方法进行～用紫外分光光度法测定吸光度～得出绿原酸含量～根据回率公式算出回收率～重复6次。用紫外光光度
中国药典菊花绿原酸含量测定方法的探讨
中国药典菊花绿原酸含量测
78新中医药2006年第24卷第5期(总第105期) 照上述3.3方法制成供液,每隔2h进样1次,每 次1O止,5次进样峰面积为1856466,1839654, 1843961,1818889,1845361,RSD为1.18%. 3.5.2回收率测定采用标准添法测定回率. 精密吸取供试品(批号050506)lmL,置EP管中,第一 份精密加入50%甲醇lmL,摇匀,作为空白回收,其 余分三组,每组3份,组别入浓度为61.2g? mL的绿原酸对照溶液0.5,0.7,1.0mL,用50% 甲醇足至2mL,摇匀,滤过,取续滤液,在含量测定 色谱条件下进样1O,用外标
表2回收率测
3.5.3重复性取同一份供品
050506),在含量测定色谱条下重复
1839654,RSD为0.95%.
3.5.4精密度同一批样品(批号050506),分别在 同一天的不同间(每隔2h)用含量测方重复 测定,
3.5.5最小检测限测定配制浓度适当绿原酸 对照品溶液,进样10,ttL,当信噪比S/N为3,其最 小检
3.6三批样
分别取三批样品,按供试品溶制
含量测定色谱条件下重复定2次,结果见表3. 表3
根据上述试验结果,考虑到药材的来源,以制 剂生产,储藏等因素,最终保临床疗效,暂定本品 每lmL含天山
4讨论
绿原酸测波长340nm选择依据:《中国药典》 2005年版一部152—153页,"金银花"项下绿原酸的 检测波长为327nm,们对雪莲注射液采用检测波 长327nm和340nm进行实验研究,结在327nm 及340nm测波长下,色谱图一致,且327nm及 340nm检测波长下雪莲注射液中绿原酸含量相近, 《中国药典)2005年版36页"天山雪莲"药材项 下含量测对天山雪莲芦丁和绿酸的测定 为340nnl,为了保持和药典的一致性,故雪莲注射液 中绿原酸
参考文献
l中华人民共和国药典.2005年
2苗明山.李振国.现代实中药质量控制技术.北京:人
3谢秀琼.中药新制剂开与应用.2版.北京:人民生出版
(收稿日期:2006—03—30)
中国药典菊花绿原酸含量测
新疆维吾尔自治区药品检验所(830002)晓芳马新玉周钢 摘要目:使用固相萃取技术优菊花含测中原酸前处理的方法,减
谱柱和液相仪的
缩短液相分析时间.方法:药典中供试品的制备方法:(1)
取改为超声处理30m1.n;(2)原
药典法中残渣加水定容改残杂加水过cl.小柱后再溶.结
对菊花中绿原酸的测
药典法测定结果相当,制方法简化,液相分析时间明
和试剂,又减少了样
和液相仪器的污损,消除了杂对绿原酸峰的干扰. 关键词花;绿酸;高效液
(总第105期)79 新疆中医药2006年
