范文一:【doc】弓形虫滋养体的二维结构图像分析
弓形虫滋养体的二维结构图像分析 958
中国人兽共患病杂志ChineseJournalofZoonoses2004,20(11) 文章编号:1002—2694(2004)11—0958—02
弓形虫滋养体的二维结构图像分析
赵恒梅.赵炜.刊,勇力,张忠广
*
摘要:目的建立并分析弓形虫滋养体的形态学数据和参数,为其构建三维结构奠定基础.方法用图象分析仪测量
弓形虫滋养体及其细胞核的长径,短径,等效直径,圆度和长宽比计算其体积等参数.结果弓形虫滋养体长径为3.66?
0.57/zm.短径为1.79?0.30t~m,等效直径为2.29?0.37tan,周长为9.35?0.88/~m,圆度为0.62?0.16,长宽比为0.51?
0.16.细胞核的长径为2.18?0.60pm,短径为1.23?0.31m,等效直径为1.48?0.38p.m,周长为5.61?0.93t~m,圆度为
0.74?0.17,长宽比为0.60?0.16,虫体的表面积为4.37?0.97/Jm2,体积为7.09?1.75/~m0;虫体细胞核的表面积为1.89?
0.85,体积为2.21?1.34btm3.结论本研究对虫体形态学数据和参数的建立,为量化和评价虫体的形态特征奠定了基
础.
关键词:弓形虫滋养体;图象分析;形态测量
中图分类号:R531.8文献标识码:A
Twodimensionm0rph0l0gicalanalysisonthetrophozoitesofToxoplasmagondii
ZHAOHeng—mei,ZHAOWei,SUNYong—li,ZHANGZhong—guang (DepartmentofParasitology,MedicalcollegeofQingdaoUniversity266021,China)
ABSTRACT:Toobtainandanalyzethemorphologicaldataandp~ametersonthetrophozoite
s0fToxoplasmagondiiinorderto
providebasisfortheconstructionofitsstereographicstructures.Thelength,breath,perimeter
,aspectratioequivalentdiameter,round—
nesSandareaofToxoplasmagondiitrophozoitesandtherenucleiweremeasuredbyimagean
alyzer.Thev~umeoftropho~itesand
therenucleiwerecalculated.Resultshowedthatthedistribution,size,equivalentcircledianle
ter,roLindn~,aspectratiooftrophozoites were9.35?0.88m,3.66?0.57m×1.79?0.30t~m,2.29?0.37/~m,0.62?0.16,0.51?
0.16respectively.Thesizeofnu—
cleusWas2.18?0.60t~m×1.23?0.31/zm.thedistributionWas5.61?
0.93tma.TheequivalentcirclediameterWas1.48?0.38
m,TheroundnessWaS0.74?0.17,theaspectratioWas0.60?
0.16.Theareaoftrophozoitesandtheirnucleiwere4.37?0.97
肿2and1.
89?0.85m2.
Thevolumeofthetrophozoitsandtheirnucleiwere7.09?1.75m0and2.
21?1.34m3.
ItCOndudes
thatthesemorphologicaldataandparametersareuse(ulforevaluatingthemorphologyofTox
oplasmagondii.
KEYWORDS:Toxoplasmagondii;imageanalyse;morphometry 弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种专性细胞
内寄生原虫,是免疫缺陷患者患病,致死及母婴垂直
传播致先天性弓形虫病的病原因之一【1】.其滋养
体的形态大小各家报告不一.应用图象分析仪对其
多种参数的测量与分析尚无报道.现将有关数据报
告如下:
1材料与方法
1.1虫体制备RH株弓形虫引自上海第二医科
大学,以滋养体悬液腹腔接种小鼠传代,3d传代一
次,无菌收集腹腔液,PBS洗涤3次,经CF一11过 滤,虫体纯度为95%以上,涂片,甲醇固定.Giemsa 染色.
1.2用德国欧波同公司VIDAS图象分析仪,用×
1000倍观测了1000个滋养体的周长,长径,短径, 等效直径,圆度,长宽比等6项指标,取其平均值. 根据其长径,短径数据计算出虫体体积,计算公式
为:体积(V):4/3ha2.b(a=1/2短径.b=1/2长
径).
2结果
2.1弓形虫滋养体及细胞核的周长,长径,短径,等
效直径,圆度和长宽比的有关数据见表1,2.
*山东省教委资助项目(NO.97K52)
**通信作者:赵恒梅
作者单位;1.青岛大学医学院寄生虫学教研室.青岛266021: 2.青岛大学医学院中心实验室
2004,20(11)中国人兽共患病杂志
ChineseJournalofZoonoses959 表1弓形虫体有关数据(ktm2)
"1]ib]e.1Themmglmn~Iricsof唧瑚gond//tes 表2弓形虫核有关数据(m2)
Table.2ThemorphometricsofToxoplasmagondiinuclei
2.2弓形虫滋养体及细胞核的表面积及体积的有
关数据见表3,4.
表3弓形虫滋养体及细胞核的表面积统计数据(pm2) Table.3TheareasofToxoplasmagondllTrophozoites.nude?
?sandcyctoplsma(1tm2) 表4弓形虫滋养体及细胞核的体积统计数据() Table4.ThevolumeofToxoplasmagondiiTrophozoitesand
itsnucleus(l
3讨论
图象分析技术应用于生物学的形态学研究,一 方面可以极大地减少生物显微镜测量的繁琐工作 量.消除主观因素对形态学研究的影响,更精确地测 量有关数据;另一方面还对可以对一些不规则的形 态特征进行定量.现已应用于血吸虫卵,卡氏肺孢 子虫及阴道毛滴虫虫体的测量.本文以弓形虫RH 株滋养体为材料,测到虫体的周长为9.35?0.88 m(17.92,3.37m),长径为3.66?0.57~m(6.25 ,
1.20rn),短径为1.79?0.30/~m(3.29,0.86 m),等效直径为2.29?0.37m(3.84,0.93/~m), 圆度为0.62?0.16(0.98,0.27),长宽比为0.51? 0.16(0.91,0.29).细胞核的周长为5.61?0.93 ttm(12.93,1.36m),长径为2.18?0.60tLm(5.51 ,
0.52rn),短径为1.23?0.31/zm(2.34,0.31 ttm),等效直径为1.48?0.38~m(2.83,0.39/~m). 圆度为0.74?0.17(1.08,0.30),长宽比为0.60? 0.17(0.91,0.27).虫体的表面积为4.37?0.97 rrl(11.57,0.69ttm2),体积为7.09?1.75rrl3 (29.20,0.63rrl0);虫体细胞核的表面积为1.89? 0.85m2(6.30,0.12m2),体积为2.21?1.34m3 (11.14,0.03m0).据古钦民【]报道滋养体的大 小为平均为5.0m×1.5m,本文测到的数据为 3.66tLm×1.79m,其长径略短而短径略粗.其原 因是否与虫体衰老或制片过程中虫体干燥浓缩有 关?今后应进一步观测虫体发育增殖的不同时间形
态的变化以及不同染色法对虫体大小的影响.本文 以弓形虫RH株的滋养体为材料.初步建立了二维 结构的有关数据,为进一步构建虫体三维立体结构 奠定了一定的基础.
收稿日期:2004—03—20
范文二:弓形虫
C6-弓形虫
宠福鑫动物医院中西结合国际动物诊疗中心
北京市昌平区回龙观龙禧三街龙锦苑6区北门,010-57903673
作者:聂振哲
近些年来,由于很多媒体的错误宣传,甚至人医妇产科医生对弓形虫的不够了解而错误的引导大众,诸如,猫狗可引起弓形虫病,造成可怕的胎儿畸形。有些甚至采取夸张手法,耸人听闻,引起大众无端的恐慌,造成很多小动物被遗弃。本文主要针对临床上较多的动物主人关于弓形虫的咨询进行论述,而非犬猫弓形虫病得论述,希望所有同仁对弓形虫和人的关系有正确的理解。
病原体和流行病学
弓形虫病是由一种弓形虫寄生引起的感染,病原体为龚地弓形虫,有些文献翻译为刚地弓形虫。
猫为弓形虫的终末宿主,会排出弓形虫卵囊。犬为弓形虫的中间宿主,不会排出弓形虫卵囊,但是可以机械性的排出传播卵囊。据报道,美国有大于20%的犬弓形虫血清抗体检测呈阳性。
世界各地的弓形虫感染非常普遍,美、英的成年人中,大约16%到40%发生过感染,有的调查达70%,而欧洲大陆和拉丁美洲的成年人,50%到80%发生过感染,法国人高达90%。1985到90年我国的23个省、市、自治区的调查,大都在10%以下,明显比外国低,但是之后未见相关调查及报道。
生活史
弓形生活史包括有性生殖和无性生殖阶段,全过程需两种宿主,在猫科动物体内完成有性世代,同时也进行无性增殖,故猫是弓形虫的终宿主兼中间宿主。在其它动物或人体内只能完成无性生殖,有性生殖只限于在猫科动物小肠上皮细胞内进行,称肠内期发育。无性生殖阶段可在肠外其它组织、细胞内进行,称肠外期发育。弓形虫对中间宿主的选择极不严格,除哺乳动物外,鸟类、鱼类和人都可寄生,对寄生组织的选择也无特异亲嗜性,除红细胞外的有核细胞均可寄生。
中间宿主内的发育 当猫粪内的卵囊或动物肉类中的包
囊或假包囊被中间宿主如人、羊、猪、牛等吞食后,在肠内
逸出子孢子、缓殖子或速殖子,随即侵入肠壁经血或淋巴进
入单核吞噬细胞系统寄生,并扩散至全身各器官组织,如脑、
淋巴结、肝、心、肺、肌肉等进入细胞内发育繁殖,直至细
胞破裂,速殖子重行侵入新的组织、细胞,反复繁殖。在免
疫功能正常的机体,部分速殖子侵入宿主细胞后,特别是脑、
眼、骨骼肌的虫体繁殖速度减慢,并形成包囊,包囊在宿主
体内可存活数月、数年,甚至终身不等。当机体免疫功能低
下或长期应用免疫抑制剂时,组织内的包囊可破裂,释出缓
殖子,进入血流和其他新的组织细胞继续发育繁殖。包囊亦中间宿主之间或终宿之间互相传播的主要形成。
终末宿主内的发育 猫或猫科动物捕食动物内脏或肉类组织时,将带有弓形虫包囊或假包囊吞入消化道而感染。此外食入或饮入外界被成熟卵囊污染的食物或水也可得到感染。卵囊内子孢子在小肠腔逸出,主要在回肠部侵入小肠上皮细胞发育繁殖,经3~7
天,上皮细胞内的虫体
形成多个核的裂殖体,成熟后释出裂殖子,侵入新的肠上皮细胞形成第二、三代裂殖体,经数代增殖后,部分裂殖子发育刚地弓形虫成熟、未成熟卵囊和红细胞为配子母细胞,继续发育为雌雄配子体,雌雄配子受精成为合子,新近形成卵囊,破出上皮细胞进入肠腔,随粪便排出体外,在适宜温、湿度环境中经2~4天即发育为具感染性的成熟卵囊,猫吞食不同发育期虫体后排入卵囊的时间不同,通常吞食包囊后约3~10天就能排出卵囊,而吞食假包囊或卵囊后约需20天以上。受染的猫,一般可排出1000万/日卵囊,排囊可持续约10~20天,其间排出卵囊数量的高峰时间为5~8天,是传播的重要阶段,卵囊具双层囊壁,对外界抵抗力较大,对酸、碱、消毒剂均有相当强的抵抗力,在室温可生存3~18个月,猫粪内可存活1年,对干燥和热的抗力较差,80℃1分钟即可杀死,因此加热是防止卵囊传播最有效的方法。
根据弓形虫的生活史,我们可以得出以下几点关于弓形虫传播的知识点:
1.
