范文一:葛根总黄酮的提取方法研究
2000年11月中成药
NOV,2000第22卷第11期
ChineseTraditionalPatent
Medicine
V01.22
NO.11
分的异同,进行了HPLC多成分分析比较,结果发
[2]Zhangzhaowang,Sunxiumei.OralPreparationsof
Chinese
现:在此分析范围内,SBE液及WE液的色谱峰数materia
medica
by
semi—bionic
extraction[J].Chemical
及峰位基本一致,两者对应色谱峰的积分值除1个Abstracts,1996,Vol
124.
[3]张瑞亭,张兆旺,孙秀梅.思维方式的转换与中药“半仿生提取
峰外SBE液均大于WE液。说明2种提取液的成
法”[J].中国中药杂志,1997,22(9):542—544.
分没有质的改变,但SBE液成分的含量显著大于[4]
张兆旺,孙秀梅.“半仿生提取法”是中药药剂现代化的科学途WE液。
径[J].中国中医药报,2000年5月8日,第4版.
[5]张兆旺,孙秀梅.“半仿生提取法”的特点与应用[J].世界科学
参考文献
技术一中药现代化,2000,2(1):35—38.
[6]
张兆旺,孙秀梅.中药方剂药效物质提取新技术一“半仿生提取[1]张兆旺,孙秀梅.试论“半仿生提取法”制备中药口服制剂[J]
模式”的初探[J].世界科学技术一中药现代化,2000,2(5):5.
中国中药杂志,1995,20(11):670.673.
10.
葛根总黄酮的提取方法研究
赵浩如1,
郜凤香2
(1.中国药科大学,江苏南京210038;2.河南省医药学校,河南开封475001)
摘要:目的:选择提取葛根总黄酮的最佳方法,研究了用渗鹿法、浸渍法、煎煮法、回流法提取葛根总黄酮。方法:采用紫
外分光光度法测定提取液中的总黄酮含量。结果:用回流法得率最高,其次为渗漉法,用煎煮法提取得率最低;在渗漉法中以乙醇为溶剂,速度为2ml/kg?min的渗漉法提取的总黄酮得率最高。结论:渗漉法是合适的提取方法。关键词:葛根;黄酮;提取中图分类号:R284.2
文献标识码:A
文章编号:1001—1528(2000)11—0756—03
Study
on
Methods
ofExtractionofFlavonoidsinRadixPuerariae
ZHAOHao—rul,GAOFeng—xian92
1.ChinaPharmaceutical
University,№巧in9210038,China;2.Henan
School
ofMedicine
and
Pharmacy,Kaifeng475001,China)
Abstract:0bjective:In
order
to
selectthebest
process
ofextractionoftheflavonoidsinRadixpuerariae.
Methods:Percolation,maceration,decoctionandreflux
wereadoIpted,andtheflavonoidsinRadixpuerariae
wasdeterminedbyUVspectrophotometry.Results:Theyieldorderisreflux,percolation,maceration,and
decoction;thepercolationwithalcoholand
a
flow
rate
of2ml/kg?ministhemosteffectiveinthepercolation
methods.Conclusion:Itindicatesthatthepercolationisthemostsuitable
to
extractionoftheflavonoids.
Keywords:RadixPueraria;flavonoid;extraction
葛根为常用中药,具有解肌退热、升阳透疹、生等)有关。目前,葛根已制成愈风宁心片、葛根素注津的功率。现代药理研究证明,葛根具有改善心脑
射剂等多种制剂上市,这些制剂皆以葛根黄酮为有血管循环、扩张冠脉、改善心脏功能等作用。同时,
效成分,并以葛根素为主要成分和含量测定指葛根还可提高学习记忆,抗氧化,抗癌等作用HJ。标心j。郭建平bJ等曾用醇回流法、醇冷浸法对葛根上述药理作用都与葛根中所含的活性成分一总黄酮的提取工艺进行了研究,发现冷浸法黄酮得率较高。(包括黄豆甙元、大豆甙元4’,7一二葡萄糖甙、葛根素
王昌利等H1用醇回流法及水煎煮法进行了研究,发
收稿日期:2000—03—04
作者简介:赵浩如(1950-),男,江苏南京市人,副教授,理学硕士,主要研究方向:中药新制剂和新剂型。通讯地址:南京神农路1号,中国药科大学中药学院中药制剂教研室,电话:025.5322383,025.5311264.
万
方数据756
2000年11月
第22卷第11期
中成药
ChineseTraditionalPatent
NOV.,2000
MedicineV01.22No.1l
现用醇回流法较好。为了选择确切的方法,我们用乙醇进行了回流法、冷浸法、渗漉法提取的比较研究,同时进行了水煎煮法的比较。1仪器与材料
751一GW分光光度计(上海分析仪器厂),野葛
Pueraria
lobata(购自陕西,并经鉴定),葛根素对照
品(中国药品生物制品检定所),其他试剂均为分析
纯。2方法
2.1提取方法取葛根药材粉末6份,每份4.59,
分别用下列方法提取。
A.渗漉法:乙醇为溶剂,浸泡12h,装入1×9era渗漉管渗漉,流速分3种方法进行考察。A1法:流速
为2ml/kg?min;A2法:流速为3ml/kg?min;A3法:
流速为4ml/kg?rain。每份各收集25ml渗漉液,摇匀,供含量测定;A1法则继续收集渗漉液Ala、Alb、Alc,共3份,每份10ml,摇匀,供含量测定。
B.浸渍法:加乙醇25ml为溶剂,室温浸渍,每天振
摇一次,8d后,提取液滤过后供含量测定。
C.回流法:用45ml乙醇为溶剂,回流提取1h,滤过,
第2次用40ml乙醇回流1h,滤过,第3次用30ml乙醇回流40rain,滤过,合并提取液,浓缩,置25ml
量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,供含量测定。
D.煎煮法:用35ml水为溶剂浸泡材30min,煎煮
25rain,离心过滤,药渣中加水14ml,煎煮2次,每次煎煮25min,滤过,合并滤液,用35ml正丁醇分3次萃取,合并正丁醇萃取液,减压蒸去正丁醇,用乙醇将残渣转移至25ml量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,供
含量测定。
以上实验各重复一次,计算总黄酮得率,取平均
值。
2.2总黄酮的含量测定
参照文献旧1进行测定。
标准曲线的制备准确称取在120℃减压干燥至恒重的葛根素对照品,用乙醇配成0.315mg/ml
的对照品溶液。精确量取对照品溶液150,200,
250,300,350p1,分别置10ml量瓶中,各加乙醇至lml,摇匀,加蒸馏水至刻度,摇匀,用乙醇作空白对
照,在250nm处测定吸收度,求得回归方程为Y=
0.0728x一0.0058,r=0.9996。
样品的测定分别取上述定容于25ml量瓶的
提取液lml,加乙醇定容于100ml的量瓶中,分别取0,4rnl于10ml量瓶内,加乙醇至lml,再加水稀释至刻度,摇匀,以乙醇作空白溶液,在250nm处测定总
万
方数据黄酮吸收度,计算总黄酮含量及得率。
A1的续漉液则分别取0.1ml。
表1
渗漉法的总黄酮得率
表2
不同提取方法的总黄酮得率
表3
渗漉法收集量的考察
收集量1111
总黄酮得率z%(RSD)
0~251
26~35O36~45
046~55
O
吲娥似Ⅲ趵国鲫跗
3结果与讨论
在3种渗漉法中,以A1法(渗漉速度为2ml/kg
?rain)的总黄酮得率最高(表1)。Al法与其他方法比较,则回流法得率最高,渗漉法次之,煎煮法得率最低。在我们对各地各种葛根药材的调查中,用超声法提取药材,同法测得该药材的总黄酮的含量为15.4%。表2表明:回流法溶剂用量也较大,成本较高,在此条件下有效成分提取率较高,同时对其他成分的提取率应会提高。用渗漉法提取所用溶剂较少,在此条件下杂质的得量应较少,但其有效成分的得率相当于回流法的91%,溶剂量只有回流法的
22%,且不需加热,节省能源,只是用时略长,故选择
渗漉法来提取葛根黄酮是一种好方法。实验表明提取葛根黄酮时高温不是重要条件;提取液与药材中的黄酮的浓度梯度十分重要,用渗漉法时浓度梯度大,提取效率高;此外,在渗漉时提取液的饱和程度也十分重要。表3表明继续渗漉仍然有黄酮漉出,但所占比例很小,收集药材量的6~8倍(v/w)之后的续漉液可做2次渗漉使用。对于渗漉选用何种浓度的乙醇以及怎样用初漉液做连续渗漉尚待进一步
研究。
参考文献
[1]梅全喜,毕焕新.现代中药药理手册[M].北京:中国中医药出
版社,1998.52—53.
757
2000年ll兵孛成药
NOV.,2000第22卷第11期
ChineseTraditionalPatentMedicine
VOI.22
NO.11
[2]中阐医学科学院药物研究所.中草药现化研究,第一卷[M].jE(10):522,539.
京:jE京医辩大学协会医辩大学联合如版技,1995。267—273,
【4】王晶利,葛摄总黄冁提取王艺的磷突【J】.中成药,1995,17(6):
(3]郭建平.葛根总黄黼不同提取工艺的探讨[J].中草药,1995,26
6.8.
