范文一：帕金森的病理变化

帕金森的病理变化

作者:武燕萍 帕金森发病原因:帕金森病的起病是缓慢的, 最初的症状往往不 被人所注意。 但出现以下症状时, 临床上就基本可以诊断为帕金森病 了。该病主要是因位于中脑部位

黑质细胞发生变性坏死的原因迄今尚未明了, 可能与遗传和环 境因素有关。有学者认为蛋白质、水果、乳制品等摄入不足,嗜酒、 外伤、过度劳累及某些精神因素等,均可能是致病的危险因素。原因 不明的多巴胺减少导致的震颤麻痹,在医学上称为

病理变化:

1,肉眼观:早期无明显病变,晚期可见中脑黑质,桥脑的蓝斑 及迷走神经运动核等处的神经色素脱失是本病相对具有的特征性的 变化;

2,光镜下:可见该处的神经黑色素细胞丧失,残留的神经细胞 中有 Lewy 包涵小体形成,该小体位于神经细胞胞浆内,呈圆形,中 心嗜酸性着色,折光性强,边缘着色浅;

3, 电镜下:该小体由细丝构成, 中心细丝致密, 周围则较松散。 部分老年性痴呆病患者大脑皮质神经元也可检出 Lewy 小体。

病情等级

Ⅰ 级:一侧症状,轻度功能障碍。

Ⅱ 级:两侧肢体和躯干症状,姿势反应正常。

Ⅲ 级:轻度姿势反应障碍,生活自理,劳动力丧失。

Ⅳ 级:明显姿势反应障碍,生活和劳动能力丧失,可站立,稍 可步行。

Ⅴ 级:帮助起床,限于轮椅生活。

温馨提示:上面的介绍还不是很完全, 若您还有其他问题可以咨询我 院的在线专家。若是您得了脑病,一定要及时的采取治疗,因为无论 是什么样的疾病都是越早治疗治疗的效果越好。

范文二：【doc】常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异

常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差

异

第26卷第3期

2008年3月

中华中医药学刊

CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE

Vo1.26No.3

Milr.2OO8

常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异

卢文丽,方肇勤,侯俐,潘志强,刘小美

(上海中医药大学基础医学院,上海201203)

摘要:目的:观察常见胃溃疡模型小鼠胃的组织病理变化,评价和比较各模型.方法:以昆明小鼠为实验对

象,选取水浸拘束,乙酸,磷酸组胺,消炎痛,利血平,乙醇等6种方法,同步制作胃溃疡模型,并设置正常,禁食,假

手术等对照组.在造模当天(第1天)及第8天取胃组织作病理组织学观察.结果:禁食,水浸拘束,假手术等造

模当日,小鼠胃出现明显的病理变化,第8天基本消失,持续时间短;消炎痛,利血平,乙醇造模当日,小鼠胃出现

明显的病理变化,至第8天其病理改变仍未完全消失;磷酸组胺病变程度轻且易于恢复;乙酸造模对动物损伤重,

易致死亡.以上病理变化,大多为黏膜局部或弥漫性炎症,水肿,出血,或黏膜萎缩,坏死和脱落,属急性胃炎或部

分急性胃溃疡性质.结论:水浸拘束,消炎痛,利血平,乙醇等造模成模率高,假手术,禁食次之,而磷酸组胺和乙

酸造模似不宜作为小鼠常规胃溃疡模型.

关键词:小鼠;胃溃疡;胃黏膜病变;水浸拘束;乙酸;消炎痛;利血平;乙醇;假手术;禁

食

中图分类号:R一33文献标识码:A文章编号:1673—7717(2008)03—0551—05

ThePathologicalChangeandDifferenceoftheCommonUsedGastrelcosisMiceModels LUWen-li,FANGZhao-qin,HOULi,PANZhi-qiang,LIUXiao-mei

(BasalMedicalCollege,ShanghaiUniversiteofChineseMedicine,Shanghai201203,China)

Abstract:0咖

ctive:Toobservethepathologicalchangeofthecommonusedgastricucermicemodel,toappraise

andcomparethesevariousmodelsMethods:Weselectsixmethods:stress,aceticacid,histaminephosphate,antifani,ap-

oplon,alcoholtomakegastriculcermodelsimultaneously,andsetupthenormal,abrosia,andshamoperatedcontrol

groups.Wegetthestomachtoobservepathohistologyonthe1stand8thday.Results:Onthe1stday,therewereconspic-

UOUSpathologicalchangesintheabrosia,stressandshamoperatedgroupsmicestomachwhichdisappearedontheeighth

day.Intheantifam,apeplonandalcoholgroupsobviouspathologicalchangeswerefoundonthe1stdayandlastedtillthe

8thday.Thehistaminephosphategroupgpathologicalchangeswereslightandeasytorecover.Theaceticacidseriously

damagedtheanimalandeasilytoresultedindeath.TheAbovementionedpathologicalchanges,whichweremostlymucous

membranepartialordiffuseinflammation,dropsy,hemorrhage,orthemucousmembraneatrophia,thenecrosisandamotic,

weretheacutegastritisorthepartialacutegastriculcer.Conclusion:Thestress,antifani,apeplon,andalcoholmodel

highlysuccessfulratio.Theabrosiaandshamoperatedcontrolgroupswerethenext,butthehistaminephosphateandthe

aceticacidgroupseemnottosuitthemouseconventionalgashtriculcermode1.

Keywords:mice;gastriculcer;gastricmucosallesion;stress;aceticacid;antifani;apoplon;al

cohol;shamoperation;

abrosia

胃溃疡是临床常见疾病.为了开展药效及治疗机制的 研究,一些常用实验性胃溃疡小鼠模型被广泛引用.鉴于 这些模型的造模方法不同,所造成的模型是否稳定,有什么 特点和差异,如何合理地择用?为此,笔者在文献报道的基 础上】,选取了水浸拘束法,乙酸法,磷酸组胺法,消炎 痛法,利血平法,乙醇法6种不同的胃溃疡疾病进行同步比 收稿日期.'2007—10—16

基金项目:上海市科委国际合作项目(064309052);上海市卫生局 资助项目(2004J003A);上海高校选拔培养优秀青年教 师科研专项基金项目(200611)

作者简介:卢文丽(1981一),女,湖北人,助教,硕士,从事中医基础 理论及实验研究.

通讯作者:方肇勤(1955一),男,上海人,教授,博士研究生导师. Tel:02l一51322ll5,E—mail:~ang@shl63d.sta.net.cn.

较实验,同时设置正常,禁食,假手术等3组对照.结果报 道如下.

1材料和方法

1.1实验动物清洁级昆明小鼠,体重(24.35?1.06)g, 雄性,152只,由中国科学院上海实验动物中心提供,合格 证号:SCXK(沪)2003—0003.

1.2主要仪器设备DK一$22型恒温水浴箱,小鼠固定 器,820rotarymicrotome,奥林巴斯CKX41/CKX31组织培养 用显微镜及成像系统,NIKONCoolpix4500数码相机. 1.3药物或试剂磷酸组胺:BR,5g,批号62014032,国药 集团化学试剂有限公司.用时配制成8mg/mL水溶液;消 炎痛:25rIl吕/片,批号060201,准字号H31020148,中美合资上

海辛帕斯制药有限公司.用时溶于5%NaHCO,溶液, 浓度为5mg/mL;利血平注射液:lillE_.1mg/支,批号050302, 中

华

中

医

药

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学

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中华

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中医药

OFTRADITIONAL

学刊

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上海医科大学红旗制药厂;无水乙醇:AR,500mL/瓶,批号 KJ20060509,国药集团化学试剂有限公司;冰醋酸:AR, 500mL/瓶,批号T2006430,国药集团化学试剂有限公司;生 理盐水:50OraL/瓶,批号06110202,准字号H31021918,上海 华源长富药业有限公司;碳酸氢钠:AR,5oog/瓶,批号 051102,上海实验试剂有限公司;乙醚:AR,500mL/瓶,批号 CY050104,国药集团化学试剂有限公司;注射用青霉素钠:0. 5g/8o万u,批号O6O9O2,准字号H31020952,上海新先锋药

业有限公司.

1.4分组及造模方法?-12]152只小鼠,随机分为9组. 除正常对照组外,其余8组于第0天上午7:0o开始禁食不 禁水至第1天上午7:0o,达24h.第1天早晨7:0o开始,8 组按时间安排依次开始造模如下.

(1)正常对照组(16只):正常饮水,摄食.

(2)禁食对照组(16只):正常饮水,继续禁食至晚 19:0o.

(3)水浸拘束法组(16只):早晨7:0o开始,将各小鼠 置于小鼠固定器中,限制活动,头朝上立于23qC左右的恒 温水浴内,水面齐剑突,至晚19:0o.

(4)乙酸组(20只):早晨8:0o,乙醚吸入麻醉小鼠,无 菌手术开腹,暴露胃,在腺胃部前壁窦体交结处浆膜面同一 部位(避开血管),用浸有冰醋酸,边长为5mm的正方形滤 纸接触2次,每次30s(秒表计时),然后还纳胃体,逐层缝 合切口.

(5)假手术对照组(20只):方法同乙酸法组,滤纸浸 生理盐水.乙酸及假手术组交替进行,早11:0o前手术结 束.

(6)磷酸组胺组(16只):上午11:00,灌胃8mg,/mL磷 酸组胺溶液0.8mg/10g1次.

(7)消炎痛组(16只):下午13:00,皮下注射5mg/mL 消炎痛NaHCO溶液0.3mg/10g1次.

(8)利血平组(16只):下午13:00,皮下注射1mg/mL 利血平注射液0.1mg/lOg1次.

(9)乙醇组(16只):下午18:0o,灌胃无水乙醇0.1mL/ lOg1次.

以上至晚19:0o全部造模结束,造模期间8组仍禁食 不禁水.造模结束后所有组别动物各随机分为两组,一半

处死;另一半恢复常规饮水摄食,观察其自然恢复及证候演 变,至第8天全部处死.乙酸及假手术组术后后肢肌注青 霉素钠加万U/kg,连续3天.

