范文一:实验室微生物安全准则
在临床实验室,工作人员在接触标本和操作过程中,可能被感染。临床实验室可能接触的微生物可分为三类:1 病毒,如:病毒性肝炎(特别是乙型及丙型肝炎)和获得性免疫缺陷综合症(AIDS);2 细菌,包括:细菌、分枝杆菌、真菌;3 其他具有高毒力的病原体,如出血热病毒和立克次体。因为从病史和体检不能可靠地鉴定所有病人的病原体,所以当接触和处理所有的体液时,均应执行“常规预防措施”。
1.感染途径
(1)空气传播:在取下装有标本试管的塞子时、溶液洒落在坚硬的表面上、用未加塞子的试管进行离心或溶液(包括接种环内的溶液)加热太急时,具有传染性的溶液在上述各种情况下,可能形成气烟雾散布在空气中。
(2)经口传播:用口吸移液可能导致微生物入人体引起传染。传染也可通过间接途径,如饮食或吸烟前没有彻底洗手引起“手-口”传染。
(3)直接接种:偶然的针刺、碎玻璃划伤和动物咬伤均可通过直接接种引起传染。临床标本中的感染原也可通过被纸张轻微划伤的手指、很轻的擦伤或损伤的表皮进入人体造成感染。
(4)粘膜接触:一些病原体,包括肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒(HIV),能够通过与粘膜(如眼结膜)的直接接触进入人体,所以在擦拭眼睛、更换隐形眼镜或使用化妆品前应彻底洗手。
(5)节肢动物媒介:蚊、蜱、蚤和其它体外寄生虫都是潜在的传染源,特别是当室内喂养有动物时。
2.常规预防措施
(1)来自所有病人的血液和体液都被认为是具有传染性的。所有血液和体液的标本都应放置于具有安全盖的结构优良的容器里,以防在运输过程中发生泄漏。采集标本时应防止污染容器的外表或随标本的检验单。如果存在潜在的或实际的污染,则应再加一层包装(例如:包装袋)。
(2)所有处理血液和体液(例如:取下真空试管的塞子)的工作人员都应戴上手套。如果有可能发生血液或体液的喷溅,则应使用面部防护装备。
(3)对于组织学和病理学检查、微生物培养之类的常规操作,并不需要在生物安全柜内进行。但是,如果操作过程中会产生气烟雾或飞沫,则应使用生物安全柜,这些操作包括混匀、超声雾化和剧烈搅拌。
(4)实验室应使用机械移液装置。绝对禁止用口吸移液。
(5)使用注射器和针具时应防止受伤。禁止用手将针套重新套在针头上、禁止故意将针头弯曲或折断、将针头从一次性注射器上取下、或对针头进行其它操作。所有锐利物品在使用后都应放入专用锐器盒内,然后运至处理场所。废弃锐利物品的容器应就近放在便于操作的地方。应在未完全装满前或48小时之内及时更换。
(6)血液或其他体液发生泄漏或工作结束后,均应使用合适的化学杀菌剂对实验室工作区进行表面消毒。可使用2%的84消毒液消毒。
(7)实验中用过的污染物品在重复使用前或装入容器中按传染性废弃物进行处理前,应先进行去污处理。
(8)被血液或其他体液污染的设备在实验室内或外送商家进行维修之前,应先进行清洁和消毒。无法彻底消毒的设备必须贴上生物危害的标签。
(9)手或其他部位的皮肤在接触血液或其他体液后必须立即彻底清洗。在实验工作结束后或取下手套后应立即洗手。在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备。
(10)如果实验人员工作时有可能接触到血液、其它可能具传染性的物质、病人的粘膜或要损伤的皮肤、或在处理污染的物品或表面时,都应戴上手套。在进行血管穿刺时,包括静脉采血、手指或脚背穿刺,也应戴上手套。如果手套破损、刺破、或失去其屏障功能,则应尽快更换。清洗或消毒会损害一次性手套的质量,故不得重复使用一次性手套,在接触病员后应更换手套。
(11)工作区应使用吸收性强的纸张覆盖。在移液、混合、振荡、搅拌或离心时,必须防止发生气烟雾。
(12)患有渗出性病变或湿疹的医务人员在痊愈前不得直接接触病人,也不得接触医疗设备。
(1)生物安全柜
