范文一:酵母菌生长曲线的测定及不同生长时间麦芽汁糖度的变化
验研营养与饲料
兽药与饲料添加剂2006年第11卷第1期
酵母菌生长曲线的测定及不同生长时间麦芽汁糖度的变化
王秋菊1,许
(1.东北农业大学动物营养研究所,黑龙江哈尔滨
摘
要
丽1,崔一喆1,潘军2
150030;2.哈尔滨远大牧业有限公司,黑龙江哈尔滨150030)
采用光电比浊法对酵母菌36h内的生长进行测定,以确定酵母菌的最优生长时间。结果表明,酵母
30℃恒温振荡培养30h时,生长达到最大值。由于实验采用麦芽汁培养液培养酵母菌,酵母菌的生长对麦芽汁的糖
度有一定的要求,因此又采用波美比重计对酵母菌在不同生长时间麦芽汁的糖度进行测定,结果表明随着酵母菌的生长,麦芽汁培养液的糖度呈现先下降后有小幅度回升的趋势。
关键词
酵母菌
生长曲线
培养液
糖度
文章编号:1007-9157(2006)01-0008-02
中图分类号:S816.79
文献标识码:B
酵母是一类单细胞微生物,其结构简单,属于真目前已知的酵母菌有490余种。由于酵母具菌类[1]。
有个体大、蛋白质含量高、杂食性强、易分离、易培养、代谢产物多、综合利用广等特点[2],在现代工业中除了用于酿酒外,还用于甘油、食用酵母、有机酸、酶制剂以及饲料等的生产[3]。随着科技的发展和人们对养殖业要求的不断提高及酵母菌具有的众多生理功能,酵母在饲料工业中得到了广泛应用。因此,了解酵母菌的生长周期,掌握其最佳生长阶段,以更好地生产酵母类产品就显得至关重要。
测糖化液糖度,将滤液用蒸馏水稀释到糖度为8波美度,自然pH值。115℃(0.1Mpa)高压灭菌20min后冷却,4℃保存备用。
斜面培养基[5]。麦芽汁,2%琼脂,加热融化后,补充失水,115℃杀菌备用。
摇瓶培养基。麦芽汁,115℃高压灭菌20min,用滤纸过滤,去除杀菌过程中形成的不溶物,然后用蒸馏水调糖至8波美度,装至三角瓶中,115℃高压灭菌15min。备用。
1试验材料1.1菌种
热带假丝酵母2.617*和酿酒酵母2.399*。购自中国科学院微生物研究所菌种保藏中心。
2实验方法2.1恢复培养
冻干菌种装在安瓿管内,恢复培养首先用75%乙醇将安瓿管的外壁消毒,将安瓿管上部用火焰上下烧热,滴几滴无菌水,使管子破裂。将无菌液体培养基加入安瓿管中,使样品溶解,然后用无菌吸管取出菌液至斜面培养基中进行培养。30℃恒温培养
1.2培养基制备
麦芽汁[4]:将大麦洗净,温水浸泡12h左右,装
入铺有纱布的托盘内,25℃恒温催芽24~48h,麦芽伸长到麦粒的2倍时停止。将发芽大麦烘干,研磨成麦芽粉。1份麦芽粉加入4倍水,65℃恒温水浴
48h,使菌种复壮。2.2扩大培养
在培养好的试管中加入无菌液体培养基,用无菌接种环将斜面上的菌落剥离,摇匀,制成菌悬液,接种到无菌的容量为1L并装有300mL液体培养基的锥形瓶中,在30℃恒温180r/min振荡培养20
4~5h,自行糖化,直至糖化完全。糖化液经过12层纱布过滤,如果滤液浑浊,可用鸡蛋清沉淀(每1L滤液加1个鸡蛋清:在20mL水中加入1个鸡蛋清
用玻璃棒搅拌调匀至产生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,将滤液静置片刻,过滤)。用波美比重计检
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基金项目:黑龙江省哈尔滨市攻关项目(2004AA6BN020)。