1.5实验室指标(1)观察造模后动物的存活及一般情 况.(2)胃整体称重:从幽门和贲门部截取造模第1,8日 整个胃,入bouin液固定约12h左右,用双面刀片沿胃大弯 剖一开1:3,用吸管取bouin液冲洗胃内壁,继续固定.固定 【i】至24h后,入7O%乙醇24h,再入50%乙醇24h,入3O%乙 璧醇24h后取出称重.(3)胃前内壁黏膜肉眼观察:上法胃 整体称重后,分离前后壁,观察前壁内侧面.(4)取近胃窦 5.52上部胃体前壁制作病理切片,常规HE染色,光镜下观察. 学2实验结果

刊2.1动物存活及一般情况第1日19:00全部造模结束 后,乙酸组有约一半动物状况很差,假手术组因麻醉过量死 亡2只,1只状态差;利血平,消炎痛及乙醇组各死亡1只. 随机平均分组后,一半动物处死,进行病理检测;另一半动 物8日内存活及一般情况:(1)正常对照,禁食对照,水浸 拘束及磷酸组胺模型未出现动物死亡;(2)乙酸组动物状 态差,至第4天陆续全部死亡;(3)假手术在造模当日因麻 醉过量死亡1只,另1只状态较差并于次日死亡;(4)消炎 痛组8只陆续死亡至3只;(5)利血平组第2日死亡1只; (6)乙醇组造模后次日死亡6只.总之,乙酸,消炎痛及乙 醇等3种模型死亡率较高.如图1.

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—?一磷酸纽胺

一一消炎稍

一

利血平

一

乙醇法

图1不同组别小鼠8天内存活情况 2.2胃整体称重结果称重结果如图2.提示造模第1 日,乙酸和乙醇刺激后,胃组织水肿,重量有增加趋势,而利

血平组相反,胃组织重量减轻;自然恢复1周后,第8日各

组胃重水平均有升高趋势,且各组间胃轻重趋势基本同造

模当日.利血平组胃组织重量轻,与该组动物造模后饮水

摄食量减少显着,致.

曲

一

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1日期(d)8

图2造模第1天和第8天各组胃重量

2.3各组胃前壁图见图3—4. 注:以上各敏字对应相应的组别 图3造模当日(第1日) 胃前壁9组

女正常对照组

禁食对照组

水浸拘束缰

*己酸组

假手木对照组

诎蒜酸姐肢组

炎腐蛆

利血平组

g己厚组

注:以上各数字对应相应的组别 图4第8日胃前壁8组 (乙酸组全部死亡)

呲?嘶呲?

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中华中医药学刊

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Mar.2008

图3—4可见,第1日,总体上,不同胃溃疡造模后,与 正常对照组(第1组)不同,其他各组别胃黏膜表现出不同 程度的损伤,出现黄褐色着染和不同程度黑褐色的出血点. 第8日,各组胃黏膜损伤改变明显减弱.具体情况见表1. 表1造模第1日及第8日胃前壁肉眼观察结果 组别第1日第8日

胃组织结构完整,大小,形态正常,胃和黏膜清洁同第1日(个别胃丢失) 胃黏膜出现不同程度的损伤.第4个胃大弯中部, 荽萎篡基本恢复至正‰(第2组)周围有充血区域环绕.但诙组胃体结构和胃壁厚

度一………

最为完好.

敌在舢血区域'呈黑褥色,基本恢复至正常

.(第3组)严重渡及刊整个黏膜.一…一….

7酵甥

最为严重,胃前壁棚显灼伤后炎症,出血表现?呈 ,:,深黑褐色,贯穿胃壁,严重被差异大.一些未被乙全部死亡常 酸刺激的部位,部分区域黏膜也出现了病变.

黧黏膜病理改变类似禁食组面轻基本恢复至正‰ 篙黼蝴染粕组

黜燃骝'

艟鞍籼氟骝'

!解剖时发理该组胃组织基本恢复至正散(第9组)质地橙软.缺少张力.一…,…

2.4病理组织学结果各模型组胃组织病理改变参见附 图5—26.病理改变描述见表2.

3讨论

笔者参考有关文献,采用了一次造模的方式.实验结 果显示,这些方法均可造成不同程度的急性胃黏膜损伤. 在造模后第8天,得到不同程度的恢复.不同模型的特征

如下.

(1)禁食对照组.与其他造模组一致,该组共禁食 36h.禁食结束后,胃黏膜出现了一定程度的病理改变.该 结果提示,禁食是不同胃溃疡模型形成的参与因素.(2) 水浸拘束法胃黏膜病变性质为急性出血性浅表性胃炎,亦 即通常所说的应激性溃疡.该法成模率高,几乎达100%, 胃体痉挛,个体问病理改变十分接近,造模方便,可作为应 激溃疡模型的首选.(3)假手术对照组,在造模当日部分 小鼠胃黏膜也出现了炎细胞浸润,充血等病理改变,类似于 临床大手术,严重创伤等应激因素引起的应激性胃炎II. 因此,与禁食一样,手术本身也参与了胃溃疡模型的形成. 相应的,假手术可以用作应激性溃疡模型.但该方法较为 复杂,干预因素多,似不宜推广.(4)乙酸造模.该方法采 用浸透乙酸的滤纸直接接触胃前壁浆膜面窦体交结处,造 成胃体浆膜层,肌层不同程度的灼伤,黏膜层也有病变.有 文献认为,该法可造成慢性溃疡,持续时间久,病理组织学 的改变类似人类溃疡,比较适合于治疗性给药研究J.但 是,该法与f临床溃疡发生机制不同,造模不便,易于造成动 物死亡,因此不宜用作常规胃溃疡模型.(5)磷酸组胺造 模成模率低,胃组织病理改变程度较轻,是组胺剂量不够还 是小鼠对之不敏感,尚待研究.(6)消炎痛造模的特点是 造模后第2日,动物的精神状态开始出现不振,继而陆续出 现死亡,造模后第8日,溃疡的恢复较差.(7)利血平造模 的特点是造模后,动物活动明显减弱,持续4日左右才见恢 复,且该组小鼠普遍消瘦,饮水,摄食减少.造模后第8日, 溃疡的恢复较差.(8)乙醇法造模当日,胃体松软,缺少张 力,与镜下水肿一致,第8日病理改变有所改善.但该组动 物造模后第2日出现大部分死亡,推测与乙醇浓度及剂量 有关,属于酒精中毒的表现.鉴此,须考虑降低乙醇浓度.

胃溃疡不同模型的造模当日,小鼠胃壁和胃黏膜层均 出现了一定的病理改变,但典型的溃疡表现不多,大多为黏 膜局部或弥漫性不同程度的炎症,水肿,出血,或黏膜萎缩, 坏死和脱落.病变发生部位浅表为主,多至黏膜上皮层,部 分深达黏膜腺体,一般不超过黏膜肌层,个别累及黏膜下 层,仅乙酸法使得胃壁4层结构均受损.因此,从严格意义 上讲,属于急性胃黏膜病变性质,可以模拟急性胃炎,或部 分急性胃溃疡.

表2造模后第1日及第8日胃前壁病理组织学改变 组别第1日(图5—21)第8日(图22—26)

糨拘翘篙萎瓤耻.

乙酸组

蒌:曼主篡:未能观察刭恢复输乙酸组肿,肌细胞形态更加狭长.黏膜层腺体结构

被::.:'…………'破坏.部分细胞形态不完整,细胞核裸露,黏膜…一' 鬟萋基本馘至正常状态.对照组量炎细胞浸润,而部分小鼠胃黏膜未觅异常.一…

一一,,.

磷酸组蚴惝鲚赚趾姊基本馘正黼态

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清癀痛组齐'偶见黏膜上皮有大

约有一半小鼠胃黏膜结构紊乱.胃壁细胞减少 利血平组且嗜酸性染色减弱,黏膜上皮多有脱落,部分区 域有少量炎细胞.见图19.

胃黏膜损伤明显,突出表现在黏膜下水肿.部

乙醇组分胃黏膜结构紊乱,萎缩,腺体被大量破坏,大 量坏死的黏膜脱落.见图20—21.

急性期病理碍刭部分改善,但

仍然觅部分细胞核固缩,胃壁

细胞嗜酸性染色减弱.黏膜有

脱落.觅图22.

部分区域病理未觅改善,胃黏塞膜下层水肿,黏膜层萎缩,坏死

和脱落.个别仍有少量炎细医

胞.觅图23.24.——翌

黏膜下层水肿程度有所减轻,553

腺体捧列整齐程度好转,但仍—

存在部分黏膜上皮萎缩和脱和

落.见图25—26

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(1)造模当天(第l天)

图5正常小鼠胃壁(HE×100)图6正常小鼠胃黏膜(HE×400)图7正常小鼠胃黏膜

(HE×400)

图8禁食小鼠胃黏膜(HEX40o)图9水浸拘束小鼠胃黏膜(HE×400)图1O水浸拘

束小鼠胃黏膜(HEX400)

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图11乙酸小鼠胃壁【HEXloo)图12乙酸小鼠胃壁(HEx400)图13乙酸小鼠胃黏

膜(HEX4o0)

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图l4假手术小鼠胃黏膜(HE×4OO)图l5组胺小鼠胃黏膜(HE×4OO)图l6消炎痛小鼠胃黏膜(HE×400)

?图17消炎痛小鼠胃黏膜(HE×400)图18消炎痛小鼠胃黏膜(HE×400)图19利血平小鼠胃黏膜【HE×400)

刊

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中华中医药学刊

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图2O乙醇小鼠胃壁(HEX100)图2l乙醇小鼠胃黏膜fHEX100) (2)第8天

图22消炎痛小鼠胃黏膜(HEX4oo)图23利血平小鼠胃壁(HEX400)图24利血平小鼠胃黏膜(}IEX4oo)

图25乙醇小鼠胃壁(HEx100)图26乙醇小鼠胃黏膜(HE×100) 结合模型一次造模的方式及胃黏膜病理改变的性质分

析,其中禁食对照,水浸拘束,假手术对照组均恢复至正常, 主要由应激形成,模型持续时间短,可以用于预防应激性溃 疡的实验;而消炎痛,利血平,乙醇等模型,恢复慢,部分病

理改变仍存在,可以用于急性胃炎或急性溃疡的治疗实验. 磷酸组胺病理改变程度轻,乙酸组由于小鼠损伤太大陆续

全部死亡,未能看到胃黏膜病变的慢性恢复过程,两种方法 似不宜作为常规小鼠胃溃疡模型.

