范文一:双关的结构类型及其修辞效果
双关的结构类型及其修辞效果
双关就是指有意识地使用同一个词语,同一个句子,在同一个上下文中,同时表达两层或两层以上的意思。如南朝民歌《采莲曲》:“采莲南塘秋,莲花过人头。低头弄莲子,莲子清如水。”这首诗里的“莲”与怜惜的“怜”谐音,就起到了双关的作用。再如刘禹锡的《竹枝词》:“杨柳青青江水平,闻郎江上唱歌声。东边日出西边雨,道是无晴却有晴。”这里的“晴”既指天气晴朗同时又暗指对唱歌的情郎的“情”。这也是一种双关。
双关的类型分为谐音双关、语义双关和语法双关三种。
谐音双关是指利用同音现象构成双关语。我们上文所举的两个例子都是谐音双关,再如唐朝诗人李群玉的《寄人》:“寄语双莲子,须知用意深。莫嫌一点苦,便拟弃莲心。”同样是以“莲”暗指“怜”。再如**主席的《蝶恋花 答李淑一》:“我失骄样杨君失柳,杨柳轻扬直上重霄九。”这里的杨柳表面上指的是杨树和柳树、杨花和柳絮,实际上指的是革命烈士**和柳直荀。有一道菜叫做“霸王别姬”,字面上指的是西楚霸王项羽和他的爱妾虞姬,实际上呢,说的是甲鱼和烧鸡做成的菜。爱新觉罗?溥仪3岁登基,大哭大喊,其父摄政王说:“别哭,别哭。快完了,快完了。”典礼完毕,文武百官窃窃私议,认为此乃不祥之兆,怎么能说“快完了”呢,袁世凯窃国坐上了龙椅,怕头上的吊灯掉下来砸着他,将座位往后挪退了一步,于是也有人认为此举预兆着——退位。
在很多民歌、民谣和歇后语中也大量使用了谐音双关的修辞手法。如宋朝有民谣曰:打破筒(谐童贯姓),泼了蔡(谐蔡京姓),便是人间好世界。”《红楼梦》里有一张“护官符”:“假不假,白玉为堂金做马;阿旁宫,三百里,住不下金陵一个史;东海缺少白玉床,龙王来请金陵王;丰年好大雪,珍珠如土金如铁。”这里就是用“假”谐“贾”用“雪”谐“薛”,民间常用的歇后语,如高山打鼓——卜通、卜通,实际上谐音“不通、不通”;外甥打灯笼——照舅,谐的是“照旧”。
语义双关,是指利用词语和句子语言多义现象构成的双关。如鲁迅《为了忘却的纪念》:“夜正长,路也正长,我不如忘却,不说的好吧。”“夜”既指现实中的黑夜,又指国民党反动派的统治正如漫漫长夜,“路”既指现实中的路,又指革命斗争的道路也正长。再如周烨《我的伯父鲁迅先生》:“我小的时候,鼻子跟你爸爸的一样,也是又高又直,可是后来碰了几次壁,就把鼻子碰扁了。”“想,四周围黑洞洞的,还不容易碰壁么,”“四周黑洞洞的”不仅指黑得看不见,也指当时的社会黑暗腐朽,“碰壁”也不光指字面上的撞了墙,同时也指做事不顺利,到处碰钉子。
歇后语里也有很多语义双关的,如老鼠进风箱——两头受气,寿星佬上吊——活得不耐烦了,王八吃西瓜——滚的滚,爬的爬。
语法双关,是利用语法结构的多种可能性造成的双关。如“做女人挺好”。这句话表面上看是一个单句:“做女人”是动宾短语做主语,“挺好”做谓语。“挺”在这里是副词。但是在广告语中,“做女人”
成了状语,“挺”成了主语,“好”成了谓语。
我们使用双关的能取得什么样的修辞效果呢,
双关往往服务于不准或不能明说的特定交际环境,从而取得委婉含蓄的修辞效果。如我们在中学课本里学过的《挺进报》:“22日黄昏,陈然忽然收到一封没有署名的短信:“今日江水暴涨,闻君欲买舟东下,谨祝一帆风顺,沿途平安。”陈然的特殊身份和他所处的特殊环境使通知他赶紧逃走的人不能明白的告诉他敌人已经要抓他了,所以只能采用这样的方式来告诉他。
双关还能增加话语、文本的美感和情趣。如在《红楼梦》里,就有“万艳同杯”、“千红一窟”,以及元春、迎春、探春、惜春四姐妹,“杯”与“悲”谐音,“窟”与“哭”谐音,四春则暗指了“原应叹息”,这样就使人物的悲剧命运带有了一种宿命感,使人更加为之感动。再如李商隐的《无题》:“春蚕到死丝方尽,蜡炬成灰泪始干。”“丝”既指春蚕吐出的丝,又指思念的“思”,这样就使诗增加了美感和更多的可读性。
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【唯美句子】 走累的时候,我就到升国旗哪里的一角台阶坐下,双手抚膝,再闭眼,?