均匀设计优选抗痴呆胶囊(复方)的提取工艺
蒋丽君1,
翼新华2
(1。湖巍中医学院附属第二医院,湖南长涉410005;2。溯南中医学院药学分院,湖毒长汐410007)
摘要:鑫戆:泼丹参酮嚣A鹣含璧秀指标,骚究蕊焘巢获囊静提王蕊。方法:采麓均匀设计法对抗癜采狡囊醇提工艺避行考察,用HPLC法测定丹参酮ⅡA的禽量。缡果:采用95%的乙醇,固液比例1:12,浸泡24h,阐流时间30rain,重复2次熙褥努稳丹参潲珏A酌含量离。结论:魏工艺j薅务参酮狂A鹩提取赢,稳定性好,适合王监化生产。关键词:抗痴呆胶囊;丹参酮IIA;提取;均匀设计中圈分类号:R944.2+7
文献标识鹤:A
文章编号:1001—1528(2000)11-0758—03
OptimizationofExtractionProcessforAnti-DementiaCapsuleswithUniform
Design
JIANGLi—junl,XlAXin.hua2
£.Thesecond
HospitalAffiliated
to
HunanCollegeofTraditionalChineseMedicine,Changsha410005,China;2.HunanCollege够Traditional
Chinese
Medicine,Changsha410007,China)
Abstract:Objective:To
studythealcohol。.extractionprocessforAnti--DementiaCapsulesintanshinoneII
A
as
a
marker.Methods:Thealcohol,extraction
processforanti,DementiaCapsuleswasstudiedwiththemethodof
uniformdesign.The
content
oftanshinoneII
A
wasdeterminedbyHPLC.Results:Thecontentoftanshinone
II
A
wasthehighestwhenthe
followingextractionconditionwasused:extractingwith95%alcohol(the
proportionofsolidtoliquidwasl:12)。infusingmedicalmaterialsfor
24handrefluxingfor30min,Theprocess
wasrepeatedtwice.Conclusion:ThecontentoftanshinoneIIA
is
highanditsstabilityisgoodwhenthis
extractionprocessisused.Thisextractionprocessissuitableforindustrialproduction.Keywords:Anti—Dementia
Capsules;tanshinone珏A;extraction;uniformdesign
抗痴呆胶囊由丹参和远志等中药组成,临床上能力。丹参酮ⅡA是丹参主要脂溶性化学成份,临
用于治疗由一系列脑盎管医素导致感缓织损害弓l起床磅究表明丹参酮嚣盎磺酸盐对改善冠状动脉供盎
的血管性痴呆综合症(VasculaDementia,VD)。此作用有显著效果,可使血液物化特性趋佳,尤对血浆
症是中老年人群的多发病、常见症畦l。方中丹参为粘度降低有瞬显作用。远志中的主要活性姣分远志
唇形科植物丹参SalviamitliorrhizaBung的干燥息甙也是脂溶性药物。本文采用均匀设计法,考察搬及裉莲,中医传统使用的安神止痛、活血化瘀药。
乙醇浓度、用量、浸泡时间、提取时间及提取次数对70年代以来,丹参对心绞癀、冠心病等心盘管疾癍提取效果的影响,以丹参冁珏A含量势指标,确定撬的较好临床疗效引起人们的深人研究i2j。现代临痴呆胶囊中醇提部分最佳提取工艺。床药理研究表明丹参脂溶性化学成分簿冠弥供血不
1仪器与试裁
良、冠心病、心绞痛莉缓解作用,并能提高缺氧耐受
日本岛津LC.6A高效液相色谱仪,SPD-6AV
收穰网期:2000.02—23
作者簿灸:蒋瑟君(1969--)。女,湖南湘阴县入,硕士,主管中药师,主要研究方向:中药剂型改进与薪药开发。
758
万
方数据
葛根总黄酮的提取方法研究
作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(期):被引用次数:
赵浩如, 郜凤香, ZHAO Hao-ru, GAO Feng-xiang
赵浩如,ZHAO Hao-ru(中国药科大学,江苏,南京,210038), 郜凤香,GAO Feng-xiang(河南省医药学校,河南,开封,475001)
中成药
CHINESE TRADITIONAL PATENT MEDICINE2000,22(11)34次
参考文献(4条)
1. 王昌利 葛根总黄酮提取工艺的研究 1995(06)2. 郭建平 葛根总黄酮不同提取工艺的探讨 1995(10)3. 中国医学科学院药物研究所 中草药现化研究 19954. 梅全喜;毕焕新;苏德民 现代中药药理手册 1998
本文读者也读过(5条)
1. 公衍玲. 黄山. 于慧荣. GONG Yan-ling. HUANG Shan. YU Hui-rong 葛根提取方法的比较研究及其工艺条件优化[期刊论文]-青岛科技大学学报(自然科学版)2009,30(5)
2. 胡建平. 罗舒月. HU Jian-ping. LUO Shu-yue 葛根中黄酮提取工艺的研究[期刊论文]-食品工业科技2008,29(8)3. 刘火安. 王伯初. 贾云. 戴传云. 王宾豪. LIU Huo-an. WANG Bo-chu. JIA Yun. DAI Chuan-yun. WANG Bin-hao 葛根总黄酮提取工艺的研究[期刊论文]-生物技术通讯2006,17(1)
4. 白兰莉. 蒋柏泉. 黄庆荣. 肖正强. 邱宝玉. BAI Lan-li. JIANG Bo-quan. HUANG Qing-rong. XIAO Zheng-qiang. QIU Bao-yu 葛根总黄酮提取新工艺的研究[期刊论文]-南昌大学学报(工科版)2006,28(3)
5. 马海乐. 王超. 刘伟民. MA Hai-le. WANG Chao. LIU Wei-min 葛根总黄酮微波辅助萃取技术[期刊论文]-江苏大学学报(自然科学版)2005,26(2)
引证文献(35条)
1. 肖芳 葛根异黄酮的分离与纯化[期刊论文]-食品工程 2010(3)
2. 张继红. 罗泽宇. 陶能国. 李俊丽. 张艳. 黄江南 葛根素提取及其抑菌实验研究[期刊论文]-激光生物学报 2010(4)3. 李玉山 葛根的综合开发与利用[期刊论文]-林产化学与工业 2009(6)4. 李秋红 葛根米酒发酵工艺研究[期刊论文]-酿酒科技 2009(6)
5. 郑有飞. 石春红. 汪本友 天然黄酮物质提取技术和分析方法的研究进展[期刊论文]-分析科学学报 2009(1)6. 王德立. 张兴翠. 孙滢 野葛主要成分积累动态变化研究[期刊论文]-中国药学杂志 2008(13)7. 刘文山. 杨梓懿 不同炮制方法对葛根中总异黄酮含量的影响[期刊论文]-中国现代药物应用 2008(1)
8. 王言才. 段金廒. 华永庆. 宿树兰 不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定[期刊论文]-时珍国医国药 2008(1)9. 祝冬青. 孔庆新 葛根保健黄酒的酿造工艺研究[期刊论文]-食品研究与开发 2008(4)10. 钮菊良. 马世宏. 张卫明 葛根在化妆品中的应用[期刊论文]-中国洗涤用品工业 2007(6)
11. 臧鹏. 陈斌. 严衍禄 短波近红外光谱法测定葛根中总异黄酮含量[期刊论文]-时珍国医国药 2007(11)12. 王薇. 康亚国 葛根总黄酮提取纯化工艺研究[期刊论文]-陕西中医学院学报 2007(6)13. 祝冬青. 孔庆新 葛根保健黄酒的开发研究[期刊论文]-酿酒科技 2007(12)
14. 孔庆新. 祝冬青 微波辅助萃取葛根总异黄酮的工艺研究[期刊论文]-安徽农业科学 2007(33)
15. 刘圣. 陈礼明. 李矗. 唐丽琴. 张善堂. 陈敬. 汪友明 正交试验优选-大孔树脂分离葛根总黄酮工艺[期刊论文]-中国
医院药学杂志 2006(6)
16. 何宇新. 于杰. 李玲. 付超美. 周亮 大孔树脂分离纯化葛根总黄酮工艺研究[期刊论文]-西南大学学报(自然科学版) 2006(6)
17. 李海涛. 于国萍 葛根异黄酮的提取及葛根食用产品的研究[期刊论文]-食品研究与开发 2006(6)18. 王楠. 袁唯 葛根主要成分的提取方法及其在食品中应用潜力的探讨[期刊论文]-中国食品添加剂 2006(1)19. 易红. 杨华 葛根的品种产地和提取工艺研究进展概况[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2006(11)20. 李海涛 葛根有效成分的提取工艺及其解酒功效的研究[学位论文]硕士 200621. 席军生 黄芩汤治疗溃疡性结肠炎的临床研究[学位论文]博士 2006
22. 张梦军. 吴世容. 李志良 几种提取葛根异黄酮的方法比较及实验优化[期刊论文]-中成药 2005(10)23. 葛根异黄酮成分的加压溶剂提取法研究[期刊论文]-分析化学 2005(10)
24. 朱丽华. 贺浪冲 葛根中有效部位及有效成分的高效液相色谱分析[期刊论文]-西安交通大学学报(医学版)2005(3)
25. 马海乐. 王超. 刘伟民 葛根总黄酮微波辅助萃取技术[期刊论文]-江苏大学学报(自然科学版) 2005(2)26. 李瑞和. 苏亚. 郭林云. 包青山. 苏日纳. 斯琴 葛根黄酮提取分离方法及制剂研究[期刊论文]-北方药学 2005(6)27. 柏明娥. 许炯. 蒋应梯. 陶杰 开化葛根有效成分的提取和含量测定[期刊论文]-浙江化工 2004(3)28. 赵亮. 潘显道. 朱承根 葛根黄酮的研究进展[期刊论文]-医学研究通讯 2004(11)
29. 李冶姗. 阿堤坎木·海力力. 安彩贤 葛根与山楂叶中总黄酮的提取及纯化比较研究[期刊论文]-西北药学杂志2004(2)
30. 丁彩梅 超声强化超临界流体萃取香椿叶黄酮类化合物的研究[学位论文]硕士 2004
31. 李文亮. 韩继福. 边鸣镝 大豆豆粕中提取异黄酮及酸解的研究[期刊论文]-中国食品学报 2003(4)32. 黄兆龙. 郭俊明. 张东璧 葛根有效成分的提取和测定[期刊论文]-医药导报 2003(5)
33. 李文亮. 韩继福. 王海波 大豆豆粕中异黄酮提取工艺的研究[期刊论文]-食品工业科技 2002(9)34. 梁桂贤. 李勤 葛根黄酮提取分离方法及制剂研究进展[期刊论文]-山西中医学院学报 2001(4)35. 王星敏. 殷钟意. 李鑫. 张渝文 纤维素酶酶解醇葛根素研究[期刊论文]-食品科学 2010(24)
本文链接:http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zhongcy200011003.aspx
范文二:从总黄芩中提取总黄酮的方法研究
鞍 山 师 范 学 院 学 报
( ) 2 0 0 0 21 2 , 2 4 : 8 7 - 9 0 J our nal of Ans ha n Teachers College
从总黄芩中提取总黄酮的方法研究
关崇新回瑞华侯冬岩
()鞍山师范学院分析测试研究中心 ,辽宁 鞍山 114005
摘 要 :从黄芩中提取总黄酮的方法各异 . 本文把经典提取法改为超声波振荡器及混合溶剂提
取法 ,同时对超声波提取法的条件做了细致深入的研究 . 在 0 ?条件下 ,超声波提取三次 ,每次 20 分
钟 ,可以大大提高总黄酮的提取率 . 与经典方法相比 ,具有快速 、简便 、提取率高等优点 .