生物安全柜是微生物实验室里控制生物危害的最好的方式之一。实验室可根据需要选择合适的型号,并应根据产品说明书进行安装、使用和维修。
实验室应制定安全柜的维护规程,以确保安全橱内合适的气流流速,并适时更换滤器。安全柜的放置应远离气流不稳定的地方,通风口的设置应根据产品说明书。
在维护、移动和/或处理安全柜之前必须对生物安全橱进行消毒。
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范文二:14实验室微生物安全准则
在临床实验室,工作人员在接触标本和操作过程中,可能被感染。临床实验室 可能接触的微生物可分为三类:1 病毒,如:病毒性肝炎 (特别是乙型及丙型肝 炎 ) 和获得性免疫缺陷综合症 (AIDS); 2 细菌,包括:细菌、分枝杆菌、真菌; 3 其他具有高毒力的病原体,如出血热病毒和立克次体。因为从病史和体检不能 可靠地鉴定所有病人的病原体,所以当接触和处理所有的体液时,均应执行 “常规预防措施”。
1. 感染途径
(1)空气传播 :在取下装有标本试管的塞子时、溶液洒落在坚硬的表面上、用 未加塞子的试管进行离心或溶液(包括接种环内的溶液)加热太急时,具有传 染性的溶液在上述各种情况下,可能形成气烟雾散布在空气中。
(2)经口传播 :用口吸移液可能导致微生物入人体引起传染。传染也可通过间 接途径,如饮食或吸烟前没有彻底洗手引起“手-口”传染。
(3)直接接种 :偶然的针刺、碎玻璃划伤和动物咬伤均可通过直接接种引起传 染。临床标本中的感染原也可通过被纸张轻微划伤的手指、很轻的擦伤或损伤 的表皮进入人体造成感染。(检验地带网整理制作)
(4)粘膜接触 :一些病原体,包括肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒(HIV ),能够 通过与粘膜(如眼结膜)的直接接触进入人体,所以在擦拭眼睛、更换隐形眼 镜或使用化妆品前应彻底洗手。
(5)节肢动物媒介 :蚊、蜱、蚤和其它体外寄生虫都是潜在的传染源,特别是 当室内喂养有动物时。
2. 常规预防措施
(1)来自所有病人的血液和体液都被认为是具有传染性的。所有血液和体液的 标本都应放臵于具有安全盖的结构优良的容器里,以防在运输过程中发生泄漏。 采集标本时应防止污染容器的外表或随标本的检验单。如果存在潜在的或实际 的污染,则应再加一层包装(例如:包装袋)。
(2)所有处理血液和体液(例如:取下真空试管的塞子)的工作人员都应戴上 手套。如果有可能发生血液或体液的喷溅,则应使用面部防护装备。
(3)对于组织学和病理学检查、微生物培养之类的常规操作,并不需要在生物 安全柜内进行。但是,如果操作过程中会产生气烟雾或飞沫,则应使用生物安 全柜,这些操作包括混匀、超声雾化和剧烈搅拌。
(4)实验室应使用机械移液装臵。绝对禁止用口吸移液。
(5)使用注射器和针具时应防止受伤。禁止用手将针套重新套在针头上、禁止 故意将针头弯曲或折断、将针头从一次性注射器上取下、或对针头进行其它操
作。所有锐利物品在使用后都应放入专用锐器盒内,然后运至处理场所。废弃 锐利物品的容器应就近放在便于操作的地方。应在未完全装满前或 48小时之内 及时更换。
(6)血液或其他体液发生泄漏或工作结束后,均应使用合适的化学杀菌剂对实 验室工作区进行表面消毒。可使用 2%的 84消毒液消毒。
(7)实验中用过的污染物品在重复使用前或装入容器中按传染性废弃物进行处 理前,应先进行去污处理。(检验地带网整理制作)
(8)被血液或其他体液污染的设备在实验室内或外送商家进行维修之前,应先 进行清洁和消毒。无法彻底消毒的设备必须贴上生物危害的标签。
(9)手或其他部位的皮肤在接触血液或其他体液后必须立即彻底清洗。在实验 工作结束后或取下手套后应立即洗手。在离开实验室之前应脱下所有的个人防 护装备。