菊花为菊多年生草植物Chrysanthe~un morifoliumRamat的头状花序,始载《神农本草经》, 列为上品.菊花药材按产地和加工方法的不同,分 为毫菊,滁菊,菊,杭菊和药菊(怀).菊花中含 挥发油,菊甙,氨基酸,黄酮,绿原酸,三萜类等多种 成份,菊花的有效成份绿原酸和黄酮类,绿原已 证明具有抗菌和抗炎作用,菊中的黄酮据道可 抑制艾滋病毒的活性.《中国药典》HPLC法测定 绿原酸的量作为菊花质量的内控指标,按药典提 取方法,采用WatersC】8(150mm×4.6mm)短柱绿原酸 出峰时30min之后有两个大吸收峰,对连续进 样绿原酸峰的测干极大.为消这两大的 峰,少样品溶液对色柱液相仪污损,缩短液 相分析时间,提高工作的效率,我们对菊花中绿原酸 的前处方法作了修改,除去了
1材料
Waters600E高效液相色谱分析仪(美
(EMPOWER色工作站);菊花(2005
全国中药材抽检样品);绿原酸对
物制品检定所);ALLTECHC,.小柱;甲醇为色谱纯, 氯仿,酸二氢钠为分
2方法
2.1色谱条件
色谱WatersC】8(150mm×4.6mm,Sum),十八 烷基键合硅胶为填充剂;以0.1mol/L磷酸二氢钠缓 冲液(加磷适量调PH值2.7)一甲醇(70:30)为流 相;测波长328nm,流速lmL?min,,柱温3O?. 对照品溶液的制备:精密称取绿原酸对照 ,置棕色量瓶中,加水制成lmL含0.1mg溶液, 即得(10~C以下保存).进样量:对照品溶液及供试
2.2样品制备
2.2.1方法一取菊5批(绿原酸的含测结果已 知,其中3批毫菊,2批贡菊)粉末(过一号筛)约1g [另本品粉末测定水分(附录?H第一法)],精密 称定,置锥形瓶中,分别加人氯仿,二氯烷,石油醚 (30oC,60oC),石油醚(60oC,90oC)用索氏取器 回流提取,弃去提取液,残渣挥干,密加人甲醇 50mL,称重量,索氏回流提取,冷却,用醇补足 减的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10mL,蒸 ,残渣别加氯仿酸乙酯5mL,浸渍3min,弃 取氯仿液和乙酸乙酯液,残渣水浴蒸干,加水适量使 溶解并移到5mL量瓶中,加水至刻,过 (0.45um)即得.色谱图与药典法色谱图基本相同. 2.2.2方二取本粉末(过一号)约1g(同法 定分),密称定,置锥形瓶中,精密加人甲醇 50mL,称定重量,超声30min,冷,用甲醇补足减失 的
渣分别用氯仿,乙酸乙酯5mL浸渍洗涤,残水浴 蒸,加水适量使溶解,溶至5mL量瓶中,摇匀, 滤过(O.45um),即.色谱与药典法色谱图基
2.2.3方法三本品粉末(过一号筛)约1g(同法测 定水分),精密称定,置锥形瓶中,精密加人甲醇 50mL称定重量,超30min,冷却,用甲醇补足减失 的重量,摇匀,滤过,密量取续液10mL蒸干,残 加氯仿5mL浸责3min,弃取氯仿液,残渣水浴 干,加水5mL使溶解,过ALLTECHC,.小柱,用15mL 水脱,集洗脱液,水域蒸至近干,加水定至 5mI量瓶中,匀,用微L滤(O.45um)滤过,即得. 除去了两个大的杂峰,故确定
2.3回收率试验
本法采用加样回收,称取5份已知含量的菊花 样品粉末(过一号筛)各1g,精密称定,分别人绿 原酸照品液(0.1mg/mL)5mL按改后的供试品 溶液制备方法进行操作,按上述色件测定,计算 回收率.果5份样品平
3讨论
3.1超声时间
供试品超声提取时间分别比较了20,30,4O, 60min,结果40min提取绿原酸含量高,30min, 60min与40min的结相近,故
