范文一:蝙蝠蛾拟青霉活性成分与保健作用
蝙蝠蛾拟青霉活性成分与保健作用
冬虫夏草、人参、鹿茸被列为我国三大补药。早在1757年《本草从新》中就有“冬虫夏草,甘平保肺,益肾,补精髓,止血化痰,已劳咳,治膈症皆良”的记载。中医认为,虫草入肺肾二经,既能补肺阴,又能补肾阳,主治肾虚,阳萎遗精,腰膝酸痛,病后虚弱,久咳虚弱,劳咳痰血,自汗盗汗等,是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。现已发现冬虫夏草越来越多的神奇功效。冬虫夏草调节免疫系统功能,具有抑制肿瘤的作用;提高细胞能量代谢,具有抗疲劳作用;调节血脂,调节心率,调节血压,改善心脏功能;抗化学性肝损伤,减轻有毒物质对肝脏的损伤,预防肝纤维化,改善肝功能;扩张支气管,平喘,祛痰,防止肺气肿,改善肺功能;降低尿蛋白,减低血肌酐和血尿素氮,改善肾功能。冬虫夏草还具有直接抗病毒、调节中枢神经系统功能、调节性功能等作用。
蝙蝠蛾拟青霉是一种新鲜冬虫夏草中分离的虫草菌丝体,通常经过液体发酵培养,生产出大量菌丝粉。现已证明,蝙蝠蛾拟青霉的药理学作用与天然虫草基本相近。蝙蝠蛾拟青霉虫草菌丝粉的生物活性物质与天然虫草也基本相同,基本活性物质包括虫草多糖、虫草素、虫草酸、腺苷、麦角甾醇、蛋白质、维生素、微量元素等,可蝙蝠蛾拟青霉虫草菌丝粉的市场价格远远低于天然虫草。
虫草酸具降低颅压作用。虫草多糖是蝙蝠蛾拟青霉中主要生物活性物质之一,是由甘露糖、虫草素、腺苷、半乳糖、阿拉伯糖、木糖精、葡萄糖、岩藻糖组成的多聚糖。虫草多糖能调节机体非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫,提高人体免疫功能,并广泛运用于传染性疾病、自身免疫障碍性疾病预防与控制,癌症康复辅助治疗领域也有一定运用。虫草中另一重要生物活性物质是腺苷,腺苷具有扩张外周血管、降压、改善心肌供血、改善脑供血、抑制血小板凝聚等方面的作用,同时还具有镇静助眠、调节心率、改善内分泌、调节血糖、抗辐射、抗疲劳等功能。虫草素,又称虫草菌素,是一种天然的抗生素,具有抗肿瘤、抗菌抗病毒、调节免疫、调节血糖、抗氧化功能,1997年美国NCI已把虫草素引入18种抗癌新药进行开发研究。
www.yjyk.net 亚健康保健设计
范文二:中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉小鼠免疫功能调节作用的比较
2012年9月第22卷第9期
中国比较医学杂志
CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINESeptember,2012Vol.22No.9
檵檵檵檵殝研究报告
檵殝
檵殝
中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉小鼠免疫功能调节
作用的比较
1222
傅惠英,张利棕,寿旗扬,周卫民,屠
22
珏,陈民利
(1.浙江中医药大学第二临床医学院,杭州310053;2.浙江中医药大学动物实验研究中心,杭州310053)
【摘要】目的影响。结果
观察中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对小鼠免疫功能的影响。方法分别给予中国被毛孢和
测定观察对小鼠碳粒廓清功能、迟发性变态反应、溶血素抗体、淋巴细胞增殖和NK细胞活性等的蝙蝠蛾拟青霉后,
3.0g/kg中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉可显著提高小鼠吞噬指数和半数溶血值(P0.05)。
表1Tab.1
中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对小鼠体内碳
±s,n=10)粒廓清功能影响(x珋
TheeffectsincarbonclearancefunctionbyHSandPHinmice(x±s,n=10)珋
廓清功能影响
组别/Groups给药剂量/Drugs吞噬指数/Phagocyticindex正常对照组模型对照组HS低剂组HS高剂组PH低剂组PH高剂组CS组
NS20mL/kgNS20mL/kg1.0g/kg3.0g/kg1.0g/kg3.0g/kg1.0g/kg
0.680±0.8643.650±0.257△△3.831±0.3183.941±0.213*3.836±0.4053.959±0.229*3.977±0.330*
布板:96孔板每孔加细胞200μL,每一样重复4孔,同时设立空白对照。样品孔加ConA2.5μg/mL或LPS5.0μg/mL,37℃5%CO2培养箱中对照孔不加,培养72h。加入MTT10μL,继续培养4h,弃上清液,加入二甲基亚砜150μL,充分振荡,于570nm测OD值。计算刺激指数:刺激指数=加ConA或LPS细胞孔的平均OD值÷对照孔的平均OD值。1.2.4.2
NK细胞活性检测:取YAC-1靶细胞和效
加入96孔培养板应细胞各100μL(效靶比50∶1),
中;靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μL,靶细胞最大释放孔加靶细胞和1%NP40各100μL;设三个复孔,5%CO2培养箱中培于37℃、养4h,然后将96孔培养板以1500r/min离心5min,每孔吸取上清100μL置平底96孔培养板中,同时加入LDH基质液100μL,反应3min,每孔加入1mol/L的HCl30μL,在酶标仪490nm处测定光密%)=度值(OD)。NK细胞活性(NKcellactivity,(ODT-(ODS-ODE))/ODT×100%,ODT:靶细胞空ODS:样品光密度值,ODE:效应细胞空白光密度值,白光密度值。