h,此时培养液浑浊。
2.3生长曲线的测定
将721型分光光度计波长调整到560nm,预热30min。以未接种的麦芽汁培养液校正比色计的零
8
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兽药与饲料添加剂2006年第11卷第1期
点。取盛有300mL无菌麦芽汁培养液的1000mL锥形瓶5个,各瓶中加入振荡培养20h的酵母培养液30mL,30℃恒温培养。于培养后的第0、2、4、6、
试验研究营养与饲料
4
结论
本实验采用光电比浊法,以热带假丝酵母和酿酒酵母为例,测定了酵母的一般生长曲线,并借助波美比重计对麦芽汁培养液糖度随酵母菌生长所产生的变化进行了测定。从而得出酵母菌在30℃恒温180r/min振荡培养30h时,生长达到最旺盛期。并且随着酵母菌的生长,麦芽汁培养液的营养被消耗,导致麦芽汁的糖度有所降低;而后麦芽汁培养液的糖度又有回升的趋势,通过多重复试验测定,此结果是正确的。至于糖度回升的原因还有待于进一步的研究,初步认为是酵母菌细胞壁含有的多糖类随着酵母菌的生长,达到衰亡期,酵母细胞
8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34h
分别用无菌移液管从各瓶中吸取培养液5mL,在
560nm下测定OD560值。2.4
培养液糖度的测定
参照食品科学糖度的测定,采用波美比重计对酵母菌培养液不同培养时间进行糖度测定。
3试验结果
酵母菌生长曲线见图1。培养液糖度的变化曲
线见图2。
图
1酵母菌生长曲线
图2培养液糖度的变化曲线
[J].生物技术通讯,2002(13):275-277.
壁破碎自溶释放出来所致[8]。
参
[1][2]
考
文
献
[5][6][7][8]
白晓婷.酵母类产品在饲料中的研究与应用[J].中国饲料,
张小卫,邵海枫,李珍,等.酵母菌培养鉴定方法的比较[J].
JournalofClinicalLaboratoryScience,1999(17):203.
李新,焦连亭,康淑荷,等.细菌在血培养仪上生长曲线的特点分析[J].江西医学检验,2003,30:229-234.
张颖,沈业寿.液体发酵蜜环菌的培养条件的优化及菌体多糖的分离[J].食用菌,2001(2):5-7.
赵芳芳,张日俊.酵母细胞壁生理功能及其应用[J].中国饲料,2003(17):17-18.
作者简介:王秋菊(1979—),女,黑龙江省海林市,在读硕士研究生。研究方向为动物营养与饲料科学。电话:13199480260,E-mail:
2005(2):8-10.
DannHM,DrackleyJK,McCoyGC,etal.Effectsofyeastculture(saccharomycescerevisiae)onprepartumintakeandpost-partumintakeandmilkproductionofJerseycows[J].JDairySci,2000,83:-127.[3]
AdamsAL,HarrisB,VanHornJrHH.Effectsofvaryingfor-agetypesonmilkproductionresponsestowholecottonseed,tal-low,andyeast[J].JDairySci,1995,78:573-581.
