范文一:血清蛋白的分离
血清蛋白的分离 —— 聚丙烯酰胺凝胶电泳法
2010-02-25 08:48:48 来源:易生物 浏览次数:141 网友评论 0 条
关键词:电泳血清凝胶血清蛋白分离聚丙烯酰胺凝胶电泳法 Tricine-SDS-PAGE
实验原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶为载体的一种区带电泳。 该凝胶由丙烯酰胺 (Acr ) 和交联剂 N , N — 甲叉双丙烯聚酰胺(Bis )聚合而成。聚丙烯酰胺凝胶电泳利用电泳和分 子筛的双重作用分离物质。
Acr 和 Bis 单独存在或混合在一起时是稳定的,但在具有自由基团体系时就能聚合。引发自 由基团的方法有化学法和光化学法两种。化学法的引发剂是过硫酸胺(Ap ),催化剂是四 甲基乙二胺(TEMED );光化学法是以光敏感物核黄素来代替过硫酸胺,在紫外光照射下 引发自由基团。 采用不同浓度的 Acr 、 Bis 、 Ap 、 TEMED 使之聚合, 产生不同孔径的凝胶。 因此可按分离物质的大小,形状来选择凝胶浓度。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE )有圆盘(disc )和垂直板(vertical slab )型之分,但两者 的原理完全相同。由于垂直板形具有板薄,以冷却,分辨率高,操作简单,便于比较与扫描 的优点,而为大多数实验室采用。
试剂和器材
一、试剂
分离胶缓冲液(Tris -HCl 缓冲液 PH8.9) :取 1mol/L盐酸 48mL , Tris 36.3g, 用无离子水溶 解后定容至 100mL 。
浓缩胶缓冲液(Tris -HCl 缓冲液 PH6.7) :取 1mol/L盐酸 48mL, Tris 5.98g, 用无离子水溶 解后定容至 100mL 。
电泳缓冲液(Tris -甘氨酸缓冲液 PH8.3) :称取 Tris 6g, 甘氨酸 28.8g, 用无离子水溶解后 定容至 1L 。用时稀释 10倍。
30%Acr -Bis 贮存液:30g Acr,0.8g Bis, 用无离子水溶解后定容至 100mL, 不溶物过滤去 除后置棕色瓶贮于冰箱。
TEMED ; 10%过硫酸铵 (新鲜配制) ; 25%蔗糖溶液; 0.05%溴酚蓝溶液; 7%冰乙酸溶液。 染色液:称取考马斯亮蓝 R250 2.5g ,冰乙酸 92ml ,甲醇 454ml ,加去离子水 454 ml 使 其完全溶解,过滤后置棕色瓶保存。
脱色液:取甲醇 50ml ,冰乙酸 75ml ,加 蒸馏 水至 1000ml 。
二、材料
人或动物 血清 。
三 . 器材
DYCZ-24D 型垂直板电泳槽; 移液管 1 mL (′ 3), 5 mL (′ 4), 0.5mL (′ 1), 0.1mL (′ 2); 烧杯 100mL (′ 2);细长头的 吸管 ;微量注射器。
操作方法
一、 安装垂直板电泳槽
1. 将密封用硅胶框放在平玻璃上,然后将凹型玻璃与平玻璃重叠;
2.用手将两块玻璃板夹住放入电泳槽内,玻璃室凹面朝外,插入斜插板;
3.用 蒸馏 水试验封口处是否漏水。
血清蛋白的分离 —— 聚丙烯酰胺凝胶电泳法
2010-02-25 08:48:48 来源:易生物 浏览次数:142 网友评论 0 条
关键词:电泳血清凝胶血清蛋白分离聚丙烯酰胺凝胶电泳法 Tricine-SDS-PAGE
二、 制备凝胶板
1.分离胶制备:取 Acr-Bis 储备液 5.0mL, Tris -HCl 缓冲液 PH8.9 2.5mL, 去离子水 12. 39mL, TEMED 0.02mL 置于小 烧杯 中混匀,再加入 10% 0.1mL 过硫酸胺,用磁力 搅拌器 充分混匀 2min 。混合后的凝胶溶液,用细长头的 吸管 加至长、短玻璃板间的窄缝内,加胶 高度距样品模板梳齿下缘约 1cm 。 用 吸管 在凝胶表面沿短玻璃板边缘轻轻加一层重 蒸馏 水 (约 3-4cm ),用于隔绝空气,使胶面平整。分离胶凝固后,可看到水与凝固的胶面有折 射率不同的界限。倒掉重蒸水,用 滤纸 吸去多余的水。