关键词 :超声波提取法 ;总黄酮 ;黄芩 ;收率
() 文章篇号 :100822441 20000420087204 中图分类号 :O652. 4 文献标识码 :A
黄芩为唇形科植物黄芩的根 ,其性寒味苦 ,主要功能是除湿热 、止血 、安胎 、抗炎 、抗微生 物 、镇静等作用 . 近年研究还发现 ,黄芩还具有较强的抗癌作用 ,并且黄芩的毒性小 . 黄芩中起
1 ,2 药理作用的主要成分是黄酮类物质,那么如何从黄芩中将黄酮类物质提取出来 ,如何提高
3 提取率就是一个关键问题 . 常见的经典方法有浸渍法 、渗漉法 、煎煮法和回流提取法等,但 是这些方法都有提取时间长 、效率不高 、溶剂消耗量大 、时间长 、操作麻烦 、过滤困难等缺点 . 本 文就是从降低生产成本 ,提高经济效益的角度出发 ,对从黄芩中提取总黄酮的方法进行了研 究 ,选择一种新的提取方法 ———超声波振荡提取法 ,并且对提取的温度 、时间 、次数都做了详细 的考察. 同时采用了三波长 ———紫外光谱测定法 ,对提取的黄酮成分进行测定. 它是基于在干 扰组分的吸收光谱上具有线性吸收的三个波长处 ,进行对被测组分的吸光度的测量 ,然后通过 计算而求得被测组分的含量. 三波长 ———紫外光谱测定法能消除某些干扰组分的影响 ,如溶液
4 ,5 混浊 、吸收池不洁净或不完全配对及吸收曲线不对称等引起的误差.
1 测定方法
λ黄芩中黄酮的甲醇溶液其吸收曲线 max 在 278nm 波长处 ,开成一个与芦丁甲醇溶液相 对应的吸收峰 . 但其吸收峰不对称 ,且出现了倾斜基线 ,妨碍了对黄芩中总黄酮含量的测定 . 为 此采用了三波长 ———紫外光谱测定法 ,从吸收曲线上选取三个适当测定波长点后 ,可正确扣除 本底值 ,有效地校正了基线的倾斜度 ,进而准确测定总黄酮的纯度.
三波长 ———紫外光谱测定法的基本原理是 ,在一吸收光谱曲线上 ,可以适当地选择三个波 λλλ长 、、处测定吸光度 A、A和 A. 1 2 3 1 2 3
收稿日期 :2000 - 09 - 28 () 作者简介 :关崇新 1973 - ,男 ,辽宁岫岩人 ,鞍山师范学院分析测试研究中心助理实验师 。
鞍山师范学院学报第 2 卷88
λλλλ从图 1 可知 : m = - , n = - , 2 3 1 2
?在 ?λPλ中 , Nλ? Pλ, 3 1 2 1 λλ λ N 232 m ? = = , λ λλm + n P 131
mA 1 λλ.?p= A,?N= 1 1 2 m + n
λλ同时又因为在 ?PR 中 , MN ? R, 3 3
λλ 12MN PN m ? = = = . 图 1 三波长 ———紫外光谱法原理 λλλλRPm + n 3 313
λ?R= A, 3 3
( )?MN = nA/ m + n 3
mA + nA 1 3( λ) ?%A = A- N+ MN = A- 2 2 2 m + n
m aλ + naλ 1 3 ) ( = - b 〃c .a λ2 m + n
式中 a 为待测组分在各波长处的摩尔吸光系数 ; b 为光程 ; c 为待测组分的摩尔浓度 .
由上式可知 , %A 值与待测组分的浓度成正比 ,可用于待测组分的浓度的测定.
从图中还可以知道 ,如果在所选择的三个波长处 ,若其相应的吸光光谱曲线上的三点若在 一条直线上 ,则测得 %A 的值为零 .
() 因此 ,当干扰成分产生吸收光谱为一直线 如混浊产生的干扰时 ,则在适当选择的三个测 定波长处 ,得到的 %A 值与干扰组分的浓度无关. 用作图计算法测定三个波长 ,在测定波长 处 ,分别测定用甲醇溶剂测定溶过的黄芩中黄酮溶液的吸光度值 ,给出 %A 值 ,并且从芦丁标
5 准工作曲线上求出相应的浓度 ,因此可以确定所提取的总黄酮含量 .
2 实验部分
2. 1 实验条件
2. 1 . 1 仪器与设备
() DWF2100 型电动植物粉碎机 河北省黄骅市科研器械厂; KQ2250A 型渣油超声波清洗器 () () 昆山市超声波仪器厂; R201 型旋转蒸发器 上海申科机械研究所; GBC2916 型紫外可见分光
() 光度计 澳大利亚 GBC 公司.
2 . 1 . 2 试剂与药品
乙醇 :沈阳市无机化工厂 ,分析纯 ;乙醚 :沈阳化学试剂厂 ,分析纯 ;氯仿 :沈阳试剂一厂 ,分
( 析纯 ;甲醇 :山东省禹王实业总公司化学试剂厂 ,分析纯 ; 黄芩干燥根 产地 : 辽宁 ,采自辽宁省
) 中药采购供应站.
2. 2 黄芩中总黄酮成分的提取
以辽宁产黄芩为样品 ,采用不同提取方法进行总黄酮的提取 .
2 . 2 . 1 浸渍法
? 1994-2013 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
第 4 期关崇新等 :从总黄芩中提取总黄酮的方法研究89
() 取粉碎的黄芩根粉末 10 克 ,加 10 倍量的氯仿?甲醇 = 1?1 V/ V混合溶剂浸泡过夜 ,倾出 滤液 ,再加入 10 倍量的混合溶剂浸泡 ,如此反复三次 ,三次滤液合并. 减压回收溶剂 ,得浸膏 , 然后再用 90 %乙醇加热溶解 ,放置. 称取少量的芦丁 ,配制成一定体积的甲醇溶液作为贮备
5 液 ,并配成一系列标准溶液 ,绘制标准工作曲线. 取三份样品按测定方法进行平行实验 ,从 芦丁标准工作曲线上求出相应的浓度 ,从而得出总黄酮的含量如表 1 .
2 . 2 . 2 超声波振荡提取法
() 称取粉碎的黄芩粉末 10 克 ,放入锥形瓶中 ,加氯仿?甲醇 = 1?1 V/ V混合溶剂 50mL ,在冰 水浴中用超声波振荡器振荡 20min ,将提取液过滤 ,残渣再重复振荡提取两次 ,三次滤液合并 , 以下处理步骤同 2 . 2 . 1 浸渍法. 取三份样品平行实验 ,提取总黄酮含量如表 2 .
