段_連_文
范文一：[doc] 赤霉素提取工艺的改进
赤霉素提取工艺的改进
申国医药工业杂志Ch{肿seJournaaofPhsrtnsceutlcal1992?(皇
和同藏温度下反应8h,收率分别为68.3,69
和65和,回流反而使收率下降,这可能是相
转移催化剂在温度高时较易分解.
试验结果表明,以固体氢氧化钾一碳酸钾
为碱,溴化四丁铵为相转移催化剂,于室温反
应10h为合成1的较佳条件.
实验部分
在装有冷凝管,机械搅拌器和温度计的
衢Oml四顼瓶中加入粉状氢氧化钾6.6g
(0.12moo,碳酸钾14g(O.1mo1),溴化四丁
铰4.8g(o.015mo1),四氢呋哺60ml,搅拌
下于30.c滴加已内酰胺11.3g(O.1mo1),
溴代十二烷27.5g(O.11moo及四氢呋喃
60m1的混合液,2h滴毕,继续反应10h,过
滤后回收四氢呋喃得油状物,加入甲苯100
m1,用水洗2次,饱和氯化钠溶液洗1次,以
无水硫酸镁干燥,回收甲苯,减压蒸馏,收集
195~200?/o.53kPa馏分[文献l55,
160.c/o.013kPa]得20.8g,收率丁4.1两.
参考文献
[1]StoughtonRBetal:DrugDevelopIndPh~rm
1988,g.”P25
,2]USl982.4310525;(cA1982.%:149181z)
[3]中国幸利ll?086
【4]PMecekJetal:zChem197ll:260
【5]E盯PatAppl0舯96:(CA1984.I?:103200e)
【’]TakahataHetal:I-Ieteroeyele~曲钟.位:1”‘
SVNTHESIS0FLAUR0CAPRAM
CENJun?Da.GENGGuo-Wu
(ShanghaiInstituteo/肼rm口ft”1ndus~y.Shanghai20043n
ABSTRACTLaurocapramwassynthesizedunderphase?transfercatalysisi
n
thepresenceofpotassiumhydroxideandpotassiumcarbonate.theyieldwas
々4%atoptimumcondition.
KeyWordsphasetransfercatalysis.1aurocapram,syntheMs
[1991年2月26日收稿]
?叛一赤霉素提取工艺的改进
摘要应用大孔吸附树脂法提取赤霉索的改进工艺能有效地去除杂
质,节约能源,五批实验平均收率
.
9%.此法尤其适用于周体凝酵法生产赤霉素.
关键词赤霉素提取树脂吸附
?.’,
赤霉索(九二0)是一种农用植物生长激
素.,多年来,主要采用深层发酵法生产.我
们参照树脂法提取抗生素的特点,通过多次
实验,摸索出一条适合于固体发酵工业生产
中国医药工业杂志Chinese]’our~,alo{P1la塑【)硌
赤霉素的提取新工艺.
一
,实验方法及工艺流程
1.工艺流程:
固体曲』墅兰!滤液酸化至pH.5,3
过滤
脂吸附九二o固体曲浸泡液的结果,其中
以HJ型树脂的吸附能力较强,适用于实际
生产.
0
表l几种大孔树脂吸附”九---0
的结果比较
墅蓄
浓液至笔墨取萃职液—;襞
斌压敢缩结晶j塑塑?Sz.T.O成品
—
母液———璺?九=o乳剂
2.效价测定:采用930型荧光分光光
度计.
二,大孔吸附树脂的选择
以静态法实验,比较了应用几种大孔树
D3?0
50
125
蚰O
463
6433
三,实验结果
1.采用多次水浸泡处理固体曲,能够较
壳分地使其中的九二o组分转入水相.
2.丑_J型吸附树脂应用于赤霉素提取,
表2赤霉素提取过程中浸泡,吸附解吸,萃取浓缩各步收率
.九二o总台量(g)收率()
实验序号
匠体曲浸泡液吸附液解噼液草取浓缩液最泡吸附解暇萃取浓缩
1290蛳.1(1636)25.9j5.2(1256421490O968i8
2246站”1376)22.822.2(11801)18i95.19i8829
323.7223(1350)21.921.2(984117094195.08i.6
417.216.3(102015.5?.O(I2~2~B)12894892185.1
621.62O.i(1loo)19.719.3(99OfI6494924685.O
{括号内为披价(g/m1)值.浸泡液总体积1BO,l8.6L,解嗳液体积
l2i,215
能有效地从滤液中吸附有效成分,且易于洗
脱,高峰集中.
3.通过两次萃取操作,可进一步去除杂
质,提高产品质量,使九二o结晶色泽白,
效价高.
自浓缩结晶液分离结晶成品,母液用于
配制”九二o”乳剂,这一过程几乎没有损失,
九二o成品结晶与乳剂的收得率比例以及
总收率情况如表3所示.
四,讨论
1.采用树脂法提取,解吸液体积大幅度
减少,能有效地除去杂质,与原工艺直接浓缩
法相比节哟了大量的能源.
2.水相,溶媒相的萃取与反萃取操作能
除去树脂洗脱渡中的大部分杂质,也是决定
表3”九二O成品及实验收率的比较
1成品九=0乳卉5总收率实
验号需广i再j.{{_—Ic,(g)(/mg)()j(g)(),徊
1”.9l93044.5l8.629.373.s
革职浓缩液中九二0总含量见表2.
‘九二o”质量与收率的重要因素之一.
3.本方法5批实验平均收率74.9茹,若
考虑取样等因素,收率可以进一步提高,因此
是一个比较理想的提取工艺.
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IMPR0VEDPROCESSF0R
EXTRACTION0FGIBBERELLIN
HUANGGuang—Htm,JIANGXiu-Zhuo,HEChang-Yu
(Fu*~ouAntibioticFactory.Fu~ian~50002)
ABSTRACTAnimprovedprocessforextractionofg~bereIILausingthe
macroporousresinadsorptionisrep0rtedItisespeciallysuitableforthe
~bberellinproductionofsoHdstatefermentation
K町Wordsgibberellin,extration,resinadsorption
[19虹年T月19葛收稿]
胆绿素经硼氢化钠还原制备胆红素
PREPARAT10N0F口?-璃UB?FR0?B?.r船DINBY
S0DIUMB0R0HYDR玎)EREDUCT10N
周广礼朱长义张丰雪
(泰山医学院生化教斫室,’擞生物教研室;山东271000)
ZHOUGuang-Li,ZHUChang-Yi,ZHANGFeng-Xue
(Taishan2”L#edi~aIColl~ge.5handong271000)
鸡,鸭,鹅等家禽的衰老红细胞释放的血
缸蛋白,被单核一巨噬细胞系统降解时,因缺
乏胆绿素还原酶,只降解到胆绿素阶段.未
加利用而被废弃.而胆红索则是贵重的中药
原科.为此,我们用强还原则剂硼氢化钠和
鸡胆汁反应,将其中的胆绿索还原为疆红素,
I盎后用钙盐法提取.提取后的母液还可用来
铜备鹅脱氧胆酸及胆酸.这一方法为胆红素
开辟了新的来源.
实验部分
取一定体积的鸡胆汁加热查沸,吸去浮
在表面的油脂和泡沫,冷却至3o?左右,在
搅拌下满加3为NaBH溶液(每1L鸡胆汁
约需1.O,2.0g),立即发生剧烈反应,产生
大量气泡,胆汁则由碧绿色逐渐变成暗绿色,
褐色,以至棕褐色,放置2h以上,气泡消失,
颜色与猪,牛胆汁近似.这时再加NaBH则
不再产生气泡迈明反应完全.
