范文一：FSH免疫反应试剂

执行标准号: YZB/JAP 023-2005

产品注册号:

1006871001-034C ※※2004年3月修订 体外诊断试剂 ※2003年7月修订

2001年9月制成

许可号(02E)第0096号 ST

E-test(TOSOH)?(FSH)免疫反应试剂

EIA法检测血清及肝素血浆中FSH浓度所需的检测试剂

卵泡刺激激素(FSH:Follicle Stimulating Hormone)是一种含糖量约20%的糖蛋白，分子量是35,000，与hCG、TSH(甲状腺刺激激素)及LH(黄体形成激素)同样以α链和β链结合的形式存在。其中的α链是相同的，但β链是不同的，这与其生理活性是相关的。不管男性还是女性，性腺的机能是由FSH和LH共同调节的，其中FSH是由脑下垂体前叶分泌产生的性腺刺激激素。并且，这些激素又受视床下部分泌的LH-RH(LH释放激素)等性腺刺激激素释放激素的调节，因此，FSH的检测与LH同样在掌握视床下部-下垂体-性腺系统的内分泌调节机能上是很重要的，在妇产科的临床诊断上也是不可缺少的。 [特征]

1、 应用AIA全自动免疫分析装置(AIA-1200系列以及AIA-600除外)，短时间内能够实现

自动检测。(抗原抗体反应时间约为10分钟)。

2、 检测中使用的是高亲合性抗FSH抗体，并采用一步EIA夹心法。

3、 抗FSH的单克隆抗体和酶标记的抗FSH单克隆抗体均以冻结干燥状态密封贮存于试剂

Cup中，使用时不需要配制。

4、 从抗原抗体反应到荧光检测均在专用的试剂Cup中进行，污染的可能性很小。 5、 不使用放射性同位素，因此不需要特殊的设备。

[成分]

E-test(TOSOH)?(FSH)免疫反应试剂

每20个试剂杯排放于一个试剂板上，并保存在铝制的防湿袋中。每次检测所用试剂主要包括以下几种:

抗FSH鼠单克隆抗体固定化微球 12个

抗FSH鼠单克隆抗体

碱性磷酸酶联标记结合物 100ul ※ ※[作用]

血清和肝素血浆中卵泡刺激激素(FSH)浓度的检测

[检测原理]

该方法是使用两种特异性抗体的一步EIA夹心法。固定在磁性微球上的抗FSH鼠单克隆抗体和碱性磷酸酶联标记的抗FSH单克隆抗体都是以冰冻干燥状态密封在试剂Cup中的。在该试剂Cup添加缓冲液和样品后，冰冻干燥的试剂开始溶解，抗原抗体反应随即发生。

在一定温度下孵育一段时间后，用洗脱液将游离的酶联标记抗体和样品成分除去(B?F分离)。之后，为了检测结合在磁性微球上的酶活性，添加酶底物磷酸-4-甲基伞形酮;通过检测酶反应产物荧光物质的生成速度确定血清或肝素血浆中的FSH的浓度。 [使用方法]

在使用本品检测血清或肝素血浆中FSH浓度时，请与下列试剂组合使用。另外，除本使用说明书外请参照其它相关说明。

E-test(TOSOH)?(FSH)标准品试剂盒

E-test(TOSOH)?(FSH)样品稀释液

E-test(TOSOH)?基质试剂盒

(标签上有粉红色“SUBII”标志)

E-test(TOSOH)?洗脱液

E-test(TOSOH)?缓冲液

在使用AIA全自动酶联免疫分析装置的时候请参考装置的使用说明书。 1、 试剂的配制方法及配制后的贮存方法、使用期限

1) 免疫反应试剂

请将E-test(TOSOH)?(FSH)免疫反应试剂从密封的防湿袋中取出，开封后在15-25?下放置可以保存一天，在2-8?下放置可保存七天。

2) 样品稀释液

E-test(TOSOH)?(FSH)样品稀释液是液体，开封后即可使用。开封后密封放置在2-8?下可以保存七天。

※ ※3)标准液

E-test(TOSOH)?(FSH)标准品(1)-(2)是液体，开封后请吸取适当量添加到样本Cup中。开封后如果密封保存于2-8?下可以保存1天。

ndE-test(TOSOH)?(FSH)标准品的浓度以WHO规定的FSH标准品(WHO 2 IRP 78/549)为标准。

) 基质液 4

每瓶E-test(TOSOH)?基质液用100毫升E-test(TOSOH)?基质溶解液配制。配制后避光放置在15-25?下放置可以保存三天，在2-8?下放置可保存七天。注意避免日光及紫外线直射。

5) 洗脱液

每瓶E-test(TOSOH)?洗脱液用适量的蒸馏水稀释到2.5升，充分混匀以免产生浓度差。配制后请放置在15-25?下可以保存30天。

6) 缓冲液

每瓶E-test(TOSOH)?缓冲液用适量的蒸馏水稀释到5升，充分混匀以免产生浓度差。配制后请放置在15-25?下可以保存30天。

2、检测操作方法

1) 从铝片保护层中取出E-test(TOSOH)?(FSH)免疫反应试剂Cup。 2) 在试剂Cup中加入100微升缓冲液和50微升标准品或稀释后的样品溶液，在磁石磁珠

振动器上搅拌，在37?下使抗原抗体反应进行10分钟。

3) 用洗脱液冲洗试剂Cup，除去其中游离的酶联标记抗体和样品成分(B?F分离)。 4) 加入基质液后，在磁石磁珠振动器上搅拌同时用荧光检测器检测荧光物质的荧光强度，

激发波长363nm，荧光吸收波长447nm，并计算出荧光物质的生成速度。 5) 根据标准液检测绘制的荧光物质生成速度标准曲线，计算出样品中FSH的浓度。

)6) 如果检测结果超过200mIU/mL时，要用样品稀释液提高稀释倍数重新稀释，并按照(1-5

步骤检测。

[操作上的注意事项]

※※1、样品必须使用新鲜的血清或肝素血浆，且请不要使用除肝素血浆以外的血浆。取血清及肝素血浆样品时请注意操作以免发生溶血。样品要避光保存在2-8?，或在-20?冰冻保存。