3.2分别采用三大类方法处理样,结果方法三达 到了预期的目的,简化了品前处理方法,
个大的杂峰且对菊花中绿原酸的测定结果基本无影 响,菊中绿原酸成份出快,减了对仪器通道 色谱柱的污损,可以看出使用C.柱(4.6mm× 150mm,Sum)短柱即可节液相分析时间30min
(收稿日期;2006—02—24)
菊花中绿原酸的含量测定
菊花中绿原酸的
李宗 陈在敏
3
林少山3
3
(福建省药品检验所 福州350001)
16mm ×摘要 目的:测定花中绿酸的含量。方法:HP LC 法, 色谱
250mm ) , 流动相为
样品的绿原酸含量,
关键词 菊花 绿原
菊花为菊科植物菊folium Ramat. 菊
, 加水配制成每1ml 约含0. 1mg 绿原酸的照品溶液。取不同体积对照品溶注入液相色谱仪, 测定峰积值, 以进样为横坐(X ) , 峰
(Y ) , 得回归方
甙、氨基酸[1]。菊, 产地广, 加工方法各异, 虽有关于菊花挥发油、木犀草素的含量测定的报道[2], 但尚无稳定、可的质量制方法。原酸已泛作为金银花及其剂的控指标, 测定的方法分光光度法[3]、薄层扫描法[4]、HP LC 法[5]等, 于菊花中绿原酸的含量测定未见报, 因, 们建了HP LC 法测定菊花中绿原酸的含量, 告如下。1 仪器和
111 仪器和试药 P E Integral 4000高效液相
μg 内=0. 9999。绿酸浓度在0. 2072～2. 072与峰积呈良好的线
213 供试品溶液的制备 取花
筛) 1g , 精密称定, 置干烧瓶中, (同时按《中国药典》1995年版部附录水分测定一
分) , 准确加入50. 0ml 甲醇, 称定重量, 水浴加热回流提取2h , 冷, 用甲醇调至原重, 摇匀, 滤过, 精密取续滤液10ml 于杯中, 水浴蒸干, 残渣加入5ml 氯仿浸泡3min , 弃去氯仿液, 残干氯仿, 准确加入5. 0ml 馏水使绿原充分溶解, 溶液用微孔滤膜超滤, 滤液
214 精密度考察 取同一浓度照
色谱仪(带二极管阵列检测器) , 美
μm , 416mm ×产品; Nova 2Pak C 18色谱柱(4
250mm ) , 大连依利特公司
由中国药品生物制品
112 材料 菊花药材经鉴均
花Chrysanthemum morifolium Ramat 1的状花序。定人李宗。2 方
211 色谱条件 使用大连依利特司
μ续进样5次, 进样量均为10l , 测得
215 准确度考察 取同一批样,
μm ,416mm ×250mm ) 。流动Pak C 18色谱柱(4
相的配制:取磷酸二氢钠适制成0. 1mol ?L 的溶
-1
-1
方法制备6份供试品溶液, 测得绿原酸含量分别为0. 236%,0. 238%,0. 239%,0. 250%, 0. 225%,0. 232%, 平
3福建省卫生厅科研基金资助目 No. Q972233福中医院中药系97
的比例加入磷酸适
p H 为2. 65, 超滤后与甲醇
合。检测波长为328nm , 柱温室
μ8ml ?min 21, 样量10l 。2. 2 对照溶液的备及线性关系
中国中药杂志 1999年
?329?
