农用链霉素的作用
农用链霉素在农业部登记使用的防治对象为:大白菜软腐病、水稻白叶枯病、棉花立枯病、瓜类霜霉病等。可在防治兰花软腐病中使用,防治期每七至十天喷药一次,连喷三至五次,可避免细菌性病害。蔬菜类防治中的用药量(72%可溶性粉剂)为3500,6000倍,兰界普遍采用2000倍(比例主要参数是放线菌代谢产物的计量单位)。
农用链霉素使用方法
农用链霉素有内吸作用,可防治多种植物细菌和真菌性病害。主要用于喷雾,见可作灌根和浸种消毒等。
(1)防治大白菜软腐病,大白菜甘蓝黑腐病,黄瓜细菌性
1
角斑病,甜椒疮痂病,软腐病,菜豆细菌性疫病、火烧病,用200ppm农用链霉素药液喷雾,于发病初期开始,每隔7-10天喷1次,连喷2-3次。
(2)防治西红柿、甜(辣)椒青枯病。用100,150ppm农用链霉素药液,于发病初期灌根,每株灌药液0.25公斤,每隔6,8天灌一次,连灌2次。
(3)防治西红柿溃疡病,按1克农用链霉素加水15升,于移栽时每株浇灌药液150毫升。
(4)防止黄瓜细菌性角斑病,用农用链霉素220ppm浸种30分钟,取出后催芽播种。
以上就是农用链霉素的作用和使用方法的相关介绍,希望对大家有帮助。需要注意,农用链霉素不能与生物药剂,如杀虫杆菌、青虫菌、7210等混合使用。
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2
链霉素在葡萄果粒中的残留分析及膨大剂的处理效果
植物学通报 2004, 21 (4): 437 ̄443Chinese Bulletin of Botany
链霉素在葡萄果粒中的残留分析及
膨大剂的处理效果①
1,2施莉莉 1董秋洪 1王世平
1②(上海交通大学农业与生物学院 上海 201101)
2(上海市花卉育种中心 上海 200072)
摘要 以12年生‘玫瑰香’葡萄为实验材料,探讨了无核诱导剂(链霉素)在果实中的残留及对无核果粒的膨大的影响。结果表明,于盛花前3 d用赤霉酸50 mg.L-1+链霉素400 mg.L-1的混合液浸蘸花穗,无核率达96%。果粒中链霉素的残留量在浸蘸10 d后即下降到处理日的1/10,到成熟时不足1 mg.kg-1。应用数学灰色系统理论分析表明,CPPU 5 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1 、 GAs 100 mg.L-1、 GAs 50 mg.L-1和CPPU 5 mg.L-1在盛花后2周浸蘸无核处理过的‘玫瑰香’果穗,无核果粒的膨大及品质良好。关键词 葡萄,链霉素,残留量,果实品质
Residue of Streptomycin in Berry and the Effect of Expanding
Reagents on Berry Quality in ‘Muscat Hamburg’ Grape
1 , 2
1SHI Li-Li 1 DONG Qiu-Hong 1 WANG Shi-Ping② (College of Agriculture and Biology, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 201101)
2(Ormamental Plants Breeding Center, Shanghai 200072)
Abstract 12-year-old ‘Muscat Hamburg’ grape was used as a experimental material to study theenlargement effect of streptomycin on seedless berry and its residue in fruit. The results indicatedthat the rate of seedless was up to 96% if the clusters of flowers were soaked with mixture of GAs 50mg.L-1 and streptomycin 400 mg.L-1 before 3 days when the flowers is blooming fully. The residualamount of streptomycin in fruit at the tenth day after treatment decreased as 10% as that of beginning,and less than 1 mg.kg-1 when the fruit matured. Date analysis on the base of the gray system theoryindicated that fruit was enlarged and its quality was improved when ‘Muscat Hamburg’ wassoaked with CPPU 5 mg.L-1 and GAs 50 mg.L-1, GAs 100 mg.L-1 or GAs 50 mg.L-1 and CPPU5 mg.L-1 2 weeks after full blooming fully.
Key words Grape , Streptomycin , Residue , Berry quality
无核葡萄食用时无吐籽的烦琐,深受消费者的欢迎,是近代葡萄的消费趋势(张维锋和
①上海市教委《曙光计划》资助项目。
②通讯作者。Author for correspondence. E-mail: rosyshine@elong.com
收稿日期:2003-07-09 接受日期:2004-03-15 责任编辑:白羽红
43821(4)李言元,1996)。用赤霉酸(GA3)诱导有核品种的无籽化生产,已于1957年在日本山梨县的‘玫瑰露’葡萄上取得成功(贺普超,1999),并在‘先锋’(Pione)、‘蓓蕾葡萄A’‘(Muscat berry A’)等葡萄品种上得到成功应用(严大义和才淑英,1997)。但这一技术有两个缺点:一是对欧亚种葡萄效果差,二是赤霉酸价格昂贵,在我国葡萄价格较低的情况下,难以推广(陶俊等,1998)。我们开发出了以赤霉素和链霉素为主要成分的诱导葡萄无核结实的无核剂。赤霉素为植物内源激素,其安全性是国际上公认的,但链霉素在果实中的残留量及其安全性会引起消费者的担忧,因此分析链霉素在果实中的残留动态是十分必要的。
无核葡萄果粒偏小,通过外源激素的应用是促进其膨大的主要途径(陈田文,2000)。本实验研究了不同浓度的CPPU、GA3和对氯苯氧乙酸(PCPA)对‘玫瑰香’无核果粒的膨大效果及品质的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
采用上海交通大学农业与生物学院葡萄园12年生管棚栽培的‘玫瑰香’葡萄为材料。树型为“T”形整型,发芽后新梢水平牵引至两侧,水肥等管理按葡萄园的常规管理方法进行。
1.2 方法
1.2.1 无核剂在果实中的残留分析 开花前3 d (2002年5月10日)用400 mg.L-1链霉素+50mg.L-1 GAs溶液浸蘸处理‘玫瑰香’100穗诱导其无核,浸蘸时间为每个花穗30 s,选择10个果穗作为对照。处理后0 d(当日)、10 d、30 d、60 d及成熟采收时采集幼果5~30 g,在-20℃下速冻冷藏备用。取出冷冻样品,溶化后研碎取汁,10 000 r/min下离心5 min,取上清液作为样品粗提液。
草杆菌ATCC的悬液1 mL(1×107 CFU.mL-1),充分混匀后,注入90 mm×15 mm灭菌取琼脂2 g, 加水100 mL, 加热熔化,冷却至65℃左右后,取15 mL并加入一定浓度的枯32、64、128 μg.mL-1的链霉素标准溶液,各取15 μL分别注入上述培养皿中的培养基微孔中,在37℃的生化培养箱中避光培养18 h。测定微孔外侧抑菌圈的直径,用抑菌圈的直径对标准溶液浓度作对数图,进行回归处理后得到回归方程为:
lgC=0.3102D-0.3045(其中C为链霉素的浓度,D为微孔抑菌圈的直径,r=0.9982(n=2))。取样品粗提液15 μL,注入上述培养基微孔中,取标准溶液用同样的方法培养,测定微孔外侧抑菌圈的直径,由标准曲线的函数式求得链霉素的浓度(处理后30 d、60 d和采收当日的样品,由于链霉素含量极低,进样量调整为30 μL)。
1.2.2 无核果粒膨大技术研究 于开花后2周用表1所示的化合物和浓度浸蘸果穗,浸蘸时间为30 s。并于开花后39 d开始采集经处理的果粒,每周1次,每次30~40粒。调查果粒300转/分摇床震荡提取3 h,在535 nm波长下测定吸光度作为花青素含量。用0.1 mol.L-1 NaOH中和滴定测定酸含量。
1.2.3 数据分析 所有处理都通过F测验和最小显著差数法作多重比较确定差异显著性。以的无核率和果汁可溶性固形物含量(TSS)。取1 cm2果皮圆片6枚,加1%盐酸丙酮溶液置培养皿中均匀分布,凝固后每皿打直径4 mm的微孔7个。精确配制浓度为2、4、8、16、
2004施莉莉等:链霉素在葡萄果粒中的残留分析及膨大剂的处理效果
表1 ‘玫瑰香’无核果粒膨大处理
处理试剂 Compound 浓度 Concentration(mgL-1)
A: CPPU 5
B: CPPU 10
C: GAs 50
D: GAS 100
E: PCPA 5
F: PCPA 10
G: CPPU+GAs 5+25
H: CPPU+GAs 10+50
I : CPPU+GAs 5+50
J : CPPU+GAS 10+25439Table 1 Treatments of expanding seedless berries
单粒重、果皮花青素、果汁TSS和可滴定酸作为综合效果的评价因素,应用数学灰色系统理论评价处理的综合效果(郁建强等,1999)。
2 结果与分析
2.1 无核处理后的葡萄无核率和果粒种子数
表2表明,用链霉素400 mg.L-1+GA3 50 mg.L-1浸蘸‘玫瑰香’花穗后,‘玫瑰香’葡萄的完全无核率达到了94%,退化核率为2%,无核率为96%。可见,这一药剂组合诱导‘玫瑰香’葡萄的无核有显著的效果。
2.2 无核剂在‘玫瑰香’果粒中的残留分析
由图1可知,链霉素处理开花前3 d的‘玫瑰香’的花穗后,果粒(小花)中链霉素的浓度急剧降低,10 d后约为处理当日的1/10。其后随着果粒的发育,链霉素的浓度继续
图1 ‘玫瑰香’葡萄果实中链霉素的含量动态变化
Fig.1 Dynamics of streptomycin contents in berry of ‘Muscat Hamburg’
grape
440表2 无核剂处理对果粒无核率和种子数的影响*21(4)
Table 2 Effects of seedless-inducing reagents on ratio of seedlessness and number of seeds in berry
调查果粒数完全无核退化核无核率 有核果粒数
Number of CompleteAborted Seedless- Number of seed per berry
investigatedseedlessnessseedness1粒种子2粒种子合计与对照比
seeds(%)(%)(%)One seedTwo seedsTotalCK (%)
‘玫瑰香’159429622626.1‘Muscat Hamburg’
Control150.00.00.07823100.0*-1-1开花前3 d用链霉素400 mgL+GA3 50 mgL浸蘸花穗。
*Dip flower clusters with streptomycin 400 mg.L-1+GA3 50 mg.L-1
3 days before flowering.品种Variety
降低,采收时果汁中的链霉素浓度已不足1 mg.L-1。链霉素为医用抗生素类化合物,据1995年版《中国药典》记载,一个60 kg体重的成人每天的最大使用剂量为0.5 g,相当于本实验中无核化‘玫瑰香’葡萄543.5 kg果粒中的链霉素含有量。也即一个成人每日消费543.5 kg的链霉素诱导的无核葡萄,才相当于一天的链霉素最大医疗使用剂量。可见链霉素在果粒中的残留是安全的。
2.3 膨大剂对果实品质的影响
2.3.1 单粒重 图2表明,‘玫瑰香’无核果粒,经C (GAs 50 mg.L-1)、D (GAs 100mg.L-1) 膨大处理后果粒单粒重极显著大于对照(有核果粒)(P
2.3.2 果皮花青素含量 如图3所示,经膨大剂处理后,在果实采收时,即盛花后74 d,图2 膨大剂处理对‘玫瑰香’单果重的影响
A~J见2.3.1文。小写字母表示经F测验后以最小显著差数法作多重比较的结果。
Fig.2 Effects of expanding reagents on the berry weight in‘Muscat Hamburg’ grape
A~J to see 2.3.1. Small letter shows the results gotten by multiple comparison after F test.