取上述经还原的鸡胆汁,按体积比11,
加入新鲜石灰乳(约Be1.2),加热煮沸lO,
玷rain,吸去表面的泡沫,离心,获褐色或暗
黄色胆红素钙盐.取钙盐用适量蒸馏水(或
回收的’醋酸)调成糊状,再加少许固体
NaHSOa,搅拌使其溶解,在搅拌下迅速加入
冰醋酸酸化,反应物则逐渐由褐色变成棕红
色.所用醋酸的总浓度应在60为以上,酸化
才船完全搅拌/0m~u,避光静置Ih,离心,
除去酸水,用蒸馏水洗涤沉淀至近中性,离
心得沉淀,为胆红素粗品.再分别用甲醇,
石i豳醚洗涤沉淀,除去胆酸和脱脂,真空干
范文二：从赤霉素混合物中分段提取赤霉素a4和a7的方法
专利名称从赤霉素混合物中分段提取赤霉素a4和a7的方法
技术领域本发明涉及赤霉素各成份的分离提取工艺，特别是从微生物发酵的赤霉素过滤液中分段提取赤霉素A4和A7(GA4、GA7)的工艺。
目前已从自然界中发现82种赤霉素，按顺序排列为GA1、GA2、GA3……GA82，还有十多种组合型。这些赤霉素主要来自微生物和植物。目前活性最高的赤霉素这种类都可从微生物中发现，如GA3、GA4、GA7等等。微生物还具有生长迅速、制备容易、产量高等优点，所以商业赤霉素都来自微生物发酵所获得产品。微生物中几乎都以藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)作为生产菌。该菌的多数菌株都产生多种赤霉素，例如GA3、GA4、GA7、GA9、GA13等。GA3是最早开发应用的一种赤霉素，它对植物茎叶生长的促进作用活性最强。GA4、GA7对植物果实细胞伸长的促进作用最为明显，目前最主要的例子是用于使苹果果实增高，称之谓“高庄苹果”或“蛇果”的生产。这种“高庄苹果”由于形状美观，颜色鲜艳而深受消费者欢迎，售价高出普通苹果数倍至数十倍。赤霉素A4、A7的商品通常是两者的混合物，即GA4+7产品中不能混有GA3，否则就会在增高果实的同时引起枝叶的徒长而带来落花落果弊病。另一方面，GA7和GA4虽有相同的方面，但也有不同的作用，比如GA7有抑制花芽分化的现象，而GA4没有;在引起植物单性结实的效果方面，GA4大于GA7;此外，还有其它方面的不同作用。为了用户的不同需要，GA4与GA7的分离也势在必行。
GA4+7的分离提取工艺，据目前所知，有两个专利，一是82年的日本专利59106478，二是64年英国专利1174924。前者的工艺要点是先经一般的赤霉素萃取，蒸出大部分乙酸乙脂，加入正丙酮，再加N-苄基甲胺得GA4+7N-苄基甲胺盐沉淀，分出不发生沉淀的GA3。GA4+7胺盐用甲醇水溶解，加酸加水使GA4+7结晶析出。后一工艺是在发酵滤液中调pH4.2-5.5，乙酸乙脂萃取得GA4+7，然后脱色浓缩，再在乙酸乙脂、2乙脂醚中结晶，萃取过GA4+7的滤液再调pH2，乙酸乙脂萃取，脱色浓缩得GA3结晶。
日本工艺需使用N-苄基甲胺、正丙醇、草酸等价格较高的化合物。其缺点是工序多，不能分离GA4和GA7。英国工艺的缺点是只分出GA4+7，GA4与GA7也同样不能分离，纯度不够时需反复多次萃取，较繁杂。
本发明的目的是提供一种从微生物发酵液的赤霉素混合物中分离提取赤霉素A4和A7(GA4、GA7)的生产方法。
本发明的工艺是先将赤霉素发酵液在pH7.0-6.8的条件下浓缩20-30倍，调pH6.0，使GA4沉淀，分离的滤液调pH4.5，使GA7沉淀，再次分离出的滤液调pH2.2，用乙酸乙脂萃取GA3。按这一工艺的特点称为分段提取法。由于赤霉素发酵滤液浓缩倍数高，每段提取过程使用乙酸乙脂很少。纯度不够时，只需用缓冲液清洗每一段的提取液，而不使用反复萃取的方法。
本发明每段分离提取的详细工艺过程为赤霉素发酵液必须清彻透亮，压滤或离心。得到的滤液经薄膜浓缩器减压浓缩，使其浓缩到原体积的1/20-1/30。开启搅拌，缓慢加入HCl或H3PO4，使pH达到6.0，即出现白色至灰白片状沉淀。分出的沉淀用pH6.0缓冲液洗一次。沉淀用乙酸乙脂溶解，经高效液相色谱检测，如还有少量GA3，GA7，可用pH6缓冲液清洗，清洗合格后，加热有机相至60℃并加入活性炭，不断搅拌以便充分脱色，通过过滤除去炭，过滤液减压回收乙酸乙脂得GA4结晶。
沉淀过GA4后的滤液和清洗液，经浓缩或不浓缩再用HCl或H3PO4调pH4.5，使其GA7沉淀。得到的沉淀按上述GA4的操作步骤进行清洗，用pH4缓冲液和pH6的缓冲液清洗，以便分别洗去GA3和GA4的残余，直至检测合格为止，然后浓缩获得GA7结晶。
沉淀过GA4和GA7的滤液和清洗液，经浓缩或不浓缩，调pH2.2，加乙酸乙脂萃取，然后脱色浓缩得GA3结晶。
本发明的生产工艺与以前的专利工艺相比，具有下列优点和积极效果1、由于发酵滤液先经浓缩，溶液中赤霉素浓度加大。根据GA3、GA7、GA4在不同pH值时的分配系数Kd(水相中的溶质重/有机相中的溶质重)，当pH6时，GA3的kd＝50，不出现沉淀，GA7的kd＝0.61，GA4的kd＝0.09，此时GA4kd为GA7的1/6，GA4首先沉淀，特别在GA7的含量小于GA4时。pH4.5时，GA7的kd＝0.27，GA3的kd＝1.37，GA3在水中的溶解度大于GA7五倍，于是出现GA7的沉淀。
2、清除GA4中混入的GA7和GA3以及清除GA7中混入的GA4和GA3，均用缓冲液清洗，而不是采用反复萃取的方法，极大的简化了工艺。
3、发酵滤液浓缩萃取，只消耗少量乙酸乙脂，清洗代替反复萃取，不用乙酸乙脂。与N-苄甲胺法相比省去的有机溶剂更多，从而降低了生产成本。
4、比以前工艺更具特色的是，可以将大部分的GA4和GA7分离，这是以前工艺所没有的。
附图说明
图1从微生物发酵液中分段提取GA4、GA7工艺流程图下面用实施例进一步叙述本发明实施例1藤仓赤霉菌农大17菌株(任何能产GA4、GA7的菌株都可代替)发酵液60l，过滤得滤液54l，内含GA312.49lg，GA713.016g，GA421.199g，其它赤霉素(主要为GA9)7.293g，薄膜浓缩后得浓缩液2.5l，搅拌下缓慢滴加2N HCl，不断出现白色片状沉淀，达到pH6.0后，继续搅拌30分钟，然后静置30分钟，使沉淀充分聚集。分出的沉淀加0.5lpH6.0缓冲液，搅拌10分钟，静置30分钟，抽出上清液。清洗过的沉淀，加乙酸乙脂1l，加热至60℃并加活性炭30g搅拌脱色30分钟，趁热过滤，滤渣用少量热乙酸乙脂洗涤，高效液相色谱(HPLC)检测，GA7已属微量(
