大便还原糖检测还原糖检测

范文一：大便还原糖检测还原糖检测

还原糖测定法

1 亚铁氰化钾快速法

1.1 试剂与溶液 1.1.1 费林氏甲液

称取分析纯硫酸铜(CuSO4〃5H2O)15g 及四甲基蓝 (次甲基蓝) 0.05g,用蒸馏水溶解,

淀容至 1000mL。

1.1.2 费林氏乙液

称取分析纯酒石酸钾钠 50g,分析纯氢氧化钠 54g 及分析纯亚铁氰化钾 4g,用蒸馏水溶解,定容至 1000mL。

1.1.3 0.1%葡萄糖标准溶液

精确称取在 105?烘 2,3h 至恒重的分析纯无水葡萄糖 1.000g,放入 100mL 烧杯中,用蒸馏水溶解,定容至

1000mL,为防染菌,可加 5mL 浓盐酸后再定容。

1.2 测定方法

1.2.1 样品处理及吸取

精确吸取样品 10mL,用蒸馏水稀释定容至 100mL,摇匀吸取稀释液 1mL 进行测定。稀

释

度及吸取量根据含糖量可予增减。

1.2.2 空白滴定

精确吸取费林甲、乙液各 5mL 放入 150mL 锥形瓶中,加蒸馏水 10mL。再用滴定管加

入

0.1%葡萄糖标准液 9mL。摇匀在电炉上加热,使其在 2min 内沸腾,沸腾 30s 后, 匀速滴入 0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点。记录沸腾前后共耗用葡萄糖液毫升数

(A) 。

1.2.3 预备滴定

精确吸取费林甲、乙液各 5mL,放入 150mL 锥形瓶中,加蒸馏水 10mL,再加 1mL10%样

品

稀释液。根据样品含糖量的高低(估计数),可用糖液滴定管先加入一定量的 0.1%葡萄糖液(空白滴定耗用葡萄糖液一般在 10mL 以上),摇匀加热,沸腾 30S 后,匀速滴入 0.1%葡

萄糖液,至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用 0.1%葡萄糖标准液毫升数,作正式滴定时参考用。

1.2.4 正式滴定

精确吸取费林甲、乙液各 5mL,放入 150mL 锥形瓶内,加蒸馏水 10mL 及 1mL10%样品

稀

释液,再用糖液滴定管加入比预备滴定耗用量少 0.5mL 左右的 0.1%葡萄糖标准液,摇匀后加热,使其在 1,2min 内沸腾,沸腾 30S 后匀速滴入 0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用 0.1%葡萄糖标准液的毫升数 (B)。

做平行样，两次结果相差不得超过0.1ml.

1.3 计算

还原糖(以葡萄糖计,g/100mL或g) ,(A-B)*C/W×100…………………(1)

式中: A——空白滴定耗用0.1%葡萄糖标准液数, mL;

B——正式滴定耗用0.1%葡萄糖标准液数, mL;

C——1mL0.1%葡萄糖标准液含葡萄量(即0.001g);

W——吸取样液相当样品量,mL 或g。

5% 取1ml稀释5倍吸取0.5ml 还原糖%=A-B

2%,5% 取1ml稀释5倍吸取1ml 还原

糖%=(A-B)/2

1%,2% 吸取0.5ml 还原糖%=(A-B)/5

1%以下吸取1ml 还原糖%=(A-B)/10

1.4 注意事项

1.4.1 每批试样测试前必须做空白滴定,二次平行测定误差不得超过0.1mL。

1.4.2 空白滴定、预备滴定及正式滴定操作条件应保持一致。滴定速度应以每秒1,2 滴为宜。热源要稳定,在正式滴定时,待试样沸腾后,标准糖液的滴定量必须控制在0.5, 1mL之内,否则要重做。整个滴定过程必须始终保持沸腾状态。