ΔΔΔ
注:与正常对照组比较,P0.05)。给予不同剂量的中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉后均具有不同程度的抑制小鼠耳1.5g/kg中脾脏增大,与模型对照组比较,廓肿胀、
0.5国被毛孢的小鼠耳廓肿胀显著降低(P<0.01),g/kg中国被毛孢、0.5-1.5g/kg蝙蝠蛾拟青霉和0.5g/kg冬虫夏草对小鼠耳廓肿胀度均明显降低(P<0.05);1.5g/kg中国被毛孢、蝙蝠蛾拟青霉和0.5g/kg冬虫夏草能明显抑制脾脏增大的作用(P<0.05),1.5g/kg中国被毛孢高和0.5g/kg冬虫P<夏草能显著抑制胸腺增大的作用(P<0.01,0.05)。
±s,n=10)表2中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对DNFB诱导小鼠迟发型变态反应影响(x珋
Tab.2TheeffectsinDNFB-induceddelayedtypehypersensitivitybyHSandPHinmice(x±s,n=10)珋
组别/Groups正常对照组模型对照组HS低剂组HS高剂组PH低剂组PH高剂组CS组
给药剂量/Drugsdose
NS10mL/kgNS10mL/kg0.5g/kg1.5g/kg0.5g/kg1.5g/kg0.5g/kg
耳肿胀度/Ear
swelling(mg)0.47±3.5028.83±8.37△△20.94±3.59*
*
19.30±4.57*
脾脏系数/Spleenindex(mg/10g)37.74±7.3257.52±9.76△△50.28±6.0446.55±4.69*51.80±8.3447.23±11.2749.41±4.09
**
胸腺系数/Thymusindex(mg/10g)20.65±2.3122.04±4.2521.05±3.11
*
17.01±2.37*
21.11±5.77*20.03±6.0320.78±5.22
**
19.23±5.9419.30±5.3218.03±2.91*
*ΔΔΔ**
注:与正常对照组比较,P<0.05,P<0.01;与模型对照组比较,P<0.05,P<0.01
ΔΔ**
Note:comparedwithnormalcontrolgroup,ΔP<0.05,P<0.01;comparedwithmodelcontrolgroup,*P<0.05,P<0.01.
2.3中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对SRBC致小鼠由表3可见,与正常对照组比较,模型对照组的
2.4中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对小鼠脾淋巴细由表4可见,与空白对照组比较,中国被毛孢、
溶血素抗体生成影响
小鼠半数溶血值明显升高(P<0.01);与模型对照3.0g/kg中国被毛孢、1~3.0g/kg蝙蝠蛾组比较,
拟青霉和1.0g/kg冬虫夏草均能显著升高小鼠的1.0g/kg中国被毛孢对半数溶血值(P<0.01),
SRBC免疫小鼠的半数溶血值有明显升高作用(P<0.05)。
表3中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对SRBC致
±s,n=10)小鼠溶血素抗体生成影响(x珋
Tab.3TheeffectsinSRBC-inducedhemolysinantibodyby
±s,n=10)HSandPHinmice(x珋组别/Groups正常对照组模型对照组HS低剂组HS高剂组PH低剂组PH高剂组CS组
给药剂量/Drugsdose
NS20mL·kgNS20mL·kg
-1-1
胞增殖反应和NK细胞活性影响
蝙蝠蛾拟青霉高剂量(3.0g/kg)组和拟青霉低(1.0g/kg)剂量、冬虫夏草组均能显著提高T淋巴细胞增殖作用(P<0.01),中国被毛孢低剂量组也能显著提高T淋巴细胞增殖作用(P<0.05),但作用明显低于拟青霉低剂组(P<0.05);中国被毛孢、拟青霉、冬虫夏草低剂量组还能促进B淋巴细胞增殖作用,而中国被毛孢低剂量组无显著作用。与正常对照组比较,被毛孢高剂量组(3.0g/kg)和低剂量(1.0g/kg)以及冬虫夏草组均能显著性提高NK细被毛孢低剂量(1.0g/kg)提高胞活性(P<0.05),
NK细胞活性的作用明显强于蝙蝠蛾拟青霉低剂量(1.0g/kg),蝙蝠蛾拟青霉无论高、低剂量组对NK细胞活性均无显著性差异。3
讨论
中国被毛孢菌粉和蝙蝠蛾拟青酶已有很多文献报道均有免疫调节功能,其增强或抑制作用取决于机体的生理状态,即炎症迹象的程度,在无炎症冬虫夏草促进DCs向Th1型免疫,反过来,迹象时,
半数溶血值/HC50
53.06±1.44309.74±38.76△△341.94±29.26*
*
355.69±26.87**
354.84±28.66**
363.88±14.70**
350.60±13.80*
1.0g·kg-13.0g·kg-11.0g·kg-13.0g·kg-11.0g·kg-1
Δ
ΔΔ
注:与正常对照组比较,P<0.05,P<0.01;与模型对照组
***
比较,P<0.05,P<0.01.
ΔΔ
Note:comparedwithnormalcontrolgroup,ΔP<0.05,P<
**
0.01;comparedwithmodelcontrolgroup,P<0.05,*P<0.01.