让心灵受到阳光的洗涤。懒洋洋的幸福。
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? 【唯美句子】 一个人踮着脚尖,在窄窄的跑道白线上走,走到很远的地方又走回来。阳光很好,温暖,柔和。漫天的安静。
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? 【唯美句子】 清风飘然,秋水缓淌。一丝云起,一片叶落,剔透生命的空灵。轻轻用手触摸,就点碎了河面的脸。落叶舞步婀娜不肯去,是眷恋,是装点,瞬间回眸,点亮了生命精彩。
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? 【唯美句子】 几只从南方归来的燕子,轻盈的飞来飞去,“几处早莺争暖树,谁家新燕啄春泥,”其乐融融的山林气息,与世无争的世外桃源,让人心旷神怡。 顶 0 收藏 2
? 【唯美句子】 流年清浅,岁月轮转,或许是冬天太过漫长,当一夜春风吹开万里柳时,心情也似乎开朗了许多,在一个风轻云淡的早晨,踏着初春的阳光,漫步在碧柳垂青的小河边,看小河的流水因为解开了冰冻而欢快的流淌, 清澈见底的的河水,可以数得清河底的鹅软石,偶尔掠过水面的水鸟,让小河荡起一层层的涟漪。河岸换上绿色的新装,刚刚睡醒的各种各样的花花草草,悄悄的露出了嫩芽,这儿一丛,那儿一簇,好像是交头接耳的议论着些什么,又好象是在偷偷地说着悄悄话。
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? 【唯美句子】 喜欢海子写的面朝大海春暖花开,不仅仅是因为我喜欢看海,还喜欢诗人笔下的意境,每当夜深人静时,放一曲纯音乐,品一盏茶,在脑海中搜寻诗中的恬淡闲适。在春暖花开时,身着一身素衣,站在清风拂柳,蝶舞翩跹的百花丛中,轻吹一叶竖笛,放眼碧波万里,海鸥,沙滩,还有扬帆在落日下的古船,在心旷神怡中,做一帘红尘的幽梦。
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? 【唯美句子】 繁华如三千东流水,你只在乎闲云野鹤般的采菊东篱、身心自由,置身置灵魂于旷野,高声吟唱着属于自己的歌,悠悠然永远地成为一个真真正正的淡泊名利、鄙弃功名利禄的隐者。
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? 【唯美句子】 世俗名利和青山绿水之间,你选择了淡泊明志,持竿垂钓碧泉绿潭;权力富贵和草舍茅庐之间,你选择了宁静致远,晓梦翩跹姹紫嫣红。
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? 【唯美句子】 那是一株清香的无名花,我看到了它在春风夏雨中风姿绰约的模样,可突如其来的秋雨,无情的打落了它美丽的花瓣,看着它在空谷中独自凋零,我莫名其妙的心痛,像针椎一样的痛。秋雨,你为何如此残忍,为何不懂得怜香惜玉,我伸出颤抖的双手,将散落在泥土里的花瓣捧在手心。
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? 【唯美句子】 滴答滴答,疏疏落落的秋雨,赶着时间的脚步,哗啦啦的下起来。听着雨水轻轻地敲击着微薄的玻璃窗,不知不觉,我像是被催眠了一样,渐渐的进入了梦乡。 顶 3 收藏 5
? 【唯美句子】 在这极致的悲伤里,我看到了世间最美的爱,可谁又能明白,此刻的我是悲伤还是欢喜,也许只有那拨动我心弦的秋季,才知道潜藏在我心中的眼泪。 顶 4 收藏 3
? 【唯美句子】 看着此情此景,我细细地聆听。像是听到了落叶的呢喃,秋风的柔软,在这极短的瞬间,他们一起诉说着最美的爱恋,演绎着永恒的痴缠。当落叶安详的躺在大地,露出幸福的模样,你看,它多像一个进入梦乡的孩子。突然发现,秋风并非是想象中的刽子手,原来它只是在叶子生命的最后一刻,让它体会到爱的缠绵,飞翔的滋味。 顶 1 收藏 1
