范文一:植物的顶端分生组织与亚顶端分生组织
植物的顶端分生组织与亚顶端分生组织
姓名:张娜 学号:2011313111 专业:11检疫
一( 概念
1. 顶端分生组织:是维管植物根和茎顶端的分生组织。包括长期保持分生能
力的原始细胞及其刚衍生的细胞。植物体其他各种组织和器官发生,均由
它的细胞增生和分化而来。
狭义的顶端分生组织只包括原分生组织,即一个或若干原始细胞和刚由
它衍生的细胞。广义的顶端分生组织,还包括由原分生组织衍生的初生分
生组织,所以人们常把茎端和根端的生长点作为顶端分生组织的同义词。
2. 亚顶端分生组织:其实是指根端分生组织,因为根端分生组织由根的保护
结构——根冠所覆盖,因此它们并不在根的最前端,而是位于亚顶端
二( 茎端分生组织
分为营养茎端和生殖茎端
1. 营养茎端
营养生长阶段的茎端,由一些叶原基和幼叶保护着,并有外起源的侧生
器官——叶和芽的发生。此外,茎有节与节间的分化,茎端的生长也就不
象根端那样均匀。因此,在植物个体发育的各个阶段茎的顶端分生组织外
形、大小和细胞分裂活动等方面变化较大。如在两个叶原基发生的间隔
期,一般有一个或一对叶原基刚发生后,顶端分生组织的高度与宽度最
小,当另一个或一对新的叶原基发生之前,它的高与宽达到最大。 ?类型
根据原始细胞的形态,细胞分裂活动及其衍生细胞与组织区域之间的关系,营养茎端可分为3种类型:
? 蕨类植物,如蕨和木贼,分别有三面体和四面体的顶端细胞位于顶端分
生组织的顶部(图2a)。顶端细胞的顶面都不进行平周分裂,只是三
面体的两个侧面和四面体的三个侧面斜向进行垂周分裂,随后进行平周
分裂或多向分裂,表面的细胞分化为表皮,内部细胞分别分化为基本薄
壁组织和中柱。
? 银杏属和松属等许多裸子植物,其顶端的原分生组织,基本上分为两个
细胞群:一是位于顶端表面,由1,2层细胞组成的顶端原始细胞群;
一是由顶端原始细胞群所衍生的中央母细胞。此外,上述两个原始细胞
群向侧面衍生的细胞,称为周围区,叶原基、表皮、皮层和维管组织均
起源于此;在中央母细胞基部的衍生细胞,多作横向分裂形成肋状分生
组织,由它进一步分化为髓部。当茎端迅速生长时,在中央母细胞的下
方,一直向侧面延伸到边缘,并把顶端的原分生组织与其他部分划分开
(图2b)。
? 被子植物顶端分生组织,普遍具明显的原套—原体结构。原套在茎端的
表面,有1,5层原始细胞,它们都以垂周分裂为特征。原体在原套的
内方,细胞作多向分裂,无分层现象。原套和原体各有其原始细胞。原
体部分也可分为中央母细胞区、周围区和肋状分生组织区(图2c)。
?生长与发生
叶起源于顶端分生组织的周围区,发生的位置决定于各种植物叶序的特性,即刚发生的叶原基能在一定距离内抑制新叶的发生。叶的发生过程,起初是在周围区原表皮层下的一层或几层细胞中,局部出现平周分裂,接着又进行垂周分裂,使此部位的细胞迅速增生,形成向外突起,即叶原座,由叶原座的顶端生长,形成指状的叶原基。叶片的生长与分化是叶原基的顶端分生组织与边缘分生组织和板状分生组织交替活动的结果。此外在叶的发育过程中,叶的基部多少还有一些居间生长。
在离顶端的第2或第3叶原基腋间,一般有腋芽的发生。初是由若干层初生分生组织细胞进行多次平周分裂和垂周分裂,形成一个分生组织突起,在逐步生长中突起顶端又形成芽的顶端分生组织,从而和主茎上的茎端一样发展而形成侧枝。在茎轴上发生的叶和腋芽的水平位置,细胞的增生和轴向生长较少,而在叶与叶之间的茎轴部分,细胞增生和生长比较明显,从而有节与节间的分化。由于节间的细胞仍继续分裂,而且细胞显著增长,使节与节逐步拉开,则茎有明显的生长。一个节间的分生活动往往是相当均匀的,但在许多禾谷类植物中,由于节间的组织分化是向基的,分生活动就逐步地限制在节间基部,且能持续一定时期,形成居间分生组织。莲座型和肉质型的草本植物,以及一些
单子叶植物的茎端,位于叶原基的下方,由顶端分生组织衍生的许多细胞,上下连接,形成了一种初生加厚分生组织,其细胞分裂活跃,由它们向外增生细胞,从而引起茎的顶部有加粗生长。
注:居间分生组织是夹在多少已经分化了的组织区域之间的分生组织,它是顶端分生组织在某些器官中局部区域的保留。主要是由于间断分生组织在某些器官中的残留。主要位于茎的节间、叶基部。
2. 生殖茎端