2004施莉莉等:链霉素在葡萄果粒中的残留分析及膨大剂的处理效果441图3 膨大剂对‘玫瑰香’果皮花青素含量的影响
Fig.3 Effects of expanding reagents on anthocyanins accumlation in peel of‘ Muscat Hamburg’
grape果皮花青素含量因处理而异,G (CPPU 5 mg.L-1+GAs 25 mg.L-1)、I (CPPU 5 mg.L-1+GAs 50mg.L-1)处理显著高于对照(P
2.3.3 可溶性固形物含量 图4表明,各处理果汁可溶性固形物含量均高于对照,其中H(CPPU 10 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1)和I (CPPU 5 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1)处理极显著高于对照(P
44221(4)
2.3.4 可滴定酸 膨大剂处理后,果汁可滴定酸含量如图5所示,G (CPPU 5 mg.L-1+GAs 25mg.L-1)和H (CPPU 10 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1) 处理极显著的高于对照(P
2.3.5 糖酸比 由图4和图5数据计算可得果汁糖酸比(资料数据省略)。与对照相比,A(CPPU 5 mg.L-1)、B (CPPU 10 mg.L-1)、C (GAs 50 mg.L-1)、D (GAs 100 mg.L-1)、F (PCPA 10mg.L-1)、I (CPPU 5 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1)和J (CPPU 10 mg.L-1+GAs 25 mg.L-1)处理高于对照,表明这些处理改善了品质。而E (PCPA 5 mg.L-1)、G (CPPU 5 mg.L-1+GAs 25 mg.L-1) 和H (CPPU 10 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1) 处理要低于对照。
2.3.6 综合效果分析
应用灰色系统理论关联度分析法通过计算可得供试处理与理想处理的
2004施莉莉等:链霉素在葡萄果粒中的残留分析及膨大剂的处理效果443关联系数。供试处理与理想处理的关联度及其排序如表3。
知,各处理关联度依次为XI>XD>XC>XA>XF>XG>XE>XB>XH>XCK>XJ。 I(CPPU 5 mg.L-1+GAs按照灰色系统理论关联分析原理,关联度大的数列与理想处理的数列最为接近。由表3可50 mg.L-1)的关联度最大,为0.786与理想处理最为接近,综合性状表现最好。此评价结果与试验中各处理实际表现相吻合。
3 讨论
链霉素是一种微生物制剂。本实验表明,它运用于葡萄有良好的无核效果,价格又比较便宜,有很好的应用前景。链霉素的作用机制与赤霉酸不同,赤霉酸是通过抑制花粉管在子房中的伸长,进而使受精过程不能完成而实现无核的,但链霉素是通过抑制细胞分裂,使种子败育而形成无核的。众所周知,链霉素与青霉素同属于抗生素类药剂(钱之玉,2000),该药对第八对颅神经和肾脏可能产生损害,其毒性反应与剂量大小、用药时间和个体差异等因素密切相关,长期或大量应用易引起眩晕、恶心、呕吐、耳鸣及听力减退,也可出现口唇、面部及指端麻木(严崇荣,1996)。作为无核剂应用后,是否会对人体健康造成威胁是很关键的问题。本实验结果很明显地表明,链霉素处理开花前3 d的‘玫瑰香’的花穗后,当天果粒中链霉素的浓度急剧降低,10 d后约为处理当日的1/10。其后随着果粒的发育,链霉素的浓度继续降低,采收时果粒中的链霉素浓度已不足1 mg.L-1。据《中国药典》(1995年版)记载,注射用硫酸链霉素的日最大剂量为0.6 EU ,即体重为60 kg的成年人,每日可接受链霉素的最大剂量为0.5 g,只要不高于0.5 g,对人体的健康不会构成威胁(李勇军等,2000)。也就是说,这一标准是采收时果粒中链霉素浓度的500倍。可见链霉素在果粒中的残留不足以给消费者的健康带来危害。
权衡各个指标,对于‘玫瑰香’葡萄来说,I (CPPU 5 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1)、C (GAs50 mg.L-1)、D (GAs 100 mg.L-1)和A(CPPU 5 mg.L-1)处理效果比较理想,其次为F (PCPA 10mg.L-1)、G (CPPU 5 mg.L-1+GAs 25 mg.L-1)、E (PCPA 5 mg.L-1)、B (CPPU 10 mg.L-1)、H(CPPU 10 mg.L-1+GAs 50 mg.L-1)处理。J (CPPU 10 mg.L-1+GAs 25 mg.L-1)处理效果在10种处理中为最差。
参 考 文 献
严大义,才淑英编著,1997.葡萄生产技术大全.北京:中国农业出版社,57~96
严崇荣,1996.链霉素的不良反应及其对策.临床荟萃,11(4):148~150
李勇军,胡昌勤,金少鸿,2000.四国药典抗生素品种细菌内毒素限值的比较.中国药事,14:110~111郁建强,蔡云霞,殷绒一,1999.灰色系统理论在平菇菌系(品种)综合评价中的应用.上海农业学报,
15(1):87~90
张维锋,李言元,1996.用赤霉素、链霉素生产无籽巨峰葡萄技术.北方果树,4:43
贺普超主编,1999.葡萄学.北京:中国农业出版社,244~245
陈田文,2000.葡萄膨大剂、赤霉素和保鲜防落剂处理葡萄果穗的效应.中国南方果树,3:38钱之玉主编,2000.药理学.北京:中国医药科技出版社,201~202
陶俊,李国祥,陈扣宏,1998.赤霉素、链霉素促进巨峰葡萄无核早熟技术研究.落叶果树,4:6~7
纳米链霉素在小鼠结核病模型中治疗作用的研究
? 论著 ?
纳米链霉素在小鼠结核病模型中治疗作用的研究
陆宇 1 赵伟杰 1 郑梅琴 1 王彬 1 M. Weisspapir 2 H. Gao 2 J. Schwarz 2
(1. 北京市结核病胸部肿瘤研究所 北京 101149; 2. AlphaRx , Markham , Canada. )
摘要 :目的 对比研究链霉素纳米制剂与普通制剂 — — — 硫酸链霉素注射液在小鼠体内经肠胃外 给药时的抗结核活性 。 方法 雌性 BALB/c 小鼠尾静脉感染结核分枝杆菌 H 37Rv 1×107CFU 。感 染后第 2d 开始按照空白对照组 、 阳性对照组 、 比较对照组和纳米链霉素 SM 2N P BSA 组 、 纳米链霉素
SM 2N P CRM 组的剂量和频率分别腹腔注射给药 , 给药至感染后 28d 。在感染的 14、 28、 56d 分别处 死每组 4只小鼠进行脾 、 肺活菌计数 。 结果 SM 2N P CRM 100%, SM 2N P BSA 组第 28d 和第 56d 的存活率分别为 83%和 75%14d 、 肺 的菌量较阳性对照组大 , 而 SM 2BSA 与 SM 2CRM 、 ; 治疗 4周时 , 各组的活菌数与 2P 2、 肺活菌数 均比比较对照组低 , 。 822N P CRM 组肺的活菌数量仍 , SM 2N P BSA 、 SM 2N P CRM 与普通链 , 在小鼠急性结核病感染模型中表现的抗菌活性仍与 , 。
关键词 :结核 /药用疗法 ; 纳米制剂 ; 链霉素 ; 疾病模型 , 动物
E ffective treatment of tuberculosis in mice with nanoparticulated streptomycin
L u Yu , Zhao Weijie , Zheng Meiqi n , et al.
