特别注意HPLC 使用过后的系统清洗：含有缓冲盐溶
1、先用100%的纯水冲洗，打开排放阀，用3~5ml/min的量，洗二十分钟左右后停泵。此举主要是针对吸液系、泵头、进出口单向阀等体积较
2、再用95：5的甲醇/水清洗整个系统，关闭排放阀，用1ml/min流量，洗30~60分钟后停泵。此举主要是用水清洗整系统中的盐，用5%的甲醇主要是
3、最后用100%的甲醇清洗整个系统，用1ml/min流量，洗2分钟左右，然后关机。如果流动中不含盐，则使用上述第三
反相色谱切换正相色谱流程：
1、先将色谱柱用相应的溶剂冲洗干净，然后将色谱柱拆下来密封保存。用通将进样器与检
2、将贮液瓶内装入300ml 的二次蒸馏水，将流速渐次提高到2.0ml/min冲系统1.5h 。注
3、将流速渐次降到0ml/min，把二次蒸馏水更换为甲醇，，将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗
4、用同样的方法将甲醇更换为异丙醇、四氢呋喃，各冲系统1h 。
5、最后将四氢呋喃更换为预先配制好的流动相冲系统1h ，同时将柱塞杆清洗系统内的10%异丙醇更换为动相，保持50-60滴/min的速度清洗柱塞杆。再双通更换为正相色谱柱，待色谱平衡好以
什么导致反相柱子污染产生？通常，样品中含有一些对分析来说不感兴趣的东西。盐、脂、含脂物质、腐质酸、疏水蛋白质和其它一些生物物质是一些可能在使用时与HPLC 柱发生相互作用的物质。这些物质有比分析者目标物或少或大的保留值。那些留值较小的物质如盐类一般来说在空体积时就被冲出色谱柱。这些非目标产物的干扰能被检测器检测到而且能形成色谱峰，气泡，基线上移或是负峰。如果样品成分在柱子中有很强的保而且流动相溶液成分足以把这物质洗脱下来，多次上样，这些吸附
在柱头。这些行为通常只有通过平行实验才能发现。有着中等保留值的样品能被缓慢洗出而且表现为宽峰，基线扰动，或者基线漂移。有时候这些被吸附的样品成分积到一定程度足以使他开始形成新的固定相。分析物能与这些杂质作用形成一定的分离机理。保留时间会波动，拖尾会出现。如果足够的污染产生，柱子的反能超过泵所能受的最压力，使柱子无工作以及
清洗硅胶键合柱子：再生被污染HPLC 柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物的累积引起的，利用单的步骤来除去这些污染物往往能恢复其色谱行为。有时候，经过多次操作以后的色谱柱90～100％的溶剂B （双溶剂反相统中强的溶剂）冲洗20个体
例如，柱子中残留的脂质就能用非水溶剂如甲醇、
如果你使用的是缓冲液系统，不要直接切换到强溶剂，突然转换到高浓度有机溶剂可能会使HPLC 流动体系中的缓冲液沉，这样会导致更的问题如柱头 堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。应该用无缓冲流动相（即把缓冲液换成水）。洗5～10体积以
有时候，强溶剂也没法把残留在色谱柱上的污染物洗掉。那么更强的溶剂或者是一系列溶剂就有必要用来清洗柱子，如果污染物是生物物质，使用者可以跳过一个或多个另外的有机溶剂去除污染物。剂与溶剂之间的组合有很多。到柱子厂的网页上找到
一般来说，所有的清洗方法都有类似的形式。所用的溶剂都是随溶剂强度增加，经常最后一个溶剂非常疏水的（醋酸乙酯甚至是烃），可以用来溶解非极性物质 如脂质和类。我们必须保证一系列溶剂中个溶剂都能
清洗过程要结束时，必须借助一个中等强度能互混的溶剂而回到原始溶剂系统。例如， 异丙醇是一个常好的作为中步骤的溶剂，因为它能与正己烷或二氯甲烷互溶又能与水相溶剂溶。但是异丙醇粘度非常大，必须保较低的
当然，如果使用紫外检测器的话，避免溶剂在紫外区域有
量的溶剂冲洗才能使基线平稳。
对于典型的硅胶键合柱来说如果没有缓冲溶液的话推
100％甲醇；100％乙晴；75％乙晴－25％异丙醇；100％异丙醇；100％二氯甲烷 100％正己烷；