由营养茎端转变为生殖茎端,在结构方面,表现为顶端分生组织仍具有一般的原套和原体的结构,或者表面细胞层数有所增减。顶端分生组织区向四周扩展变宽,而纵深变得较浅,顶区的原始细胞液化程度降低,细胞质稠密,由于细胞分裂频率较高,细胞也变得较小,并与周围区的细胞大小相同,从而在顶端分生组织表面形成了一个分生组织套层。另外,因肋状分生组织细胞分裂活动下降,近基的所有原体细胞液泡化程度较高,细胞较大,从而形成另一个组织区域,即薄壁组织核心,它为分生组织套所覆盖。在生殖茎端上花各部分(花冠、雄蕊与雌蕊)的发生,大体上也和营养叶一样。通常在原表皮层下面稍里面的细胞开始有平周分裂,接着进行各向分裂,使花器官原基出现突起。不过细胞位置的深浅,往往与花中不同部分的发生有关。
三( 根端分生组织(亚顶端分生组织)
细胞特征
根端分生组织的原始细胞较小,一般等径,排列紧密。细胞壁薄,结构致密,质膜紧靠细胞壁,原生质联丝细小,液泡化程度较低,细胞质为具有十分微细颗粒的匀质体,在发育过程中内质网数量渐增,结构亦趋复杂,细胞质中有较多的线粒体和核糖体,此外还有高尔基体、微管和原质体等细胞器。细胞核相对较大,位于细胞中央,核仁亦大。细胞分裂的频率一般较高。在进行活跃的细胞分裂时,通常多不见后含物,质体也处于原质体状态。
细胞周期中的间期,细胞核中DNA和RNA的水平,保持相对恒定,在迅速分裂时,代谢活动较旺,过氧化物酶的反应特别增强。DNA合成较高,细胞质和核内的RNA亦高。此外,顶端分生组织中的植物激素含量,特别是生长素含量较高。这些特点,说明顶端分生组织的细胞合成代谢旺盛,处于胚性状态。
类型
根据原始细胞形态,细胞分裂活动以及细胞组织分区等特征,根端可有不同的类型:
?一些低等维管植物,如蕨类植物的木贼属等,顶端有一个倒四面体锥形的顶端细胞,它向顶进行平周分裂,产生根冠细胞;向基作垂周分裂,分化出各
组织系统(图1a
?某些蕨类植物,如座莲蕨;裸子植物,如云杉属;一部分被子植物,如大蒜属等,根端有1,2层横列的原始细胞。由它向顶衍生的细胞形成柱状分生组织区,因细胞横向分裂而形成根冠柱。原始细胞向基衍生的细胞构成中柱分生组织区,进一步分化中柱组织系统、皮层和环柱分生组织区。后者向基分化表皮和皮层,向顶产生根冠的环柱组织(图1b)。
?大多数双子叶植物顶端分生组织区有3列原始细胞,其上层为中柱原,中层为皮层原,下层是表皮和根冠共同的原始细胞,称为表皮根冠原。这种类型也存在于一部分单子叶植物中(图1c)。
?单子叶植物的根端有3列原始细胞,其中根冠有独立的原始细胞,称为根冠原,表皮则与皮层共同起源于皮层原(图1d)。有的种类表皮有它独立的原始细胞层,即表皮原。
所有根的组织系统和根冠,有其共同原始细胞的,属开放型;而中柱、皮层和根冠,甚至于表皮,各有其一定的原始细胞,属封闭型。一般认为开放型是比较原始的类型。
生长和分化
旺盛的有丝分裂活动区,一般在离顶端有一定距离处。细胞分裂频率较高的部位也不完全一致。如烟草伸长区,在离顶端分生组织区约260,580微米处,而玉米是在4毫米处。
根端分裂和增大的细胞。在一定区域还与分化中的细胞重叠,因为从顶端分生组织的衍生细胞到有明显分化的细胞之间是一个逐渐变化的过程,根端各组织区域,在同一水平上的分化程度也不一致。一般靠近顶端分化皮层的基本分生组织,在液泡化和发生胞间隙时,其相邻的原形成层细胞还停留在具有稠密的细胞质的时期。即使在中柱部分的韧皮部和木质部分子,分化也可不同步。
四( 顶端分生组织和亚顶端分生组织的区别与联系
(一) 区别
顶端分生组织指的是维管植物根和茎顶端的分生组织,它包括长期保持分生能
力的原始细胞及其刚衍生的细胞植物体其它各组织和器官的发生,均由它的细胞
增生和分化而来。
亚顶端分生组织其实指的是植物顶端分生组织中的根端分生组织,因为根端分
生组织由根的保护结构——根冠所覆盖,因此它们并不在根的最前端,而
是位于亚顶端
(二) 联系
亚顶端分生组织只是植物顶端分生组织的一部分,它包括在顶端分生组织之下,
范围小于顶端分生组织。
范文二:植物的顶端分生组织与亚顶端分生组织[精华]
植物的顶端分生组织与亚顶端分生组织
姓名,张娜 学号,2011313111 专业,11检疫
一, 概念
1. 顶端分生组织:是维管植物根和茎顶端的分生组织。包括长期保持分生能
力的原始细胞及其刚衍生的细胞。植物体其他各种组织和器官发生,均由
它的细胞增生和分化而来。
狭义的顶端分生组织只包括原分生组织,即一个或若干原始细胞和刚由
它衍生的细胞。广义的顶端分生组织,还包括由原分生组织衍生的初生分
生组织,所以人们常把茎端和根端的生长点作为顶端分生组织的同义词。
2. 亚顶端分生组织:其实是指根端分生组织,因为根端分生组织由根的保护
结构——根冠所覆盖,因此它们并不在根的最前端,而是位于亚顶端
二( 茎端分生组织
分为营养茎端和生殖茎端
1. 营养茎端
营养生长阶段的茎端,由一些叶原基和幼叶保护着,并有外起源的侧生
器官——叶和芽的发生。此外,茎有节与节间的分化,茎端的生长也就不