参考文献

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华

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医

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刊

范文三：常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异_卢文丽

第 26卷 第 3期 2008年 3月

中 华 中 医 药 学 刊

CH I NESE ARCH I VES O F TRAD I T I O NAL CH I NESE M E D I C I NE

Vo. l 26No . 3M ar . 2008

中

华 中 医 药

学 刊

常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异

卢文丽 , 方肇勤 , 侯 俐 , 潘志强 , 刘小美

(上海中 医药大学基础医学院 , 上海 201203)

摘 要 :目的 :观察常见胃溃疡模型小鼠胃的组织病理变化 , 评价和比较各模型 。 方法 :以昆 明小鼠为实验对

象 , 选取水浸拘束 、 乙酸 、 磷酸组胺 、 消炎痛 、 利血平 、 乙醇等 6种方法 , 同 步制作胃溃疡模型 , 并设置正常 、 禁食 、 假 手术等对照组 。 在造模当天 (第 1天 ) 及第 8天取胃组织作病理组织学观 察 。 结果 :禁食 、 水浸拘束 、 假手 术等造 模当日 , 小鼠胃 出现明显的病理变化 , 第 8天基本消失 , 持续时间 短 ; 消 炎痛 、 利 血平 、 乙醇造模 当日 , 小鼠胃 出现 明显的病理变化 , 至第 8天其病理 改变仍未完全消失 ; 磷酸组胺病变程度轻且易于恢复 ; 乙酸造模对动物损伤 重 , 易致死亡 。 以上病理变化 , 大多为黏膜局部或弥漫性炎症 、 水肿 、 出血 , 或黏膜萎缩 、 坏死和脱落 , 属急性胃炎或部 分急性胃溃疡性质 。 结论 :水浸拘束 、 消炎痛 、 利血平 、 乙醇等 造模成模 率高 , 假 手术 、 禁食次之 , 而磷 酸组胺 和乙 酸造模似不宜作为小鼠常规胃溃疡模型 。

关键词 :小 鼠 ; 胃溃疡 ; 胃黏膜病变 ; 水浸拘束 ; 乙酸 ; 消炎痛 ; 利血平 ; 乙醇 ; 假手术 ; 禁食

中图分类号 :R -33 文献标识 码 :A 文章编号 :1673-7717(2008) 03-0551-05

The Patho l o gi c al Change and D i f ference of the Co mm on U sed Gastr el c os i s M i c e M ode l s

LU W en-l, i FANG Zhao-q i n , HOU L , i PAN Z hi-qiang , L I U X iao-me i

(Bas a lM ed i calC oll ege , Sh anghaiUn iversit e of Ch i neseM ed i cine , Shangh ai201203, C hina)

A bstrac t :O b jective :To observe t he pa t hologica l change o f t he co mm on used gastric ucer m ice m ode , l t o appraise and co m pa re t hese va ri ous models . M et hods :W e se lect six m e t hods :stress , acetic ac i d , h ist am ine phospha t e , an tifan, i ap-oplon , alcoho l t o m ake gastric u l cer model si mu ltaneously , and se t up t he no r ma , l abro si a , and sha m opera ted control g roups . W e ge t t he st om ach to obse rve pa t hohisto l ogy on t he 1st and 8t h day . Results :O n t he 1st day , the re we re conspic-uous patho l og ical change s i n t he ab rosia , stress and sham ope rated g roups m ice stomach w hich disappeared on the eight h day . In the antifan, i apoplon and alcoho l g roups obv ious pa t ho logica l changes we re f ound on the 1st day and last ed till t he 8th day. The h istam ine phospha t e g roup s ' pa t ho l og ica l changes w ere sli ght and easy to recover . The ace tic ac i d seriousl y da m aged t he an i m a l and easil y t o result ed i n dea t h . The A bove m entioned patho l og ical changes , which we re m ostl y m ucous membrane parti a l o r diff use i nfla mm a tion , drops y, he m orrhage , o r t he mucou sm e m brane a troph i a , t he necro sis and a m o tic , we re t he acute ga stritis o r the partia l acu t e gastric ulcer . Conclusion :T he stress , antifan, i apoplon , and a lcoho l model high l y successful ra tio . The ab rosia and sham operated contro l g roups w ere the nex, t but t he hista m i ne phosphate and t he acetic acid g roup seem no t to suit t he m ouse conven tiona l g ashtric ulcer m ode. l K ey wo rds :m ice ; gastric ulcer ; ga stri c m ucosa l lesi on ; stre ss ; ace tic ac i d ; an tifan; i apoplon ; a lcoho; l sha m operati on ; abrosia

收稿日期 :2007-10-16

基金项目 :上海市科 委国际 合作 项目 (064309052); 上海市 卫生 局

资助项目 (2004J003A ); 上 海高校 选拔培 养优秀 青年 教 师科研专项基金项目 (200611)

作者简介 :卢文丽 (1981-), 女 , 湖北人 , 助教 , 硕 士 , 从事中医基 础

理论及实验研究。

通讯作 者 :方 肇勤 (1955-), 男 , 上 海人 , 教 授 , 博 士研 究 生导 师。

Te:l 021-51322115, E -m ai:l z q f ang @s h163d. st a . ne. t cn 。

胃溃疡是临床常见疾病。为了开展药效及治疗机制的 研究 , 一些常用实验 性胃溃 疡小鼠 模型被 广泛引 用。鉴于 这些模型的造模方法不同 , 所 造成的模型是否稳定 , 有什么 特点和差异 , 如何合 理地择用 ? 为此 , 笔者在文献报道的基 础上 [1-12], 选取 了水浸 拘束 法、 乙酸 法、 磷酸 组胺 法、 消炎 痛法、 利血平法、 乙醇法 6种不同的胃溃疡疾病进行同步比

较实验 , 同时设置正 常、 禁 食、 假 手术 等 3组 对照。结 果报

道如下。

1 材料和方法

1. 1 实验动物 清洁级昆 明小鼠 , 体重 (24. 35? 1. 06) g , 雄性 , 152只 , 由中国科 学院 上海 实验 动物 中心 提 供 , 合格 证号 :SCXK (沪 ) 2003-0003。

1. 2 主 要仪 器设备 DK -S22型 恒温水 浴箱 , 小鼠 固定 器 , 820ro t a ry m icro to m e , 奥林巴斯 CKX41/CKX 31组织培养 用显微镜及成像系统 , N I KON Coo l pix 4500数码相机。 1. 3 药物或试剂 磷酸组胺 :BR , 5g, 批 号 62014032, 国药 集团化学试剂有 限公 司。用时 配制成 8m g /m L 水 溶液 ; 消 炎痛 :25m g /片 , 批号 060201, 准字号 H 31020148, 中美合资上 海辛帕斯制药有限公司。用时溶于 5%N aHCO 3溶液 [11-12], 浓度为 5mg /m L ; 利 血平注射 液 :l m L :1m g /支 , 批号 050302,

551

DOI :10.13193/j.archtcm.2008.03.104.luwl.085

中 华 中 医 药 学 刊 上海医科 大学 红旗 制药 厂 ; 无 水乙 醇 :AR , 500m L /瓶 , 批 号

K J20060509, 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 ; 冰 醋 酸 :A R ,

500mL /瓶 , 批号 T2006430, 国药集 团化学 试剂 有限 公司 ; 生

理盐水 :500mL /瓶 , 批号 06110202, 准字号 H31021918, 上 海

华源 长 富 药 业 有 限 公 司 ; 碳 酸 氢 钠 :AR, 500g /瓶 , 批 号

051102, 上海实验试 剂有限 公司 ; 乙醚 :AR, 500mL /瓶 , 批 号

CY 050104, 国药集团化学试剂有限公司 ; 注射用青霉素钠 :0.