[4]张继泉,孙玉英,王瑞明,等.发酵戊糖产酒精酵母菌株的选育
wqj_9@sohu.。[收稿日期:2005-10-14]
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范文二:【doc】酵母菌生长曲线的测定及不同生长时间麦芽汁糖度的变化
酵母菌生长曲线的测定及不同生长时间麦
芽汁糖度的变化
善药与饲料添加剂2006筹77巷第7期
酵母菌生长曲线的测定及不同生长时问麦芽汁糖度的变化
王秋菊,许丽,崔一拮,潘军
(1.东北农业大学动物营养研究所,黑龙江哈尔滨150030;2.哈尔滨远大牧业有限公司,黑龙江哈尔滨150030)
摘要采用光电比浊法对酵母菌36h内的生长进行测定,以确定酵母菌的最优生长时间.结果表明,酵母
3O?恒温振荡培养30h时,生长达到最大值.由于实验采用麦芽汁培养液培养酵母菌,酵母菌的生长对麦芽汁的糖
度有一定的要求,因此又采用波美比重计对酵母菌在不同生长时间麦芽汁的糖度进行测定,结果表明随着酵母菌的
生长,麦芽汁培养液的糖度呈现先下降后有小幅度回升的趋势. 关键词酵母菌生长曲线培养液糖度
中图分类号:S8l6.79文献标识码:B文章编号:l007—9157(2006)叭一0008—02 酵母是一类单细胞微生物,其结构简单,属于真
菌类….目前已知的酵母菌有490余种.由于酵母具
有个体大,蛋白质含量高,杂食性强,易分离,易培
养,代谢产物多,综合利用广等特点2],在现代工业
中除了用于酿酒外,还用于甘油,食用酵母,有机
酸,酶制剂以及饲料等的生产_3].随着科技的发展和
人们对养殖业要求的不断提高及酵母菌具有的众
多生理功能.酵母在饲料工业中得到了广泛应用.
因此.了解酵母菌的生长周期.掌握其最佳生长阶
段,以更好地生产酵母类产品就显得至关重要.
1试验材料
1.1菌种
热带假丝酵母2.617和酿酒酵母2.399.购自 中国科学院微生物研究所菌种保藏中心. 1.2培养基制备
麦芽汁I4]:将大麦洗净,温水浸泡12h左右,装 入铺有纱布的托盘内,25?恒温催芽24,48h,麦芽 伸长到麦粒的2倍时停止.将发芽大麦烘干,研磨 成麦芽粉.1份麦芽粉加入4倍水,65?恒温水浴 4,5h,自行糖化,直至糖化完全.糖化液经过12层 纱布过滤,如果滤液浑浊,可用鸡蛋清沉淀(每1L 滤液加1个鸡蛋清:在20mL水中加入1个鸡蛋清 用玻璃棒搅拌调匀至产生泡沫,倒入糖化液中.搅 拌煮沸,将滤液静置片刻,过滤).用波美比重计检 基金项目:黑龙江省哈尔滨市攻关项目(20o4AA6BNO2O).
测糖化液糖度,将滤液用蒸馏水稀释到糖度为8波 美度,自然pH值.ll5?(0.1Mpa)高压灭菌20rain 后冷却,4?保存备用.
斜面培养基【5].麦芽汁,2%琼脂,加热融化后, 补充失水,ll5?杀菌备用.
摇瓶培养基.麦芽汁,ll5?高压灭菌20min, 用滤纸过滤,去除杀菌过程中形成的不溶物,然后 用蒸馏水调糖至8波美度,装至三角瓶中,ll5?高 压灭菌15min.备用.
2实验方法
2.1恢复培养
冻干菌种装在安瓿管内,恢复培养首先用75% 乙醇将安瓿管的外壁消毒,将安瓿管上部用火焰上 下烧热,滴几滴无菌水,使管子破裂.将无菌液体培 养基加入安瓿管中,使样品溶解,然后用无菌吸管
取出菌液至斜面培养基中进行培养.30?恒温培养 48h,使菌种复壮.
2.2扩大培养
在培养好的试管中加入无菌液体培养基.用无 菌接种环将斜面上的菌落剥离,摇匀,制成菌悬液, 接种到无菌的容量为1L并装有300mL液体培养 基的锥形瓶中,在30?恒温180r/min振荡培养20 h,此时培养液浑浊.
2.3生长曲线的测定
将721型分光光度计波长调整到560nm.预热 30min.以未接种的麦芽汁培养液校正比色计的零 叠
VETERINARYPHARMACEUTICALS&FEEDADDn,ES
点.取盛有30omL无菌麦芽汁培养液的1000mL 锥形瓶5个,各瓶中加入振荡培养20h的酵母培养 液30mL,30cI=恒温培养.于培养后的第0,2,4,6, 8,10,12,14,16,18,20,22,24,26,28,30,32,34h
分别用无菌移液管从各瓶中吸取培养液5mL.在 560nm下测定OD560值.