2、 当样品中含有EDTA或柠檬酸存在时检测结果会偏低。

3、 避免多次进行冰冻样品冰冻溶解操作。

4、 在使用E-test(TOSOH)?(FSH)样品稀释液稀释样品时请充分混匀。 [检测结果的判定方法]

应用E-test(TOSOH)?(FSH)标准品试剂盒绘制标准曲线，从曲线中计算出样品中FSH的浓度。

对于检测结果的判定，其标准值由各单位各自设定。在进行临床诊断时，要考虑到其他检测结果及临床症状并给予一个综合的判断。

为了提高检测结果的精确度，在检测样品时请同时测定市售管理血清的Control。使用全自动酶联免疫分析装置AIA-21检测所得的标准曲线如下(见原版说明书)所示。 [性能及相关性]

1、灵敏度

1)E-test(TOSOH)?(FSH)标准品(1)的荧光单位(FU，Rate)在8nmol/(L.s)以下。

2)测定E-test(TOSOH)?(FSH)标准品(1)和E-test(TOSOH)?(FSH)标准

品(2)的FU，并计算FSH浓度，FU差值与FSH浓度之比是0.4-3.0nmol/(L.s)/mIU/mL。

注释:FU之比由以下公式计算:

FU之比=(A-B)/C

A:标准品(2)的FU nmol/(L.s)

B:标准品(1)的FU nmol/(L.s)

C:标准品(2)的FSH浓度 mIU/mL

2、特异性

检测已知FSH浓度在6-170mIU/mL范围的血清样品时，其检测结果在100?20%以内。 注释:已知浓度的血清样品是以TOSOH FSH标准品做对照，用E-test(TOSOH)?(FSH)检测，从而得到检测结果。

3、重复性

同时检测FSH浓度在6-170mIU/mL范围的两例病人的血清样品10次，其检测结果的变动系数在15%以下。

※4、检测范围:1.0-200mIU/mL

以标准品(1-2)的检测结果绘制成标准曲线，从标准曲线中推测出标准品(1)的FU平均值(Y轴截距)，以该平均值+2SD(10次检测结果的标准偏差)作为检测下限，即1.0mIU/mL。

抗原浓度过高时会导致检测结果偏低，但当其浓度在20000mIU/mL以下时不会发生上述情况。

5、 交叉反应性

交叉反应性物质 交叉率(%)

FSH 100

LH(黄体形成激素) 0.15

TSH(甲状腺刺激激素) 0.31

hCG 0.03

※ ※6、干扰物质

在检体标本中如血红蛋白、游离胆红素、饱和胆红素、脂质、白蛋白、抗坏血酸以及肝素的浓度分别低于390mg/dl 、17mg/dl、18mg/dl、1660mg/dl、50 mg/ml、20mg/dl、100U/ml时上述物质几乎不会影响检测结果。

※ ※7、 相关性

本方法(y)与本公司EIA法(x)的相关性如下所示:

y=0.943x+1.02

r=1.000

n=48

其中，用本方法检测讨论肝素血浆(y)和血清(x)的相关性，其结果如下:

y=0.983x-0.118

r=0.999

n=205

8、参考标准范围

分析健康者血清中FSH浓度的检测结果，所得的参考标准范围如下。其中，参考标准范围因为很容易受其他各种因素影响，所以希望各单位自行设定。

N 参考标准值范围(mIU/mL)

132 2.1-18.6 成年男性

成年女性

52 4.5-11.0 卵泡期

49 3.6-20.6 排卵期

42 1.5-10.8 黄体期

21 36.6-168.8 闭经期

[SI单位的变换]

本说明书中FSH的浓度是以mIU/mL表示的，变换到SI单位的IU/L要用以下关系式:

IU FSH/ L =mIU FSH/mL×1.0

[注意事项]

1. 本品是一种体外诊断用试剂，禁止以其他目的使用。

2. 试剂超过有效期限请勿使用。

3. 试验仪器的污染对检测结果的判断有一定影响，所以请洗净试验仪器后再进行检测。 ※4. 因为本品中含有的作为保存试剂的叠氮化钠，因此试验中如不慎进入眼睛、口中或沾到皮肤上的时候，请采取应急措施—用流水充分冲洗;必要时请求助医生处理。另外，叠氮化钠与铅和铜可发生反应生成有爆炸性的金属叠氮化物，因此，检测结束后请将试剂用大量水稀释后废弃。

5. 已经确认该试剂盒对HB抗原、HIV抗体及HCV抗体呈阴性，但仍请使用者注意使用S

以免意外。

6. 沾有标准品和样品溶液的手套等试验器具及检测结束后的试剂Cup要用高压灭菌锅在120?下处理15分钟灭菌后废弃。

※※7. 本产品是血清或肝素血浆中FSHl的检测用剂，请不要用于其它样品的检测。其中，血浆请用肝素血浆。

8. 如果样本中有HAMA(Human Anti-mouse Antibody)时，在使用鼠单克隆抗体的检测系统中不能得到正确的结果。

9. 本产品不能用于AIA全自动免疫分析装置AIA-1200系列及AIA-600。

[贮存及有效期限]

标签。 请避光保存于2-8?。有效日期见试剂盒、防潮袋和Cup板的

[包装规格]

100次检测用量(20试剂Cup/板×5)。

[主要文献]

1. Pierce，J.G. and Parsons,T.E:Glycoprotein hormones:Structure and

function.,Ann,Rev.Biochem.,50,465-495(1981).

2. Tojo,S.Ashitaka,Y.Maruo,T.and Nishimoto,H.:Some biological properties of human chorionic

follicle stimulating hormone.,Endocrinol.Jpn.,22,585-589(1975). 3. 三宅 侃等，日本临床，43，秋季临时增刊号，752-754(1985)

4. Pelletier,G.,Robert, F and Hardy,J.:Identification of human anterior pituitary cells by

immunoelectron microscopy.,J.Clin.Endocrinol.Metab., 46534-542(1978). 5. Abraham,G.E.,Odell,W.D.Swerdloff,R.s. and Hopper,K.:Simultaneous radioimmunoassay of

plasma FSH,LH,progesterone,17-hydroxyprogesterone and ereadiol-17β during the menstrual

cycle.,J.Cli.Endocr.,34,312-318(1972).