2. 浓缩胶制备:取 Acr-Bis 储备液 1.0mL , Tris -HCl 缓冲液(PH6.7) 1.25mL , TEMED 0.01mL, 去离子水 7.64mL , 10% 过硫酸胺 0.1mL ,用磁力 搅拌器 充分混匀。混合均匀后 用细长头的 吸管 将凝胶溶液加到长短玻璃板的窄缝内 (及分离胶上方) , 距短玻璃板上缘 0. 5cm 处,轻轻加入样品槽模板。待浓缩胶凝固后,轻轻取出样品模槽板,用手夹住两块玻 璃板,上提斜插板,使其松开,然后取下玻璃胶室去掉密封用胶框,用 1%电泳缓冲液 琼脂 胶密封底部, 再将玻璃胶室凹面朝里置入电泳槽。 插入斜插板, 将电泳缓冲液加至内槽玻璃 凹口以上,外槽缓冲液加到距平玻璃上沿 3mm 处。
三、加样
取 0.1mL 血清 样品 , 0.1mL 25%蔗糖溶液 , 0.05mL 0.05%溴酚蓝溶液混合后, 用微量注射 器取 5μL上述混合液,通过缓冲液,小心将样品加到凝胶凹形样品槽底部,待所有凹形样 品槽内都加了样品,即可开始电泳。
四、电泳
将直流稳压 电泳仪 开关打开,开始时将电流调至 10mA 。待样品进入分离较时,将电流调至 20-30mA 。当蓝色染料迁移至底部时,将电流调回到零,关闭电源。拔掉固定板,取出玻
璃板, 用刀片轻轻将一块玻璃撬开移去, 在胶板一端切除一角作为标记, 将胶板移至大培养 皿中染色。
五、染色
将凝胶放入考马斯亮蓝 R250染色液中,使染色液没过胶板,染色 30min 左右。
六、脱色
弃去染色液,将凝胶置于脱色液中,并经常更换脱色液,直至背景蓝色褪去。如用 50℃ 水 浴 或脱色 摇床 ,则可缩短脱色时间。脱色液经活性炭脱色后,可反复使用。
注意事项
(1) Acr 和 Bis 均为神经毒剂,对皮肤有刺激作用,操作时应戴手套和口罩,纯化应在通风 橱内进行。
(2) 玻璃板表面应光滑洁净,否则在电泳时会造成凝胶板与玻璃板之间产生气泡。
(3) 样品槽模板梳齿应平整光滑。
(4) 用 琼脂 封底及灌凝胶时不能有气泡,以免影响电泳时电流的通过。
(5) 切勿破坏加样凹槽底部的平整,以免电泳后区带扭曲。
(6)为防止电泳后区带拖尾,样品中盐离子强度应尽量低,含盐量高的样品可用透析法或 凝胶过滤法脱盐。
(7)电泳时应选用合适的电流、电压,过高或者过低都会影响电泳效果。
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范文二:血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量 实验报告
姓 名:
学 号:
专业年级:
组 别:
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量 实验日期 实验地点
合作者 指导老师
评分 教师签名 批改日期 一、实验目的
1.1.学习醋酸纤维薄膜电泳的基本原理和操作方法;
1.2.了解电泳技术的一般原理;
1.3.掌握电泳分离血清蛋白质及其定性定量的方法。
二、实验原理
2.1.血清中各种蛋白质的等电点不同,一般都低于pH7.4。它们在pH8.6的缓冲液中均解离带负电荷,在电场中向正极移动。由于血清中各种蛋白质分子大小、形状及所带的电荷量不同,在醋酸纤维素薄膜上电泳的速度也不同。因此可以将它们分离为清蛋白(Albumin)、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白5条区带。
2.2.血清中不同蛋白质的等电点、分子量及含量
血清蛋白质 等电点 分子量 占总蛋白的,
清蛋白 4.64 69,000 57,72
α1,球蛋白 5.06 200,000 2,5
α2,球蛋白 5.06 300,000 4,9