5g /80万 U, 批号 060902, 准 字号 H31020952, 上海 新先 锋药

业有限公司。

1. 4分 组及造 模方法 [1-12]152只小 鼠 , 随 机分为 9组。

除正常对照组外 , 其 余 8组于第 0天上午 7:00开始禁食不

禁水至第 1天上午 7:00, 达 24h 。第 1天 早晨 7:00开始 , 8

组按时间安排依次开始造模如下。

(1) 正常对照组 (16只 ):正常饮水、 摄食。

(2) 禁食 对 照 组 (16只 ):正 常 饮 水 , 继 续 禁 食 至 晚

19:00。

(3) 水浸拘束法组 (16只 ):早晨 7:00开始 , 将 各小鼠

置于小鼠固定器中 , 限 制活 动 , 头朝 上立 于 23e 左右 的恒

温水浴内 , 水面齐剑 突 , 至晚 19:00。

(4) 乙酸组 (20只 ) :早晨 8:00, 乙醚吸 入麻醉小 鼠 , 无

菌手术开腹 , 暴露胃 , 在腺胃部前壁窦体交结处浆膜面同一

部位 (避开血管 ) , 用浸有 冰醋酸 , 边长 为 5mm 的正 方形滤

纸接触 2次 , 每 次 30s(秒表 计时 ) , 然 后还 纳胃体 , 逐 层缝

合切口。

(5) 假手术 对照 组 (20只 ):方 法同 乙酸 法组 , 滤 纸浸

生理盐水。乙酸及假手术 组交 替进行 , 早 11:00前 手术结

束。

(6) 磷酸组胺组 (16只 ):上午 11:00, 灌 胃 8m g /m L 磷

酸组胺溶液 0. 8m g /10g 1次。

(7) 消炎痛 组 (16只 ):下午 13:00, 皮下 注射 5m g /mL

消炎痛 N aHCO

3

溶液 0. 3mg /10g 1次。

(8) 利血平 组 (16只 ):下午 13:00, 皮下 注射 1m g /mL

利血平注射液 0. 1m g /10g 1次。

(9) 乙醇组 (16只 ) :下午 18:00, 灌胃无水乙醇 0. 1m L /

10g1次。

以上至晚 19:00全 部造模 结束 , 造 模期间 8组 仍禁食

不禁水。造模结束后所有 组别动 物各随 机分为 两组 , 一半

处死 ; 另一半恢复常规饮水摄 食 , 观察其自然恢复及证候演

变 , 至第 8天全部处 死。乙酸及 假手术 组术后 后肢 肌注青

霉素钠 40万 U /kg, 连续 3天。

1. 5实验室指 标 (1) 观 察造 模后 动物的 存活 及一 般情

况。 (2) 胃整体称重 :从 幽门 和贲 门部 截取 造模 第 1、 8日

整个胃 , 入 bouin 液 固定约 12h 左右 , 用双 面刀片沿 胃大弯

剖一开口 , 用吸管取 bouin 液冲洗 胃内壁 , 继续 固定。固定

至 24h 后 , 入 70%乙醇 24h , 再 入 50%乙 醇 24h , 入 30%乙

醇 24h 后取出称重。 (3) 胃前 内壁 黏膜 肉眼 观察 :上 法胃

整体称重后 , 分离前 后壁 , 观察前 壁内侧 面。 (4) 取 近胃窦

上部胃体前壁制作病理切片 , 常规 HE 染色 , 光镜 下观察。

2实验结果

2. 1动物存活及一 般情况 第 1日 19:00全 部造 模结束

后 , 乙酸组有约一半动物状况 很差 , 假手术组因麻醉过量死

亡 2只 , 只状态差 ;

随机平均分组后 , 一半 动物处 死 , 进 行病理 检测 ; 另一 半动 物 8日内存活 及一般 情况 :(1) 正 常对 照、 禁食 对 照、 水浸 拘束及磷酸组胺模 型未出 现动 物死 亡 ; (2) 乙酸 组动 物状 态差 , 至第 4天陆续全部死亡 ; (3) 假 手术在 造模当日 因麻 醉过量死亡 1只 , 另 1只状态较差 并于次 日死亡 ; (4) 消炎 痛组 8只陆续死亡 至 3只 ; (5) 利血平 组第 2日死亡 1只 ; (6) 乙醇组造模后次日死亡 6只 。总之 , 乙酸、 消炎痛 及乙 醇等 3种模型死亡 率较高。如图 1。

图 1不同组别小鼠 8天内存活情况

2. 2胃整体称 重结 果 称 重结 果如 图 2。提 示 造模 第 1日 , 乙酸和乙醇刺激后 , 胃组织水肿 , 重量有增加趋势 , 而利 血平组相反 , 胃组织重 量减轻 ; 自然 恢复 1周后 , 第 8日各 组胃重水平均有升高趋势 , 且 各组间胃 轻重趋 势基本 同造 模当日。利血平组胃组织重 量轻 , 与该组 动物造 模后 饮水 摄食量减少显著一致。

图 2造模第 1天和第 8天各组胃重量

2. 3各组胃前壁图 见图 3~4。

中 华 中 医 药

学 刊

图 3~4可见 , 第 1日 , 总体 上 , 不同胃 溃疡 造模 后 , 与 正常对照组 (第 1组 ) 不同 , 其他各 组别胃 黏膜表现 出不同

程度的损伤 , 出现黄褐色着染 和不同程度黑褐色的出血点。 第 8日 , 各组胃黏膜损伤改变明显减弱 。具体情 况见表 1。

表 1 造模第 1日及第 8日胃前壁肉眼观察结果

组 别 第 1日

第 8日

正 常对照组

(第 1组 )

胃组织结构 完整 , 大小、 形态正 常 , 胃和黏膜清 洁

同 第 1日 (个别 胃丢失 )

禁 食对照组 (第 2组 )

胃黏膜出现 不同程度 的损 伤。第 4个 胃大 弯中 部 ,

出现类似溃 疡的表现 :在 一个小 的灰 白色 圆 形区 域

周围有充血 区域环绕 。但该组 胃体结构 和胃壁厚 度 最为完好。

基 本恢复至正 常。

水 浸拘束组 (第 3组 ) 胃体出现明 显痉挛 , 有散 在的 出血 区域 , 呈 黑褐 色 ,

严重波及到 整个黏膜 。

基 本恢复至正 常。

乙酸组

(第 4组 )

最为严重 , 胃前 壁有明显 灼伤 后炎 症、 出血 表现 , 呈

深黑褐色 , 贯穿 胃壁 , 严重程度 差异大。 一些未被 乙

酸刺激的部 位 , 部分区域 黏膜也出 现了病变。

全 部死亡

假 手术对照

组 (第 5组 ) 黏膜病理改 变类似禁 食组而轻

基 本恢复至正 常。 磷 酸组胺组

(第 6组 ) 大多胃组织 黏膜似有 轻度损伤 , 有 散在的褐色 着染

个 体差 异明 显 , 个 别胃 组 织 黏膜残存损 伤 消炎 痛组

(第 7组 ) 胃体出现痉 挛 , 形态出现 异常

胃 体痉 挛未 能完 全 缓解 , 形 态异常仍然 存在。 利血 平组

(第 8组 ) 胃体出现痉 挛萎缩 , 但黏 膜损伤和 出血点程度 轻。

胃 体痉 挛未 能完 全 缓解 , 形 态异常仍然 存在。 乙醇组 (第 9组 )

胃内壁较清 洁 , 出血点少 。解剖 时发 现该 组 胃组 织

质地松软 , 缺少 张力。

基 本恢复至正 常。

2. 4 病 理组织学 结果 各 模型组胃组 织病理改 变参见附 图 5~26。病理改变描述见表 2。

3 讨 论

笔者参考有关文献 , 采用 了一次 造模 的方式。 实验结 果显示 , 这些 方法 均可 造成 不同 程度 的急 性 胃黏 膜损 伤。 在造模后第 8天 , 得 到不同 程度的 恢复。不同 模型 的特征 如下。

(1) 禁 食 对 照组。 与 其 他 造 模 组 一 致 , 该 组 共 禁 食 36h 。禁食结束后 , 胃黏膜出现了一定程度的病理改变。该 结果提示 , 禁食 是不 同胃 溃疡模 型形 成的 参与 因素。 (2) 水浸拘束法胃黏膜病变 性质为 急性出 血性浅 表性胃 炎 , 亦 即通常所说的应激性溃疡。该 法成模 率高 , 几乎达 100%, 胃体痉挛 , 个体间病 理改变 十分接 近 , 造 模方便 , 可 作为应 激溃疡模型的首 选。 (3) 假手 术对 照组 , 在 造模 当日 部分 小鼠胃黏膜也出现了炎细胞浸润、 充血等病理改变 , 类似于 临床大手术、 严重 创伤 等应 激因素 引起 的应激 性胃 炎 [13]。 因此 , 与禁食一样 , 手术本 身也参 与了胃 溃疡模 型的 形成。 相应的 , 假手术可以 用作应 激性溃 疡模型。但 该方 法较为 复杂 , 干预因素多 , 似不宜推 广。 (4) 乙 酸造模。该 方法采 用浸透乙酸的滤纸直接 接触胃 前壁浆 膜面窦 体交结 处 , 造 成胃体浆膜层、 肌层 不同程度的灼伤 , 黏膜层也有病变。有 文献认为 , 该法可造 成慢性 溃疡 , 持续时 间久 , 病理 组织学 的改变类似人类溃疡 , 比较 适合于 治疗性给 药研究

[5]

。但

是 , 该法与临床溃疡 发生机 制不同 , 造模 不便 , 易于 造成动 物死亡 , 因此 不宜用 作常 规胃 溃疡模 型。 (5) 磷 酸组 胺造

模成模率 低 , 胃组织病理改变程度较轻 , 是组胺剂量不够还 是小鼠对之不敏 感 , 尚待研 究。 (6) 消 炎痛 造模 的特 点是

造模后第 2日 , 动物的精神状态开始出现不振 , 继而陆续出 现死亡 , 造模后第 8日 , 溃疡 的恢复 较差。 (7) 利血平 造模 的特点是 造模后 , 动物活动明显减弱 , 持续 4日左右才见恢 复 , 且该组小鼠普遍消瘦 , 饮水、 摄食减少。造模后第 8日 , 溃疡的恢复较差。 (8) 乙醇法造模 当日 , 胃体松 软 , 缺 少张 力 , 与镜下水肿一致 , 第 8日 病理改变有所改善。但该组动 物造模后第 2日出 现大部 分死亡 , 推测 与乙醇 浓度及 剂量 有关 , 属于酒精中毒的表现。鉴此 , 须考虑降低乙醇浓度。 胃溃疡不同模型的造模 当日 , 小鼠胃 壁和胃 黏膜 层均 出现了一 定的病理改变 , 但典型的溃疡表现不多 , 大多为黏 膜局部或弥漫性不同程度的炎症、 水肿、 出血 , 或黏膜萎 缩、 坏死和脱落。病变发生部位浅表为主 , 多至黏膜上皮层 , 部 分深达黏膜腺体 , 一 般不 超过 黏膜 肌层 , 个 别 累及 黏膜 下 层 , 仅乙酸法使得胃壁 4层结构均受损。因此 , 从严格意义 上讲 , 属于急性胃黏膜 病变性 质 , 可 以模拟 急性胃 炎 , 或部 分急性胃溃疡。

表 2 造模后第 1日及 第 8日胃前壁病理 组织学改变

组别

第 1日 (图 5-21)

第 8日 (图 22-26)

正常 对照组

100倍镜下 见正常胃 壁浆膜层 、 肌 层、 黏 膜下层 、 黏膜层 4层 结构清 晰 , 400倍 镜下

黏膜 层 , 腺体排列整 齐 , 主细胞、 壁细胞 形态正常 , 胃内 容物少 , 清洁 , 有少 量脱落胃 上皮 细胞与黏 液的混和 物。见图 5~7。 禁食 对照组