±s,n=6)表4中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对小鼠脾淋巴细胞增殖反应和NK细胞活性影响(x珋
Tab.4TheeffectsinSplenocyteproliferationandNKcellactivitybyHSandPHinmice(x±s,n=6)珋
组别/Groups空白对照组
HS低剂组HS高剂组PH低剂组PH高剂组CS组
给药剂量/Drugsdose
NS20mL/kgHS1.0g/kg3.0g/kg1.0g/kg13.0g/kg1.0g/kg
T淋巴细胞SI值/TlymphocytesSIvalue2.355±0.3722.7853.1353.4383.6383.311
±0.404*
*
±0.390*
*a
±0.513*
*
±0.824*
*
±0.416*
B淋巴细胞SI值/BlymphocytesSIvalue1.546±0.3091.726±0.1841.8271.8051.9061.801
±0.136*±0.135*±0.253*±0.126*
NK细胞活性/NKcellactivity(%)21.09±4.5127.3827.6321.3823.54
±4.81*±4.88*±2.44a±4.30
26.94±5.24*
*a**
注:与空白对照组比较,P<0.05,P<0.01;与HS低剂组比较,P<0.05
**
Note:comparedwithblankcontrolgroup,*P<0.05,P<0.01;comparedwithmodelcontrolgroup,aP<0.05
就抑制Th1型超敏反应,在一定程度上体现了中医药对机体调控作用的特色
[9]
强作用蝙蝠蛾拟青霉略强于中国被毛孢。
参考文献:
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〔修回日期〕2012-08-25
。本文通过免疫药效
功能评价体系对中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉一同观察两者是否具有差异。进行免疫调节作用研究,
实验结果显示,中国被毛孢、蝙蝠蛾拟青霉和冬虫夏草均具有免疫调节作用,但两者在作用程强中国被和作用靶向性各有倾向。在免疫增强方面,毛孢和蝙蝠蛾拟青霉均可显著提高小鼠吞噬指数B淋巴细胞增殖和半数溶血值;同时也均能促进T、
能力,但蝙蝠蛾拟青霉作用要强于中国被毛孢;中而蝙蝠蛾拟国被毛孢还能显著提高NK细胞活性,
青霉在本研究中未发现。在免疫抑制方面,中国被毛孢除能抑制小鼠耳廓肿胀程度外,还能抑制小鼠脾脏和胸腺增大,而蝙蝠蛾拟青酶对胸腺增大无作用,中国被毛孢免疫抑制作用要强于蝙蝠蛾拟青霉。
因此,通过检测中国被毛孢菌粉和蝙蝠蛾拟青霉吞噬指数的影响及菌粉对先天性免疫系统NK活性、
对适应性免疫系统细胞免疫、体液免疫的影响,结果表明中国被毛孢、蝙蝠蛾拟青霉均具有免疫调节作用,但中国被毛孢免疫抑制作用及增强天然免疫系统作用要强于蝙蝠蛾拟青霉,而对适应性性免疫系统增(上接第16页)
提高,仅使造血干细胞数量增加,而不能增强其干细胞功能,生成淋巴细胞的能力降低,所以,老龄小
[7,8]
。本研究发现随年龄增鼠B淋巴细胞及T减少
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Cramp基因敲除后,长,骨髓长期造血干细胞(LT-HSC)减少,而骨髓多潜能造血祖细胞(MPP-HSC)增多;同时,骨髓中前体B淋巴细胞和未成熟B淋巴细胞减少,而成熟B淋巴细胞增多。这说明Cramp基因在骨髓造血干细胞及B淋巴细胞发育及其作用机制有待进一步深入衰老中具有重要作用,研究。
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〔修回日期〕2012-08-25
范文三:蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对阿霉素肾病大鼠的保护作用
生旦空堕匿笙盒苤查垫!!笙!旦笙i!鲞笙!塑!』!!!竺!!1211里!!!垫!!:!!!:i!:塑!:!
?957?
蝙蝠蛾拟青霉Cs4对阿霉素肾病大鼠的保护作用
王
娜
亓
敏梁素忍甄军晖刘春喜胡
昭
摘要目的研究蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对阿霉素肾病大鼠的保护作用。方法雄性SD大鼠24只,随
机分为正常组、模型组、蝙蝠蛾拟青霉Cs-4组、贝那普利组。采用左侧肾脏切除加尾静脉重复注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。术后1周蝙蝠蛾拟青霉Cs-4组给予蝙蝠蛾拟青霉Cs-4
500
mg/(kg?d)灌胃,
贝那普利组予贝那普利4mg/(kg?d)灌胃。用药4、8周后观察各组大鼠24h尿蛋白定量、血生化(BUN、Scr),8周后取肾组织于光镜、电镜下观察肾脏病理变化,应用免疫组化方法测定肾组织骨调素(OPN)、纤维连接蛋白(FN)、胶原IV(COL-IV)的表达。结果
蝙蝠蛾拟青霉Cs-4能减少阿霉素肾病大鼠尿蛋白,延
蝙蝠蛾拟青霉Cs-4可减少蛋白尿的排泄,纠正脂
缓BUN、Ser的上升,纠正脂代谢紊乱,与模型组相比差异显著(P<0.05);减轻肾小球系膜基质比(P<0.05),减少OPN、FN、COL—IV的表达(P<0.05)。结论
代谢紊乱,改善肾功能,抑制ECM的过度积聚,从而减轻肾脏病理损害,发挥其肾脏保护作用。
关键词
阿霉素肾痛;肾纤维化;蝙蝠蛾拟青霉Cs-4;贝那普利
ProtectiveEffectsofPaocilomycesHeplallCs-4onRatswithAddamycin-inducedNephropathyWANG
Na,QIMin.LIANGSu-ren,etalDepartmentofNephrology,QiluHospitalofShandongUniversity,Jinan(250012)
ABSTRACT
on
Objective
To
studytherenalprotectiveeffectOfPaecilomyceshepialiCs-4(Abbr.toCs-4)
Tty-fourmaleSDratswererandomlydivided
ratswith
adriamycin-induced
nephropathy(AIN).Methods
intofour
groups:thecontrolgroup(A),themodelgroup(B)。theBenazeprilgroup(C),andtheCs-4group
ratmodelwas
(D).AIN
establishedbyleftunilateralnephrectomyandrepeatedcaudalveininjectionofadriamy?