β,球蛋白 5.12 90,000,150,000 6.5,12
γ,球蛋白 6.85,7.3 156,000,950,000 12,20
缓冲液pH=8.6,pI,pH。
血清蛋白带负电荷,在电场中向正极移动。
预测血清蛋白电泳区带图
血清蛋白依次分为清蛋白,球蛋白的α1、α2、β、γ五个区带
2.3.?膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带;?各色带蛋白质含量与染料结合量基本成正比;?可将各色带剪开,分别溶于碱性溶液中;?用分光光度法计算各种蛋白质的百分数。
三、材料与方法:
3.1.实验材料:
3.1.1.实验试剂:?样品:健康人血清(新鲜、无溶血);?巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6,离子强度0.06mol/L);?氨基黑10B染色液;?漂洗液;?洗脱液:0.4mol/NaOH溶液。
3.1.2.实验器材:?V-1100分光光度计(×1);?恒温水浴箱(×1);?试管(×6)、试管架(×1);?1000μL加样枪(×1)、加样枪架(×1);?醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120μm);?培养皿(×5);?点样器或载玻片(×1);?平头镊子(×2);?剪刀(×1);?电泳槽(×1);?直流稳压电泳仪(×1)
3.2.实验步骤
1(准备与点样:?取2×8cm的膜条;?亚光面距一端1.5cm处取一点样线;?充分浸透在巴比妥缓冲液中;?取出膜条,用滤纸吸去多余的缓冲液;?点样器下端粘上薄层血清;?垂直点样。
点样示意图:
注意:点样线尽量点得细窄而均匀。
8cm + —
m — 点样线 小组标记
(粗面) 2cm 点样区
样品标记
1.5cm
2.电泳:?放置膜条(点样面向下,点样端置于阴极);?膜条贴紧滤纸,拉直膜条;?平衡五分钟;?通电(调节电压120v/电流,时间:45~60 min);?关闭电源。 电泳槽解剖图:
3.染色、漂洗:?通电完毕;?取出膜条;?浸于染色液(氨基黑10B)中,5min;?取出膜条,浸于漂洗液;?反复漂洗2次,直至漂净;?滤纸吸干薄膜。
4.定量(洗脱比色法)(因实验室等原因,未做)
四、结果与讨论:
图一 染色后的膜条
4.1.结果分析
本次实验得到的图谱只能够清晰的看出清蛋白和γ,球蛋白的区带,其余无法区别。原因可能如下:
?醋酸纤维薄膜质量不足
?薄膜过湿,样品扩散迅速,导致样品分离不成区带。
?点样太少,区带显色不明显。
?电泳时间不足。
?薄膜在缓冲液中浸泡的时间不足。
?取出电泳后的薄膜过程中曾不慎将薄膜掉到地上。
?染色时,因为现场混乱,可能导致醋酸纤维薄膜不是一张一张放入染色液的,在染色固定前,薄膜与薄膜之间重叠,造成薄膜上还未固定的血清蛋白彼此粘连。
4.2.课后思考题
1.电泳时,点样端置于电场的正极还是负极,为什么,
答:点样端置于电场的负极。因为人体血清的蛋白质会因电槽中溶质呈碱性而带负电,要成功分离出各类各类蛋白质,理应将点样端置于电场的负极。
2.电泳后各区带应明显分开,如分离不清或不整齐,试分析其可能存在的原因。
答:?醋酸纤维薄膜质量不足;?薄膜过湿,样品扩散迅速,导致样品分离不成区带;?点样太少,区带显色不明显;?染色时,醋酸纤维薄膜不是一张一张放入染色液的,在染色固定前,薄膜与薄膜之间重叠,造成薄膜上还未固定的血清蛋白彼此粘连。?电泳时电压,电流或电泳过小或时间不够,造成区带未分离。
范文三:血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量 实验报告
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量 实验报告
生物化学实验报告
姓 名:
学 号:
专业年级:
组 别:
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称
实验日期
合作者
评分 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量 实验地点 指导老师 教师签名 批改日期
一、实验目的
1.1.学习醋酸纤维薄膜电泳的基本原理和操作方法;
1.2.了解电泳技术的一般原理;
1.3.掌握电泳分离血清蛋白质及其定性定量的方法。
二、实验原理
2.1.血清中各种蛋白质的等电点不同,一般都低于pH7.4。它们在pH8.6的缓冲液中均解离带负电荷,在电场中向正极移动。由于血清中各种蛋白质分子大小、形状及所带的电荷量不同,在醋酸纤维素薄膜上电泳的速度也不同。因此可以将它们分离为清蛋白(Albumin)、α1-球蛋白、α2-球蛋
白、β-球蛋白、γ-球蛋白5条区带。
2.2.血清中不同蛋白质的等电点、分子量及含量
血清蛋白质 等电点 分子量 占总蛋白的, 清蛋白 4.64 69,000
57,72 α1,球蛋白 5.06 200,000
2,5
α2,球蛋白 5.06 300,000
4,9 β,球蛋白 5.12 90,000,150,000 6.5,12 γ,球蛋白 6.85,7.3 156,000,950,000 12,20 缓冲液pH=8.6,pI,pH。
血清蛋白带负电荷,在电场中向正极移动。
预测血清蛋白电泳区带图
血清蛋白依次分为清蛋白,球蛋白的α1、α2、β、γ五个区带
2.3.?膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带;?各色带蛋白质含量与染料结合量基本成正比;?可将各色带剪开,分别溶于碱性溶液中;?用分光光度法计算各种蛋白质的百分数。
三、材料与方法:
3.1.实验材料:
3.1.1.实验试剂:?样品:健康人血清(新鲜、无溶血);?巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6,离子强度0.06mol/L);?氨基黑10B染色液;?漂洗液;?洗脱液:0.4mol/NaOH溶液。
3.1.2.实验器材:?V-1100分光光度计(×1);?恒温水浴箱(×1);
?试管(×
6)、试管架(×1);?1000μL加样枪(×1)、加样枪架(×1);?醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120μm);?培养皿(×5);?点样器或载玻片(×1);?平头镊子(×2);?剪刀(×1);?电泳槽(×1);?直流稳压电泳仪(×1)
3.2.实验步骤
四、结果与讨论:
图一 染色后的膜条
4.1.结果分析
本次实验得到的图谱只能够清晰的看出清蛋白和γ,球蛋白的区带,其余无法区别。原因可能如下:
?醋酸纤维薄膜质量不足
?薄膜过湿,样品扩散迅速,导致样品分离不成区带。
?点样太少,区带显色不明显。
?电泳时间不足。
?薄膜在缓冲液中浸泡的时间不足。
?取出电泳后的薄膜过程中曾不慎将薄膜掉到地上。 ?染色时,因为现场混乱,可能导致醋酸纤维薄膜不是一张一张放入染色液的,在染色固定前,薄膜与薄膜之间重叠,造成薄膜上还未固定的血清蛋白彼此粘连。
4.2.课后思考题
1.电泳时,点样端置于电场的正极还是负极,为什么, 答:点样端置于电场的负极。因为人体血清的蛋白质会因电槽中溶质呈碱性而带负电,
要成功分离出各类各类蛋白质,理应将点样端置于电场的负极。
2.电泳后各区带应明显分开,如分离不清或不整齐,试分析其可能存在的原因。 答:?醋酸纤维薄膜质量不足;?薄膜过湿,样品扩散迅速,导致样品分离不成区带;?点样太少,区带显色不明显;?染色时,醋酸纤维薄膜不是一张一张放入染色液的,在染色固定前,薄膜与薄膜之间重叠,造成薄膜上还未固定的血清蛋白彼此粘连。?电泳时电压,电流或电泳过小或时间不够,造成区带未分离。
范文四:实验八血清蛋白的醋酸纤维膜电泳
实验八 血清蛋白的醋?酸纤维膜电泳?