? 【唯美句子】 很感谢那些耐心回答我的人,公交上那个姐姐,还有那位大叔,我不知道他们是不是本地人,但我们遇到的一个交警协管,一位头发花白的大姐,她是上海本地人,很和善,并不像有些人说的上海人很排外。事实上,什么都不是绝对的。 顶 2 收藏 0
? 【唯美句子】 我嗅到浓郁的香奈尔,却也被那种陌生呛了一鼻。也许,我却不知道,那时的感受了。那里没有那么美好,没有安全感,归属感。我想要的自由呢,不完全地体验到了。
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? 【唯美句子】 那些繁华的都市,车水马龙,灯红酒绿,流光溢彩,却充斥着一种悲哀,浮夸。我看到各种奢华,却也看到各种卑微,我看到友善亲和,也看到暴躁粗鲁,我看到金光熠
? 【优美语句】 踏过一片海,用博识的学问激起片片微澜;采过一丛花,正在聪慧的碰碰外送来缕缕清喷鼻;无过一个梦,决定从那里启程。
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? 【优美语句】 人生如一本书,应该多一些精彩的细节,少一些乏味的字眼;人生如一支歌,应该多一些昂扬的旋律,少一些忧伤的音符;人生如一幅画,应该多一些亮丽的色彩,少一些灰暗的色调。
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? 【优美语句】 母爱是一滴甘露,亲吻干涸的泥土,它用细雨的温情,用钻石的坚毅,期待着闪着碎光的泥土的肥沃;母爱不是人生中的一个凝固点,而是一条流动的河,这条河造就了我们生命中美丽的情感之景。
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? 【优美语句】 生活如海,宽容作舟,泛舟于海,方知海之宽阔;生活如山,宽容为径,循径登山,方知山之高大;生活如歌,宽容是曲,和曲而歌,方知歌之动听。 顶 0 收藏 0
? 【优美语句】 母爱就是一幅山水画,洗去铅华雕饰,留下清新自然;母爱就象一首深情的歌,婉转悠扬,轻吟浅唱;母爱就是一阵和煦的风,吹去朔雪纷飞,带来春光无限。 顶 0 收藏 0
? 【优美语句】 努力奋斗,天空依旧美丽,梦想仍然纯真,放飞自我,勇敢地飞翔于梦想的天空,相信自己一定做得更好。
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? 【优美语句】 品味生活,完善人性。存在就是机会,思考才能提高。人需要不断打碎自己,更应该重新组装自己。
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? 【优美语句】 母爱是一缕阳光,让你的心灵即使在寒冷的冬天也能感到温暖如春;母爱是一泓清泉,让你的情感即使蒙上岁月的风尘依然纯洁明净。
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? 【优美语句】 母爱是温暖心灵的太阳;母爱是滋润心灵的雨露;母爱是灌溉心灵的沃土;母爱是美化心灵的彩虹。
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? 【优美语句】 一轮金色的光圈印在海面,夕阳将最后的辉煌撒向了大海,海平面波光潋滟,金光闪闪,夕阳下的海水让最后一丝蓝也带着感动。温和的海水轻轻地拍打着我的脚踝,我张开双臂拥抱最温馨的时刻??我爱大海宽广的胸怀,无论多大的风浪,她都可以揽入怀中;无论多少风雨,都无法将她击垮;无论多少河流,她都可以容纳;我愿做一只填海的燕,填平她的波涛翻滚,填平她的汹涌愤怒,只留下平静、柔和的海面。
范文二:实用的双关的结构类型及其修辞效果