( )( )表 1 浸渍法提取总黄酮含量 单位 :克 表 2 超声波振荡法提取总黄酮含量 单位 :克
样 品 1 2 3 平均值 样 品 1 2 3 平均值
0 . 1502 0 . 1560 0 . 1453 0 . 1505 0. 1782 0 . 1816 0 . 1733 0 . 1777 含 量 含 量
综合以上两种提取方法 ,可以看出 ,浸渍法耗时较长 ,消耗溶剂量较大 ,并且提取率没有超 声波振荡法高 . 而超声波法节省时间和溶剂 ,收率高 ,是一种比较理想的提取方法. 2. 3 超声波法在不同提取时间 、提取温度 、提取次数对收率的影响考察
2 . 3 . 1 不同提取时间对收率的影响
() 称取粉碎的黄芩样品 10. 00 克 ,加氯仿?甲醇 = 1?1 V/ V50mL 混合溶剂 ,在冰水浴中用超声 波振荡器振荡提取 ,时间分别为 5 、10 、15 、20 、25 、30 分钟 ,每档时间取三份样品平行实验 ,提取三 次 ,滤出液处理方法同 2. 2. 1 浸渍法. 提取总黄酮含量与时间 t 的变化规律如图 2 所示.
结果分析 :从上面的数据和曲线可以看出 ,提取时间对收率有一定的影响 ,20 分钟收率最 高 ,所以选用 20 分钟为宜 .
2 . 3 . 2 提取温度对收率的影响
称取粉碎的黄芩样品 10. 00 克 ,加混合溶剂 50mL ,在 25 ?、20 ?、15 ?、10 ?、5 ?、0 ?、- 5 ?条 件下 ,超声波振荡提取 ,每个温度档平行做三份样品 ,每份样品提取三次 ,三次滤液合并 ,滤出液 处理方法同 2. 2. 1 浸渍法 ,提取总黄酮的收率与温度的关系如图 3.
结果分析 :从表中的数据和作出的曲线可以看出 ,温度对于从黄芩中提取总黄酮的影响是 十分明显的 ,从 25, - 5 ?,随着温度的降低收率也逐渐增高 ,但是 0 ?较易控制 ,并且 0 ?与 - 5 ?收率相差很小 ,所以选取 0 ?做为超声波提取时的温度为宜 .
图 2 提取时间与收率关系图 图 3 提取温度与收率关系图
? 1994-2013 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
鞍山师范学院学报第 2 卷90
2. 3 . 3 提取次数对收率的影响
称取粉碎的黄芩样品 10 . 00 克三份 , 每份 都用超声波振荡提取 4 次 ,每次提取液单独减
压浓缩通过 2 . 2 . 1 浸渍法的处理方法 ,每次提
取总黄酮的收率与次数的关系如图 4 .
结果分析 :从做出的曲线可以看出 ,提取产
品最多的是第一次 ,第二次比第一次提取的产
品质量要少得多 ,约为第一次的 1/ 6 ,第三次仅
图 4 提取次数与收率关系图 为第一次的 1/ 10 , 第四次约为第一次的 1/ 30 .
因此 ,在从黄芩中提取黄酮时 ,没有必要进行多次提取 ,三次为宜 ,过多则浪费溶剂和时间 . 3 讨论
综合上述分析 ,从黄芩中提取总黄酮最好采取以下措施 : 改经典法为超声波振荡提取法 , 对样品超声提取三次 ,每次 20 分钟 ,温度控制在 0 ?.
这种新的提取方法和考察所确定的条件 ,将给生产带来许多方便 ,节省了大量的时间和溶 剂 ,从而降低生产成本 ,提高经济效益 .
参考文献 :
() 1 江苏新医学院 . 中药大辞典 下Z. 上海 :上海科学技术出版社 ,1986.
肖崇厚等 . 中药化学 M . 上海 :上海科学技术出版社 ,1987. 2
徐任生 ,陈仲良 . 中草药有效成分提取和分离 M . 上海 :上海科学技术出版社 ,1989. 3
马学毅 ,回瑞华 . 超声波法提取波叶大黄有效成分 J . 甘肃药学 ,1990 ,5 (1) :28 - 30. 4
侯冬岩 ,回瑞华 . 三波长 ———紫外光谱法测定黄芩中总黄酮的含量 J . 特产研究 ,1995 , (2) :47 - 50. 5
Study on the Extraction of Flavonoids from
the Scutellaria Ba icalensys
GUAN Chong2xin HUI Rui2hua HOU Dong2yan
( )Analytical and Testing Research , Anshan Teachers College , Liaoning Anshan 114005 , China
Abstract : Flavonoids was extracted from the Scutellaria Baicalensys by ultrasoinic extraction. The ex2 perimental results showed the best conditions of extraction which are 3 times ,20 min each time at 0 ? temperature . The method is simple ,rapid and higher extraction efficiency.
Key words :Ultrasoinic ; Flavonoids ; Scutellaria baicalensys ;extraction
? 1994-2013 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
范文三:甘草总黄酮的提取
甘草总黄酮的提取工艺研究
摘要:目 的 :用 正 交 法 研 究 提 取 甘 草 中 的 甘 草 总 黄 酮 类 化 合 物 最 佳 提 取 工 艺 。 方 法 :选 取 乙 醇 浓 度 、 提 取 时 间 、 温 度 、 料 液 比 个 主 要 影 响 因 素 , 采 用 正 交 法 , 以 甘 草 总 黄 酮 类 化 合 物 得 率 作 为 检 测 指 标 。 结 果 :应 用 酸 溶 碱 沉 法 获 得 甘 草 总 黄 酮 类 化 合 物 的 最 佳 提 取 工 艺 是 :75%的 乙 醇 , 提 取 2h , 酸 沉 PH 为 2.5, 液 料 比 为 20:1。 结 论 :该 方 法 提 取 率 高 , 稳 定 性 好 , 操 作 简 便 , 适 合 工 业 化 生 产 。
关 键 词 :甘 草 甘 草 总 黄 酮 正 交 设 计 提 取 工 艺
甘草为双子叶植物豆科甘草,胀果甘草, 或光果甘草的根及 根茎 。始 载 于《 神 农 本 草 经 》,列 为 上 品 。甘草性平,味甘,归十二经。有解毒、祛痰、止痛、解痉 以至抗癌等药理作用。在 中医 上,甘草补脾益气,滋咳润肺,缓急解毒,调和百药。 临床应用分 “ 生用 ” 与 “ 蜜炙 ” 之别。生用主治 咽喉 肿痛,痛疽 疮疡 ,胃肠道溃疡以及解 药毒、食物中毒等;蜜炙主治脾胃功能减退,大便溏薄,乏力发热以及咳嗽、心悸等。 甘 草 是 我 国 传 统 常 用 中 草 药 之 一 , 也 是 我 国 重 要 的 植 物 资 源 [1]。 甘 草 黄 酮 类 成 分 是 甘 草 中 最 重 要 的 活 性 成 分 之 一 , 具 有 抗 氧 化 、 抗 肿 瘤 、 增 强 心 血 管 功 能 、增 强 免 疫 力 等 作 用 [2-5]。因 此 ,开 展 甘 草 的 深 加 工 ,使 甘 草 资 源 得 以 充 分 利 用 , 增 加 资 源 的 附 加 值 , 前 景 十 分 可 观 。 为 此 , 笔 者 以 甘 草 为 对 象 , 研 究 了 甘 草 黄 酮 的 乙 醇 回 流 提 取 工 艺 , 单 因 素 试 验 确 定 各 因 素 对 提 取 工 艺 的 影 响 , 正 交 试 验 确 定 甘 草 黄 酮 提 取 的 最 佳 工 艺 条 件 。
1、 仪 器 与 试 药
1.1仪 器 :烧 杯 、 容 量 瓶 、 移 液 管 、 玻 璃 棒 、 量 筒 、 回 流 装 置 、 滤 纸 、 HH24数 显 恒 温 水 浴 锅 、分 析 天 平 、 AB1042N 电 子 天 平 、布 氏 漏 斗 、 SHZ2C 型 循 环 水 多 用 真 空 泵
1.2试 剂 :甘 草 , 市 售 ; 试 剂 :蒸 馏 水 、 氢 氧 化 钠 、 盐 酸
2、 方 法 与 结 果
在 利 用 碱 溶 酸 沉 法 从 甘 草 中 获 得 甘 草 总 黄 酮 的 过 程 中 , 我 们 通 过 预 试 验 发 现 影 响 提 取 得 率 的 主 要 因 素 为 乙 醇 浓 度 、 提 取 时 间 、 温 度 、 料 液 比 。 故 选 择 乙 醇 浓 度 (A)、 提 取 时 间 (B)、 酸 沉 pH 值 (C)、 料 液 比 (D)作 为 考 察 的 四 个 因 素 , 各 取 三 个 水 平 (见 表 1) , 以 甘 草 总 黄 酮 得 率 (%)为 考 察 指 标 。 提 取 工 艺 与 试 验 结 果 、 方 差 分 析 和 验 证 试 验 结 果 依 次 见 表 2、 表 3、 和 表 4
2.1正 交 试 验 设 计
2.1.1正 交 因 素 水 平 设 计
采 用 碱 溶 酸 沉 法 进 行 提 取 ,选 择 乙 醇 浓 度 、提 取 时 间 、酸 沉 PH 值 、料 液 比 四 个 因 素 , 每 个 因 素 选 择 三 个 水 平 , 设 计 正 交 试 验 因 素 水 平 表 (见 表 1)
表 1 正 交 因 素 水 平 设 计 表
Table1 Orthogonal design factor level table
水 平
因 素
A
乙 醇 浓 度 (%)
B
提 取 时 间 (h)
C
酸 沉 PH 值
D 液 料 比
1 65 1.5 3.0 15
2 75 2.0 2.5 20
3 85 2.5 2.0 25
2.1.2正 交 试 验 设 计 结 果