6. Michell,D.R.Jr.,Nakamura,R.M.,Crosignani,P.G.,Stone,S.,Kharma,K.,Nagata.Y and

Thorneycroft,I.H.:Serum gonadotropin and steroid patterns during the normal menstrual

cycle.,Am.J.Obestet.Gynecol.,III,60-65(1971)

(文献申请单位)

〒105-8623东京都港区芝3-8-2

东曹株式会社 科学计量事业部

电话:(03)5427-5181

传真:(03)5427-5220

制造商

东曹AIA有限公司

富山县富山市岩濑古志町,番地

销售商

东曹株式会社

山口县周南市开成町 ,,,,番地

中国地区总代理:上海蓝怡科技有限公司

中国地区售后服务:上海蓝怡科技有限公司

地址:上海市顾戴路2468号

邮编:201100

电话:021-54880800

传真:021-54883805

网址:www.ailex.com

范文二：Ｔh２免疫反应状态

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肺肿瘤;,T淋巴细胞,辅助诱导;,Th1细胞;,Th2细胞;,细胞因子类;,酶联免疫吸附测定

摘要: 目的 了解不同病理类型肺癌患者辅助性T细胞亚群(Th1/Th2)的反应状态，探讨肺癌发生发展的免疫机制。 方法 收集不同病理类型肺癌患者77例(腺癌30例，鳞癌28例，小细胞肺癌19例)、肺部良性疾病患者33例、健康志愿者45例的血清，分成肺癌组、良性组和正常组，用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血中Th1型细胞因子白细胞介素2(IL2)、γ干扰素(IFNγ)和Th2型细胞因子IL4、IL10的浓度。结果 3种不同病理类型肺癌患者外周血中IL2、IFNγ浓度均显著低于正常组，IL4、IL10浓度显著高于正常组(P0.05)。 结论 腺癌、鳞癌、小细胞肺癌等3种不同病理类型的肺癌患者外周血中的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应优势状态，使肺癌逃逸免疫，是肺癌发生发展的可能免疫机制。

关键词: 肺肿瘤; T淋巴细胞，辅助诱导; Th1细胞; Th2细胞; 细胞因子类; 酶联免疫吸附测定

Th1/Th2的平衡消长是机体免疫反应调节的基本方式，肿瘤的Th1/Th2免疫反应状态是近年来国内外研究的热点之一[12]。笔者以IL2、IFNγ代表Th1型细胞因子，IL4、IL10代表Th2型细胞因子，用ELISA方法检测肺癌患者外周血中Th1/Th2型细胞因子的水平，观察不同病理类型肺癌患者的Th1/Th2免疫反应状态，将有助于揭示肺癌病人的免疫调节机制。

1 材料与方法

1.1 对象 收集2002年1月12日,2005年12月20日收治的经病理证实的肺癌患者77例作为肺癌组，年龄(56?17)岁(33,72岁)，其中小细胞肺癌19例，鳞癌28例，腺癌互联网购物必备的省钱教程网站----省钱屋 www.5730.net

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30例;肺部良性疾病患者33例作为良性组，年龄(51?13)岁(30,68岁);健康志愿者45例作为正常组，年龄(53?15)岁(35,70岁)。

1.2 方法 采集不抗凝外周血2 mL，取其血清备查。IL2，IFNγ，IL4，IL10的标准品及其检测试剂盒均购自Genzyme公司。

1.2.1 包被 将鼠抗人的IL2、IL10和IFNγ单抗按1.0 μg/mL，抗人的IL4按0.5 μg/μL的浓度溶于pH 9.6的碳酸盐缓冲液中，然后每孔加50 μL至96孔板中，4 ?过夜。

1.2.2 用PBST(含0.05% Tween 20的PBS)洗涤3次。将灭活的新生牛血清(FCS)按

37 ?封闭1 h。用PBST洗涤3次。 5%的浓度配在PBST中，每孔加100 μL，

1.2.3 加入50 μL标准品稀释液至零孔和空白孔，然后在各孔中分别加入50 μL稀释的标准品、血清，每份做2个复孔，而后用封板胶封住反应孔，37 ?孵育60 min。用PBST洗涤3次。

1.2.4 加入生物素标记的羊抗鼠二抗，IL2、IL10和IFNγ按1?500，IL4按1?400稀释在含5% FCS的PBST中，每孔加入50 (L，而后用封板胶封住反应孔，37 ?孵育60 min。

1.2.5 用PBST洗涤3次。用HRP标记的亲和素50 μL，而后用封板胶封住反应孔，37 ?孵育15 min。用PBST洗涤3次。

1.2.6 每孔加入底物A、B各50 μL，混匀，37 ?孵育10 min。每孔加终止液50 μL。在波长450 nm处，用空白孔调零，测每孔光密度。

1.2.7 制作标准曲线或求出标准方程。根据标准曲线或方程求出每测定孔的细胞因子的浓互联网购物必备的省钱教程网站----省钱屋 www.5730.net

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度。

1.3 统计学处理 资料用x?s表示，各肺癌组、良性对照组及正常对照组外周血中Th1/Th2型细胞因子浓度的比较采用成组设计的两样本均数比较的t检验。

2 结果

腺癌、鳞癌及小细胞肺癌等3种不同病理类型的肺癌患者外周血中Th1/Th2型细胞因子的浓度均明显高于正常组(P0.05)(表1)。

表1 3组外周血中Th1/Th2相关细胞因子的浓度(略)

Tab 1 The concentration of Th1/Th2 related cytokines in the serum from three study

groupspg/mL

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范文三：免疫反应习题精选

课后检测 融会贯通

作业时限：25分钟

作业满分：50分

一、选择题(每小题2分，共24分)

1．对非特异性免疫特点的表述，不正确的是( )

A．是人生来就有的天然防御功能

B．其包括三道对付病原体的防线

C．皮肤、黏膜是其第一道防线

D．体液中的杀菌物质和吞噬细胞是其第二道防线

解析：非特异性免疫是人生来就有的防御功能，包括两道防线，第一道防线是皮肤和黏膜，第二道防线是吞噬细胞和杀菌物质。

答案：B

2．若一个人的胸腺先天发育不良，可能造成的后果是( )