(10)如果实验人员工作时有可能接触到血液、其它可能具传染性的物质、病 人的粘膜或要损伤的皮肤、或在处理污染的物品或表面时,都应戴上手套。在 进行血管穿刺时,包括静脉采血、手指或脚背穿刺,也应戴上手套。如果手套 破损、刺破、或失去其屏障功能,则应尽快更换。清洗或消毒会损害一次性手 套的质量,故不得重复使用一次性手套,在接触病员后应更换手套。
(11)工作区应使用吸收性强的纸张覆盖。在移液、混合、振荡、搅拌或离心 时,必须防止发生气烟雾。
(12)患有渗出性病变或湿疹的医务人员在痊愈前不得直接接触病人,也不得 接触医疗设备。
(1)生物安全柜
海尔生物安全柜是微生物实验室里控制生物危害的最好的方式之一。实验室 可根据需要选择合适的型号,并应根据产品说明书进行安装、使用和维修。 实验室应制定安全柜的维护规程,以确保安全橱内合适的气流流速,并适时 更换滤器。安全柜的放臵应远离气流不稳定的地方,通风口的设臵应根据产品 说明书。(检验地带网整理制作)
在维护、移动和/或处理安全柜之前必须对生物安全橱进行消毒。
范文三:微生物实验室生物安全
文章编号:1004-9231(2007)02-0091-03
当前,各种传染病仍然是人类生存和发展的大敌,老的传染病死灰复燃,新发传染病不断发生,而微生物实验室在人类与传染病作斗争的过程中起着重要的作用。但由于微生物本身的特性和实验室安全防护方面的不足,出现了诸如2003年在新加坡和台湾分别发生的SARS病毒实验室感染等生物灾害事件[1]。生物安全在微生物实验室活动过程中越来越受到人们的关注。为此,本文仅对微生物实验室的生物安全若干问题作一探讨。
1 微生物实验室生物安全
微生物实验室生物安全的核心在实验室生物安全防护,即实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时,通过在实验室设计建造、个体防护、严格遵从标准化操作规程等方面采取综合措施,确保实验室工作人员不受实验对象的感染,确保周围环境不受实验对象的污染[1]。
2 微生物实验室生物安全分级
2.1 分级起因
据记载,在微生物实验室中曾多次发生感染性疾病。在上世纪与实验室相关的感染性疾病有伤寒、霍乱、马鼻疽、布氏菌病和破伤风等病例。1947―1973年,美国疾病控制中心(CDC)记录了109例实验室感染[3]。1949―1951年,Sulkin和Pikel发表的有关实验室感染的调查报告,使人们认识到实验室内培养基或标本的处理及含菌尘粒的吸入是工作人员被感染的主要途径[4]。1974年,美国CDC/NIH首次提出将病原微生物和实验室活动分为4级的概念[5],作为从事致病微生物实验室工作的一般参考。随后美国国立卫生研究院制定的《微生物学和生物医学实验室的生物安全》和WHO颁布的《实验室生物安全手册》基本沿用了此种模式。
2.2 级别划分
由于病原微生物可通过直接或间接感染方式对健康人体造成切实的或潜在的危害,世界卫生组织(WHO)根据微生物的致病性、感染与传染的严重程度、有效治疗和预防措施的有无将其生物危害分为1―4级。我国制定的《实验室生物安全通用要求》(GB14989-2004),则根据实验室生物因子对个体和群体的危害程度分为4个级别(危害程度由低至高),为确保操作人员、周围环境不被微生物感染或污染,从事上述生物危害病原体检验或研究的实验室的生物安全防护也分1―4级,简称为BSL 1―4(Biosafety level ,BSL)级,实行分级管理[6]。
3 生物安全2级实验室要求[7―8]
3.1 实验室建设和设施
实验室的建设和设计应着重考虑生物安全防护问题,确保实验人员和环境的安全,同时保护实验对象不被污染。例如,从事高致病性微生物工作时气溶胶形成的问题;节肢动物或啮齿动物横行造成的环境污染;实验室人员进出、样本检验、有毒试剂使用等工作流程问题。应从功能上划分清洁区和污染区,实验工作区域、休息场所、样本接收及处理、生物废弃物的处置、安放实验设备和耗材的地方均应清楚地加以区分。
