范文一:植物细胞和动物细胞实验报告11
七年级生物上 第1期
观察植物细胞和动物细胞实验报告 班级 姓名 时间
1、学习制作临时装片的基本方法。 实验2、认识动植物细胞的基本结构。
3、练习画细胞结构简图 目的
洋葱鳞片叶,清水,生理盐水,碘液,消毒牙签,镊子,刀片,滴管,纱布,吸水材料纸,载玻片,盖破片,显微镜,擦镜纸
用具
一、制作并观察植物细胞临时装片
1、用洁净的 把载玻片和盖玻片擦拭干净。
2、用_____________在载玻片中央滴一滴_____________。
3、用镊子从洋葱鳞片叶_____________撕取一小块透明薄膜??_____________。把
撕下的内表皮浸入载玻片上的_____________中,用镊子把它_____________。
4、用镊子夹起盖玻片,使它的_____________载玻片上的水滴,然后_____________ 放下,盖在要观察的材料上,这样才能避免盖玻片下面出现_____________。
5、把一滴_____________滴在盖玻片的_____________。用_____________从盖玻片
的_____________吸引,使染液浸润标本的全部。
6、用显微镜观察细胞要用 眼向目镜注视, 眼睁开以便画图,画图
一般用 铅笔,图中较暗的地方用 表示,如果注字,应尽量注在图方 的 。
二、观察人的口腔上皮细胞 法 1、用洁净的纱布把载玻片和盖玻片_____________。
2、在载玻片中央滴一滴_____________。 步
3、用 在自己已漱净的口腔内壁轻刮几下,放在载玻片的生理盐水中,骤 轻涂几下。
4、用镊子夹起盖玻片,使它的一端先接触载玻片上的水滴,然后缓缓放下,盖在要
观察的材料上,避免出现气泡。
5、在盖玻片的一侧滴加一滴_____________。用_____________从盖玻片的另一侧吸
引,使染液浸润标本的全部。
1、观察临时装片不能将显微镜倾斜,避免液体流出,污染显微镜。 注意2、绘图先用铅笔轻轻勾勒出草图,再修改正式画好,务必要真实,在图形右侧标出
各部分名称,在图形下方写出所绘图形名称。绘图用铅笔,标注用黑色签字笔。 事项
[键入文字]
1、是不是所有的材料都需要染色, 讨论
2、为什么要擦载玻片和盖玻片,
3、为什么盖盖玻片要这样小心做,
将你看到的洋葱内表皮细胞及口腔上皮细胞画下来(只选一个细胞画出,并标注各
部分结构,周围的细胞画出轮廓):
结
果
展
示
[键入文字]
范文二:动物细胞传代培养实验报告
动物细胞传代培养实验报告
篇一:细胞传代培养实验报告
细胞传代培养
一.实验目的
初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程,为生物技术在医学上的
应用打下基础。
二、原理
从生物体中取出某种组织或细胞,模拟体内生理条件,在人工培养条件下使其生存、生
长、繁殖或传代,这一过程称为细胞培养。细胞培养技术的最大优点是使我们得以直接观察
活细胞,并在有控制的环境条件下进行实验,避免了体内实验时的许多复杂因素,还可以与
体内实验互为补充,可同时提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象,耗费少,比较经济,
因此成为生物学研究的重要手段。
细胞培养可分为原代培养和传代(继代)培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为
原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做
再培养,即将培养的细胞分散
后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养,为传代培养,传
代培养的累积次数就是细胞的代数。
细胞培养是一种程序复杂、要求条件多而严格的实验性工作。所有离体细胞的生长都受
温度、渗透压、pH值、无机盐影响,消毒、配液等均有严格的规范和要求,特别是无菌操
作是细胞培养成败的关键。
三、材料和试剂
1、细胞:293细胞株
2、试剂:0.25,胰酶、1640培养基(含10,小牛血清)
3、仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、电动枪,培养板,吸液枪,5ml玻璃吸管、酒精
灯等
四、操作步骤
1、将长满细胞的培养板中原来的培养液吸去。
2、加入1~2ml 0.25,胰酶溶液,使板底细胞都浸入溶液中。
3、马上吸走胰酶液 ,再次加入2ml左右的胰酶,同样马上吸去,再加入几滴胰酶放入培养箱中消化几分钟
4、用吸管将贴壁的细胞反复吹打成悬液,再按照 观察的生长情况确定的传代比例传代
5.根据确定的比例来取需要的量(剩余的细胞拿来做细胞计数),加入4ml左右的培养液
6.前后左右的来回震荡使细胞分散均匀后,将培养板放入培养箱
7.收拾整理超净台
附:消化液配制方法:
称取2.5克胰酶蛋白酶,加入100ml10xPBS+纯水溶解到1L,滤器过滤除菌,4?保存,
用前可在37?下回温。
10x PBS配方:Na2HPO4(14.2g)KH2PO4(2.32g) NaCl(80g)KCl(2.02g)
(调 至PH=7.4)
五、实验结果