分 别 取 药 材 10g ,按 上 述 L9(34)正 交 表 方 案 进 行 试 验 ,以 最 后 甘 草 总 黄 酮 得 率 为 指 标 进 行 分 析 , 结 果 见 表 2, 方 差 分 析 见 表 3。
表 2 正 交 试 验 设 计 及 结 果
Table2 Orthogonal test design and results
实 验 号 因 素 结 果 A B C D
1 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 2.31
2 1.0000 2.0000 2.0000 2.0000 2.41
3 1.0000 3.0000 3.0000 3.0000 2.42
4 2.0000 1.0000 2.0000 3.0000 2.44
5 2.0000 2.0000 3.0000 1.0000 2.53
6 2.0000 3.0000 1.0000 2.0000 2.45
7 3.0000 1.0000 3.0000 2.0000 2.41
8 3.0000 2.0000 1.0000 3.0000 2.35
9 3.0000 3.0000 2.0000 1.0000 2.36 K1 7.1400 7.1600 7.1100 7.2000
K2 7.4200 7.2900 7.2100 7.2700
K3 7.1200 7.2300 7.3600 7.2100
R 0.3000 0.1300 0.2500 0.0700
SS 0.0188 0.0028 0.0106 0.0010
表 3 方 差 分 析 表
Table3 Analysis of Variance Table
方 差 来 源 离 差 平 方 和
SS
自 由 度 f 均 方 S F 值 显 著 性 P
A 0.0188 2.0000 0.0094 19.6279 P<>
B 0.0028 2.0000 0.0014 2.9535 P>0.05
C 0.0106 2.0000 0.0053 11.0465 P>0.05
D 0.0010 2.0000 0.0005 1.0000 P>0.05
2.13 结 果 分 析
由 直 观 分 析 可 知 , 利 用 水 提 醇 沉 法 提 取 甘 草 总 黄 酮 的 过 程 中 , 影 响 提 取 效 果 的 因 素 顺 序 为 :乙 醇 浓 度 >酸 沉 PH 值 >提 取 时 间 >液 料 比 , 以 乙 醇 浓 度 影 响 最 大 , 为 主 要 因 素 , 其 它 为 次 要 因 素 。 考 虑 到 继 续 增 加 乙 醇 浓 度 和 延 长 提 取 降 低 酸 沉 PH 对 结 果 影 响 较 小 , 从 工 业 生 产 节 约 能 源 、 费 用 , 省 时 考 虑 , 确 定 利 用 碱 溶 酸 沉 法 提 取 甘 草 总 黄 酮 的 最 佳 提 取 工 艺 为 A 2B 2C 2D 2, 即 75%的 乙 醇 , 提 取 2h , 酸 沉 PH 为 2.5, 液 料 比 为 20:1。
2.2 工 艺 流 程
甘 草 药 材
75%乙 醇 加 热 回 流 提 取 , 过 滤
滤 液
加 Ca(OH)2水 溶 液 , 分 液 ,
下 层 液
加 HCL 溶 液 调 制 PH 为 2.5, 过 滤
沉 淀
45℃ 下 常 温 干 燥
总 黄 酮
该 工 艺 生 产 路 线 短 、 操 作 简 单 、 生 产 成 本 低 , 提 取 率 高 , 实 现 了 甘 草 的 资 源 的 开 发 利 用 , 同 时 探 索 出 适 合 工 业 化 生 产 的 方 法 , 为 中 药 有 效 成 分 的 提 取 开 发 奠 定 了 基 础 。
3、 小 结 与 讨 论
经 实 验 发 现 , ① 当 用 碱 溶 酸 沉 法 提 取 甘 草 总 黄 酮 时 , 乙 醇 浓 度 是 影 响 甘 草 总 黄 酮 得 率 的 主 要 因 素 。 增 大 乙 醇 浓 度 能 提 高 甘 草 总 黄 酮 提 取 量 , 但 当 甘 草 总 黄 酮 提 取 趋 近 于 完 全 时 , 继 续 增 大 乙 醇 用 量 并 不 能 使 得 率 有 明 显 提 高 。 并 且 加 乙 醇 过 多 会 使 后 期 加 酸 碱 量 增 加 , 增 大 了 工 作 量 和 能 耗 , 降 低 了 工 业 生 产 效 率 。 ② 在 实 验 过 程 中 , 降 低 酸 沉 PH 能 使 沉 淀 更 充 分 , 但 是 酸 度 增 加 并 未 显 著 增 加 甘 草 总 黄 酮 的 量 。 提 取 酸 沉 PH 的 降 低 , 增 加 了 资 源 浪 费 , 降 低 了 工 业 生 产 效 率 。 ③ 提 取 时 间 对 甘 草 总 黄 酮 的 量 也 有 影 响 , 增 加 提 取 时 间 能 使 提 取 更 充 分 ,但 是 延 长 时 间 并 未 显 著 增 加 甘 草 总 黄 酮 的 量 。提 取 时 间 的 延 长 , 增 加 了 工 厂 能 耗 , 降 低 了 工 业 生 产 效 率 。 所 以 从 工 业 上 降 低 成 本 、 节 约 能 源 和 时 间 的 角 度 考 虑 , 确 定 利 用 碱 溶 酸 沉 法 提 取 甘 草 总 黄 酮 的 最 佳 工 艺 为 :75%
的 乙 醇 , 提 取 2h , 酸 沉 PH 为 2.5, 液 料 比 为 20:1。
参 考 文 献
[1] 王 晓 荣 . 榆 林 地 区 甘 草 资 源 的 开 发 与 利 用 [J].资 源 开 发 与 市 场 ,2003,19(6):4 02,414.
[2] 刑 国 秀 , 李 楠 , 王 童 , 等 . 甘 草 中 黄 酮 类 化 学 成 分 的 研 究 进 展 [J].中 国 中 药 杂 志 ,2003,28(7):593-597.
[3] 傅 乃 武 , 刘 朝 阳 , 张 如 意 等 . 甘 草 黄 酮 类 和 三 萜 类 化 合 物 抗 氧 化 作 用 的 研 究 [J].中 药 药 理 与 临 床 ,1994,(5):26.
[4]句 海 松 , 忻 文 娟 , 李 小 洁 等 . 甘 草 类 黄 酮 对 脂 质 过 氧 化 和 活 性 氧 自 由 基 的 作 用 [J].药 学 学 报 ,1989,24(11):807-812.
[5] PAULA A BEL INKY, MICHAEL AVIRAM, SAEED MAHMOOD, et al.Structural aspects of the inhibltory effect of Glabridin on LDL oxidation [J].Free Radical Biology &Medicine,1998,24(9):1419-1429.
范文四:竹叶总黄酮不同提取方法的比较研究
竹叶总黄酮不同提取方法的比较研究 第27卷第6期
2007年12月
林产化学与工业
ChemistryandIndustryofForestProducts Vol_27No.6
Dec.2007
竹叶总黄酮不同提取方法的比较研究
袁珂,薛月芹,楼炉焕
(浙江林学院食品与药学院,浙江临安311300)
摘要:对竹叶的不同提取方法进行比较研究.采用回流提取,超声波提取,渗漉提取,冷浸提
取,微波提取和索氏提取6种不同的方法进行提取,并对提取物的收率进行比较,同时以芦丁为考
察指标分别对其总黄酮进行含量测定.实验结果表明,不同提取方法所得的提取物中总黄酮的收
率大小次序为:超声波法>微波法>回流法>渗漉法>索氏法>冷浸法.与其它方法相比,超声波
提取法具有提取快速,不需加热,节省时间,溶剂和能源,所提取的总黄酮含量较高等优点.
关键词:竹叶;芦丁;超声波提取;含量测定
中图分类号:TQ9l;R284.2文献标识码:A文章编号:0253—2417(2007)06—0109—04
ComparisonStudyofDifferentMethodsforExtractingFlavonoidsfrom
Phyllostachysprominensns(W.Y.Xiong)Leaves YUANKe,XUEYue.qin,L0ULu—huan
(CollegeofFoodandPharmacy,ZhejiangForestryUniversity,Linan31130,China)
Abstract:ExperimentsofsixdifferentmethodsforextractingflavonoidsfromleavesofPhyllostachysprominensns(W.Y,Xiong)
werecarriedout,namelybyrefluxextraction,ultrasonicextraction,percolationextraction,cold-soakedextraction,microwave
extractionandSoxhletextraction,adoptingflavonoidscontentasindex.Theresultsshowedthattheflavonoidsyieldsinextracts
areinthesequenceof:ultrasonicextraction>microwaveextraction>refluxextraction>percolationextraction>Soxhletextraction>
cold—
soakedextraction.Theultrasonicextractionmethodwassuperiortoothermethods.Thismethodhadtheadvantagesoffast
extractionspeed,noheating,beeconomicaloftime,solventandenergy,andhadhigheryieldofflavonoids.