216 回收率考察 精密称取6菊
别准确加入一定量的绿原酸对照品溶液, 按213项下方法制备供试品溶液, 测定并计算回收。结果加样提取回收率别为104. 9%, 10018%,10019%,9516%,9615%,9717%平均回收率为9914%, RSD =315%。217 样品测定结果 先后测了20批菊样品绿原酸含量和水分含量, 各批菊花的含量
表1 不同产地菊花绿原酸
编号商品名
1234567891011121314151617181920
如阴干法(亳菊) 、硫黄蒸晒法(滁菊) 、烘干法
(贡菊) 、蒸透法(杭菊) 等
[6]。从实验结果来看, 贡菊含量最高, 滁菊、川菊次之, 杭菊普遍较低, 甘仅0. 060%。提示加工方法对绿原酸的含有一定的影响。必要就加方法对菊花的影响作进
产地福建福州福建福州浙江杭州福建福浙江桐乡徽 安徽黄山安滁县安亳州云南昆明四川 河禹州河南新广西南宁河北安国福建福
水分%
I
0. 1880. 2220. 2360. 2670. 2580. 2730. 1360. 2840. 3220. 4670. 3820. 1170. 2640. 3840. 2670. 0870. 3200. 2860. 1620. 060
16. 417. 819. 614. 214. 812. 413. 013. 017. 121. 112. 913. 47. 68. 97. 112. 814. 813. 612. 4
0. 0. 1860. 1940. 2150. 2210. 2330. 1220. 2520. 2610. 3880. 3060. 1020. 2290. 3550. 2430. 0810. 2800. 2440. 1400. 053
%
杭菊杭菊杭菊 杭菊 杭菊 杭 杭菊 杭菊 贡菊 贡菊 滁菊 亳菊 ** 菊 菊花 菊 菊花 祁菊 甘
图1 菊花(滁菊) 供试液HP LC 色谱图
C 1绿原酸
313 由于菊花成分复杂, 木犀草含量仅0. 031%～0. 066%, 挥发
～～0. 2144%[2]。其他有效成分的含量分析尚未见报道, 而绿原酸的药理活菊花的功用是相符的[7], 根据所集样的性状分析, 原酸量相对较低者, 香一般偏弱, 花序多破碎, 色泽偏暗, 多呈浅棕色或浅色。可能为加工方法不或储存件不所致, 因用绿原酸含量作为菊花的质量控制指标是
1 黄泰康. 常用中药成分与药理手册1北京:中国医药科技
出版社,1994. 1565
2 陈发奎. 常用中草药有效成分含量定1
出版社,1997. 606
3 张广强, 粱生旺, 姜玉凤, 等. 三长分
注:样品均为市售品, 丁学均为C 1morifolium ; I 为干前商品,II 以
解毒注射剂中绿原酸的
33
4 刘伟, 杜天信, 郑松波, 等. 小儿热解
结果显示菊花中绿原酸的含量
～0. 388%, 以干燥品计则为0. 060%～0. 467%, 菊花中原酸含量因产地和商规格不同而有定差, 含水量亦较差异。3 讨论311 比较了多种流动相对绿原酸的分离效果, 结果表0. 1mol ?L -1,pH2. 65的磷酸盐缓冲液与甲醇混合洗脱, 可
μm 粒径的Nova 2Pak C 18拖尾
谱柱, 使绿原酸与杂质得到好的分离。312 由于菊花产多而散, 加工方
的薄层扫描测定. 中成药,1989,11(8) :14
5 潘扬, 马国祥, 郭
绿原酸的含量. 中国
6 徐国均, 徐珞珊, 何宏贤, 等. 中国药材(下
国医药科技出版社,1996. 993
7 季宇彬. 中药效成分药理与应用. 哈尔
术出版社,1995. 110
致谢 部分菊花样品由江、安徽、昆明等地药检和
1998208226收稿
?330?
中国中药杂志 1999年
ABSTRACT OF ORIGINAL ARTICL ES
Phamacognostical Identification of Medicinal Plants of Paederia
He K aijia (Phamacology Department ,G uangxi Health Staff C ollege ,Nanning 530021)
Abstract Objective :T o distinguish accurately the dried medicinal plants of Paederia in G uangxi Province. Method :Using regular methods for identification of crude drugs. R esults :Obvious distinctions were found among quality ,pre 2sence of hair characteristics ,inflorescence morphology ,presence of non 2glandular hair and with their sizes ,forms and superficial characteristics. Obvious distinctions were found of cuticles ,pro 2jecting of cells ’outer walls ,development of metaxylem ,shapes and under micro 2scope. Conchusion :All the above 2mentioned K ey words plants of Paederia ; (original article on page 323)
Identification of Rhizoma Corydalis
and Rhizoma Corydalis R epentis
T ian Jinguo ,Chen Y onglin ,Ren Jian ,Lou H ongxiang and G ao Y anhui (Faculty of Pharmaceutical Sciences ,Shandong Medical University ,Jinan 250012)
Abstract Objective :T o study the IR spectra of Rhizoma C orydalis and Rhizoma C orydalis Repentis. Method :The petroleum ether ,ethyl ether and water extracts obtained by the same isolating procedure from Rhizoma C orydalis and Rhi 2zoma C orydalis Repentis were determined by IR spectrophotometry. R esults :The IR spectral evidences of the two samples showed distinct characteristics and good repeatability. Conclusion :The IR spectral evidences can be used to differentiate Rhizoma C orydalis and Rhizoma C orydalis Repentis.