胃壁 四层结构 仍然完整 , 但黏 膜结构稍 显松散 ,

胃腔 面少量黏 膜脱落 , 在部 分 黏液 一侧 有凝 血 块。 见图 8。

基 本恢复至 正常状态 。

水浸 拘束组

胃黏 膜受损并 脱落 , 伴随有出 血块、 脱落的 坏死

黏膜 , 部 分区域出现 炎细胞。 见图 9~10。 同 上。

乙 酸组

乙酸 直接作用 于浆膜层 后 , 形 态发生变 化 , 不似 正常 小鼠浆膜 层般平滑 , 肌层 、 黏 膜下层出 现水

肿 , 肌细 胞形态更加 狭长 。黏 膜层 腺体 结构 被

破坏 , 部 分细胞形态 不完 整 , 细胞 核 裸露 , 黏 膜 上皮 有脱落。 见图 11~13。

全 部死亡 , 未 能观 察到 恢 复阶

段 的改变。

假 手术 对 照组

与肉 眼观察不 完全一致 , 且个 体间差异 较大 ; 部

分小 鼠胃黏膜 层部分区 域结 构破 坏 紊乱 , 有 少

量炎 细胞浸 润 , 而 部分 小鼠 胃 黏膜 未 见异 常。 见图 14。

基 本恢复至 正常状态 。

磷酸 组胺组

黏膜 固有层腺 体排列尚 整齐 , 偶见 黏膜 上皮 有

大量 脱落。见 图 15。

基 本恢复正 常状态。 消痰痛组

胃黏 膜固有层 腺体尚整 齐 , 偶 见黏 膜上 皮有 大

量脱 落。见图 16~18。

急 性期病 理得 到部 分改 善 , 但

仍 然见部 分细 胞核 固缩 , 胃壁 细 胞嗜酸 性染 色减 弱 , 黏 膜有 脱 落。见图 22。

利血平组

约有 一半小鼠 胃黏膜结 构紊 乱 , 胃 壁细 胞减 少

且嗜 酸性染色 减弱 , 黏膜上皮 多有脱落 , 部 分区

域有 少量炎细 胞。见图 19。

部 分区域 病理 未见 改善 , 胃黏

膜 下层水肿 , 黏 膜层萎缩、 坏死

和 脱落 。个 别 仍 有 少 量炎 细

胞 。见图 23~24。

乙 醇组

胃黏 膜损伤明 显 , 突 出表 现在 黏膜 下 水肿。 部

分胃 黏膜结构 紊乱、 萎缩 , 腺 体被 大 量破 坏 , 大

量坏 死的黏膜 脱落。见 图 20~21。

黏 膜下层 水肿 程度 有所 减 轻 ,

腺 体排列 整齐 程度 好转 , 但仍

存 在部 分 黏膜 上 皮 蒌 缩 和脱

落 。见图 25~26

553

中 华 中 医 药 学

刊

中

华 中 医 药

学

刊

结合模型一次造模的方式及胃黏膜病理改变的性质分

析 , 其中禁食对照、 水浸拘束、 假手术对照组均恢复至正常 , 主要由应激形成 , 模型持续时 间短 , 可以用于预防应激性溃 疡的实验 ; 而消炎痛 、 利 血平、 乙醇等 模型 , 恢复 慢 , 部分病 理改变仍存在 , 可以用于急性 胃炎或急性溃疡的治疗实验。 磷酸组胺病理改变程度 轻 , 乙酸组 由于小鼠 损伤太 大陆续 全部死亡 , 未能看到胃黏膜病 变的慢性恢复过程 , 两种方法 似不宜作为常规小鼠胃溃疡模型。 参考文献

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卫生出版社 , 2002:1331-1332.

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价 [M].杜冠华 , 译 . 北京 :科学出版社 , 2001:638-641. [3] 方厚华 . 医学 实验 模型动 物 [M].北 京 :军 事医 学科 学出 版

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民卫生出版社 , 2003, 8:167-168.

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.

555

范文四：常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异

常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差

异

摘 要,目的,观察常见胃溃疡模型小鼠胃的组织病理变化,评价和比较各模型。方法,以昆明小鼠为实验对象,选取水浸拘束、乙酸、磷酸组胺、消炎痛、利血平、乙醇等6种方法,同步制作胃溃疡模型,并设置正常、禁食、假手术等对照组。在造模当天(第1天)及第8天取胃组织作病理组织学观察。结果,禁食、水浸拘束、假手术等造模当日,小鼠胃出现明显的病理变化,第8天基本消失,持续时间短,消炎痛、利血平、乙醇造模当日,小鼠胃出现明显的病理变化,至第8天其病理改变仍未完全消失,磷酸组胺病变程度轻且易于恢复,乙酸造模对动物损伤重,易致死亡。以上病理变化,大多为黏膜局部或弥漫性炎症、水肿、出血,或黏膜萎缩、坏死和脱落,属急性胃炎或部分急性胃溃疡性质。结论,水浸拘束、消炎痛、利血平、乙醇等造模成模率高,假手术、禁食次之,而磷酸组胺和乙酸造模似不宜作为小鼠常规胃溃疡模型。

关键词,小鼠,胃溃疡,胃黏膜病变,水浸拘束,乙酸,消炎痛,利血平,乙醇,假手术,禁食

1

中图分类号,R-33

文献标识码,A

文章编号,1673-7717(2008)03-0551-05

The Pathological Change and Difference of the Common Used Gastrelcosis Mice Models

LU Wen-li,FANG Zhao-qin,HOU Li,PAN Zhi-qiang,

LIU Xiao-mei

(Basal Medical College,Shanghai Universite of

Chinese Medicine,Shanghai 201203,China)

Abstract,Objective,To observe the pathological change of the common used gastric ucer mice model,to

appraise and compare these various models.Methods,We

select six methods,stress,acetic acid,histamine

phosphate,antifani,apoplon,alcohol to make gastric ulcer model simultaneously,and set up the normal,abrosia,

and sham operated control groups.We get the stomach to observe pathohistology on the 1st and 8th day.Results,On

the 1st day,there were conspicuous pathological changes in the abrosia,stress and sham operated groups mice stomach which disappeared on the eighth day.In the antifani,apoplon and alcohol groups obvious pathological changes were found on the 1st day and lasted till the 8th

2

day.The histamine phosphate group’s pathological changes were slight and easy to recover.The acetic acid seriously damaged the animal and easily to resulted in death.The Above mentioned pathological changes,which

were mostly mucous membrane partial or diffuse inflammation,dropsy,hemorrhage,or the mucous

membrane atrophia,the necrosis and amotic,were the

acute gastritis or the partial acute gastric ulcer.Conclusion,

The stress,antifani,apoplon,and alcohol model highly

successful ratio.The abrosia and sham operated control groups were the next,but the histamine phosphate and the acetic acid group seem not to suit the mouse conventional gashtric ulcer model.

Keywords,mice,gastric ulcer,gastric mucosal lesion,

stress,acetic acid,antifani,apoplon,alcohol,sham

operation,abrosia

胃溃疡是临床常见疾病。为了开展药效及治疗机制的研

究,一些常用实验性胃溃疡小鼠模型被广泛引用。鉴于这些

模型的造模方法不同,所造成的模型是否稳定,有什么特点

和差异,如何合理地择用?为此,笔者在文献报道的基础上

[1-12],选取了水浸拘束法、乙酸法、磷酸组胺法、消炎痛

法、利血平法、乙醇法6种不同的胃溃疡疾病进行同步比较

3

实验,同时设置正常、禁食、假手术等3组对照。结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 实验动物 清洁级昆明小鼠,体重(24.35?1.06)g,雄

性,152只,由中国科学院上海实验动物中心提供,合格证号,SCXK(沪)2003-0003。

1.2 主要仪器设备 DK-S22型恒温水浴箱,小鼠固定器,820 rotary microtome,奥林巴斯CKX41/CKX31组织培养用显微镜及成像系统,NIKON Coolpix 4500数码相机。

1.3 药物或试剂 磷酸组胺,BR,5g,批号62014032,国药集团化学试剂有限公司。用时配制成8mg/mL水溶液,消炎痛,25mg/片,批号060201,准字号H31020148,中美合资上海辛帕斯制药有限公司。用时溶于5%NaHCO,3溶液[11-12],浓度为5mg/mL,利血平注射液,lmL,1mg/支,批号050302,上海医科大学红旗制药厂,无水乙醇,AR,500mL/瓶,批号KJ20060509,国药集团化学试剂有限公司,冰醋酸,AR,500mL/瓶,批号T2006430,国药集团化学试剂有限公司,生理盐水,500mL/瓶,批号06110202,准字号H31021918,上海华源长富药业有限公司,碳酸氢钠,AR,500g/瓶,批号051102,上海实验试剂有限公司,乙醚,AR,500mL/瓶,批号CY050104,国药集团化学试剂有限公司,注射用青霉素钠,0.5g/80万U,

4

批号060902,准字号H31020952,上海新先锋药业有限公司。

1.4 分组及造模方法[1-12] 152只小鼠,随机分为9组。除正常对照组外,其余8组于第0天上午7,00开始禁食不禁水至第1天上午7,00,达24h。第1天早晨7,00开始,8组按时间安排依次开始造模如下。

(1)正常对照组(16只),正常饮水、摄食。

(2)禁食对照组(16只),正常饮水,继续禁食至晚19,00。

(3)水浸拘束法组(16只),早晨7,00开始,将各小鼠置于小鼠固定器中,限制活动,头朝上立于23?左右的恒温水浴内,水面齐剑突,至晚19,00。

(4)乙酸组(20只),早晨8,00,乙醚吸入麻醉小鼠,无菌手术开腹,暴露胃,在腺胃部前壁窦体交结处浆膜面同一部位(避开血管),用浸有冰醋酸,边长为5mm的正方形滤纸接触2次,每次30s(秒表计时),然后还纳胃体,逐层缝合切口。