2.4培养液糖度的测定
参照食品科学糖度的测定.采用波美比重计对 酵母菌培养液不同培养时间进行糖度测定. 3试验结果
酵母菌生长曲线见图1.培养液糖度的变化曲 线见图2.
基
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4结论
本实验采用光电比浊法,以热带假丝酵母和酿
酒酵母为例.测定了酵母的一般生长曲线.并借助 波美比重计对麦芽汁培养液糖度随酵母菌生长所 产生的变化进行了测定.从而得出酵母菌在30cI= 恒温180r/min振荡培养30h时,生长达到最旺盛 期.并且随着酵母菌的生长,麦芽汁培养液的营养 被消耗,导致麦芽汁的糖度有所降低;而后麦芽汁 培养液的糖度又有回升的趋势.通过多重复试验测 定,此结果是正确的.至于糖度回升的原因还有待 于进一步的研究.初步认为是酵母菌细胞壁含有的 多糖类随着酵母菌的生长,达到衰亡期.酵母细胞 t/h
图1酵母菌生长曲线
图2培养液糖度的变化曲线
壁破碎自溶释放出来所致[8】.
参考文献
[1]白晓婷.酵母类产品在饲料中的研究与应用[J].中国饲料, 2005(2):8-10.
[2]DannHM,DrackleyJK,McCoyGC,eta1.Effectsofyeast
culture(saccharomycescerevisiae)onprepartumintakeandpost— partumintakeandmilkproductionofJer'~yCOWS[J].JDairy
sci.2000.83:123—127.
[3]AdamsAL,HarrisB,VanHornJrHH.Effectsofvaryingfor-
agetypesonmilkproductionresponsestowholecottonseed,tal— low,andyeast[J].JDairySei,1995,78:573—581. [4]张继泉,孙玉英,王瑞明,等.发酵戊糖产酒精酵母菌株的选育 [J].生物技术通讯,2002(13):275—277.
[5]张小卫,邵海枫,李珍,等.酵母菌培养鉴定方法的比较[J]. JournalofClinicalLaboratoryScience.1999(17):203.
[6]李新,焦连亭,康淑荷,等.细菌在血培养仪上生长曲线的特点 分析[J].江西医学检验,20o3,30:229—234.
[7]张颖,沈业寿.液体发酵蜜环菌的培养条件的优化及菌体多糖 的分离[J].食用菌,2001(2):5-7.
[8]赵芳芳,张日俊.酵母细胞壁生理功能及其应用[J].中国饲 料,2003(17):17—18.