2. 猫是弓形虫的终末宿主,只有猫才能排出具有感染性的卵囊。 猫在捕食野生动物、吃被弓形虫感染过的生肉或者接触到被卵囊污染的食物或水时才
具有感染的可能性,之后排出感染性卵囊。所以纯室内饲养和只吃猫粮的猫是很难有
机会感染弓形虫的。反之,户外生活的猫或者流浪猫则具备很高的感染弓形虫的可能
性。
3. 猫排出的感染性卵囊在体外合适的温度和湿度下发育2-4天之后才具备感染性。48小
时以内的卵囊是不具备感染性的。所以每天清理猫砂特别重要。
4. 猫的卵囊在环境中有着极强的抵抗力,一般不容易杀灭。囊合子可以在水里、潮湿的
土壤里生存好几个月或更长,因而猫粪污染的食物、饮水、甚至尘土,人吃下去都可
以传染。
5. 人可以通过接触被弓形虫卵囊污染的土壤或水感染弓形虫,所以养成洗手的习惯非常
重要。
6. 因为几乎所有哺乳动物和鸟类都可以感染弓形虫。人的传染来源主要来自于这些动物
的肉类,如果肉类烹煮的温度不够和时间过短,其中的弓形虫没有杀死,就有传染的
危险。
7.
8.
9. 生肉或切肉案板的污染生食的水果或蔬菜同样可以传染弓形虫。 弓形虫污染的牛奶等奶制品同样可以传染弓形虫。 犬可能会机械性的传播弓形虫卵囊。所以,教育狗不要有捡食的习惯就显得非常重要。
但是有新闻报道说“狗与人关系密切,是人类的重要传染源之一”,还有人生下的孩
子出现了“智力迟钝、先天性心脏病或者畸形”,就归罪于家里养狗,这些都是缺乏
依据的、不负责任的说法。
10. 在完全熟食肉类的地区,猫科动物是人的重要传染来源。但是,作为中间宿主的许多
其他动物同样可以传播。例如有许多牧场极少有猫,也有很多牛羊感染;而且世界上
还有个别岛屿没有猫,岛上居民感染率仍然很高。所以,国内有一本重要的《人体寄
生虫学》书上说:由于作为中间宿主的家畜感染率很高,故从人的感染来源来说,猫
粪的污染就不及吃未熟肉类为重要。
临床症状
正常猫感染弓形虫可能只会出现自限性腹泻。
弥散性弓形虫病得猫可能出现精神沉郁、食欲不振、体温先升后降、腹水、黄疸、呼吸困难。一般来讲,免疫系统正常的猫不会出现弥散性感染,但是如果猫同时感染FIPV/FIV/FeLV,则可能出现弥散性症状。
正常人感染弓形虫绝大多数没有症状,或者症状很轻,不知道是什么时候感染的,只有少数人初次感染(或称原发性感染)时有发热、淋巴结肿大、头痛、肌肉关节痛和腹痛,几天或数周后随着人体产生免疫力,症状消失,只是形成的包囊在身体里存在几个月、好几年或者更长时间,一般都是自愈。但是,有严重免疫缺陷的病人,如爱滋病人等,如果发生感染,后果就很严重。怀孕妇女感染可传染给胎儿,也有可能发生严重后果。
弓形虫对胎儿的危害
如果怀孕前3个月发生弓形虫感染,大约40%胎儿可能有严重损害,出现流产、死胎或新生儿疾病,或者出生后有眼、脑或肝脏的病变或畸形,如视网膜脉络膜炎、白内障、脑内钙化、脑积水、小头畸形、智力障碍、黄疸和肝脾肿大。怀孕3个月之后发生的感染,严重者不到3%。
1996年,芬兰赫尔辛基大学医院的一项弓形虫对胎儿影响的研究发现:在他们进行血清抗体检查的16733名孕妇中,只有42人是原发性感染,其中有36 人接受了螺旋霉素治疗,长期随访结果,她们的孩子中共发生4例先天性弓形虫病,2例有严重的神经系统病变,2例无临床症状。其余原发性感染孕妇所生的孩子在生长发育和智力方面与其他孕妇的孩子没有不同。 弓形虫感染的预防
1. 注意饮食卫生,肉类要充分煮熟,避开生肉污染熟食,养成生熟菜板分开的生活习惯。
2. 室内饲养猫,喂熟食或成品猫粮,避免它们在外捕食。因为猫的感染是吃了感染了弓形虫的
老鼠或鸟类,或者吃了被弓形虫卵囊污染的食物。
3. 要注意日常卫生,每天清除猫的粪便,不要将粪便堆积到第二天清理,接触动物排泄物后要
认真洗手。
4. 除非孕妇血清检查证明已经有过弓形虫感染,否则孕妇怀孕期间要避免接触猫及其粪便。
5. 弓形虫感染有多种简便有效的药物治疗,如磺胺类加乙胺嘧啶,螺旋霉素等,治疗须按医嘱
进行,孕妇感染及时治疗大约可使胎儿感染机会减少。
6. 孕妇感染弓形虫可传染给胎儿,发生先天性感染,由于先天性感染胎儿有可能产生严重后果,
所以很重要。可是,只有在怀孕前没有感染过弓形虫的孕妇,在怀孕期间发生初次(原发性)感染才有可能传染给胎儿,如果孕妇在怀孕前感染过弓形虫,那她就不再有传染的危险。
7. 如果备孕母亲经检测已经感染过弓形虫,具有弓形虫抗体IgG,那么就无需担心再次感染的
可能性。
弓形虫结果的判读
弓形虫检测一般检测IgG,IgM两种抗体,IgG为长效抗体,IgM为短效抗体。
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写在最后
每一位母亲都希望给自己的孩子最好的成长环境,这是人之常情。遗憾的是,绝大多数家人和媒体对弓形虫一知半解的时候,只是一味劝告准妈妈们远离宠物,甚至危言耸听,造成不必要的惊慌。盲目地把其实无害的猫猫狗狗随便送走,狗狗会害怕、忧郁,健康和性情都会发生恶化。而主人也会因思念、内疚而损害健康,实在是一场不必要的悲剧。
养狗的女性在准备做妈妈之前,应做TORCH检查。弓形虫的检查是它所包含的四个项目之
一。如果TORCH的检验报告上显示已经感染过弓形虫,就可安心迎接宝贝的到来;但若结果显示正在感染,则暂时不能怀孕。弓形虫主要存在于流浪猫的体内,室内家猫一般没有。假如你已经感染过弓形虫,早就在体内产生了抗体,没有关系了,不用担心怀孕会影响到小孩。 IgG(+)说明以前感染过弓形虫,体内存在抗体。 IgM(+),表示正在处于弓形体感染期。 IgG(-)表示以前没有感染过弓形虫。 IgM(-)表示目前没有处于弓形虫的感染期。
范文三:弓形虫
弓形虫
弓形虫的传播途径有哪些,检测的临床意义是什么,实验室检测结果如何判定?