Beiji ng Tuberculosis a nd Thoracic Tumor Resea rch I nstit ute , Beiji ng 101149, Chi na
Abstract :Objective To investigate t he antit uberculosis efficacy of newly developed nanopar 2ticulate forms of st reptomycin (SM ) for parenteral administration in comparison wit h conventional preparation “ streptomycin sulfate for injections ” . Methods SPF female BALB/c mice were infected wit h M. t uberculosis (H 37Rv , A TCC27294, 107CFU/mouse , iv ) . Infected mice were t reated ip as follows :U nt reated (saline ) , 5times per week ; SM sulfate U SP , 200mg/kg , 5times per week (po sitive cont rol ) ; SM sulfate U SP , 100mg/kg , twice weekly (comparative cont rol ) ; SM 2N P BSA , 100mg/kg , twice weekly ; SM 2N P CRM , 100mg/kg , twice weekly. SM formulations were administered ip for 28days. Four mice from each group were assessed for CFU count and organ weight s on days 14, 28and 56. R esults All animals survived in N P 2SM CRM group , received 800mg cumulative dose of SM , while survival rate for po sitive cont rol (SM U SP , cumulative 4000mg ) was 92%, and for comparative cont rol (SM U SP , total 800mg ) was 58%.Bacterial count in lungs and spleen were significantly lower (215~3orders of magnit ude ) in N P group s. Conclusions The activity of St reptomycin , incorporated into biodegradable N P , was significantly imp roved in co mparison to a conventional formulation using an acute murine t uberculosis infection model. It resulted in an 80%decrease of total do se of SM wit h an increased survival rate.
K ey w ords :t uberculosis chemot herapy , nanoparticulate forms ; st reptomycin ; disease model , animal
?
205?
2008年 12月 第 30卷 第 6期
抗结核治疗的联合性和长程性使得约 1/2的结 核病患者不能自觉完全按医嘱完成疗程 , 这是耐药
结核病形成的主要原因之一 [1]。新药研制艰难 , 使 得如何更好地发挥现有抗结核药物作用 , 提高患者 的依从性成为关键问题 。 纳米制剂具有良好的缓释 性 , 可以在保证治疗效果的前提下减少药物给药剂 量和频率 , 提高依从性 , 降低不良反应 , 因此利用纳 米技术改变现有抗结核药物的载运方式引起研究者 的关注 。
链霉素是传统的一线抗结核药物 , 但因胃肠不 能吸收而采取肌注或静脉的给药方式 , 反复的肌肉 注射很难被患者接受 。 解决的办法之一是改变给药 的方式或减少给药的次数 。 本研究的目的是对比研 究链霉素新型纳米制剂与普通制剂 — — — 硫酸链霉素 注射液在小鼠体内肠胃外给药时的抗结核活性 , 寻 找最佳纳米组成 , 菌活性的治疗方法 1. 实验动物 :雌性 SPF 级 BALB/c 小鼠 ; 体质
量 :16~18g ; 购自北京维通利华实验动物中心 。 2. 实验菌株 :改良罗氏培养基上生长良好的结
核分枝杆菌标准株 H 37Rv (A TCC27294) 。
3. 受试药物 :链霉素纳米制剂 (SM 2N P BSA ) , Lot :11306; 链霉素纳米制剂 (SM 2N P CRM ) , Lot :022107; 由 Alp harx International Holdings Limit 2ed 提供 。 注射用硫酸链霉素 :华北制药股份有限公
司产品 , 产品批号 :060401。
4. 方法 :选取结核分枝杆菌 H 37Rv 2~3周的 培养物制成菌悬液 10mg/3ml , 菌悬液 1mg/ml 相当 于 McFarland 1(107CFU/ml ) , 雌雄 BALB/c 小鼠尾 静脉注射 013ml/只 , 感染菌量 1×107CFU/只。 感染 后饲养于 25℃ 恒温负压感染动物房内 。于感染后 第 2d 解剖 5只小鼠以提供脾质量 、 肺质量及活菌数 的基础值 , 将其余小鼠随机分成 5组 , 每组 12只 。 于感染后第 2d 开始给药 :空白对照组 :(生理盐 水 ) , 每周给药 5次 ; 普通链霉素制剂组 (阳性对照 组 ) :200mg/kg , 每周给药 5次 ; 普通链霉素制剂组 (比较对照组 ) , 100mg/kg , 每周给药 2次 ; 纳米链 霉素制剂组 (SM 2N P BSA ) 100mg/kg , 每周给药 2次 ; 纳米链霉素制剂组 (SM 2N P CRM ) 100mg/kg , 每周给药 2次 ; 以上各组均为腹腔注射给药 , 给药至 感染后 28d 。 在感染的 14、 28、 56d 各处死每组 4只
小鼠进行脾 、 肺活菌计数 。 活菌计数方法 :记录小鼠 体质量 , 无菌操作下取脾 、 肺称重 , 小鼠全脾 、 肺分别 研磨 , 加入生理盐水制成组织混悬液 , 分别取小鼠 脾 、 肺的组织混悬液系列 10倍稀释 , 取 011ml 接种 于改良罗氏培养基 , 各样品的各浓度接种 3支 ,37℃ 培养 4周 。观 察 细 菌 生 长 情 况 , 计 算 活 菌 数 (CFU ) 。
5. 统计分析 :应用双单侧 t 检验对各组数据进
行统计学处理 。
结 果
1. 存活情况 :空白对照组于感染的 14d 内全部
死亡 , 阳性对照组 、 比较对照组 2N P BSA 组及
SM 2N P :4000和 d 的存活率 %%%(表 1) 。
2. 、 肺质量 :小鼠感染结核分枝 2d 的平均体质量为 (16126±01812) g 。在 治疗 14d 时 ,SM 2N P BSA 和 SM 2N P CRM 组小鼠 体质量均明显高于阳性对照组 (P <0105) ;="" 在治疗="" 28d="" 时="" ,="" 各治疗组小鼠体质量没有明显差别="" ;="" 在感染="" 56d="" (停药="" 28d="" )="" 时="" ,sm="" 2n="" p="" crm="" 组小鼠体质量明显="" 高于阳性对照组="" (p="">0105)><0105) 。小鼠在感染第="" 2d="" 的="" 肺质量平均值为="" (0114±01012)="" g="" 。在治疗="" 28d="" 时="" ,="" sm="" 2n="" p="" bsa="" 组小鼠肺质量为="" (0121±01027)="" g="" ,="" 明="" 显低于阳性对照组="" (p="">0105)><0105) ;="" 且在整个试验过程="" 中="" (56d="" )="" ,="" 各组小鼠间在感染的各阶段在肺质量上="" 未表现明显差别="" 。="" 小鼠在感染第="" 2d="" 的脾质量平均="" 为="" (0109±01011)="" g="" 。="" 在治疗="" 14d="" 时="" ,="" 各组小鼠脾质="" 量均增加="" ,="" 但各治疗组与阳性对照组相比差异无统="" 计学意义="" (p="">0105) ; 在治疗 28d 时 , 各治疗组小鼠 脾质量比治疗 14d 时低 ; 在感染 56d 时 , 各治疗组 小鼠脾质量接近治疗 28d 时的水平 。 见表 2。
3. 全脾活菌计数 :感染的第 2d , 小鼠全脾活菌 数为 (7163±01049) lg CFU 。在治疗 14d 时 , 各治 疗组小鼠全脾的 CFU 下降约 1lg , SM 2N P BSA 和 SM 2N P CRM 组小鼠全脾活菌计数分别为 (6103±01410) 和 (6143±01231) lg CFU , 比阳性对照组低 ((6190±01076) lg CFU , P <0105) ,="" 但比较对照组="" 小鼠全脾活菌数为="" (7155±01259)="" lg="" cfu="" ,="" 高于阳="" 性对照组="" 。="" 各组小鼠在治疗="" 28d="" 时的全脾活菌数="" 接近治疗="" 14d="" 的水平="" 。在感染="" 56d="" (即停药="" 28d="" )="" 时="" ,="" 阳性对照="" 、="" sm="" 2n="" p="" bsa="" 和="" sm="" 2n="" p="" crm="">0105)>
鼠全 脾 活 菌 数 分 别 为 (7121±01238) 、
(7104±?
305?