用二氯甲烷或正己烷以后，于溶剂相容性柱子必须用异丙醇冲洗后才能用原来的水相溶剂。每种溶剂至少冲洗10个柱体积。如250mm×4.6mmHPLC 分析柱，分析者可以用1～2ml/min的速来冲洗，要回复原来的溶剂体系，不需要每一步都冲洗，可以跳过中间步骤。中间步骤推荐使用异丙醇，然后用没 有缓冲的流动相，最后回复起始流动相配置。四氢呋喃是另外一种比较受欢迎的去污染的溶剂。如果使用者怀疑柱子被重污染，可以二甲基亚砜（DMSO ）或 者二甲基甲酰铵和水按50：50的例混合用低于0.5ml/min的流速流过色谱柱。成功再生反柱子是一个常耗时间的过程，溶剂冲洗可以利用梯度系统过夜操作。 常见液相色谱柱性能比较。 最常用的" 万能柱" 料为"C18" ，简称"ODS" 柱，即十八烷基硅烷键合硅填料（Octadecylsilyl ，简称ODS ）。这种填料在反相色谱中发挥着极为重要的作用，它可完成高液相色谱70～80％的分析任务。由于C18(ODS)是长链烷基键合相，有较高的碳含量和更好的水性，对各种类型的物大分子有更强的适应能，因此生物化学分析工作用最为广泛。 近年来，为适应氨基酸、小肽等生物分的析任务，又发展了CH 、C3、C4等短链烷基键合
反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用最广泛的技术，主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和很多的可离子化的离子化合物。大多用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质，因此，分析物是按照它们与固相的疏水相互作用的大小来分离的，含有水的机制也以同样
按键合到基质上的官能团可分为：
⑴反相柱：填料是非极性的，官能团为烷烃，例如：C18(ODS)、C8、C4等。
⑵正相柱：填料是极性的，官能团为－CN 氰基、－NH2氨基等。 ⑶离子交换键合相：阳离子官能团：－SO3H 磺酸基、－COOH 羧基等。 阴
离子官能团：―R4N ＋季铵基、-氨基等。 ( 由于硅胶基质的键合相只能在pH ＝2～7.5的范围内使用，而离子交换色谱要求有更宽的pH 范围，因此其基质现在仍主要使用聚苯
流动相：反相色谱最常用的流动相其冲洗强度如下： H2O ＜甲醇＜乙腈＜乙醇＜丙醇＜异丙醇＜四氢呋喃 最常用的流动相组成是：" 甲醇-H2O" " 乙腈-H2O" ，由于乙腈的剧毒性，通常优先考虑" 甲醇-H2O" 流动相。 反相色谱中，溶质按其疏水性大小进行分离，极性越大疏水性越小的溶质，越不易与非极性的固定相结合，所以先被洗脱下来。流动相的pH 对样品溶质的电离状态影响很大，进而影响其疏水性，所以在分离肽类和蛋白等生物大分子的过程中，经常要加入修饰性的离子对物质，最常用的子对试剂是三氟乙酸（TFA ），使用浓度为0.1％，使流动相的pH 值为2～3，这可以有地抑制氨基酸上α羧基的离介，使其疏水性增加，延长洗脱时间，提高分辨率和分效果。完全子化的溶质，例如强酸或强碱，其在反相键合相上的保留值很低，近于死时间流出，不能进行分析。根据离子对色谱的原理将一种与样品离子电荷（A ＋）相反的离子（B －），称为离子，加入到流动相中，使其与样品离子结合生弱极性的离子，即中性缔合物，从而增强了样品的疏水性，加大了保留值，改善了分离效果。 正相色谱常用的流动相及其冲洗强度的顺序： 正己烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜异丙醇 其中最常用是正已烷，虽然其价较贵，但80％的顺、反和邻位、对位异构体仍然要正相色谱来进行分离。流相的选择原则是：①样品易溶，溶解度尽能大。②化学性质稳，损柱子。③不妨碍检测器检测，紫外波长处无吸收。④粘度低，流性好。⑤易于从其中回收样品。⑥毒低毒，易于操作。⑦易于制成高