作者简介:王秋菊(1979一),女,黑龙江省海林市.在读硕士研 究生.研究方向为动物营养与饲料科学.电话:13199480260.E—mail: wqj9@sohu.eonl.【收稿日期:2005—1o-14]
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不同生长时间麦芽汁糖度的变化作者 王秋菊 许丽 崔一喆 潘军作者单位
王秋菊许丽崔一喆东北农业大学动物营养研究所黑龙江哈尔滨150030 潘军哈
尔滨远大牧业有限公司黑龙江哈尔滨150030刊名 兽药与饲料添加剂英文刊名
VETERINARY PHARMACEUTICALS amp FEED ADDITIVES年 卷期
2006 111被引用次数 7次 1.白晓婷 酵母类产品在饲料中的研究与应用期刊论文-中国饲料 2005022.Dann H M.Drackley J K.McCoy G C Effects of yeast culture
saccharomyces cerevisiae on prepartumintake and postpartum intake and milk production
of Jersey cows 20003.Adams A L.Harris B.Van Horn H H Effects of varying forage
types on milk production responses towhole cottonseedtallowand yeast 19954.张继泉.孙玉英.王瑞明 发酵戊糖产酒精酵母菌株的选育期刊论文-生物技术通讯 2002135.张小卫.邵海枫.李珍 酵母菌培养鉴定方法的比较 1999176.李新.焦连亭.康淑荷 细菌在血培养仪上生长曲线的特点分析期刊论文-江西医学检验 20037.张颖.沈业寿 液体发酵蜜环菌的培养条件的优化及菌体多糖的分离期刊论文-食用菌 2001028.赵芳芳.张日俊 酵母细胞壁生理功能及其应用期刊论文-中国饲料 200317 1.学位论文 陈龙泉 一株高产酒精酵母菌种的选育与工艺优化 2007 以本公司菌种保藏室提供的酵母茵ZX-19为出发菌株 首先确定了该菌株的生长曲线 然后在获得的生长曲线的基础上逐步对处于对数生长期的酵母细胞进行了热冲击处理和紫外线诱变 并
最终获得一株稳定高产酒精的酵母经TTC平板初筛、杜氏管二级筛选、摇瓶复筛
菌株ZX—19—509。 对该株酵母菌进行耐酒精和耐糖特性的试验 结果表明 菌株ZX-19—509较原菌ZX-19的耐酒精性能稍有提高 可在25g/100ml糖化液中进行正常的生长发酵。然后通过优化该酵母菌株的生长温度、pH值、种龄、接种量、液化液DE值、发酵温度、发酵初始pH值、无机离子浓度、糖化液DE值等条件 确定了
最适生长温度为30? 最适生长pH值为5.5 最佳种龄最佳的生长与发酵条件为
为22h 最佳接种量为10 最适液化液DE值为20 最适发酵温度为32? 最适发酵初始pH值为5.5 确定了四种营养盐的添加量 考虑到发酵生产的成本 确定发酵糖化液DE值为96 。 本研究还对该菌株及获得的优化工艺放大到5001罐 发酵60h 酒精度达到12.7 v/v 转化率达到45.1 比出发菌株ZX—19的产酒提高了2.7 转化率提高了2.4 。2.学位论文 李艾 耐高温高产酒精酵母的分离鉴定及其应用研究 2007 在全球环境恶化和能源危机日益严峻的今天 酒精作为一种可利用的绿色能源 正逐渐成为各国能源发展的战略方向。其生产方法以微生物发酵为主 工业上 通常采用酵母在30 33?条件下发酵 但其发酵后期温度高达38? 必须采用降温手段以维持正常生产 需要消耗大量能源。因此耐高温高产酒精酵母的选育 在工业生产上具有重要意义。 本研究从不同来源的基质中分离得到127株酵母菌 经四级筛选 最终获得一株适宜以玉米为原料 在高温条件下可进行浓醪酒精发酵的高产酵母菌株 编号为A27。 对A27进行形态和生理生化鉴定实验 发酵糖类试验 可发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖 不发酵乳糖和半乳糖 同化碳源试验