cin.GastricpeffusionofCs-4[500mg/(kg?d)]andBenazepril[4mg/(kg?d)]wasgivenrespectivelytothegroupsDandC.startingfrom1weekaftermodeling.Bloodbiochemicalindicesincludingblood
urea
nitrogenl
(BUN),serumcreatine(Scr)and
24一hour
urinaryprotein
excretion(24h-UP)wereassessed4and8weeks
aftermedication.Ratsweresacrificedattheendof8-weekmedication,theirrenaltissuewasgetforpathological
examinationwith
electric
microscopy,theexpressionsoffibronection(FN),collagenIV(COL-Ⅳ)and
byimmunohistochemistry.Results
Levels
OS-
teopont(OPN)in
renaltissuewereassessed
of24h?UP,BUN,Scr,
mesengialmatrixpercentage,aswellOPN,FN,COL一ⅣweresignificantlyloweringroupDthaningroupB(P<0.05);andthefatmetabolicdisorderwasimprovedingroupD(P<0.05).Conclusion
nalprotective
actionin
ratswithAIN
over
Cs-4displaysits
re-
throughreducingtheurinaryproteinexcretion,correctinglipidmetabolicdis?
Ofextracellularmatrix。improvingthepathologicaldamageofkidney,
turbance,inhibitingthe
thus
accumulation
restoringtherenalfunction.
KEYWORDS
adriamycin?inducednephropathy;kidneyfibrosis;PaecilomyceshepialiCs4;Benazepril
慢性肾脏病已成为威胁人类健康的重要疾病,在成年人中患病率ll%左右,其预后差、医疗费用高,已成为全球性的重要公共卫生问题…。蝙蝠蛾拟青霉Cs-4由新鲜冬虫夏草经人工发酵培养,获得发酵虫草菌丝体,是金水宝胶囊的主要成分,本实验通过改良的阿霉素(ADR)肾病大鼠模型¨’,探讨蝙蝠蛾拟
青霉cs_4对慢性肾脏病的肾脏保护作用,为临床治疗提供实验依据。
材料与方法
l1.1
300
材料
实验动物成年雄性SD大鼠24只,280—
g,购于北京维通利华实验动物技术有限公司,饲1.2药物与试剂
蝙蝠蛾拟青霉Cs-4购自江西
基金项目:国家科技支撑计划课题(No.2007BAl04810)作者单位:山东大学齐鲁医院肾内科(济南250012)
通讯作者:胡昭,Tel:1379i122685.E.mail:sdhuzhao@163.
养于山东大学实验动物中心。
济民可信金水宝制药有限公司,批号:060134;贝那普
生国生亘医垡金盘查!!!!生!旦笙!!鲞笙!塑£!!!!丛!!!P!!坐!!!!!!!!!!!:!Q:堕!:!
利购自北京诺华制药有限公司,批号:X0256;阿霉素(ADR)由意大利法玛西亚普强公司生产,批号:20060101。骨调素(OPN)、纤维连接蛋白(FN)、胶原Ⅳ(COL—IV)兔抗大鼠一抗和即用型链霉素亲和素一生物素一过氧化酶复合物(streptavidin—biotinperoxidaseplex,SABC)、免疫组化试剂盒(SAl022)购于武汉博士德生物工程有限公司,其余试剂为进口分装。
1.3
仪器离心机,日本日立公司产品;自动生化分析仪,13本日立公司7170A型产品;光学显微镜,13本OLYMPUS公司产品;恒温水浴箱,美国FORMA驻上海雷勃分析仪器有限公司产品;切片机,上海倍曼生物科技有限公司产品;照相显微镜,13本OLYMPUS公司产品;TGL.168台式离心机,上海安亨科学仪器厂产品;日立H600型透射电镜,HITACH,Japan。
2方法
2.1
动物模型制作
实验动物自由饮水进食,