将沉淀过GA4的浓缩液2.5l和清洗液0.5l浓缩至1.5l，搅拌下，缓慢滴入2N HCl调pH4.5，沉淀GA7。上清液吸去，0.5lpH4.5缓冲液清洗沉淀，700ml乙酸乙脂溶解沉淀，加20g活性炭脱色，除滤渣后，过滤液用pH4.5缓冲液洗5次(0.5l/次)，用pH6.0缓冲液洗二次(0.5l/次)，用HPLC检测合格。两种清洗液分别处理。过滤液回收乙酸乙脂后得GA7结晶4.3克，母液65ml(含GA75.6%)。
将pH4.5缓冲液洗出的清洗液浓缩至0.4l，加入沉淀过GA7的浓缩液1.5l，继续浓缩至1.0l，2NHCl调pH2.2，加乙酸乙脂萃取，浓缩回收GA3结晶3.8克(GA3含量70%，其它赤霉素16%)，母液60ml(GA34.5%)。萃余液弃去。
以上得到的GA4、GA7、GA3结晶，如有更高纯度要求，可以按常规进行重结晶。
实施例2发酵浓缩滤液2.1l(浓缩25.7倍)，含GA312.460g，GA714.105g，GA422.418g.GA4的分离和实施例1操作相同，当沉淀溶解脱色过滤后，发现GA7达3.2%，于是用pH6.0缓冲液1l进行清洗后才达合格，最后得GA4结晶9.7克母液90ml(含GA47.2%)。
以上萃余液，清洗液一并浓缩至1.5l，沉淀操作同实施例1，用pH4.5缓冲液洗5次(0.5l/次)后，即行浓缩得结晶4.9克，其中GA4占13%，得母液70ml(GA74.7%，GA41.8%)。
GA3回收同实施例1。
实施例3发酵浓缩滤液3.2l(浓缩30倍)，用2NHCl调pH2.2，按实施例1中GA3回收的方法，进行萃取浓缩，回收乙酸乙脂，得混合结晶19.2克，母液280ml。
结晶用pH8缓冲液溶解，19.2克溶于1000ml缓冲液，然后按实施例1的操作，分离GA4、GA7和GA3，分别得GA49.5g，GA74.7g和GA34.3克。
母液也和结晶一样萃取，得GA4母液100ml(含量5.9%)，GA780ml(含量5.3%)，GA360ml(含量4.5%)。
权利要求
1.一种从赤霉素发酵液中提取赤霉素A4、A7的方法，其特征在于(1)、先将赤霉素发酵液在pH7.0-6.8条件下浓缩20-30倍，调pH6.0，使GA4沉淀，分离滤液；(2)、将上述分离的滤液，调pH4.5，使GA7沉淀，再次分离出滤液；(3)、将上述再次分离出的滤液，调pH2.2，用乙酸乙脂萃取GA3。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于GA4的提取方法是，赤霉素发酵液必须清彻透亮，压滤或离心，得到的滤液经薄膜浓缩器减压浓缩，使其浓缩到原体积的1/20-1/30，开启搅拌，缓慢加入HCl或H3PO4，使pH达到6.0时，即出现白色至灰白片状沉淀，分出的沉淀用pH6.0缓冲液洗一次，沉淀用乙酸乙脂溶解，经高效液相色谱检测，如还有少量GA3，GA7，可用pH6缓冲液清洗，清洗合格后，加热有机相至60℃并加入活性炭，不断搅拌以便充分脱色，通过过滤除去炭，过滤液减压回收乙酸乙脂得GA4结晶。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于沉淀过GA4后滤液和清洗液，经浓缩或不浓缩，再用HCl或H3PO4调pH4.5，使其GA7沉淀;得到的沉淀按GA4的操作步骤进行清洗，用pH4.5缓冲液和pH6的缓冲液清洗，以便分别洗去GA3和GA4的残余，直至检测合格为止，从而获得GA7结晶。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于沉淀过GA4和GA7的滤液和清洗液，经浓缩或不浓缩，调pH2.2，加乙酸乙脂萃取，然后脱色浓缩得GA3结晶。
全文摘要
一种从赤霉素发酵液中提取赤霉素A
文档编号C07D307/93GK1111286SQ95102240
公开日1995年11月8日 申请日期1995年3月16日 优先权日1995年3月16日
发明者颜方贵 申请人:北京农业大学
范文三：【doc】吸附法提取赤霉素工艺研究
吸附法提取赤霉素工艺研究
石蜡油加橡胶塞的方法保藏最好,其它两种方 法次之,继代保藏较差.用常温石蜡油加橡胶 塞的方法,尿嘧啶核苷含量高于保藏前(cK), 腺嘌呤棱蕾含量与保藏前相同.这很可能是由 于1984年和1988年两次培养条件不完全相同 而导致有效成分含量的变.所以CK值只起 参考作用,但至少可以说明用石蜡油加橡胶塞 的方法,在保藏前后菌株特性变化不大. 讨论
药用真菌生产菌种的保藏问题,多年来一 直被认为是药麒菌研究的薄弱环节之一,薄 盖灵芝也是如此.常规的继代保藏,保藏时间 短,菌种变异退化大.目前采用的超低温液氮 保藏法虽然在很大程度上解决了保藏时间及菌 种变异退化问腼,但设备晶贵,费用太高,广泛 应用有一定困难.本试验用的常温下石蜡油加 橡胶塞的方法,可以较为圆满地解决了上述问 题.我们认为,薄盖灵芝生产菌种采用液体石 蜡油加橡胶塞封口在常温下保藏,是简便可靠 的.
I.刘耕陶等
2.余竟光等
3.李钟庄等
4.王宦民等
;.刘凤春等
6.陈燕噼等
7.杨云鸱等
8.章观蓥等
参考文献
中华医学杂悉,In:607,1977. 药学,14(6):374,I979.
徽生物,2t(1):4;,19B1.
馥生物学通报,8():294,198}, 镦生物学通报,5(?):35,197B. 真菌,6(2):110,I987
药学,84(7):484,i97g.
茹用真菪,l:jj,i985.
吸附法提取赤霉素工艺研究
严希康
(上海华束化工学院生化工程研究所)
摘要舟绍一种用大网格聚台物吸附剂发酵液中分离,提取赤霉素的新工艺.通过树
脂筛选,
定向台成,到动态吸附容量测定.吸附,解吸和结晶条伴等的研究,最后台成了一种
对赤霉紊动态吸附
容量较高(选4I.1mg/ml湿吸附剂),与国外AmberllteXAD一4相当的吸附剂GD
一46.该暖咐剂
在最佳条件下对赤霉素结晶收率可达55—57%,总收率达80%,比原萃职工艺提高
10%o井总结了一
条在生产上可行,技术上先进的工艺浇程,供工厂企业选用. 关键词赤霉素;大网格吸附剂;吸附技术
从赤霉素培养发酵液中提取赤霉素,一般
用有机溶媒萃取法,但它需要庞大的浓缩设 备和超速离心机等分离设备,而且能耗和溶媒 损耗大,劳动保护差,故有人研究采用活性炭吸 附法.活性炭吸附法由于洗脱不易或操怍过繁
不适合于大生产,但其优点为设备要求简单',生 产过程中pH变化小,适用于稳定性较差的活 性物质的提取.