实验室的墙、天花板、地面应光滑,易于清洗,防液体渗漏,抗化学腐蚀、可消毒,地面应防滑;工作台面应耐酸碱、有机溶剂腐蚀,耐中等以上的温度,防液体渗透,可消毒。实验室出门处应有洗手池,水龙头开关应设计成用肘部或脚操作,有紧急喷淋设备和洗眼装置,以保证紧急情况发生时可以立即处理。应有专门的污水排放管道,污水排放前应作消毒处理。实验室应考虑提供不循环的向内气流,如不能,则应考虑开窗,这时应安装防节肢动物出入的纱窗。实验室的同一楼中应有高压灭菌器、灭火器、可靠的供电系统和紧急情况下方便疏散的照明灯。在工作场所之外提供实验人员摄食和休息的地方,提供放置工作人员外衣或生活物品的设施等。
3.2 样本运送
应按照有关病原微生物或样本规范运送的要求,将样本放在可靠、安全、经检测合格的容器中运输,严防对人员、环境的污染。
3.3 实验操作
所有的实验操作应降低气溶胶或泡沫的生成,操作应在二级生物安全柜内完成。感染性材料的离心操作应使用安全的离心杯,或密封的离心机转子,在生物安全柜中开启或封闭感染性材料。禁止用嘴吸取液体。尽可能避免使用注射器。发生液体溅出、溢出等事故时应立即向实验室负责人报告,及时处理并有相关记录备案。
3.4 个人防护
应根据操作需要穿工作服(或防护服),离开实验室时应脱去工作服并留在实验室内,限制在实验室以外的场所穿工作服。接触感染性物质的操作,应戴防护手套,操作完毕或离开实验室,接触干净区域前应摘手套,防止污染其他表面或环境。应穿防护鞋(套),在特定区域操作时应穿特殊的鞋。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时,应戴口罩、护目镜、面罩或其他个体呼吸防护用品、防溅出的保护装置,保护脸部皮肤和黏膜,养成勤洗手的习惯。
3.5 生物废弃物处置
生物废弃物是指经实验分析后被丢弃的含有已知或未知微生物的材料,废弃物管理是保障生物安全的最后环节[9]。实验样本在处理和进行实验时产生的废弃物如吸头、离心管、平皿等应放入适当的容器或防漏的高压袋内,实验结束后立即就地高压灭菌。实验过程中产生的污染性液体物质、废弃的液体标本、培养物等应放在盛有消毒液的防渗漏的专用容器中并及时加盖。实验中使用的锐器如针头、注射器、玻璃器具等应放入专用的坚固容器,加盖。高压灭菌器应规范操作,保证灭菌效果。
4 生物安全三级实验室简介[10]
4.1制订严格的实验室操作和技术规程
要求实验人员应在处理致病性和致死性病原方面受过专业训练,并有监督机制。实验室人员工作时必须穿戴隔离服,所有与生物病原等操作有关的步骤,都应在生物安全柜或其他物理遏止装置内进行。
4.2 一级屏障
安装包括系列生物安全柜、各种密闭容器和其他为了消除或减少暴露于有害生物材料设计的工程控制设施等一级屏障。
4.3 实验室建筑设计符合二级屏障的标准?主要用于防止感染性微生物逸出进入环境,避免相邻区域的工作人员和环境暴露于可能的感染性气溶胶之中。实验室工作区和公共通道分开,使用消毒设备和洗手装置;实验室工作区是一个完全密闭的空间,实验室只设置密封结构的观察窗。整个实验室空气成负压状态;实验室的进风要经初、中、高效三级过滤,以清除或杀灭含有的病原体[11],室内空气外排必须经过特殊装置过滤,百分之百地杀灭可能存在的各种病原体。所有物品必须要经过高温、高压的无害化处理才能带出实验室,以确保外部环境的安全[12、13]。
5 微生物实验室生物安全管理[7、8]
5.1 组织与人员职责
成立生物安全委员会,对实验室工作人员和参观者的生物安全负责。制订和修改生物安全管理计划,保证计划的贯彻实施并进行安全检查。实验室应任命协助管理层工作的生物安全员,生物安全员负责提交生物安全计划和培训计划,对实验室的生物安全提出建议和指导,对微生物的危害性作评估,监督操作过程中的生物安全,及时发现隐患,提出解决方案。?