1.4.3 凡样品含糖量在6%以上时,应适当增加稀释倍数,否则会加大误差。

1.44滴定的手法与条件对分析结果影响很大，因此必须首先做预备滴定，粗略算出预加数再滴定。

1.45滴定速度要适当，大约每3S一滴，不得过快或过慢，过快容易超过终点，过慢则长时间加热而使婓林溶液分解，造成不到终点而蓝色消失。

1.46取婓林A、B液要精确，应使用固定的移液管吸取，在反应中起定量反应的为A液，故此A液的精确吸取尤为重要。

1.47滴定时，单靠液体的沸腾来搅拌时不够的，还要不时地振荡，否则容易超过终点。

还原糖测定原理与细节

滴定反应:

还原性单糖，2酒石酸钾钠铜+6H2O?糖酸+2酒石酸钾钠+Cu2O?+H2CO3

指示反应:

还原性单糖+亚甲基蓝盐(蓝色)+H2O?糖酸+亚甲基蓝(无色)+HCl

终点:蓝色 ? 无色

红色Cu2O的干扰消除:加入少量亚铁氰化钾

Cu2O?+K4Fe(CN)6+H2O K2Cu2Fe(CN)6+2KOH

实际上，还原糖在碱性溶液中与硫酸铜的反应并不完全符合以上关系，还原糖在此反应条件下将产生降解，形成多种活性降解产物，其反应过程极为复杂，并非反应方程式中所反映的那么简单。

在碱性及加热条件下还原糖形成某些差向异构体的平衡体系。由上述反应看，1mol葡萄糖可以将2mol的Cu2+还原为Cu+。而实际上，从实验结果表明，lmol的葡萄糖只能还原1mol多点的Cu2+，且随反应条件的变化而变化。

因此，不能根据上述反应直接计算出还原糖含量，而是要用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的方法，或利用通过实验

编制的还原糖检索表来计算。

预测定的目的

本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求(0.1%左右)，测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近，通过预测可了解样品溶液浓度是否合适，浓度过大或过小应加以调整，使预测时消耗样液量在10mL左右;

通过预测可知道样液大概消耗量，以便在正式测定时，预先加入比实际用量少1mL左右的样液，只留下1mL左右样液在继续滴定时加入，以保证在短时间内完成续滴定工作，提高测定的准确度。

测定中还原糖液浓度、反应液碱度、滴定速度、热源强度及煮沸时间等都对测定精密度有很大的影响。反应液碱度的碱度直接影响Cu2+与还原糖反映的速度、反应进行的程度及测定结果。在一定时间内，溶液的碱度越高，Cu2+的还原越快。因此必须严格控制反应液的体积，还原糖液浓度要求在0.1,左右，与标准葡萄糖溶液的浓度相近，标定和测定时消耗的体积应接近，使反应体系碱度一致;继续滴定至终点的体积数应控制0.5,lmL以内，以保证在 lmin内完成续滴定的工作，目的是使绝大多数样液与碱性酒石酸铜在完全相同的条件下反应，减少因滴定操作带来的误差;热源一般采用800W电炉，热源强度和煮沸时间应严格按照操作中规

定的执行，否则，加热至煮沸时间不同，蒸发量不同，反应液的碱度也不同，从而影响反应的速度、反应进行的程度及最终测定的结果。

1、菲林溶液甲中的硫酸铜的铜离子为此化学反应定量的标物，次甲基蓝为氧化还原指示剂(氧化型为蓝色，还原型为无色。)

2、为什么要在碱性条件下进行，主要是再酸性条件下，还原糖会形成酯(不具有氧化型或氧化性不

强的含氧酸如乙酸)、有机酸(如被硝酸氧化)，样液中的二糖及多糖与淀粉会水解成还原糖。

3、菲林乙中的酒石酸钾钠的作用:既然实验得在碱性条件下进行，那么硫酸铜遇碱生产氢

氧化铜沉淀后，不能使实验正常进行，必须使其(铜离子)在可溶状态下才行，酒石酸钾钠与铜离子络合就达到了目的。

影响实验结果的主要因素为:

3) 反应液碱度:碱度越高，反应速度越快，样液消耗也越多，故样品测定时样液的滴定体积要与标准相近，原理再次，这样误差要小; 锥形瓶规格:不同体积的锥形瓶会致使加热的面积及样液的厚度有变化，同时瓶壁的厚度不同影

响传热速率，故有时甚至统一规格但不同批次的锥形瓶也会引起误差; 加热功率:加热的母的意识加快反应速度，而是防止次甲基蓝与滴定过程中形成的氧化

亚铜被氧气氧化，使结果偏高。加热功率不同，样液沸腾时间不同，时间短样液消耗多，同时反应液蒸发速度不同，及时监督的变化也就不同，故试验的平行性受影响。

滴定速度:滴定速度越快，样液消耗越多，结果会偏低。

滴定终点有时不显无色而显暗红色，是由于样液中亚铁氰化钾量不够，不能有效络合氧

化亚铜成无色的缘故。故可在反应液中适量添加亚铁氰化钾，标准与样液添加量一样。滴定终点也有偏差

滴定点是在静止加热沸腾中的颜色瞬间变化，如果人为摇晃会造成额外氧化反应的叠加，造成滴定量加大，结果漂高。用同一型号的滴定锥形瓶作空白，即可避免加热不均造成的热量差异。 4、 4) 5) 6)

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范文二：还原糖检测方法

糖液质量的检测方法

1、糖浆OD值的检测方法：

1ml糖浆样品（DS%≈30%）＋9ml无水乙醇，迅速混匀后，在650nm下测其OD值。

2、斐林滴定法测DE值

淀粉酶将淀粉水解成短链的糊精及少量的葡萄糖。

斐林试剂由甲乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。平时甲、乙液分别储存，测定时才等体积混合，混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀。

NaOH + CuSO4→Cu（OH）2+NaSO4

生成的氢氧化铜和酒石酸钾钠反应，生成酒石酸钾钠与铜的络合物，使氢氧化铜溶解。

COOK（CHOH）2COONa + Cu（OH）2→COOK（CHO ）2 Cu COONa +2H2O 酒石酸钾钠铜络合物中的二价铜就是一个氧化剂，能使还原糖氧化，而二价铜被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀：

2 Cu（OH）2→COOK（CHO）2 Cu COONa + CHO（CHOH）4CH2OH +2 H2O→ 2 COOK（CHOH）2COONa + COOH（CHOH）4 CH2OH + Cu2O

剩余的二价铜在酸性调价下与碘化钾反应，生成碘，用硫代硫酸钠滴定，I2被还原成I-，随着其缓缓加入，颜色由棕黄色逐渐变成黄色，当呈现淡黄色时，2%的淀粉指示剂，缓慢滴加硫代硫酸钠直至溶液中的蓝色消失，为浅粉色，即为滴定终点。

通过这个反应，能够测量存在于淀粉水解物中的还原糖含量。用纯水代替样品与斐林试剂反应，所消耗硫代硫酸钠的体积为空白值。定义：

葡萄糖当量浓度（DE）代表淀粉水解的程度，是以葡萄糖计算的还原糖含量占干物质的百分率，其数值的大小与淀粉水解的程度成正比。

化学试剂： Na2CO3

C4H4O6KNa，4H2O CuSO4 NaOH

葡萄糖（Dextrose）；HPLC级 KI I2 H2SO4 Na2S2O3 5H2O 蒸馏水试剂：

葡萄糖标准溶液的配制

1、调解电磁炉的加热功率，使45ml，25℃的水在2.75~3.25min分钟达到沸腾； 2、水空白值的滴定：

加入25ml 的蒸馏水，10ml斐林试剂甲液，10ml斐林乙液于250ml的三角瓶中。

摇匀后，放在电炉上加热，沸腾2min后，放在冰箱中将其冷却到30℃以下。

加入10ml30%KI 和10ml26%H2SO4摇匀后用1.0N Na2S2O3滴定

滴定过程中不断的摇匀，随着硫代硫酸钠的缓慢加入，颜色由棕黄色逐渐变为黄色，当呈现浅黄色时，加入2%的淀粉指示剂，缓慢滴加硫代硫酸钠至溶液蓝色消失，为浅红色，即为滴定终点。