由于大网格聚合物吸附剂的合成成功, 以及它与活性炭等天然吸附剂相比,具有选择 性好,解吸容易,机械强度好,可反复使用和流 体阻力较小等特点,故70年代开始国外研究甩 它来分离赤霉素..到目前为止,还未能找到 有关工业性生产的报道,仅从有关专利中看到 使用Amberlhe-XAD和XAD一4吸附赤霉素 的报道.
我国在这方面的研究工作始于7O年代中, 于1984年12月通过了吸附赤霉素专用GD一46 太网格吸附剂的研制和用大网格吸附剂提取 赤霉素工艺研究小试两项鉴定.新工艺具有工 谈项研究于I98}年I2月通过鉴定.
序短,设备简单,节能多,经济效益大,收率哥等 特点.
材料与方法
1.药品:苯乙烯,二乙烯苯及致孔剂等树 脂合成原料均为CP级;赤霉素成品及发酵液; 醇,酮等有机溶剂CP级;硫酸CP级. 2.实验仪器及装置:吸附剂合成装置,脂 肪抽提器吸附柱,高位槽,真空吸滤装置等. 3.试验方法:?树脂合成:悬浮聚合法, ?静态吸附:三角烧瓶振荡平衡法,@动态 吸附:即管子试验.
4.分析方法:?树脂性能测定:表面孔径
测定仪,汞孔度计,扫描电镜.@赤霉素浓度分 析:930费光仪.
结果与讨论
1大网格吸附剂的筛选:采用大网格吸附 剂提取赤霉素,首先要选择一种吸附容量高,分 离效果好,机械强度大的吸附剂.利用现有的 国内外吸附剂进行筛选,根据生产上发酵液的 一
般浓度约为1500u/ml左右,用赤霉素纯品 配制溶液,进行试验,结果见表1.
由表1可见,AmberliteXAD-4吸附剂
(此表面为784m/g,孔径为50五,非极性聚苯 乙烯树脂)对赤霉素的吸附能力相比之下最大, HP-20次之,XAD-7此表面虽较XAD一2大 150mZ/g,但二者的吸附容量相差不大,这可能 衰l不同大嘲格嗫坩剂对奢霉素碾附軎量的比较(?态) 吸附装量(g)赤霉素溶液浓度赤霉素溶液体积吸附容量mg/g吸附剂来源设附荆名
稚或型号
(m1)抽干湿吸附剂抽干湿吸驸i}4(u,m1) XAD一25l44010D22.}美国
XAD-451440l0Dj1.}美国
XAD-75144010D23.,美国
HP-2D5l44010D29.9日土
CADr4c5144010n2j.6国产
D65144010026.2国产
由于XAD-7是中等极性的吸附剂,其骨架为 甲基丙烯酸甲酯,而赤霉素是一弱极性化合物 <其母体为芳香族化合物),所以XAD一7的吸附 性能不如XAD一4.而在相同非极性吸附剂中,
如XAD一4,HP一20,XAD-2,则比表面大的 其吸附量也高.
同样从所筛选的国产树脂来看,其吸附容 量都较低,为了解决优质吸附剂的国产化问题, 我们进行了合成吸附剂的工作.
2大网格吸附剂的合成:按照上述提出的 合成方向:控制孔径一定的范围下,尽量增加 树脂的比表面积,所合成的吸附剂对赤霉素的 圾附容量即可提高.我们用苯乙烯,二乙烯苯 对单体,在致孔剂存在下,通过悬浮聚合的方 祛,制成球状共聚物.从数十种吸附剂中筛 选到其吸附容量与XAD一4相当而选择性比 XAD一4好的GD一46大网格吸附剂,其物理与 牝学性能见表2.
衰2GD一躺吸附耕理他性能一置衰
外观白色翟润球形树脂
含水量(%)6D
表面积(mg)
平均孔径(A)
显真密度I02
L体积(ml/g)0.6247
I盘度范围(mm)D40一O.80
堆积密度(mI/g)
对赤霉素的静态吸附容量mglg湿树脂j1.1 3.动态吸附容量测定:由于吸附剂在实际 使用时往往在固定床中动态进行,所以动态吸 附容量更有意义.为此我们测定了GD一46和 XAD一4两种吸附剂的动态交换容量,其结果见 表3.
从表3中可以看出GD一46对赤霉素的动 态吸附容量较大,可达41.1mg/ml湿吸附剂, 与国外XAD一4吸附剂相近.但从洗脱的流出 液看,XAD一4的流出液中色泽较深,高单位洗
脱液色泽较浅并且高单位流出液中能有少量结 晶析出,可见选择性稍好.因此我们选定GD一46 大网格吸附剂作为赤霉素提取新工艺的吸附 帮l.
衰3嚷附剂GD一45和XAD.4对赤霉素动态嚷甜窨量 吸附剂型号吸附客量(mg/m1)洗脱率(%) GD一4641.198.4
X^D一443.298.6
注动态试验条件:柱径2Omm,寐甚高
240ram,树脂薮量l00山I,空间流速SV,滤 蔽效竹1400u/mla
4吸附条件的确定:固体在溶液中的吸附 比较复杂,影响的因素也较多,主要有吸附剂, 吸附物和溶剂的性质以及吸附过程的操作条件 等.在吸附剂GD一46和吸附物赤霉素确定以 后,主要影响因素是吸附过程的操作条件.为 此进行了吸附条件的选择:
(i)吸附柱填充层径高比的确定:一般来 讲床高一些对吸附有利,但床层过高压力降增 大,参照活性炭处理过程中的一般设计经验数 据(直径1—2m,床高6—8m),在试验过程 中选用径高比为1:3—4.
(2)溶液的pH对吸附剂吸附赤霉素的影 响:被吸附物质在离解作用的介质内被吸附量
必然下降.赤霉素为一弱酸性物质,pH值为 3:8,所以应采用酸性条件下吸附才有利,结果 见表4.
衰'溶液中pH值对赤?寨嚷附窖量的影响 吸附帮装置吸附容量赤霉紊离解宦客液pH擅 (m1,(mg/m1)
2520.9O.Ot56
?52D.20.613l
650t0.O0.9994
注:吸附荆华药30,吸附柱径z15ram,吸附柱高 h;280ram,空间赢速s=I./20,赤霉素泼窿为 1440u/ml
由表4可见pH4以下较好,这与理论分 析相符.
(3)慌速对吸附剂吸附赤霉素的影响:由 于大网格吸附剂对溶液中赤霉素分子的吸附是 衰5瀛遵对嚷附摘嚷附赤霉素的影响 1/2030.O
1,2秘.2
1/3039.1
注:警孽;i.mm,原液教价为.m'柱高
一
种物理分配,所以其吸附速度一般比较快,实 验结果见表5.
由表5可见,吸附速度以空间流速1/25为 佳,SV一1/25与1t3o时对赤霉素吸附容量 相差不多,而SV为1/30时生产周期将延长, 所以采取1/25为宜.