弓形虫(Toxoplasma )是一种寄生虫,广泛分布于世界各地,猫、狗、兔、猪等哺乳动物和鸟类均普 遍易感, 人通过食入未煮熟的肉、 蛋、 奶类及被污染的水果、 蔬菜或者输入了感染有弓形虫的血浆而传染, 也可通过接触猫的粪便或被污染的土壤而传染。大部分人感染弓形虫后没有症状,但对于免疫受损患者, 可引起中枢神经系统损害和全身性播散感染。孕妇感染可导致胎儿畸形,且病死率高。
常用的实验室检测方法有:
1.IgG抗体 IgG 抗体通常在感染后 1~2周出现, 1~2月达到高峰, 然后逐渐下降, 通常终身存在。 检 测方法有:间接免疫荧光试验(IFA ):急性期和恢复期双份血清 IgG 抗体滴度4倍及以上升高或单份血 清≧ 1∶ 1024可提示近期感染。 IgG 抗体阳性(但滴度<1∶ 1024),且="" igm="" 抗体阴性提示弓形虫既往感="" 染或窗口期。="" igg="" 抗体亲合力测定试验:弓形虫="" igg="" 抗体亲合力高可排除发生在="" 3~5月内的感染,低亲="">1∶>
2.IgM抗体 IgM 抗体比 IgG 抗体出现早,下降快。正常人 IgM 抗体为阴性。 IgM 抗体阳性多提示近 期感染,但也有特殊的情况,慢性感染或急性感染后数年 IgM 仍然存在。由于类风湿因子及抗核抗体等因 素的干扰, IgM 检测常出现假阳性,故阳性或临床可疑的结果要同时做 RF 乳胶吸附试验后进行确证,同 时结合 IgG 、 IgA 、 IgE 结果进行判定。 由于我国孕妇弓形虫 IgG 抗体阳性率很低, 故检测 IgG 对排除 IgM 假阳性很有帮助。 比如 IgG 结果为阴性而 IgM 结果为阳性, 此时可能为感染窗口期, 但间隔2~4周后 IgG 结果仍为阴性而 IgM 结果为阳性,那么可以考虑 IgM 检测出现了假阳性。
3.IgA抗体 IgA 抗体可以持续数月或一年以上。在一些先天性弓形虫病的新生儿中 IgM 抗体阴性,通 过 IgA 抗体 IgG 抗体可以确诊。
4.IgE抗体与 IgG 抗体同时出现,感染后 2~3月达峰值,随后迅速下降。故 IgE 抗体出现提示近期感 染。
病因
由刚地弓形虫所引起,呈全球流行。特殊人群如肿瘤患者、免疫抑制或免疫缺陷患者、先天性缺陷婴幼儿 感染率较高。
弓形虫病临床表现
一般分为先天性和后天获得性两类,均以隐性感染为多见。临床症状多由新近急性感染或潜在病灶活化所 致。
先天性弓形虫病的临床表现复杂。多数婴儿出生时可无症状,其中部分于出生后数月或数年发生视网膜脉 络膜炎、斜视、失明、癫痫、精神运动或智力迟钝等。下列不同组合的临床表现:视网膜脉络膜炎、脑积 水、小头畸形、无脑儿、颅内钙化等应考虑本病可能。
后天获得性弓形虫病病情轻重不一,免疫功能正常的宿主可表现急性淋巴结炎最为多见,约占 90%。免疫 缺损者如艾滋病、 器官移植、 恶性肿瘤 (主要为霍杰金病等)常有显著全身症状, 如高热、 斑丘疹、肌痛、 关节痛、头痛、呕吐、谵妄,并发生脑炎、心肌炎、肺炎、肝炎、胃肠炎等。
眼弓形虫病多数为先天性,后天所见者可能为先天潜在病灶活性所致。临床上有视力模糊、盲点、怕光、 疼痛、泪溢、中心性视力缺失等,很少有全身症状。炎症消退后视力改善,但常不完全恢复。可有玻璃体 混浊。
弓形虫病检查
1. 病原学检查
将可疑病畜或死亡动物的组织或体液,做涂片、压片或切片,甲醇固定后,作瑞氏或姬氏染色镜检可找到 弓形虫滋养体或包囊。
2. 用 PCR 方法检测特异性核酸
3. 血清学诊断
间接荧光抗体试验、间接血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验和补体结合试验检测特异性 IgM 、 IgG 、 IgA 抗 体或血清循环抗原。
弓形虫病诊断
1. 具有临床症状和特征。
2. 排除其他与之相混淆的疾病。
3. 病原学阳性者。
4. 检测特异性 IgM 、 IgG 、 IgA 抗体三项中有两项阳性者。
弓形虫病治疗
多数用于治疗本病的药物对滋养体有较强的作用,而对包囊阿齐霉素和阿托伐醌可能有一定作用外,余均 无效。
1. 免疫功能正常者:
方案 1:磺胺嘧啶和乙胺嘧啶联合。
方案 2:乙酰螺旋霉素:一日三次口服
方案 3:阿奇霉素:顿服。可与磺胺药联合应用(用法同前)。
方案 4:克林霉素:一日三次口服。可与磺胺药联合应用(用法同前)。
2. 免疫功能低下者:可采用上述各种用药方案,但疗程宜延长,可同时加用 γ-干扰素治疗。
3. 孕妇可用乙酰螺旋霉素(或克林霉素或阿奇霉素)。
4. 新生儿可采用螺旋霉素(或乙胺嘧啶) +磺胺嘧啶,或阿奇霉素。
5. 眼部弓形虫病可用, ① 磺胺类药物 +乙胺嘧啶 (或螺旋霉素) :疗程至少一个月; ② 克林霉素:每日 4次, 至少连服 3周。若病变涉及视网膜斑和视神经头时,可加用短程肾上腺皮质激素。
弓形虫病预后
本病预后和虫株毒力及受感染者的感受性有关。
本病先天性的预后多较严重,不治疗的病例的病死率约 12%。最常见的后遗症为视网膜脉络膜炎,其次为 脑内钙化、精神障碍、脑积水、小脑畸形和抽搐等。
本病获得性如及时治疗,预后多较好。中等度急性获得性如不治疗,淋巴结肿大等症状可持续数月,但多 无不良后果而自然消退。特异性治疗可以缩短病程。多器官被侵犯时,特别有免疫抑制的病例,后果非常 严重。
弓形虫病预防
1. 做好孕前、孕中检查。
2. 家猫最好用干饲料和烧煮过的食物喂养,定期清扫猫窝,但孕妇不要参与清扫。
3. 低温(-13℃ )和高温(67℃ )均可杀死肉中的弓形虫。
4. 操作过肉类的手、菜板、刀具等,以及接触过生肉的物品要用肥皂水和清水冲洗。
5. 蔬菜在食用前要彻底清洗。
6. 提高医务人员和畜牧兽医人员对本病的认识及掌握本病的诊断和治疗方法。对人群和动物特别是家畜的 感染情况及其有关因素进行调查,以便制定切实可行的防治措施。
7. 做好水、粪等两管五改工作,要特别注意防止可能带有弓形体卵囊的猫粪污染水源,食物和饲料等。
范文四:弓形虫
弓形虫
弓形虫中医叫三尸虫,是细胞内寄生虫. 寄生于细胞内,随血液流动,到达全身各部位,破坏大脑、心脏、眼底,致使人的免疫力下降,患各种疾病。它是专性细胞内寄生虫,球虫亚纲,真球虫目,等孢子球虫科、弓形体属。人感染了这种寄生虫,便患了弓形虫病。
1、弓形虫是怎样传染的?
任何动物食入弓形虫的包囊,卵囊或活体,都能受到感染而患弓形虫病。猫科动物的粪便中,常带有卵囊。可以污染草原、牧场、蔬菜、水果等。猫的身上和口腔内常常有弓形虫包囊和活体。直接接触猫易受感染。狗是弓形虫的中间宿主,也可以传染弓形虫,但是它的粪便和排泄物却都没有传染性,所以单纯和狗接触不会感染弓形虫病。其他家畜、家禽,如:鸡、鸭、鹅、猪、牛、马、羊等动物体内有时带弓形虫包囊和活体。所以食用肉、蛋奶也可能感染,鱼肉体内有时也有弓形虫包囊或活体。鱼也是一个传染源,另外某些吸血昆虫,叮咬人时也可以感染。
人和人之间也可以互相传染。怀孕妇女,可以把弓形虫通过胎盘传染给胎儿。患弓形虫病的妇女,在怀孕期如果有血播期(即弓形体、燕形体、尖形体活动)胎儿一定被感染。所有胎儿80%为隐伏性的慢性弓形虫病患者,携带终生。还有一部分成为多病型体质,实际是多病型弓形虫病患者。很少一部分成为死胎畸形、弱智。在哺乳期,因婴儿成为“带病免疫”者,所以尽管母乳中带有弓形虫,婴儿并无大碍,每喂一次奶,便接种一次活疫苗。婴儿可以照常发育成长。但症状轻重不一。
患有弓形虫病的妇女,在月经期弓形虫活动最强烈。妇女所排的经血里面常含有大量的弓形虫包囊,是一个不小的传染源。决不应忽视。 另外,患弓形虫病人的尿液中,唾液中、眼泪中、鼻涕中、男人的精液中、有时带有弓形虫包囊。人类通过性行为可以互相传染。 急性发作的病人的喷嚏,可以成为飞沫传染源。
市售的各种肉制品、香肠、火腿肠、罐头也都可以成为传染源。奶制品、奶油制品、蛋类制品、蛋糕、各类饼干、点心、冰点有时也能成为传染源。
总之不符合卫生标准的鱼、肉、蛋、奶及其制品、都有可能传染弓形虫病。
2、怎样防治弓形虫感染?
弓形虫病的预防分为非免疫病源感染的预防和免疫病源感染的预防。
一、非免疫病源感染的预防
由于饮食或其它原因,大量非免疫病源进入人体内,造成非免疫病源感染,如果被感染者以前没有感染过弓形虫,这便是初次感染,由于体内不能很快生成抗体,会造成极严重的病症和后果甚至死亡。对于非初次感染的免疫低下者同样造成不良后果。如艾滋病患者,癌症晚期等,这种情况当前少见。
但因大多数人都是弓形虫带虫者,形成带虫免疫,被感染后很难出现初次感染的症状。
预防方法是:
1.避免与猫、狗等动物的亲密接触。
2.避免动物尤其是猫的粪便污染水源,蔬菜等。
3.要熟食、不生食动物性食物。
4.厨房里要生、熟食品分离,生、熟食分别加工,如用两块菜板,两把刀具等。
5.饭前便后要养成洗手的习惯。
6.妇女月经期对经血应很好的处理。
二、免疫病源感染的预防
过去一向认为弓形虫滋养体56℃减活,只要熟食就不会感染弓形虫,现代科学研究证明熟食照常会感染弓形虫。只不过是慢性感染,症状较轻微,再加上潜伏期长,使人们不易察觉。要想做到预防慢性感染就要有一整套的预防手段。
预防弓形虫慢性感染要分两个阶段:
第一是当前怎么办?第二是长远根本上怎么解决?
1. 是当前首先我们要从饮食上着手,要改变人们的理念,动物性食品中弓形虫感染率很高,尽管熟食也会照常感染,可是我们又不能没有动物性食品。所以暂时先择用以下的方法控制慢性感染:
2. 购买动物性食品时应注意挑选。
3. 食用动物性食品应有节制,最好不要每天都吃动物性食品。
3、先天性弓形虫感染对胎儿有哪些危险?