双关的结构类型及其修辞效果 双关就是指有意识地使用同一个词语,同一个句子,在同一个上 下文中,同时表达两层或两层以上的意思。如南朝民歌《采莲曲》 : “采莲南塘秋,莲花过人头。低头弄莲子,莲子清如水。 ”这首诗里 的“莲”与怜惜的“怜”谐音,就起到了双关的作用。再如刘禹锡的 《竹枝词》“杨柳青青江水平,闻郎江上唱歌声。东边日出西边雨, : 道是无晴却有晴。 ”这里的“晴”既指天气晴朗同时又暗指对唱歌的 情郎的“情” 。这也是一种双关。 双关的类型分为谐音双关、语义双关和语法双关三种。 谐音双关是指利用同音现象构成双关语。 我们上文所举的两个例 子都是谐音双关,再如唐朝诗人李群玉的《寄人》“寄语双莲子,须 : 知用意深。莫嫌一点苦,便拟弃莲心。 ”同样是以“莲”暗指“怜” 。 再如**主席的《蝶恋花 答李淑一》“我失骄样杨君失柳,杨柳 : 轻扬直上重霄九。 ”这里的杨柳表面上指的是杨树和柳树、杨花和柳 絮,实际上指的是革命烈士**和柳直荀。有一道菜叫做“霸王别 姬” ,字面上指的是西楚霸王项羽和他的爱妾虞姬,实际上呢,说的 是甲鱼和烧鸡做成的菜。爱新觉罗?溥仪 3 岁登基,大哭大喊,其父 摄政王说: “别哭,别哭。快完了,快完了。 ”典礼完毕,文武百官窃 窃私议,认为此乃不祥之兆,怎么能说“快完了”呢,袁世凯窃国坐 上了龙椅,怕头上的吊灯掉下来砸着他,将座位往后挪退了一步,于 是也有人认为此举预兆着――退位。
在很多民歌、民谣和歇后语中也大量使用了谐音双关的修辞手 法。如宋朝有民谣曰:打破筒(谐童贯姓) ,泼了蔡(谐蔡京姓) ,便 是人间好世界。《红楼梦》里有一张“护官符”“假不假,白玉为堂 ” : 金做马;阿旁宫,三百里,住不下金陵一个史;东海缺少白玉床,龙 王来请金陵王;丰年好大雪,珍珠如土金如铁。 ”这里就是用“假” 谐“贾”用“雪”谐“薛” ,民间常用的歇后语,如高山打鼓――卜 通、卜通,实际上谐音“不通、不通” ;外甥打灯笼――照舅,谐的 是“照旧” 。 语义双关,是指利用词语和句子语言多义现象构成的双关。如鲁 迅《为了忘却的纪念》“夜正长,路也正长,我不如忘却,不说的好 : 吧。“夜”既指现实中的黑夜,又指国民党反动派的统治正如漫漫长 ” 夜, “路”既指现实中的路,又指革命斗争的道路也正长。再如周烨 《我的伯父鲁迅先生》“我小的时候,鼻子跟你爸爸的一样,也是又 : 高又直,可是后来碰了几次壁,就把鼻子碰扁了。“想,四周围黑洞 ” 洞的,还不容易碰壁么,” “四周黑洞洞的”不仅指黑得看不见,也 指当时的社会黑暗腐朽, “碰壁”也不光指字面上的撞了墙,同时也 指做事不顺利,到处碰钉子。 歇后语里也有很多语义双关的,如老鼠进风箱――两头受气,寿 星佬上吊――活得不耐烦了,王八吃西瓜――滚的滚,爬的爬。 语法双关,是利用语法结构的多种可能性造成的双关。如“做女 人挺好” 这句话表面上看是一个单句: 。 “做女人” 是动宾短语做主语, “挺好”做谓语。 “挺”在这里是副词。但是在广告语中, “做女人”
成了状语, “挺”成了主语, “好”成了谓语。 我们使用双关的能取得什么样的修辞效果呢, 双关往往服务于不准或不能明说的特定交际环境, 从而取得委婉 含蓄的修辞效果。如我们在中学课本里学过的《挺进报》:“22 日 黄昏,陈然忽然收到一封没有署名的短信:“今日江水暴涨,闻君欲 买舟东下,谨祝一帆风顺,沿途平安。”陈然的特殊身份和他所处的 特殊环境使通知他赶紧逃走的人不能明白的告诉他敌人已经要抓他 了,所以只能采用这样的方式来告诉他。 双关还能增加话语、文本的美感和情趣。如在《红楼梦》里,就 有“万艳同杯”、“千红一窟”,以及元春、迎春、探春、惜春四姐 妹,“杯”与“悲”谐音,“窟”与“哭”谐音,四春则暗指了“原 应叹息”,这样就使人物的悲剧命运带有了一种宿命感,使人更加为 之感动。再如李商隐的《无题》:“春蚕到死丝方尽,蜡炬成灰泪始 干。”“丝”既指春蚕吐出的丝,又指思念的“思”,这样就使诗增 加了美感和更多的可读性。
范文三:浅析西班牙语中双关语的类型及其修辞作用[Word文档]
浅析西班牙语中双关语的类型及其修辞作用
关键字: 浅析西班牙语中双关语的类型及其修辞作用 本文为Word文档,感谢你的关注,