5.2 生物安全手册?编写生物安全手册且方便员工获取、阅读并遵照执行。内容可包括:① 评估实验中接触的微生物的危害级别;② 标准或特殊安全操作规程;③ 个人防护要求;④ 意外发生时应急处理程序;⑤ 生物废弃物处置;⑥ 实验设备安全消毒程序;⑦ 内务管理制度;⑧ 员工培训方法与记录。
5.3 内务制度?在实验室入口明显位置张贴生物危害标志并表明实验室生物安全级别,出口处应有发光指示标志。保证工作区域整洁有序。非实验有关人员、外来参观、进修人员未经允许不得进入实验室。实验室内禁止吸烟、摄食、饮水或其他与实验无关的活动,实验设备维护或运出修理前进行消毒。
5.4事故处理?制订报告危险隐患或事故发生的程序。所有报告以文件形式保存,对事故原因、经过、处理及预防作详细说明。
5.5安全培训?实验室专业技术人员必须清楚地了解工作中存在微生物的种类与危害级别,自愿从事实验室工作,接受安全教育,遵守生物安全规章制度和操作规程。为防止出现差错、事故,避免操作人员获得实验室感染,必须经常地对所有员工进行生物安全培训,保证每个人有好的微生物操作技术,有识别和控制生物危害因子的能力,掌握接触病原微生物后预防感染的方法。新进人员工作前应熟悉操作规程和个人防护知识,通过岗位培训考核后方可独立工作。
5.6健康检查?操作人员应定期作健康检查,从而监测实验感染所得的疾病。操作人员就职前进行体检,在健康时,采集血液并按规定储存,提供有效的主动或被动免疫,对孕妇等易感者免于接触或从事高度生物危险性操作作出规定,实验室发生事故或员工生病时应立即报告,对实验室获得性感染的个人作早期检查。需要时应向每个人提供医学评价、疾病监测和治疗,有关记录应存档。
6 我国实验室生物安全管理现状和对策
随着国家对实验室的认可和论证工作的全面展开,我国已经出台了《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》、《实验室生物安全通用要求》、《生物安全实验室建筑技术规范》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关的实验室安全的标准法律法规,从确保实验室工作人员、仪器设备、实验室清洁和消毒、废弃物处置等方面管理入手,使得实验室生物安全管理得到强化和规范。然而,由于实验室生物安全工作涉及面广,相关职能部门多,相关人员的实验室生物安全意识和自觉性还有待强化,目前在实验室的建设和管理方面尚存在一些隐患。主要存在有关管理制度和措施有待完善落实,对相关人员的安全防护知识和专业操作技能的培训亟待加强,安全设施需要完备等缺陷[14]。另外,一些临床门诊实验室和非医疗系统实验室在生物安全建设和管理方面既缺少有效的防护设施,也缺少生物安全防护意识,是生物安全防护比较薄弱的领域,必须引起相关部门的高度重视。
基于上述现状,在实验室生物安全管理上应进一步理顺管理体系,明确有关部门职能,形成有关部门各司其职、有机配合的工作格局,加大对生物安全工作的支持和投入,全面加强生物安全工作的能力建设;加强生物实验室建筑设计与施工的规范管理;加强生物安全知识的传贯彻力度等措施。只有采取多管齐下的对策,才能尽快将我国实验室生物安全的监督管理纳入标准化和规范化科学管理的渠道,才能充分发挥生物安全实验室的作用,保障实验室生物安全。
7 工作体会
实验室生物安全不是新出现的学科。自人类开始有医疗行为时就存在有实验室生物安全的问题。当一个生物样品从人体采集后,进行样品运送到实验检测,以及剩余样品的处置,直至检验报告发出这一连续过程中,始终贯穿实验室生物安全。
实验室生物安全以往我们没有引起足够的重视,在实际工作中谈及的很少。自2004年中国疾病预防控制中心发生了SARS病毒实验室感染事件后,引起了各级政府和卫生行政部门的高度重视。近年来陆续出台了有关实验室生物安全的法律法规及规范管理性文件,将我国实验室生物安全工作纳入规范管理体系。
实验室生物安全作为体系管理,必将会有一系列的管理制度来系统管理,这样就会使原来一些不规范的操作受到约束。为此,每个工作人员必须要有一个正确的认识,对原有的不规范的行为要干预,错误的陋习要改变,尽可能将对人员、环境的生物污染控制到最低。当然也要注意,不要因实验室生物安全管理,而超越了实际工作现状,影响正常的临床诊断、疾病控制、科学研究工作的开展。同时,必须考虑到实验室生物安全是有共性,亦有个性,要针对不同的实验对象采取相应的安全措施。
建议在专科学校中,开设实验室生物安全课目,应该让专科学生在接触专业前,就有实验室生物安全这一完整概念。
本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。
范文四:微生物实验室安全守则
实验室人员在工作的时候,要接触各种微生物、试样及检验过程中的物品0,这些物质中有些对人体有毒害作用,有些还具有易燃易爆性质;同时,各种仪器、电器、机械等设备,在使用中也可能存在危险性。因此,作为实验室人员,必须遵守以下实验室安全守则。 (1)实验人员必须熟悉仪器、设备性能和使用方法,按规定要求进行操作; (2)微生物室应保持室内通风良好,避免不必要的污染;
(3)凡接触微生物的实验,工作人员应小心使用,确保安全,使用后必须用酒精消毒手和台面,有条件的必须在无菌室超净工作台操作;。
(4)在无菌室操作时,必须穿工作服、戴工作帽及口罩,使用前必须经紫外线照射或其他方法消毒,才可使用,操作必须严格无菌操作,以免污染; (5)不使用无标签(或标志)容器盛放的试剂、试样;
(6)实验中产生的废液、废物应集中处
理,不得任意排放;所用的培养物、被污染的玻璃器皿及阳性的检验标本,都必须用消毒水泡过夜或煮沸或高压蒸汽灭菌等方法处理后再清洗;
(7)在实验室中使用手提高压灭菌锅时,必须熟悉操作过程,操作时不得离开,时刻注意压力表,不得超过额定范围,以免发生危险;
(8)严格遵守安全用电规程。不使用绝缘损坏或接地不良的电器设备,不准擅自拆修电器。
(9)实验完毕,实验人员必须洗手及消毒后方可进食,并不准把食物、食具带进实验室。实验室内禁止吸烟。 (10)实验室应配备消防器材。实验人员要熟悉其使用方法并掌握有关的灭火知识。
(11)实验结束,人员离室前要检查水、电、燃气和门窗,确保安全。
范文五:微生物实验室生物安全
微生物实验室生物安全
2007年第19卷第2期
2007,Vo1.19No.2
上海预防医学杂志
ShanghaiJournalofPreventiveMedicine?91?