如果怀孕头3个月发生先天性感染,大约40%胎儿可能有严重的损害,出现流产、死胎或新生儿疾病,或者出生后有眼、脑或肝脏的病变或畸形,如视网膜脉络膜炎、白内障、脑内钙化、脑积水、小头畸形、智力障碍、黄疸和肝脾肿大。怀孕末3个月发生的感染,严重者不到3%。
1996年,芬兰赫尔辛基大学医院的一项弓形虫对胎儿影响的研究发现:在他们进行血清抗体检查的16733名孕妇中,只有42人是原发性感染,其中有36 人接受了螺旋霉素治疗,长期随访结果,她们的孩子中共发生4例先天性弓形虫病,2例有严重的神经系统病变,2例无临床症状。其余原发性感染孕妇所生的孩子在生长发育和智力方面与其他孕妇的孩子没有不同。
4、弓形虫感染检查方法
虽然法国和奥地利等国家规定对孕妇常规进行弓形虫抗体检查,做法是在怀孕早期进行血清抗体检查,如果为阴性(即没有感染过),告诉孕妇注意预防感染,并定期复查;一旦发现孕妇出现急性感染,即给予螺旋霉素治疗,同时对胎儿进行羊膜穿刺和超声检查。如果证明胎儿发生感染,孕妇则采用磺胺加乙胺嘧啶治疗;要是发现胎儿有明显的病症,父母可考虑终止妊娠。但这种方法是否值得采用,仍有争论。由于孕妇在妊娠期间的感染和胎儿感染的机会都很小,所以英美的研究结论是这种筛检不值得常规做。
进行孕妇感染的筛检是个很严肃的公共卫生问题。一般认为须根据当地的流行病学研究而定。首先进行检查必须有明确牡丹和处理原则,筛检方法一定要有很高的准确性,有系统的检查和处理持续,大众可以接受,成本效益分析表明确实有很高的效益。
抗弓形虫IgM 抗体阳性提示近期感染。由于母体IgM 类抗体不能通过胎盘,故在新生儿体内查到弓形虫特异IgM 抗体则提示其有先天性感染。IgG 抗体阳性提示有弓形虫既往感染。鉴于技术上的原因和生物学上的交叉反应,对阳性结果应结合临床综合判断。(这是因为抗体检查方法漏检率非常高。)
现在我国有许多医院已在对孕妇普遍进行弓形虫抗体检查。有些医院的检查和处理没有规范,检查归检查,结果无所谓,也不做处理。不只一次地有人向我询问检查结果的意义:阳性怎么办?要不要治疗或终止妊娠?有的出现矛盾的结果,一个医院检查结果为阳性,复查或者另一个医院检查又变成阴性,为什么?因此,试剂和检查的质量一定要高,筛检方法要标准化,临床医生必须熟悉血清学检查结果的意义和判断,实验质量不高造成的假阳性和假阴性结果,不仅浪费病家钱财,而且还引起病人和家属的焦虑,带来很大精神负担,甚至造成难以弥补的损失。
5、 弓形虫感染率有多高?
弓形虫的感染率极高,1985年调查报告美国感染率为84%、法国为90%、危地马拉为94%。因为千百年来没有引起医疗界的重视此病得以广泛流行,造成了世界性的感染。
6、弓形虫病主要有那些症状
弓形虫可以使人表现为慢性寄生虫病。
1) 发热、发热程序及持续时间不一定。
2) 皮疹:常见的皮疹有斑丘疹和出血性皮疹。
3) 胃肠道症状;可发生呕吐,肠鼓气,顽固性腹泻,粘液血便,也可有类似胃溃疡,慢性胃炎,萎缩性胃炎,阑尾炎,结肠炎等症状。
4) 呼吸系统症状:可发生肺炎,支气管炎。
5) 黄胆、有类肝炎症状。出现黄胆,轻者也可无黄胆,肝功能化验可改变,肝肿大,脾亦可肿大。
6) 神经系统症状:头疼、头晕、神经衰弱、神经官能症、精神分裂症、儿童多动症、恐惧症、、强迫症、抽搐、癫痫、麻痹等。
7) 心血管;心肌炎,心包炎,心律不齐,早搏,心绞痛,血压不正常,血栓,血管炎等。
8) 淋巴结肿大
9) 体腔积液;水肿
10)眼病:如视网膜炎、脉络膜炎、近视、斜视、眼球震颤、小眼畸形、小眼睑、
11) 贫血:乏力、低热、身体虚弱、头晕、指甲、嘴唇及眼皮苍白、烦躁或忧郁、昏昏欲睡、嘴痛、妇女停经。没有食欲、头痛、便秘、烦躁及很难集中注意力。
12) 尿路感染,尿中出现红细胞及管形
13) 也可引起肾小球肾炎
14) 可引起骨质疏松,骨质增生,骨刺,弓形体可以破坏骨髓,引起造血系统疾病。也可引起颈椎病,腰间盘突出。
15) 破坏肌肉,引起肌肉炎,腰肌损伤。
除上述提到的几种病以外,在青少年中常表现为头痛头晕,学习精力不能集中,不爱完成作业,有少数表现为抑郁觉得累,缺乏上进心精神痛苦,也有表现多动,烦躁易怒,行为不很规范.老年人表现为老年病,冠心病,脑血管病,骨质病,肝肾病,脑萎缩等.
7、弓形虫病急性感染有哪些症状
弓形虫病重型急性感染少见。可出现全身症状。体温可上升到40摄氏度或更高伴有寒颤。呈驰张热或稽留热,持续2- 3周,随体温上升,急性
症状加重,头痛剧烈,全身肌肉疼痛以眼部和背部疼痛为甚。面部潮红眼球结膜充血、出现神情滞呆、无欲状态、还可出现嗜睡、昏迷或狂躁等精神、神经症状。食欲不振,腹泻或便秘。病情经过较严重,可造成死亡。
有的患者可出现斑疹,麻疹样皮疹,红斑结节性皮疹,可持续两周,有的可留无色栗粒小疹,或紫褐瘢痕,数十年。也可出现淋巴结、肝、脾肿大。常伴有脑膜脑炎、肝炎、肺炎、心肌炎、心包炎、可导致死亡。有的患者出现视网膜炎、脉络膜炎。急性感染是全身的,受损部位可以是全身的,也可以是某一器官或某几个器官。
轻型急性感染,全身症状不太明显,类似一次感冒,或一次急性胃肠炎。
由于目前用于临床弓形虫检测方法检出率不高,以及临床医生对弓形虫病的认识不足,往往造成误诊。延误治疗,或是误用激素。造成弓形虫爆发。此时在一些大医院脑脊液可查出弓形体,依据现在的国际上的惯用治疗方案:乙胺嘧啶、磺胺嘧啶与阿齐霉素等药治疗后肝、肾、及造血系统都得到严重的破坏。
此时即使再予以正确的治疗,愈后也会留下后遗症。
可能是糖尿病的主要致病原因
青岛某研究所声称已经发现了糖尿病的致病主要原因,并解释了产生并发症的原因。其研究结果是:
解剖学证明糖尿病可能是弓形虫引起的。大量的弓形虫寄生于大脑细胞内和神经细胞内。使人的各种腺体的分泌都有可能发生紊乱,其中也包括胰岛素的分泌。如果弓形虫同时寄生于胰脏,就直接破坏胰脏的细胞。当β细胞受到破坏时,胰岛素的分泌就会受到影响。认为弓形虫的破坏导致神经系统的失调和胰腺细胞的破坏,是糖尿病的主要原因。该所认为糖尿病之所以出现遗传性,是因为这属于器官易感性遗传疾病。
弓形虫病
弓形虫病(toxoplasmosis )又称弓形体病,是由刚地弓形虫(Toxophasma gondii )所引起的人畜共患病。在人体多为隐性感染;发病者临床表现复杂,其症状和体征又缺乏特异性,易造成误诊,主要侵犯眼、脑、心、肝、淋巴结等。孕妇受染后,病原可通过胎盘感染胎儿,直接影响胎儿发育,致畸严重,其危险性较未感染孕妇大10倍、影响优生,成为人类先天性感染中最严重的疾病之一,已引起广泛重视。本病与艾滋病(AIDS )的关系亦密切。
本病临床表现复杂,诊断较难。遇某些临床表现,如脉络膜视网膜炎、及积水、小头畸形、脑钙化等应考虑本病可能。确衣有赖于实验室检查。 先天性弓形虫病应与TORCH 综合征(风疹、巨细胞病毒感染、单纯疱疹和弓形虫病)中的其他疾病相鉴别。此外尚需与梅毒、李斯特氏菌或其他细菌性和感染性脑病。胎儿成红细胞增多症、败血症、传染性单核细胞增多症、淋巴结结核等鉴别。主要依靠病原学和免疫学检查。
治疗措施
一、病原治疗
多数用于治疗本病的药物对滋养体有较强的活性,而对包囊除阿齐霉素(azithromycin )和atovaquone 可能有一定作用外,余均无效。
1. 乙胺嘧啶和磺胺嘧啶(SD ) 联合对弓形虫有协同作用,前者成人剂量为第一日100mg2次分服、继以日1mg/kg(50mg为限) ;幼儿日2mg/kg,新生儿可每隔3~4d 服药一次。同时合用亚叶酸10~20mg/d,以减少毒性反应。SD 成人剂量为4~6g/d,婴儿100~150mg/kg,4次分服。疗程:免疫功能正常的急性感染患者为一月,免疫功能减损者宜适当延长,伴AIDS 病的患者应给予维持量长期服用。SMZ-TMP 可取代SD 。乙胺嘧啶尚可和克林霉素合用,后者的剂量为成人0.6g ,每6h 一次,口服或静注。
2. 螺旋霉素 成人2~3g/d,儿童50~100mg/kg、4次分服。适用于孕妇患者,因乙胺嘧啶有致畸可能,故孕妇在妊娠4月以内忌用而可用本品。眼部弓形虫病亦可用螺旋霉素,若病变涉及视网膜斑和视神经头时,可加用短程肾上腺皮质激素。
3. 其他:乙胺嘧啶与阿齐霉素(1.2~1.5g/d)、克拉霉素
(clarithromycin )(1g·12小时一次)、氨苯砚(300mg/d)、罗红霉素等合用均曾试用于治疗AIDS 病伴弓形虫脑炎患者取得琔 疗效。此外,不同的药物联合,包括克拉霉素、DS ;阿齐霉素、SD ;atovaquone 、SD :克拉霉素、米诺环素;以及青蒿素、喷他脒等用于动物实验性感染均显示满意效果,对人体感染的作用尚有待确定。
3. 青岛某研究所,经近40年研究,开发了系列中药制剂,在治疗弓形虫病方面有独特疗效。其部分方剂还申请了国家专利。
二、支持疗法
可采用加强免疫功能的措施,如给予重组IFN-γ、IL-α或LAK 细胞等。对眼弓形虫病和弓形虫脑炎等可应用肾上腺皮质激素以防治脑水肿等。
弓形虫属顶端复合物亚门(subphylum Apicomplexa )、孢子虫网(clss sporozoasida )、真球虫目(order Eucoccidiorida),细胞内寄生性原虫。其生活史中出现5种形态,即滋养体(速殖子、tachyzoite );包囊(可长期存活于组织内),呈圆形或椭圆形、直径10~200μm 、破裂后可释出缓殖子、(bradyzoite );裂殖体;配子体和卵囊(oocyst )。前3期为无性生殖,后2期为有性生弓形虫生活史的完成需双宿主:在终宿主(猫与猫科动物)体内,上述5种形成俱存;在中间宿主(包括禽类、哺乳类动物和人)体内则仅有无性生殖而有无性生殖。无性生殖常可造成全身感染,有性生殖仅在终宿主肠粘膜上皮细胞内发育造成局部感染。卵囊由猫粪排出,发育成熟后含二个孢子囊(sporocyst )、各含4个子孢子(sporozoite ),在电镜下子孢子的结构与滋养体相似。卵囊被猫天食后,在其肠中囊内子孢子逸出,侵入回肠末端粘膜上皮细胞进行裂体增殖,细胞破裂后裂殖子逸出,侵入附近的细胞,继续裂体增殖,部分则发育为雌雄配子体,进行配子增殖,形成卵囊,后者落入肠腔。在适宜温度(24℃)和湿度环境中,约经2~4天发育成熟,抵抗力强,可存活1年以上,如被中间宿主吞入,则进入小肠后子孢子穿过肠壁,随血液或淋巴循环播散全身各组织细胞内以纵二分裂法(endodyogeny )进行增殖。在细胞内可形成多个虫体的集合体,称假包囊(pseudocyst ),囊内的个体即滋体或速殖子,为急性期病例的常见形态。宿主细胞破裂后,滋养体散出再侵犯其他组织细胞,如此反复增殖,可致宿主死亡。但更多见的情况是宿主产生免疫力,使原虫繁殖减慢,其外有囊壁形成、称包囊,囊内原虫称缓殖子。包囊在中间宿主体内可存在数月、数年,甚至终生(呈陷性感染状态)。 病理改变