正相柱还是反相柱[技巧]
液相注意事项
特别注意HPLC使用后系统清洗:含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法:1、先用100%的纯水冲洗，打开排放阀，用3~5ml/min的量，二十分钟左右后停泵。此举主要是针对吸液系统、泵头、进出口单
2、再用95:5甲醇/水清洗整个系统，关闭排放阀，用1ml/min的流量，洗30~60分钟后停泵。举要是用水清洗整个系统中的盐，用5%的甲醇主
3、最后用100%的甲醇清洗整个系统，用1ml/min的流量，洗2分钟左右，然关
反相色谱切换正相色谱流程:
1、先将色柱用相应的溶剂冲洗干净，然后将色谱柱拆下来密
2、将贮液
3、将流速次降到0ml/min，把二次蒸馏水更换为甲醇，，将流速
4、用同样的方法将甲醇更为丙醇、四氢呋喃，各冲系统1h。 5、最后将四氢呋喃更换为预先配制好的流动相冲系统1h，同时将柱塞杆清洗系统内的10%异丙醇更换为动相，保持50-60滴/min的速度清洗柱塞杆。再将双通更换为正相色谱柱，待谱柱平衡好
什么致反柱子污染产生,通常，样品中有些对分析者来说不感兴趣的东西。盐、脂质、含脂物质、腐质酸、疏水蛋白质和其它一些生物物质是一些可能在使用时与HPLC柱发生相互作用的物质。这些物质有比分析者的目标物或少或大的保留值。那些保留值较小的物质如类一般来说空体积时就被冲出色谱柱。这些非目标产物的干扰能被检测器检测到而且能形成色谱峰，气泡，基线上或者是负峰。如果品成分柱子中有
以把些物洗脱下来，多次上样后，这些附在子表面的物质通常就会积累在柱头。这些行为通常只有通过平行实验才能发现。有着中等保留值的样品能被缓慢洗出而且表现为宽峰，基线扰动，或者基线漂移。有时候这些被吸附的样品成分累积到一定程度足以使他们开始形成新的定相。分析能与这些杂质作用形成一定的分离机理。保留时间会波动，拖尾会出现。如果足够的污染产生，柱子的反能超过泵所能承受的大压力，使柱子无
清洗硅胶合柱子:再生被污染HPLC柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的步骤来除去这些污染物往往能恢复其谱行为。有时候，经过多次操作以后的色谱柱用90,100,的溶剂B(双溶剂反相系统中较强的剂)冲洗20
例如，柱中残留的脂质就能用非溶如甲醇、乙晴、四氢 呋喃。 如果你使用的是缓冲液系统，不要直接切换到强溶剂，突然转换到高浓度有机溶剂可能会使HPLC流动体系中的缓冲液沉淀，这样会导致更大的问题如头 堵、管道堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。应该先用无缓冲流动相(即把冲液换成水)。洗5,10个
有时候，强溶剂也没法把留色谱柱上的污染物洗掉。那么更强的溶剂或者是一系列溶剂就有必要用来清洗柱子了，如果污染物是非生物物质，使用者可以跳过一个多个外的有机溶剂去除污染物。溶剂与溶剂之间的组合有很多。到柱子厂家的页上能找
一般来说，所有的清洗都有类似的形式。所用的溶剂都是随溶剂强度增加，经常最后一个溶剂是非常疏水的(如醋酸乙酯甚至是烃)，可以来溶非极性物质 如脂质和油类。我们必须保证一系列溶剂中每个溶
清洗过程要结束时，必助一个中等强度能互混的溶剂而回到原始溶剂系统。例如， 异丙醇是一个非常好的作为中间步骤的溶剂，因为它能与正己或二甲烷互溶又能与水相溶剂互溶。但是异丙醇粘度非常大，必须确
当然，如果用紫外检测器的话，避免溶剂在紫外区域有吸收，要不
对于典型的硅胶键柱来说如果没有缓冲溶液的话推荐使用以下溶剂系列: 100,甲醇;100,乙晴;75,晴,25,异丙醇;100,异丙醇;100,二氯甲