适应环境l周,将其随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)、蝙蝠蛾拟青霉Cs-4组(J组)和贝那普利组(B组),每组6只。治疗组与M组以10%水合氯
醛3mL/kg腹腔注射麻醉大鼠,置于无菌手术台,腹
部右旁正中切口,暴露左侧肾脏,行左肾切除。术后第7天尾静脉注射阿霉素(ADR)5mg/kg,术后每只大鼠予青霉素G注射液2万U/d腹腔注射,第4周后尾静脉注射ADR
3
mg/kg;N组和M组分别尾静脉
注射等量生理盐水。首次尾静脉注射ADR后J组每天给予蝙蝠蛾拟青霉Cs-4
500
mg/kg灌胃,B组每天
给予贝那普利4mg/kg灌胃,N组和M组每天给予等量自来水灌胃。灌胃时间为8周。实验过程中M组大鼠死亡1只。
2.2标本收集
实验第4、8周末在代谢笼中收
集各组大鼠24h尿液,测定24h尿蛋白定量;第4周末尾静脉取血、第8周末腹主动脉取血分离血清检测尿素(BUN)、肌酐(Scr)、血浆总蛋白(TP)、血浆白蛋白(ALB)、总艄固醇(TC)、甘油j酯(TG);第8周末于10%水合氯醛3mL/kg腹腔麻醉下取右侧肾脏,用生理盐水冲洗组织后取部分肾皮质用于电镜检查,剩余部分置于10%福尔马林固定液用于常规病理、免疫组化检查。
2.3
肾组织病理检查肾组织经10%中性福尔马林缓冲液固定,石蜡包埋,切片厚约3斗m,行HE
及PAS染色,运用Image.ProPlus5.1图像分析软件
测定肾小球面积(GA)、肾小球细胞外基质面积(ECM),计算ECM/GA比值¨’。采取约l
mm×
1mm×1
mm大小肾皮质,用含15%戊二醇的二甲砷
盐缓冲液固定4h后,再固定于1%锇酸,Epon812包埋,切片厚50nm,铀铅双霞染色,日立H600型透射电镜下观察肾小球和肾小管间质的超微结构。
2.4免疫组织化学检测
(1)石蜡切片常规二
甲苯脱蜡和梯度酒精水化;(2)蒸馏水冲洗3次,
3
min/次;(3)3%过氧化氢溶液,室温下孵育20
min;(4)柠檬酸盐缓冲液对组织抗原进行微波修复
10rain,室温冷却30min后,蒸馏PBS冲洗3次,
3
min/次;(5)5%山羊血清封闭,室温孵育20
rain;
(6)甩去血清滴加OPN、Col-IV、FN一抗(1:200),以PBS代替一抗作为阴性对照,4℃孵育过夜;(7)室温复温30min,PBS冲洗3次,5rain/次;滴加酶标抗鼠/兔聚合物,37℃温箱下孵育30min,PBS冲洗3次,3rain/次;(8)滴加新鲜配制DAB溶液,显微镜下控制显色时间;流水冲洗10rain,苏木素复染,l%盐酸分化,流水冲洗;(9)梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封片。细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性结果,对肾组织免疫组化结果行半定量分析,用平均光密度(OD)表示阳性物质的相对含量。
2.5统计学方法
采用SPSS13.0软件进行组
间单因素方差分析,数据用面±s表示,P<0.05为差异有统计学意义。
结
果
1
各组24h尿蛋白定量、血TP、ALB、TC、TG、
BUN、Scr比较(表1)
M组与N组比较,血TP、ALB
明显降低(P<0.05),且第8周TP比第4周更低,血
TC、TG、BUN、Scr及24h尿蛋白定量均明显升高(P<
0.05),第8周比第4周更高;B、J组各时间点与M组比较,均能降低CHO、TG,改善肾功能,降低尿蛋白(P<0.05),J组用药4周Scr及B、J组8周BUN、SCr均低于M组,TP、ALB均高于M组(P<0.05),其中J组在改善TP、CHO方面比B组明显,但降低尿蛋白效果不如B组(P<0.05)。
2
肾组织病理变化(图1)光镜:HE、PAS染
色,N组肾小球结构清晰,M组肾脏体积缩小,间质炎性细胞增多,可见纤维化及蛋白管型,系膜细胞增生和上皮细胞出现空泡变性,系膜基质增多,毛细血
管塌陷,可见部分局灶节段性硬化改变。B、J组系膜细胞轻度增生,病变明显轻于M组,N组M/G值为0.30±0.03;M组为0.63±0.04,与N组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);B组为(0.48±0.04),J组为0.46±0.04;与M组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。电镜检查:N组肾小球结构正常,基膜厚度
生垦生耍匿缝金苤查!!!!生!旦筮!!鲞箜!塑曼』!!里丛:!!e堡竺!!!!!!!:!!!:垫:塑!:!