2008年 12月 第 30卷 第 6期
01272) 和 (6114±01071) lg CFU , 仅 有 SM 2N P CRM 组小鼠全脾活菌数下降 (表 3) 。
4. 全肺活菌计数 :感染的第 2d , 小鼠全肺活菌
数为 (10106±01304) lg CFU 。 在治疗 14d 时 , 各治
疗组小鼠全肺的 CFU 下降 2~3lg , SM 2N P CRM
组小鼠全肺活菌数为 (7110±01316) lg CFU , 比阳
性对照组低 ((7185±01144) lg CFU , P <0105)>0105)>
各组小鼠在治疗 28d 时的全肺活菌数接近治疗 14d 的水平 。 在感染 56d (即停药 28d ) 时 , 阳性对照 , SM 2N P BSA 和 SM 2N P CRM 各组小鼠全肺活菌数 分别为 (8186±01180) , (8106±01506) 和 (7133±01242) lg CFU , 均比治疗 28d 时相应增加 (表 3) 。
表 1 链霉素纳米制剂和普通制剂治疗结核分枝杆菌感染小鼠的存活率
组别 药物 剂量
(mg/kg ) 给药频率
(次 /周 ) 存活率 (%) (存活只数 )
14d 28d 不治疗对照 生理盐水
1ml/只 50(0) 0(0) 阳性对照 SM 200592(11) 92(11) 比较对照 SM
100292(11) 58(7) 链霉素纳米制剂 SM 2NP BSA 100283(10) 75(9) 链霉素纳米制剂
SM 2NP CRM
100
2
100)
100(12)
表 2 ( x ±s )
时间 (d )
(g 脾质量 (g )
肺质量 (g )
14
±013920170±010990132±0105514190±118320158±011120140±01049SM 2NP BSA 17173±11067a ) 0177±010690124±01079SM 2CRM
18122±01863a ) 0149±010820120±0105128阳性对照 19162±012970149±010490128±01027比较对照
16173±216460163±011360140±01006SM 2NP BSA 19166±312360149±012810121±01027a ) SM 2NP CRM
20116±015410139±01026a ) 0125±0106456阳性对照
17185±111540152±010290130±01053SM 2NP BSA 18119±511900135±01125a ) 0129±01098SM 2NP CRM
20163±11491a )
0139±01066a )
0129±01031
表 3 链霉素纳米制剂和普通制剂治疗结核分枝杆菌感染小鼠不同时期的全脾和肺的 CFU ( x ±s )
时间 (d )
组别 lg (CFU/全脾 ) lg (CFU/全肺 ) 14
阳性对照 6190±010767185±01144比较对照
7155±01259a ) 8116±01253SM 2NP BSA 6103±01410a ) 7177±01086SM 2NP CRM
6143±01231a ) 7110±01316a ) 28阳性对照 6166±012877157±01268比较对照
7148±015148137±01367a ) SM 2NP BSA 6126±014376197±01163SM 2NP CRM
6143±013987118±0125256阳性对照
7121±012388186±01180SM 2NP BSA 7104±012728106±01506a ) SM 2NP CRM
6114±01071a )
7133±01242a )
a ) P <0105,>0105,>
?
405?
2008年 12月 第 30卷 第 6期
讨 论
利用微球技术、 纳米技术的药物载体研究是新药 研究的一部分 [2]。 纳米粒是指直径为 10~1000nm 。 纳米技术运载药物的优势在于 [3,4]:稳定性好 、 较高 的载运能力 、 载入疏水和亲水物质均可 、 给药途径多 种 :口服 、 吸入等 。 纳米制剂中药物的释放可通过溶 蚀降解 、 扩散 、 崩解等途径实现 。 抗结核药物纳米制 剂的特点 :纳米制剂足够小可以长时间滞留在小肠 绒毛内 , 通过肠道集合淋巴结释放 , 药物释放时间可 达数天甚至数月 , 可以被宿主巨噬细胞吞噬 , 作用于 细胞内的结核分枝杆菌 [5,6]。
本研究目的在于对比研究链霉素新型纳米制剂 与普通制剂在小鼠体内肠胃外给药时的抗结核活性 并寻找最佳纳米制剂 。 在本研究所建立的小鼠急性 结核感染模型中 :SM 2N P CRM 的存活率是 100%, SM 2N P BSA 第 28天和第 56
83%和 75%。 治疗 14d 时 ,
, N 2P CRM , 提示 SM 2N P BSA P 在给药剂量与给药频 率与普通链霉素注射液相同时 , 其抗菌活性比普通 链霉素注射液好 , 且在给药剂量与给药频率降低时 , 其抗菌活性仍与普通链霉素注射液相当或稍好 。 治 疗 28d 时 , 各组的活菌数与 14d 时相比没有明显变 化 , 提示链霉素的抗结核杆菌的作用主要在早期 , 但 SM 2N P BSA 与 SM 2N P CRM 组的脾肺活菌数均比 比较对照组低 , 差异有统计学意义 。感染 56d 时 , SM 2N P BSA 、 SM 2N P CRM 组肺的活菌数量仍比阳 性对照组小 , 差异有统计学意义 。本研究结果显 示 :纳米链霉素制剂 SM 2N P BSA 、 SM 2N P CRM 与 普通链霉素注射液相比 , 在给药剂量与给药频率 降低 , 总剂量减少将近 80%(从 1000mg/(kg ? 周 ) 减至 200mg/(kg ? 周 ) ) 时 , 在小鼠急性结核病感染 模型中仍明显提高存活率并表现出抗菌活性与阳性 对照相当或稍好 ; 总剂量减少 80%, 对于减少不良 反应 , 提高患者的依从性是非常有意义的 。并且制 剂 SM 2N P CRM 较 SM 2N P BSA 更好 , 值得进一步 研究 。
参考文献 :
1 Thomas C. A literature review of t he problems of delayed pres 2 entation for treat ment and non 2completion of treat ment for tuber 2 culosis in less developed countries and ways of addressing t hese problems using particular implementations of DO TS strategy [J].J Manag Med ,2003,16(4-5) :371
2 , 王巍 . [J].中国防 (5) 442
H , , P. Targeted de 2 liposomes and nanoparticles :research [J].Int J Antimicrob Agent s , 2000,13(3) :155 -168
4 Gelperina S , K isich K , Iseman MD ,et al. The potential advanta 2 ges of nanoparticle drug delivery systems in chemot herapy of tu 2 berculosis [J].Am J Respir Crit Care Med ,2005,172(12) :1487 -1490
5 Kayser O , Olbrich C , Croft SL , K iderlen A F. Formulation and biopharmaceutical issues in t he development of drug delivery sys 2 tems for antiparasitic drugs [J].Parasitol Res , 2003,90(S2) :63 -70
6 du Toit LC , Pillay V , Danckwert s MP. Tuberculosis chemot he 2 rapy :current drug delivery approaches [J].Respir Res 2006, 7 (1) :118
(收稿日期 :2008-02-14)
《中国防痨杂志》 2008年审稿人名单
(按姓名笔画排序 )
丁北川 万康林 么鸿雁 马 王仲元 王海英 王甦民 王 巍 白丽琼 白连启 刘剑君 安燕生 孙希文 成诗明 朱莉贞 闫世明 何广学 何宝明 吴雪琼 张广宇 张宗德 张培元 李传友 李 琦 肖和平 邱丽华 陆 宇 周伯年 周 林 周新华 易著文 林 羽 林明贵 金水高 姜世闻 姜 平 胡忠义 贺正一 贺晓新 赵雁林 钟 球 唐神结 徐 缓 高孟秋 高微微 屠德华 曹兵生 梁建琴 章静波 黄海荣 傅 瑜 端木宏谨
? 5 0 5
? 2008年 12月 第 30卷 第 6期
链霉素在农业上的应用及其抗药性机制研究进展
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堑鏊垡鐾黧坠—————篁—黜粼黼—琳煳黼黜黼蝴??。糍一一 啦辩
链霉素在农业上的应用及其
抗药性机制研究进展
徐颖1’2周明国1 (1南京农业大学植物保护学
院,江苏南京210095; 2上海市园林科学研究
所,上海200232)
链霉素(streptomycin,SM),属于氨基糖苷类抗生素(aminogl’rcoside antibiotics, AGs),一般以硫酸链霉素或硝酸链霉素的化学形式存在。其硫酸盐为白色或近白色结晶性 粉末,具吸湿性,易溶于水,但难溶于多数有机溶剂。
H
H0
0 II HO—S一0H I| 0
图1硫酸链霉素的结构式
Structural formula of Fig(1 streptomycin
1链霉素在农业上的应用