可同化棉子糖、半乳糖、麦芽糖、海藻糖、蔗糖 不同化纤维二糖、肌醇、核糖、赤藓糖醇、鼠李糖、乳糖、木糖、核糖醇、柠檬酸、玻拍酸、甘露醇、可溶性淀粉、阿拉伯糖 同化氮源试验 不能同化硝酸盐、盐酸乙胺、盐酸尸胺 可在无维生素培养基上生长 可在50 w/w葡萄糖酵母膏培养基中生长 37?下可生长 不能在100ppm放线菌酮中生长。参照The Yeastsa taxonomic study第三版 鉴定A27菌株属于酵母属Saccharomyces的酿酒酵母Saccharomycescerevisiae。 对A27进行分子水平鉴定实验 利用酵母菌种鉴定目前国际上通用的26S rDNAD1/D2区对A27进行分子鉴定 结果表明对A27的26S rDNA D1/D2区扩增序列与GenBank上报道的酿酒酵母
26S rDNA D1/D2区同源性达到99 。因此 在分子生物学水平上进一步确证了A27菌株为酵母属Saccharomyces的酿酒酵母Saccharomycescerevisiae。 对A27进行生理特性研究 确定了A27生长和发酵的适宜温度和pH值 研究了温度、pH和接种量对生长曲线和发酵曲线的影响 研究了A27菌株的耐酸碱 耐酒精 耐盐 耐糖 耐发酵副产物和耐高温特性。结果表明 其适宜生长温度为36? 适宜生长pH为4.5 发酵适宜温度为36? 发酵适宜pH为4.5 温度和接种量对生长曲线和发酵曲线的影响显著 pH对生长曲线和发酵曲线的影响不显著 耐酒精能力为18 v/v 耐盐能力为9 可在50 w/w的葡萄糖溶液中发酵 并对乙酸、乳酸和甘油有一定的耐受能力 能耐受54?高温 在40?玉米醪中发酵 酒精体积分数为10.7 v/v。 采用四因素四水平正交试验确定了A27菌株的浓醪酒精发酵工艺。浓醪发酵的工艺条件为 料水比为1 2 接种量4.5 发酵时间84h 初始pH值4.5。在此条件下进行10L发酵罐小试 72h后酒精体积分数为14.1 v/v。3.期刊论文 熊海燕.李莹.Xiong Haiyan.Li Ying 不同果汁发酵液中酵母菌生长曲线的测定及pH值的变化 -农产品加
2009quotquot4 采用浊度法测量发酵液浓度确定波长为560nm.以新鲜苹果工?学刊
汁、柑橘汁为原料进行生长曲线、pH值的测定发现菌种的生长规律基本保持同一性果汁原料成分的影响不显著苹果汁与柑橘汁发酵醪液中的pH值也均呈逐渐下降的趋势.4.学位论文 鄯晋晓 四川泡菜菌系分离、筛选及发酵剂的研究 2008 四川泡菜具有历史悠久、鲜酸纯正、清爽可口、解腻开胃、促进消化等诸多优点。主要由于四川泡菜中含有对人体心脑血管疾病有利的纤维蛋白溶解酶 此外 经常食用泡菜可摄入大量的活性乳酸菌及乳酸菌代谢产物 它们具有调节肠道微生态平衡、降低胆固醇、提高机体免疫力等保健功能。 我国泡菜工业大多属于手工作坊式生产 而且主要靠自然发酵 故存在安全性差 质量不稳定等缺陷 在生产中缺乏可靠性和可控性。所以在现代加工工艺中人们越来越倾向于采用微生物发酵剂来实现对发酵过程的有效控制 保证产品的安全性和产品质量的稳定性。目前研究的重点是筛选出优良菌种用于传统四川泡菜的发酵 研究其合适的发酵条件 为工业化生产提供参数。 本论文就是以传统四川泡菜为研究对象。利用经典的微生物生理生化鉴定方法 对自然发酵泡菜在发酵过程中的微生物菌系、老泡菜水中的微生物菌系、发酵辣椒中的微生物菌系进行研究 然后以四川泡菜的优势微生物菌系为依据 选择标准菌种制作泡菜液体和固体发酵剂 并研究四川泡菜在发酵过程中pn值、总酸、盐度的变化以及发酵过程中乳酸菌总数和酵母菌总数的变化。