象根端那样均匀。因此,在植物个体发育的各个阶段茎的顶端分生组织外
形、大小和细胞分裂活动等方面变化较大。如在两个叶原基发生的间隔
期,一般有一个或一对叶原基刚发生后,顶端分生组织的高度与宽度最
小,当另一个或一对新的叶原基发生之前,它的高与宽达到最大。
?类型
根据原始细胞的形态,细胞分裂活动及其衍生细胞与组织区域之间的关系,营养茎端可分为3种类型:
? 蕨类植物,如蕨和木贼,分别有三面体和四面体的顶端细胞位于顶端分
生组织的顶部(图2a)。顶端细胞的顶面都不进行平周分裂,只是三
面体的两个侧面和四面体的三个侧面斜向进行垂周分裂,随后进行平周
分裂或多向分裂,表面的细胞分化为表皮,内部细胞分别分化为基本薄
壁组织和中柱。
? 银杏属和松属等许多裸子植物,其顶端的原分生组织,基本上分为两个
细胞群:一是位于顶端表面,由1,2层细胞组成的顶端原始细胞群;
一是由顶端原始细胞群所衍生的中央母细胞。此外,上述两个原始细胞
群向侧面衍生的细胞,称为周围区,叶原基、表皮、皮层和维管组织均
起源于此;在中央母细胞基部的衍生细胞,多作横向分裂形成肋状分生
组织,由它进一步分化为髓部。当茎端迅速生长时,在中央母细胞的下
方,一直向侧面延伸到边缘,并把顶端的原分生组织与其他部分划分开
(图2b)。
? 被子植物顶端分生组织,普遍具明显的原套—原体结构。原套在茎端的
表面,有1,5层原始细胞,它们都以垂周分裂为特征。原体在原套的
内方,细胞作多向分裂,无分层现象。原套和原体各有其原始细胞。原
体部分也可分为中央母细胞区、周围区和肋状分生组织区(图2c)。
?生长与发生
叶起源于顶端分生组织的周围区,发生的位置决定于各种植物叶序的特
性,即刚发生的叶原基能在一定距离内抑制新叶的发生。叶的发生过程,起初
是在周围区原表皮层下的一层或几层细胞中,局部出现平周分裂,接着又进行
垂周分裂,使此部位的细胞迅速增生,形成向外突起,即叶原座,由叶原座的顶端生长,形成指状的叶原基。叶片的生长与分化是叶原基的顶端分生组织与边缘分生组织和板状分生组织交替活动的结果。此外在叶的发育过程中,叶的基部多少还有一些居间生长。
在离顶端的第2或第3叶原基腋间,一般有腋芽的发生。初是由若干层初生分生组织细胞进行多次平周分裂和垂周分裂,形成一个分生组织突起,在逐步生长中突起顶端又形成芽的顶端分生组织,从而和主茎上的茎端一样发展而形成侧枝。在茎轴上发生的叶和腋芽的水平位置,细胞的增生和轴向生长较少,而在叶与叶之间的茎轴部分,细胞增生和生长比较明显,从而有节与节间的分化。由于节间的细胞仍继续分裂,而且细胞显著增长,使节与节逐步拉开,则茎有明显的生长。一个节间的分生活动往往是相当均匀的,但在许多禾谷类植物中,由于节间的组织分化是向基的,分生活动就逐步地限制在节间基部,且能持续一定时期,形成居间分生组织。莲座型和肉质型的草本植物,以及一些单子叶植物的茎端,位于叶原基的下方,由顶端分生组织衍生的许多细胞,上下连接,形成了一种初生加厚分生组织,其细胞分裂活跃,由它们向外增生细胞,从而引起茎的顶部有加粗生长。
注:居间分生组织是夹在多少已经分化了的组织区域之间的分生组织,它是顶端分生组织在某些器官中局部区域的保留。主要是由于间断分生组织在某些器官中的残留。主要位于茎的节间、叶基部。
2. 生殖茎端
由营养茎端转变为生殖茎端,在结构方面,表现为顶端分生组织仍具有一般的原套和原体的结构,或者表面细胞层数有所增减。顶端分生组织区向四周扩展变宽,而纵深变得较浅,顶区的原始细胞液化程度降低,细胞质稠密,由于细胞分裂频率较高,细胞也变得较小,并与周围区的细胞大小相同,从而在顶端分生组织表面形成了一个分生组织套层。另外,因肋状分生组织细胞分裂活动下降,近基的所有原体细胞液泡化程度较高,细胞较大,从而形成另一个组织区域,即薄壁组织核心,它为分生组织套所覆盖。在生殖茎端上花各部分(花冠、雄蕊与雌蕊)的发生,大体上也和营养叶一样。通常在原表皮层下面稍里面的细胞开始有平周分裂,接着进行各向分裂,使花器官原基出现突起。不过细胞位置的深浅,往往与花中不同部分的发生有关。 三( 根端分生组织(亚顶端分生组织)
细胞特征
根端分生组织的原始细胞较小,一般等径,排列紧密。细胞壁薄,结构致密,质膜紧靠细胞壁,原生质联丝细小,液泡化程度较低,细胞质为具有十分微细
颗粒的匀质体,在发育过程中内质网数量渐增,结构亦趋复杂,细胞质中有较多的线粒体和核糖体,此外还有高尔基体、微管和原质体等细胞器。细胞核相对较大,位于细胞中央,核仁亦大。细胞分裂的频率一般较高。在进行活跃的细胞分裂时,通常多不见后含物,质体也处于原质体状态。 细胞周期中的间期,细胞核中DNA和RNA的水平,保持相对恒定,在迅速分裂时,代谢活动较旺,过氧化物酶的反应特别增强。DNA合成较高,细胞质和核内的RNA亦高。此外,顶端分生组织中的植物激素含量,特别是生长素含量较高。这些特点,说明顶端分生组织的细胞合成代谢旺盛,处于胚性状态。