记录硫代硫酸钠的体积，即为空白滴定值。 3、标准葡萄糖溶液滴定

加入20ml蒸馏水，5ml1%的葡萄糖溶液，10ml斐林甲液，10ml斐林乙液试剂于250ml三角瓶中。

加入25ml蒸馏水，10ml斐林甲液，10ml斐林乙液试剂与50ml三角瓶中。混匀后，放在电炉上加热，沸腾2分钟后，放在冰箱中迅速冷却到30℃以下。

加入10ml 30%KI和10ml 26% H2SO4混匀后用0.1N硫代硫酸钠滴定。滴定过程中不断的摇匀，随着硫代硫酸钠的缓缓加入，颜色由棕黄色逐渐变为黄色，但呈现黄色时，加入2%的淀粉指示剂，缓慢加入硫代硫酸钠直至溶液蓝色消失，为浅粉色，即为滴定终点。

记录硫代硫酸钠的体积，即为葡萄糖的滴定值。

4、液化液、糖化液DE的测定

称0.2g的液化液（0.1g 的糖化液）到250ml三角瓶中，用移液管加24.8ml（或24ml）的蒸馏水，记录液化液的质量。

加入10ml斐林甲液，10ml斐林乙液到这个三角瓶中。

摇匀后，放在电炉上加热，沸腾2min后，放在冰箱中迅速冷却到30℃以下。

加入10ml 30%KI 和10ml26% H2SO4摇匀后用0.1N硫代硫酸钠滴定。滴定过程中不断的摇匀，随着硫代硫酸钠的缓慢加入，颜色由棕黄色变为黄色，当呈现黄色时，加入2%的淀粉指示剂，缓慢加入硫代硫酸钠直至溶液蓝

色消失，变为粉色时，即为滴定终点。

记录硫代硫酸钠的体积，即为样品滴定值。

TVT代表空白消耗的硫代硫酸钠的体积，ml TS代表样品消耗的硫代硫酸钠的体积，ml

TDEX代表1%葡萄糖消耗的硫代硫酸钠的体积，ml W代表样品的质量，g

%DS代表样品的干物质含量，%

范文三：还原糖检测规程

还原糖检测规程

1.目的

规范本公司番茄制品的检测，确保产品的内外质量。

2.制定依据

根据GB/T 5009.7-2008制定此标准

3.适用范围

适用于实验室还原糖的检测。

4.具体内容

4.1试剂

4.1.1碱性酒石酸铜甲液：称取15.00g硫酸铜（CuSO4?5H2O）及0.05g亚甲基蓝，溶于水中并稀释至1000ml。

4.1.2碱性酒石酸铜乙液：称取50.00g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。

4.1.3乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。

4.1.4亚铁氰化钾溶液（106g/l）。

4.1.5盐酸（1:1）。

4.1.6葡萄糖标准溶液：精密称取1.0000 g经过99±1℃干燥至恒重的纯葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当于10mg葡萄糖。

4.1.7果糖标准溶液：称取1g（精确至0.0001g）经过98℃~100℃干燥2h的果糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当于1.0ml乳糖（含水）。

4.1.8转化糖标准溶液：准确称取1.0526纯蔗糖，用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中，加5ml盐酸（1+1）在68.70℃水浴中加热15min，放置室温定容至1000ml，每毫升标准溶液相当于1.0mg转化糖。

4.2仪器

4.2.1酸式滴定管。

4.2.2可调式电炉（带石棉板）。

4.3操作方法

4.3.1样品处理

称取约2.50-5.00g固体样品（吸取25.00-50.00ml液体样品），置于250ml容量瓶中，加50ml水，漫漫加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。