A．体内没有B细胞而仅仅有T细胞

B．几乎丧失一切免疫功能，各种传染病乘机而入

C．只保留有非特异性免疫功能和部分体液免疫功能

D．有免疫功能的球蛋白合成能力减弱

解析：淋巴细胞起源于骨髓中，造血干细胞在胸腺内分化成T细胞，在骨髓中分化成B细胞。先天无胸腺，则缺乏T细胞，没有细胞免疫，但有一部分病原体可直接刺激B细胞，从而产生体液免疫，故会保留有非特异性免疫功能和部分体液免疫功能。

答案：C

3．下列关于抗体的说法，正确的是( )

A．抗体的化学本质主要是蛋白质，少部分是RNA

B．人体的抗体主要分布在血清中，在组织液和外分泌液中也有

C．抗体既能作用于细胞外的抗原，又能作用于细胞内的抗原

D．正常免疫反应与过敏反应中产生的抗体的性质不相同，所以其生理反应不同

解析：该题考查抗体的化学本质、分布、作用及其种类。抗体的化学本质是蛋白质，主要分布在血清中，少量分布在组织液和外分泌液中，只能与细胞外的抗原物质发生特异性结合，正常免疫反应产生的抗体与过敏反应产生的抗体的性质是相同的，都是蛋白质，但其分布不同，所以引起的反应不相同。

答案：B

4．关于过敏原和抗原的叙述中，正确的是( )

A．过敏原第二次进入机体才能引起过敏反应，抗原第一次进入就引起免疫反应

B．过敏原第一次进入机体就引起过敏反应，抗原第二次进入才能引起免疫反应

C．过敏原和抗原都是第一次进入机体就能引起反应

D．过敏原和抗原都是第二次进入机体才能引起免疫反应

解析：过敏原第一次进入机体只产生相应的抗体，不发生过敏反应，当相同的过敏原第二次进入机体后，抗体与过敏原反应，导致机体发生过敏反应。

答案：A

5．(2013·海南卷)关于人体非特异性免疫的叙述，正确的是( )

A．非特异性免疫是能够遗传的

B．过敏反应是由非特异性免疫异常引起的

C．机体能够通过非特异性免疫产生记忆细胞

D．非特异性免疫只对一种特定的病原体起作用

解析：非特异性免疫是先天的、生来就有的，因而是可以遗传的，A正确；过敏反应是指已产生免疫的机体，在再次接受相同的抗原时所发生的组织损伤或功能紊乱，属于特异性免疫，B错误；记忆细胞是B细胞、T细胞受抗原刺激后增殖、分化产生的，为特异性免疫，C错误；特异性免疫针对特定的病原体起作用，D错误。

答案：A

6．下列有关免疫系统组成的叙述，正确的是( )

A．免疫系统包括免疫器官、免疫细胞

B．免疫器官是免疫细胞生成、成熟或集中分布的场所

C．免疫细胞包括T细胞和B细胞，分别在胸腺和骨髓成熟

D．免疫活性物质是由免疫细胞产生的发挥免疫作用的物质

解析：免疫系统包括免疫器官、免疫细胞、免疫活性物质三部分；免疫器官是免疫细胞生成、成熟或集中分布的场所；免疫细胞包括吞噬细胞和淋巴细胞；免疫活性物质是由免疫细胞或其他细胞产生的具有免疫作用的物质。

答案：B

7．下列有关人体免疫的叙述正确的是( )

A．人类清除感冒病毒只需通过非特异性免疫

B．艾滋病病人的免疫系统受损可能导致恶性肿瘤的发病率大大提高

C．效应T细胞可直接杀灭抗原

D．过敏原首次侵入人体即引起过敏反应

解析：人体清除流感病毒还需要细胞免疫和体液免疫的参与。艾滋病患者的免疫系统严重受损，导致自身免疫能力低下，难以及时清除体内癌变细胞，因此艾滋病患者易患恶性肿瘤。效应T细胞通过与

靶细胞的密切接触，使靶细胞裂解死亡，最终抗原因失去藏身之所而被抗体消灭。过敏反应是指已产生免疫的机体，在再次接受相同的抗原时所发生的组织损伤或功能紊乱。

答案：B

8．免疫调节在维持稳态的过程中具有重要作用，以下有关特异性免疫的叙述，正确的是( )

A．第一道和第二道防线被攻破后，才会引发特异性免疫

B．体液免疫过程中，每个浆细胞只分泌一种特异性抗体

C．浆细胞必须由B细胞受到抗原刺激而增殖分化产生

D．B细胞、T细胞和吞噬细胞均具有特异性识别抗原的能力 解析：本题考查免疫调节的知识，属于分析判断层次，难度较大。人体的三道防线同时发挥免疫作用；浆细胞具有特异性，每个浆细胞只能分泌一种抗体；B淋巴细胞受抗原刺激后可增殖分化为浆细胞，浆细胞也可以通过记忆细胞增殖分化而来；吞噬细胞没有特异性识别抗原的能力。

答案：B

9．下图为人体免疫过程的示意图，下列叙述正确的是(

)

A．该过程为特异性免疫的细胞免疫

B．通过过程V产生的“某物质”是淋巴因子

C．细胞①③分别为吞噬细胞和T细胞，均能识别抗原

D．当同一种抗原再次进入机体时，细胞⑤会迅速增殖、分化

解析：该过程应为特异性免疫的体液免疫；过程V产生的“某物质”是抗体；细胞③为B细胞，细胞②是T细胞，细胞⑤是记忆细胞，因此A、B、C三项均不正确。

答案：

D

10．如图表示某种特异性免疫细胞某时期的结构，请据图分析并判断下列说法正确的是( )

A．抗体是由图中④合成，经③通过①分泌到细胞外

B．若该细胞是浆细胞，它分泌抗体的过程需要②提供能量

C．如果该细胞是效应T细胞，该细胞参与细胞免疫

D．抗体吸附在某些细胞表面与过(致)敏原结合，会引起自身免疫病

解析：抗体是由图中④核糖体合成，经②高尔基体通过①细胞膜分泌到细胞外，不通过线粒体，A项错误；若该细胞是浆细胞，它分泌抗体的过程需要③线粒体提供能量，B项错误；抗体吸附在某些细胞表面与过(致)敏原结合，引起的是过敏反应，D项错误。