(5)假手术对照组(20只),方法同乙酸法组,滤纸浸生理盐水。乙酸及假手术组交替进行,早11,00前手术结束。

(6)磷酸组胺组(16只),上午11,00,灌胃8mg/mL磷酸组胺溶液0.8mg/10g 1次。

(7)消炎痛组(16只),下午13,00,皮下注射5mg/mL

5

消炎痛NaHCO,3溶液0.3mg/10g 1次。

(8)利血平组(16只),下午13,00,皮下注射1mg/mL利血平注射液0.1mg/10g 1次。

(9)乙醇组(16只),下午18,00,灌胃无水乙醇0.1mL/10g1次。

以上至晚19,00全部造模结束,造模期间8组仍禁食不禁水。造模结束后所有组别动物各随机分为两组,一半处死,另一半恢复常规饮水摄食,观察其自然恢复及证候演变,至第8天全部处死。乙酸及假手术组术后后肢肌注青霉素钠40万U/kg,连续3天。

1.5 实验室指标 (1)观察造模后动物的存活及一般情况。(2)胃整体称重,从幽门和贲门部截取造模第1、8日整个胃,入bouin液固定约12h左右,用双面刀片沿胃大弯剖一开口,用吸管取bouin液冲洗胃内壁,继续固定。固定至24h后,入70%乙醇24h,再入50%乙醇24h,入30%乙醇24h后取出称重。(3)胃前内壁黏膜肉眼观察,上法胃整体称重后,分离前后壁,观察前壁内侧面。(4)取近胃窦上部胃体前壁制作病理切片,常规HE染色,光镜下观察。

2 实验结果

2.1 动物存活及一般情况 第1日19,00全部造模结束后,乙酸组有约一半动物状况很差,假手术组因麻醉过量死亡2只,1只状态差,利血平、消炎痛及乙醇组各死亡1只。

6

随机平均分组后,一半动物处死,进行病理检测,另一半动物8日内存活及一般情况,(1)正常对照、禁食对照、水浸拘束及磷酸组胺模型未出现动物死亡,(2)乙酸组动物状态差,至第4天陆续全部死亡,(3)假手术在造模当日因麻醉过量死亡1只,另1只状态较差并于次日死亡,(4)消炎痛组8只陆续死亡至3只,(5)利血平组第2日死亡1只,(6)乙醇组造模后次日死亡6只。总之,乙酸、消炎痛及乙醇等3种模型死亡率较高。如图1。

2.2 胃整体称重结果 称重结果如图2。提示造模第1日,乙酸和乙醇刺激后,胃组织水肿,重量有增加趋势,而利血平组相反,胃组织重量减轻,自然恢复1周后,第8日各组胃重水平均有升高趋势,且各组间胃轻重趋势基本同造模当日。利血平组胃组织重量轻,与该组动物造模后饮水摄食量减少显著一致。

图3,4可见,第1日,总体上,不同胃溃疡造模后,与正常对照组(第1组)不同,其他各组别胃黏膜表现出不同程度的损伤,出现黄褐色着染和不同程度黑褐色的出血点。第8日,各组胃黏膜损伤改变明显减弱。具体情况见表1。

2.4 病理组织学结果 各模型组胃组织病理改变参见附图5,26。病理改变描述见表2。

3 讨 论

笔者参考有关文献,采用了一次造模的方式。实验结果

7

显示,这些方法均可造成不同程度的急性胃黏膜损伤。在造模后第8天,得到不同程度的恢复。不同模型的特征如下。

(1)禁食对照组。与其他造模组一致,该组共禁食36h。禁食结束后,胃黏膜出现了一定程度的病理改变。该结果提示,禁食是不同胃溃疡模型形成的参与因素。(2)水浸拘束法胃黏膜病变性质为急性出血性浅表性胃炎,亦即通常所说的应激性溃疡。该法成模率高,几乎达100%,胃体痉挛,个体间病理改变十分接近,造模方便,可作为应激溃疡模型的首选。(3)假手术对照组,在造模当日部分小鼠胃黏膜也出现了炎细胞浸润、充血等病理改变,类似于临床大手术、严重创伤等应激因素引起的应激性胃炎[13]。因此,与禁食一样,手术本身也参与了胃溃疡模型的形成。相应的,假手术可以用作应激性溃疡模型。但该方法较为复杂,干预因素多,似不宜推广。(4)乙酸造模。该方法采用浸透乙酸的滤纸直接接触胃前壁浆膜面窦体交结处,造成胃体浆膜层、肌层不同程度的灼伤,黏膜层也有病变。有文献认为,该法可造成慢性溃疡,持续时间久,病理组织学的改变类似人类溃疡,比较适合于治疗性给药研究[5]。但是,该法与临床溃疡发生机制不同,造模不便,易于造成动物死亡,因此不宜用作常规胃溃疡模型。(5)磷酸组胺造模成模率低,胃组织病理改变程度较轻,是组胺剂量不够还是小鼠对之不敏感,尚待研究。(6)消炎痛造模的特点是造模后第2日,动物的精神状态开始出

8

现不振,继而陆续出现死亡,造模后第8日,溃疡的恢复较差。(7)利血平造模的特点是造模后,动物活动明显减弱,持续4日左右才见恢复,且该组小鼠普遍消瘦,饮水、摄食减少。造模后第8日,溃疡的恢复较差。(8)乙醇法造模当日,胃体松软,缺少张力,与镜下水肿一致,第8日病理改变有所改善。但该组动物造模后第2日出现大部分死亡,推测与乙醇浓度及剂量有关,属于酒精中毒的表现。鉴此,须考虑降低乙醇浓度。

胃溃疡不同模型的造模当日,小鼠胃壁和胃黏膜层均出现了一定的病理改变,但典型的溃疡表现不多,大多为黏膜局部或弥漫性不同程度的炎症、水肿、出血,或黏膜萎缩、坏死和脱落。病变发生部位浅表为主,多至黏膜上皮层,部分深达黏膜腺体,一般不超过黏膜肌层,个别累及黏膜下层,仅乙酸法使得胃壁4层结构均受损。因此,从严格意义上讲,属于急性胃黏膜病变性质,可以模拟急性胃炎,或部分急性胃溃疡。

结合模型一次造模的方式及胃黏膜病理改变的性质分析,其中禁食对照、水浸拘束、假手术对照组均恢复至正常,主要由应激形成,模型持续时间短,可以用于预防应激性溃疡的实验,而消炎痛、利血平、乙醇等模型,恢复慢,部分病理改变仍存在,可以用于急性胃炎或急性溃疡的治疗实

9

验。磷酸组胺病理改变程度轻,乙酸组由于小鼠损伤太大陆续全部死亡,未能看到胃黏膜病变的慢性恢复过程,两种方法似不宜作为常规小鼠胃溃疡模型。

参考文献

[1] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理学实验方法[M].3版.北京,人民卫生出版社,2002,1331-1332.

[2] H.G沃格尔[德].药理学实验指南―新药发现和药理学评价[M].杜冠华,译.北京,科学出版社,2001,638-641.

[3] 方厚华.医学实验模型动物[M].北京,军事医学科学出版社,2002,116-119.

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[5] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海,上海科技出版社,2006,493-499.

[6] 施新猷.现代医学实验动物学[M].北京,人民军医出版社,2000,468-469.

[7] 蒋毅萍,吴航宇,朱汉,等.胃可宁对实验性胃溃疡的影响[J].中药药理与临床,2003,19(5),37-38.

[8] 赵明宏,郭涛,刘玉兰,等.安胃微丸抗胃溃疡作用[J].沈阳药科大学学报,2002,19(2),118-121.

[9] 陈奇英,黄明,徐晓霞,等.法莫替丁分散片对实验性胃溃疡的防治[J].华西药学杂志,2001,16(3),181-182.

10

[10] 谢振家,黄美星.荆花胃康胶丸对实验性胃溃疡及幽门螺杆菌的抑制作用[J].中国新药杂志,2001,10(3),221-223.

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[13] 于皆平,王小众,张介眉.胃部疾病的诊断和治疗[M].北京,人民卫生出版社,2004,297,301.

11

范文五：常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异

第２６卷第３期

２００

中华中医药学刊

ＣＨＩＮＥＳＥ

ＡＲＣＨＩＶＥＳ

ＯＦ

ＴＲＡＤＩＴＩＯＮＡＬ

ＣＨＩＮＥＳＥ

ＭＥＤＩＣＩＮＥ

Ｖ０１．２６Ｎｏ．３Ｍ叫．２０Ｏ８

８年３月

常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异

卢文丽，方肇勤，侯俐，潘志强，刘小美

（上海中医药大学基础医学院，上海２０１２０３）

摘要：目的：观察常见胃溃疡模型小鼠胃的组织病理变化，评价和比较各模型。方法：以昆明小鼠为实验对象。选取水浸拘束、乙酸、磷酸组胺、消炎痛、剃血平、乙醇等６种方法，同步制作胃溃疡模型，并设置正常、禁食、假手术等对照组。在造模当天（第ｌ天）及第８天取胃组织作病理组织学观察。结果：禁食、水浸拘束、假手术等造模当日。小鼠胃出现明显的病理变化，第８天基本消失，持续时间短；消炎痛、利血平、乙醇造模当日，小鼠胃出现明显的病理变化，至第８天其病理改变仍未完全消失；磷酸组胺病变程度轻且易于恢复；乙酸遣模对动物损伤重，易致死亡。以上病理变化，大多为黏膜局部或弥漫性炎症、水肿、出血，或黏膜萎缩、坏死和脱落，属急性胃炎或部分急性胃溃疡性质。结论：水浸拘束、消炎痛、利血平、乙醇等造模成模率高，假手术、禁食次之。而磷酸组胺和乙酸造模似不宜作为小鼠常规胃溃疡模型。

关键词：小鼠；胃溃疡；胃黏膜病变；水浸拘束；乙酸；消炎痛；利血平；乙醇；假手术；禁食中图分类号：Ｒ一３３

文献标识码：Ａ

文章编号：１６７３—７７１７（２００８）０３—０５５１—０５

ＴｈｅＰａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌＣｈａｎｇｅａｎｄＤｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆｔｈｅＣｏｍｍｏｎＵｓｅｄＧａｓｔｒｅｌｃｏｓｉｓＭｉｃｅＭｏｄｅｌｓ