弓形虫不同于其他大多数细胞内寄生病原体,几乎可以感染所有各种类型细胞。弓形虫从入侵部位进入血液后散布全身并迅速进入单核-巨噬细胞以及宿主的各脏器或组织细胞内繁殖,直至细胀破,逸出的原虫(速殖子)又可侵入邻近的细胞,如此反复不已,造成局部组织的灶性坏死和周围组织的炎性反应,此为急性期的基本病变。如患者免疫功能正常,可迅速产生特异性免疫而清除弓形虫、形成隐性感染;原虫亦可在体内形成包囊、长期潜伏;一旦机体免疫功能降低,包囊内缓殖子即破囊逸出,引起复发。如患者免疫功能缺损,则的虫大量繁殖,引起全身播散性损害。弓形虫并可作为抗原,引起过敏反应、形成肉牙中要炎症。此外,弓形虫所致的局灶性损害,尚可引起严重继发性病变、如小血栓形成、局部组织梗死,周围有出血和炎症细胞包绕,久而形成空腔或发生钙化。
弓形虫可侵袭各种脏器或组织,病变的好发部位为中枢神经系统、眼、淋巴结、心、肺、肝和肌肉等。
流行病学
一传染源
几所有哺乳类动物和一些禽类均可作为弓形虫的储存宿主,其在流行病学上所起作用不同,以未完全煮熟的猪牛羊肉为最大,其次为猫、猪、羊、鼠等。急性期病人的尿、粪、唾液和痰内虽可以弓形虫,但因其不能在外界久存,故除孕妇可经胎盘传染给胎儿外,病人作为传染源的意义甚小。
二遗传途径
①先天性弓形虫病系通过胎盘传染,孕妇在妊娠期初次受染,无论为显性或陷性,均可传染胎儿。但一般仅传染1次。②后天获得性弓形虫病主要经口感染:食入被猫粪中感染性卵囊污染的食物和水,或未煮熟的含有包囊和假包囊的肉、蛋或未消毒的奶等均可受染。受感染的猫一生也只会排出一次含有弓形虫的粪便,如在孕期接触了这一次含有弓形虫的粪便,又不洗手,病菌可能经粘膜及损伤的皮肤进入人体。实验室工作人员和尸解受伤亦可受染。此外,尚可通过输血及器官移植传播。
三易感人群
动物饲养员、屠宰声工作人员以及医务人员等较易感染。新感染的孕妇,其胎儿感染率较高。免疫功能低下者如接受免疫抑制治疗者、肿瘤、器官移植和艾滋病等患者易感染本病,且多呈显性感染。
四流行情况
本病分布遍及全球,动物和人的感染均极普遍。根据血清流行病学调查,国内弓形虫在家畜中流行很普遍:血甭阳性率以猫(15.16%~73%)为最不稳定,喂猫粮并关在家中的猫感染率最低,而经常吃生食,经常出去玩的猫感染率较高,余依次为猪、羊、牛、马列等;至于人的感染情况,据国内大多数地区的调查、估计血清阳性性率约为5%~15%,平均8.5%,远低于某些西方国家,可能与生活和饮食习惯有关。
临床表现
一般分为先天性和后天获得性两类,均以隐性感染为多见。临床症状多由新近急性感染或潜在病灶活化所致
一先天性弓形虫病 多由孕妇于妊娠期感染急性弓形虫病(常无症状)所致。孕妇感染有无症状与胎儿感染的危险性先天相互关系。前瞻性研究表明先天性感染的发生率和严重性与孕妇受染时间的早晚有关:妊娠早期感染弓形虫病的孕妇,如不接受治疗则可引起10%~25%先天性感染而导致自然流产、死胎、早产和新生儿严重感染;妊娠中期与后期感染的孕妇分别可引起30%~50%(其中72~79%可无症状)和60~65%(内89%~100%可无症状)的胎儿感染。受染孕妇如能接受治疗,则可使先天性感染的发生率降低60%左右。
先天性弓形虫病的临床表现不一。多数婴儿出生时可无症状,其中部分于出生后数月或数年发生视网膜脉络膜炎、斜视、失明、癫痫、精神运动或智力迟钝等。出生时即有症状者?#93;下列不同组合的临床表现:视网膜脉络膜炎;脑积水或小并没有畸形或无脑儿、颅内钙化,伴脊柱裂、脑脊膜膨出、兔唇腭裂;肾上腺缺如、双多囊肾;联体畸胎等;抽搐、精神运动障碍;淋巴结肿大、肝脾肿大、发热、黄疸、皮疹等。
二后天获得性弓形虫病 病情轻重不一,从亚临床性至暴发性感染不等。可为局限性或全身性:①局限性感染以淋巴结炎最为多见、约占90%。常经及颈或腋窝部。质韧,大小不一(一般不超过cm )、分数无压痛、不化脓。可伴低热、头痛、咽痛、肌痛、乏力等。累及腹膜后或肠系膜淋巴结时,可有腹痛。临床表现可拟似传染性单核细胞增多症或巨细胞病毒感染,但弓形虫病引起单核细胞增多综合征者很可能不足1%。较少见者尚有心肌炎,心包炎、肝炎、多发性肌炎、肌炎、胸膜炎、腹膜炎等。视网膜脉络膜炎极少见。②全身性感染多见于免疫缺损者(如艾滋病、器官移植、恶性肿瘤、主要为何杰金氏病、淋巴瘤等)以及实验室工作人员等,常有显著全身症状,如高热、斑丘疹、肌痛、关节痛、头痛、呕吐、谵妄,并发生脑炎、心肌炎、肺炎、肝炎、胃肠炎等。
眼弓形虫病多数为先天性、后天所见者可能为先天潜在病灶活性所致。临床上有视力模糊、盲点、怕光、疼痛、泪溢、中心性视力缺失等,很少有全身症状。炎症消退后视力改善,但常不完全恢复。可有玻璃体混浊。 辅助检查
一病原检查
1. 直接镜检 取患者血液、骨髓或脑脊液、胸腹水、痰液、支气管肺泡灌洗液、眼房水、羊水等作涂片,或淋巴结、肌肉、肝、胎盘等活组织切片,作瑞氏或姬氏染色镜检可找到滋养体或包囊,但阳性率不高。亦可作直接免疫荧光法检查组织内弓形虫。
2. 动物接种或组织培养 取待检体液或组织悬液,接种小白鼠腹腔内,可产生感染并找到病原体,第一代接种阴性时,应盲目传代3次。或作组织(猴肾或猪肾细胞)培养以分离、鉴定弓形虫。
3.DNA 杂交技术 国内学者首次应用32P 标记含弓形虫特异DNA 序列的探针,与患者外周血内细胞或组织DNA 进行分子杂交,显示特异性杂交条带或斑点为阳性反应。特异性和敏感性均高。此外,国内亦已建立多聚酶链反应诊断本病,并与探针杂交、动物接种和免疫学检查方法相比较,显示春具高度特异、敏感和快速等优点。
4. 孙宝江教授发明的细胞破碎仪检测法,取患者血液等作涂片,采用细胞破碎法,镜检可找到滋养体或包囊,检出率较高。
二免疫学检查
1. 检测抗体 所用抗原主要有速殖子可溶性抗原(胞质抗原)和胞膜抗原。前者的抗体出现较早(用染色试验、间接免疫荧光试验检测)、而后者的抗体出现较晚(用间接血凝试验等检测)。同时采用多种方法检测可起互补作用而提高检出率。由于弓形虫在人体细胞内可长期存在,故检测抗体一般难以区别现症感染或以往感染,可根据抗体滴度的高低以及其动力学变化加以判断。常用的检测方法有:
⑴染色试验(Sabin-Feldman DT):检测IgG 抗体。感染后1~2周出现阳性,3~5周抗体效价达高峰,以后逐渐下降,可维持多年。抗体效价1∶阳性提示为隐性感染;1∶256为活动性感染1∶1024为急性感染。其缺点为需要活虫进行操作。
⑵间接荧光抗体试验(IFAT ):检测IgM 和IgG 抗体。具灵敏、特异、快速、重复性好等优点,与DT 基本一致。但如有类风湿因子、抗核抗体阳性时,可引起假阳性反应。血清抗体效价1∶64为既往感染,余同DT 。 ⑶间接血凝试验(IHA ):试验方法简便。与DT 结果符合率高。但一般在病后一个月左右出现阳性。结果判断同IFAT 。重复性差和致敏红细胞不稳定与其缺点。
⑷酶联免疫吸附试验(ELISA ):可检查IgM 与IgG 抗体。并有灵每度高、特异性强等优点。也可用于抗原鉴定。近年来在ELISA 的基础上又创建、衍生了多种新新的测定方法,如金葡萄A 蛋白(SPA)-ELISA;辣根过氧化物酶标记SPA 取代酶标第二抗体进行ELISA 检测(PPA-ELISA );亲和素-生物素(ABG )ELISA ;凝胶扩散(DIG)-ELISA;斑点(DDT)-ELISA以及单克隆抗体(McAb)-ELISA等更灵敏、更特异的方法。
⑸放射免疫试验(RIA ):具有高度敏感性和特异性。
2. 检测抗原 系用免疫学方法检测宿主细胞内的病原(速殖子或包囊)、在血清及体液中的代谢或裂解产物(循环抗原)。是早期诊断和确诊的可靠方法。国内外学者建立了McAb-ELISA 以及McAb 与多抗的夹心型ELISA
法检测急性患者血清循环抗原,其敏感度为能检出血清中0.4μg/ml的抗原。
三皮内试验 以受染小白鼠腹腔液或鸡胚液作抗原。常出现延迟性、结核菌素反应。可用作流行病学调查。目前应用不多。
预防
一,注意饮食卫生,肉类要充分煮熟,避开生肉污染熟食。
二,猫要养在家里,喂熟食或成品猫粮,不让它们在外捕食。因为猫的传染是吃了感染的老鼠或鸟类,或者吃了污染猫粪的食物。
三,要注意日常卫生,每天清除猫的粪便,接触动物排泄物后要认真洗手。
四,除非孕妇血清检查证明已经有过弓形虫感染,否则孕妇怀孕期间要避免接触猫及其粪便。 五,弓形虫感染有多种简便有效的药物治疗,如磺胺类加乙胺嘧啶,和螺旋霉素等,治疗须按医嘱进行,孕妇感染及时治疗大约可使胎儿感染机会减少。
预后
取决于宿主的免疫功能状态以及受累器官。严重先天性感染预后多恶劣。成人免疫功能缺损(如有艾滋病、恶性肿瘤、器官移植等),弓形虫病易呈全身播散性、预后亦差。单纯淋巴结肿大型预后良好。眼部弓形虫病常反复反应。
范文五:弓形虫棒状体蛋白与宿主细胞互作的研究进展_赵桂华
中国血吸虫病防治杂志 2014年第 26卷第 4期 Chin J Schisto Control 2014, Vol. 26, No. 4
[文章编号 ]1005? 6661(2013) 02? 0453? 04·综述 ·弓形虫棒状体蛋白与宿主细胞互作的研究进展 赵桂华 1, 尹淑霞 2, 尹昆 1*