(一)目的要求
1(学习电泳的原?理。
2(掌握醋酸纤维?膜电泳法分离?血清蛋白的基?本操作方法。
(二)原理
带电粒子在电?场中发生定向?移动的现象称?电泳。电泳方法的基?本原理是利用?不同带电物质?在电场中移动?速度不同而达?到分离的目的?。醋酸膜是由二?乙酸纤维制成?的具有均一的?泡沫状结构,渗透性强,对分子移动的?阻力小,较适宜用作区?带电泳法分离?物质的支持物?。
血清中含有清?蛋白,α、α、β、γ球蛋白等,其等电点各不?相同,都在7以下。若12
将血清置于?pH8.6的缓冲溶液?中电泳,由于它们均表?现为带负电荷?,所以在电场中?会向阳极移动?。由于它们所带?电荷的多少和?分子大小的不?同,故在电场内的?移动速度也不?同,通过电泳法可?将之分离。
(三)试剂和器材
1(器材
(1)醋酸纤维膜(2×8cm)
(2)电泳仪(带电泳槽)
(3)平板玻璃
(4)点样器(用塑料垫板自?制)
)培养皿,粗滤纸,镊子等。 (5
2(试剂
(1)新鲜动物血清?(无溶血现象)
(2)巴比妥缓冲液?(pH8.6):巴比妥钠12?.76g、巴比妥1.66g溶于1?000mL蒸?馏水中。 (3)染色液:氨基黑10B?0.5g,甲醇50mL?,冰醋酸10 mL,水40 mL,混匀。 (4)漂洗液:95%乙醇45mL?,冰醋酸5 mL,水50 mL,混匀。
(5)透明液:无水乙醇70? mL,冰醋酸30 mL,混匀。
(四)操作步骤
1(浸泡醋酸纤维?膜:将醋酸纤维膜?用镊子取出一?张,并识别光泽面?与无光泽面,用笔在膜角标?上记号,然后放入缓冲?液中浸泡约2?0分钟。待膜浸透后(有白斑的弃去?),取出,用滤纸吸干多?余缓冲液。
2(点样:将醋酸纤维膜?平放于玻璃板?上,无光泽面朝上?,将点样器沾上?血清在离膜条?的一端约2c?m处轻轻地水?平落下并随即?提起,于是膜条上就?有了血清样品?。(点样好坏是电?泳图谱是否清?晰的关键)。
(电泳:在两个电泳槽?内加入高等的?缓冲液,并放置好浸入?缓冲液的双层?滤纸条作3
的滤?纸桥。将膜条平悬于?电泳槽支架的?滤纸架上,为防止蒸发,将点样的无光?泽面朝下,点样的一端靠?电源的负极。待平衡后通电?。调节电压至1?60V,电流强度在0?.4~0.7A,电泳时间约5?0分钟。
4(染色:电泳结束,关闭电源,将膜条取出浸?于染色液染色?5~10分钟。
5(漂洗:将染好色的膜?条放入漂洗液?中漂洗4~5次,每次浸漂3分?钟左右,使背景颜色脱?净为止。
6(透明:为了长期保存?将漂洗后的膜?条夹在干净的?滤纸中吸去多?余的溶液,吹干,浸入透明液中?浸泡3~5分钟,然后取出平贴?于玻璃板上,(不要留有气泡?),用电吹风使之?完全干燥后用?单面刀片,刀口紧贴玻璃?板进刀把整块?膜取下,即成为了可长?期保存不退
色?的血清蛋白区?带透明膜。
注意事项:染色液、漂洗液、透明液应存放?于密闭瓶子中?,否则,易挥发成分挥?发,
使溶液组分比?发生变化,影响实验结果?。
膜条
点样线
2cm
(五)思考题
在一含有多种?偏酸性和偏碱?性蛋白质的混?合液中,用pH7的缓?冲液进行电泳?,是否均
可得到?分离,为什么,你有什么办法?使之完全分离?,
范文五:血清蛋白电泳的临床意义及实验诊断分型
380中国医师杂志 2002年增刊
血清蛋白电泳的临床意义及实验诊断分型
湖南省脑科医院(湖南 长沙 410007) 王松华
关键词 蛋白电泳; 血清; 临床意义; 实验诊断分型