答案：C

11．目前我国许多地方有计划地接种“甲流疫苗”，接种该疫苗

后在体内可引起的免疫反应是( )

A．B细胞、T细胞和浆细胞受到刺激后都不断进行分裂

B．T细胞受刺激后形成相应的效应T细胞

C．吞噬细胞受刺激后能特异性识别甲型H1N1流感病毒

D．“甲流疫苗”与病毒结合使其失去侵染宿主细胞的能力 解析：浆细胞是高度分化的细胞，受到刺激后不能进行分裂。吞噬细胞不具有特异性识别作用。“甲流疫苗”是灭活的病毒，不是抗体，不能与病毒结合。

答案：B

12．干细胞移植现已成为治疗糖尿病的一种临床新技术。自体骨髓干细胞植入胰腺组织后可分化为胰岛样细胞，以替代损伤的胰岛B细胞，达到治疗糖尿病的目的。下列叙述正确的是( )

A．骨髓干细胞与胰岛样细胞的基因组成不同，基因表达产物不同

B．骨髓干细胞与胰岛样细胞的基因组成相同，基因表达存在差异

C．胰腺组织微环境造成骨髓干细胞基因丢失，分化成为胰岛样细胞

D．胰腺组织微环境对骨髓干细胞分化无影响，分化是由基因决定的

解析：骨髓干细胞和胰岛样细胞都是由同一个受精卵经有丝分裂而形成的体细胞。在有丝分裂过程中，遗传物质精确复制后平均分配到子细胞中，故骨髓干细胞和胰岛样细胞基因组成相同。机体不同细胞是细胞分化的结果，细胞分化的实质是基因的选择性表达，表达的产物存在差异，故A项错误，B项正确。骨髓干细胞是分化程度较低

的干细胞，其能分化成为胰岛样细胞是基因选择性表达的结果，而不是基因丢失的结果，C项错误。细胞分化是遗传物质和外界环境条件共同作用的结果，D项错误。

答案：B

二、非选择题(共26分)

13．(7分)下图甲表示某种病毒先后两次感染人体后，人体内抗体产生、病毒增殖与疾病程度变化曲线图。请据图回答：

(1)a、b、c中表示疾病程度的曲线是________，表示抗体产生的曲线是__________。

(2)再次感染与初次感染相比，体内抗体产生明显____________。产生这种现象的原因是________________。

(3)在初次感染前一周给人体注射了相应的疫苗，因而在感染后人体没有明显病症出现，是由于人体内已有__________，该免疫属于特异性免疫中的__________。

(4)请在图乙中用曲线表示出在(3)条件下，人体内抗体产生与疾病程度的关系(用文字注明对应曲线名称)。

解析：抗体的产生是在病毒感染以后，且渐渐增多至稳定水平，

因此曲线c表示抗体产生情况。人患病应是从病毒感染开始，并且程度不断增强，在抗体产生以后，病毒被不断消灭，疾病程度将不断下降，故曲线b表示疾病程度。再次感染时，由于初次感染时产生的记忆细胞再次受抗原刺激时，迅速增殖分化，形成大量的效应B细胞，继而产生大量抗体。给人体注射疫苗属于预防接种，能使人在不发病的情况下产生相应的抗体，从而获得免疫能力，属于体液免疫。

答案：(1)b c

(2)增加 记忆细胞再次受抗原刺激时，迅速增殖分化，形成大量的效应细胞，继而产生大量抗体

(3)抗体 体液免疫

(4)如下图所示

14．(8分)免疫是在长期进化过程中，哺乳动物特别是人体对病原性物质的侵害所形成的特殊防御机制。请回答下列问题：

(1)HIV是具有包膜的__________病毒，入侵人体后，引起获得性免疫缺陷综合症(AIDS)。

(2)请简述HIV病毒在寄主细胞内复制繁殖的过程。

_______________________________________________________

(3)除了AIDS外，还有其他免疫缺陷相关的疾病，这些疾病一般可通过骨髓移植和基因治疗等方法进行部分治疗。

①骨髓移植，其实质是__________移植，能替代受损的免疫系统，

实现免疫重建。

②基因治疗，取患者的__________作为受体细胞，将正常的__________转到受体细胞后，再回输体内，以替代、修复或纠正有缺陷的基因。

答案：(1)RNA(逆转录)

(2)病毒侵入寄主细胞后，利用逆转录酶合成DNA，然后分别指导合成大量的病毒遗传物质和病毒蛋白质，并装配成完整的病毒颗粒。

(3)①造血干细胞(干细胞)

②淋巴细胞(脐带血细胞) 外源基因(目的基因)

15．(11分)探究点 从曲线中提取实验信息

——免疫过程的分析

实验一：用不带特殊病原体的小鼠进行如下特异性免疫实验。过程如图1，结果如图2。

(1)实验一中，对B组小鼠的处理是作为A组小鼠的__________处理。

(2)从图2可知，Ⅱ组与Ⅳ组相比，小鼠脾脏中的活细菌数量的增长趋势________，说明血清中的________不能有效抑制脾脏内的细菌繁殖。注射来自于A组小鼠的T细胞后，在4天内Ⅰ组小鼠脾脏中的活细菌数量________，说明该组T细胞(活化T细胞)________细菌数量的增长。由此推测该细菌生活在________。