表1
组别n
N
24
?959-
各组24h尿蛋白定量、血TP、ALB、TC、TG、BUN、Scr比较
BUN
Scr
TP
AIB
(孑4-s)
TC
TG
时间
h尿蛋白
(rag/24h)(mmoL/L)
10.42±0.339.36±1.2l7.54±1.39△38.30±8.84’△7.78±0.9321.40士4.Ol+▲7.87±1.0I19.37±4.20‘▲
(p.mol/L)
48.83±5.1I56.504-8.5389.17±10.30A
(g/L)
63.83±1.94
(g/L)
27.004-0.8927.50±i.3818.33土3.01
A
(mmoL/L)
1.28±0.341.33±0.233.67±0.19△
(mmoL/L)
0.25±0.260.28±0.221.46±0.42A3.6I士1.5l’A
6用药4周11.12±1.12
用药8周12.30±5.27
M
“.00±2.97
45.67±3.50A
6用药4周38.57±2.65△
用药8周97.20±12.05‘A6用药4周23.17±2.58▲
用药8周49.67±8.26。▲6用药4周3I.26±1.83AO
用药8周60.254-8.59‘▲o
169.17±16.75’△39.17±1.47’A88.50±28.16
43.33±5.64
17.50±1.87△10.32土1.04‘△18.83±2.14
B
2.75±0.6l▲0.40±0.53▲
1.00±0.32‘▲0.43±0.26▲0.66±0.14▲
105.83±14.61+▲47.83±2.4▲59.83±9.22▲
50.17±7。760
19.50±I.05▲4.55±0.48’▲17.174-2.3221.174-I.17‘▲
2.15±0.40▲o3.65±0.36’▲o
J
一
95.00±25.61‘▲55.67±2.25’▲o
注:与本组用药4周比较,‘P<0.05;与N组比较。oP<0.05;与M组比较,‘P<0.05;与B组比较,”P(0.05;下表同
注:A—D为HE染色结果(x400),E-H为PAS染色结果(x400),I-L为电镜结果;A、E、I为正常对照组,B、F、J为模型组,C、H、L为贝那普利组,D、K、M为蝙蝠蛾拟青霉C8_4组
图1各组大鼠肾组织HE染色、PAS染色结果、电镜结果
一致,毛细血管腔充盈,足突排列规则,内皮孔分布均匀,M组观察到大鼠肾小球代偿性肥大,系膜细胞增生,肾小球脏层上皮细胞足突部分融合,足细胞内质网肿胀形成大小不等的泡,胞质中高密度颗粒多见,基底膜部分增厚,厚薄不一,结构疏松。B、J组明显轻于M组。
3
讨论
慢性肾脏病最终会导致肾脏纤维化,其机制较为复杂,以细胞外基质(extracelluarmat.fix,ECM)在肾组织的过度积聚与沉积,以及成纤维细胞的增生为特征,是多种细胞、生长因子、细胞因子共同参与,相互作用的结果H’,持续的细胞外基质沉积导致纤维化形成。阿霉素诱导的大鼠肾脏模型是较成熟的可以用于研究肾小球硬化和肾间质纤维化的动物模型¨’。
FN在纤维化过程中最早出现,并成为ECM积聚
各组大鼠OPN、Col—N、FN比较(表2、图2)
M组OPN、Col一Ⅳ、FN的表达较N组明显增强(P<0.05),B、J组各指标较M组降低(P<0.05),J组FN低于B组(P<0.05)。
表2
组别n
NMB
6666
各组大鼠OPN、Col—N、FN比较
OPN
(i±s)
FN
4.99-I-0.22
的促发因素,使得胶原更容易沉积坤’。C01.IV是构成肾小球基膜网架结构的支架,其变化与总的ECM的变化趋势相一致;OPN在肾间质纤维化的形成中发挥重要作用。局部FN和胶原的堆积促进成纤维细胞、肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞的增殖及肾脏纤维
化的形成。
Col一Ⅳ
11.78±0.44
A
7.87±0.22
18.76±0.23
13.25±0.41▲14.75±0.50▲。
25.90土0.64A12.98土0.37▲12.61±0.21▲
20.40±I.48△18.43±0.45▲15.00±0.74▲。
J
注:与N组比较,6P<0.05;与M组比较,▲P<0.05;与B组比较,。P<0.05
史垦±堕匿笙盒盘查!!!!至!旦筮!!鲞筮!塑垦』!!里堕:!!P!!堡!!!!!!!:!!!:!!:塑!:!
注:A-D为Col—IV表达结果(×400)。E-H为FN表达结果(x400)。I-L为OPN表达结果(x400);A、E、I为正常对照组,B、F、J为模型组,C、G、K为贝那普利组。D、H、L为蝙蝠蛾拟青霉Cs一4组
图2各组大鼠肾组织免疫组化染色结果
蝙蝠蛾拟青霉Cs-4正常情况下可以通过对多种不同的免疫细胞发挥不同的作用而增强免疫功能‘”,而在免疫增强的情况下又能起到免疫抑制作用¨,。前期研究证明蝙蝠蛾拟青霉Cs-4和贝那普利联合应用有相加作用,能有效延缓肾间质纤维化¨。。本研究结果证明蝙蝠蛾拟青霉Cs-4能明显升高ALB,降低