ＬＵ

Ｗｅｎ－ｌｉ，ＦＡＮＧＺｈａｏ－ｑｉｎ，ＨＯＵＬｉ，ＰＡＮＺｈｉ－ｑｉａｎｇ，ＬＩＵＸｉａｏ－ｍｅｉ

（ＢａｓａｌＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ．Ｓｈｕｓｈ＝ＵｎｉｖｅｒｅｉｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈ＝２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）

ａｎｄ

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０咖ｃｔｉｖｅ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅ

ｔｏ

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ｐａｒｅｔｈｅｓｅｖａｒｉｏｕｓｍｏｄｅｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｗｅｓｅｌｅｃｔｓｉｘｍｅｔｈｏｄｓ：ｓｔｒ鹊ｓ，ａｃｅｔｉｃａｃｉｄ，ｈｉｓｔａｍｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ａｎｔｉｆａｎｉ，ａｌＰ

ｉｎａｋｅｇａｓｔｒｉｃｕｌｃｅｒ

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ｍｏｄｅｌｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ，ａｎｄ

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Ｉｌｐｔｈｅｎｏｒｍａｌ，ａｂｒｏｓｉａ，ａｎｄｓｈａｍｏｐｅｒａｔｅｄｃｏｎｔｒｏｌ

ｇｒｏｕｐｓ．Ｗｅｇｅｔｔｈｅｓｔｏｍａｃｈ

ｏｂｓｅｒｖｅｐａｔｈｏｈｉｓｔｏｌｏｇｙ

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ｔｈｅＩｓｔｄａｙａｎｄｌａｓｔｅｄｆｉｌｌｔｈｅ

ｇｒｏｕｐ台ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓ

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ｔｏｒｅｃｏｖｅｒ．Ｔｈｅａｃｅｔｉｃ

ａｃｉｄｓｅｒｉｏｕｓｌｙ

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ｏｒ

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ｒｅｓｕｌｔｏｄｉｎｄｅａｔｈ．ＴｈｅＡｂｏｖｅｍｅｎｔｉｏｎｅｄｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｍｏｓｔｌｙｍｕｃｏｕｓ

ｔｈｅｍｕｃｏｕｓｍｅｍｂｒａｎｅａｔｒｏｐｈｉａ，ｔｈｅｎｅｃｒｏｓｉｓａｎｄａｍｏｔｉｃ，

ｍｅｎｌｂｒｓｎｅｐａｒｔｉａｌ

ｗｅｒｅ

ｄｉｆｆｕｓｅｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ｄｒｏｐｓｙ，ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ，ｏｒ

ｏｒ

ｔｈｅａｃｕｔｅｇａｓｔｒｉｔｉｓ

ｔｈｅ

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ｕｌｃｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｓｔｒｅｓｓ，ａｎｔｌｆａｎｉ，ａｐｏｐｌｏｎ，ａｎｄａｌｃｏｈｏｌｍｏｄｅｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｔｈｅｎｅｘｔ．ｂｕｔｔｈｅｈｉｓｔａｍｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔｅａｎｄｔｈｅ

ｈｉｇｈｌｙａｃｅｔｉｃ

ｓｕｃｏｅｓ削ｒａｔｉｏ．Ｔｈｅａｂｒｏｓｉａ

ａｃｉｄｇｒｏｕｐｓｅｅｍ

ｎｏｔ

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ｍｏｕｓｅｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｇａｓｈｔｒ／ｃｕｌｃｅｒｍｏｄｅｌ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｍｉｃｅ；ｇａｓｔｒｉｃｕｌｃｅｒ；ｇａｓｔｒｉｃｍｕｃｏｓａｌｌｅｓｉｏｎ；ｓｔｒｅｓｓ；ａｃｅｔｉｃ

ａｂｒｏｓｉａ

ａｃｉｄ；ａｎｔｆｆａｎｉ；ａｐｏｐｌｏｎ；ａｌｅｏｈｄ；ｓｌ姗ｏｐｅｒａｔｉｏｎ；

胃溃疡是临床常见疾病。为了开展药效及治疗机制的研究，一些常用实验性胃溃疡小鼠模型被广泛引用。鉴于这些模型的造模方法不同，所造成的模型是否稳定，有什么特点和差异，如何合理地择用？为此，笔者在文献报道的基础上‘１．１引。选取了水浸拘束法、乙酸法、磷酸组胺法、消炎痛法、利血平法、乙醇法６种不同的胃溃疡疾病进行同步比

较实验，同时设置正常、禁食、假手术等３组对照。结果报道如下。１材料和方法

１．１实验动物清洁级昆明小鼠，体重（２４．３５４－１．０６）ｇ，雄性，１５２只，由中国科学院上海实验动物中心提供，合格证号：ＳＣＸＫ（沪）２００３—０００３。

１．２

由

—————————————————一

收稿日期：２００ｒ７—１０—１６

基金项目：上海市科委国际合作项目（０６４３０９０５２）；上海市卫生局

资助项目（２００４Ｊ００３Ａ）；上海高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金项目（２００６１１）

作者简介：卢文丽（１９５１一）。女，湖北人，助教，硕士。从事中医基础

理论及实验研究。

通讯作者：方肇勤（１９５５一）．男，上海人，教授，博士研究生导师。

Ｔｅｌ：０２１—５１３２２１１５，Ｅ—ｍａｉｌ：川ｈｎｇ＠ｓｈｌ６３ｄ．８ｔ＾ｎｅｔ．∞ｏ

主要仪器设备ＤＫ一￥２２型恒温水浴箱，小鼠固定

ｒｏｔａｒｙ

华

器，８２０ｍｉｃｒｏｔｏｍｅ，奥林巴斯ＣＫＸ４１／ＣＫＸ３１组织培养

Ｃｏｏｌｐｉｘ

老

药

用显微镜及成像系统，ＮＩＫＯＮ４５００数码相机。

１．３药物或试剂磷酸组胺：ＢＲ，５９，批号６２０１４０３２，国药■；■

集团化学试剂有限公司。用时配制成８ｍｇ／ｍＬ水溶液；消——

炎痛：２５ｍｇ／片，批号０６０２０１，准字号Ｈ３１０２０１４８，中美合资上海辛帕斯制药有限公司。用时溶于５％ＮａＨＣＯ，溶液‘¨。１引，浓度为５ｍｇ／ｍＬ；利血平注射液：］ｉｎＬ１１ｍｅ／支，批号０５０３０２，

雾“

第２６卷第３期

中华中医药学刊

¨．２６

Ｎｏ．３

２００

８年３月

ＣＨＩＮＥＳＥ

ＡＲＣＨＩＶＥＳ

ＯＦ

ＴＲＡＤＩＴＩＯＮＡＬ

ＣＨＩＮＥＳＥ

ＭＥＤＩＣＩＮＥ

Ｍａｉｒ．２００８

上海医科大学红旗制药厂；无水乙醇：Ａ１１．，５００ｍＬ／瓶，批号随机平均分组后，一半动物处死，进行病理检测；另一半动Ｋ１２００６０５０９。国药集团化学试剂有限公司；冰醋酸：ＡＲ，物８日内存活及一般情况：（１）正常对照、禁食对照、水浸５００ｍＩ，／瓶，批号１＂２００６４３０，国药集团化学试剂有限公司；生拘束及磷酸组胺模型未出现动物死亡；（２）乙酸组动物状理盐水：５（Ｘ）ｍＬ／瓶。批号０６１１０２０２，准字号Ｈ３１０２１９１８，上海态差，至第４天陆续全部死亡；（３）假手术在造模当日因麻华源长富药业有限公司；碳酸氢钠：ＡＲ，５００ｓ／瓶，批号醉过量死亡１只，另１只状态较差并于次日死亡；（４）消炎０５１１０２，上海实验试剂有限公司；乙醚：Ａ１１．，５００ｍＩ．／瓶，批号痛组８只陆续死亡至３只；（５）利血平组第２日死亡１只；ＣＹ０５０１０４。国药集团化学试剂有限公司；注射用青霉素钠：Ｏ．（６）乙醇组造模后次１３死亡６只。总之，乙酸、消炎痛及乙５ｓ／ｓｏ万ｕ，批号０６０９０２，准字号Ｈ３１０２１）９５２，上海新先锋药醇等３种模型死亡率较高。如图ｌ。

业有限公司。

１．４分组及造模方法【ｌ－１２１

１５２只小鼠，随机分为９组。

１０

除正常对照组外，其余８组于第０天上午７：００开始禁食不禁水至第ｌ天上午７：００，达２４ｈ。第１天早晨７：００开始，８一Ｂ．、Ａ＼一…一一

—．一一正常对用

—?一繁食对照一ｇ－－水浸拘束

文

—．●卜一乙艘法组按时间安排依次开始造模如下。

；６

（１）正常对照组（１６只）：正常饮水、摄食。

（２）禁食对照组（１６只）：正常饮水，继续禁食至晚

一利ｍ平１９：０００

２：一飞＝一三＝：

－ｄｉ（－一般手术对照

芒

—?一礴做｛儿胺｛幸４

一一消炎｜ｉｉ；

（３）水浸拘束法组（１６只）：早晨７：００开始，将各小鼠Ｏ

’ｊｊ＼．．……

一乙醉法

置于小鼠固定器中，限制活动，头朝上立于２３℃左右的恒Ｏ

ｌ

２

３

４

５

６

７

８

日期（ｄ）

温水浴内，水面齐剑突，至晚１９：００。

（４）乙酸组（２０只）：早晨８：００，乙醚吸人麻醉小鼠，无图１不同组别小鼠８天内存活情况

菌手术开腹，暴露胃，在腺胃部前壁窦体交结处浆膜面同一２．２

胃整体称重结果称重结果如图２。提示造模第１

部位（避开血管），用浸有冰醋酸，边长为５ｍｍ的正方形滤

日。乙酸和乙醇刺激后，胃组织水肿，重量有增加趋势，而利　纸接触２次，每次３０ｓ（秒表计时），然后还纳胃体，逐层缝

血平组相反，胃组织重量减轻；自然恢复１周后，第８日各合切口。

组胃重水平均有升高趋势，且各组间胃轻重趋势基本同造（５）假手术对照组（２０只）：方法同乙酸法组，滤纸浸模当日。利血平组胃组织重量轻，与该组动物造模后饮水生理盐水。乙酸及假手术组交替进行，早１ｌ：００前手术结摄食量减少显著一致。