[摘要 ]棒状体蛋白是弓形虫分泌于宿主细胞的主要效应因子, 定位于宿主细胞的不同部位, 并与其存在复杂的相互作 用。通过调控膜系及骨架结构, 该蛋白可影响宿主细胞的生物活性因子, 从而阻断其内在的防御机制, 使弓形虫成功实 现胞内入侵、 寄生及增殖。棒状体蛋白对宿主细胞的功能及作用方式反映了弓形虫的致病机制, 对探寻治疗弓形虫病的 药物靶点及安全有效的疫苗候选分子意义重大。本文就近年来弓形虫棒状体蛋白与宿主细胞间相互作用的研究进展进 行综述。
[关键词 ]弓形虫; 棒状体蛋白; 宿主细胞; 相互作用
[中图分类号 ]R382.5[文献标识码 ]A
Research progress of interaction between Toxoplasma gondii pro rhoptry pro? ? teins and host cells
ZHAO Gui?hua 1, YIN Shu?xia 2, YIN Kun 1*
1Shandong Academy of Medical Sciences , Shandong Institute of Parasitic Diseases , Jining 272033, China ; 2Water Quality Testing Center of Jining Water Supply Group , Shandong Province , China
*Corresponding author
[Abstract ]Rhoptry proteins are the major virulence factors of Toxoplasma gondii . They locate in different parts of the host cells , and can affect the membrane , cytoskeleton structure and active factors of the host cells , so as to block the cell intrinsic de? fense mechanisms of the host , and let T. gondii invade , parasitize and proliferate in the host successfully. The function and ac? tion mode of rhoptry proteins reflect the pathogenic mechanism of T. gondii , which holds great significance to looking for toxo? plasmosis drug targets and developing molecule vaccines. This paper reviews the research progess of the interaction between rhoptry proteins of T. gondii and host cells.
[Key w ords ]Toxoplasma gondii ; Rhoptry proteins ; Host cell ; Interaction
作为专性细胞内寄生的复顶亚门原虫, 弓形虫通过其顶 端复合体向宿主细胞分泌大量蛋白效应因子, 它们与宿主细 胞的活性因子互作, 以逃避宿主的免疫反应 [1]。有关弓形虫棒 状体分泌的棒状体蛋白的研究最为广泛、 深入。该蛋白通过 与宿主细胞内活性因子的互作而协助弓形虫入侵细胞、 形成 和修饰纳虫空泡 (Parasitophorous vacuole , PV ) , 以影响宿主细 胞的信号转导。作为弓形虫重要的入侵和毒力作用因子, 该 棒状体蛋白是最佳的防治弓形虫病的药物靶点及疫苗候选分 子 [2]。近年来, 随着对弓形虫棒状体蛋白研究的不断深入, 研 究人员发现其分泌后定位于宿主细胞的不同部位, 以实现多 方位调控宿主细胞的生理功能。本文就弓形虫棒状体分泌蛋 白与宿主细胞相互作用的最新研究进行概述, 主要简述已知 重要棒状体蛋白的功能及其与宿主互作的机制, 旨在为寻找 有效的药物靶点及新型弓形虫潜在分子疫苗奠定基础。 1弓形虫棒状体蛋白在宿主细胞内的定位
蛋白组学研究表明棒状体分泌 30多种蛋白, 根据在棒状 体内的定位, 这些蛋白可分为棒状体基部蛋白 (ROPs ) 和棒状 体颈部蛋白 (RONs ) 两类。 ROPs 是弓形虫特异性蛋白, 包括 ROP2、 3、 4、 5、 7、 8、 16、 18等, 可调控弓形虫入侵、 生长和毒力 [3]; RONs 与 ROPs 属同系物, 但较保守, 分泌后靶向定位于宿主细
胞质膜, 其代表成员有 RON1、 2、 3、 4、 5、 6、 8等 [4]。棒状体分泌 蛋白发挥作用的先决条件是其必需正确进入分泌途径以到达 宿主细胞质, 该机制与其合成方式有很大关系。目前已知的 棒状体蛋白有以下 2种合成方式:① 在核糖体内合成, 以该方 式合成的棒状体蛋白 N 末端含有 Pro?domain 信号肽序列, 指引 其进入内质网、 高尔基体分泌途径, 最后到达棒状体; 其中 Pro? domain 信号肽序列在分泌蛋白到达棒状体时被酶切, 但研究 表明该类棒状体蛋白的某些成员 (如 ROP1) 正确进入分泌途 径与 Pro?domain 是否被切除关系不大 [5]; 棒状体枯草杆菌蛋白 酶 SUB2及 Toxopain?1蛋白酶能识别棒状体前体蛋白 N 端信号 序列的共识序列 SΦXE/D(Φ为疏水氨基酸, X 为任意氨基酸 ) 进行水解加工, 这类棒状体蛋白的代表为 ROP1、 2、 4、 8、 9、 13、 17、 18等 [6?7]; 但随着研究的深入, 发现 N 端信号序列除引导棒 状体蛋白进入正确的分泌途径外, 还具有防止过早表现激酶
[基金项目 ] [作者单位 ] [作者简介 ]
山东省医药卫生科技发展计划项目 (WSO370) ; 山东
省 优 秀 中 青 年 科 学 家 科 研 奖 励 基 金 (博 士 基 金)
(BS2013SW015) ; 山东省医学科学院青年基金
1山东省医学科学院、 山东省寄生虫病防治研究所 (济
宁 272033); 2山东省济宁市供水集团水质检测中心
赵桂华, 女, 硕士研究生, 助理研究员。研究方向:病
原生物学
*通信作者 E?mail :yinkun0326@163.com
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活性的功能; ② 通过棒状体以生物合成和内吞的方式获得原 料合成 (如 ROP5) , 这些蛋白的 N 端亦含有 Pro?domain 信号序 列, 但该序列在棒状体蛋白成熟分泌时不被酶切 [8]。
棒状体蛋白定位于宿主细胞质、 细胞核、 纳虫空泡 (PV ) 和 纳虫空泡膜 (Parasitophorous vacuole membrane , PVM ) 等; 这种 胞内定位机制目前尚不确切, 但随着研究的深入, 研究者发现 ROP16和棒状体蛋白磷酸酯酶 2C (PP2C?hn ) 携带核定位信号 序列 NLS , 以指引它们定位于细胞核 [9]
。 Gilbert 等 [9]
和 Saeij 等
[10]
研究推测 ROP16蛋白序列的 339~344氨基酸 (RKRKRK ) 为其 核定位序列 NLS , 因为该序列中 340、 342和 344位的赖氨酸 (K ) 替换成甲硫氨酸 (M ) 后, 感染弓形虫宿主细胞核内的 ROP16含量明显降低。某些棒状体蛋白的 N 端有 3个富含精
氨酸两性分子螺旋膜结合结构域 (RAH ) (图 1) , 其依赖该结构
定位于 PVM (如 ROP2、 18) [11]
。
图 1棒状体蛋白的 RAH 结构
2弓形虫棒状体蛋白对宿主细胞膜系结构的影响
2.1弓形虫 ROPs 参与 PV 的形成
PV 是弓形虫在宿主细胞
内寄生的重要场所, 能逃避宿主细胞内涵体酸化作用和溶酶 体融合作用。 PVM 是宿主细胞与弓形虫主要的接触界面及进 行物质和信息交流的主要通道。近年来, 关于 PV 的形成存在 很大争议, 但最合理的说法是 PV 由宿主细胞膜内陷形成, 但 形成过程中宿主细胞膜的许多膜蛋白 (如膜筏、 细胞骨架定位 蛋白、 穿膜蛋白等) 被清除, 同时由弓形虫分泌细胞器分泌蛋 白 (微粒体 蛋 白 、 棒 状 体 蛋 白、 致密颗粒 蛋 白) 进 行 修 饰 补 充 [12]。研究表明棒状体蛋白 (ROPs ) 如 ROP2、 4、 5、 7、 18等参 与了 PV 的形成 [13]。但目前关于 PVM 包含的弓形虫分泌蛋白 和宿主细胞蛋白的种类、 数量及功能知之甚少。近年来, 有关 ROP2作为 PVM 跨膜蛋白的研究最为深入 [14?16], 该蛋白其通过 N 端信号序列招募宿主细胞线粒体及高尔基体到 PVM 周围, 从而在宿主细胞线粒体与 PVM 之间形成分子连接, 参与营养 物质运输、 代谢产物排泄及虫体与宿主细胞间相互作用。但 最近的分子结构模型与跨膜序列分析表明, ROP2蛋白核心结 构域疏水性较强, 并被掩埋在球状蛋白的内部, 与跨膜的拓扑 学结构不能同时存在 [17?18]。另外, 有研究发现 ROP2家族成员 ROP18具有激酶活性, 这就对此类蛋白的跨膜模式提出了疑 问, 其在 PVM 上的新定位机制还有待进一步研究。 2.2
RONs 参与运动连接 (MJ ) 的形成
弓形虫对宿主细胞的
成功入侵依赖于虫体与宿主细胞膜间临时环形紧密接触的形 成, 该结构称为 MJ , 由 RON2、 4、 5、 8形成的大分子复合物及弓