类型
根据原始细胞形态,细胞分裂活动以及细胞组织分区等特征,根端可有不同的类型:
?一些低等维管植物,如蕨类植物的木贼属等,顶端有一个倒四面体锥形的顶端细胞,它向顶进行平周分裂,产生根冠细胞;向基作垂周分裂,分化出各
组织系统(图1a
?某些蕨类植物,如座莲蕨;裸子植物,如云杉属;一部分被子植物,如大蒜属等,根端有1,2层横列的原始细胞。由它向顶衍生的细胞形成柱状分生组织区,因细胞横向分裂而形成根冠柱。原始细胞向基衍生的细胞构成中柱分生组织区,进一步分化中柱组织系统、皮层和环柱分生组织区。后者向基分化表皮和皮层,向顶产生根冠的环柱组织(图1b)。 ?大多数双子叶植物顶端分生组织区有3列原始细胞,其上层为中柱原,中层为皮层原,下层是表皮和根冠共同的原始细胞,称为表皮根冠原。这种类型也存在于一部分单子叶植物中(图1c)。
?单子叶植物的根端有3列原始细胞,其中根冠有独立的原始细胞,称为根冠原,表皮则与皮层共同起源于皮层原(图1d)。有的种类表皮有它独立的原始细胞层,即表皮原。
所有根的组织系统和根冠,有其共同原始细胞的,属开放型;而中柱、皮层和根冠,甚至于表皮,各有其一定的原始细胞,属封闭型。一般认为开放型是比较原始的类型。
生长和分化
旺盛的有丝分裂活动区,一般在离顶端有一定距离处。细胞分裂频率较高的部位也不完全一致。如烟草伸长区,在离顶端分生组织区约260,580微米处,而玉米是在4毫米处。
根端分裂和增大的细胞。在一定区域还与分化中的细胞重叠,因为从顶端分生组织的衍生细胞到有明显分化的细胞之间是一个逐渐变化的过程,根端各组织区域,在同一水平上的分化程度也不一致。一般靠近顶端分化皮层的基本分生组织,在液泡化和发生胞间隙时,其相邻的原形成层细胞还停留在具有稠密的细胞质的时期。即使在中柱部分的韧皮部和木质部分子,分化也可不同步。
四( 顶端分生组织和亚顶端分生组织的区别与联系 (一) 区别
顶端分生组织指的是维管植物根和茎顶端的分生组织,它包括长期保持分生能
力的原始细胞及其刚衍生的细胞植物体其它各组织和器官的发生,均由它的细胞
增生和分化而来。
亚顶端分生组织其实指的是植物顶端分生组织中的根端分生组织,因为根端分
生组织由根的保护结构——根冠所覆盖,因此它们并不在根的最前端,而
是位于亚顶端
(二) 联系
亚顶端分生组织只是植物顶端分生组织的一部分,它包括在顶端分生组织之下,
范围小于顶端分生组织。
范文三:植物的分生组织以外的组织
植物的分生组织以外的组织(如根成熟区细胞、筛管细胞等),人和动物的肌肉、神经组织(神经细胞)、哺乳动物成 细胞分裂后,子细胞的去路可能出现三种途径:
①继续增殖:处于细胞周期中的细胞,也就是连续分裂的细胞
植物:根尖分生区细胞、形成层细胞、受精卵、胚的胚根、胚芽、胚轴细胞等;人体:皮肤中表皮的生发层、骨髓的造血干细胞、骨膜的成骨细胞、受精卵、早期胚胎细胞等。
②暂不增殖:暂停分裂,又没有分化完成的细胞。
肝细胞、肾细胞、记忆细胞等。
③不再增殖:分化的细胞,已经具有细胞分裂后,子细胞的去路可能出现三种途径:
①继续增殖:处于细胞周期中的细胞,也就是连续分裂的细胞。 了某种具体的功能。
熟的红细胞、人体皮肤的角质层细胞,成熟的生殖细胞(精子和卵细胞)等。
具有细胞周期的条件
1 连续分裂的细胞才具有细胞周期。
2细胞分裂能力与细胞分化程度成反比。
3成熟的细胞一般不分裂,不具有分裂能力。
一般来说,高度分化的细胞无细胞周期,尚未分化的细胞才有。 有丝分裂的特征及意义
将亲代细胞的染色体经过复制后,精确的平均分配到两个子细胞中。由于染色体上有遗传物质DNA,因而在细胞的亲代和子代之间保持了遗传性状的稳定性。
无丝分裂(1)是一种低等的细胞分裂方式,但高等生物细胞有时也进行无丝分裂。
(2)有DNA的复制,并且细胞要增大。
(3)没有纺缍体染色体的出现。
无丝分裂不是低等生物细胞特有的.蛙的红细胞,高等动物的肝细胞、肾小管上皮细胞、肾上腺皮质细胞等都进行无丝分裂. 全能性的细胞物质基础
生物体每个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体必需的全部基因。
干细胞的用途:
干细胞移植治疗白血病
在体外培养出组织和器官,并最终通过组织和器官移植实现对临床疾病的治疗。
范文四:大豆茎顶端分生组织石蜡切片的制备