Keywords:leavesofPhfllostachysprominensns(W.Y.Xiong);rutin;ultrasonicextraction;determinationofcontent
竹叶为多年生常绿植物竹子的叶?J,其性淡,微涩,寒,味甘,苦.具有清热利尿,明目
解毒和止血的功
能』.竹叶在我国具有悠久的药用和食用历史,是一味着名的清热解毒良药.1998
年被我国卫生部列入
了"药食两用的天然植物"名单.据报道,竹叶中含有大量对人体有益的活性物质,包
括黄酮类,酚酸类,生
物活性多糖,蒽醌类,香豆素类,氨基酸类,芳香成分和其它微量元素』.其中酚酸类,
蒽醌类,香豆素类具
有较强的抑菌杀菌作用.竹叶提取物的功能因子主要是黄酮类.研究表明』,竹叶总
黄酮具有多方面的
生物活性,如抗脂质过氧化,抗衰老,清除自由基,阻断亚硝基化反应,降低血脂及血
胆固醇,抗菌消炎,抗
病毒,增强免疫功能,抑制移植性肿瘤在宿主体内的生长等方面的作用.竹叶总黄
酮以其巨大的资源优
势,良好的药理活性将成为一种非常有前途的天然药物,具有广阔的开发前景.作者对竹叶的不同提取方
法进行了研究,通过对6种不同提取方法所得提取物的收率及提取物中总黄酮的收率进行测定比较,确定
出了最佳提取方法,为合理利用这一自然资源并为工业化生产提供参考依据. 1实验部分
1.1仪器与试剂
UV,2102PCS紫外可见分光光度计,上海龙尼柯仪器有限公司;KQ-250B超声波提取器,昆山市超
收稿日期:2007一O3—14
基金项目:浙江省森林培育重中之重学科开放基金资助项目(200510) 作者简介:袁珂(1959一),女,北京市人,教授,主要从事森林药用植物活性成分研究及其产品开发;E.mail:yuan—keO01@163.COill,
ll0林产化学与工业第27卷
声仪器有限公司;NJL07—3型实验专用微波炉,南京杰全微波设备有限公司,额定功率800W;真空薄膜
浓缩装置(自装);R201B旋转蒸发仪,上海申胜生物技术有限公司.竹叶于2006年9月采自浙江临
安功臣山,由浙江林学院植物分类学教授楼炉焕鉴定为高节竹Phyllostachysprominensns(W.Y.Xiong). 芦丁对照品,中国药品生物制品检定所提供;硅胶,青岛海洋化工厂产品;所用试剂均为分析纯.
1.2标准曲线的绘制及回归方程的建立
准确称取干燥质量恒定的芦丁对照品12.8mg,加人60%(体积分数,下同)乙醇溶解并定容至
100mL的量瓶中,摇匀得质量浓度为0.128g/L的对照品溶液.分别取上述芦丁标准溶液0,1.0,2.0,
3.0,4.0和5.0mL于6只10mL量瓶中,用60%乙醇补充至5mL,各加人0.3mL5%亚
硝酸钠,摇
匀,放置5min后再各加人10%硝酸铝0.3mL,摇匀.5min后再加人1mol/L的氢氧化钠溶液4mL,
混匀,用60%乙醇稀释至刻度.10min后于510nm处测吸光度(A),试剂为空白参比,以芦丁质量浓度
(C)为纵坐标,吸光度为横坐标绘制标准曲线,用最dx--乘法进行线性回归,得芦丁含量与吸光度之间
的回归方程:
A=11.241071C一0.012048.r=0.9995
2结果与讨论
2.1不同溶剂提取所得提取物收率及总黄酮收率的比较
2.1.1提取物收率的比较为了选择合适的溶剂进行提取,分别选用50%乙醇,80%乙醇,甲醇,
70%丙酮4种溶剂进行索氏提取.原料均取20g,溶剂用量为200mL,提取时间5h.分别将提取液浓
缩至稠膏状移人微波炉中烘干至质量恒定.称质量,计算收率,结果见表1. 表1不同溶剂提取所得提取物量及收率的比较
Table1Comparisonofmassandyieldsofextractsobtainedwithdifferentsolvents
2.1.2总黄酮收率的比较分别吸取一定量由不同溶剂提取所制得的竹叶提取液于10mL量瓶中,添
加60%乙醇溶液使体积约为5mL,按照上述绘制芦丁标准曲线的方法,依次加人亚硝酸钠,硝酸铝和
氢氧化钠溶液,混匀,用60%乙醇稀释至刻度.静置20min后测定吸光度.重复3次测定,并根据标
准曲线换算出样品中总黄酮的收率,计算平均收率及相对标准偏差(RSD),结果见表2.
表2不同溶剂提取所得提取物中总黄酮收率比较
Table2Comparisonofflavonoidsyieldsobtainedwithdifferentsolvents
由表1可以看出,由4种不同的溶剂进行索氏提取,以70%丙酮进行提取所得提取
物的收率为最
高;从表2可以看出,以80%乙醇为溶剂进行提取,所得提取物中总黄酮收率相对最高.虽然以70%
丙酮提取率最高且总黄酮的收率与用80%乙醇提取相当,但考虑到乙醇与丙酮相比,具有无毒安全,
价廉易得的优点,故提取溶剂选用80%乙醇.
2.2不同提取方法所得提取物收率及总黄酮含量的比较
2.2.1回流提取称取粉碎并过60mm筛后的竹叶原料20g,用200mL80%乙醇回流
,每 提取3次
第6期袁珂,等:竹叶总黄酮不同提取方法的比较研究
次2h.合并提取液,抽滤后将滤液真空薄膜浓缩至一定量,移人微波炉中烘干至质量恒定,称质量,计
算收率,结果见表3.
2,2.2超声波提取称取粉碎并过60mm筛后的竹叶原料20g,用200mL80%乙醇置超声波提取器
中室温超声波提取3次,每次20min.合并提取液,抽滤后将滤液真空薄膜浓缩至一定量,移人微波炉
中烘干至质量恒定,称质量,计算收率,结果亦见表3.
2,2,3渗漉提取称取粉碎并过60mm筛后的竹叶原料20.g,用80%乙醇润湿后装入渗漉柱中,加
溶剂浸泡24h后开始渗漉.控制流速3mL/min收集渗漉液500mL.将渗漉液旋转蒸发浓缩至稠膏
状,移人微波炉中烘干至质量恒定,称质量,计算收率,结果亦见表3. 2.2.4冷浸提取称取粉碎并过60mm筛后的竹叶原料20g,加80%乙醇少量使药材润湿溶胀后每
次用200mL80%乙醇浸提6h,共提3次.合并浸提液,抽滤.将滤液真空薄膜浓缩至一定量,移人微
波炉中烘干至质量恒定,称质量,计算收率,结果亦列入表3.
2,2,5微波萃取称取粉碎并过60mm筛表3不同提取方法所得提取物量及收率的比较
后的竹叶原料20g,置微波实验炉中,在装有Table3Comparisonofextractionyieldswithdifferent
回流冷凝装置及搅拌下,于设定功率为
480w(搅拌转速200r/min)的实验条件下,
每次用200mL80%乙醇微波萃取2次,每
次萃取3min,合并提取液,抽滤.将滤液旋
转蒸发浓缩至稠膏状,移人微波炉中烘干至
质量恒定,称质量,计算收率,结果同样见
表3.
2.2.6索氏提取称取粉碎并过60mm筛
后的竹叶原料20g,置索氏提取器滤纸套筒中,加200mL80%乙醇进行连续回流提取8h,抽滤.将滤
液进行旋转蒸发浓缩至稠膏状,移人微波炉中烘干至质量恒定,称质量,计算收率,结果一并列入表3.
2.2.7不同提取方法所得总黄酮的收率比较分别吸取一定量按上述不同提取方法提取所制得的样
品溶液于10mL量瓶中,添加60%乙醇溶液使体积约为5mL,按照上述绘制芦丁标准曲线的方法,依
次加入亚硝酸钠,硝酸铝和氢氧化钠溶液,混匀,用60%乙醇稀释至刻度.静置20min后测定吸光度,
重复3次测定,并根据标准曲线换算出样品中总黄酮的收率,计算平均收率及RSD,结果见表4.
表4不同提取方法所得提取物中总黄酮收率比较
Table4Comparisonoftotalflavonoidsyieldswithdifferentextractionmethods
2.3讨论
在回流提取法中,溶剂用量较大,提取所需时间较长,这样由于药液长时间受热,很容易导致其中的
有效成分发生改变,同时也浪费时间和能源.索氏提取是一种连续热回流提取方法,虽然溶剂用量不
大,但提取时间较长,往往需要数小时才能将有效成分提取完全,而且药液长时间处于被加热状态,致使
其中的有效成分容易被破坏,测出的总黄酮收率偏低.2种浸渍法(冷浸,渗漉)避免了加热,使其中的
热敏性成分有了一定的安全性,其中渗漉法与冷浸法相比,由于始终保持一定的浓度差,使其提取效率
比冷浸法有所提高.但冷浸法和渗漉法所用溶剂量均较大,提取时间较长,操作麻烦.因此,虽说冷浸
112林产化学与工业第27卷
法和渗漉法避免了加热,但同样存在操作麻烦和费时,费工,费溶剂的缺点. 从实验结果可以看出,传统提取方法(浸渍法,回流法,连续回流法)的共同特点是:提取时问长,效
率低,溶剂用量大,操作费时麻烦,总黄酮产率也不是最高,尤其是连续回流提取法,由于提取时间很长,
应该提取很完全,但因为在高温下长时间加热,致使其中的热敏性的总黄酮成分结构被破坏,导致提取
物中总黄酮收率偏低.而超声波提取与微波萃取方法的特点是溶剂用量较少,提取时间短,提出总黄酮
的量相对较高.