血清含有的蛋白质不下300种[1], 这些蛋白质执等。行着许多功能。在各种疾病期间总血清蛋白质浓度和各个蛋白质组分的比例可发生改变, 因此总血清蛋白质和各个组分的定量在临床诊断与治疗上很有重要的价值[2]。1 血清蛋白电泳的临床意义1?1 前白蛋白区带 前白蛋白含有两种运载蛋白, 一
白蛋白增高, 多见于严重失水而引起的血液浓缩。
白蛋白降低, 常见的疾病有肝脏疾病、肝损伤、慢性感染、肿瘤、肾脏疾病、出血、饥饿和营养不良, 主要见于以下情况。⑴白蛋白合成障碍:长期禁良, 胃肠道疾病并有吸收不良, 蛋白质营养缺乏, 肝脏疾患, 晚期癌症, 感染及创伤等应激状态, 甲状腺功能减退等都可出现白蛋白降低。⑵白蛋白丢失过多:慢性肾病, 肾病综合征白蛋白从尿中排出, 大面积烧伤蛋白质从伤口排出, 胃肠道疾病可将蛋白质从胃肠道排出, 大量的出血时蛋白质流出体外, 。⑶白蛋白分解过多:, , 糖尿病, 甲状腺α11-球蛋白区带 1-抗胰蛋白酶是α1-球蛋白区带的主要成分, 约占1/2。肺部疾病, 特别是肺气肿
combinant human granulocyte -macrophage colony -stimulating factor[J]1N E NGJ M ed ,1998,319:1628
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4
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种与甲状腺素结合, 称甲状腺素结合蛋白, 有调节甲状
腺代谢和甲状腺功能状态的作用, 但不如甲状腺结合球蛋白重要; 另一种与维生素A 结合, 称维生素A 结合蛋白, 在维生素A 代谢中起作用。在蛋白质—热能营养不良者, 血清前白蛋白的浓度会降低。1?2 白蛋白区带 白蛋白是维持人体血浆胶体渗透压的主要成分; 作为内源性氨基酸的营养源; 的缓冲酸和碱的能力; 载体如:胆红素、脂肪酸镁见, , 加用小剂量阿糖胞苷。
然而, 细胞因子在体内细胞间微环境中所构成的调控网络还一无所知。为此, 在联用细胞因子方面还存在一些问题, 如对哪些疾病几种因子联用, 是同时应用还是序贯应用, 以及剂量等都有待进一步研究。
细胞因子一般无严重副作用, G M -CSF 约10%的轻、中度发热, 全身不适, 肌肉关节疼痛, 还可有食欲减退、转氨酶轻度升高; 如剂量较大, 偶可发生浆膜腔积液。G -CSF 的副作用较前者轻, 可引起皮疹、轻度骨痛, 偶见发热。M -CSF 可引起轻度发热、骨骼痛。I L -2可引起发热, 皮肤红斑, 严重者可发生毛细血管渗漏综合征, 需积极处理。I L -3可引起发热、头痛、畏寒、骨痛、注射局部红斑等。rhEPO 常并发高血压, 部分患者在用药后数小时出现寒颤、关节痛、恶心、呕吐, 还可发生透析管口血栓形成。上述各种细胞因子的不良反应大多是可逆的, 停药后可恢复。
参考文献
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[收稿日期:2001-11-16]
中国医师杂志 2002年增刊381
可引起αangler 氏病可引起α1-抗胰蛋白酶减少。T 1-脂蛋白减少, 肝病时可引起凝血酶原减少。炎症反应, 高脂血症, 妊娠, 使用避孕药均导致α1-球蛋白增加。
α1?4 类风湿关节炎, 骨髓病, 贫血, 2-球蛋白区带 严重肝病时皆可引起α2-球蛋白区带内的主要蛋白质减少; 但肾病综合征、急慢性炎症、肿瘤、心肌炎、肺气肿、糖尿病、高脂血症、妊娠可引起α2-球蛋白增加。
β-球蛋白区带 1?5 肾病、高脂血症、缺铁性贫血等可引起β-球蛋白增高; 肝病、恶性肿瘤、系统性红斑狼, 自身免疫性贫血可导致降低。