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(收稿日期:2006—12—02)
文章编号:1004—9231I2007)02—0091—03
微生物实验室生物安全
金子辰,王奕峰,吴立梦(上海市疾病预防控制中心,上海200336) 当前,各种传染病仍然是人类生存和发展的大敌,老的传 染病死灰复燃,新发传染病不断发生,而微生物实验室在人类 与传染病作斗争的过程中起着重要的作用.但由于微生物本 身的特性和实验室安全防护方面的不足,出现了诸如2003年在 新加坡和台湾分别发生的SAP,S病毒实验室感染等生物灾害事 件….生物安全在微生物实验室活动过程中越来越受到人们 的关注.为此,本文仅对微生物实验室的生物安全若干问题作 一
探讨.
1微生物实验室生物安全
微生物实验室生物安全的核心在实验室生物安全防护,即 实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒 素时,通过在实验室设计建造,个体防护,严格遵从标准化操作 规程等方面采取综合措施,确保实验室工作人员不受实验对象 的感染,确保周围环境不受实验对象的污染[1]. 作者简介:金子辰(1953一),男,副主任医师.
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综述?
2微生物实验室生物安全分级
2.1分级起因
据记载,在微生物实验室中曾多次发生感染性疾病.在上 世纪与实验室相关的感染性疾病有伤寒,霍乱,马鼻疽,布氏菌 病和破伤风等病例.1947—1973年,美国疾病控制中心(CDC) 记录了109例实验室感染J.1949--1951年,Sulkin和Pikel发
表的有关实验室感染的调查报告,使人们认识到实验室内培养 基或标本的处理及含菌尘粒的吸入是工作人员被感染的主要 途径.1974年,美国CI)CJNIH首次提出将病原微生物和实 验室活动分为4级的概念J,作为从事致病微生物实验室工作 的一般参考.随后美国国立卫生研究院制定的<微生物学和生 物医学实验室的生物安全》和WHO颁布的<实验室生物安全手 册》基本沿用了此种模式.
2.2级别划分
由于病原微生物可通过直接或间接感染方式对健康人体 造成切实的或潜在的危害,世界卫生组织(WHO)根据微生物的 致病性,感染与传染的严重程度,有效治疗和预防措施的有无 将其生物危害分为1—4级.我国制定的<实验室生物安全通
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上海预防医学杂志
ShanShaiJournalofPreventiveMedicine
200"/年第19卷第2期
2007,Vo1.19No.2
用要求》(GB14989—2004),则根据实验室生物因子对个体和群 体的危害程度分为4个级别(危害程度由低至高),为确保操作 人员,周围环境不被微生物感染或污染,从事上述生物危害病 原体检验或研究的实验室的生物安全防护也分1,4级,简称 为BSL1,4(Biosafetylevel,BSL),实行分级管理?. 3生物安全2级实验室要求
3.1实验室建设和设施
实验室的建设和设计应着重考虑生物安全防护问题,确保 实验人员和环境的安全,同时保护实验对象不被污染.例如, 从事高致病性微生物工作时气溶胶形成的问题;节肢动物或啮
齿动物横行造成的环境污染;实验室人员进出,样本检验,有毒 试剂使用等工作流程问题.应从功能上划分清洁区和污染区, 实验工作区域,休息场所,样本接收及处理,生物废弃物的处 置,安放实验设备和耗材的地方均应清楚地加以区分. 实验室的墙,天花板,地面应光滑,易于清洗,防液体渗漏, 抗化学腐蚀,可消毒,地面应防滑;工作台面应耐酸碱,有机溶 剂腐蚀,耐中等以上的温度,防液体渗透,可消毒.实验室出门 处应有洗手池,水龙头开关应设计成用肘部或脚操作,有紧急 喷淋设备和洗眼装置,以保证紧急情况发生时可以立即处理. 应有专门的污水排放管道,污水排放前应作消毒处理.实验室 应考虑提供不循环的向内气流,如不能,则应考虑开窗,这时应 安装防节肢动物出入的纱窗.实验室的同一楼中应有高压灭 菌器,灭火器,可靠的供电系统和紧急情况下方便疏散的照明 灯.在工作场所之外提供实验人员摄食和休息的地方,提供放 置工作人员外衣或生活物品的设施等.