4.3.2标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml乙液，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管加约9ml葡萄糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖或其他还原糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每10ml（甲乙液各5ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg）。

X3=V3×m3

X3 –10ml（甲乙液各5ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量,mg；

V3 –平均消耗还原糖标准溶液的体积，ml；

m3 –1ml还原糖标准溶液相当于还原糖的质量，1mg；

4.3.3样品液预测：吸取5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml乙液，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积（样品中还原糖可溶性固形物根据预测加以调节，以0.1g/100g为宜，即控制样液消耗体积在10ml左右，否则误差大）。

4.3.4样品溶液的测定：吸取5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml乙液，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管加比预测体积少1ml的样品溶液，控制在2min内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。同法平行操作三次，待平均消耗体积。

4.4计算

X4=m4/[m5×(V4/250) ×1000] ×100

X = X4/干物质×100

式中：X—样品中还原糖的含量，%

X4—样品中还原糖的含量（以某种还原糖计），g/100g

m4—10ml碱性酒石酸铜溶液（甲乙液各5ml）相当于还原糖（以葡萄糖计）的质量，mg

m5—样品质量（或体积），g（ml）

V4—测定时平均消耗样品溶液体积，ml

250—样液总体积，ml

4.5说明

4.5.1本法为直接滴定法，经过标定的定量的碱性酒石酸铜试剂，可与定量的还原糖作用，根据样品溶液消耗体积，可计算样品中还原糖含量。

4.5.2亚甲基蓝本身也是一种氧化剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色，当它的氧化能力比碱性酒石酸铜更弱，还原糖将溶液中碱性酒石酸铜耗尽时，稍微过量一点点的还原糖会将亚甲基蓝还原，变为无色状态，指示滴定终点。其反应是可逆的，当空气中的氧与无色亚甲基蓝结合时，又变为蓝色。滴定时要保持沸腾状态，使上升蒸汽阻止空气侵入溶液中。

4.5.3加入少量亚铁氰化钾，可使生成的红色氧化铜沉淀络合，形成可溶性络合物，消除观察红色沉淀对滴定终点的干扰，使终点变色更明显。

4.5.4本法对滴定操作条件要求很严。对碱性酒石酸铜溶液的标定，样品液必须预测，样品液测定的操作条件与预测条件均应保持一致。对每一次滴定所使用的锥形瓶规格加热电炉功率滴定速度预加入大致体积终点的确定方法等都尽量一致，以减少误差，并将滴定所需体积的绝大部分先加入碱性酒石酸铜试剂中共沸，使其充分反应，仅留１ml左右进行滴定，并判断终点。

4.6原始记录填写及结果反馈：

在检验进行的同时认真填写检验原始记录仪器使用记录。

5.相关记录

《成品检验原始记录》

范文四：还原糖检测

还原糖检测

一:还原糖的定义(003)

还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。二:主要涉及的产品包括:

化工、石油、矿产、机械设备、食品、AV产品、儿童玩具、健身器材、食品容器、包装印刷材料、电子产品、塑料包装、医疗器械、灯具、家具、纺织品、皮革、汽车配件、化妆品、有害物质检测、各类电器、五金工具、建筑材料、消防产品、电线电缆等等。三:主要测试项目

水分、对羟基苯甲酸乙脂、氨基酸、灰分、膳食纤维、粗纤维、塑化剂、硝酸盐、亚硝酸盐、过氧化值、维生素、二氧化硫、酸价、氯化钠、有机酸、咖啡因、折光率、苯并[a]芘、脂肪酸、总碱度、可溶性固形物、总酸、总脂、总砷、蛋白质、还原糖、粒度、脂肪、总汞及有机汞、相对密度、重金属、甲醇、乙醇、PH值、胆固醇、黄曲霉毒素b1、铅、食品添加剂、其它污染物