5.洗脱
(1)溶剂的选择:由于大网格吸附剂对有 机物的吸附是分子吸附,而且其吸附能一般低 于括性炭,所以洗脱比较容易.最常用的是以 低级醇酮或其水溶液洗脱,所选用的溶剂应符 合两种要求:一种要求为溶剂应能使大网格聚 合物吸附剂溶胀,这样可减弱溶质与吸附剂之 间的吸附力,另一种要求所选用的溶剂应容易 溶解吸附物,因为洗脱时不仅须克服吸附力, 而且当溶剂分子扩散到吸附中心后,应能使溶 质很快溶解.
溶剂对聚合物的溶胀能力可用溶解度参数 或内聚能密度CED来表征,它们的定义如 下:
旺.一一筹Vf市聃早佐糨)
热力学分析表明,当溶剂的溶解度参数和 聚合物的溶解度参数接近时,溶剂愈易溶胀聚 台物.聚苯乙烯聚合物的溶解度参数接近9, 根据这样的原则来进行洗脱剂的选择,所选得 的溶剂其溶解度参数等于9,洗脱过程中树脂 的膨张率可达34.6为.同时此溶剂对赤霉素 溶解度也较大,每ml溶剂可溶解32rag赤霉 素,洗脱率可达96—98%之间.
(2)洗脱速度的选择:按照大踊格吸附 提取抗生素时洗脱的一般速度为
SV—=1/150—1/25o
之间.经试验,发现三种不同流速对解吸收率 井无影响.但速度快如1/150,溶剂的耗量要 大,洗脱高峰低;洗脱速度慢如1/250,由于赤
霉素洗脱浓度高,会在柱中析出堵塞管路,所以 采用SV一1/200为宜.综合上述吸附和洗脱 的最佳条件进行试验,从数据计算得到:GD一 46吸附剂对赤霉素的吸附容量为39.5mg/ml 湿吸附剂,其洗脱率为96.4%.
6.结晶条件的摸索:由于所选择的洗脱剂
对赤霉素的溶解度较大,因此赤霉素比较容易 地从吸附剂上洗脱下来,单位集中,浓度高,一
部分可直接结晶出来,一次结晶收率达2O%左右.对于从高单位洗脱液中分离掉赤霉素结晶 之母液,其单位仍很高,通过蒸发浓缩可第二次 获得晶体,其各步收率见表6,低单位洗脱液可 以套用.
根据上述研究结果,可得到如下一条提取
衰6动杏下~D-46型嚷附新对齐霉素吸附,漶脱,鳍?牧车 i赤霉紊
1一
番步名称lI1II
1mg%lmg1%
柱中吸附量1~.1401100l102]100 洗脱量(包括结晶量)』3974i6?0J4923J96-5 一
次结晶重(干重折合为她品)lB63l20.81.65l20.9
二次结晶总量(干重折合为纯品)l2570I57.22833:55?5
工艺路线,此工艺在生产上是可行的,技术上是 先进的,它能提高生产能力,降低成本,具有较 高的经济效益,同时吸附剂可自己合成,性能稳 定.工艺流程图示如下:
赤霉素发酵液
i丽处理i胃节pH至酸性范日
橙清淖{茛
lGD一?6吸附桶圾耐
为赤霉素饱和之吸附荆
l溶剂洗一l
高单
—
脱一
1—上丁结晶母棱
i'纯品'——一结晶残液————做乳荆或回收 由以上流程图可见,吸附法工序短,设备简 单,不需用高速离心机和庞大的薄膜浓缩设备, 故比萃取法节电节能,溶媒消耗量也少.相反,收 率吸附法比萃取法高1O西,经济效益比萃取法 高,同时操作安全,劳动强度小.吸附法为固定 床操作,放大比较简单,主要是径高比例问题, 因此本研究实用性很强.由于投资费用比萃取 祛少得多,所以对新投产的企业容易上马,唯吸 驸过程周期比莘取法稍长,需倒三班,如采用自 动控制也可解决以上问题,所以该工艺的推广 和实施前景是很宽广的.
?考文棘
I.北京农业大学赤霉素厂编:赤霉素昀应甩和生产,化学工 业出版社,北京,l970年.
2.钱雇宝等:工业散生物,':l3,l982o 3.野崎正士:QrganoHi—I1e5-l9(338.1970-
4.C~ech:PstI52gS0.L974. 5.严希康等:华东化工学院,l;(?):46l,L98 f上接第182页)
3.oweDRJe,JJ,;InChemicalmethodainb?c'.—l】?,Shirlia~EB".】,;』-J."Bs~lttloL,l3I3一
'y=tematic=,Goodfellow.^1.eta1.(ed1.).Academic340.1966. Press.Londoa.pp.67一'3.1995.,.恩惠玲:徽生物,18;IM~L$9,197.-
范文四：赤霉素
创新课题实验报告
课题：啤酒原料麦芽中的赤霉素的研究
指导老师：李永仙
组员：孟昭文 李航 王润东
一．赤霉素性质研究现状
1.1 赤霉素的理化性质
赤霉素GA 3（Gibberellic acid）
化学名：2，4a ，7-三羟基-1-甲基-8-亚甲基-赤霉-3-烯-1，10羧酸-14内酯， 分子式：C 19H 22O 6，
分子量：346.38
又称赤霉酸。其结构内含有3个环，一个内酯环，八个手性碳，羟基，三个双键和一个羧基。是真菌恶苗病菌所产生的刺激植物生长抗生素。
结构式如下：
赤霉素GA 3工业品为白色结晶粉末，含量在85%以上，熔点233-235℃。由于赤霉素GA 3官能团的特殊排列方式以及几个易变化部位的相互牵制，使得它在很温和的条件下就有发生重排列或异构化的可能。但是，它的结构在常温避光条件下是稳定和易保藏的。赤霉素GA 3易溶于醇类（比如甲醇、乙醇）、丙酮、醋酸乙酯等、乙酸乙酯有机溶剂和pH6.2的磷酸缓冲液中。微溶于水、醚中，不溶于石油醚、苯、氯仿等溶剂中。在温度低的酸性条件下，比较稳定。遇碱中和失去生理效用。其溶液在pH3-4下最稳定。在中性或微碱性条件下，稳定性下降。高温能明显加速其分解，因此赤霉素GA 3不能以水溶液形式在室温下长期保存。
1.2赤霉素GA 3检测方法与残留限量
目前关于赤霉素研究最多的是机理与应用上，对赤霉素的安全性分析和检测方法国内外报道的不多。主要方法有绵联免疫检测法，高效液相色谱法、薄层层析法、分光光度测定法。美国、日本等国规定水果、蔬菜中赤霉素最高残留限量为0.2mg/kg，而我国还没有相关限量标准。
目前检测赤霉素含量方法有以下几种，而麦芽中赤霉素含量检测尚无先例：