传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2天左右就在瓶内形成单层,
达到七八成满。这时需再次传代
六、讨论与反思
无菌操作中的注意事项
在无菌操作中,一定要保持工作区的无菌清洁。为此,在操作前要认真地洗手并用75,乙醇消毒。操作前20,30分钟起动超净台灭菌。培养瓶要在超净台内才能打开瓶塞,打开之前和加塞前瓶口都要在酒精灯上烧一下,打开瓶口后的操作全部都要在超净台内完成。操作完毕后,加上瓶塞,才能拿到超净台外。使用的吸管在从消毒的铁筒中取出后要手拿末端,将尖端在火上烧一
下,戴上胶皮乳头,然后再去吸取液体。总之,在整个无菌操作过程中都应该在酒精灯的周围进行。
每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代。
多做,熟能生巧
篇二:细胞传代实验报告
篇一:细胞传代培养实验报告
细胞传代培养
一.实验目的
初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程,为生物技术在医学上的 应用打下基础。
二、原理
从生物体中取出某种组织或细胞,模拟体内生理条件,在人工培养条件下使其生存、生 长、繁殖或传代,这一过程称为细胞培养。细胞培养技术的最大优点是使我们得以直接观察 活细胞,并在有控制的环境条件下进行实验,避免了体内实验时的许多复杂因素,还可以与 体内实验互为补充,可同时提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象,耗费少,比较经济, 因此成为生物学研究的重要手段。
细胞培养可分为原代培养和传代(继代)培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为 原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养,即将培养的细胞分散 后,从一个
容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养,为传代培养,传 代培养的累积次数就是细胞的代数。
细胞培养是一种程序复杂、要求条件多而严格的实验性工作。所有离体细胞的生长都受 温度、渗透压、ph值、无机盐影响,消毒、配液等均有严格的规范和要求,特别是无菌操 作是细胞培养成败的关键。
三、材料和试剂
1、细胞:293细胞株
2、试剂:0.25,胰酶、1640培养基(含10,小牛血清)
3、仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、电动枪,培养板,吸液枪,5ml玻璃吸管、酒精 灯等
四、操作步骤
1、将长满细胞的培养板中原来的培养液吸去。
2、加入1~2ml 0.25,胰酶溶液,使板底细胞都浸入溶液中。
3、马上吸走胰酶液 ,再次加入2ml左右的胰酶,同样马上吸去,再加入几滴胰酶放入培养箱中消化几分钟
4、用吸管将贴壁的细胞反复吹打成悬液,再按照 观察的生长情况确定的传代比例传代
5.根据确定的比例来取需要的量(剩余的细胞拿来做细胞计数),加入4ml左右的培养液
6.前后左右的来回震荡使细胞分散均匀后,将培养板放入培养箱
7.收拾整理超净台
附:消化液配制方法:
称取2.5克胰酶蛋白酶,加入100ml10xpbs+纯水溶解到1l,滤器过滤除菌,4?保存, 用前可在37?下回温。
10x pbs配方:na2hpo4(14.2g)kh2po4(2.32g) nacl(80g)kcl(2.02g)
(调 至ph=7.4)
五、实验结果
传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2天左右就在瓶内形成单层, 达到七八成满。这时需再次传代
六、讨论与反思
无菌操作中的注意事项
在无菌操作中,一定要保持工作区的无菌清洁。为此,在操作前要认真地洗手并用75,乙醇消毒。操作前20,30分钟起动超净台灭菌。培养瓶要在超净台内才能打开瓶塞,打开之前和
加塞前瓶口都要在酒精灯上烧一下,打开瓶口后的操作全部都要在超净台内完成。操作完毕后,加上瓶塞,才能拿到超净台外。使用的吸管在从消毒的铁筒中取出后要手拿末端,将尖端在火上烧一下,戴上胶皮乳头,然后再去吸取液体。总之,在整个无菌操作过程中都应该在酒精灯的周围进行。
每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代。
多做,熟能生巧篇二:细胞生物学实验 传代培养
一、【实验目的】
1、了解动物细胞传代培养的基本原理。
2、掌握动物细胞传代培养的基本操作,并对hela细胞进行传代培养。
二、【实验原理】
hela 是heietta lacks的简称,heietta lacks 是一位患有子宫颈癌的美国妇女的名字,在她死后,该细胞走被广泛散发到各研究机构,并无限次地繁殖分裂下去。
培养细胞的特性:
贴附生长:必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种实体瘤细胞。
悬浮生长:于悬浮状态下即可生长,不需要贴附于支持物表面。见于各种造血系统肿瘤细胞。 每代贴附生长细胞的生长过程:
1、游离期 细胞接种后在培养液中呈悬浮 状态(也称悬浮期。此时细胞质回缩,胞体呈圆球形。10分钟一4小时