摘要:双关是古今中外广泛使用的一种修辞格,它有不同的类型和丰富的修辞作用。本文从双关的定义、类型及修辞作用方面,分析西班牙语中的双关修辞格,阐明其在西班牙语中的运用。
关键词:西班牙语;双关语;修辞
双关(doble sentido)是利用一个词或短语在句子里产生双重意义,并做不同解释的一种修辞方法。通常,在双关的两层意思中,表达作者本意的不是字面含义,而是深层含义。它的特点是语言表达生动活泼、幽默诙谐,有时也可以借题发挥、由此及彼。
西班牙语的单词包括音、形、义三个部分,在一定的语言环境里,它们所表达的意义是确定的,即“一种发音,一种形式,对应唯一的意思”,这是语言明确性的基础。但是在特定的语言环境下,词语的音、形、义发生一定的关联,就产生了双关。比如,同样的发音,但拼写方法不同,所对应的意义自然不同,这种同音异义就会产生双关(tubo和tuvo);又比如同样的发音,同样的形式,但表达的意义却不同,比如amo可作名词“主人”,也可作动词表示“我爱”。
下面,我们就双关的类型及其产生原因对这种修辞方法进行初步的探讨。
一、双关的类型及产生原因
1. 谐音双关(homofonía)
Homofonía(谐音双关),前缀homo-表示相同,-fonía表示声音,是一种基于同音异义所产生的双关。从单词
音、形、义关联的角度来看,同样的发音,但拼写方法不同,所对应的意义自然也会发生变化。
谐音双关与西班牙语的发音规则有密切的联系。比如西语中的h是不发音的,huno和uno发音相同,但huno是“匈奴”,而uno是“一个”;honda和onda也是如此,honda作为形容词表示“深的”,onda是名词“波”。再比如,西语中b和v在单词中的发音相同,由此产生tubo和tuvo,在一定的语境下也可以构成谐音双关;je和ge、ji和gi发音相同,jira和gira也构成一对同音异义词。
另外,重音也是产生谐音双关的一个重要因素,西班牙语中很多组单词有重音和无重音时发音完全相同,但意义却又很大区别,比如说tu和tú,前者是“你的”,而后者是第二人称代词“你”。几乎所有疑问词都有这种情况,例如:
(1) - He re?ido a un hostelero.
-?Por qué, ?dónde, ?cuándo, ?cómo,.
-Porque donde cuando como sirven mal, me desespero.
其中por qué/porque、dónde /donde、
cuándo/cuando、cómo/como就是四,π骋羲,关的词语。por qué问为什么,porque是连接词表示原因;dónde疑问副词“在哪里”,donde关系副词“在那个地方”;同理,cuándo疑问副词“什么时候”,cuando连接词“当...的时候”;cómo问怎么样,como表示原因。因此上一句的意思是“为什么和店主争吵,在哪里,什么时间,怎么吵的,”而回答“因为我吃饭的那个地方服务不好,我很沮丧,所以...”。
2. 词义双关(homografía)
Homografía(词义双关),前缀homo-表示相同,-grafía表示形态,从单词音、形、义关联的角度分析,是同形异义产生的双关。
其中最常见的情况的一词多义,例如:
(2) Es necesario que traigas las velas para
salir a navegar.
其中的vela可以理解为蜡烛,也可以理解为帆。因此(2)可以理解为,航海需要带上蜡烛,也可能是在说出海一定要有帆。很多时候,这样的词义双关正是歧义产生的原因。
除了一词多义,词义双关还可能来源于某个单词和一个变位动词的形式相同,但意义不同。比如haya, 可以指一种树,也可以是动词haber的虚拟式现在完成时;cura可以是名词“神父、疗法”,也可以是动词“治愈”,例如:
(3) El cura buscó la cura que curaría al
enfermemo.