黄少白（1）用碳二亚胺（EDC ）法将赤霉素A （GA4）与卵清蛋白（OVA ）连接，形成GA4-OVA 复合物用于包板，利用GA4-ME 与GA4-OVA 对兔抗GA4-PAbs 竞争结合反应，建立了GA1,3,4,7, 间接酶联免疫检测法（ELISA0。其灵敏度、检测范围和最小检测样品量分别为45pg ，0.2-200ng 和50-500mg ，样品的平均回收率为97%，批内和批间的变异系数分别为4.2%和
4.8%。
吴硕如（2）GA4-BSA 结合物诱导制得兔抗，采用放射免疫测定法检测赤霉素，与GA1，GA3,GA7有较高的交叉反应率，而与GA5、GA9与GA20的交叉反应率甚小，检测范围25-800pg/50ul之间。
李进（3）采用竞争ELISA 检测赤霉酸，在1ug/ml to150ug/ml范围内有较好的线性关系，回归方式为:y=0.44+15.59,相关系数为0.99，与HPLC 比较有较好的一致性。
湛社霞（4）建立固相萃取-高效液相色谱法测定水果中赤霉素的含量。水果样品经50%甲醇-水提取后，用HLB 萃取，以甲醇+水（3+1）洗脱，洗脱液经C18柱分离、二极管阵列检测器检测，用高效液相色谱仪测定。赤霉素回归方程为I=13358.46*C+1.69，相关系数r>0.9999，相对标准偏差<5%，加标回收率可达90%以上，以信噪比为3时，赤霉素的最低检测出限为0.11ug>
陈小鹏（5）采用高效液相色谱测定黄瓜瓜条中赤霉素，试材用液氮研磨以100%冷乙腈浸提，浸提液抽虑，氯仿去除色素，PVP 去除酚类杂质，乙酸乙酯提取激素，最后过PT-C18柱上进行分离，紫外检测器在252nm 波长下检测、鉴定，GA3的检测线为0.242ugFW ，回收率为80.2%。
周艳明（6）建立水果中赤霉素残留量的高效液相色谱检测方法，样品采用80%的甲醇提取，经液液萃取净化，以紫外检测器检测。添加回收率为82.8%-100.6%，变异系数为3.2%-4.6%，最低检出限为0.017mg/kg。
张有林（7）用SymmetryC18色谱柱（4.6mm*150mm）, 以乙腈和1.8%乙酸
[V(CH3CN):V(1.8%CH3COOH)=1:1]为流动相，流速为0.5ml min-1,Waters 2487UV-检测器，在检测波长254NM ，柱温25°C 的条件下，同时分离并测定了银凤桃中的GA3，回收率分别达到100.1%，该方法测量灵敏度达0.047ng/ml，精密度RSD%<>
黄红林（8）建立了固相萃取-高效液相色谱（SPE-HPLC ）法分析番茄中赤霉素GA3残留量的方法。线性范围为0.21-1.05*102mg/l，检出限为0.011mg/kg,加标回收率为88.45%-95.90%，其RSD 为1.15%-6.56%。
王骏（9）建立用HPLC/MS测定猴桃中赤霉素的方法。用甲醇-氨水溶液提取式样中的赤霉素，经固相萃取净化，以反相液相色谱分离、质谱检测器测定。赤霉素的最低检测线均为4.0ug/kg,回收率92.5%-101.4%，相对标准偏差1.68%-3.79%。
葛雅琨（10）使用高效液相色谱（HPLC ）对蔬菜中的农药GA3残留进行分析检测，用80%甲醇溶液作为提取剂，建立了液液萃取与SPE2PAKC18固相萃取相结合纯化GA3的方法。检测波长为206.00nm ，流动相为甲醇与7.5nM 甲酸水的体积比为3：7的溶液，实验结果为GA3标准曲线的线性方程为：y=5.9242x+4.9434，相关系数R=0.9995，最低检测限为0.5ug/g,平均回收率都在80%以上。
侯圣洁(11)采用LC-MS/MS方法同时检测小麦中的赤霉素、吲哚乙酸和脱落酸，检测限分别为0.005ug/ml，2.2ug/ml and 0.003ug/ml,回收率为95.5%-102.4%。
肖志壮（12）报道，赤霉素在体积分数为70%乙醇溶液中，与98%（质量分数）硫酸作用生成的产物在412nm 波长处具有最大的吸收峰；在0-200mg/l浓度范围内，赤霉素浓度与其吸光度值呈线性关系，其相关系数大于0.990；检测限为2mg/l,可信度在99%以上。
二． 立题背景及意义
啤酒生产以大麦麦芽为主要原料，麦芽的制备是啤酒生产的开始。原料大麦需经过除杂-精选-分级-浸麦-发芽-焙燥-除根，最终得到成品麦芽。当大麦籽含水量超过25%时，即开始生理萌发产生赤霉素，刺激糊粉层细胞分泌系列水解酶。麦芽制造的目的就是在人工控制的条件下，使大麦在发芽过程中产生淀粉酶、蛋白酶、半纤维素等多种水解酶系，降解大麦籽粒中蛋白质、淀粉、半纤维素等高分子物质成中低分子物质，少部分低分子的降解产物被用于合成根芽，大部分降解产物被储存于胚乳中，以构成麦汁中的营养成分。制卖过程中为了加强水解酶系的分泌速度和分泌量，强化水解酶系的活性，普遍会在浸麦是添加一定量
（2mg/kg大麦）的商品赤霉素，进入麦粒中的GA 3少部分伴随除根而除去，其余部分的则保留在成品麦芽中，随着麦芽的糖化发酵最终进到啤酒里。
随着食品安全法的颁布及实施，对人体会造成伤害的物质必须控制在一定的限量内，中国酿酒协会啤酒分会于2009年规定将啤酒中的赤霉素GA 3控制在0.2mg/升啤酒。为此，通过研究大麦发芽及啤酒酿造过程中赤霉素在数量上的变化，为成品酒中的赤霉素的控制提供理论依据。
由此可见，本实验的研究是十分有意义且有前景的。
三．实验过程
3.1 赤霉素标准曲线的建立立及检测限确定
3.1.1HPLC 检测条件的确定
色谱柱：Eclips,XDB-C18(5um,4.6*250mm)
柱温：40°C
流动相：甲醇：0.1%甲酸水（30：70）
流速：1.0m/min
检测波长：20um 325min
3.1.2 GA3标准曲线的建立
配制不同浓度的GA 3标准溶液，根据在HPLC 中的出峰面积建立相应的工作曲线。 准确称取100mg 赤霉素，溶解于80%甲醇(分析纯），取1L 容量瓶，定容。
取10mL 容量瓶5个，编号4～8，取小离心管3个，编号1～3.
