范文一:乳糖的测定
五、乳清粉中乳糖的测定
1 试剂与溶液
1.1酒石酸铜甲液:34.639gCuSO4溶于水,加入0.5ml浓H2SO4,稀释
到500ml。
酒石酸铜乙液:173g酒石酸钾钠,加50gNaOH,稀释到500ml。1.2 氢氧化钠溶液c(NaOH)= 1mol/L 1.3硫酸铁溶液 50g/L
1.4高锰酸钾标准滴定溶液c(1/5 KMnO4)=0.1mol/L 2 步骤:
称2g样品(准确到0.0002g)于200ml烧杯中,加50ml水,电炉加热到80℃,加酒石酸铜甲液10ml,加NaOH(1mol/L)5ml,搅拌后放置到室温,用水定容于250ml容量瓶中,摇匀,静止1h后干过滤。吸取滤液25.00ml于三角瓶中,加25ml酒石酸铜甲液,再加25ml酒石酸铜乙液,在电炉上加热并煮沸2min(要保证在3min内煮沸),取下过滤,并用水洗涤沉淀4~5次,之后将滤纸及沉淀物(Cu2O)一起放入三角瓶中,加入硫酸铁(50g/L)25ml,再加25ml水,用玻璃棒搅拌并微热到看不到Cu2O的红色为止,然后用高锰酸钾标准滴定溶液(c(1/5 KMnO4)=0.1mol/L)的标准溶液滴定到呈微红色为终点。同样条件做空白 3结果的表示和计算: 乳糖含量按下式计算
a) Cu2O=(V-V0)×C×71.54
b) 由Cu2O的质量查表求乳糖的质量m乳:
c) 样品中乳糖的含量:乳糖%=m
乳
/m样×100
式中: m乳——样品中乳糖的质量;g
m样——-样品的质量;
V——-样品消耗KMnO4的体积;ml V0——-空白消耗KMnO4的体积;ml 71.54—常数;
C——--KMnO4标准溶液的浓度,mol/L
二十 乳糖测定附表
相当于氧化亚铜质量的葡萄糖、果糖、乳糖、转化糖质量表
(mg)
范文二:乳糖的含量测定
App ID: FLM-A170001
乳糖的含量测定
方法:CHP2015 二部
色谱柱:ACE Excel NH2 5μm 150×4.6mm(货号:EXL-1214-1546U )
流动相:乙腈-水(70:30)
流速:1.0 mL/min
进样体积:10μL
柱温:35℃
检测:RI@35℃
样品:5 mg/mL,溶于流动相中
附:ACE NH2 用于糖分析时,每次使用前的冲洗方案
保存好的ACE NH2 柱,每次拿出来用于分析还原糖之前,应按下列步骤进行操作,以便在开始分析之前获得最佳的色谱柱性能。
1. 乙腈/水(7:3), 冲洗20 倍柱体积;
2. 乙腈/水(7:3),加0.1% v/v 氨水溶液(氨水溶液浓度约32%), 冲洗50 倍柱体积;
3. 乙腈/水(7:3), 冲洗20 倍柱体积;
冲洗前: 冲洗后: 图
1. ACE 5μm NH2
3 的乙腈/水(75:25)冲洗前后的糖分析对比图。 0.21mL/min, 35℃ 3=乳糖.
为了最大程度上延长色谱柱使用寿命,先用乙腈/水(1:1)冲洗20 倍柱体积,再用 100%异丙醇冲洗20 倍柱体积,然后取下柱子塞紧柱堵头放置。
范文三:乳糖测定
乳糖的测定
试剂
0.1N 碘溶液:称取20~25g 碘化钾(准确至1g)于烧杯中用少量水溶解, 加 12.7g 碘(准确至0.10g),溶解后定容至1000ml 容量瓶中。
0.1N 硫代硫酸钠溶液:在粗天平上称取约 25g?之硫代硫酸钠(Na3S2O3·5H2O),置于500ml 烧杯中,加400ml 刚刚煮沸过的蒸馏水,至完全溶解,然后转入1000ml容量瓶,并用刚煮沸过的蒸馏水稀释至刻度,摇匀,静置过夜或更久(8~14?天)。再进行过滤标定与应用。
标定方法:精确称取在105℃烘干过的重铬酸钾(K2Cr2O7)0.10~0.12g(准确至 0.2mg),加入30ml 水使其溶解,加5ml 浓盐酸及10ml 15%碘化钾溶液,充分混合稀释至 200ml,然后用制备的硫代硫酸钠溶液滴定到呈黄色(稻草色),然后加入 5ml0.05%淀粉溶液,继续滴定到淡蓝色消失而成为三阶铬离子的绿色为止。
计算:
G
N= ------------------------- ……………………………… ………… (2)
V×0.04904
式中:N-硫代硫酸钠溶液的当量浓度;
G-重铬酸钾的重量,g;
V-消耗用去0.1N 硫代硫酸钠溶液的毫升数。
0.5mol/l 盐酸溶液(45ml浓盐酸加入1000ml水中)。
1%淀粉溶液。
方法