用二氯烷或正烷以后，由于溶剂相容性柱子必须用异丙醇洗后能用原来的水相溶剂。每种溶剂至少冲洗10个柱体积。如250mm×4.6mmHPLC 分析柱，分析者可以用1,2ml/min的流速来冲洗，要回复原来的溶剂体系，不需要每一步都冲洗，可以跳过中间步骤。中间步骤推荐使用异丙醇，然后用没 有缓冲的流动相，最后回复起始流动相配置。四氢呋喃是另外种比受欢迎的去除污的溶剂。如果使用者怀疑柱子被严重污染，可以二甲基亚砜(DMSO)或 者二甲基甲酰铵和水按50:50的比例混合用低于0.5ml/min的流速流过色谱柱。成功再反相柱子是个非常耗时间过程，溶剂
常见液相色谱柱性能比较。
最常的"万能柱"填料为"C18"，称"ODS"柱，即十八烷基硅烷键合硅胶填料(Octadecylsilyl，简称ODS)。这种填料在反相色谱中发挥着极为重要的作用，它可完成高效液相色谱70,80,的分析任务。由于C18(ODS)是长链烷基键合相，有较高的碳含量和更好的疏水性，对各类型的生物分子有更强的适应能力，因此在生物化学分析工作中应用的最为广泛。 近年来，为适应氨基酸、小肽等生分子的分析任，又发展了CH、C3、C4等短烷基键合相
反相色谱是迄今在高效液相谱应用最广泛的技术，主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的水物，因此，分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的，含有疏水机制也能以
按键合到基质上的官能团可分为:
?反相柱:填料是非极性的，官能团为烷烃，例如:C18(ODS)、C8、C4等。
?正相
?离子交换合相:阳离子官能:,SO3H磺酸基、,COOH羧基等。 阴离子官能团:―R4N，季铵基、-氨基。 ( 由硅胶基质的键合相只能在pH,2,7.5的范围内使用，离子交换色谱要求有更宽的pH范围，因此其基质现在仍主要使用聚苯烯和二乙烯苯。) 动相:相色谱最常用的流动相及其冲洗强度如下: H2O,甲醇,乙腈,乙醇,丙醇,异丙醇,四氢呋喃 最常用的流动相组成是:"甲醇-H2O"和"乙腈-H2O"，于乙腈的剧毒性，通常优先考虑"甲醇-H2O"流动相。 反相色谱中，溶质按其疏水性大小进行分离，极性越大疏水性越小的溶质，越不易与非极性的固定相结合，所以先被洗脱下来。流动相的pH对样品溶质的电离状态影响很大，进而影响其疏水性，以在分离肽类蛋白质等生物大分子的过程中，经常要入修饰性的离对物质，最常用的子对试剂氟乙酸(TFA)，使用浓度为0.1,，使流动相的pH值为2,3，这样可以有效地抑制氨基酸上α羧基的离介，使其疏水性增加，延长洗脱时间，提高分率和分离效果。完全离子化的溶质，例如强酸或强碱，其在反相键合相上的保留值很低，近于死时间流出，不能进行分析。根据离子对色谱的理将一种与样品离子电荷(A，)离子(B,)，称对离子，加入到流动相中，使其与样品离子结合生成弱极性
正相色谱常的流动相及其冲洗强度的顺是: 正己烷,乙醚,乙酸乙酯,异丙醇 其中最常用的是正已烷，虽然其价格较贵，但80,的顺、反和邻位、对位异构体仍然要用正相色谱来进行分离。流动相的选择原则是:?样品易溶，且溶解度尽可能大。?化学性稳定，不坏柱子。?不妨碍检测器检测，紫外波长处无吸收。?粘度低，流动性好。?易于从其中回收样。?无毒或低毒，于操作。?易于制
理，不污染环境。
正相柱
正相类型：按质分为硅胶柱、Al 2O 3柱和聚物柱，按填料分为氨基、氰基、二醇基柱（Diol ，不能沾水）。氨基、氰基柱正反向可用，反相用时-NH 2与-CN 会水解，pH 应在1.5-7.0。CHIRALPAK AD-H 的硅胶表面涂敷的是直链淀粉－三(3,5－二甲苯基氨基甲酸酯) ；CHIRALPAK AS-H胶表面涂敷有链淀粉-三[(S)-α-甲基苄基氨基甲酸酯；CHIRALCEL OD-H 硅胶表面涂敷有纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基酸酯]; CHIRALCEL OJ-H 硅胶表涂敷有纤