3.2样本运送
应按照有关病原微生物或样本规范运送的要求,将样本放 在可靠,安全,经检测合格的容器中运输,严防对人员,环境的 污染.
3.3实验操作
所有的实验操作应降低气溶胶或泡沫的生成,操作应在二 级生物安全柜内完成.感染性材料的离心操作应使用安全的 离心杯,或密封的离心机转子,在生物安全柜中开启或封闭感 染性材料.禁止用嘴吸取液体.尽可能避免使用注射器.发 生液体溅出,溢出等事故时应立即向实验室负责人报告,及时 处理并有相关记录备案.
3.4个人防护
应根据操作需要穿工作服(或防护服),离开实验室时应脱 去工作服并留在实验室内,限制在实验室以外的场所穿工作
服.接触感染性物质的操作,应戴防护手套,操作完毕或离开 实验室,接触干净区域前应摘手套,防止污染其他表面或环境. 应穿防护鞋(套),在特定区域操作时应穿特殊的鞋.当微生物 的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时,应 戴口罩,护目镜,面罩或其他个体呼吸防护用品,防溅出的保护 装置,保护脸部皮肤和黏膜,养成勤洗手的习惯.
3.5生物废弃物处置
生物废弃物是指经实验分析后被丢弃的含有已知或未知 微生物的材料,废弃物管理是保障生物安全的最后环节.实 验样本在处理和进行实验时产生的废弃物如吸头,离心管,平 皿等应放入适当的容器或防漏的高压袋内,实验结束后立即就 地高压灭菌.实验过程中产生的污染性液体物质,废弃的液体 标本,培养物等应放在盛有消毒液的防渗漏的专用容器中并及 时加盖.实验中使用的锐器如针头,注射器,玻璃器具等应放 入专用的坚固容器,加盖.高压灭菌器应规范操作,保证灭菌 效果.
4生物安全三级实验室简介
4.1制订严格的实验室操作和技术规程
要求实验人员应在处理致病性和致死性病原方面受过专 业训练,并有监督机制.实验室人员工作时必须穿戴隔离服, 所有与生物病原等操作有关的步骤,都应在生物安全柜或其他 物理遏止装置内进行.
4.2一级屏障
安装包括系列生物安全柜,各种密闭容器和其他为了消除 或减少暴露于有害生物材料设计的工程控制设施等一级屏障. 4.3实验室建筑设计符合二级屏障的标准
主要用于防止感染性微生物逸出进入环境,避免相邻区域 的工作人员和环境暴露于可能的感染性气溶胶之中.实验室 工作区和公共通道分开,使用消毒设备和洗手装置;实验室工
作区是一个完全密闭的空间,实验室只设置密封结构的观察 窗.整个实验室空气成负压状态;实验室的进风要经初,中,高 效三级过滤,以清除或杀灭含有的病原体,室内空气外排必 须经过特殊装置过滤,百分之百地杀灭可能存在的各种病原 体.所有物品必须要经过高温,高压的无害化处理才能带出实 验室,以确保外部环境的安全_l.
5微生物实验室生物安全管理J
5.1组织与人员职责
成立生物安全委员会,对实验室工作人员和参观者的生物 安全负责.制订和修改生物安全管理计划,保证计划的贯彻实 施并进行安全检查.实验室应任命协助管理层工作的生物安 全员,生物安全员负责提交生物安全计划和培训计划,对实验 室的生物安全提出建议和指导,对微生物的危害性作评估,监 督操作过程中的生物安全,及时发现隐患,提出解决方案. 5.2生物安全手册
编写生物安全手册且方便员工获取,阅读并遵照执行.内 容可包括:?评估实验中接触的微生物的危害级别;?标准或 特殊安全操作规程;?个人防护要求;?意外发生时应急处理 程序;?生物废弃物处置;?实验设备安全消毒程序;?内务 管理制度;?员工培训方法与记录.