同科专业提供:还原糖检测，还原糖含量检测，还原糖成分检测，还原糖性能检测等检测服务。同科温馨提示:检测注意的问题—据在橡塑材料及制品检测行业有着最高权威的第三方检测机构同科橡塑研究所检测中心的专家王教授郑重提示，止水带性能检测是一个很专业且不容忽视的问题。在进行检测时，一定科学的确定检测项目，在“权威性、高效性、性价比”原则上，慎重选择专业的检测机构，以期获得客观可信的检测报告，一定不要盲目的选择检测机构和检测项目，切忌“盲目投医”。(12.9)

范文五：还原糖检测

还原糖测定法

1 亚铁氰化钾快速法

1.1 试剂与溶液 1.1.1 费林氏甲液

称取分析纯硫酸铜(CuSO4〃5H2O)15g 及四甲基蓝 (次甲基蓝) 0.05g,用蒸馏水溶解,

淀容至 1000mL。

1.1.2 费林氏乙液

称取分析纯酒石酸钾钠 50g,分析纯氢氧化钠 54g 及分析纯亚铁氰化钾 4g,用蒸馏水溶解,定容至 1000mL。

1.1.3 0.1%葡萄糖标准溶液

精确称取在 105℃烘 2～3h 至恒重的分析纯无水葡萄糖 1.000g,放入 100mL 烧杯中,用蒸馏水溶解,定容至 1000mL,为防染菌,可加 5mL 浓盐酸后再定容。

1.2 测定方法

1.2.1 样品处理及吸取

精确吸取样品 10mL,用蒸馏水稀释定容至 100mL,摇匀吸取稀释液 1mL 进行测定。稀

释

度及吸取量根据含糖量可予增减。

1.2.2 空白滴定

精确吸取费林甲、乙液各 5mL 放入 150mL 锥形瓶中,加蒸馏水 10mL。再用滴定管加

入

(A) 。

1.2.3 预备滴定

精确吸取费林甲、乙液各 5mL,放入 150mL 锥形瓶中,加蒸馏水 10mL,再加 1mL10%样

品

稀释液。根据样品含糖量的高低(估计数),可用糖液滴定管先加入一定量的 0.1%葡萄糖液(空白滴定耗用葡萄糖液一般在 10mL 以上),摇匀加热,沸腾 30S 后,匀速滴入 0.1%葡萄糖液,至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用 0.1%葡萄糖标准液毫升数,作正式滴定时参考用。

1.2.4 正式滴定

精确吸取费林甲、乙液各 5mL,放入 150mL 锥形瓶内,加蒸馏水 10mL 及 1mL10%样品

稀

释液,再用糖液滴定管加入比预备滴定耗用量少 0.5mL 左右的 0.1%葡萄糖标准液,摇匀后加热,使其在 1～2min 内沸腾,沸腾 30S 后匀速滴入 0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用 0.1%葡萄糖标准液的毫升数 (B)。

做平行样，两次结果相差不得超过0.1ml.

1.3 计算

还原糖(以葡萄糖计,g/100mL或g) ＝（A-B）*C/W×100…………………(1)

式中: A——空白滴定耗用0.1%葡萄糖标准液数, mL;

B——正式滴定耗用0.1%葡萄糖标准液数, mL;

C——1mL0.1%葡萄糖标准液含葡萄量(即0.001g);

W——吸取样液相当样品量,mL 或g。

5% 取1ml稀释5倍吸取0.5ml 还原糖%=A-B

2%～5% 取1ml稀释5倍吸取1ml 还原糖%=（A-B）/2

1%～2% 吸取0.5ml 还原糖%=（A-B）/5

1%以下吸取1ml 还原糖%=（A-B）/10

1.4 注意事项

1.4.1 每批试样测试前必须做空白滴定,二次平行测定误差不得超过0.1mL。

1.4.2 空白滴定、预备滴定及正式滴定操作条件应保持一致。滴定速度应以每秒1～2 滴为宜。热源要稳定,在正式滴定时,待试样沸腾后,标准糖液的滴定量必须控制在0.5～ 1mL之内,否则要重做。整个滴定过程必须始终保持沸腾状态。