称取样品 1.5g(准确至0.2mg)于烧杯中,加100ml水溶解,放置磁力搅拌器中搅拌10min,待样品完全溶解后转入250ml 容量瓶中,加水至标线,摇匀后静置10min。吸取滤液 20ml 于碘量瓶中,加碘溶液10ml,再边摇边加0.1N 氢氧化钠15ml,摇匀放于暗处20min。加入0.5mol/l 盐酸5ml,边滴加边摇匀。以0.1N 硫代硫酸钠滴定至淡黄色,加 1%淀粉指示剂1ml,继续滴至无色即可,以式(3)计算。以同样方法做试剂空白试验。
(B-A)×N×0.18
乳糖(%)=------------------------------------×100 ……………………… W*20/250
式中:0.18-乳糖换算系数;
A-样品消耗硫代硫酸钠溶液量,ml;
B-空白消耗硫代硫酸钠溶液量,ml;
N-硫代硫酸钠溶液的当量浓度;
W-样品重量,g。
范文四:任务13奶粉中乳糖的测定
包头轻工职业技术学院乳品工程系
项目十三 奶粉中乳糖的测定
班 级:
姓 名:
学 号:
包头轻工职业技术学院
乳品工程系
包头轻工职业技术学院乳品工程系
任 务 单
项 目 项目十三 奶粉中乳糖的测定 实施日期 年 月 日 至 年 月 日
学习任务1. 查阅资料,总结奶粉中乳糖测定的原理和方法
学习任务2. 费林氏液的配制,乳糖标定费林氏液
学习任务3. 莱因-艾农氏法测奶粉中乳糖的含量
学习任务
1. 查阅资料,总结测定奶粉中乳糖的原理和方法
2. 通过小组讨论并制定测定奶粉中乳糖的实验方案
3. 正确配制费林氏液并用乳糖进行标定 任务要求
4. 正确测定奶粉中的乳糖含量
1
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知识储备单
项 目 项目十三 奶粉中乳糖的测定
查阅资料~并回答问题:
1. 乳糖有哪些特性,
2. 费林氏液由甲液和乙液组成~甲液和乙液如何配制,贮存时应注意什么, 甲液和乙液等量混合后溶液呈氧化性还是还原性,
3. 莱因-艾农氏法的原理,
4. 莱因-艾农氏法中所用的指示剂是什么,是哪种类型的指示剂,氧化色和还原色分
别是什么颜色,
5. 写出乳糖标定费林氏液的操作方法。
2
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6.写奶粉中乳糖测定的实验方案。
3
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考 核 单
项 目 项目十三 奶粉中乳糖的测定 1. 正确计算费林氏液的校正系数(20分)
实验项目 费林氏液的配制及标定
所需玻璃器皿
试剂保存方法及注意事项
重复次数 1 2 3
称量乳糖量 (mg) 750.0
滴定管初读数(ml) 0.00 0.00 0.00
滴定管终读数(ml) 27.00 26.88 27.03
乳糖标液耗量V(ml)
考核内容 实测乳糖量A(mg) 1
乳糖转化因数A(mg) L1
乳糖转化因数平均值
计算公式及计算
A4×V×g 1=
f=A/ A 1L1
2. 2.简述莱因-艾农氏法测定乳糖的原理。(10分)
4
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3(简述莱因艾农氏法测定奶乳中乳糖含量的实验步骤。(20分)
3. 4(测乳糖含量的实验为什么要在持续加热中进行,(10分)
4. 5.实验的注意事项有哪些,(10分)
5
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6(奶粉中乳糖含量的测定(30分)
实验项目 乳粉中乳糖的测定
所需玻璃器皿
1 2 平行实验
样品重量(g)
耗
预滴定(ml)
液
精滴1(ml)
量
精滴2(ml)
精滴平均(ml)
乳糖%=(F×f×250×100)/( V×W×11乳糖计算公式
1000)
乳糖测定结果(%)
平均值(%)
成绩: 被考核人: 考核人: 年 月 日
6
范文五:酶法测定乳糖
1 9 9 8 年1 0 月CH INA DA IR Y INDU S TR Y Oct . 1 9 9 8
酶 法 测 定 乳 糖
An Enzymatic Method f or Determin ing Lactose
于国平于广吉赵敏
Yu Guoping Zhao Min Yu Guangji