γ-球蛋白区带 γ-球蛋白增多症, 肝脏疾病, 1?6
慢性感染, 系统性红斑狼疮, 单克隆和多克隆性骨髓瘤可引起增高; 慢性淋巴白血病, 轻链病, 无γ-球蛋白血症, 低免疫球蛋白血症引起降低。1?7 异常区带 已发现有20种以上蛋白的遗传性变异, 这些个体可以不表现病症, 在电泳分析血清蛋白质区带时可发现二条或一条宽的白蛋白区带, 称为双白蛋白血症。当某些药物大量应用(如青霉素大剂量注射使血药浓度增高时) 而与白蛋白结合时, 也可使白蛋白出现异常区带。
在β和γ的γ-β和γ区带分离不开, 称为β-γ桥2 血清蛋白电泳图谱实分型
正常人血清中各种蛋白浓度的差别较大, 所以在许多疾病时仅表现出轻微变化, 血清蛋白电泳不能作为测定特异蛋白的方法, 但对具有各自特异蛋白电泳类型的某些疾患亦有重要的诊断意义, 以下是几种主要图谱类型[3]。2?1 蛋白不足型 白蛋白部分显著减少β, 部分减少。是蛋白摄取不足, 吸收不良及无选择性的蛋白漏出所致。2?2 肾病型 肾病综合征患者血清蛋白泳图型非常特异, 由于白蛋白等小分子蛋白选择性的漏出α, 2-球蛋白及IgM 脂蛋白等大分子残留在血中致使白蛋白显著减少α, 2-球蛋白明显增加β, 及γ-球蛋白亦可能下降。肾炎急性期α2-球蛋白可增高有时合并γ-球蛋白轻度增高。
α2?3 急性肝损害型 2-球蛋白及白蛋白降低(广泛
的肝损害引起) , 特别是在乙型肝炎时α2-球蛋白可显
著降低, 如γ-球蛋白增高则为慢性化的指标。
α2?4 慢性肝损害型 2-球蛋白及白蛋白降低同时
伴有γ-球蛋白增加, 其变化程度与肝损害的临床所
γ-球见平行, 常见病因是肝硬化。由于IgA 的增加,
蛋白明显增加并出现快γ-球蛋白使得β和γ-球蛋白连接在一起不易分开, 称为β-γ桥, 此乃是肝硬化的特征。
α2?5 急性炎症(应激反应) 型 1及α2-球蛋白增加,
白蛋白减少。此型表现基于炎症可刺激细胞分裂, 产
α生的多种“急性相反应物质”蛋白群多存在于α1、2及
β-球蛋白区带, 尤其是α由于合成减2-球蛋白区带。少, 白蛋白和转铁蛋白常常降低。常见于各种炎症和应激反应、急性感染、心肌梗塞、全栓形成、恶性肿瘤、外伤、休克等。
α2?6 慢性炎症型 , -球蛋白1和α2-球蛋白增加γ
增加, 白蛋白降低。各种“急性相反应物质”增加β, 淋γ-球蛋白, , 两条α-。见于各种
, 自身免疫性疾病, 变态反应性疾。2?7 M 蛋白型 多在γ-球蛋白区带位置出现狭窄而峰高的M 蛋白带区。此时血清中正常的γ-球蛋白几乎消失, 主要见于多发性骨髓瘤, 原发性巨球蛋白血症,H 链病。
β(α2?8 某种高脂血症时β, 或α2) 增加型 2-球蛋白区带因脂蛋白(LD L 、V LD L 等) 增加而致β或α2-球蛋白增加。
β-球蛋白增加, 白蛋白减少, 从妊娠中2?9 妊娠型
期至第9个月时最明显。
2?10 蛋白缺乏型 某种特定的蛋白成分单独缺乏而
引起某一蛋白区带蛋白质减少多为先天性蛋白缺乏所
αα致。包括白蛋白缺乏、1-球蛋白显著减少、2-球蛋
β-球蛋白显著减少、γ-球蛋白缺乏。白显著减少、
参考文献
1 沈霞, 主编1现代生化检验与临床实践[M]1上海:上海科学技术文
献出版社,1999,100~110
2 张孝明, 主编
1现代临床生化检验学[M]1北京:人民军医出版社, 2001,1179~1184
3 久保信彦1蛋白电泳图谱分型[J]1治疗,1994,76(5) :29~31
[收稿日期:2001-08-30]