新柱活化：般正相新柱出厂是用95%的己烷：5%乙醇或纯异丙醇或正己烷保存，如AD-H 、AS-H 、OD-H 、OJ-H 的保存液是正己烷/异丙醇=90/10(v/v)。可用异丙醇过渡（0.2mL ·min-1），先路后过柱，约0.5h 后换上流动相，若有缓冲盐，则应先用不含盐的同比例的流动相过柱）；若新保存在正己烷-乙
1）以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，再根据流动相选用极性相近的氯仿
测柱效（硅胶柱、氨基柱、氰基柱）：流动相：10％乙酸乙酯＋90％正己烷；1.0mL ·min-1；标准溶液：乙苯（或甲苯）＋苯甲酸甲酯；254nm 。
氨基柱反使用：先用正己烷-乙（99：1）以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）冲柱子。pH 11.0的氢氧化钠溶液冲子（LUNA 牌柱子，0.5ml/min，30倍柱体积），立即用水（0.5ml/min，30倍柱体
氨基柱正相使：不宜分析含醛基、羰基的化合物和还原糖，流动相不得含有羰基化
氨基柱正相使后冲洗：50倍柱体积异丙醇（低流速）→50倍柱体积甲醇→异丙醇过到
氨基柱恢柱效：酸性物质（如糖）质子，可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，导致柱效下降。可用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0％NH 3的50-50乙腈-水溶液冲洗，再用不含碱的流动相洗去多的NH 3，之后再分析酸性物时可在流动相中添加少许氨（如0.1％）。 氰基柱恢复柱：10倍柱体积
正相柱再生：方案1：依次用甲醇、异醇、氯仿、正己烷、氯仿、异丙醇、甲醇冲柱子（各以0.5ml/min的流速，20倍柱体积），再换流动相；方案2：清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗：95％水/5％乙腈、THF 四氢呋喃、95％乙腈/5％水、再走流动相即可。若反相使用后柱效下降再生冲洗方法同上过程，并保持95％乙腈/5％水继续冲洗，以低流
除水再生：保留时间漂移可由定相的含水量变化引起（大部分溶剂都内含有小部分的溶解水分，如正己烷20摄氏度下水分含量是0.0111% w/w），可用含2.5 % 二氧基丙烷(dimethoxypropane)和2.5 % 冰醋酸的正烷冲洗色谱
添加剂：性样品需加三氟乙酸或乙酸，碱性样品需加
蛋白质纯化的反相柱选择
蛋白纯化反相柱选择问题
主要想用 ，分析蛋白是否纯化好了，当然能制备更
HP-RPC 的选择首看蛋白质的分子量，20kDa 左右的一般用C4或C8，再小一点的可以用C18，太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用最好，但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对，以考虑通
一般来说，4.6mm 的内径比较常见，250mm 长的柱子比150mm
其次要注意填料的孔径，80A 左右的填料主要是用于小分子的分析分离，对于蛋白这样的大分子，要用300A 孔径的填料，可以避免分扩散填料内部的摩擦阻力，提高柱效。此外C 载量来说，蛋白柱和
Agilent, Waters ，ydac 都有相关
更小内
制备的话，还是考虑物的制备级填料Source RPC 比较好，可以NaOH CIP 。Amersham 也有ReSource 的聚合物反相分析柱卖，寿命会长些，该柱非极性
印象中要RMB 8000。
一般的
我以有一Agilent 的从从c18柱，是用来作液
另外，如是比较大的蛋白，几十kD 看来就不适合作
你查一下说明书，看看孔径是多少？
80A 的不大适合做蛋白，300A 的SB-C18才好。