第一个cura是阳性名词,指神父;第二个cura为阴性名词,指治疗方法;第三个curaría来源于动词curar,表示医治、治愈。因此这句话的意思是神父在寻找一种能治愈病人的疗法。
3.拆字母游戏(calambur)
如果说谐音双关和词义双关侧重的是对词义的不同理解,那么拆字母游戏则更加偏重于结构和形式。人们通过对相同字母进行不同组合,改变句义,比如plata no es还可以解读为plátano es,从而构成双关语。
在汉语中的一句没有标点的句子,不同的断句方法也会得到不同的意思,比如 “没有鸡鸭也可以”,断为“没有鸡,鸭也可以”和“没有鸡鸭,也可以”表达的就是完全不同的意思。在西语中,一个典型的例子是
(4) y mi voz que madura / y mi voz quemadura
/ y mi bosque madura / y mi voz quema dura
同样的字母,通过不同的拆分组合,得到了四句完全不同的句子。再如:
(5) ató dos palos / a todos, palos
前者的意思的他绑起了两根棍子,而后者的意思是把棍子给所有人。
二、双关的修辞作用
双关的特点是语言表达生动活泼、幽默诙谐,有时也可以解题发挥或旁敲侧击。
1. 双关语能增加讽刺效果
双关语的运用,大都适应了一种特定的交际环境,不准明说,也不能明说,因此,在很多时候,双关是一种表达讽刺的绝佳手段。
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范文四:IHC的四种基本类型
IHC ,是免疫组织化学(Immunohistochemistry )的简称,是以免疫学的抗原-抗体反应为理论基础,用标记的特异性抗体(抗原),对组织内的相应抗原(抗体)进行定位、定性和半定量检测,经组织化学显色反应,利用光镜、荧光显微镜或电子显微镜进行实验结果观察的一项技术。若该技术主要用于研究和观察细胞内的某些成分,又可称为ICC ,即免疫细胞化学(Immunocytochemistry )。
研究对象,所有能作为抗原或者半抗原的物质,如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖以及病原体等,都可以成为它的研究对象。 其优势在于特异性高,敏感性高,方法步骤统一,形态、功能和代谢密切结合等方面。因此,IHC/ICC已成为临床病理不可或缺的辅助手段,尤其是根据该技术检测结果的表达水平所发展起来的相关“个体化治疗”方案,使免疫组化的质量及质控管理愈来愈受到高度重视。
IHC/ICC主要有四种基本类型
1
原理
传统直接法,将已知的特异性抗体与标记物结合,制备成标记抗体,再用标记抗体直接与标本内的相应抗原结合,光镜下观察抗原存在部位呈现特异性标记。
新型直接法,采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和HRP 结合在骨架上,形成HRP-葡聚糖-特异性抗体的巨大复合物,其内的特异性抗体直接与标本内的相应抗原结合,经酶促反应,即可在光镜下观察特异性阳性结果,
也叫多聚螯合物酶法——EPOS 法(Enhanced Polymer One-step Stainning)。
优点
传统直接法,特异性强,非特异性反应较少,技术操作简便。
新型直接法,敏感性极强,背景无染色,大大缩短了试验时间,是目前最简便的免疫组织化学方法,用于冰冻切片作用尤为突出。
缺点
传统直接法必须标记每一种特异性抗体,且只能检测一种抗原,敏感性较差,同时反应的信号也较小,特别是对于组织或细胞内微量的抗原检测。
新型直接法商品化的EPOS 品种不多,试剂价格较昂贵。
2
传统直接法 新型直接法
原理
传统间接法是用未标记的一抗与标本内的相应的抗原物质结合,用标记的二抗与一抗结合,通过荧光显微镜观察,或经过酶促反应后利用光镜观察有色的阳性反应产物。
新型间接法是将标本内的抗原与一抗结合后,标记有多聚化合物酶复合物的二抗与一抗结合,经酶促反应进行显色定位,也叫EnVision 法。
注:EnVision 复合物是由二抗分子的一个Fab 段与HRP/ALP通过聚合技术结合在线状的葡聚糖上而形成。
优点
传统间接法一个一抗可以结合多个二抗抗体分子,增强了免疫反应信号,敏感性比直接法增大3-4倍;一抗使用浓度较直接法低;不用直接标记一抗,标记的二抗可以用于多种一抗。