束。

（６）磷酸组胺组（１６只）：上午１１：００，灌胃８ｍｇ／ｍＬ磷酸组胺溶液０．Ｓｍｓ，＇１０９１次。

（７）消炎痛组（１６只）：下午１３：００，皮下注射５ｍｇ／ｍＬ消炎痛ＮａＨＣ０３溶液０．３ｍｇ／１０９１次。

（８）利血平组（１６只）：下午１３：００，皮下注射１ｍｇ／ｍＬ利血平注射液０．１ｍｓ／１０９１次。

（９）乙醇组（１６只）：下午１８：００，灌胃无水乙醇Ｏ．１ｍＩ．／１０９１次。

以上至晚１９：００全部造模结束，造模期间８组仍禁食图２造模第１天和第８天各组胃重量

不禁水。造模结束后所有组别动物各随机分为两组，一半处死：另一半恢复常规饮水摄食，观察其自然恢复及证候演２．３各组胃前壁图见图３—４。

变，至第８天全部处死。乙酸及假手术组术后后肢肌注青霉素钠４０万Ｕ／ｋｇ，连续３天。１．５实验室指标

（１）观察造模后动物的存活及一般情

况。（２）胃整体称重：从幽门和贲门部截取造模第ｌ、８日整个胃。人ｂｏｕｉｎ液固定约１２ｈ左右，用双面刀片沿胃大弯

发

剖一开１：３，用吸管取ｂｏｕｉｎ液冲洗胃内壁，继续固定。固定‘、审

至２４ｈ后，人７０％乙醇２４ｈ，再人５０％乙醇２４ｈ，人３０％乙曼

醇２４ｈ后取出称重。（３）胃前内壁黏膜肉眼观察：上法胃二＝一．整体称重后，分离前后壁，观察前壁内侧面。（４）取近胃窦５５２

上部胃体前壁制作病理切片，常规ＨＥ染色，光镜下观察。生

２实验结果

刊

２．１动物存活及一般情况第１日１９：００全部造模结束注：以上各数字对应相应的绑町

注：以上各数字对应相应的组剐后，乙酸组有约一半动物状况很差，假手术组因麻醉过量死图３造模当日（第１日）

图４第８日胃前壁８组

胃前壁９组

（乙酸组全部死亡）

亡２只，１只状态差；利血平、消炎痛及乙醇组各死亡１只。

第２６卷第３期

２００８年３月

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医药学刊

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图３—４可见，第１日，总体上，不同胃溃疡造模后，与正常对照组（第ｌ组）不同，其他各组别胃黏膜表现出不同程度的损伤，出现黄褐色着染和不同程度黑褐色的出血点。第８日，各组胃黏膜损伤改变明显减弱。具体情况见表ｌ。

表ｌ造模第１日及第８日胃前壁肉眼观察结果

组别

第１日

第８日

鬻≥胃组织结构完整’大小、彤太正靓胃和张清洁

孵…个别胃丢失）

专鬻｝：鬟兰：：：嚣：笔篡麓纂鬈毖墓奉叛至碲。（第２组）周围有充●区域环绕。但该组胃体结构和胃壁厚度“…～…。

弯！？黧！竺孚！！譬耋敌在舢直区域’呈晏褐色，基本恢复至正富．（第３组）严重菠及弼整个黏膜。

一………７

ｆ；忑深黑褐色，贯穿胃壁，严重醒差异大．＿些未被乙全部死亡、印’砸７酸辋澈的部位，部分区域黏膜也出现了病变。

詈鬻牯膜翩改变类似鞭组稚

基本倾至正乱

鼍慧太多胃组织虢嚷似有轻度捏伤，有散在柏褐色着染姜：善ｉ鬻艄组黼黜魍础珊富瑟雾篇躺’

勰黜艄…嬲嗽蹴。：筹蕊篙最

（第９组）质地橙软，缺步张力。

，熙！艘鬯！点步肩黼发琨该组朝织基本溉魄…一…一

２．４病理组织学结果各模型组胃组织病理改变参见附图５—２６。病理改变描述见表２。３讨论

笔者参考有关文献，采用了一次造模的方式。实验结果显示，这些方法均可造成不同程度的急性胃黏膜损伤。在造模后第８天，得到不同程度的恢复。不同模型的特征如下。

（Ｉ）禁食对照组。与其他造模组一致，该组共禁食３６ｈ。禁食结束后，胃黏膜出现了一定程度的病理改变。该结果提示，禁食是不同胃溃疡模型形成的参与因素。（２）水浸拘束法胃黏膜病变性质为急性出血性浅表性胃炎，亦即通常所说的应激性溃疡。该法成模率高，几乎达１００％，胃体痉挛，个体问病理改变十分接近，造模方便，可作为应激溃疡模型的首选。（３）假手术对照组，在造模当日部分小鼠胃黏膜也出现了炎细胞浸润、充血等病理改变，类似于临床大手术、严重创伤等应激因素引起的应激性胃炎¨３１。因此，与禁食一样，手术本身也参与了胃溃疡模型的形成。相应的，假手术可以用作应激性溃疡模型。但该方法较为复杂，干预因素多，似不宜推广。（４）乙酸造模。该方法采用浸透乙酸的滤纸直接接触胃前壁浆膜面窦体交结处，造成胃体浆膜层、肌层不同程度的灼伤，黏膜层也有病变。有文献认为，该法可造成慢性溃疡，持续时间久，病理组织学的改变类似人类溃疡，比较适合于治疗性给药研究瞪Ｊ。但是，该法与临床溃疡发生机制不同，造模不便，易于造成动物死亡。因此不宜用作常规胃溃疡模型。（５）磷酸组胺造

模成模率低，胃组织病理改变程度较轻，是组胺剂量不够还是小鼠对之不敏感，尚待研究。（６）消炎痛造模的特点是造模后第２日，动物的精神状态开始出现不振，继而陆续出现死亡，造模后第８日，溃疡的恢复较差。（７）利血平造模的特点是造模后，动物活动明显减弱，持续４日左右才见恢复，且该组小鼠普遍消瘦，饮水、摄食减少。造模后第８日，溃疡的恢复较差。（８）乙醇法造模当日，胃体松软，缺少张力，与镜下水肿一致，第８日病理改变有所改善。但该组动物造模后第２日出现大部分死亡，推测与乙醇浓度及剂量有关，属于酒精中毒的表现。鉴此，须考虑降低乙醇浓度。

胃溃疡不同模型的造模当日，小鼠胃壁和胃黏膜层均出现了一定的病理改变，但典型的溃疡表现不多，大多为黏膜局部或弥漫性不同程度的炎症、水肿、出血，或黏膜萎缩、坏死和脱落。病变发生部位浅表为主，多至黏膜上皮层，部分深达黏膜腺体，一般不超过黏膜肌层，个别累及黏膜下层，仅乙酸法使得胃壁４层结构均受损。因此，从严格意义上讲，属于急性胃黏膜病变性质，可以模拟急性胃炎，或部分急性胃溃疡。

表２造模后第１日及第８日胃前壁病理组织学改变

木琴糊：嚣毳慧麓！：蠢？篙曼翟橛Ｒ

Ｉ－。

乙酸组

乙酸组ｌ要ｊｉ重ｉｉ妻蚕｝！｝：曼黼至主主：篡：未能观察到恢复阶

肿，肌细胞形态更加狭长。黏膜层腺体结构被：：：。ｊ：……～…一…

破坏．部分细胞形卷不完整，细胞核裸露，黏膜

一…～

对照组量炎细胞缦润．而部分小鼠胃黏膜未见异常。…一…。一筹蒸篓：：：：：毳棼嚣蓍鬈籍鬈基本恢复至正常状态。

磷酸组胺组！：蒜？：：翟尚整齐’儡见黏膜上皮有基本恢复正常状态。

急性期病理得刊部分改善，但

消痰痛组：茎：？妻：警篙齐?儡见黏膜上皮有大

仍然见部分细胞核固缩，胃壁细胞嗜酸性染色减弱．黏膜有脱落。觅图２２。

约有一半小鼠胃黏膜结构紊乱，胃壁细胞减少靴域病！！墨苎胃黏利血平组

虞下层水肿，赫膜层萎缩、坏死

辜且嗜酸性染色碱弱，黏膜上皮多有脱落．部分区鬲

和脱落。个别仍有少量炎细

域有少量炎细胞。见图１９。

患。舳２３．２４。

三

医

黏膜下层水肿程度有所减轻．

５５，３

胃黏膜损伤明显．突出表＿现在黏膜下水肿。部乙醇组

分胃黏膜结构紊乱、萎缩．腺体被大量破坏。大盛体捧列整齐程度好转．但仍—‘。：：■

量坏死的黏瑛脱落。见图２０一２Ｉ。

存在部分黏膜上皮萎缩和脱采Ｉ

落。见图２５－２６

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结合模型一次造模的方式及胃黏膜病理改变的性质分析，其中禁食对照、水浸拘束、假手术对照组均恢复至正常，主要由应激形成，模型持续时间短，可以用于预防应激性溃疡的实验；而消炎痛、利血平、乙醇等模型，恢复慢，部分病理改变仍存在，可以用于急性胃炎或急性溃疡的治疗实验。磷酸组胺病理改变程度轻，乙酸组由于小鼠损伤太大陆续全部死亡，未能看到胃黏膜病变的慢性恢复过程，两种方法似不宜作为常规小鼠胃溃疡模型。参考文献

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５弱

学

刊

常见胃溃疡模型小鼠胃组织病理变化及差异

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

卢文丽， 方肇勤， 侯俐， 潘志强， 刘小美， LU Wen-li， FANG Zhao-qin， HOU Li，PAN Zhi-qiang， LIU Xiao-mei

上海中医药大学基础医学院,上海,201203

中华中医药学刊

CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE2008,26(3)1次

参考文献(13条)

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