形虫表面跨膜蛋白 ? 顶端膜抗原 1(AMA1) 构成。其中 RON2定 位于宿主细胞膜, 是一种跨膜蛋白, 在细胞质侧与 RON4、 5、 8相互作用, 在 细 胞 外 通 过 C 端 疏水片段 附 近 两 短 序 列 D3(1293~1346aa ) 、 D4(1366~1479aa ) 与 AMA1互作 [13?19], 形 成 MJ 结构 (图 2) 。 MJ 的主要功能是建立弓形虫与宿主细胞间 的连接, 使弓形虫进入宿主细胞。另外 MJ 作为分子筛, 不仅
能筛选宿主细胞组分进入弓形虫, 而且还可过滤弓形虫自身 分泌的定位于 PVM 的膜蛋白, 这对于 PV 的形成起决定作用。 但目前 MJ 的分子筛作用机制尚不明确。 Lamarque 等 [20]的研 究表明, RON9和 RON10形成的复合物不出现于 MJ 结构中, 与 MJ 复合物形成不相关。 Camejo 等 [21]研究证明 RON12也不 参与 MJ 的形成。目前关于 RONs 迁移形成 MJ 结构的具体机
制仍不清楚。
图 2弓形虫 MJ 的结构模式图
3弓形虫棒状体蛋白调控宿主细胞的信号传导
3.1
ROP16调控宿主细胞的 STAT 信号通路
ROP16是一种
可溶性棒状体蛋白, 经顶端复合体释放后进入宿主细胞质, 借 助自身的核定位结构 (NLS ) 转运到宿主细胞核, 影响宿主基因 的表达。研究证实 ROP16具有酪氨酸激酶活性, 并通过其激 酶活性调控 STAT3和 STAT6信 号 通 路 , 使 STAT3和 STAT6复 合 体 的 Tyr705和 Tyr641磷 酸 化 , 从 而 活 化 STAT3和 STAT6[22?24]。 Butcher 等 [24]选取强毒 I 型株弓形虫速殖子, 采用
基因敲除的反向遗传学技术研究 ROP16在弓形虫感染过程中 的生物功能。结果显示 ROP16通过两种方式调控对弓形虫的 抑制作用, 一种是基于 LPS 诱导的细胞因子的合成; 另一种是 依靠主要抗弓形虫调控因子 IFN?γ诱导的 NO 的生成。此外, ROP16通过 STAT6促进宿主细胞精氨酸酶 1的合成; 该酶是 STAT6信号通路下游的一种主要的作用底物, 能与诱生型一 氧化氮合酶 (iNOS ) 竞争底物精氨酸, 从而减少宿主细胞内 NO
的生成和阻碍弓形虫从宿主细胞内获取精氨酸。细胞抑制因 子 (SOCS ) 不能抑制由 ROP16诱导的 STAT3/6活性; 具体机制 为 SOCS 通过二硫键绑定 JAK 激酶 (JAKs ) 和细胞因子受体亚 基的磷酸化酪氨酸残基, 诱导其降解, 使 JAKs 和细胞因子受体 不能与被 ROP16磷酸化的 STAT3/6发生互作, 从而使 SOCS 不 能抑制 STAT3/6的活性 [25]。另有研究证明活化的 STAT3可使 强效抗炎细胞因子 IL?10含量升高, 从而降低宿主细胞 IFN?γ的含量, 增强虫体毒力 [26]。 ROP16的这种作用在弓形虫不同 毒力株间存在差异, ROP16?I 和 ROP16?III 能较强且持久地激 活 STAT3/6, ROP16?II 的作用较弱且短暂。 3.2
ROP18对宿主免疫相关细胞因子的调控
ROP18定位于
PVM 上, 与 PVM 有很强的亲和力, 是一种丝氨酸 /苏氨酸激 酶。研究表明弓形虫不同毒力株与 ROPs 的丝氨酸 /苏氨酸蛋
白激酶家族的调控有关。 Taylor 等 [27]和 Saeij 等 [28]用 I 型和 III 型毒力株、 II 型和 III 型毒力株的杂交子一代感染小鼠, 以研究
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弓形虫不同毒力株相关的基因位点, 结果表明不同基因型的 毒力差别与 ROP18直接相关。 III 型 ROP18由于在 ATG 起始 密码子上游的 85bp 处多出了一段 2.1kb 的序列, 表达水平极 低; I 型和 II 型表达水平则较高 [27]。 ROP18具多态性, I 型和 II 型存在明显的序列多态性, 目前尚无研究证明这种序列多态 性是否与其功能有关。小鼠细胞内 ROP18的作用底物为免疫 相关性 GTP 酶 (IRGs ) , 通过使 IRGs 磷酸化, 抑制其在 PVM 的 积累。 IRGs 属于 GTP 酶动力学家族, 可调控细胞内小泡膜的 聚合; 受 IFN?γ刺激细胞时, IRGs 能被高度诱导, 随后被转运并 有序地在 PVM 上积累 (转运机制未知) , 使 PVM 断裂, 最终清 除虫体, 其中 IRG 6和 IRGb 10是最先定位的成员, 它们具有 稳定其他后来 IRGs 成员在 PVM 堆积的功能。 IRGs 在 PVM 上 的累积存在株特异性, 只有 I 型 PVM 能抵抗较高水平 IRGs 的 累积而不被破坏 [29]。最近的研究表明, ROP18?I 能绑定和直接 磷酸化 IRGa 6、 IRGb 6和 IRGb 10, 阻断其在 PVM 的累积, 降低 IFN?γ激活的巨噬细胞对弓形虫的清除 [30]。 ROP18并非是影 响 IRGs 累积的唯一因素, 因为人类细胞及未被弓形虫感染的
细胞中并不表达 IRGs 。 IRGs 也不是 ROP18唯一的作用底物, 如在细菌内表达的 ROP18能磷酸化弓形虫来源的 ROP2、 ROP8及 ROP18自 身 [26]。 Yamamoto 等 [31]发 现 了 另 外 一 种 ROP18的识别底物 ATF6b , ATF6b 是一种定位于宿主内质网的 转录因子, 可激活宿主的获得性免疫反应。 ROP18通过磷酸 化 ATF6b 的至少 1个苏氨酸位点, 经由蛋白酶体途径降解 ATF6b , 下调由 CD8+T 细胞介导的 I 型获得性免疫反应。但缺 失了 N 端 RAH 区域的 ROP18, 也不能与 ATF6b 结合。
3.3假激酶 ROP5影响宿主细胞的信号传导 弓形虫在已测 序的生物中具有最高比例的假激酶, 多数假激酶分泌到宿主 细胞。 ROP5晶体结构显示其具有与 ROP2和 ROP8结构域高 度相似的丝氨酸 /苏氨酸 (S/T) 蛋白激酶结构域, 能结合 ATP , 但由于一个不正常镁离子螯合位点的存在, 使得该结合域扭 曲变型, 导致 ROP5结合 ATP 前后该结合域构象没有明显变 化, 因此是一种没有活性的假激酶 [11]。尽管如此, ROP5仍是 弓形虫的重要毒力决定因子。 Behnke 等 [32]通过 II ×III 杂交, 分析杂交子一代毒性发现在弓形虫 XII 染色体上的 ROP5基因 簇位点与不同毒力株特异性有关。 ROP5基因在 I 、 II 、 III 型毒 力株分别有 4、 10、 6个拷贝, 这些拷贝中每个毒力株至少含有 3个不同的等位基因, 其中 I 型和 III 型毒力株等位基因相似, I 型 毒力株敲除掉一个等位基因时毒性增加。其还用 I 型和 II 型 毒力株杂交的方法证明了含 ROP5基因簇的一个数量性状遗 传位点 (QTL ) 控制 I 型和 II 型毒力株毒性的差异, 但 ROP5不 是调控 I 型和 II 型株毒力差异的唯一基因。目前关于 ROP5调 控毒力的机制还不清楚。尽管弓形虫棒状体蛋白激酶家族 (ROPKs ) 中的假激酶不能直接使目标蛋白磷酸化, 但它们可 能在激活激酶的变构调节以及激酶与底物相互作用中起辅助 功能 [33], 从而影响宿主的信号转导。如 LKB1?STRADα?MO25α三元复合物的晶体结构揭示了 STRADα假激酶维持 LKB1激 酶活性的结构基础, LKB1作为一个假底物与 STRADα底 物 结 合 位 点 (相 当 于活 性 激 酶 的 底 物 结 合 位 点) 相 互 作 用 [34], 且假激酶底物结合环序列保守, 排列有序。研究表明 ROP5是 ROP18发挥催化活性所必需的效应物, 其在体内能直接调控 ROP18的活性, 两者相互作用以磷酸化 IRGs , 从而阻断 IRGs 在 PV 内的堆积, 保护寄生虫免受巨噬细胞清除 [35], 但 ROP5不 影响 ROP18的表达及定位。 ROP5还有其他功能, 如决定阻抗 弓形虫应答产生的先天免疫配体 IFN?γ的能力, 调控毒力因子 以阻断免疫等 [36]。
3.4ROP38调控宿主细胞 MAPK 信号通路 ROP38是一种有 活性的激酶, 不同毒力株的表达量差异很大, III 型和 II 型表达 量分别是 I 型的 64倍以上和 8倍以上。 ROP38定位于 PVM , 其 基因在弓形虫内以三倍体存在 [37]。有研究用过量表达 ROP38I Ⅰ 型和野生型 I 型弓形虫感染宿主后进行微数列分析, 结果表 明, 在感染过量表达 ROP38I Ⅰ 型弓形虫的宿主细胞内, 大量与 调控 Ⅰ 型感染有关的基因被抑制 [26]。初步实验表明, ROP38可能调控 MAPK 信号通路, 但这种调控似对弓形虫毒力没有 影响 [26]。
4小结与展望
不同于胞外病原体 (如细菌) 能将分泌物运输到较远距 离, 细胞内病原体的分泌物大部分进入感染的宿主细胞以发 挥功能。胞内病原体分泌物在宿主细胞内的靶向及定位决定 了其与宿主细胞的哪些因子互作, 及对宿主细胞将产生何种 影响。棒状体蛋白是弓形虫特异性蛋白, 其功能及作用方式 反映了弓形虫的致病机制, 成为目前研究的热点。但棒状体 蛋白成员众多, 靶向定位机制复杂, 功能多样, 目前对其功能 的研究还处于初步的探究阶段, 科学家对其与宿主细胞相互 作用的分子机制和细节还知之甚少, 这就严重阻碍了弓形虫 病潜在分子疫苗和药物靶点的发掘。今后应加强该蛋白功能 及其与宿主细胞相互作用的研究, 如鉴定宿主细胞内与之互 作的效应物, 揭示其作用机制, 以推动弓形虫作为模式生物的 研究。
[参考文献 ]
[1]Hill DE , Chirukandoth S , Dubey JP , et al. Biology and epidemiol? ogy of Toxoplasma gondii in man and animals [J ]. Anim Health Res Rev , 2005, 6(1) :41?61.