3结论
3.1采用6种不同的提取方法对竹叶中的黄酮类物质进行提取,所得提取物收率的顺序为:索氏法>
回流法>超声波法>微波法>渗漉法>冷浸法;对竹叶中的不同提取方法所得提取物中总黄酮的收率
高低次序为:超声波法>微波法>回流法>渗漉法>索氏法>冷浸法.由此可见,尽管超声波提取法的
收率并不高,但所含有效成分总黄酮的收率相对最高.
3.2通过分析比较可以看出,超声波提取竹叶中的总黄酮具有提取快速,完全,提取率较高,操作简单,
节省时间,溶剂和能源,无需加热,被提取的有效成分不易受破坏等优点.微波萃取则具有提取时间更
短的优点,但提出的有效成分收率不如超声波法的高,可能是由于微波辐射所引起的短时高温会对其中
的热敏性成分有一定程度的影响.但该法仍不失为一种快速高效的提取方法. 综合考虑各因素,提取工艺应优选超声波提取,其次是微波萃取.两种提取方法的效率均高于其他
提取法,有待在竹叶的研究中进一步扩大规模及不断应用.
参考文献:
[1]吴三林,李书华,弓加文,竹叶活性成分的研究进展[J],乐山师范学院,2005,20(5):53—54.
[2]黄文,王益.竹叶的化学成份及应用进展[J],中国林副特产,2002,64(3):65—66, [3]张英,天然功能性竹叶提取物——竹叶黄酮[J].中国食品添加剂,2002(3):54—58,
[4]张英,竹叶黄酮的生理与药理活性[J].世界竹藤通讯,2004,2(2):l—II, [5]傅剑云,夏勇,郑云燕,等.竹叶抗氧化物的致畸和致突变性研究[J].浙江预防医学,2004,16(3):15—18.
[6]陆柏益,张英,吴晓琴,竹叶黄酮的抗氧化性及其心脑血管药理活性研究进展[J].林产化学与工业,2005,25(3):120—124
[7]袁珂,俞莉.真空薄膜浓缩装置的研制及应用研究[J].分析化学,2005,33(9):l358
—1360.
(上接98页)
文章题目文章题目
我国热带地区燃料油植物资源的开发和利用农林产品废弃物催化热解制备氢气的初步研究
生物燃油——生物质工程前沿与关键技术我国沙区发展林业生物质能源的优势
和问题探讨
鄂尔多斯地区柠条与杨柴的调查及测定中间锦鸡儿faa2基因片段的克隆和反义表达载体的构
我国主要木本燃料油植物的研究概况与发展建议建及遗传转化初步研究 林木生物质能源的发展和我国能源林建设植物热值研究综述
林业生物质能开发利用途径,问题与前景分析江苏省耐盐生物质能源植物选育和生物柴油制备研究
广东林业生物质能源发展现状与对策优良生物质能源树种东京野茉莉及其培育技术
燃料油植物开发利用现状与发展策略探讨云南省生物质能源树种产业化发展前景
我国木本油料植物资源及其开发利用现状湖北省富含油脂林木资源调查初报 我国特有珍稀植物——翅果油树研究与开发进展云南干热河谷木本生物柴油树种产业化开发潜力研究
生物质转化为方便能源的现状及未来展望黑龙江省国有林区生物质能源发展潜力和对策的研究
内蒙古荒漠化地区发展生物质能问题探讨木本生物质能源树种乌桕的种质资源与培育研究进展
宁夏野生可开发林木生物质能源植物
范文五:苹果果皮中总黄酮的提取方法优化研究
苹果果皮中总黄酮的提取方法优化研究
摘要:我们以控制变量的方法,以苹果果皮总黄酮得率为考察指标,对影响苹果皮总黄酮提取方法的因素
进行了探讨,通过从苹果皮中提取出来的黄酮的吸光度描绘出的曲线判断其含量得出了苹果皮总黄酮提取的优化条件,从而找出它的优化方法并测定了苹果果皮中总黄酮的含量。结果表明,苹果果皮总黄酮提取的最佳实验条件为:水浴温度为65℃,乙醇浓度为65%,提取时间为2h ,pH=10,总黄酮得率为1.272%。 关键词:苹果、总黄酮、提取方法
前言 黄酮类(英语:Flavones )是一类基于
2-苯基色圆酮-4-酮(2-苯基-1-苯并吡喃
-4-酮)骨架的黄酮类化合物。果中的重要抗氧化物质来源。
苹果皮的营养与经济价值:
黄酮化合物是广泛存在水果和蔬菜中的一类次生代谢类物质,近来发现它们具有很强的清除自由基能力,是苹
苹果皮中含有很多生物活性物质,例如:酚类物质,黄酮类物质,以及二十八烷醇等,这些活性物质可以抑制引起血压升高的血管紧张素转化酶,有助于预防慢性疾病,如心血管疾病、冠心病,降低其发病率。
此外,苹果皮的摄入可以降低肺癌的发病率。国外研究表明,苹果皮较果肉具有更强的抗氧化性,苹果皮的抗氧化作用较其它水果蔬菜都高。普通大小苹果的果皮抗氧化能力相当于800mg 维生素C 的抗氧化能力。
苹果皮中的二十八烷醇还具有抗疲劳和增强体力的功效。苹果皮可以抑制齿垢的酶活性及口腔内细菌的生长,具有抗蚀作用,可以保护牙齿。还可以使皮肤白嫩,防止黑色素的生成,有美容功效。
苹果皮含丰富的膳食纤维,能帮助消化。苹果中将近一半的维生素C 也在紧贴果皮的部位。苹果皮比果肉抗氧化性更强。
目前已经有很多厂家通过从苹果皮中提取生物活性物质来开发功能食品。苹果皮粉作为一种很有价值的食品添加剂,可以用其生产强化食品,少量地添加苹果皮粉就能够增加食品中的多酚类物质、黄酮类物质的含量。
1实验目的
(1)学习分光光度计的原理,加深掌握和熟悉了分光光度计的原理和使用操作。
(2)了解了黄铜的结构和化学性质,学会了如何鉴定黄酮类化合物和学习植物中黄酮化合物的提取的一般方法,同时也了解了黄酮类化合物的药性功效。
(3)掌握标准曲线法测定原料药含量的方法及锻炼自己的实验操作技能。
2材料的选择
研究表明,苹果果实中含有丰富的黄酮类物质,主要集中在果皮部分,果肉和果心中的含量远远小于果皮的黄酮含量。但是由于农药的残留、空气污染等诸多不利因素,人们在食用苹果时多将果皮弃去,却没有认识到在去除果皮的同时却丢弃了苹果最有营养价值的部分。而且,黄酮化合物是广泛存在于水果和蔬菜中的一类次生代谢类物质, 近来研究发现, 它们具有很强的清除自由基能力, 是苹果中的重要抗氧化物质来源。
苹果果实中含有丰富的黄酮类物质, 且主要集中在果皮部分, 果肉和果心中的黄酮含量
远远小于果皮,苹果皮中的总多酚含量达307mg/100g,总黄酮为184mg/100g,原花青素为105mg/100g,这些数据是果肉所望尘莫及的。所以在本次实验中我们挑选皮果皮来做实验原料。若存在一种科学有效的提取方法将苹果皮中的总黄酮等抗氧化物质提取分离,加以充分利用,为食品加工业、化妆品工业以及医药业提供天然抗氧化剂资源,将为苹果的加工业开辟新的出路。目前提取分离苹果中黄酮类物质还没有一个完善的方法,本研究旨在找到一个苹果果皮中总黄酮提取的最佳方法,为苹果的营养鉴定提供一个确切的黄酮含量测定标准,并为苹果的开发利用提供一个科学有效的理论依据。
3实验原理
3.1结构
黄酮类化合物(Flavonoids),又称物黄酮(Bioflavonoids)或植物黄酮。黄酮类化合
物泛指拥有15个碳原子的多元酚化合物,其中两个芳环(A环、B 环) 之间以一个三碳链相连,其骨架可用C6-C3-C6表示[1]。基本结构如图1-1。
A B 图1-1 黄酮(A )和异黄酮(B )的分子结构
根据中央三碳链的氧化程度、B 环连接的位置(2-位或3-位)以及三碳链是否构成环等特点,可将黄酮类化合物进行不同分类。 3.2性质
游离的黄酮类化合物一般难溶或不溶于水,可溶于乙醇、乙酸乙脂、甲醇、乙醚等有机溶剂或稀碱中。其中黄酮醇、黄酮、查耳酮等,因为分子中存在交叉共扼体系,所以是一类平面型化合物,平面型分子堆砌得比较紧密,分子间引力较大,故很难溶于水。 黄酮类化合物分子中有多个酚羟基,显酸性,可溶于乙醇. 碱水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。
3.3分光光度
当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后, 由于一部分光被体系吸收, 因此透射光的强度降至I, 则溶液的透光率T 为: 根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律: A=abc
式中A 为吸光度,b 为溶液层厚度(cm ),c 为溶液的浓度(g/dm^3), a 为吸光系数。其中吸光系数 与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。溶液中其他组分(如溶剂等)对光的吸收可用空白液扣除。
由上式可知,当固定溶液层厚度l 和吸光系数 时,吸光度A 与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定最大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源,测定一系列已知浓度c 溶液的吸光度A ,作出A~c工作曲线。在分析未知溶液时,根据测量的吸光度A ,查工作曲线即可确定出相应的浓度。 3.4显色反应