新型间接法每一分子的EnVision 复合物中约含有70个酶分子和10个二抗分子,具有高度的方法作用,也增加了与一抗分子的结合机会;机体内不存在这种葡聚物,背景非常干净;染色步骤分为两步,操作简便省时。
缺点
传统间接法特异性低于直接法,容易出现非特异性染色;染色步骤较多,染色所需时间延长。
新型间接法是目前最优化的方法。
3
酶桥法3种抗体均被酶标记,酶是通过免疫学原理被标记在三抗上,避免了因化学方式结合对抗体和酶活性的损害,提高了方法的敏感性,节省了一抗的用量。
PAP 法抗体活性高,灵敏度高,背景染色低。
缺点
酶桥法标记的酶类很难被精确的稀释到恰当的浓度,以达到和三抗的抗酶部位全部结合,同时也难以彻底洗脱掉与标本中其他成分非特异性结合的酶,造成较高的非特异性染色。 PAP 法染色步骤较多,需要的染色时间长。
4
ABC 法敏感性高(相对于PAP 法),特异性强,尤其适用于单克隆抗体,组织背景染色浅,操作方法简便,节省染色时间。
SP 法相比ABC 法,有效地降低了内源性生物素带来的非特异性反应的程度,敏感性增加了4-8倍。
缺点
ABC 法使用时某些器官或者组织内的内源性生物素与卵白素特异性结合,引起非特异性反应增强。
随着免疫组织化学各项技术的发展应用,相继建立了多种不同的标记抗体的方法,因而也就产生了与其相应的各种免疫组织(细胞)化学技术。根据标记物的不同,可以分为:免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组织(细胞)化学技术、免疫铁蛋白标记技术、免疫金银标记技术、亲和免疫组织化学技术、免疫电子显微镜技术、杂交免疫组织(细胞)化学技术、免疫双重和多重组织(细胞)化学技术。
以上都是理论,来看一点实际的。
操作流程
现从取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色和封固这9个过程详尽的介绍最常用的石蜡切片免疫组织化学技术。
一丶标本取材,取材是标本制备过程的第一步,取材是否科学,是否符合实验要求,将直接影响光镜下组织或细胞的形态学观察。不论取材的标本来自何种途径,首先应尽量保证所取材标本的形态完整性和材料新鲜性。因为死亡两小时以上的标本,其组织或细胞将呈现
出不同程度的自溶,有些抗原可能会出现变形、弥散和消失的现象。这些都不利于抗原抗体的结合,从而直接地影响免疫组织化学反应,导致实验结果的偏差。因此,取材要求准确、迅速和完整,以免因操作不当造成抗原破坏或丢失,影响实验结果的正确性。
举三个例子
活检标本/病理标本,对于病变部位大的标本,取材要具有代表性,在保证组织结构完整的情况下,可适当分割成为较薄的标本块,其中应包括:主要病灶、病灶与正常组织交界处、病灶周围的正常组织。
实验动物标本,根据实验目的和要求选择正确的动物麻醉方法或者处死方法进行取材。 细胞标本,不论是获取的新鲜细胞液,还是经过酶消化作用而制备成的细胞悬浮,都可以通过离心沉淀的方法使细胞浓缩成细胞团,吸出上清液。注意缓慢加入固定剂,不要将细胞团冲散。固定时间一般为1-6小时。
二丶标本固定,用于标本固定的固定剂种类很多,不同的固定剂固定的标本适用于不同的实验目的,应根据检测物质的抗原性质、所使用的抗体特征以及固定剂的性质选择合适的固定剂。目前用于免疫组化实验的常用固定剂有以下几种:
①10% 福尔马林缓冲液(pH 7.4)
配制方法:10%甲醛溶液加入0.01 mol/L pH 7.4 PBS缓冲液90 mL,混合均匀,即为10%福尔马林缓冲液。
适用范围:该固定液广泛适用于标本的固定,既能有效的保护标本的组织或细胞形态结构,又能保持标本内的抗原活性,只是甲醛的交联作用会对某些抗原表面的抗原决定簇有一定的
封闭作用,因此要在染色前对封闭的抗原决定簇进行暴漏,即抗原修复。常规大小的标本块,固定时间为12-24小时。
②4% 多聚甲醛缓冲液(pH 7.4)
配制方法:多聚甲醛40 g溶于0.01 mol/L pH 7.4 PBS缓冲液500 mL,搅拌加热至60℃,滴加1 mol/L氢氧化钠至溶液清澈,冷却至室温,最后补加PBS 达总体积为1000 mL,过滤,即为4%多聚甲醛缓冲液,4℃冰箱保存。
适用范围:它对标本的渗透性较强且产生的收缩小,由于其pH 近中性,可以最大限度的保存抗原的活性,由于该固定剂性质较为温和,于4℃保存较长时间的标本,仍可获得满意的实验结果。同时也适用于标本灌注固定,灌注后的标本再在此固定剂中浸泡固定6-12小时即可。