1.4.3 凡样品含糖量在6%以上时,应适当增加稀释倍数,否则会加大误差。

1.44滴定的手法与条件对分析结果影响很大，因此必须首先做预备滴定，粗略算出预加数再滴定。

1.45滴定速度要适当，大约每3S一滴，不得过快或过慢，过快容易超过终点，过慢则长时间加热而使婓林溶液分解，造成不到终点而蓝色消失。

1.46取婓林A、B液要精确，应使用固定的移液管吸取，在反应中起定量反应的为A液，故此A液的精确吸取尤为重要。

1.47滴定时，单靠液体的沸腾来搅拌时不够的，还要不时地振荡，否则容易超过终点。

还原糖测定原理与细节

滴定反应：

还原性单糖＋2酒石酸钾钠铜+6H2O→糖酸+2酒石酸钾钠+Cu2O↓+H2CO3

指示反应：

还原性单糖+亚甲基蓝盐（蓝色）+H2O→糖酸+亚甲基蓝（无色）+HCl

终点：蓝色 → 无色

红色Cu2O的干扰消除：加入少量亚铁氰化钾

Cu2O↓+K4Fe(CN)6+H2O K2Cu2Fe(CN)6+2KOH

因此，不能根据上述反应直接计算出还原糖含量，而是要用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的方法，或利用通过实验编制的还原糖检索表来计算。

预测定的目的

本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求（0.1%左右），测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近，通过预测可了解样品溶液浓度是否合适，浓度过大或过小应加以调整，使预测时消耗样液量在10mL左右；

测定中还原糖液浓度、反应液碱度、滴定速度、热源强度及煮沸时间等都对测定精密度有很大的影响。反应液碱度的碱度直接影响Cu2+与还原糖反映的速度、反应进行的程度及测定结果。在一定时间内，溶液的碱度越高，Cu2+的还原越快。因此必须严格控制反应液的体积，还原糖液浓度要求在0.1％左右，与标准葡萄糖溶液的浓度相近，标定和测定时消耗的体积应接近，使反应体系碱度一致；继续滴定至终点的体积数应控制0.5～lmL以内，以保证在 lmin内完成续滴定的工作，目的是使绝大多数样液与碱性酒石酸铜在完全相同的条件下反应，减少因滴定操作带来的误差；热源一般采用800W电炉，热源强度和煮沸时间应严格按照操作中规定的执行，否则，加热至煮沸时间不同，蒸发量不同，反应液的碱度也不同，从而影响反应的速度、反应进行的程度及最终测定的结果。

1、菲林溶液甲中的硫酸铜的铜离子为此化学反应定量的标物，次甲基蓝为氧化还原指示剂（氧化型为蓝色，还原型为无色。）

2、为什么要在碱性条件下进行，主要是再酸性条件下，还原糖会形成酯（不具有氧化型或氧化性不

强的含氧酸如乙酸）、有机酸（如被硝酸氧化），样液中的二糖及多糖与淀粉会水解成还原糖。

3、菲林乙中的酒石酸钾钠的作用：既然实验得在碱性条件下进行，那么硫酸铜遇碱生产氢

氧化铜沉淀后，不能使实验正常进行，必须使其（铜离子）在可溶状态下才行，酒石酸钾钠与铜离子络合就达到了目的。

影响实验结果的主要因素为：

1）

2）

3）反应液碱度：碱度越高，反应速度越快，样液消耗也越多，故样品测定时样液的滴定体积要与标准相近，原理再次，这样误差要小；锥形瓶规格：不同体积的锥形瓶会致使加热的面积及样液的厚度有变化，同时瓶壁的厚度不同影响传热速率，故有时甚至统一规格但不同批次的锥形瓶也会引起误差；加热功率：加热的母的意识加快反应速度，而是防止次甲基蓝与滴定过程中形成的氧化

滴定速度：滴定速度越快，样液消耗越多，结果会偏低。