不过
HP-SEC 用的也多，Shodex 的SEC 不错，TSK 也有。 那么你是说，不可能有一根柱子，可以分析所有的蛋白了，总有分量的范围了。我看安玛西亚的source RPC 说明似乎
大家能不能给推荐一根啊，便宜点的
太大分子量的蛋白用Source RPC 分离收率也一样不会高的，不过对于硅胶C18系列分析柱，柱子寿命更重要，为了防止堵，自，厂家会强调如何根据蛋白性质来选合适的柱，以尽量延长
对于安马亚的Source RPC ，它的非极性和C8的蛋白柱相近，这一点是明确的，但选择性不同。Source 柱可以CIP 再生，所以寿命不是问题，就是沉淀了活是洗不下来也不用担心，用浓酸碱再生就是，所以用不着强调分子量范围，而只是说和C 8的非极性相似。一般的SOURCE RPC 的载量是用岛素标称的，
对于C18柱，配合相应的保护应
哦，谢谢啊，
安玛西亚的source 柱，如果用于大蛋白呢，是不是分不开，还是分离效果差了。一般可以分开多大的蛋白呢，是不是玛
对于分离而言，Source 和C18相比，没有明显的优势；但是前者寿命长，怕
不同的
的柱子更容易使白变性，比如C18比C8更容易使蛋白变性，因为蛋白容易变性，有的甚至沉，
此外维持蛋活性还可蛋白本身的稳定性和所用的离子对试剂的种类
以硅胶反相柱为例，太大的蛋白无法进入小的孔径，无法利用孔径内的配基位点，因此分离效果不会很好，但也不绝，要杂蛋白的情况。如果分子量不是太大，那可以试试
Source 柱的非极性和C8相近，一般也足以使蛋白保留了。可以放
不知道说清楚没有
请问一下，阁下否用过silica 这种反相介质？如用过能否给小弟一些使用建议，如介质用后
请不要留邮件，谢谢合作！
常见的C8,c18硅胶基质的反相填料。这种填料比较耐压，但是pH 范围较窄，一般为2~7，以免硅胶水解或配基脱落。 理话看说明书即可，要注意极性和非极性溶液之间的过渡就可
如果你说的是通的层析硅胶，那还是属于正相层析，因为硅胶本身是极性的，
请问版主，我现在用的是C18的反相柱， 我是分离水解酶水解的碱基的，样品水解后没有处理，直接进样，用HPLC 分离，但是水解的过程中的水解酶是蛋白，一个是性磷酸酶，一个是磷酸二脂酶，所以一直担心这些蛋白会不会堵C18 。有时候
1、对于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流动相
1、对于一般的反相柱，醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时，如果得到的色谱图出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出的峰太靠后分离果又不错，可加大甲醇的比例，可使出峰变早。对于一些难分离的物
2、秘诀1:由强弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验， 这样可以很快得分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(
秘诀2: 三倍规 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。是个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观
秘诀3: 粗转微调:当分离达到一定程度，应将有机溶剂10%的改变量调整为5%，据
3、含缓冲的流动相最好当天用完，要置过夜，用不完也要倒掉，这是为了保护好机子起见，流动相的保存期限与缓冲盐的浓度有关系，越浓越不宜保留，总之，我认为缓冲盐溶液都不宜保留超过24小时，HPLC用缓冲盐时,由于泵头内缓冲盐溶存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞的往复运动,容易生划痕,并磨损