() (东北农业大学〃哈尔滨 150030)黑龙江省乳品工业技术开发中心
( ) ( )No rt heast Agricult ural U niversit yHeilo ngjiang Dairy Indust ry Technical Develop ment Center
dochro m 试剂测定葡萄糖的量 , 反 应 产 物 在 510 nm 摘 要 介绍了酶法检测乳糖的方法 ,该法基于 处有吸收峰 ,从而可计算出乳糖的浓度 。 乳糖酶对乳糖的水解反应 ,测定所生成的葡萄糖
量 。本法在乳糖浓度与吸光度之间有很好的线 2 试剂 性关系 。
关键词 乳糖 酶法检测 乳糖酶 从脆壁克鲁维酵母中提取的商品酶制
2 An enzymatic met ho d fo r deter minaAbstract β剂 ,使其含- 半乳糖苷酶活力为 3 000 L AU / ml 。 tio n of lacto se was int ro duced. In t his paper , t he 乳 糖 为含一个结晶水的乳糖粉末 。 met ho d was based o n t he hydrolysis of lacto se by a 缓冲液 p H = 6 . 6 、0 . 1M 的柠檬酸盐缓冲液 。 β- galacto sidase and t he liberated gluco se was de2 Peridochro m 试剂 为比色法测葡萄糖的试剂 ter mined. There were goo d linearit y bet ween lac2 (其中含 有 180 mM 的 t ris - 磷 酸 缓 冲 液 , 11 mM 苯 to se co ncent ratio n and abso rbance . 酚 ,2 . 1 mM 的 3 , 4 - 二氯苯酚 ; 0 . 24 mM 的脂肪 醇 enzymatic met ho d deter mi2 Key words lacto se 聚乙二醇醚 ; 0 . 8 mM 的 4 - 氨基苯腙 ; 过氧化物酶 natio n
( ) ( ) ) POD 0 . 9 U / ml ; 葡 萄 糖 氧 化 酶 GOD 15 U / ml 。
此试剂与反应体系产生的葡萄糖发生了如下反应 : 0 引言
在乳及乳制品行业中 ,经常要检测其乳糖含量 , 乳糖酶
乳糖 ———?葡萄糖 + 半乳糖 常用的检测方法包括旋光法 、红外测定法 、比色分析 GOD 及色谱法等 。它们虽各有优点 ,但多需要昂贵的仪 葡萄糖 + O+ HO ———?葡萄糖酸 + HO 2 2 2 2 器设备 ,应用受到一定限制 。这里介绍用乳糖酶检 POD
( 2〃HO+ 4 - 氨基苯腙 + 苯酚 ———?4 - 对 - 苯醌 测乳糖的方法 ,该法简便快捷 ,费用低廉 ,乳糖浓度 2 2
) - 亚氨基- 苯腙 + 4 HO 2 和吸光度之间存在良好的线性关系 ,适合食品行业
应用 。 3 实验方法
3 . 1 样品的测定 测定原理1 经适当处理 ,使所测样品中乳糖的浓度相当于 利用乳糖酶在适当条件下水解乳糖 ,使之产生
乳中乳糖的浓度 。按 1?100 的比例 ,用蒸馏水将样 等摩尔的葡萄糖与半乳糖混合物 , 之后 , 再用 Peri2
收稿日期 1997 —04 —08
酶法测定乳糖1998 年 10 月 35
μ品稀释 ,取稀释后的样品 80l 于分光光度计的比色 4 讨论
μμ皿中 ,加蒸馏水 20l 、柠檬酸盐缓冲液 200l 及乳糖 酶 本研究测定的精密度是利用测定乳糖水合物在 μ50l ,轻摇混匀 ,于 25 ?下保温 20 min ,使乳糖水 解 ,2 %和 7 %浓度时相应的变异系数来衡量的 。当乳 之后加 Peridocho m 试剂 2 ml ,于 25 ?保温 45 , 糖含量为 2 %时 ,吸光度的平均值为 0 . 094 2 ,标准 60 min ,产生的颜色用分光光度计于 510 nm 测定吸 偏差为 0 . 006 088 ,变异系数为 6 . 5 % ; 当乳糖含量 光值 ,以蒸馏水作空白进行同样操作 。 为 7 %时 ,其平均值为 0 . 336 4 ,标准差为 0 . 016 788 ,
如有必要 , 可用 Carrez 法除 蛋 白 , 具 体 操 作 如 变异系数为 5 % 。