8号中加入以1L 容量瓶中溶液定容
7号中加入8mL 1L容量瓶中溶液, 以80%甲醇定容
6号中加入6mL 1L容量瓶中溶液, 以80%甲醇定容
5号中加入4mL 1L容量瓶中溶液, 以80%甲醇定容
4号中加入2mL 1L容量瓶中溶液, 以80%甲醇定容
3号中加入1mL 8号容量瓶中溶液, 以80%甲醇定容
2号中加入1mL 7号容量瓶中溶液, 以80%甲醇定容
1号中加入1mL 6号容量瓶中溶液, 以80%甲醇定容
3.1.3 过柱，得到赤霉素标准曲线
3.1.4检测限确定
100mg/L赤霉素标准样（溶剂为分析纯甲醇），过HPLC 液相之后所得峰面积足够大，即将标准曲线上限设置为100mg/L。GA 3最低检测限为2mg/L（下限）
3.2 麦芽样品中赤霉素含量检测
3.2.1第一次实验：
1. 取麦芽50g ，
2．以食品楼仪器超微粉碎，5min ，得液体约50mL
3．将液体和麦渣以20%甲醇100mL 溶解
4．以滤纸过滤，得液体A ，分离固体麦渣
5．取4只50mL 离心管，将麦渣均分四堆放入，每管各加约20mL 甲醇，使之重量相等，离心机离心，2000r/min，3min 。
6．取离心上清液，与液体A 混合
7．以磷酸一氢钠调pH 至8，
8．以石油醚萃取色素，除去下层石油醚
9．旋转蒸发至干，以2mL 甲醇溶解
10．过柱
3.2.2第二次实验
1. 取麦芽100g,
2. 以食品楼仪器超微粉碎，5min ，得液体约100mL
3. 将液体和麦渣以乙酸乙酯100mL 溶解
4. 连续超滤3次，弃去麦渣，得到液体约200mL
5. 以石油醚萃取除去色素，失败
四．实验结果及分析
4.1第一次结果及分析
过液相柱，出峰很慢且量很少。分析原因可能有：
1．提取方法存在问题，手法不熟练，大部分赤霉素可能于液体转移过程中损失
2．选取萃取液可能不是最合适
3．最后旋转蒸发至干，以2mL 甲醇溶解的溶解效率低
4．液相柱子流速设置小
4.2第二次结果及分析
从色素的提取效果来看，以乙酸乙酯萃取效果与甲醇相比差别不大。而用连续超滤对麦渣中物质提取效果远远好于过滤及离心。最后石油醚提出色素失败，分析原因可能是pH 在酸性条件下，石油醚无法从乙酸乙酯中萃取出色素。
4.3 总体分析
本实验对结果最重要的过程是麦芽样品的预处理，即从中提取赤霉素的方法。其中最值得值得研究的是萃取剂选择。
五．实验展望
5.1 啤酒样品的预处理
5.1.1 啤酒样品减压浓缩
5.1.2 浓缩样品中GA3的萃取
5.1.3 测定加标回收率
5.2 对测定影响因素的研究
5.3 麦芽样品中的GA 3的检测—检测不同麦芽中的GA 3含量
5.4 检测方法的应用
5.4.1 检测大麦发芽过程中GA3含量的变化
5.4.2 检测发酵过程中GA3含量随发酵时间的变化
参考文献
（1） 黄少白，周夔，GA1,2,3,7酶联免疫检测法的建立[J],华北农学报，1993.8（4）：
46-51
（2） 吴硕如，周夔，赤霉素1，2，3，7放射免疫测定药盒的研制[J]，南京农业大学学
报，1990，13（1）：24-27
（3） 湛社霞，孙世宏，臧李纳等，SPE-HPLC 法测定水果中的赤霉素、苯甲酸、糖精钠和
胭脂红。中国卫生检疫杂志，2009，19（3）：579-581
（4） 陈小鹏，王秀峰，孙小镭等，高效液相色谱测定黄瓜瓜条中赤霉素和脱落酸含量[J].
山东农业科学，2005，1：65-67
（5） 周艳明，汤媛，牛森，高效液相色谱法检测草莓中赤霉素残留量的研究[J]，食品工
业科技，2009，1：311-312，321
（6） 张有林，党娅，张静等。高效液相色谱法同时测定银凤桃中的赤霉素和脱落酸[J].
西北植物学报，2005，25（7）：1467-1471
（7） 黄红林，刘实，张桃芝。固相萃取-高效液相色谱法测定番茄中的赤霉素GA3残留[J]。
分析科学学报，2005，21（1）：75-77
（8） 王骏，张卉，胡梅，液相色谱-质谱测定猕猴桃中赤霉素和脱落酸的含量[J],食品工
业，2008，4：74-76
（9） 葛雅琨，张元新，胡睿，素材中赤霉素残留量的高效液相色谱检测方法研究[J].吉
林化工学院学报，2005，22（2）：13-16
范文五：赤霉素
赤霉素，广泛存在的植物激素。化学结构属于二萜类酸，由四环骨架衍生而得。赤霉素种类至少38种，应用于农业生产，可刺激叶和芽的生长，提高产量。
中文名：赤霉素
外文名：gibberellin
本质：植物激素
化学结构：二萜类酸
简称：GA4+7
效果：西红柿调节生长，棉花提高结铃率
CAS：77-06-5
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历史
1926年日本黑泽英一发现，当水稻感染了赤霉菌后，会出现植株疯长的现象，病株往往比正常植株高50%以上，而且结实率大大降低，因而称之为“恶苗病”。科学家将赤霉菌培养基的滤液喷施到健康水稻幼苗上，发现这些幼苗虽然没有感染赤霉菌，却出现了与"恶苗病"同样的症状。1938年日本薮田贞治郎和住木谕介从赤霉菌培养基的滤液中分离出这种活性物质，并鉴定了它的化学结构。命名为赤霉酸。1956年C.A.韦斯特和B.O.菲尼分别证明在高等植物中普遍存在着一些类似赤霉酸的物质。到1983年已分离和鉴定出60多种。一般分为自由态及结合态两类，统称赤霉素，分别被命名为GA1，GA2等。
结构
赤霉素都含有赤霉素烷骨架，它的化学结构比较复杂，是双萜化合物。在高等植物中赤霉素的前体一般认为是贝壳杉烯。赤霉素的基本结构是赤霉素烷，有4个环。在赤霉素烷上，由于双键、羟基数目和位置不同，形成了各种赤霉素。自由态赤霉素是具19C或20C的一、二或三羧酸。结合态赤霉素多为萄糖苷或葡糖基酯，易溶于水。
分布
广泛分布于被子、裸子、蕨类植物、褐藻、绿藻、真菌和细菌中，多存在于生长旺盛部分，如茎端、嫩叶、根尖和果实种子。含量： 1~100Ong·g-1鲜重，果实和种子(尤其是未成熟种子） 的赤霉素含量比营养器官的多两个数量级。每个器官或组织都含有两种以上的赤霉素，而且赤霉素的种类、数量和状态 （自由态或结合态） 都因植物发育时期而异。GA与生长素不同，其运输不表现极性，（根尖合成---沿导管向上运输，嫩叶产生---沿筛管向下运输）。不同植物间的运输速度差别很大。
提取
赤霉素可以用甲醇提取。不同的赤霉素可以用各种色谱分析技术分开。提纯的赤霉素经稀释后处理矮生植物，如矮生玉米，观察其促进高生长的效应，可鉴定其生物活性。不同的赤霉素生物活性不同，赤霉酸(GA3）的活性最高。活性高的化合物必须有一个赤霉环系统（环ABCD），在C-7上有羧基，在A环上有一个内酯环。
植物各部分的赤霉素含量不同，种子里最丰富，特别是在成熟期。
合成
种子植物中赤霉素的生物合成途径，根据参与酶的种类和在细胞中的合成部位，大体分为三个阶段，一、二、三阶段分别在质体、内质网和胞质溶胶中进行。