K ey words IR spectra ;identification ;Rhizoma C orydalis ;Rhizoma C orydalis Repentis
(original article on page 327)
Determination Chlorogenic Acid in Chrysanthemum morif olium R amat. Flow er
Li Z ong ,Chen Zaimin ,Liao Leisheng and Lin Shaoshan (Fujian Provincial Insititute for Drug C ontrol ,Fuzhou 350001)
Abstracts Objective :T o determine the contents of chlorogenic acid in flower of Chrysanthemum morifolium.
μm ,4. 6mm ×Method :C olumn :Nova2Pak C 18,4250mm ,mobile phase :MeOH20. 1mol ?L -1NaH 2PO 4(pH 2. 65) 30∶70,de 2
tection wavelength :328nm.R esults :Flowers of 20batches bought from the market were analysed. C ontents of clorogenic acid were 0. 060%～0. 467%.Conclusion :Chlorogenic acid is a suitable component for the quality control of C. morifolium.
K ey words Chrysanthemum morifolium ; chlorogenic acid ;content determination
(original article on page 329)
E ffect of Space Flight on U ltrastructure in Medicinal Plant
Datura innoxia Mill.
G ao Wenyuan ,Zhao Shuping ,Xue Lan ,Quan Lihui ,Fu Rongzhao and Xiao Peigen
(Institute of Medicinal Plants ,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical C ollege ,Beijing 100094)
Abstract Objective :T o substantiate the effect of space environment on medicinal plants. Method :The seeds of Datura innoxia were set up in retrievable satellites. After returning to earth ,the ultrastructural changes were observed by
means of electron microscope. R esult :In cells of weightless group and hit group ,some changes were found in chloroplast
中国中药杂志 1999年
?381?
绿原酸的提取分离及含量测定
54中 国 油 脂 2005年第30卷第3期
文章编号:1003-7969(2005)03-0054-03 中图分类:TQ64519 文献
绿原酸的提取分离
刘军海1,2,
(1.江南大学食品学,214036江苏省锡市
2.聊城大学化学化工学院,252059
摘要:绿原酸是一种重要的生物活性质。,用丙酮-对绿原酸取工艺
:;; 绿原酸又名咖啡鞣酸,属酚类化合物,是植物体在有氧呼吸过程中经酸途径形成的一种丙素类物质[1]。原酸具有抗、抗毒、升高白细胞、血、保肝利胆、促进胃肠蠕动、抗肿瘤、降压、清除基、兴奋中枢神经系统等种生活性[1,2]。绿原酸在植物中存在广泛,但
种植物和中草药中,如葵花籽(仁、)210%～315%,金银花1%～5.9%,