1944年美国的Selman A(Waksman成功分离可以产生链霉素的放线菌Streptomyces gri一 5e础,并很快将链霉素用于治疗肺结核(Mycobacterium tuberculosis)(Waksman,1951),链 霉素是继青霉素后第二个成功应用于临床治疗的抗生素。
自1955年起,链霉素开始用于农业,成为防治由革兰氏阴性(G一)细菌引起的植物病 害的一种重要的抗生素(McManus等,2002)。链霉素在美国和欧洲主要被用来防治梨火疫 病(Erwinia amylovora),但在欧洲某些国家禁止使用链霉素用于农作物。近年来梨火疫病 开始在中东出现,链霉素在以色列也被用来防治这种病害。链霉素防治的其他病害还包括引 起鲜切花植物和马铃薯软腐病的Pectobacterium spp((以前被称为Erwinia spp();
细菌性叶斑病的Pseudomonas cichorii;引起苹果、梨等树木果实斑点和花苞引起芹菜
枯萎症状的
Pseudomonas syringae不同的致病变种;引起辣椒和番茄细菌性斑点的Xanthomonas campestris pv(vesicatoria;引起蔷薇科植物冠瘿的Agrobacterium tumefaciens;引起烟草野火病的Pseudo —l'norta5 syringae pv(tabaci(McManus等,2002)。
美国农业统计局(NASS)统计了部分果园自1991,1999年每隔2年在苹果和梨树上
用链霉素的面积和数量,在苹果树上使用链霉素处理最少和最多的年份中,链霉素的使使
用面 积分别占总面积的9,和25,,在梨树上最少和最多的年份中,链霉素的处理面积分别占
:碘杠j牌驽藿搿篙搿稿端嚣黜。搿拳龄搴黼蕾端警蕊拳霉篇篇嚣篁盘皇盘毒蕾墨嘲—曩曩?—曩???薯?昌_曩—????————??——————?——-
链霉素在农业上的应用及其抗药性Sit制研究进展 28,和41,;平均每公顷苹果园使用链霉
素有效成分最高的年份为0(08kg,hm2,梨树上为 0(25kg,hm2。概括而论,在美国30,一40,的梨树园用链霉素或土霉素或这两种同时使用 2-4次,年(McManus等,2002)。 链霉素在我国登记的防治对象为大白菜软腐病
carotovora (Erwinia subsp(carotovora)、
柑橘溃疡病(Xanthomonas axonopodis pv(cirri)、烟草野火病(Pseudomonas syringae pv(taba— ci)、水稻白叶枯病(Xanthomonas oryzae pv(oryzae)和水稻细菌性条斑病(Xanthomonas oryzae pv(oryzieola)。链霉素在我国的应用历史已近40年(学农,1973)。在我国,链霉素 防治柑橘溃疡病的报道较多,其防治效果为68,一97,(王远湖和骆严良,1990;罗君琴 和王洪祥,2000;张世平,2001);防治水稻白叶枯病和水稻细菌性条斑病的相对防治率为 70,(薛元海,2002;袁惠园和邓集平,1995)。
2链霉素在农业上的抗药性现状
链霉素1944年被用于治疗肺结核后,结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)对链霉 素的抗药性很快在临床上出现,Youmans等和稍后的Middlebrook&Yegian均在1946年报
道 了结核分支杆菌对链霉素抗药性的出现(Middlebrook&Yegian,1946;Youmans等,1946)。 链霉素被用于田间防治后,抗药性也很快出现,农业上最早的关于链霉素抗药性的
报道 出现在1962年,美国佛罗里达州辣椒疮痂病菌Xanthomonas campestris
间链霉素抗药性菌株(Stall,Thayer,1962)。梨火疫病pv(vesicatoria出现田
E(amylovora的链霉素抗药性最早 于1971年在加利福尼亚被报道(Miller&Schroth,1972),目前此病原菌上的抗药性已在美 国西部和加拿大不列颠哥伦比亚省苹果和梨树果
园广泛分布(Loper等,1991;Moiler等, 1981;Sholberg等,2001)。另外在新西兰
(Thomson等,1993),以色列和黎巴嫩抗药性也
。有报道(Manulis等,1998;Saad等,2000)。
Erwinia)其他一些已有链霉素抗药性报道的植物病原菌包括Pectobacterium(formerly carotovora(Fukusawa等,1980)、Pseudomonas chichorii(Pohronezny等, 994)1、Pseudomonas syringae pv(papulans(Burr等,1988;Jones等,1991)、Pseudomonas pv(syringae syringae (Scheck等,1996;Sundin和Bender,1993)、X(campestris pv(vesicatoria(Minsavage等, 1990)和Xanthomonas dieffenbachiae(Knauss,1 972)。
在我国,人、兽病原菌链霉素的抗药性已有多篇报道(吴雪琼等,1998;吴聪明等, 2005;李成忠等,2007)。在植物病原菌方面,李梅云采集了云南省43株烟草野火病
omonas Pseud— syringae pv(tabaci田间菌株,对其检测了链霉素的抗药性,发现其中25株具有中高 水平抗药性(李梅云,2007)。向平安从我国不同实验室收集了7株辣椒疮
thomonas vesicatoria)和14株水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae 痂病菌(Xan—
到4株辣椒疮痂病菌和1株水稻细菌性条斑病菌的链霉素抗药性菌pv(oryzicola),检测
株(向平安等,2003)。 Xu等(2010)2007,2008年从我国水稻主产区采集了534株水
细菌性条斑菌株,并测定了它们对链霉素的敏感性。发现4稻白叶枯菌株和827株水稻
株来自云南的水稻白叶枯菌株对 链霉素具有抗药性。
3链霉素的抗药性机制
目前已经发现的链霉素的抗药性机制主要可以归为以下两大类:第一类是由于核糖体结 合位点的改变而导致的抗药性。第二类是由于链霉素修饰酶的存在引起的抗药性。
团
3(1核糖体结合位点的改变导致的抗药性 链霉素作用于核糖体30S亚基,导致遗传密码的错
读,引起mRNA翻译起始的抑制和
rRNA的邯基因突变都会使核糖异常校读。编码S12核糖体蛋白的rpsL基因及编码16S
体靶 位点改变,使细菌对链霉素产生显著水平的抗药性。
早在1969年,Ozaki等(1969)和Birge等(1969)分别证明S12蛋白的突变会导
肠杆菌对链霉素的抗药性和依赖性。20世纪90年代,多篇关于结核分支杆菌致大
umtuberculosis)链霉素抗药性的研究结果表明,结核分支杆菌的抗药性主(Mycobacteri—
要是由编码$12蛋 白的基因rpsL和编码16S rRNA的邢突变所致。吴雪琼(1998)整理了国内外关于结核分 支杆菌抗药性研究的结果(表1)。77株结核分支杆菌SM敏感菌株在上述两个基因上均未 发现突变;而107株耐药分离株中78(5,(84株)存在rpsL和(或)邢基因突变。其中 rpsL的突变率(48(6,)高于邢突变率(29,),而且其中以
生率最高(40(2,)。 rpsL第43位密码子突变的发
表1结核分支杆菌链霉素抗药性基因突变情况(吴雪琼。1998)
Table 1 mutation of resistance of tuberculosis to The gene Myeobacterium streptomycin 注:表中数字为发生突变的菌株数量,括号中的数字为发生突变的菌株数占抗性菌株数的比例。
核糖体结合位点改变导致的链霉素的抗药性机制在植物病原细菌上也有研究,但迄今为 止,只有E(amylovora上有rpsL突变的报道(Chiou等,1995),而未见16s rRNA突
报道。 变的
Chiou等(1995)报道了链霉素抗性菌株E(amylovora上rpsL基因的突变。E(amylovora 来自新西兰和美国的5个州,PCR扩增结果表明102株链霉素高抗菌株
上均有突变,而所有供试敏感菌株仍保持赖氨酸不变。突变的高抗菌在S12蛋白的43位
株中,其中96株突变 为精氨酸,3株突变为天冬酰氨酸,3株突变为苏氨酸,并随后用基因互补实验证明了突变 rpsL基因的链霉素抗药性功能(McManus&Jones,1995)。核糖体指纹图谱(ribotype finger— print)研究结果表明S12蛋白引起的链霉素抗药性突变是分别进化的,因为同为高抗性菌 株,来自密西根和新西兰的高抗菌株和来自美国西部的高抗菌株可以被PCR区分为不同的 核糖体型(McManus,Jones,1995)。
3(2链霉素修饰酶 链霉素属于氨基糖苷类抗生素。氨基糖苷类药物修饰酶的存在也是链霉
素另外一个主要
的抗药性机制。氨基糖苷类药物修饰酶催化氨基糖苷药物氨基或羟基的共价修饰,使得氨基 糖苷类药物与核糖体的结合减少,不能诱发能量依赖的第二阶段的抗生素大量吸收,使细菌 能够在药物存在下继续生存,从而导致抗药性(Llano(Sotelo等,2002)。
链霉素的修饰酶主要包括以下4类:氨基糖苷_3一羟基腺苷转移酶ANT(3”)一
I(AA— DA)、氨基糖苷(6?羟基腺苷转移酶ANT(6)一I、氨基糖苷-3一磷酸转移酶(APH(3”)一I) 和氨基糖苷石一磷酸转移酶STRB(APH(6)一I),它们在链霉素中的修
vies&Wright,1997)。表2列出了已报道的编码链霉素修饰酶的基因。 饰位置见图2(Da—
氨基糖苷类抗生素修饰酶的编码基因是一个很大的类群,它们中的大部分在核苷酸序列 水平上是不相关的,明显从不同的微生物起源进化而来。氨基糖苷类抗生素产生的细菌是氨 基糖苷类抗性基因的保存库,这些细菌不仅包括Streptomyces spp(,还包括
spp(甚至包括Bacillw spp(。 Micromonospora
HO
? ?