1）从异戊烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate）到贝壳杉烯（ent-kaurene）阶段
此阶段在质体中进行，异戊烯焦磷酸是由甲瓦龙酸（mevalonic acid,MVA）转化来的，而合成甲瓦龙酸的前体物为乙酰-CoA。
2）从贝壳杉烯到GA12醛（GA12-aldehyde）阶段，接着转变为GA12或GA53，依赖于GA的C-13是否羟基化。此阶段在内质网上进行。
3）由GA12醛转化成其它GA的阶段 此阶段在细胞质中进行。GA12-醛第7位上的醛基氧化生成20-C的GA12?；GA12进一步氧化可生成其它GA。各种GA相互之间还可相互转化。所以大部分植物体内都含有多种赤霉素。
分类
自由型
(free gibberellin)不以键的形式与其他物质结合，易被有机溶剂提取出来。属于有生理活性；
结合型
(conjugated gibberellin) --赤霉素和其他物质 （如葡萄糖） 结合，要通过酸水解或蛋白酶分解才能释放出自由赤霉素，属于无生理活性。
束缚型
这是GA的一种储藏形式。种子成熟时，GA转化为束缚型贮存，而在种子萌发时，又转变成游离型而发挥其调节作用。
应用
用于马铃薯、番茄、稻、麦、棉花、大豆、烟草、果树等作物，促进其生长、发芽、开花结果;能刺激果实生长，提高结实率，对水稻、棉花、蔬菜、瓜果、绿肥等有显著的增产效果。赤霉素不溶于水，但可溶于酒精。使用时先用少许酒精或高度数的烧酒（如60度白干酒）把它化开，然后再对水稀释到需要浓度，于花期喷施连续三次（每次间隔7天）。枣树上通常使用的浓度为10-15ppm的水溶液。（ppm是重量的百分率，表示“百万分之一”，如1ppm即百万分之一，菜宝，以下技术有郑州中联化工产品有限公司技术部提供：
赤霉素药剂
具体如下：
1、赤霉素粉剂：
赤霉素粉剂不溶于水，使用时先用少量酒精或白酒溶解，再加水稀释到所需浓度，水溶液容易失效，要现用现配。不能与碱性农药混用，以免失效。如生产的纯净赤霉素（每包1克），可先用3-5毫升酒精溶解，然后兑水100公斤即变成10ppm液，兑水66.7公斤，即为15ppm的水溶液。如果使用的赤霉素粉剂含量为80%（每包1克装），同样要先用3-5毫升酒精将其化开，然后兑水80公斤，即为10ppm的稀释液，兑水53公斤则为15ppm液。
2、赤霉素水剂：
赤霉素水剂在使用中一般不需要酒精溶解，直接稀释便可以使用。菜宝，使用时直接稀释使用，稀释倍数为1200-1500倍液。
注意事项：
1、喷施赤霉素在日平均气温23℃以上的天气进行，因为气温低时花、果不发育，赤霉素不起作用。
2、喷施时要求细雾快喷，将药液均匀地喷到花上。如果浓度过大，就会导致植株徒长、白化，甚至枯死或畸形。
3、市场上赤霉素生产厂家较多有效成分含量不一致建议在使用时严格按照使用说明进行喷施。
4、由于赤霉素使用时需要精量配置，要求专人把关集中统一配备使用。
一、促使黄瓜、西瓜多开雄花：在黄瓜的1叶期，用4%的赤霉素乳油500倍液或菜宝800-1000倍液叶面喷雾，在西瓜的2-3叶期，用4%的赤霉素乳油8000倍液叶面喷雾。
二、促进土豆、豌豆、扁豆发芽：用4%的赤霉素乳油800倍液，浸种24小时，捞出后（由于切开有伤口，土豆还需用草木灰或其它药剂消毒）播种。
三、使芹菜、菠菜、散叶生菜叶片肥大：收获前20天，用4%的赤霉素乳油4000倍液叶面喷雾，或菜宝800-1000倍液叶面喷雾，隔5天再喷1次（这是目前种植户所掌握的最常见一种用法）。
四、 提高黄瓜、茄子、番茄坐果率：开花期用或菜宝800-1000倍液叶面喷雾或4%的赤霉素乳油800倍液喷花。
五、另外，在西瓜采收前用4%的赤霉素乳油2000-4000倍液喷瓜，还可有效延长西瓜贮存期。
在使用赤霉素时要注意：首先使用浓度要准确（一定要看说明书，以上浓度所用的是4%的赤霉素乳油，生产上还有其它剂型和其它浓度，所以不能千篇一律，下面介绍的其它几类植物生长调节剂也是如此），过高浓度容易使植株徒长失绿，甚至枯死，而且还容易使产品出现畸形。纯品赤霉素较难溶于水，可先用酒精或高浓度的烧酒先溶解，再加水到需要的浓度，切忌用大于50℃的热水去兑溶液，配好溶液后要立即使用，长时间贮藏容易失效。
功效
赤霉素功效对作物的有效率是百分之百，效果持久，更高效，更稳定，更安全，幼苗期开始喷施为最佳，可使根系发达，又预防病害，它能显著地促进植物茎、叶生长，如生长期喷施，也可使营养均衡，有助于作物长势，花期喷施，可保花保果、也能使果实膨大、更有美果作用，棉花盛花期喷洒能有效减少蕾铃脱落，提高结铃率，并可以有效解除作物病害
赤霉素适合以下作物：棉花、番茄、马铃薯、果树、稻、麦、大豆、烟草等，促进其生长、发芽、开花结果;能刺激果实生长，提高结实率，对棉花、蔬菜、瓜果、水稻、绿肥等有显著的增产效果。
赤霉素最突出的生理效应是促进茎的伸长和诱导长日植物在短日条件下抽薹开花。各种植物对赤霉素的敏感程度不同。遗传上矮生的植物如矮生的玉米和豌豆对赤霉素最敏感
赤霉素
，经赤霉素处理后株型与非矮生的相似；非矮生植物则只有轻微的反应。有些植物遗传上矮生性的原因就是缺乏内源赤霉素（另一些则不然）。赤霉素在种子发芽中起调节作用。许多禾谷类植物例如大麦的种子中的淀粉，在发芽时迅速水解；如果把胚去掉，淀粉就不水解。用赤霉素处理无胚的种子，淀粉就又能水解，证明了赤霉素可以代替胚引起淀粉水解。赤霉素能代替红光促进光敏感植物莴苣种子的发芽和代替胡萝卜开花所需要的春化作用。赤霉素还能引起某些植物单性果实的形成。对某些植物，特别是无籽葡萄品种，在开花时用赤霉素处理，可促进无籽果实的发育。但对某些生理现象有时有抑制作用。
关于赤霉素的作用机理，研究得较深入的是它对去胚大麦种子中淀粉水解的诱发。用赤霉素处理灭菌的去胚大麦种子，发现GA3显著促进其糊粉层中 α-淀粉酶的新合成，从而引起淀粉的水解。在完整大麦种子发芽时，胚含有赤霉素，分泌到糊粉层去。此外，GA3还刺激糊粉层细胞合成蛋白酶，促进核糖核酸酶及葡聚糖酶的分泌。
促进麦芽糖的转化（诱导α—淀粉酶形成）；促进营养生长（对根的生长无促进作用，但显著促进茎叶的生长），防止器官脱落和打破休眠等。
赤霉素最突出的作用是加速细胞的伸长（赤霉素可以提高植物体内生长素的含量，
而生长素直接调节细胞的伸长），对细胞的分裂也有促进作用，它可以促进细胞的扩大（但不引起细胞壁的酸化），除此之外，赤霉素还有着抑制成熟，侧芽休眠，衰老，块茎形成的生理作用。
合成部位：芽、嫩叶、未成熟种子、未成熟果实、根尖
作用：
1.茎、叶的伸长生长，诱导α-淀粉酶的形成
2.加速细胞分裂、成熟细胞纵向伸长、节间细胞伸长
3.抑制块茎形成
4.抑制侧芽休眠，衰老
5.提高生长素水平，顶端优势
注意事项
1、该品可与一般农药混用，并能相互增效。如果使用赤霉素
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