层析缸(Φ15×30cm),玻璃层柱Φ2.6×60cm,HL-2恒流泵,BSZ-100自动部分收集
取样器,Unic-2100型紫外可见分光光度,365nm紫外分仪,Re-52AA真空旋转蒸发
晾干粉碎
溶剂
→→滤液
咖啡豆2%～8%[3],元宝枫叶4%[4]。由于绿原酸是一种具有多种生理功生物活性物质和重的生试剂,此绿酸的提取分离究受人们的极大关注[1～10]。国内主要从葵花籽(仁、粕)、金银花、杜中提取,国外主要从葵花籽(仁、)、咖啡中提取[3,9,10],且大多采用
[2,7,8]
[2,3,5,6,8]
含量测定
1.4 实验方案
杜仲叶中绿原酸的提取受浸提时间、温度、丙酮浓和丙酮溶液量等因素的影响。为探佳提取条件,在单因素实验的基础上,对每个素分别取3个水
,而以丙酮-水溶液体
绿原酸,国内未见
本文以杜仲叶为原料,采用丙酮-水溶液系作浸提对绿原酸提取工艺进研究探,旨在为杜仲叶提取绿原产业化奠定基。1 材料与方法1.1
平如表1所示。
表1 影响绿原酸提取率
水平
1
23
A)温度(℃455565
B
C
D
杜仲叶购于北京某地区,为秋后落叶,粉碎,60℃下烘备用。绿原标准品(于中国药品生品鉴定所);乙醇、丙酮、甲醇均为分析纯;水为
收稿日期:2004-06-24
作者简介:刘军海(1963-),男,副教授/在读博士;主要从事油改性及相副产品的开发研
丙酮浓度(%)
304050料液比1∶81∶121∶16时间(h)
123
115 绿原酸
115.1 测定波长的确定 精密取绿原酸标准品12.20mg,用50%甲醇溶,定容于10mL
中,摇匀,吸取上述标准溶液1mL,用50%甲醇溶液释至10mL(以此为母液,
2005年第30卷第3
表2 绿原酸提取正
50%甲醇溶液为参比液,在200～400nm的波长范
围扫描,得其最大吸收波长,由此选择326nm作为测定波长。
11512 标准曲线的制作 分别精密量
序号
1
2345678123k1k2k3R
A11122234.5.811.5701.8601.9370.367
B123123124..5.311.6171.9801.7700.363
C12323134.5.655.461.6631.8831.8200.220
D123312235.155.415.541.7171.8031.8470.130
提取率
()1.211.871.641.842.011.731.812.06的绿原酸标准20、50、150、200、250μL点于华1号层析纸上,成约3cm细条状,晾干或干后用正丁醇∶乙酸∶水=4∶1∶5(V/V/V)混合层清液作展开剂,上行开约13cm取出,晾干吹干,在365nm紫外灯下观察画出与
和蓝色荧光斑带,剪开,置于20mL带塞试管中,精密入50%甲溶液10mL,反复振荡,置浸泡24h,同时以50%作空白,在326nm处,,光度A,C曲线,得回
R=0.9999。
11513 样品测定 称取烘干粉的
入一定量的丙酮溶液控制一定条件提取,滤,滤液容于100mL容量中,用量取样器精密吸取50μL,按11512方法测定。按下式计算绿原
绿原酸提取率=×100%6
杜仲叶重量×10
由表2可知,在影响绿原酸提率4个素中,温度、丙酮浓度绿原酸的提取率影响较,其次是液比,影响最小的是
由图1表明,以绿原酸提取率为考察指,各因素最佳水平分别是:提温度65℃,丙酮浓度40%,液比1∶12,浸提时间3h,因此最
精密称取适量绿原酸粗品(mg),用50%甲醇溶解,定容至10mL量瓶中,按下
绿原酸含量=
×100%
称取样品重量×1000
是A3B2C2D3。
绿原酸提取率明显受到温度的影响,因为升高温度,增加分子热运动,使溶和叶粉分间的传递加速,有于绿原酸的出。但绿原酸为热敏性物质,温度过高,会造成绿原酸的分解,引起丙酮化挥发损失,因此温度控制
丙酮的浓度对绿原酸的影响次之,随着浓度增加,溶剂的极性降低,同绿原酸的极性差拉,不利于绿原酸的浸。料液的增大,溶剂叶粉固体溶质间浓差增大,有利于传质,因此绿原酸提取率增大。料液比增大,虽然有利于传质,液蒸发量大,增加溶剂和操作本,后续工作带困难,因此,料液比也不应过大,应控
浸提时间延长,有利于绿原酸提取率的加,但间过长,绿原酸分解,反而低绿原酸的含量,时间短,也不利于
同时我们在提取过程中发现,丙酮-水体系作浸提剂,其提取液蛋白质、黏液量减少,而质含量增加,可是由于丙酮能制蛋白质的溶解,而丙酮-水体系为糅质最佳溶剂[11];时用丙酮-水体系避免了醇溶性色素的大