2、贴壁期 细胞附着于底物上,游离期 结束。细胞株平均在10分钟一4小时贴壁。
3、血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘素、胶原(本文来自:Www.HnbOxu.coM 博 旭 范文 网:动物细胞传代培养实验报告)等糖蛋白(生长基质),这些带正电荷的糖蛋白的促贴壁因子先吸附于底物上,悬浮细胞再与吸附有促贴壁因子的附着。
4、潜伏期 此时细胞有生长话动,而无细胞分裂。细胞株潜伏期一般为6,24小时。
5、对数生长期 细胞数随时间变化成倍增长,活力最佳,最适合进行实验研究。
6、停止期(平台期) 细胞长满瓶壁后,细胞虽有活力但不再分裂
细胞传代方法
1、悬浮生长细胞传代
离心法传代:离心(1000转/分)去上清,沉淀物加新培养液后再混匀传代。 直接传代法:悬浮细胞沉淀在瓶壁时,将上清培养液去除l,2一2,3,用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。
2.悬浮生长细胞传代(hela细胞)
此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可用直接吹打法使纫胞从瓶壁脱落下来,进行传代。
3、贴壁生长细胞传代
采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25,的胰蛋白酶液。
细胞培养用液的配制
1、d-hanks原液试剂配方
氯化钠 80.0g 磷酸氢二钠(na hpo ?2h o) 0.6g 氯化钾 4.0g 磷酸二氢钾 0.6g 三蒸水 1000ml
2、d-hanks工作液试剂配方
d-hanks原液 100ml 三蒸水 896ml 0.5% 酚红液 4ml
3、消化液:
胰蛋白酶作用于与赖氨酸或精氨酸相连接的肽健,除去细胞间
粘蛋白及糖蛋白,影响细胞骨架,从而使细胞分离。胰蛋白酶液浓度越高,作用越强,但超过一定限度会损伤细胞。胰蛋
白酶是一种黄白色粉末,用无ca2+、mg2+的pbs缓冲液配制常用的胰蛋白酶液浓度是0.25, 。用滤器过滤除菌。
胰蛋白酶液消化时间:2-10分钟。用含血清培养液终止其对细胞的消化作用
完全培养基的组成基础培养基 80,一95,
血清 5,一20,(一般加10,)
碳酸氢钠2.0 g/l
青、链霉素 各100卑位,毫升
血清质量好坏是实验成败的关键。
常用血清有胎牛血洁、新生牛血清、小牛血情、兔血清、马血清等,其中以胎牛血清质量最好。
优质血清的标准:透明,淡黄色,无沉淀物,无细菌、支原体、病毒污染。 血清的灭活(消除补体活性):56 ? ,30 分钟
血清的消毒:过滤除菌
三、【实验材料】
实验用具:离心管(2支),移液枪(每个台面一把),枪头,吸管(4根),培养皿(每组2个)
实验药品:0.25,胰酶,d,hanks,1640培养基
四、【实验操作】
1. 用75%乙醇擦手,取离心管一个,打开超净台(照明、风机),
把离心管置于架子上。然后用75%乙醇擦一下台面,点燃酒精灯。取尖吸管、吸量管各一支,套好吸球,放置在专用的架上。
2(从冰箱中取出0.25,胰酶、d,hanks、培养基。可以把胰酶和d,hanks的瓶盖打开或者拧松。
3.取待传代的细胞,用尖吸管弃去旧的培养基,加入d,hanks。轻轻摇动后将hanks弃掉。
4.用尖吸管吸取适量胰酶加入,加入的量以覆盖整个细胞培养面为宜,轻轻摇动。2,5分钟后迅速将消化液吸出。消化时间长短是实验成败的关键,宁可短消化,不能过消化。否则细胞会变死。在倒置显微镜下观察,当细胞质回缩,胞间间隙加大为消化适宜。
5(取培养基加入细胞,反复轻轻吹打培养皿壁,制备细胞细胞悬液。吹打的部位均匀,从上到小,从左到右,顺序进行吹打,保证各个部位的培养细胞均能吹打到,成片的细胞已经分散成小的细胞团或者单细胞便停止吹打。吹打时用力不要过猛,尽量不要出现气泡,以免损伤细胞。
6(至所有细胞从培养皿底部脱落下来,然后吸取至离心管中。1000 rpm离心5分钟。(无需准确计数时离心可略)
7(细胞离心毕,尖吸管弃去上清,吸取培养基适量,加入离心管,将细胞重悬、吹匀。(无需准确计数时离心可略)
8(吸量管吸取适量培养基1.5ml加入新的培养皿中。细胞悬液0.5ml加入新的培养皿中,培养密度为1×105,×106/ml。显微镜下观察,摇匀,放入37度c02培养箱孵育。
9(待培养基(本身为红色),当ph值降低,培养基呈偏淡红色时,一般2天以后,将旧的培养基吸掉,更换新鲜培养基继续培养。
五、【实验现象】
培养基:rm1640培养基,10%胎牛血清
六、【实验讨论】
注意事项
1(传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染。所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。
每次最好只进行一种细胞的操作。每一种细胞使用一套器材。培养用液应严格分开。
2(每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代。
3(如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞
,如果必须挽救,可加含有抗生素的bss或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗菌素,并经常更换培养基等篇三:实验二_细胞的传代培养[定稿]
篇三:7-动物细胞传代培养
报告成绩
实验七 动物细胞传代培养
学生姓名 学号班级
座位号: 同组同学 日期:年月 日
备注:
【Introduction】
(1) 动物细胞培养的概念和要求:动物细胞培养,是从动物体内取出细胞或组织,模拟体内的生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,使离体细胞或组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。[1]
动物细胞培养需要无菌操作,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染,不受其他有害因素影响,空气要保持清新和干燥。
(2) 原代培养和传代培养及其应用:接种组织块直接长出单层细胞或将组织分散成单个细胞再进行培养,在首次传代前的培养称为原代培养。原代培养在一定程度上能反映体内状态。
在供体来源充分、生物学条件稳定的情况下,原代细胞是很好的实验材料,如药物测试、研究细胞分化等。原代培养也是建立各种细胞系(株)必经的阶段。
传代培养是指将原代培养的细胞继续转接培养的过程。在细胞一代中,细胞约能倍增3,6次。
【Materials & methods】
实验用具:超净工作台、倒置显微镜、离心机、CO2培养箱。
实验器材:滤器;细胞培养瓶;细胞培养皿/板;培养液瓶--蓝盖瓶;移液器和吸头;离心管;Eppendorf管;酒精灯或煤气灯;75%酒精棉。
培养用液:完全培养基(合成培养基加入5%~10%血清);平衡盐溶液;消化液;抗生素液。 实验操作:
(1) 戴好口罩,穿好鞋套、无菌白大衣?戴手套,喷酒精。
(2) 从细胞瓶的反面加入胰酶2.5ml,轻洗?再加0.5ml胰酶置于培养箱中消化两分钟
(3) 加入2~3ml完全培养基终止?吸管吹打力量适中,7~8次
(4) 低速离心1000转/分钟,5min,弃去上清液?沉淀中加入1ml完全培养基,吹匀
(5) 吸取1/3体积悬液至原瓶中,加5ml完全培养基,继续培养。
【Results】
细胞传代的第二天去观察。
(1)外观细胞培养瓶:培养液清亮,无混浊。贴壁面呈现白色点状。
(2)倒置显微镜观察细胞:细胞分布均匀,密度为40%左右,大部分细胞贴壁铺展良好,类似梭状。少量细胞圆形悬浮,为有丝分裂期细胞。无细菌等污染。
【Discussion】
1. 分析细胞生长优劣的影响因素,若结果不理想,是何原因,如何改进,。
答:细胞培养最容易被细菌或者病毒感染,因此实验操作时应
当果断快速,不要犹豫。
如果结果不理想,比如培养液浑浊,可能是已经被污染了。比如细胞生长过少,可能是吸吹过程中震动太大造成了细胞破裂;也可能是培养箱条件不适合生长;或者盖子太紧了没有气体交换。
2. 实验操作过程中应注意哪些问题,,
答:所有瓶口打开前、打开后、关闭前,都要在火焰上消毒。吸管口和枪头口从瓶口中间伸入,不要碰到瓶口;从液面浅表处吸,不要深入;若碰到,更换新的吸管或枪头。操作时,双手不要从瓶口、皿口上面经过,应绕过取物。这都是为了防止细胞被污染,所以要小心操作。
另外,在吹吸细胞的时候不能太多次数,否则细胞遭受物理撞击容易破裂死亡。还有离心后要缓慢取出,尽量少晃动离心管,否则应该重新离心。细胞培养时应该把瓶口拧松,留一些空隙让细胞呼吸。
3( 对该实验有何意见或建议,,
答:鞋套太容易破了,希望可以换质量好一点的。还有后面组等待的时间太长了,可以先做实验再在等待的时候讲述一些概念性的东西。
【Questions】
1( 在细胞培养的过程中,若细胞培养皿/瓶中出现污染,该如何操作或挽救,如何判断污染源,, 答:细胞污染常见有三种:即真菌污染、细菌污染和支原体污染。
细菌污染:可见培养液明显混浊,细菌产生的毒素等使细胞崩解、死亡,孔或皿底部常有沉淀物出现,用光学显微镜或倒置相差显微镜观察可见视野内有均匀的点状颗粒,瑞氏或革兰氏染色镜下检查即可确定。挽救方法有抗生素除菌法、抗生素联合巨噬细胞吞噬法和裸鼠体内接种除菌法。其中裸鼠体内接种除菌法能彻底清除喉癌细胞系中的污染细菌, 并能保持肿瘤细胞的来源特征和增生活性, 是细胞系去除污染细菌最为理想的方法 [2]。
真菌污染:这在细胞培养中是比较常见的,尤其是在炎热、潮湿的季节。此种污染容易发现,肉眼观察大多呈白色或浅黄色小点漂浮于培养液表面,镜下可见丝状、管状或树枝状菌丝,纵横交错于细胞之间。用氟康唑可以去除细胞培养中的真菌污染[3]。
支原体污染:这是目前细胞培养中最常见、不易被察觉、干扰实验结果的一种污染。支原体在镜下呈暗色微小颗粒,并有类似布朗运动的表现,多位于细胞表面和细胞之间。
2( 若给你一株从你未培养过的细胞株,你应该怎样做才能将该细胞株顺利传代培养,,
答:准备细胞培养室和各种实验器材,然后首先观察该细胞株是贴壁生长还是悬浮生长,以便于制
备相应的培养基以及培养方法。要多设计几个对照组来找到最佳培养方案,接着按照一般细传代的步骤操作。整个实验过程中要保持无菌状态,不能有污染。
【References】
[1]姜彬. 细胞培养技术简介及避免污染的策略[J]. 生物学通报,2008,03:54-55.