’ANT(3”1 APH(3”)’
图2链霉素4种不同类型修饰酶的结合位点(Davies,Wright,1997)
Structure of Fig(2 streptomycin
are indicated arrowsThe sites of modification various by enzymes by
氨基糖苷(3(羟基腺苷转移酶ANT(3”)、氨基糖苷_6一羟基腺苷转移酶
ANT(6)、氨基糖苷3(磷酸转移酶APH(3”)和氨基糖苷_6一磷酸转 ’ 移酶APH(6),不同酶作用位点为箭头所示
APH(3”)和APH(6)分别修饰链霉素的3”一和6一羟基基团。编码APH(3”)的有两
基因,其中一个aph(3”)一Ia存在于链霉素产生细菌Streptomyces griseus中个
(Heinzel等, 1988);另外一个基因aph(3”)一Ib多存在于质粒上,在许多种G一细菌中被发现过。尽管 上述的两个酶分布在不同的微生物中,其编码基因在核苷酸序列上也仅有41,的一致性, 但在氨基酸水平上有50,的一致性和68,的相似性(Shaw等,1993)。
磷酸化修饰链霉素6一羟基基团的酶有4个已经被鉴定。其中两个酶APH(6)一Ia和一Ib 的基因已经被克隆,它们均存在于链霉素产生菌株Streptomyces griseus和Streptomyces glauces— cerl^s中(Distler等,1987;Vogtli,Hutter,1987)。第3个酶APH(6)一Ic的编码基因位于 G一细菌的转座子Tn5上(Mazodier等,1985)。编码第4个酶APH(6)一
aph(3”)(,6同时存在,其别名分别为strB和strA(下文中我们将以Id的基因常常和
strA和strB分别代替 aph(3”)一乃和aph(6)一Id)。strA和strB编码两个不同的磷酸化酶,但这两个基因往往串
曷胄置__——墨置田董嚣墨薯置曩_葛
型翟墅塑董些型警堑璺0墓塞型—嘲———————————————一熊
昌置皇端墨霉量翻蕾簟墨黑墨蕊童蹦黑高黼冒躲蜀蕊黑蕊墨勰墨蕊盈隔盈繇罱鞴墨w?《_?日日日_??5;‘“8、。。“
联存在,并且已在人类、动物、植物病原菌和环境微生物中均有报道。
表2链霉素修饰酶
Table 2 The character of enzymemodifying streptomycin 注a-Sm,链霉素(streptomycin);Spcm,壮观霉素(speetinomycin)
植物病原细菌中链霉素抗药性最主要的机制即strA—strB基因的存在,这两个基因分别 编码氨基糖苷3-磷酸转移酶(aminoglycoside一3一phosphotransferase)和氨基糖苷石,磷酸转移酶 (aminoglycoside-6一phosphotransferase),strA、strB按照命名法则分别被命名为aph(3”)一,b 和aph(6)一Id。strA—strB基因最常见于转座子Tn5393上,且这个转座子多存在于较大的质 粒上(Sundin,2000)。由于strA—strB基因的存在导致链霉素抗药性的植物病原细菌包括E( amylovora(Chiou&Jones,1991;McManus&Jones,1994;Russo,Burr,
993),Pseudomonas syringae 2008),Erwinia herbicola(Chiou,Jones,1Pseudomonas 99 1), syringae pv(syringae(Sundin&Bender,1 pv(papulans(Jones等,1
993),和Xanthomonas campestris pv( vesicatoria(Minsavage等,1990)。
另外一个较常见的使链霉素具有抗药性的修饰酶为氨基糖苷(3(羟基腺苷转移酶 AADA(ANT(3”)一I),这个酶修饰链霉素的3”一羟基位置和壮观霉素(spectinomycin)的9(羟基 位置(Davies&Smith,1978;Hollingshead,Vapnek,1985),由ant(3”)一儿编码。
ant
链霉素在农业上的应用及其抗药性机制研究进展 廿,铲‘珊船;端嚣荤端糯瓤嚣篇糍怒船搿糍冒嘲四翻搿冒橱冒翻胃啊田嗣—躺?——?—?———?———?—??——?——????——?———??—?———????
(3”)一,a基因在G一细菌中较为普遍,且它常存在于转座子
1985;Schmidt等,1988)和抗药性整合子(resistance (Hollingshead&Vapnek,
cassette) 中。迄今为止,aadA基因在人类、动物、动物源食integron)的基因盒(gene
品、灌溉水及河床沉淀物中均有发现 (Clark等,1999;Matthew等,2003;Miko等,2005;MoUa等,2007;Pinto—Atphandary 等,1990;Sunde&Norstrom,2005()。Shaw等(1991)的研究表明在1462株表现链霉 素抗药性的临床医学细菌菌株中,
临床医学病原菌中,I型整合子携55(1,的菌株含有aadAl基因(Shaw等,1991)。在
带aadA最常见于肠杆菌科Enterobacteriaceae(Levesque 等,1 995;Mazel等,2000),
cholerae Pseudomonas aeruginosa(Naas等,1999),和Vibrio (Dalsgaard等,2001)中。
bacteria)中也已被发 aadA基因在叶面习居细菌(phylloplane 现存在于抗药性整合子中(Schnabel&Jones,1999),但目前为止还未在植物病原菌中被 报道过。
到2002年为止,Partridge报道至少有8个独立的ant(3”)一I基因被鉴定出
(3”)(I表现出59,一95,的氨基酸序列一致性。大部分含有I型整合子的来。ANT
菌株基因盒中 至少含有一个aadA基因,其中以aadAl最多,其次为aadA2或
aadA5(Chang,2007)。
编码氨基糖苷石(羟基腺苷转移酶ANT(6 7)一I的最主要的基因是ant(6)-忆,关于
个基因的报道主要集中在革兰氏阳性菌肠球菌(enterococcal)和葡萄球菌这
(staphylococcal) 中(Vakulenko,Mobashery,2003)。Ounissi等(1990)通过DNA杂
过80,的临床肠球菌和葡萄球菌菌株携带ant(6)一,a基因。2001交研究表明在欧洲超
年Kobayashi在日本通过 PCR检测ant(6)一,a基因,发现50,左右的Enterococcusfaecalis和Enterococcusfaeciura菌株 均可以扩增到此基因。另外芽胞杆菌Bacillus的两个种Bacillus subtilis(Ohmiya等,1989) 和Bacillus halodurans(Takami等,2000)的染色体上也发现了编码氨基糖苷一6一羟基腺苷转 移酶的基因。
参考文献
E Ribosomal Protein in Escherichia C G(Altered coli[J](sci—A,Kurland Streptomycin—Dependent [1]Birge
284(282—1 ence,1969,166(3910):1
W S resistance of Pseudomonas T J L,Katz B,Wilcox syringae [2]Burr J,Norelli F,Hoying A(Streptomycin
in orchards and its association with a pv( papulans apple conjugative plasmid[J](Phytopathology,1988,78:
410—413(
L Y(Variable cassette of class 1 TCgene patterns integron—associated drug-resistant [3]Chang L,Chang M,Chang
in of Medical coli Journal Taiwan[J](The Sciences,2007,23(6):273—280( Kaohsiung Escherichia
in Erwinia C A L The of resistance [4]Chiou S,Jones amylovora[J](analysis plasmid-mediated streptomycin
Phytopathology,1991,81:710—714(
C A L(Nucleotide of a resistance [5]Chiou S,Jones sequence analysis transposon(Tn5393)carrying streptomycin
in Erwinia and other Bacteriol,1993,175:732— amylovora gram—negative bacteria[J](J genesfrom of C A L and identification the strA-strB [6]Chiou S,Jones Expression gene pair streptomycin—740( resistant
Erwinia amylovora[J](Gene,1995,152:47—51(
of resistance in Erwinia C A L Molecular S,Jones [7]Chiou analysis high—level streptomycin
amylovora[J]( Phytopathology,1995,85(3):324—328(
ade— N C F C(Detection of a J A,Tenover streptomycin,spectinomycin 【8]Clark C,Olsvik O,Swenson M,Spiegel
Enterococcus and nylyltransferase gene(aadA)in faecalis[J](Antimicrobial Agents Chemotherapy,1999,
团
43:157—160(
in isolates K(Vibrio choIerae 01 outbreak D,Arntzen L,Keddy [9]Daisgaard A,Forslund A,Sandvang
Mozam‘ the element and the aadA2are SXT and South Africa in 1998 resistant,contain gene muhiple(drug bique located of Antimicrobial on class 1 Chemotherapy,2001,48:827—838( integrons[J](Journal
to antimicrobial Review of Microbi— D I(Plasmid(determined resistance [10]Davies J,Smith agents[J](Annual ology,1978,32:469—518(
in G D(Bacterial resistance to 997, antibiotics[J](Trends aminogly’cosideMicrobiology,1[1 1]Davies J,Wright
5(6):234—240(
W(Gene cluster for K,Pissowotzki streptomycin [12]Distler J,Ebert A,Mansouri K,Stockmann,Piepersberg
of three and of in activity griseus:nucleotide sequence genes analysis transcriptional biosynthesis Streptomyces 041—8 056(Acids [J](Nucleic Research,1987,15(19):8
H,Shimizu S,Naganawa H,Kondo S,Kawabe H,Mitsuhashi S(3-phosphoryldihydro— [13]Fukusawa K,Sakurai
the Erwinia of by inactivating enzyme carotovora[J](Antibiot,1980,33:122—streptomycin produced
W(A second resistance from 23( [14]Heinzel P,Werbitzky O,Distler J,Piepersberg streptomycin gene Streptomyces
and kinasescodes for between antibiotic griseus streptomycin-3"-phosphotransferase(Relationships protein [J](Arch Microbiol,1988,150:184—192(
of a a D(Nucleotide [1 sequence analysis gene encoding streptomycin,spectinomycin 5]HoHingshead S,Vapnek
adenyltransferase[J](Plasmid,1985,13(1):17—30(
A R(Detection of Pseudomonas inGresistant J [16]Jones L,Norelli L,Ehret streptomycin syringae pvpapulans
Dis,1991,75:529—531(Michigan apple orchards[J](Plant
J isolates F(Resistance of Xanthomonas to [17]Knauss dieffenbachiae streptomycin[J](Plant Dis(Rep,1972,
56:394—397(P H(PCR of reveals several novel combinations of [1 8]Levesque C,Piche L,Larose C,Roy mapping integrons
resistance 85—191(Chemother,1995,39:1 genes(Antimicrob[J](Agents
E L C modified resistance[19]Llano—Sotelo B,Azucena F,Kotra P,Mobashery S,Chow S(Aminoglycosides by
diminished to the bacterial ribosomal enzymes display binding aminoacyl-tRNA site[J](Chemistry Biology, 2002,9(4):455—463(
M R G M J T of [20]Loper E,Henkels D,Robeas G,Grove G,Willett J,Smith J(Evaluation streptomycin,oxy-
resistance in Erwinia isolated from orchards in State copper amylovora pear Washington tetracycline,and
[J](Plant Dis,1991,75:287—290(
a1(Distribution of strains of [21]Manulis S,Zutra D,Kleitman F,Dror O,David I,et streptomycin(resistant Erwinia in Israel and occuiTenee of blossom in the amylovora blight autumn[J](Phytoparasitica,1998,26: 223—230(
T D P(Antimicrobial resistance markers of class 1 and class 2 bear- [22]Matthew R,Everardo V,Suresh integron Escherichia coli from water and Infectious ing irrigation sediments[J](Emerging Diseases,2003,9:822— 826(
V J(Antibiotic resistance in the and iden— ECOR[23]Mazel D,Dychinco B,Webb A,Davies collection:integrons tification of a novel aad 568—1 574(gene[J](Antimicrob Agents Chemother,2000,44(6):1
of the nucleotide of the central of TnS[24]Mazodier P,Cossart P,Giraud E,Gasser F(Completion sequence region conilrlns the three resistance Acids of presence genes[J](Nucleic Res,1985,13:195—205(
P A and Erwinia from of resistant [25]McManus S,Jones L(Epidemiology genetic analysis streptomycin amylovora
and evaluation of for oxytetracyctine control[J](Phytopathology,1994,84:627—633( Michigan
P A L Genetic Erwinia strains isolated from tree—fruit and of [26]McManus S,Jones fingerprinting amflovora crops Rubus 547—1-553,spp(([J](Phytopathology,1995,85(12):1
链霉素在农业上的应用及其抗药性机制研究进展 饼(。揣珏i篇篇粼德黜箍础端糍黜高勰葛端黼霉嘲霉螺鲁霉皇尊曩曹窜?—————————?——?—???????????—???—?—?—????????