V乩27 N“4 大豆科学 第27卷 第4期 20082008矩 Aug( 8月 SOYBEAN SCIENCE
大豆茎顶端分生组织石蜡切片的制备
李晓梅 (枣庄学院生命科学系,山东枣庄277160)
摘要:为探讨大豆茎顶端分生组织石蜡切片的制作方法,观察大豆茎顶端发育过程的微观结构变化。将大豆顶
芽经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等一系列过程,获得其纵切片。结果表明:生长锥顶端、叶原基、花原
基等分裂活跃的部位染色较深,髓分生组织部位染色较浅;在营养生长阶段,叶原基依次从茎顶端分生组织底部发
育,逐渐变大;在生殖生长阶段,顶端变成伸长的圆顶形,然后开始分化各轮花器官。研究结果可为深入观察大豆 茎顶端分生组织解剖结构及分生组织发育的分子生物学研究提供基础。关键词:大豆;顶端分生组织;石蜡切片
中图分类号:s565(1 文献标识码:A 文章编号:1000-984l(2008)04—0708一
03
Paraff'm Section on Meristem of Manufaction of Apical Soybean LI Xiao(mei of (Department Biology Science,Zao出uang University,Zaozhuan9277160,Shandong,China)
for meristem methods to obtain mlcr?tructure information of Abstract:In order more on apical development soybean,the
in Oil of the wm studied the paper(Based fixation,dehydration,transparency,saturated paraffin,embed- process sections in-tithe of obtained(The results this and shootmerlstem were from ding,section dye,s吲ght- 蒯?8apical soybean study
that of dicated the flower regions sptitting actively,such鹪the top apical meristem,leaf 曲mprimordia幽,andwere
dyed
the same meristem zone wss were found at the deeply(At time。pitll dyed lightly(At vegetative growth stage,leaf primordla of dome—liked stage,the part apical meristem,and they bt煅叫惦bigger reproductive酬u8l:乎们Iynh (Atapical basal meri- item became each of floral to in turn(The results could the base for fur- longer 8lighdy,then primordia began appear provide ther on anatomical structure and of shoot mel-iBtem in investigation developmental biology apical soybean(
8ectioHKey meristem;ParaITm words:Soybean;Apical 茎顶端分生组织可分化为茎、叶、花、果实,它对 茎顶端分生组织的石蜡切片技术尚无系统报道,文 植物的形态发生极为重要。大多数植物在这方面都 章旨在用石蜡切片技术找寻可获得清晰、完整的大 有一些
豆茎顶端分生组织的制片方法,为深入研究大豆茎 在国内外研究。大豆茎顶端分生组织形态发生的研究
顶端分生组织解剖结构及分生组织发育的分子生物 剖镜对大豆顶也已有一些报道。早期是凭借放大镜或解 学奠定基础。 端形态发生进行观察?。3】。现在可通 过电镜技术对其形态进行研究【4】,但在制作过程1材料与方法 中,物理、化学方法的处理易使幼嫩复杂的结构受到 并不实用。但石蜡切片可完成大量材损伤甚至变形,且费用较高,并且在研究大量材料时 1(1材料 1(1(I试验材料自贡冬豆(Glycine,懈 (L()me(料的连续观察,同时,石蜡切片结合原位技术可以研究特定基因 序列在组织和细er),有限结荚习性,产于四川自贡。