(3)实验中，Ⅰ～Ⅳ组小鼠感染的是________，感染的时间是在注射T细胞或血清的________天。

实验二：在体外观察小鼠的T细胞和巨噬细胞(一种吞噬细胞)对细菌X的杀伤力。结果如图3。

(4)由图3可知，能有效杀伤细菌X的是______细胞，而不是活化T细胞。

(5)有人假设，活化T细胞释放某种物质活化了巨噬细胞。若用体外实验验证该假设，实验组应选择的实验材料包括________(填选项前的符号)。

a．培养过活化T细胞的培养液

b．培养过巨噬细胞的培养液

c．A组小鼠的巨噬细胞

d．B组小鼠的巨噬细胞

e．培养过未活化T细胞的培养液

f．细菌X

(6)该系列实验的目的是研究________________________。 解析：(1)活化的T细胞和血清的区别：

①活化的T细胞主要参与细胞免疫，它能识别并裂解靶细胞，暴露抗原，使抗体消灭抗原。

②注射血清的目的主要是血清中含有抗体，可以起到体液免疫的作用，即可以和位于细胞外的抗原结合使其失去活性而发挥免疫效应，但是对于侵入细胞内的抗原起不到作用。

(2)坐标图中信息提取的技巧：

①分析曲线的起点、终点和走向：图2中Ⅱ组与Ⅳ组的起点、终点和走向基本相同，因此，Ⅱ组与Ⅳ组的小鼠脾脏中活细菌数量的增长趋势基本相同；Ⅰ组中活细菌的数量基本不变，说明活化的T细胞能抑制细菌的数量。

②解读坐标图中横纵坐标的含义：坐标图中横纵坐标的含义不同，曲线的走势不同。图2中横坐标表示“感染后天数”，据此和箭头指向的注射T细胞或血清的时间可推知感染发生在注射的前1天。

(3)验证性实验中实验材料的选择：

验证性实验也遵循对照原则，在选择实验材料时首先明确验证的假设和实验的自变量。实验二中验证的假设是“活化T细胞释放某种物质活化了巨噬细胞”；自变量是“活化T细胞释放某种物质的有无”，因此该实验中选择的材料是：活化T细胞释放的某种物质、未接受过细菌X的巨噬细胞和细菌X。

(4)整合结论明确实验目的：

分析本题所设计的系列实验可知该特异性免疫属于细胞免疫，对细菌X有杀伤力的是T细胞、巨噬细胞，该系列实验的目的是研究小鼠抗细菌X的免疫应答。

答案：(1)对照

(2)相同 抗体 无明显变化 抑制 细胞内

(3)细菌X 前1

(4)活化巨噬

(5)a、d、f

(6)小鼠抗细菌X的免疫应答

失分点警示：得分要点

(2)第一个空必须体现“相同”。

(3)第一个空必须体现“细菌X”。

(5)必须体现“a、d、f”。

(6)必须体现“抗细菌X的免疫应答”。

失分案例

(2)第一个空错答为“更快”而不是“相同”。(错因：没有明确消灭细菌是由T细胞完成的)

(3)第一个空只答出“细菌”。(错因：没有仔细的考虑抗原与免疫的特异性)

(5)错答为“a、c、f”或“b、d、f”。(错因：没有考虑到吞噬细胞必须是未刺激过的)

(6)错答为“哪种细胞可以抗细菌X”。(错因：没有考虑到实验目的必须是肯定的语气)

范文四：CA125免疫反应试剂

执行标准号: YZB/JAP 016-2005

产品注册号:

1002671001-014C ※※2004年1月修订 体外诊断试剂 ※2003年11月修订

2001年8月制成

许可号(07AM)第0504号 ST

E-test(TOSOH)?(CA125)免疫反应试剂

EIA法检测血清及肝素血浆中CA125浓度所需的检测试剂

CA125是Bast等于1981年从人卵巢癌细胞株(OVCA433)中发现的一种糖蛋白抗原，其主要识别单克隆抗体(OC125)，其分子量在20万以上。在上皮卵巢癌患者血清中CA125反应呈阳性，且阳性率很高;因此，CA125的检测已经被广泛用于卵巢癌的诊断、治疗效果的评价及治疗过程中的观察上。另外，CA125在子宫内膜炎患者血液中浓度也较高，因此也可以作为子宫内膜炎症的诊断指标。

[特征]

1、 应用AIA全自动免疫分析装置(AIA-1200系列以及AIA-600除外)，短时间内能够实现

自动检测。(抗原抗体反应时间约为10分钟)。

2、 检测中使用的是高亲合性抗CA125抗体，并采用一步EIA夹心法。 3、 抗CA125的单克隆抗体和酶标记的抗CA125单克隆抗体均以冻结干燥状态密封贮存于

试剂Cup中，使用时不需要配制。

4、 从抗原抗体反应到荧光检测均在专用的试剂Cup中进行，污染的可能性很小。 5、 不使用放射性同位素，因此不需要特殊的设备。

[成分]

E-test(TOSOH)?(CA125)免疫反应试剂

每20个试剂杯并排放于一个试剂板上，并保存在铝制的防湿袋中。每次检测所用试剂主要包括以下几种:

抗CA125鼠单克隆抗体固定化微球 12个

抗CA125鼠单克隆抗体

碱性磷酸酶联标记结合物 50ul ※ ※[作用]

血清及血浆中CA125浓度的检测

[检测原理]

该方法是使用两种特异性抗体的一步EIA夹心法。固定在磁性微球上的抗CA125抗体和碱性磷酸酶联标记的抗CA125单克隆抗体都是以冰冻干燥状态密封在试剂Cup中的。在

该试剂Cup添加缓冲液和样品后，冰冻干燥的试剂开始溶解，抗原抗体反应随即发生。

在一定温度下孵育一段时间后，用洗脱液将游离的酶标记抗体及样品成分除去(B?F分离)。之后，为了检测结合在磁性微球上的酶活性，添加酶底物磷酸-4-甲基伞形酮;通过检测酶反应产物荧光物质的生成速度确定血清或肝素血浆中的CA125的浓度。 [使用方法]

在使用本品检测血清或肝素血浆中CA125浓度时，请与下列试剂组合使用。另外，除本使用说明书外请参照其它相关说明。

E-test(TOSOH)?(CA125)标准品试剂盒

E-test(TOSOH)?(CA125)样品稀释液

E-test(TOSOH)?基质试剂盒

(标签上有粉红色“SUBII”标志)