[2]Dlugonska H. Toxoplasma rhoptries :unique secretory organelles and source of promising vaccine proteins for immunoprevention of toxoplasmosis [J ]. J Biomed Biotechnol , 2008, 2008:632424. [3]Dubremetz JF. Rhoptries are major players in Toxoplasma gondii invasion and host cell interaction [J ]. Cell Microbiol , 2007, 9 (4) :841?848.
[4]Hoppe HC , Ng?HM , Yang M , et al. Targeting to rhoptry organ? elles of Toxoplasma gondii involves evolutionarily conserved mechanisms [J ]. Nat Cell Biol , 2000, 2(7) :449?456. [5]Binder EM , Kim K. Location , location , location :trafficking and function of secreted proteases of Toxoplasma and Plasmodium [J ]. Traffic , 2004, 5(12) :914?924.
[6]Miller SA , Thathy V , Ajioka JW , et al. TgSUB2is a Toxoplasma gondii rhoptry organelle processing proteinase [J ]. Mol Microbiol , 2003, 49(4) :883?894
[7]Hajagos BE , Turetzky JM , Peng ED , et al. Molecular dissection of novel trafficking and processing of the T. gondii rhoptry metallo? ? ? 455
中国血吸虫病防治杂志 2014年第 26卷第 4期 Chin J Schisto Control 2014, Vol. 26, No. 4
protease Toxolysin?1[J ]. Traffic , 2012, 13(2) :292?304. [8]El Hajj H , Lebrun M , Fourmaux MN , et al. Inverted topology of the Toxoplasma gondii ROP5rhoptry protein provides new in? sights into the association of the ROP2protein family with the para? sitophorous vacuole membrane [J ]. Cell Microbiol , 2007, 9(1) :54?64.
[9]Gilbert LA , Ravindran S , Turetzky JM , et al. Toxoplasma gondii targets a protein phosphatase 2C to the nuclei of infected host cells [J ]. Eukaryotic Cell , 2007, 6(1) :73?83.
[10]Saeij JP , Coller S , Boyle JP , et al. Toxoplasma co?opts host gene expression by injection of a polymorphic kinase homologue [J ]. Na? ture , 2007, 445(7125) :324327.
[11]Reese ML , Boothroyd JC. A helical membrane?binding domain tar? gets the Toxoplasma ROP2family to the parasitophorous vacuole [J ]. Traffic , 2009, 10(10) :1458?1470.
[12]彭鸿娟 . 刚地弓形虫纳虫泡的形成机制及其作用 [J ]. 中国寄生 虫学与寄生虫病杂志, 2010, 28(5) :382?386.
[13]Tyler JS , Boothroyd JC. The C?terminus of Toxoplasma RON2pro? vides the crucial link between AMA1and the host?associated inva? sion complex [J ]. PLoS Pathog , 2011, 7(2) :e1001282. [14]Beckers CJ , Dubremetz JF , Mercereau ? Puijalon O , et al. The Toxoplasma gondii rhoptry protein ROP 2is inserted into the para? sitophorous vacuole membrane , surrounding the intracellular para? site , and is exposed to the host cell cytoplasm [J ]. J Cell Biol , 1994, 127(4) :947?961.
[15]Sinai AP , Joiner KA. The Toxoplasma gondii protein ROP2medi? ates host organelle association with the parasitophorous vacuole membrane [J ]. J Cell Biol , 2001, 154(1) :95?108.
[16]Nakaar V , Ng?HM , Aaronson EP , et al. Pleiotropic effect due to targeted depletion of secretory rhoptry protein ROP2in Toxoplas? ma gondii [J ]. J Cell Sci , 2003, 116(11) :2311?2320.
[17]Labesse G , Gelin M , Bessin Y , et al. ROP2from Toxoplasma gondii :a virulence factor with a protein?kinase fold and no enzy? matic activity [J ]. Structure , 2009, 17(1) :139?146. [18]El Hajj H , Demey E , Poncet J , et al. The ROP2family of Toxo? plasma gondii rhoptry proteins :proteomic and genomic character? ization and molecular modeling [J ]. Proteomics , 2006, 6(21): 5773?5784.
[19]Poukchanski A , Fritz HM , Tonkin ML , et al. Toxoplasma gondii sporozoites invade host cells using two novel paralogues of RON2 and AMA1[J ]. PLoS One , 2013, 8(8) :e70637.
[20]Lamarque MH , Papoin J , Finizio AL , et al. Identification of a new rhoptry neck complex RON9/RON10in the Apicomplexa parasite Toxoplasma gondii [J ]. PLoS One , 2012, 7(3) :e32457.
[21]Camejo A , Gold DA , Lu D , et al. Identification of three novel Toxoplasma gondii rhoptry proteins [J ]. Int J Parasitol , 2014, 44 (2) :147?160.
[22]Yamamoto M , Standley DM , Takashima S , et al. A single poly? morphic amino acid on Toxoplasma gondii kinase ROP16deter? mines the direct and strain ? specific activation of Stat3[J ]. J Exp Med , 2009, 206(12) :2747?2760.
[23]Ong YC , Reese ML , Boothroyd JC. Toxoplasma rhoptry protein
16(ROP16) subverts host function by direct tyrosine phosphoryla? tion of STAT6[J ]. J Biol Chem , 2010, 285(37) :28731?28740. [24]Butcher BA , Fox BA , Rommereim LM , et al. Toxoplasma gondii rhoptry kinase ROP16activates STAT3and STAT6resulting in cy? tokine inhibition and arginase ? 1? dependent growth control [J ]. PLoS Pathog , 2011, 7(9) :e1002236.
[25]Dalpke A , Heeg K , Bartz H , et al. Regulation of innate immunity by suppressor of cytokine signaling (SOCS ) proteins [J ]. Immuno? biology , 2008, 213(3/4) :225?235.
[26]Lim DC , Cooke BM , Doerig C , et al. Toxoplasma and Plasmodi? um protein kinases :roles in invasion and host cell remodeling [J ]. Int J Parasitol , 2012, 42(1) :21?32.
[27]Taylor S , Barragan A , Sibley LD , et al. A secreted serine?threo? nine kinase determines virulence inthe eukaryotic pathogen Toxo? plasma gondii [J ]. Science , 2006, 314(5806) :1776?1780. [28]Saeij JP , Boyle JP , Boothroyd JC , et al. Polymorphic secreted ki? nases are key virulence factors in toxoplasmosis [J ]. Science , 2006, 314(5806) :1780?1783.
[29]Khaminets A , Hunn JP , K?nen? Waisman S , et al. Coordinated loading of IRG resistance GTPases on to the Toxoplasma gondii parasitophorous vacuole [J ]. Cell Microbiol , 2010, 12(7) :939? 961.
[30]Steinfeldt T , K?nen?Waisman S , Tong L , et al. Phosphorylation of mouse immunity ? related GTPase (IRG ) resistance proteins is an evasion strategy for virulent Toxoplasma gondii [J ]. PLoS Biol , 2010, 8(12) :e1000576.
[31]Yamamoto M , Takeda K. Inhibition of ATF6β? dependent host adaptive immune response by a Toxoplasma virulence factor ROP18[J ]. Virulence , 2012, 3(1) :77?80.
[32]Behnke MS , Khan A , Wootton JC , et al. Virulence differences in Toxoplasma mediated by ampli?cation of a family of polymorphic pseudokinases [J ]. Proc Natl Acad Sci U S A , 2011, 108(23) : 9631?9636.
[33]Zeqiraj E , van Aalten DM. Pseudokinases?remnants of evolution or key allosteric regulators? [J ]. Curr Opin Struct Biol , 2010, 20(6) : 772?781.
[34]Zeqiraj E , Filippi BM , Deak M , et al. Structure of the LKB1? STRAD?MO25complex reveals an allosteric mechanism of kinase activation [J ]. Science , 2009, 326(5960) :1707?1711. [35]Behnke MS , Fentress SJ , Mashayekhi M , et al. The polymorphic pseudokinase ROP5controls virulence in Toxoplasma gondii by regulating the active KROP18[J ]. PLoS Pathog , 2012, 8(11) : e1002992.
[36]Reese ML , Boyle JP. Virulence without catalysis :how can a pseu? dokinase affect host cell signaling? [J ]. Trends Parasitol , 2012, 28 (2) :53?57.
[37]Peixoto L , Chen F , Harb OS , et al. Integrative genomic approach? es highlight a family of parasite?specific kinases that regulate host responses [J ]. Cell Host Microbe , 2010, 8(2) :208?218.
[收稿日期 ]2014?04?03[编辑 ]邓瑶
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