下 :将 1 ml 乳样放在 100 ml 容量瓶中 ,加入 30 ml 蒸 酶法测乳糖的又一优点是所测样品可不用除蛋
(馏水 ;2 . 5 ml Carrez 试剂甲 每 100 ml 含 3 . 60g KFe 4 白 。即此 法 既 适 合 于 脱 蛋 白 的 乳 , 也 适 合 于 全 乳 。 ( ) ( ) CN 〃3 HO ; 2 . 5 ml Carrez 试 剂 乙 每 1 0 0 ml 含 6 2 利用红外仪测全乳的乳糖含量 ,与酶法测定结果比
) 7 . 2g ZnSO〃7 HO; 5 ml 0 . 1M NaO H 。混合物于 4 2 较 ,二者仅有 2 %的偏差 ,完全可以在不除蛋白的情 室温下 ,定容到 100 ml ,摇匀过滤 ,滤液供分析用 。 况下测定乳糖 ,这样可使操作简化 。 3 . 2 标准曲线的制作 参 考 文 献
将 乳 糖 配 制 成 8 个 浓 度 系 列 , 分 别 为 1 , 1 Sanchez - Manzanares J A. Food chemist ry , 1993 ,46 : 425 8g/ 100 ml ,进行同上的操作 ,测其吸光值 。以无水乳 ,427
糖浓度对吸光度作图 ,可绘制标准曲线或求出回归 Ball G F M . Food chemist ry , 1990 , 35 :117 2 Feitosa T , Young C K. J . Dairy Sci . , 1978 ,61 :506 方程 。由实验数据可知 ,其 Y 轴截距为 - 0 . 009 5 ; 3 Frank J F. J . Food Sci . , 1984 , 49 :1 332 4 斜率为 0 . 058 4 ;相关系数 r = 0 . 999 4 ,说明乳糖浓 Pilloto n R. Food Chem. , 1990 ,36 :213 5 度与吸光度之间呈很好的线性关系 。
()其次 ,为了保证通过塔内第一次附聚和流化床上接第 26 页 内老式的干燥塔之所以不能均匀出粉 ,其主要原因 , 第二附聚生产的无细粉的中空颗粒在输送时不受到 一是布袋机械抖袋不好用或根本不用 ,人工开门用 破坏 ,我们又开发了“落差式粉仓”。过去不论是引 木棒打袋比较普遍 ,造成打袋时粉出得多 ,不打袋时 进设备还是国产设备 ,凡有集粉仓的全是正压送粉
Φ粉出的少 ;二是塔壁振荡装置不好用 ,一般电锤敲击 或负压送 粉 , 一 般 输 送 粉 的 不 锈 钢 管 径 为 70 mm 力量小 ,加上制造塔时壁与骨架焊接点过多 、焊道过 左右 ,实践证明奶粉通过管道输送颗粒要破坏 50 % 长加强了塔体的钢性 ,局部敲击 ,塔壁的振颤幅度较 左右 。所以 ,有些引进设备厂家在生产有颗粒要求 小 。特别是圆锥部份 ,如果圆锥角度过大 ,出粉口过 的奶粉时就不用粉仓 ,而用粉车直接接下来 ;在生产 小 ,振锤无力且布置不合理 ,由于塔下积粉更容易出 没有颗粒要求的奶粉时 ,在用罗茨风机通过输粉阀 现出粉时多时少的问题 ; 三是现在国内有很多的塔 把粉送到粉仓里 。我们设计制造的这套装置是 : 把 在制造时 ,根本不加振锤 ,需要振荡时人工开门用不 干燥塔座落在三 层 上 , 二 层 是 粉 仓 , 一 层 是 包 装 间
() 锈钢管直接敲击塔壁 。 干燥塔一般设计塔座在二层上 ,一层是落粉间,把
要想实现均匀出粉 ,除旋风或布袋捕集到的细 原来的横向布置改为竖向布置 ,从塔 、流化冷却床和 粉要均匀送回干燥塔的雾区外 ,又开发了空气锤 ,安 电振筛出来的粉 , 通 过 振 送 器 直 接 落 到 集 粉 仓 里 。 装在塔壁和旋风分离器的出口 。这种气锤用 0 . 6, 这样 ,就保证了由附聚工艺生产的中空颗粒奶粉不 31 m的空气压缩机就可以工作 , 工作压 力 在 2 . 5 , 受任何破坏 。
26 kg/ cm之间可 调 , 通 过 尼 龙 球 敲 打 焊 在 塔 壁 上 的 另外 ,在干燥塔的设计和制造上还采用了塔顶 背板 ,塔壁与骨架的焊接点采取间断焊接的办法 ,尽 设冷水圈 、加热器进风加分风板 、浓奶加热 、冷凝水 量减少焊点 。这样在空气锤敲击塔壁时能形成“和 余热回收 、自动包装机真空上粉 、旋风流化床和输粉 尚敲钟”的效果 ,减少塔壁挂粉和锥节积粉的问题 , 管道原位清洗等技术和各种参数的自动控制 。这对 从而保证了均匀出粉 。 生产具有国际水平的奶粉都有重要的作用 。