cHo、TG,改善肾功能,降低尿蛋白,与M组比较,差
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异均有统计学意义,并且其在降低血脂方面优于B组;肾脏病理结构改变无论是光镜还是电镜均较M组减轻;免疫组化可见C01.IV、FN、OPN在肾小球及肾间质中少量表达,与M组相比明显减轻,并且FN的表达较B组相比明显减轻。由此证明蝙蝠蛾拟青霉Cs?4可以改善ADR肾病大鼠的肾功能,并能减轻肾脏纤维化,其机制可能是通过减少C01.Ⅳ、FN、OPN的表达从而减轻EcM的合成。
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范文四:冬虫夏草与蝙蝠蛾拟青霉
一、什么是冬虫夏草:
冬虫夏草是由冬虫夏草菌寄生鳞翅目蝙蝠蛾科,蝠蛾属昆虫的幼虫所形成的菌虫复合体。在《本草纲目拾遗》中首先记载为夏草冬虫,冬是虫,夏是草,后称为冬虫夏草。冬虫夏草菌侵入虫体后以蝙蝠蛾幼虫为营养,在虫体内繁殖、生长。冬季菌丝充满虫体,幼虫体内营养消耗完后即死亡、僵硬,外观还是虫,即称之为冬虫;来年春末夏初,从僵虫头部长出子座,即称之为夏草,虫体加子座称为“冬虫夏草”。
冬虫夏草是一种稀有珍贵的中药材,是我国的瑰宝,具有重要的食用和药用价值。它的稀有珍贵之处在于:
1.生长环境特殊:仅生长在青藏高原3000-5000米的高原草甸、山地草甸和高山草甸高寒植被中,即西藏、青海、四川、云南和甘肃五省。
2.寄主专一:仅寄生鳞翅目、蝙蝠蛾科、蝠蛾属昆虫的幼虫。
3.生长周期长:蝙蝠蛾的生长周期一般是3年,在4500-5000米高山生长周期长达4-5年,幼虫被侵染至形成冬虫夏草又需要1年,因此,冬虫夏草的生长期需4-6年。
4.独有的医疗、保健作用:性温,味甘,具有益肝肾,补精髓,止血、化痰等功效,研究发现还具有双向免疫调节功能。
二、冬虫夏草所含化合物:
1.核苷类:腺苷、尿苷等。
2.甾醇类:麦角甾醇、胆甾醇等。
3.氨基酸:含18种人体必需的氨基酸。
4.肽类:从发酵菌丝提取物中分离到环肽类。
5.甘露醇。
6.多糖。
7.有机酸:软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸等。
8.有机元素:钙、镁、铁、铜、锌、锰、硫、磷、硒等。
9.维生素类:冬虫夏草含B1、B2、B12、C,不含A、E及β-胡萝卜素,发酵菌丝含B1、B2、B12、E和K。
10.蛋白质及多胺类物质:1,3-二氨基丙烷、腐胺、尸胺、类精胺等。
三、冬虫夏草与蝙蝠蛾拟青霉的关系:
蝙蝠蛾拟青霉是从冬虫夏草子座和僵虫体分离得来的。1982年,中国中医研究院中药研究所从云南迪庆藏族自治州的冬虫夏草(寄主为虫草蛾蝙蝠幼虫)中分离获得并鉴定为蝙蝠蛾拟青霉的菌株。同年,中国医学科学院药物研究所从青海化隆冬虫夏草中分离所得的Cs-4菌株,经鉴定也是蝙蝠蛾拟青霉。2004年,华茂临床药理研究中心从四川冬虫夏草子座及虫体中也分离到了蝙蝠蛾拟青霉菌株。该菌经深层发酵所得的干菌丝具有与冬虫夏草相似的有效成分和药理作用,临床验证了其药用价值,是一种重要的药用真菌。
四、蝙蝠蛾拟青霉的有效成分及药理作用:
(一)蝙蝠蛾拟青霉的有效成分:
1.核苷类:腺苷>0.14%;尿苷0.41%等。
·腺苷具有舒张血管,降低血压,减慢心率,刺激肾上腺素,刺激甾体激素生成,抑制血小板聚集,镇静、抗惊厥等多种生理活性作用,对心律有双向调节作用。
·虫草素:0.24%。是一种具有抗菌活性的核苷类物质,对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在DNA转录mRNA过程中使mRNA成熟障碍,抑制癌细胞生长。还有降血糖作用。
2.虫草酸(D-甘露醇):10%左右。能显著减低颅压,促进机体新陈代谢,缓解脑溢血和脑血栓病症。
3.多糖:18%。是一种高度分枝的半乳甘露糖,能促使淋巴细胞转化,提高血清1gG的抗体含量和机体的免疫功能;通过宿主细胞介导增强机体自身抗癌、抑癌能力。
4.氨基酸:19种,21.7%。是补益强壮及增强免疫功能的物质基础。
5.无机元素:锌、钾、锰、磷、硒等。
6.维生素mg/kg:B1 2.97;B2 38;E4.61。维生素是人体正常生理功能所需的有机营养素,参与调节机体代谢,对维持机体健康十分重要,缺乏会引起相关生理缺陷至疾病。
(二)蝙蝠蛾拟青霉的药理作用:
1.免疫系统双向调节、增强免疫:提高机体单核-巨噬细胞系统的吞噬功能;减轻机体细胞免疫功能的紊乱状态;可对抗或恢复肿瘤对化疗药导致的免疫抑制或免疫损伤。
免疫抑制:对接受器官移植免疫增强状态有抑制作用,对自身免疫有抑制作用。
2.呼吸系统:抗炎、止咳、祛痰、平喘;降低支气管平滑肌的高反应性,松弛平滑肌;提高耐氧能力;抗纤维化;改善营养状态,增强免疫了,预防感染。
3.泌尿系统:降低尿蛋白和血尿;有效降低肌酸酐和血尿素氮,减慢肌酐清除率下降;纠正慢性肾衰的脂质代谢紊乱;保护肾功能,促进肾小管的再生、修复;促进骨髓细胞造血,升高红细胞和白细胞。