E-test(TOSOH)?洗脱液

E-test(TOSOH)?缓冲液

在使用AIA全自动酶联免疫分析装置的时候请参考装置的使用说明书。 1、 试剂的配制方法及配制后的贮存方法、使用期限

) 免疫反应试剂 1

请将E-test(TOSOH)?(CA125)免疫反应试剂从密封保存的防湿袋中取出，开封后在15-25?下放置可以保存一天，在2-8?下放置可保存七天。

2) 样品稀释液

E-test(TOSOH)?(CA125)样品稀释液是液体，开封后即可使用。开封后密封放置在2-8?下可以保存七天。

※ ※3)标准液

E-test(TOSOH)?(CA125)标准品(1)是液体，开封后请吸取适当量添加到样本Cup中。E-test(TOSOH)?(CA125)标准品(2)-(6)都是冰冻干燥品，使用前各自用1.0毫升蒸馏水溶解。配制后如果密封保存于2-8?下可以保存1天。

E-test(TOSOH)?(CA125)标准品的浓度以TOSOH公司内标准品为标准。

4) 基质液

每瓶E-test(TOSOH)?基质液用100毫升E-test(TOSOH)?基质溶解液配制。配制后避光放置在15-25?下放置可以保存三天，在2-8?下放置可保存七天。注意避免日光及紫外线直射。

5) 洗脱液

每瓶E-test(TOSOH)?洗脱液用适量的蒸馏水稀释到2.5升，充分混匀以免产生浓度差。配制后请放置在15-25?下可以保存30天。

6) 缓冲液

每瓶E-test(TOSOH)?缓冲液用适量的蒸馏水稀释到5升，充分混匀以免产生浓度差。配制后请放置在15-25?下可以保存30天。

2、检测操作方法

1) 从铝片保护层中取出E-test(TOSOH)?(CA125)免疫反应试剂Cup。 2) 在试剂Cup中加入50微升缓冲液和100微升标准品或稀释后的样品溶液，在磁石磁珠

振动器上搅拌，在37?下使抗原抗体反应进行10分钟。

3) 用洗脱液冲洗试剂Cup，除去其中游离的酶联标记抗体及样本成分(B?F分离)。 4) 加入基质液后，在磁石磁珠振动器上搅拌同时用荧光检测器检测荧光物质的荧光强度，

激发波长363nm，荧光吸收波长447nm，并计算出荧光物质的生成速度。 5) 根据标准液检测绘制的荧光物质生成速度标准曲线，计算出样品中CA125的浓度。 6) 如果检测结果超过1000U/mL时，要用样品稀释液提高稀释倍数重新稀释，并按照(1-5)

步骤检测。

[操作上的注意事项]

、样品必须使用新鲜的血清或肝素血浆，且请不要使用除肝素血浆以外的血浆。取血※※1

清及肝素血浆样品时请注意操作以免发生溶血。样品要避光保存在2-8?，或在-20?冰冻保存。

2、 当样品中含有EDTA或柠檬酸存在时检测结果会偏低。

3、 避免多次进行冰冻样品冰冻溶解操作。

4、 在使用E-test(TOSOH)?(CA125)样品稀释液稀释样品时请充分混匀。 [检测结果的判定方法]

应用E-test(TOSOH)?(CA125)标准品试剂盒绘制标准曲线，从曲线中计算出样品中CA125的浓度。

对于检测结果的判定，其标准值由各单位各自设定。在进行临床诊断时，要考虑到其他检测结果及临床症状并给予一个综合的判断。

为了提高检测结果的精确度，在检测样品时请同时测定市售管理血清的Control。使用全自动酶联免疫分析装置AIA-21检测所得的标准曲线如下(见原版说明书)所示。 [性能及相关性]

1、灵敏度

1)E-test(TOSOH)?(CA125)标准品(1)的荧光单位(FU，Rate)在5nmol/(L.s)以下。

2)测定E-test(TOSOH)?(CA125)标准品(1)和E-test(TOSOH)?(CA125)标准品(2)的FU，并计算CA125浓度，FU差值与CA125浓度之比是0.1nmol/(L.s)/U/mL(以上)。

注释:FU之比由以下公式计算:

FU之比=(A-B)/C

A:标准品(2)的FU nmol/(L.s)

B:标准品(1)的FU nmol/(L.s)

C:标准品(2)的CA125浓度 U/mL

2、特异性

检测Control时，其检测结果在100?20%以内。

注释:Control是以TOSOH CA125标准品做对照，用E-test(TOSOH)?(CA125)检测，用此结果做对照值。

3、重复性

同时同一Control 10次，其检测结果的变动系数在15%以下。

4、检测范围:2-1000U/ml

以标准品(1-6)的检测结果绘制成标准曲线，从标准曲线中推测出标准品(1)的FU平均值(Y轴截距)，以该平均值+2SD(10次检测结果的标准偏差)作为检测下限，即2U/mL。

抗原浓度过高时会影响检测结果，但当其浓度在20000 U/mL以下时不会发生上述情况。 5、 交叉反应性

交叉反应性物质 交叉率(%)

CA125 100

CA19-9 N.D.

CEA N.D.

AFP N.D.

(N.D.:检测限以下)

※ ※6、干扰物质

在检体标本中如血红蛋白、游离胆红素、饱和胆红素、脂质、白蛋白、抗坏血酸以及肝素的浓度分别低于390mg/dl 、17mg/dl、18mg/dl、1660mg/dl、50 mg/ml、20mg/dl、100U/ml时上述物质几乎不会影响检测结果。

※ ※7、 相关性

本方法(y)与本公司EIA法(x)的相关性如下所示:

y=0.991x+6.253

r=0.997

n=48

其中，用本方法检测讨论肝素血浆(y)和血清(x)的相关性，其结果如下:

y=1.061x-0.041

r=0.998

n=124

8、参考标准范围

对172例健康者血清中CA125浓度进行检测，其结果呈对数正态分布;检测结果经对数变换后，求得的平均值加上2SD是33.5U/ml。其中，参考标准范围因为很容易受其他各种因素影响，所以希望各单位自行设定。

[SI单位的变换]

本说明书中CA125的浓度是以U/ml表示的，变换到SI单位的KU/L要用以下关系式:

kU CA125/ L =U CA125/mL×1.0

[注意事项]