in PVGLAntibioticuseRevAW,Jones [27]McManus S,Stockwell O,Sundin plant agriculture[J](Annu
Phytopatho,2002,40:443—465(
D(M Certain effects of onin [28]Middlebrook G,Yegian streptomycin mycobacteria vitro[J](Am(Rev( Tuberc,1946,54(6):553—558(
R(Molecular mechanisms of resistance in serovars [29]Miko A,Pries K,Schroeter A,Helmuth multidrug—resistant of Salmonella enterica isolated from foods in of Antimicrobial Germany[J](Journal Chemotherapy,2005,
033( 025—1 56(6):1
selectiveonwithaM the of Erwinia T [30]Miller D,SchrothN(Monitoringepiphyticpopulationamylovorapear
175—1 182(medium[J](Phytopathology,1972,62:1
Xanthomonas in B R E(Plasmid—mediated resistance to G campes。 [3 V,Canteros I,Stall streptomycin 1]Minsavage
tris pv(vesicatoria[J](Phytopathology,1990,80:719 —723(
V(The scenario of fire and W M S resistance[J](Plantblight streptomycin [32]Moiler J,Schroth N,Thomson Disease,1981,65:563—68(
of InS class l a novel P(Molecular eharacterisation L,Nordmann 1,a integron containing [33]Naas T,Poirel
amin? Pseudomonas cassette,aadA6,in aeruginosa[J](Biochim oglycoside adenylyhransferase gene
Biophys Acta,1999,1489(2—3):445—451(
M(Nucleotide of the chromosomal coding K,Tanaka T,Noguchi N,O’Hara K,Kono sequence gene [34]Ohmiya
from Bacillus subtilis for the Marburg 168[J](Gene,1989,78: aminoglycoside 6(adenylyltransfemse
377—378(
in P(Gene for enzymes [35]Ounissi H,Derlot E,Carlier C,Courvalin homogeneity aminoglycoside—modifying
168( 164—2cocci(Antimicrob[J]( Agents Chemother,1990,34:2 gram—positive
characterization of the controlled M(Identification and functional protein by[36]Ozaki M,Mizushima S,Nomura
the tocus in E(coli[J](Nature,1969,222:333—339( streptomycin—resistant
a new S C R M(Class 1 cassette,aadAlO,associated[37]Partridge R,Collis M,Hall integron containing gene
400—2 408(with Tnl41M from Chemother,2002,46:2 R151(Antimicrob[J](Agents
aadA and aadE inof resistance H,Mabilat C,Courvalin P(Emergence aminoglycoside genes [38]Pinto—Alphandary
the and 294—1 296(990,34:1 genus Campylobacter[J](Antimicrobial Agents Chemotherapy,1
resistance and tolerance strains ofM R copper among [39]Pohronezny K,Sommerfeld L,Raid N(Streptomycin Pseudomona$cichorii in Disease,1994,78:150—153( celery seedbeds[J](Plant
New in N T of isolates of Erwinia J(Isolation York[J]([40]Russo L,Burr streptomycin—resistant amylovora Plant Disease,2008,92:714—718(
and resistance of Erwinia A E(Evaluation of [41]Saad T:Hanna L,Choueiri oxytetracycline amylovo— streptomycin
in ruLebanon(2000,(Abstr()Phytopathology,90(suppl( ):$68(populations
Pseudomonas in strains of L and resistance HsyringaeJ [42]Scheek J,Pscheidt W,Moore W(Copper streptomycin 。 034—1 039(from Pacific Northwest nurseries[J](Plant Disease,1996,80:1
F R E R B(Nucteotide of nucleotidyl-[43]Schmidt J,Nucken J,Henschke sequence analysis 2'-aminoglycoside
Tn21 ontransferase with Tn4000:its evolution[J](MolANT(2”)from relationship AAD(3”)and impact Microbiol,1988,2:709—717(
bac— E A L Distribution of resistance and [44]Schnabel L,Jones tetracycline genes transposons among phylloplane
898—4 teria in and Environmental Microbiology,1999,65:4 Michigan apple orchards[J](Applied
907( K R F C [45]Shaw J,Hare S,Sabatelli J,Rizzo M,Cramer A,Naples L,Kocsi S,Munayyer H,Mann P,
H M(Correlation between G H,Verbist L,Landuyt V,Glupczynski Y,Catalano M,Woloj aminoglycoside Miller
and DNA chnical of isolates[J](Antimicrob(Agents Chemother,1991,35 profiles hybridization resistance
253—2 261( (11):2
团
中国植物病害化学防治研究(第七卷) —???墨—?置皇囊冒晕昌昌置量皇—胃蕾—墨置置墨昌昌昌罱高罱离誊嚣昌薯墨曩麓曩瞄嗣峨糍曩搿葛黜器霉篇篇踹墨胃鼢蔫瓣篇黜耀嫦船端磷蹦尊埘豳黜端螂黼蛙《锵嚣!幅善黜#亨i“ GH(Molecularof resistanceand PKRS,Miller genetics aminogl'rcoside genes [46]ShawJ,RatherN,Hare
familial of the enzymes[J](Microbiological Reviews,1993,57 relationships aminoglycoside—modifying
(1):138—163(
K of Erwinia from British Columbia isolates P L,Bedford E,Haag P,Randall P(Survey amylovora [47]Sholberg
and virulence on Plant of tericides Journal Pathology,2001,23(1):60—67( apple[J](Canadian
R P L resistance of the bacterial and control with [48]Stall streptomycinE,Thayer Streptomycin spot pathogen
[J](Plant Dis(Rep,1962,46:389—392(
in coli M(Thefor resistanceEscherichiainfluencesthe [49]SundeM,Norstrombackgroundgenetic streptomycin
of of Antimicrobial MICs[J](Journal Chemotherapy,2005,56:87—90(distribution
G W(Examination of base of the strA—strB resistance from bacterial variants [50]Sundin pair streptomycin genes
of and pathogens humans,animals plants[J](Antimicrobial Chemotherapy,2000,46:848—849(
G C L and and resistance in Pseudo—of [5 1]Sundin W,Bender Ecological genetic analysis copper streptomycin
and Environmental 018—1 024(rnona$syr,ngae pv(syr,ngae[J](Applied Microbiology,1993,59:1
G C L(Dissemination of the strA-strB eommensal and [52]Sundin W,Bender streptomycinresistance genes among
bacteria from pathogenic humans,animals,and plants[J](Molecular Ecology,1996,5(1):133—
[53]Takami 143( H,Nakasone K,Takaki Y,Maeno G,Sasaki R,Masui F,Hirama C,N,Fuji
of the N,Kuhara S,Horikoshi bacterium Y。 Ogasawara K(Complete genome sequence alkaliphilic
durans and with Bacillus Acids NakamuraBacillus halo— genomic sequence comparison subtilb[J](Nucleic Res,2000,28:4
3 1 7—
4 331(
S Gouk S G(The resistant strainsJ CRof [54]ThomsonVjC,VannesteL,HaleN,Clark presence streptomycin
of Erwiniain in New amylovora amylovoraZealand[J](Acta Hortie,1993,338:223—30(
S of [55]Vakulenko and Their for B,Mobashery S(Versatility Aminoglycosides Prospects Future[J](Clinical
Microbiology Reviews,2003,16(3):430—450(
R(Characterisation of the [56]Vogtli M,Hutter hydroxystreptomycin phosphotransferase gene(sph)of Streptomyces
and and General Genetics glaucescens:nucleotide sequence promoter analysis[J](Molecular MGG,1987,
208(1—2):195—203(
S [57]Waksman utilization(Journal of the of Medicine and A(Streptomycin isolation,properties,and History
Allied of Medicine and Allied Sciences[J](History Sciences,1951,VI(Summer):318—347(
XuXM[58] and X(Status of Resistance Y F,Zhou J Y,ZhuG,Kuang J,Zhang Y,Shang Wang Streptomycin
Xanthomonas in and Xanthomonas in China and their opment oryzae oryzae pv(oryzae pv(oryzicola Develresistance characters[J](J Phytopathol,2010,158:601—608(
Youmans G E W H C(Increase in [59] P,Williston H,Feldman H,Hinshaw resistance of tubercle bacilli to streD(
Staff tomycin:a preliminary 1:126—1 27(report[c](Proc Meetings,Mayo Clinic,1946,2 [60] 李成忠,王红宁,黄勇,马孟根,吴琦,羊云飞,谢涛,柳萍(多重耐药鸡致病性沙门氏菌I类整合 子的
检测研究[J](中国畜牧兽医,2007,34(1):119—122(
61 李梅云(烟草野火病病原菌对农用链霉素的抗药性测定[J](植物保护科学,2007,23:328—332( 62 罗君琴,王洪祥(农用链霉素W'P防治柑橘溃疡病的药效试验[J](浙江柑橘,2000,17(4):44( 63 向平安,周燕,高必达(辣椒疮痂病菌(Xanthomonas vesicatoria)和水稻细菌性条斑病菌(置oryzae
pv(oryzicola)的质粒及其与耐链霉素和耐铜性关系[J](植物病理学报,2003,33(4):330—333( [64] 王远湖,骆严良(硫酸链霉素防治柑桔溃疡病药效试验[J](广西热作科技,1990,37(4):
40—41(
[65]吴聪明,陈杖榴,曾振灵(猪场大肠杆菌I型整合子及其基因盒的分子流行病学研究[J](畜牧
医学报,2005,36(9):931—936( 兽
[66]吴雪琼,张俊仙,庄玉辉,张晓刚,李国利,何秀云,张军芝,贾树林(16S rRNA基因突变与结核
国
链霉素在农业上的应用及其抗药性机制研究进展 叩 (( 甜 挑黜=端=搿援篇端蹦勰墨船篁蕊=搿冒翻霉端薯瑞暑篇墨霉罩雹墨冒墨啊墨墨曩囊崔冒?—?—辅?????曩?———?—????—?—————???—?