J。为此,大 1(1(2试剂及配制切片石蜡:上海三精工贸有限 胞中的时空分布规律K 公司;桔红G、苏木精:上海化学试剂厂(Fhka分 豆茎顶端分生组织连续切片的制备就显得尤为重
要。但大豆茎顶端分生组织的石蜡切片在制作过程 装);加拿大树胶:德国Serva公司;其它均为国产分 中常常出现划痕、破碎、染色不良等情况,国内大豆 析试剂。
收稿日期:2007-12?09 基金项目:国家自然科学基金资助项目(30070456)。 作者简介:李晓梅(1972?),女,硕士,主要从事作物生理研究工作。E-mail:elixiaomei@163(eonl。
万方数据
7094期 李晓梅:大豆茎顶端分生组织石蜡切片的制备 海氏铁矾苏木精染液:常规法配制[6]。 上,然后放入40?温箱中干燥24 h以上。并且
mL 燥的时间越长越好。桔红G丁香油饱和液:O(5 g桔红G溶于25 干 100,酒精后,再加入到50 mL丁香油中,然后将其 1(2(5染色、分
放入30-400C烘箱中,待酒精挥发后即色、复染与封片 切片先经二甲苯
I一二甲苯?(+1,2二甲苯+1,2乙醇--*100,乙可使用。
醇 -+100,乙醇—西5,乙醇_80,乙醇—钉O,乙醇_ 加拿大树胶封固液:先将加拿大树胶在40?温
箱中干燥l d以上,然后用二甲苯以1:1稀释加拿 50,乙百扣蒸馏水顺序逐级脱蜡、复水,每级
2—5大树胶。 min。然后再进行染色。采用铁钒一苏木精一桔红 1(2方法 G三重染色法进行染色。4,铁矾染色1 h后,水
洗
30 min,过一次蒸馏水。然后用0(5,苏木精水溶液 1(2(1取材、固定用镊子和解剖针小心剥出生长点,
放入F'从固定液。为使固定液充分进入组织,用真空染色 l h,也可加两滴0(5,苏木精于放有蒸馏水的 抽气机抽气10 mitt左右,使材料沉底。可长期保存。 染色缸中,染色过夜。第2天,水洗5 min后,用
2,1(2(2 脱水、透明 按50,乙醇-+70,乙醇-+ 铁矾分色,之后再用流水洗30 min。然后还要如前 80,乙醇—汐5,乙醇(+100,乙醇_+100,乙醇-+l, 所述从50,,100,酒精逐级脱水,脱水后用1,2
二
2二甲苯+1,2乙醇_+二甲苯I_+二甲苯?顺序脱 甲苯+1,2乙醇(加桔红G丁香油染液)染15 min, 水、透明,每级2 h。在1,2二甲苯+1,2乙醇混合 最后经2次二甲苯透明5 min。完成以上
可用加拿大树胶封固制成永久装片。过程后就 液中加少许番红粉末,以便在以后切片中材料与石
蜡容易辨别。 2结果与分析1(2(3浸蜡、包埋按2,3二甲苯+1,3石蜡(+1 ,3二甲苯+2,3石蜡(+石蜡I_石蜡?顺序浸蜡。 通过上述方法获得的石蜡切片组织完整,染色 清
2,3二甲苯+1,3石蜡中可放置4—8 h或过夜,1,3 晰,细胞核被染为蓝黑色,细胞质为桔红色。生长二甲苯+2,3石蜡中放置3 h,再转入融化的纯石蜡 锥 顶端、叶原基、花原基、原形成层等分裂活跃的部位中2次,每次放置2 h。然后用纸盒(用光滑的硬纸 色较深。髓分生组织部位染色较浅,液泡化程度染 折成)常规包埋。 2(1营养生长阶段 高。’ 1(2(4切片、贴片、烤片 修整蜡块、调整好切片机 后叶原基依次从茎顶端分生组织底部发育,逐渐
轻进行切片,切片厚度8斗m。把切好的蜡带用毛笔 变大。最初,在顶端基部出现凸起(叶原基形成初 放在干净的纸上,光面朝下。镜检后选取合适的 期),凸起与分生组织表面成钝角(图1A),随着内 蜡片
胶滴到放人37-50?的温水中,让其展开。将一滴明 部细胞的分裂,凸起逐渐变大、变长,与分生组织表 福尔马载玻片上,用洗干净的手抹开,再滴一滴3, 面角度逐渐变小,后成锐角(图1B)。最后叶原基发 林,用镊子将展开的切片小心的放在载玻片 育成小叶。
A,B为营养生长期的大豆茎顶端分生组织;c为生殖生长期的大豆茎顶端分生组织(X50);D为雌蕊原始体和雄蕊原始体进一步
分化(X50)。
is A and mm'istem of at merlatem B啪apical mybean veoetative 8rowth staSe 1(X 100);C apical 0f?yk岫at reproductive掣owth
stage(XiJ and 50)lD filrghet'devetot?d pistil ptiInt础 ltstallle血primordia(X 50) (
圈l大豆营养顶端和生殖顶端纵切解剖图 万方数据and meristem structure of shoot Fig(1(11惦mi凹唱r叩118《蚰 _岖ht-apical 眦tioIlof?ybe瓶at vegetative reproductive stage