[2]王鸿,张伟,孟娜. 细胞培养中珍贵贴壁细胞污染挽救方法的评价[J]. 首都医科大学学报,2011,01:129-134.
[3]王恩军,靳祎,王亮. 氟康唑去除细胞培养中的真菌污染[J]. 河北职工医学院学报,2007,04:7-8.
实验七 动物细胞传代培养
学生姓名 学号班级
座位号: 同组同学 日期:年月 日
备注:
【Real-time Record】
范文三:动物细胞制片技术及减数分裂观察实验报告
动物细胞制片技术及减数分裂观察实验
报告
植物细胞减数分裂制片和观察实验教学的改革
植物细胞减数分裂制片和观察实验教学的改革
摘要 “植物细胞减数分裂制片和观察”是农学类专业普通遗传学实验中的基础实验。通过对原有实验进行改革,增加实验材料和永久片的制作,扩大了染色剂种类,引进了数码显微技术等,使制片和观察绘图的单一实验变为取材、固定、制片、观察、封片、数码照片标识和说明的综合性实验,提高了实验教学的效果。
关键词 植物细胞;减数分裂;制片;实验观察;教学改革
“植物细胞减数分裂制片和观察”是农学类专业普通遗传学实验中的基础实验。了解减数分裂各个时期染色体的行为和变化是理解减数分裂遗传学意义的关键,也是遗传学进一步学习和研究的基础。采用的传统实验流程是:以单一固定好的实验材料(如:玉米)让学生制片观察;学生手绘完成减数分裂各个时期染色体行为特征图像。这样实验的结果是:学生缺乏实验的系统性,他们只了解实验中的一种植物,仅关注植物细胞减数分裂实验过程中的某一阶段,而且对该实验的整个过程和结果缺乏全面的认识,部分学生由于没能完成高质量的制片,实验报告存在抄袭现象,离开教师无法独立完成。因此,我们对该实验进行了改革,适当延长实验时间,增加了实验材料和永久片的制作,扩大了染色剂
种类,引进了数码显微技术,变原来单一的制片、观察绘图为取材、固定、制片、观察、封片、数码照片标识和说明的实验全过程,取消学生的绘图过程,加深对减数分裂遗传学意义的理解,使实验更加系统、全面,无论是实验的深度和广度都大大提高[1,2],获得了较好的实验教学效果。
1选取有代表性的植物实验材料
减数分裂可分为3种主要类型:配子减数分裂、孢子减数分裂和合子减数分裂。高等植物的减数分裂属孢子减数分裂,又叫中间减数分裂。以往我们只是用固定好的玉米材料让学生实验,而忽略了不同类植物间减数分裂染色体图像的差异,学生对减数分裂图像认识模糊。如单子叶植物和双子叶植物减数分裂的图像:前者为平面图像,从花粉母细胞分裂开始的前期?细线期到分裂结束的四分体,染色体几乎都在一个平面上;后者为立体图像,尤其是减数分裂?,形成二分体后,立体感较强,至四分体呈等四面状。为了让学生更全面、更清楚的了解减数分裂的全过程,使他们真正掌握所学知识,我们改变原来实验材料的单一性,以单子叶植物(玉米)和双子叶植物(蚕豆)为代表,制片观察植物减数分裂。由于玉米和蚕豆取材方便,花药粗壮、染色体数目少且染色体较大,染色体特征明显,所以是学生制作和观察植物减数分裂的良好材料。
篇二:遗传学实验 减数分裂的制片与观察
实验二 减数分裂的制片与观察
PB12210261 徐导
中国科学技术大学 生命科学学院
【摘要】
本实验选取玉米雄花作为实验材料,首先将已固定好雄花的花
药剥离出来,然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观
察细胞减数分裂的全过程。
【关键词】
减数分裂 细线期 偶线期 粗线期 双线期 终变期
【Abstract】
In this experiment, we chose Zea mays as the material. We got a
lot of cells in meiosis. Then we disposed the cells in order to observe
the whole processes of the meiosis.