本研究是在了解四川泡菜的微生物菌系基础上 筛选出泡菜的优势菌 以生产具有四川泡菜特有风味 品质稳定、安全卫生的泡菜。试验结论如下 1.自然发酵的泡菜其泡菜活菌数最高为1.9×107CFU/g 酸度最高的是老泡菜水 达到1.8654 盐度最高的是泡辣椒为11.349g/100 mL。自然发酵泡菜发酵期间活菌数变化为 1-3天为前期发酵 活菌数较少 3 7天为中期发酵 7天时活菌数最高 达到108 109CFU/g 发酵基本成熟 7天以后泡菜进入低温4?保藏 活菌数有所下降 自然发酵泡菜发酵产酸结果为 1 3天酸度较低 而且产生少量的酒精 3 7天为中期发酵 以正型乳酸菌发酵为主 7 9天时酸度最高 达到0.7145 发酵基本成熟。 2.利用经典的微生物生理生化鉴定方法 分离鉴定泡菜中的优势菌株确定 试验结果如下 1泡菜中的主要乳酸菌有 肠膜明串珠菌Leuconostocmesenteroides 植物乳杆菌Lactobacillus
plantarum 干酪乳杆菌Lactobacillus casei 短乳杆菌Lactobacillus brevis 植物乳链
球菌Streptococcus lacris 2泡菜中的主要酵母菌有酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae 粘红酵母Rhodotorula gtutinis 粗状假丝酵母Candidavalida 异变酒香酵母Torulopsis glabrata 汉逊氏酵母Hansenula anomala。 3.制作泡菜发酵剂的菌株从5株乳酸菌和3株酵母菌中筛选 5株乳酸菌分别是植物乳杆菌Lactobacillus plantrum 肠膜明串珠菌Leuconostocmesenteroides 乳酸链球菌Streptococcus lactis 干酪乳杆菌Lactobacillus casei 短杆Lactobacillus brevis 3株酵母菌是粗状假丝酵母Candida valida 汉逊氏酵母Hansenula anomala 酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae。 4.5株乳酸菌最适生长温度 其中1、2、4、5最适生长温度为30? 3号菌株最适生长温度为35? 5株乳酸菌生长曲线在0 18h呈上升趋势 在18h达到对数期 菌数达到最大 其中以2号菌株活菌数最大 为7.56×108CFU/mL 1、3、4、5号菌株活菌数依次为3.04×10CFU/mL、2.01×108CFU/mL、2.35×108CFU/mL、2.69×108CFU/mL 5株乳酸菌通过产酸试验和拮抗试验 确定1号、2号乳酸菌作为泡菜发酵剂的乳酸菌出发菌株。 5.3株酵母菌最适生长温度均为30? 在豆芽汁培
0 18h呈上升趋势 在18h达到对数期 菌数达到最养基中培养24h 其生长曲线在
大 其中以3号菌株活菌数最大 为6.98×108CFU/mL 1、2号菌株活菌数依次为3.14×108CFU/mL、4.15×108CFU/mL 酸度对1号酵母菌影响较大 对2、3号酵母菌影响较小 测定产醇能力 以3号菌最强 发酵终点酒度为2.96 确定3号菌株为泡菜发酵剂酵母菌出发菌株。 6.液体发酵剂发酵菌株通过正交试验 以酸度和酒度
1 乳酸菌与酵母菌配比1 3 接种量为指标 确定发酵菌株配比为乳酸菌配比1