710 4期 大豆科学 2(2生殖生长阶段 色。这要求不断的从2,铁矾水溶液拿出在显微镜
下检查,但重复太久片子易脱落。所以制作开始时生长 生殖生长阶段指花序分化及花芽的分化。生殖 最好以少量材料先尝试,然后再大量制作一J。经多 初期,营养顶端转变为生殖顶端,与前期相比,顶端变成伸长的圆顶形,开始分化苞片和花原基,进 次尝试后,用2,铁矾分色15 min左右,再水洗30 入了花序分化阶段(图1C)。这与前人的研究结果 min就可达到较理想的效果。最好用流水洗
净2,类似【3(7J。随后,早期分化的花原基便开始分化花 铁矾,如果洗不彻底,制好的片子会褪色。 器官。花器官的分化次序依次为花萼、花瓣、雄蕊、 复染的常规方法是用桔红G丁香油饱和液滴 雌蕊。雌蕊原始体进一步分化柱头、花柱、子房,雄 染。滴染的时问为1—3 min,但由于浓度高,容
过。结果得出用6 mL左右桔红G加入1,2 易染 蕊原始体分化为花药和花丝(图ID)。最后传粉、 受精、开花、结实。 +1,2乙醇溶液的染色缸中进行染色,约15 rain二甲苯 即
可,也可适当加大桔红G丁香油饱和液的浓度,减 3讨论少染色时间。
顶端分生组织幼嫩,而大豆叶片茸毛相对坚硬, 参考文献 给制片带来困难。因此,在取生长点时,一定要尽可【1]蒋青,李扬汉(有限型和无限塑大豆的解剖初探【J](大豆科学, 能剥去外层小叶片,使材料尽可能小。如果外层叶 H(Anatemieel study帆the1990,9(3):213-219(Q(jieng 。“Y 片未剥净,较成熟的茸毛浸蜡后会变硬,在切片时会 and determinate indeteneinateScience咖蛔【, J】(Soybean 在材料上留下擦痕,使整个制作失败。另外,为了固1990。9(3):213-219()
定充分,固定时要抽气,使材料沉于容器底部。 [23王连铮,王金陵(大豆遗传育种学[M】(北京:中国科学出版社,
L I^G?e晒 andof J 脱水时从95,乙醇到100,乙醇中,放置的时 1992:88-89((Wang Z,Wang bleeding soy-Press,1992:88?89()be叭[M](Beijin8:Science 间不能过长,时间太长会使材料变脆,以后会在切片
【3】董钻。大豆栽培生理[M】(北京:中国农业出版社(1995:19—20( 时增加困难。因此在白天不能完成脱水时,可将材 (DolIg Z(Soybe觚eeltlvatlon ph了|ioloSy[M】(Beijing:Agricultural ?料放在80,或70,乙醇任意一级中过夜。但如果Pines,1995:19?20')
长时间保存只能放在70,乙醇中。经乙醇脱水后, of C J F(Reversim in 【4】Wuhbum flowering a伽胍,F,Themes of J咖ll 材料加入二甲苯中,如果产生乳白色,表明材料脱水 【J]((^】 merlca(nBo佃哆,2000,97(10):1425?1438(【5】徐运远,种康。许智宏,等(RNA原位杂交实用技术[J](植物学 不彻底,应该倒回重新脱水,否则切片呈雨雾状,难 z Y K,Xn 报。2002,19(2):234-238((Xe H,ct 11(The Y(Chen6 以镜检婵1。浸蜡的时间要适当,时间过长,易导致 0f in elte with RNA practical technique hybrldiuaien p舶be【 J](缸组织脆硬,切片破碎;时间过短,浸蜡不足,也影响切 ta Bota“eAt Siniea,2002,19(2):234-238() 片效果。一般情况下,如果当天不能完成浸蜡,可在 [6】郑国昌(生物显微技术[M】(北京:人民教育出版社。1978:58(
B2,3二甲苯+1,3石蜡溶液(40?)中放置过夜。包 82((撕 C(Biological Gmiemtechnique[M](Beijing:People ductien Fress,1978:58?82()埋的时间要尽量缩短,否则引起蜡块的温度差,影响
end K(Diffe?'entlatlon [7]KenlylJki s,Sachlko l,Teshiro developmental 石蜡浸入组织的均匀度【6J。另外,切片时切片刀必 flond l'ltoorgans聃influenced 嘲铲d b,nodaI posltlen硼etem^lld 须研磨锋利,没有缺口。切片最大障碍就是刀钝或 涨order in丑determhme 0f Science Soci?type soybeen[J】(cIDp 刀口受损,刀钝会使蜡带翻卷、出现条纹、纵裂。切ety ofJapan,1998,67(1):85(90(