4.生殖内分泌系统:具有促性腺作用,迅速改善性功能;调节性器官、下丘脑、脑下垂体的荷尔蒙分泌,可改善女性更年期综合症。
5.心血管系统:腺苷具有舒张血管,降低血压,减慢心率的作用;抗心肌缺血,增加冠脉血流量;增加心脑组织对氧的摄取利用,减低心肌耗氧量;明显抑制血小板聚集及脑内血栓素的形成。
6.消化系统:护肝、抗纤维化。能减轻肝脏的炎症细胞侵润和肝细胞变性坏死;抑制总胶原、Ⅰ、Ⅲ型胶原在肝内的沉积,并可使已形成的胶原重新吸收,其作用与秋水仙碱相仿。
7.改善物质代谢:补充机体必须的氨基酸和微量元素,改善患者健康状况;调节三大物质代谢;具有促进蛋白质代谢和降脂、降糖作用;抗脂质氧化作用(虫草素和甘露醇有抗脂质氧化活性,对自由基有清除作用);抗疲劳作用(抗缺氧,使LGH活力增高,糖原储备增加,Ma和MDA含量明显降低);并能通过抑制LDL脂质过氧化而控制粥样硬化进展。
范文五:珍源阁蝙蝠蛾拟青霉来源详解
蝙蝠蛾拟青霉来源详解
2014年12月22号,中央电视台焦点访谈节目播出了冬虫夏草的市场情况,有些混乱。一些不良商家,打擦边球,借冬虫夏草的名气卖其它类型的虫草保健品,谋取利益,搅乱了冬虫夏草市场秩序,导致消费者难辨真假李逵。 很多人都知道冬虫夏草,但是不知道冬虫夏草只是虫草中的一种,从冬虫夏草中分离出的可用于保健食品的蝙蝠蛾拟青霉更加没太多了解。
这些都是虫草,但不是冬虫夏草
冬虫夏草药用价值很高,是珍贵的中草药,但是在我国只产于海拔在3500米以上的高原地带,产地范围小。每年挖虫草的人很多,这导致冬虫夏草资源越来越少。市场上好一点的冬虫夏草要几百元一克,价格昂贵。但是想买冬虫夏草的人又很多,因为它的保健功能的确很好。这样就出现了供求矛盾。
然而到现在为止,还不能用人工的方式培养出冬虫夏草,只能从新鲜的冬虫夏草中分离出菌株。再进行培养,发酵,提取出具有与冬虫夏草同等功效的冬虫夏草提取物。
冬虫夏草是一种神奇的真菌,从中分离出的菌株也不止一种,已经从中发现了有蝙蝠蛾拟青霉菌、中国被毛孢、蝙蝠蛾被毛孢等等。这些菌株当中,部分菌株具有保健效果,其中蝙蝠蛾拟青霉菌和蝙蝠蛾被毛孢是国家食品药品监督局批准的可用于保健食品的真菌菌种①。
冬虫夏草分离物所包含的菌种
从上图可以看出,冬虫夏草菌包含很多种,但是,经过检测发现,与中国被毛孢相比,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体与冬虫夏草的指纹谱更相似②。另外,由杨金玲,肖薇等,撰写的《蝙蝠蛾拟青霉菌与冬虫夏草关系的分子系统学研究》显示,经DNA测序结果表明,与某些已在GenBank中注册的蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列的一致性约为72%,另外一个PCR及巢式PCR扩增,相应片段与蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列具有100%的一致性③。
下表为两种物质的营养成份对比表,也充分说明了蝙蝠蛾拟青霉菌与冬虫夏草的关系
冬虫夏草与蝙蝠蛾拟青霉菌的营养成份对比表④
这些都说明,蝙蝠蛾拟青霉菌是源自冬虫夏草的真菌精华,是药食同源的真菌。并非是与冬虫夏草没有关系的真菌。
珍源阁牌增强免疫力胶囊采用了由中国医学科学院从新鲜的冬虫夏草中分离出的优良菌株,蝙蝠蛾拟青霉菌。经现代生物工程科技发酵、提取的蝙蝠蛾拟青霉菌粉生产而成。
蝙蝠蛾拟青霉菌粉是天然冬虫夏草在制药业和食品工业上的替代品。从天然冬虫夏草分离得到虫草菌丝,经发酵培养,所得菌丝体的作用与天然冬虫夏草基本相同。因此用人工发酵物代替昂贵的天然品,以缓和天然虫草药源少,供不应求的矛盾。虫草菌粉学名蝙蝠蛾拟青霉菌粉。
蝙蝠蛾虫草菌丝体粉富含腺苷、多糖等活性物质,不仅含量丰富且比例适当,有效增强人体体质,全面提高了免疫机能和抗疲劳能力。蝙蝠蛾虫草菌丝体粉中含有 HH2,是女性生物钟的重要成分。可促使人体的抗体分泌量增加,可激活机体的免疫活性细胞,尤其对淋巴细胞转化和巨噬细胞吞噬率有明显促进作用。
蝙蝠蛾拟青霉菌粉与冬虫夏草的药理作用比较。天然冬虫夏草提取物能降低血清胆固醇和甘油三酯含量。蝙蝠蛾拟青霉菌粉作用与天然冬虫夏草基本相同,而效果更强。蝙蝠蛾拟青霉菌粉能够提高肝组织SOD的含量,抑制脂质过氧化物LPO的生成,与天然冬虫夏草相似。SOD含量增加对于清除生物体代谢产生的O2-,或由外界进入体内某些药物或毒物代谢产生的O2-和由辐射产生的O2-起到积极的作用。实验表明,发酵虫草对高脂血症、性功能低下和慢性支气管炎等病有一定疗效。
① 具体内容可以上中国食品药品监督局网站查询。
② 朱佳石,郭英兰等,蝙蝠蛾拟青霉菌DNA共存及竞争增殖力、化学成份变化[J]菌物研究,2007,第五卷第四期。
③ 杨金玲,肖薇等,蝙蝠蛾拟青霉菌与冬虫夏草关系的分子系统学研究 [J]药学学报 2008 43
(4):421-426.
④ 成份对比表的研究成果分别来自于以下6篇文章:
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