116 分离工艺
将预处理好的聚酰胺粉加水浸泡,搅拌排出气泡,装入层析柱中,用去离子水冲衡。将一定量的杜叶用丙酮溶液取绿酸,提取液滤浓,将适量的浓缩液柱。然后控制一定流速,用3倍量柱体积的水、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%的乙醇作洗脱剂进行洗脱,按
经纸层析检识至相同成分被洗脱完全,并检识果相同的洗脱液,真空蒸浓缩回收溶剂,得到粉末分离物。2 结果与讨论2.1 正
绿原酸提取正交实验果及各因素与提取率
图1 各因素与绿原酸
绿原酸的分离。但缺点是其绿原提
56中 国 油 脂 2005年第30卷第3期
溶液提取和醇溶液提取偏低,这也是应注意的问题。2.2 分
77104%。如果需要更高纯度的原
精制。参考文献:
[1] 高锦明,张鞍灵,张康健.绿原酸
经聚酰胺柱层析分离结果见表3,绿原酸主要集中在水和10%醇的洗剂中,绿原酸
27.4%,绿原酸产品纯度可达77.04%(见表4),达到了预分离的的,取得了良好
表3 分离结果
样 品
12345
洗脱剂水、10%乙醇20%、30%乙40%、50%乙醇60%乙70%离产物绿原酸杂质总黄酮
研究综述[J].西北
[2] 张维农,刘大川,胡小泓.葵花仁中
究[J].中国油脂,2002,27(2):76-77.
[3] 刘军海,裘泳.绿原酸及其提取化和
粮食与油脂,2003,(9):44-[4] , 惠.[J)-,.[J].中国农业大
[6] 马希汗,张康健,尉 芹.从杜叶提
4次 数
12345
绿原酸含量(%)
77.3578.4676.7376.9278.75
平均含量(%)
研究[J].西北林
[7] 戚向阳,张声华,陆彩玲.杜仲中绿
研究[J].中草药,1998,29(11):741-742.
[8] 尉 芹,景谦平,马希汗.杜仲中绿
77.04
条件研究[J].林产
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[11] 石 碧, 莹1植物多酚[M].北
2000130-31.
3 结 论
以丙酮-水溶液体系作浸提剂提取杜仲叶中绿原酸的佳条件为浸温度65℃,丙酮浓40%,料液1∶12,浸提时间3h,经聚酰柱层析分离后,原酸得率达27.4%,绿原酸
ExtractionandpurificationofchlorogenicacidfromEucommiaulmoideoliverleave
LIUJun2hai1,2,QIUAi2yong1
(1.SchoolofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,214036JiangsuWuxi,China;
2.SchoolofChemistryandChemicalEngineering,LiaochengUniversity,252059ShangdongLiaocheng,China)
Abstract:Thechlorogenicacidisanimportantbioactivitymaterial.Theprocessofextractingchlorogenicacidfrom
Eucommiaulmoidesoliverleaves,withaqueousacetoneasextractionsolvent,wasstudied.Theoptimumextractioncondi2
tionswereasfollowing:temperature65℃,40%aqueousacetone,aratioofmaterialtosolvent1∶12,extractionduration3h.Afterextractedundertheoptimumconditionsandpurifiedwithpolyamidecolumnchromatography,theyieldandpurityofchlorogenicacid
were27.4%and77.04%,respectively.Itisexpectedtoprovidereferenceforothermaterialtoex2tractchlorogenicacid.
Keywords:Eucommiaulmoidesoliverleaves;chlorogenicacid;extraction;isolation