5.3内务制度
在实验室入口明显位置张贴生物危害标志并表明实验室 生物安全级别,出口处应有发光指示标志.保证工作区域整洁 有序.非实验有关人员,外来参观,进修人员未经允许不得进 入实验室.实验室内禁止吸烟,摄食,饮水或其他与实验无关 的活动,实验设备维护或运出修理前进行消毒. 5.4事故处理
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上海预防医学杂志
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制订报告危险隐患或事故发生的程序.所有报告以文件 形式保存,对事故原因,经过,处理及预防作详细说明. 5.5安全培训
实验室专业技术人员必须清楚地了解工作中存在微生物 的种类与危害级别,自愿从事实验室工作,接受安全教育,遵守 生物安全规章制度和操作规程.为防止出现差错,事故,避免 操作人员获得实验室感染,必须经常地对所有员工进行生物安 全培训,保证每个人有好的微生物操作技术,有识别和控制生 物危害因子的能力,掌握接触病原微生物后预防感染的方法. 新进人员工作前应熟悉操作规程和个人防护知识,通过岗位培 训考核后方可独立工作.
5.6健康检查
操作人员应定期作健康检查,从而监测实验感染所得的疾 病.操作人员就职前进行体检,在健康时,采集血液并按规定 储存,提供有效的主动或被动免疫,对孕妇等易感者免于接触 或从事高度生物危险性操作作出规定,实验室发生事故或员工 生病时应立即报告,对实验室获得性感染的个人作早期检查. 需要时应向每个人提供医学评价,疾病监测和治疗,有关记录 应存档.
6我国实验室生物安全管理现状和对策
随着国家对实验室的认可和论证工作的全面展开,我国已 经出台了《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》,《实 验室生物安全通用要求》,《生物安全实验室建筑技术规范》, 《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关的实验室安全 的标准法律法规,从确保实验室工作人员,仪器设备,实验室清 洁和消毒,废弃物处置等方面管理人手,使得实验室生物安全 管理得到强化和规范.然而,由于实验室生物安全工作涉及面
广,相关职能部门多,相关人员的实验室生物安全意识和自觉 性还有待强化,目前在实验室的建设和管理方面尚存在一些隐 患.主要存在有关管理制度和措施有待完善落实,对相关人员 的安全防护知识和专业操作技能的培训亟待加强,安全设施需 要完备等缺陷.另外,一些临床门诊实验室和非医疗系统实 验室在生物安全建设和管理方面既缺少有效的防护设施,也缺 少生物安全防护意识,是生物安全防护比较薄弱的领域,必须 引起相关部门的高度重视.
基于上述现状,在实验室生物安全管理上应进一步理顺管 理体系,明确有关部门职能,形成有关部门各司其职,有机配合 的工作格局,加大对生物安全工作的支持和投入,全面加强生 物安全工作的能力建设;JJn强生物实验室建筑设计与施工的规 范管理;加强生物安全知识的传贯彻力度等措施.只有采取多 管齐下的对策,才能尽快将我国实验室生物安全的监督管理纳 入标准化和规范化科学管理的渠道,才能充分发挥生物安全实 验室的作用,保障实验室生物安全.
7工作体会
实验室生物安全不是新出现的学科.自人类开始有医疗 行为时就存在有实验室生物安全的问题.当一个生物样品从 人体采集后,进行样品运送到实验检测,以及剩余样品的处置, 直至检验报告发出这一连续过程中,始终贯穿实验室生物安 全.
实验室生物安全以往我们没有引起足够的重视,在实际工 作中谈及的很少.自2004年中国疾病预防控制中心发生了 SARS病毒实验室感染事件后,引起了各级政府和卫生行政部 门的高度重视.近年来陆续出台了有关实验室生物安全的法 律法规及规范管理性文件,将我国实验室生物安全工作纳入规 范管理体系.
实验室生物安全作为体系管理,必将会有一系列的管理制
度来系统管理,这样就会使原来一些不规范的操作受到约束.
为此,每个工作人员必须要有一个正确的认识,对原有的不规
范的行为要干预,错误的陋习要改变,尽可能将对人员,环境的
生物污染控制到最低.当然也要注意,不要因实验室生物安全
管理,而超越了实际工作现状,影响正常的临床诊断,疾病控
制,科学研究工作的开展.同时,必须考虑到实验室生物安全
是有共性,亦有个性,要针对不同的实验对象采取相应的安全
措施.
建议在专科学校中,开设实验室生物安全课目,应该让专
科学生在接触专业前,就有实验室生物安全这一完整概念.
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