1. 本品是一种体外诊断用试剂，禁止以其他目的使用。

2. 试剂超过有效期限请勿使用。

3. 试验仪器的污染对检测结果的判断有一定影响，所以请洗净试验仪器后再进行检测。 ※4. 因为本品中含有的作为保存试剂的叠氮化钠，因此试验中如不慎进入眼睛、口中或沾到皮肤上的时候，请采取应急措施—用流水充分冲洗;必要时请求助医生处理。另外，叠氮化钠与铅和铜可发生反应生成有爆炸性的金属叠氮化物，因此，检测结束后请将试剂用大量水稀释后废弃。

5. 已经确认该试剂盒对HB抗原、HIV抗体及HCV抗体呈阴性，但仍请使用者注意使用S

以免意外。

6. 沾有标准品和样品溶液的手套等试验器具及检测结束后的试剂Cup要用高压灭菌锅在120?下处理15分钟灭菌后废弃。

※※7. 本产品是血清或肝素血浆中CA125l的检测用剂，请不要用于其它样品的检测。其中，血浆请用肝素血浆。

8. 如果样本中有HAMA(Human Anti-mouse Antibody)时，在使用鼠单克隆抗体的检测系统中不能得到正确的结果。

※※9. CA125值在子宫内膜炎等良性疾病患者的血清或血浆样本中有时也是上升的，所以不能把CA125作为恶性疾病的唯一判断标准。

10. 本产品不能用于AIA全自动免疫分析装置AIA-1200系列及AIA-600。

[贮存及有效期限]

请避光保存于2-8?。有效日期见试剂盒、防潮袋的标签。

[包装规格]

100次检测用量(20试剂Cup/板×5)。

[主要文献]

1. Bast R.C.Jr,et al:Reactivity of a monoclonal antibody with human ovarian

carcinoma.J.Clin.Invest.,68.1331(1981).

2. Yacobs,I. and Bast R.C.Jr: The CA125 tumor-associated antigen: a review of the

literature.Human Reproduction.4,1(1989)

3. 野泽志朗。病理和临床，8(临时增刊号)，321(1990)。

4. 木村英三:日产妇志，36，2121(1984)。 5. 铃木光明:产妇的实际，361545(1987)。

(文献申请单位)

〒105-8623东京都港区芝3-8-2 东曹株式会社 科学计量事业部

电话:(03)5427-5181

传真:(03)5427-5220

制造商

东曹AIA有限公司

富山县富山市岩濑古志町,番地

销售商

东曹株式会社

山口县周南市开成町 ,,,,番地

中国地区总代理:上海蓝怡科技有限公司 中国地区售后服务:上海蓝怡科技有限公司 地址:上海市顾戴路2468号

邮编:201100

电话:021-54880800

传真:021-54883805

网址:www.ailex.com

范文五：C-反应蛋白 CRP 免疫比浊法

目 录

1.检测原理

2.标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3.试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4.仪器

5.操作

6.计算

7.操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8.参考值

9.临床意义

附录 A: 参数

1. 检测原理

570-600nm

样本中 CRP + 试剂中的 CRP 抗体 -----------------大分子免疫复合物

在 570-600nm 监测生成的复合物的浊度变化,与样本中 CRP 含量成正比。

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备:

病人空腹 12h ,不饮酒 24h 后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用 影响测试项目的药物。此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节 性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前 24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血:

除非是卧床的病人, 一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布, 会影响测试项目的浓度。 在采血前至少应静坐 5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过 1分钟,穿刺成功后立即松开 止血带。

2.3 抗凝剂:

不使用抗凝剂。

2.4 标本处理:

血清在 2 - 8°C 下储存不超过一周或在 -20°C 可保存 2个月。

3.试剂

3.1 试剂:

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司 hCRP 试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:

3.2:校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的多项免疫类标准液。其中包含 HCRP 。

校准频次:

全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的 2SD 范围,需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性:

原包装试剂储存在 2-8℃ 至标签所示失效日期。试剂开瓶后,在仪器中至少可保存 30天。

试剂储存在 18-22℃ 稳定 28天,试剂应避免污染。试剂 R1颜色为无色,试剂 R2颜色为乳白色,当 试剂变色或出现沉淀,按照试剂失效处理。

多项免疫类标准液储存在 2-8℃ 至标签所示失效日期。第一次开启后,不要冷冻。在 2-8℃ 下将瓶盖拧 紧保存,标准品可以储存长达 6个星期的时间。

4.仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能:波长 570nm ,仪器测定吸光度的灵敏度应达到 0.001ABS 以上。

5.操作

样品为血清。本法为免疫比浊法。参数见后附,附录 A 。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作,见仪器操作规程。

6.计算

测定标准液系列的吸光度,建立吸光度 -浓度对应关系的工作曲线。测定标本的吸光度,并在工作曲线 上读取浓度值(mg/dL)。如标本的吸光度值超过线性范围,则需稀释标本后,重新测量。

7.操作性能

7.1 精密度:

批内 CV< 1.58%,批间=""><>

7.2 准确度:

测量结果在利德曼质控血清靶值 ±2SD 范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异,使用时 请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。

7.3 灵敏度:

hCRP 浓度为:5.80mg/dL时,吸光度 A 600nm 约为 1.12-1.25。

7.4 可报告范围:

血清与试剂用量之比为 1:50时,测定范围为 0.06~16mg/dL。

7.5 特异性:

测量值在给定值的 90%-110%范围内。

7.6 干扰:

内源性干扰物溶血为 1000mg/ml、脂血 2000mg/ml、黄疸 30mg/ml、抗坏血酸 300mg/ml对测试结果 无明显影响。

8.参考值

成人:0~0.5mg/dL;新生儿,脐血:<0.06 mg/dl;=""><0.16>

9.临床意义

C-反应蛋白(CRP )是在炎症过程中出现在血液中的一种非特异性急相反应蛋白。患有急性炎症的病 人 CRP 浓度的变化比红细胞沉积的速度快。 CRP 浓度的升高以一种非特异性的方式发生在各种组织病变, 如:感染期、风湿性关节炎、心肌梗塞、恶性肿瘤等。

研究表明 CRP 不仅是炎症的非常好的指示物,当显著增加时,它也是冠状动脉疾病的很好的指示物。 CRP 的浓度在正常参考范围内时,在明显健康的个体中,可以评估预测将来发生冠状动脉疾病的可能性。 附录 A: 参数

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