【Key words】
Meiosis leptonema zygonema pachynema diplonema
diakineses
【实验部分】
一、实验目的
1、了解植物生殖细胞的形成过程;
2、熟悉减数分裂各时期的特点,加深对减数分裂的认识;
3、掌握植物花粉母细胞的压片技术和方法。
二、基本原理
减数分裂(meiosis),又称成熟分裂(maturation division)是在
性母细胞成熟时,配子形成过程中所发生的一种特殊方式的有丝分裂。性母细胞(2n)连续进行两次核分裂(第一次分裂和第二次分裂),形成四个染色体数目减半的配子(n)。经过受精,雌雄配子(n)融合为合子,又恢复了体细胞染色体数目(2n)。确保了亲代与子代间染色体数目的恒定性,从而保证了物种相对的遗传稳定性。 在适当的时候采集植物的花蕾制备染色体标本就可在显微镜下观察到植物细胞的减数分裂。整个减数分裂可分为下列各个时期:
第一次分裂
前期? 减数分裂的特点之一就是前期?特别长,而且又较复杂。通常根据细胞核内结构变化特征又将这一期分成五个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。
细线期(leptotene):这是减数分裂的开始时期,染色质开始浓缩为细而长的丝状,首尾不分,且细线局部可见到念珠状颗粒,即染色粒。此时,虽然染色体已经复制为二个染色单体,但在显微镜下还看不出结构上的双重性。
偶线期(zygotene):各同源染色体开始配对(pairing),出现联会现象。2n个染色体联会为n对染色体。染色体形态与细线期差别不大。在显微镜下不易与细线期分开,但可根据染色体分散状态及粗细变化判断其是靠近细线期还是趋于偶线期。
粗线期(pachytene):二价体逐渐缩短变粗,同源染色体配对完毕,这种二价体包含了四条染色单体,又称四合体(tetrad)。此
时,非姊妹染色单体间出现交换(crossing over),造成遗传物质的重组。
双线期(diplotene):配对的同源染色体进一步缩短变粗,由于同源染色体间发生过互换,开始分离而出现交叉(chiasmata)现象。此时染色体呈现扭花状。
终变期(diakinesis):由于交叉端化(terminalization),染色体显著收缩变粗,并向核周边移动,在核内较均匀地分散,二价体往往呈X、O、V形态,核膜、核仁才开始消失。此时有利于染色体计数。
另外,玉米花粉母细胞在整个前期?都具有较明显的核仁,这是前期的一个显著标志,进入中期,核膜、核仁才开始消失。
中期? 核膜、核仁才消失,各个二价体排列在赤道面上,纺锤体形成。双价体开始分离。此时也是鉴定染色体数目和形态的最好时期。
后期? 由于纺锤丝的牵引,各个二价体分开,移向两极,每一极得到n条染色体,每一染色体含有两个染色单体。实现了染色体数减半(2n ? n)。
末期? 移到二极的染色体,解旋、松散变细,逐渐形成两个子核,核膜重新形成,胞质分裂,成为两个子细胞,称为二分体(dyad)。
中间期(interkinesis) 在第二次分裂开始之前,两个子细胞进入间期。但有的植物和大多数动物不经过间期,直接进入第二
次分裂。间期的时间短,无DNA复制,故DNA含量没有变化。
第二次分裂
前期? 染色体缩短变粗,开始清晰起来。每个染色体含有一个着丝粒和纵向排列的两条染色单体。前期快结束,染色体变得短粗、清晰可见,核膜消失。 中期? 染色体排列在赤道面上,两条染色单体开始分裂。此时细胞的染色体数为n,每一染色体有两条染色单体。
后期? 着丝点分裂为二,两条染色单体由纺锤丝分别拉向两极,每极含有n条染色体。
末期? 染色体逐渐解旋,核膜重建,核仁重新形成,同时细胞质又分为两部分,各成为两个子细胞。
这样,一个花粉母细胞经过两次连续分裂形成四个子细胞,称四分体(tetrad)或四分孢子(tetraspore)。各细胞的核里的染色体只有最初细胞染色体的一半,即从2n减数为n。
三、材料和器材
1、实验材料:
玉米雄花序(2n = 20)
2、实验仪器及用具:
显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片等。
3、药品和试剂:
Carnoy固定液(甲醇?冰醋酸 = 3?1)、醋酸洋红、45%醋酸等。
四、实验方法和步骤
1、采集玉米不同花期的雄花序用新配制的Carnoy固定液(甲醇?冰醋酸 = 3?
1)固定18—24小时,经80%和70%酒精各半小时,保存于70%酒精中备用。这样处理的材料可保存使用2—3年。
2、取经过固定的雄花序,选取长0.5cm左右的小花,用解剖针或镊子挑出花药(每一朵小花有3个花药),置于载玻片上。
3、在花药上滴一滴醋酸洋红,然后用解剖针把每个花药截成几段,尽可能挤出花药中的花粉母细胞。
4、去除花药残渣,适当涂匀玻片,盖上盖玻片,垫一张滤纸,以大拇指均匀按压,注意,不要滑动盖玻片~吸去多余染液即可镜检。若高倍镜观察颜色太深,可在酒精灯火焰上过几遍,微烫,使细胞质透明,增大反差,注意不要
拷过度~
5、显微镜下观察,寻找减数分裂各期图象,熟悉各时期特点。
五、实验结果
1.细线期
2.偶线期
4.双线期
6.减一中期
篇三:实验3 减数分裂制片技术和显微镜观察
实验3 减数分裂制片技术和显微镜观察
一、实验目的
1. 学习花粉母细胞涂抹制片技术,观察细胞减数分裂时期染色体变化规律及特征并绘图。
2.观察花蕾或花药长度与减数分裂时期的关系。减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次的细胞分裂阶段,最终分裂为染色体数目减半的四个子细胞,从而发育为雌性或雄性配子(n) 。
由于植物花药取材容易,操作和鉴定比较方便,故一般都取用花粉母细胞作为减数分裂制片材料。在生物发育的适宜时期取样、固定、涂片等程序,便可在显微镜下观察到减数分裂过程中染色体的行为变化。
三、实验材料 四、实验步骤 (一)取材 通常花蕾长度18mm(花药长度8mm)时为花粉母细胞分裂始期。花蕾约40mm(花药长 (二)制片
从小花中取出花药1~3 枚置于载玻片?滴一滴醋酸洋红溶液?用镊子按压花药?去尽肉眼可见残渣?染色2分钟?盖上盖玻片?在低倍镜下寻找花粉母细胞?高倍镜下观察各分裂相细胞染色体的特征及变化规律.