③Bouin 固定剂
配制方法:在75 mL的饱和的苦味酸溶液中加入25 mL 10%甲醛溶液,再加入5 mL冰醋酸,混合后即为Bouin 液。
适用范围:它也是形态学常用的固定剂,对于某些抗原的保存较10%福尔马林缓冲液更适合免疫细胞化学的研究。对标本的渗透性强,产生的收缩少,但其pH 为3-3.5,对标本内的抗原可能有一定的损坏,因此标本不适合在固定剂中长期停留。
三丶标本处理
脱水-透明-浸蜡-包理-切片-染色-固封
常用染色方法步骤脱蜡:二甲苯,室温,两次,每次20分钟。
↓
水合 :100%→100%→95%→90%→80%→70%乙醇→蒸馏水,每级5分钟。 ↓ 3%过氧化氢,室温孵育10分钟。蒸馏水冲洗。PBS 浸洗5分钟。
↓
抗原修复。
↓
PBS 洗涤3分钟,3次。
↓
封闭用血清,室温孵育10-30分钟,倾去血清,勿洗。
↓
滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育60-90分钟,或者4℃过夜。
↓
PBS 洗涤3分钟,3次。
↓
生物素标记的二抗,室温30分钟。
↓
PBS 洗涤3分钟,3次。
↓
ABC 复合物,室温孵育30-60分钟。(ABC 法)
or
辣根过氧化物酶标记链霉抗生物素,37℃或室温孵育10-30 min。(SP法)
or
辣根过氧化物酶标记抗兔/抗鼠IgG 多聚体,室温30分钟。(Envision法)
↓
PBS 洗涤3分钟,3次。
↓
显色剂(DAB) 显色反应,5-10分钟。光镜下控制显色程度。蒸馏水洗终止显色反应。
↓
细胞核复染苏木素3-5分钟。流水冲洗蓝化。
↓
脱水:70%→80%→90%→95%→100%→100%乙醇,每级5分钟。
↓
透明:二甲苯2次,每次5分钟。
↓
中性树胶封固。
范文五:弹性的基本类型
需求价格弹性的基本类型
通常可以把需求价格弹性分为三种:需求价格弹性和总销售收入的关系
(1)需求富有弹性。ed〉1,其需求曲线相对比较平坦。SM:例如:价格下降2%,需求量增加4%。
需求富有弹性的商品,ed〉1,价格上升会使销售收入减少,价格下降会使销售收入增加。销售收入与价格变动成反方向变动趋势。对于需求富有弹性的商品,才适于采用薄利多销的政策。
(2)需求单位弹性。ed=1,SM:例如:价格下降2%,需求量增加2%。
需求单位弹性的商品,ed=1,价格变动不会引起销售收入的变动。
(3)需求缺乏弹性。ed〈1,其需求曲线相对比较陡峭。SM:例如:价格下降2%,需求量增加1%。
需求缺乏弹性的商品,ed〈1,价格上升会使销售收入增加,价格下降会使销售收入减少。销售收入与价格变动成同方向变动趋势。 需求交叉价格弹性的类型
(1)i、j两种商品为替代品时,则eij〉0,因为商品的需求量与替代品的价格呈同方向变化。
(2)i、j两种商品为互补品时,则eij〈0,因为商品的需求量与互补品的价格呈反方向变化。
(3)eij=0时,说明i、j两种商品是无关的。
需求收入弹性类型:
1.富有收入弹性商品(ey>1)
这类商品是指消费者收入增加时,消费者对该商品的需求量迅速增加,需求增加的百分比要大于收入增加的百分比,通常我们把这一类商品称为优等品。
2.缺乏收入弹性商品(0<ey<1)
缺乏收入弹性的商品是指当消费者收入发生变动时,对该商品的需求量会发生同方向的变动,但变动的百分比要小于收入变动的百分比。日常生活中的一般必需品就属于这一类商品。
3.收入无弹性商品(ey=0)
这类商品较特殊,在消费者的收入变化后,这类商品的消费量完全没有变化,这意味着消费者对这类商品的需求量是基本固定的,食盐被认为是一种收入无弹性商品。
4.单元收入弹性商品(ey=1)
这类商品是指当消费者收入变动某一百分比时,需求量也恰好变动相同的百分比。统计表明衣服是一种较为接近单元收入弹性的商品。
5.负收入弹性商品(ey<0)
在经济生活中,还有一类商品在消费者收入增加后,需求量反而减少,需求收入弹性为负,这类商品属于低档消费品。
供给价格弹性的类型,(一般了解)
(1)Es>1,供给富有弹性;
(2)Es
(3)Es=1,供给单位弹性;
(4)Es=0,供给无弹性;
(5)Es=∞,供给完全有弹性。第(4)、(
5)两种情况很少见。
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