在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在510nm 波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般以芦丁标准品定量。 先用亚硝酸钠还原黄酮, 然后加入硝酸铝络合,最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环,生成 2'''' 羟基查耳酮而显色。显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时不显色
4实验材料
实验所用苹果样品为甘肃天水花牛苹果生产基地 4.1仪器
4.2药品:
5实验步骤
5.1溶液配制
(1)5%NaNO2溶液:准确称取5g NaNO2放置于烧杯中溶解,移至100mL 容量瓶中并定容至刻线。
(2)10% Al(NO3)3溶液:准确称取10g Al(NO3)3放置于烧杯中溶解,移至100mL 容量瓶中并定容至刻线。
(3)4%NaOH溶液:准确称取4gNaOH 放置于烧杯中溶解,移至100mL 容量瓶中并定容至
刻线。
(4)55%乙醇: 称取无水乙醇150g ,加入水122.7g ,配制成55%的乙醇 (5)65%乙醇: 称取无水乙醇150g ,加入水80.77g ,配制成65%的乙醇 (6)75%乙醇: 称取无水乙醇150g ,加入水80.77g ,配制成75%的乙醇
5.2标准曲线的制作 本研究以芦丁作为苹果总黄酮含量测定的标准品。
(1)波长的选择取样品液适量,在0.5 mL 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下,经硝酸铝显色后,以试剂为空白参比液在450~550 nm 波长范围测定络合物的吸光度, 并找出最大吸收波长。
(2)准确称取芦丁标准品20mg ,用95%的乙醇溶解,定容到100mL 的容量瓶中,再精确从中量取25mL 至50mL 的容量瓶中,用95%的乙醇稀释定容,得到浓度为100μg/mL的芦丁标准溶液。
准确吸取该溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0mL ,分别置于25mL 试管中,加入5%的NaNO 2溶液0.5mL ,混匀后放置6min ,然后加入0.5mL 的10%的Al(NO3) 3溶液,摇匀后放置6min 。最后加入4%的NaOH 溶液4mL ,用95%乙醇定容至25mL, 摇匀,放置15~20min ,以上述8种溶液为标准品溶液,在510nm 测定不同浓度的标准品的吸光值。 5.3 条件实验
(1)温度对总黄酮提取的影响: 设定温度为:55℃ 、 65℃ 、 75℃ 乙醇浓度为:65% ; 提取时间为:2h (2)乙醇浓度对总黄酮提取的影响: 设定乙醇浓度为:55% 、 65% 、 75% 温度为: 65℃ ; 提取时间为:2h (3)提取时间对总黄酮提取的影响: 设定提取时间为:1h 、 2h 、 3h 温度为:65℃ ; 乙醇浓度为:65% (4)pH 对总黄酮提取的影响: 设定pH 为 8、9、10、11
温度为65℃、乙醇浓度65%、时间2h
取出样品进行过滤,过滤完后,再进行一次过滤,收集滤液试管中,移取2.5ml 于50ml 的容量瓶中并定容至50ml, 摇匀,用移液管移取5mL 于试管中,加入5%的NaNO 2溶液0.5ml ,混匀后放置4-6min ,然后加入0.5mL 的10%的Al(NO3) 3溶液,摇匀后放置4-6min 。最后加入4%的NaOH 溶液4mL ,摇匀,放置15~20min ,测其吸光度。
按上述标准的显色方法测定总黄酮含量,按下式计算总黄酮得率。
总黄酮得率%=【量取液浓度(mg/mL)*体积(mL )*稀释倍数】/[称去样品干重(g )*1000]
6实验结果
表一:不同波长对吸光度的影响结果
表二:不同波长对吸光度的影响曲线
表 三:溶液分光光度测量结果
标准品溶液浓度ug/ml
0 10 20 30 40
表四:芦丁标准曲线的绘制
A)
由表一数据,根据标准曲线的制作方法,以浓度(c ,ug/ml)为横坐标,吸光值(A722)为横坐标,进行线性回归,得到回归方程:
y=0.01002x+0.0348 r = 0.9898
2
表 五:温度对黄酮提取量的影响(乙醇浓度设为65% 2h)
表 六:乙醇浓度对黄酮提取量的影响(温度设为65℃ 时间h )
表 七:提取时间对黄酮提取量的影响(温度设为65℃ 乙醇浓度65%)
表 七:提取时间对黄酮提取量的影响(温度设为65℃ 乙醇浓度65% 时间2h )
7实验讨论
(1) 由所得数据得到络合物于510 nm 波长处有最大吸收,故测定时选用此波长。
(2) 用最小二乘法做线性回归,得到芦丁标准溶液吸光度A 与浓度C 的关系曲线的回归方程
为:
Y=0.01002X+0.0348 r 2 =0.9898
比色溶液显色后,在5小时内的吸光度的变化小于5%,黄酮类物质与铝盐生成的络合物显色稳定,说明分光光度法以芦丁为标准样品测定总黄酮含量稳定可靠,且简单易行。
(3) 由图表知浴温度对总黄酮得率的影响:黄酮提取量先随温度升高而升高,当达到65℃
以后又开始降低,所以低温和较高温度都不利于总黄酮的提取。温度过低降低了黄酮的
溶解度低,而不能充分地把果皮中总黄酮完全提取,而温度较高时,黄酮类化合物的稳定性差,易发生氧化作用而失效,造成总黄酮得率降低。
(3) 由图表知乙醇浓度对总黄酮提取的影响:黄酮提取量先随乙醇浓度升高而升高,当达到65%以后又开始降低,乙醇的浓度较大和较低时,总黄酮的得率都比较低,表明苹果中的黄酮类化合物具有一定的水溶性。65%的乙醇兼有极性、非极性和中等极性的特点,适合提取混合物成分。另外,与甲醇相比,用乙醇作溶剂具有无毒、无异味、无残留、安全性好等优点。
(4) 由图表知提取时间对总黄酮提取的影响:黄酮提取量先随时间升高而升高,当达到2h 以后又开始降低,所以并非时间越久越好,提取2个小时与提取3个小时差异不是很明显,而且时间较久时提取量还有下降的趋势,原因可能是因为黄酮的稳定性较差,时间较长时易发生氧化反应,在高温提取过程中分解变性,致使黄酮的率降低。 (5) 由图表知pH 对总黄酮提取的影响:黄铜提取量先随着pH 升高而升高,pH 当达到10时,黄铜提取量又开始降低,可能原因是pH 较高时含有的NaOH 溶质较多,而造成分析结果出现干扰,因此pH=10时提取效果最好。
(6) 本体是一个单因素实验,按全面实验要求,须进行3^3=27种组合的实验,且尚未考虑每一组合的重复数。全面试验的最大优点是所获得的信息量很多, 可以准确地估计各实验因素的主效应的大小, 还可估计因素之间各级交互作用效应的大小;
其最大缺点是所需要的实验次数最多, 因此耗费的人力、物力和时间也较多, 当所考察的实验因素和水平较多时, 研究者很难承受。
8注意事项
(1)苹果皮的烘干度要一致,最好就一次性把整个实验所需的材料烘干好。
(2)选择合适的溶剂,所选的溶剂要对所提取的成分的溶解性大,对杂质的溶解度小,而且毒性要小。
(3)注意加入适量的溶剂,在水浴的过程中有必要的隔一段时间摇匀混合物。
(4)关闭水嘴后要先加水到水位线,再接通电源,但水浴锅的水位不能加得过高,以防止水溢出造成安全事故的发生,水浴锅不使用或进行修理时,应切断电源,以保证安全。
(5)要从小到大依次稀释提取液的倍数,使待测液的吸光度能在标准曲线的范围内。 (6)采用NaNO2-Al(NO3)3比色测定时,每加入亚硝酸钠,硝酸铝或氢氧化钠是都要摇匀后静止,且要保证每次测定都要使摇匀时间保持一致。
(7)比色皿使用完毕后要立即用蒸馏水冲洗干净,并用吸水纸吸干比色皿中的水以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率,同时取拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,而不能碰比色皿的光学表面。
(8)为防止光电管疲劳,不测定时必须将试样室盖打开,使光路切断,以延长光电管的使用寿命。
参考文献
1 许任生,天然产物化学导论,---北京:科学出版社,2006
2 杨世林,杨学东,刘云主编,天然产物化学研究,---北京:科学出版社,2009 3 李炳奇,廉宜君主编,天然产物化学实验技术,---北京:化学工业出版社,2012.1 4 唐浩国,黄酮化合物的研究[M],---北京:化学工业出版社,2009 5 武汉大学主编,分析化学实验,---北京:高等教育出版社,2012.3
转载请注明出处范文大全网 » 葛根总黄酮的提取方法研究