选择典型分裂相的临时片1~2张?在酒精灯火焰上缓缓烘干(不能沸腾~)?将玻片放入液氮罐,在液氮表面冷冻1分钟?取出玻片放在白纸上,手按盖玻片一边,用刀片从另一边将盖玻片揭开置于白纸上(有材料的一面朝上)?滴一滴中性树胶在载玻片上的材料处?原位盖上盖玻片?树胶凝固后镜检。 1. 取花药1枚(截)
置载玻片中央2. 加1滴染色液
3.用镊子按压,并镊除可见残渣4.放上盖玻片 (三)显微镜观察
先在低倍镜下寻找具分裂相的花粉母细胞,然后依次转换到高倍镜观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征。 区分4 类细胞:
1 形状较大,圆形,核大,着色较浅的是花粉母细胞。 2 形状较小、着色较深的是花药壁体细胞。 3 形状居中略呈扇形的是四分体的小孢子。
4 形状较大,内部透明并有明显外壳的是成熟的 花粉粒。 五、实验作业
1. 在实验课中完成制作细胞减数分裂各时期图象片子 1-2张 2. 花发育进度与染色体的动态变化关系
3.绘制细胞学片子的分裂相,并作染色体行为特征的描述。
1.1前期?细线期图象和行为特征 核内染色体呈细长线状,互相缠绕,难以辨别成双的
范文四:观察动物细胞
第三节 观察动物细胞 习题精选
1. 观察口腔上皮细胞临时装片时,我们看到细胞中染色最深的是( )
A. 细胞壁
B. 细胞膜
C. 细胞质
D. 细胞核
2. 通过观察发现,洋葱鳞片叶表皮细胞和人口腔上皮细胞相同之处有
形状都是长方形
都具有细胞壁
都有细胞核
都有细胞质
都有液泡
A. ③④ B. ①③ C. ①⑤ D. ③⑤
3. 位于植物细胞最外层的结构是——,位于动物细胞最外层的结构是—— ( )
A. 细胞壁 B. 细胞膜 C. 细胞质 D. 细胞核
4. 下列哪项不是细胞学说的主要内容 ( )
A. 动植物体都是由细胞构成的
B. 动植物体细胞都有细胞膜、细胞质和细胞核
C. 细胞是生物体结构和功能的基本单位
D. 细胞能够产生细胞
5. 下面是用显微镜观察人的口腔上皮细胞的一段叙述:
取一块清洁的载玻片,在其中央滴一滴0.7%的生理盐水。用凉开水把口漱净,取一根消过毒的牙签在口腔壁上轻轻刮几下,再把牙签放到载玻片的液滴中涂一下,然后放在显微镜下进行观察。
(1)本实验中使用生理盐水的目的是什么?为什么不用清水?
(2)制作装片前,先将口漱净的目的是 。
(3)请指出叙述中的两处错误并改正。
6. 构成我们身体的细胞是平面的,还是立体的?
参考答案:
1.D
2.A
3.A ,B
4.D
5. (1)使用生理盐水的目的是维持细胞的正常形态。人体内的细胞生活在一个液态的环境中,这种液体具有一定的浓度。0.9%的生理盐水大约相当于这个浓度,口腔上皮细胞离开人体后,需要继续保持在这样的浓度下,用生理盐水浸泡就是这个道理。如果换用清水,则浓度低于正常体内液体的浓度,口腔上皮细胞会吸水。而动物细胞的最外层是没有细胞壁的,只有一层细胞膜,口腔上皮细胞吸水的结果可能会使细胞胀破。
(2)清除口腔内的食物残渣。
(3)错误之一:应在载玻片中央滴一滴0.9%的生理盐水,0.7%的盐水不是生理盐水。错误之二:应盖上盖玻片后再在显微镜下观察。
6. 立体的
范文五:《动物细胞》说课稿
第二单元 第一章 细胞是生命活动的基本单位
第三节《动物细胞》说课稿
我说课的课题是七年级生物(上)第二单元第一章第三节《动物细胞》,下面我将从教材分析、学情分析、教法和学法、教学设计、板书设计和教学反思六个方面来对本课题进行说明。
一、教材分析
1、教材的地位和作用
本单元主要是引导学生从细胞水平来认识生物体,教学上有一定难度。而本节内容是“植物细胞”内容的自然延续,实验活动也是以
第二节中的实验知识和技能作为铺垫,相对而言难度不大。
学生在了解植物细胞的基本结构之后,自然就想了解动物细胞的基本结构。这节课主要包括制作动物细胞临时装片和动物细胞基本结构等内容,它的学习为后面生物体的结构层次的学习打下了基础,所以,学好这节课还是很重要的。
教材首先从“想一想,议一议”活动入手引进课题,后由实验活动到观察动物细胞,引导学生归纳动物细胞的基本结构,最后在比较植物和动物细胞基本结构的基础上形成“细胞是构成生物体的基本单位”这一概念。另外,教材设计了“制作动物细胞模型”活动,进一步加深动物细胞基本结构的知识。
本节课有意识地设置了实验活动同时通过以图代文,讨论思考等方式,引导学生,培养学生观察 ,分析,概括等能力。基于对教材的分析和理解,我从知识、能力、情感(德育)三方面确定了如下的教学目标。
2、教学目标
知识目标
1 进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞。