分支杆菌耐链霉素的研究[J](中华结核和呼吸杂志,1998,21(9):569( [67]学农(农用链霉素在植保上的应用(农业科技通讯, 1973,(2):14( [68]薛元海(应用生物源农药防治水稻病害[J](江西植保,2002,25(3):68—70( [69]袁惠园,邓集平(稻细菌性条斑病药效试验[J](植保技术与推广,1995,(2):3—4( [70]张世平(农用链霉素防治柑桔溃疡病药效试验初报[J](福建农业科技,2001,(1):19
硫酸链霉素对小肠推进运动的作用
中国校医 2003 年 2 月第 17 卷第 1 期 Chin J School Doctor Feb. 2003 Vol . 17 No . 1 45 ? ?
() 【文章编号】 1001 - 7062 200301 - 0045 - 01 【调查研究】
硫酸链霉素对小肠推进运动的作用
马鸿基 岳军
2 + 奋传递 ,其机制是硫酸链霉素阻断了接头前膜的 Ca内流 , 【关键词】硫酸链霉素 ;小肠 ;平滑肌
导致前膜释放乙酰胆碱的数量减少 ,因而不能产生足够的终 【中图分类号】 R338 【文献标识码】 [ 1 ] A
2 + ,引起肌肉瘫痪 。笔者设想硫酸链霉素还能阻断支 板电位 许多研究表明 ,硫酸链霉素对不同类型细胞膜的 Ca内 2 + Ca 内流 ,使小肠平滑肌活动产生抑 配小肠的迷走神经末梢 流都有抑制作用 ,从而影响这些部位的功能 。但硫酸链霉素 ,小鼠在腹腔注射硫酸链霉素后 ,小肠运动明 制 。本实验表明 对自主神经所支配的胃肠平滑肌的运动是否也有影响 ,至今 显减弱 。实验组小肠推进速度平均为 24. 13 % ,而对照组小肠 为止尚未见文献报道 。本实验旨在观察硫酸链霉素对小肠推 推进速度平均为 70. 04 %。经 t 检验两组间差异有显著意义 。 进运动的影响 ,以了解该药物对小鼠小肠运动的作用 。 结果显示实验组小肠推进速度远慢于对照组小肠推进速度 。 1 材料和方法 证实了硫酸链霉素对小肠运动的抑制作用 。 1. 1 动物分组 采用清醒 、健康小鼠 ,体重 18,25g ,雌雄不 有文献报道 ,硫酸链霉素造成的急性听力损害是其阻断 拘 。动物由徐州医学院实验动物中心提供 。实验前禁食不禁 2 +[ 2 ] Ca 内流所致 ;眩晕症状的出现可能是因 了耳蜗外毛细胞 水 18,20h 。随机分成两组 ,即实验组和对照组 ,每组 8 只 。 2 + [ 3 ] 为前庭毛细胞机械敏感性 Ca 通道被阻断的结果 ;而神经 1. 2 方法 实验组腹腔注射 13. 7mmol/ L 硫酸链霉素0. 2 + 01ml/
Ca 内流减少造成 肌接头处的阻滞作用也是由于接头前膜 g ;对照组腹腔注射生理盐水 0. 01ml/ g。两组小鼠均在注射后 [ 1 ] :硫酸链霉素能阻断颈动脉窦压力 的 。近年尹彤等人发现 15min 用新配制的炭末胶液 0. 5ml 灌胃 ,再过 30min 用颈椎脱 2 +[ 4 ] Gannier 还提出链霉素能 感受器的机械敏感性 Ca 。臼法处死小鼠 ,剖腹 ,分离肠系膜 ,取出小肠铺平 ,用米尺测量 通道() 如 :心肌细胞 、感觉毛细胞等由机械牵拉所致 逆转几种细胞 小肠全长和炭末胶液的推进距离 。推进速度以 30min 的推进 2 + 2 + 的细胞内 Ca浓度的增加 ,原因主要来自其机械敏感性 Ca距离占小肠全长的百分数表示 。 [ 5 ] 。时至今日硫酸链霉素对某些细胞的细胞膜 通道的被阻断 1. 3 药品 硫酸链霉素为华北制药股份有限公司产品 ;产品 2 + 的 Ca 通道的阻断作用已被广大学者所证实 。因此笔者认 批号 :990905 。炭末胶液为 12 %活性炭和 4 %黄芪胶 。 为 :硫酸链霉素对小肠的作用可能也是通过阻断迷走神经 2 结果 2 + Ca通道引起的 。 表 1 显示 ,实验组小鼠小肠推进的平均速度为每 30min 为了预防感染 ,以往的腹腔手术在关腹腔前 ,曾常规腹腔 的推进距离占小肠全长的 24. 13 % ,而对照组小鼠小肠推进的 内放置大剂量硫酸链霉素 ,这就必然导致被手术者的肠蠕动 ( 平均速度为 70. 04 %。两组间差异有极显著意义 t = 24. 326 , 减弱 。因此 ,硫酸链霉素的使用可能就是大多数腹腔手术患 ) P < 0.="" 01。="" 者术后发生肠粘连的主要原因之一="" 。="" 表="" 1="" 小鼠小肠的推进速度="" 参考文献="" (="" )="" (="" )="" 鼠号="" 实验组推进速度="" %对照组推进速度="" %="" [1="" ]="" atchison="" wd="" ,adgate="" l="" ,beaman="" cm.="" effects="" of="" antibiotics="" onuptake="" of="" 1="" 26.="" 04="" 70.="" 00="" calcium="" into="" isolated="" nerve="" terminals.="" j="" pharmacol="" exp="" ther="" ,1988="" ,245="" :="" 2="" 22.="" 34="" 65.="" 85="" 394="" -="" 401.="" 3="" 29.="" 81="" 67.="" 50="" [="" 2="" ]="" 李树华="" ,韩东一.="" 硫酸链霉素对豚鼠耳蜗外毛细胞细胞膜钙内流="" 4="" 21.="" 36="" 70.="" 45="" ()="" 的影响.="" 中华耳鼻喉科杂志="" ,2000="" ,35="" 5:394.="" 5="" 28.="" 00="" 65.="" 96="" [="" 3="" ]="" ohmori="" h.="" mechano="" -="" electrical="" transduction="" currents="" in="" isolated="" vestibu2="" 6="" 19.="" 27="" 70.="" 21="" lar="" hair="" cell="" of="" the="" chicks.="" j="" physiol="" ,1985="" ,359="" :189="" -="" 217.="" 7="" 24.="" 24="" 78.="" 00="" [4="" ]="" yin="" t="" ,="" chen="" s="" ,="" he="" rr.="" streptomycin="" inhibits="" sinus="" baroreflex="" in="" anes2="" 8="" 22.="" 00="" 72.="" 34="" ()="" x-="" 24="" .="" 13="" .="" 5843="" 70="" .="" 04="" .="" 95518="" thetized="" rats.="" acta="" physiol="" sin="" ,2000="" ,52="" 3:239="" -="" 242.="">
[ 5 ] Gannier F ,White E ,Lacampagne A ,et al . Streptomycin reverses a large 3 讨论 2 + stretch induced increase in [ Ca ] in isolated guinea pig ventricular i 早已明确硫酸链霉素能阻断运动神经末梢向骨骼肌的兴 myocytes. Cardiovasc Res ,1994 ,28 :1193 - 1198. ()收稿日期 :2002 - 09 - 11 修回日期 :2002 - 11 - 04 樊继忠 编辑 ()作者单位 :徐州医学院生理学教研室 徐州 221002
? 1994-2016 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
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