片过程中,刀口还应经常用二甲苯擦拭,以保持清 【8】曾小鲁(实用生物学制片技术[M】(北京:高等教育出版社。 slices Lof The 1989:76?77((ze吣x pracecal technique making 洁,不干净的刀口也会使切片出现划痕或蜡片贴在 Edeetien (M】(BeijtIlg:mgher PT嘲。1989:76— 77()刀上。 [9】李正理(植物钳片技术[M】(北京:中国科学出版社,1987:90( 分色是最为关键的步骤,也是较难掌握的步骤。 Z The Lof technique 92((Ling plant酗[M】(Beljing:Selenee 苏木精染色时间不能过长,否则分色困难。要求Free8。19s7:9D-92 ()
2,铁矾水溶液分色至细胞核呈中灰色,细胞质中无
万方数据
范文五:观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂:
一.实验目的:
(1)制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片
(2)观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期,比较细胞周期不同时期的时间长短。
(3)绘制植物细胞有丝分裂简图。
二.实验原理:
(1)在高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。
(2)染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液) 着色,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的存在状态,就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。
(3)细胞的分裂具有独立性:同一组织的不同细胞,在同一时间内可处于细胞周期的不同分裂时期。
三.实验步骤:
(1)洋葱根尖培养:课前3-4d ,将洋葱放在盛满清水的广口瓶上,让底都接触水,放置温暖处,待根长至5cm 时取用。
(2)制作临时装片 (解离→漂洗→染色→制片)
(3)观察:先用低倍镜观察,找到分生区。分生区细胞的特点是细胞呈正方形,排列紧密。然后把观察目标移到视野中央,再换高倍镜观察有丝分裂各个时期的细胞图像。 知识点拨:
1、制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点:
(1)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间;
(2)解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离;
(3)压片时,用力的大小要适当,要使根尖被压平,细胞分散开。
2、操作要点
(1)解离:
①通过解离将细胞杀死,使细胞停留在不同的分裂时期。
②解离的目的是使组织细胞相互分离开。
③解离时间不宜过长或过短:过长会使根尖过分酥软且染色体成分被破坏;过短使根尖细
胞解离不充分,不能相互分离开。
(2)漂洗:漂洗一定要彻底,防止残留的解离液继续破坏细胞,同时盐酸也影响染色和腐蚀镜头。
(3)染色:染色液的浓度和染色时间必须掌握好,应注意染色不能过深,否则镜下一片紫色,无法观察。
(4)压片:用力要恰当均匀,过重可能将组织压烂' 过轻则不能将细胞分散开。
(5)显微镜下观察的都是死细胞,不能看到细胞分裂的动态变化,若视野中找不到某一时期的细胞,可通过移动装片从邻近的区域中找。
知识拓展:
1、“酒精”在不同实验中的作用:
(1)体积分数95﹪的酒精:与质量分数15%的HCI 溶液按1:1的体积比混合作解离液,用于观察根尖分生组织细胞有丝分裂的实验。
(2)体积分数50﹪的酒精:检测生物组织中(如花生子叶切片)脂肪实验中,用于洗去苏丹Ⅲ染色剂染色后切片上的浮色。
(3)无水乙醇:叶绿体中色素提取与分离实验中用作色素提取剂。
(4)质量分数70%的酒精:常用作实验材料或消毒剂。
2、与细胞分裂有关的细胞器:
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