② 说明人的口腔上皮细胞的基本结构。
③ 区别动物细胞和植物细胞结构的主要不同点和相同点。 能力目标
提高学生制作以及用显微镜观察临时装片的技能。
情感态度价值观
设计实验,开发自己的创新潜能,以此来体会科学探索的思想和方法是不断发展的;通过制作临时装片,养成实事求是的科学态度。
3、重点和难点
重点:说明人的口腔上皮细胞的基本结构,比较动植物细胞的异同点;
提高实验和观察能力。
难点:制作临时装片过程中的刮取,人的口腔上皮细胞临时装片的制
作及细胞结构的观察。
二、学情分析
通过前两的节的学习,学生初步具备了使用显微镜的技能,另外,学生已经观察了植物细胞的结构并有一定的了解,故这节课采用灵活的教学方式,让学生在动手中进一步了解动物细胞的结构。但是学生的实验能力还不是很强,所以只有引导学生自己动手用显微镜观察动物细胞才能吸引学生兴趣,把握课堂的重点。
三、教法、学法:
1、教学方法:实验探究、比较法、演示法等。本节主要以学生亲自动手实践为主,并采用复习、展示导入、教师演示与辅导为辅的教学手段。
2、学生在教师的指导下运用小组合作法、观察法、理解记忆法、比较法、分析归纳法等方法来学习本课。
分析了教法和学法,下面我将具体说一下本次说课的第四部分——教学设计,这一部分我将分为八个环节。
四、课时安排及教学时间:1课时。2012年9月26日
五、教学环节
(一)温故知新,引入新课:
1、临时装片的制作步骤;2、说出植物细胞的基本结构。
(二)创设情境,讲授新课
1、想看看自己身上的细胞吗?
2、动物细胞中人的细胞与植物细胞一样吗?
引导学生联系自身,提出问题,创设学习情境,引入新课
(三)出示本节课的教学目标
(四)组织实验,合作交流
出示题目,交流:“看到题目,你有何疑问?
疑问:人的口腔上皮细胞在哪?怎样取材?引导、分析。
① 设计:根据已有的经验,设计实验方案(注意取材、方法、染色剂的变化); ② 制作:同组同学尽量选择不同的方案制作临时装片,增加对比性。
③ 观察自己制作的临时装片,然后同学间交换观察。
(五)小结归纳反思,学以致用
引导小结制作动物细胞临时装片的方法步骤,通过绘图感知动物(人)细胞的形态结构。 挂图演示不同种类的动物细胞。
比较动物细胞和植物细胞的异同点
(六)模拟制作,能力拓展
策略①:按照书中方法分组制作。
策略②:改进。利用现成的果冻,将一枚糖粒放入其中表示细胞核,果冻表示细胞质,包装果冻的塑料壳表示细胞膜。
(七)巩固练习,检测反馈
1、人体或动物体的各种细胞虽然形态不同,基本结构却是一样的,都有__________、__________和__________。
2、动物细胞与植物细胞相比较,没有__________、__________和__________结构。
3、回忆所做的《观察植物细胞》和《观察人的口腔上皮细胞》的实验。
(1)实验中用洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞制作的玻片标本叫__________。
(2)在制作洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞实验中,开始在载玻片上分别用滴管滴一滴__________和__________。
(3)《观察植物细胞》和《观察人口腔上皮细胞》的实验中染色使用的染料都是____?
(八)布置作业:
绘制动物细胞基本结构图和植物细胞基本结构图,要求标注功能。
六、板书设计
第三节 动物细胞
(一) 制作人的口腔上皮细胞的方法步骤:
擦→滴→刮→涂→盖→染→吸
(二)观察人的口腔上皮细胞临时装片
(三)动物细胞的结构(细胞膜、细胞质、细胞核)
(四)动植物细胞结构的相同点(细胞膜、细胞质、细胞核),不同点
(植物细胞有细胞壁、叶绿体、液泡)
(五)细胞是构成生物体的基本结构。
七、教学反思
教学反思
因为有了上一节课的植物细胞的实验,这一实验学生比较容易操作,但有的学生觉得在口腔里面取细胞很恶心,要教育他们科学精神。 对于口腔里面的上皮细胞,压片时并没有植物那样容易,可以老师先做好一片示范的在讲台,让学生先了解这些上皮细胞成什么形态后再自己观察,这样易于学生找到细胞,而且也不用老师逐个指导。 很多同学做实验的时候没有找到细胞,在实验过程中,老师要一直强调当看到有物体出现在视野某方,要移到中央,应该向相同的方向移动;要用左眼观察,右眼同时睁开;下降镜筒时眼睛要注视物镜,防止压碎玻片标本。
虽然有的书上写在实验中可以先染色后盖玻片,但对于这个实验来说,先盖玻片后染色成功率更高。
对于实验课,同学们比较兴奋,在组织教学时同时还要维持好纪律。
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