为3 发酵培养基为葡糖糖含量2 、蛋白胨含量2 、磷酸盐含量0.3 、番茄汁含量15 发酵最佳温度为30?12 发酵18h达到对数期 制备的液体发酵剂的发酵能力较强 在20h达到发酵终点 酸度达到0.9687 活菌数也达到109 CFU/mL 纯乳酸菌发酵、乳酸菌与酵母菌协同发酵、自然发酵三种泡菜各个指标比较 纯菌发酵泡菜各个指标均优于自然发酵泡菜 添加酵母菌后泡菜中还原糖、总糖含量明显降低 总酯和乙醛含量高于纯乳酸菌泡菜 因而利用乳酸菌和酵母菌协同发酵泡菜效果较佳 但是液体发酵剂保存效果较差。 7.固体发酵剂制备最佳离心条件为4000r/min 30min 离心后添加保护剂后进行真空冷冻干燥 保护剂选择通过单因素试验和正交试验 得到最佳保护剂配比为 乳糖15 、山梨醇7.5 、海藻酸钠2.5 、糊精9 、脱脂奶粉9 、血清蛋白1.5 经过真空冷冻干燥后 固体发酵剂发酵产酸随时间呈上升趋势 发酵20h达到终点 酸度达到0.9083 活菌数达到5.019×109CFU/g 固体发酵剂保存采用真空包装 于-18?可以保存两个月以上。 8.固体发酵剂和液体发酵剂发酵各项指标相差不大 但均优于自然发酵 显示了纯菌发酵的优势。但总糖和还原糖的含量略高于液体发酵剂 其他指标虽然固、液两种发酵剂相差较小 由于固体发酵剂保存时间较长 选用固体发酵剂较佳。5.期刊论文 郭春叶.龚月生.刘林丽.曹雨莉 酵母菌生长曲线的测定及其转葡萄芪合酶基因重组菌遗传稳定性的检测 -安徽农业科学2007357 采用分光光度计比浊法测定酿酒酵母INVSc1的生长曲线确定菌体生长规律并以此为依据制备酿酒酵母感受态细胞进行葡萄芪合酶基因酿酒酵母重组质粒的转化采用菌落PCR法快速鉴定阳性重组子并进一步检测重组质粒在重组菌中的稳定性.结果表明于酵母菌对数生长中期OD600为0.8时进行重组质粒的转化可以得到较高的转化效率在0 72 h发酵培养过程中重组质粒在宿主菌中的稳定性达到100.这为后续工作开展葡萄芪合酶基因在酿
酒酵母中的诱导表达研究奠定了技术基础.6.学位论文 廖卢艳 红茶菌优势菌的分离鉴定及代谢产物变化规律的研究 2007 本研究对红茶菌中优势菌的分离、菌相分析及代谢特性进行了研究。 本研究主要包括三个方面的内容 1.红茶菌中优势菌种的分离与鉴定本试验对来自湖南农业大学茶叶研究自然发酵的红茶菌进行了菌种分离和鉴定。从该红茶菌中分离的优势菌种经鉴定主要有 6 株醋酸菌包括 2 株液化醋杆菌 A.liquef aciens 1 株醋化醋杆菌A.aceti 2 株重氮营养醋杆菌 A. diazot-rophicus 1 株为甲醇醋杆菌A.metha nolica。4 株酵母菌包括克鲁丝假丝酵母CandidaKrusei 汉逊德巴利酵母 Debaryomyces hansenii 栗酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombeLinder 酿酒酵母Saccharomyces ceriisiae。 2.红茶菌菌相的研究本试验的研究结果表明红茶菌在发酵过程中菌液中的微生物要比菌膜中的微生物数量多。在发酵的第6d 菌液中的醋酸菌的数量要比菌膜中的高出7倍左右 酵母菌的数量要高出2倍左右。但是 醋酸菌和酵母菌的生长曲线是相同的。同时 从红茶菌中分离出的醋酸菌和酵母菌在各菌种单一发酵的过程中因菌种的不同其生长
红茶菌发酵过程中主要代谢产物变化规律的研究在糖代谢方的曲线是不相同的。 3.
面 在单一的醋酸菌发酵过程中 醋酸菌 A3 即甲醇醋杆菌的乙酸产量最高 同时也是所有处理中产乙酸最高的。说明这个醋酸菌是产乙酸的主要菌种。在单一的酵母菌发酵过程中 酵母菌Y3即栗酒裂殖酵母的乙醇产量是最高的 说明这个酵母菌利用糖产乙醇的能力很强。通过对红茶菌发酵过程中儿茶素变化规律的研究可以看出发酵完成后CAF及儿茶素总量均略有降低 儿茶素各主要成分 EGCG、GCG、EGC、ECG、DL-C、EC 变化趋势不同。7.期刊论文 杨家华.谢占玲.俞芳.YANG Jia-hua.XIE Zhan-ling.YU Fang 食用酵母菌生物特性的研究 -青海师范大学学报 自然科学版 2008quotquot1 研究用的酵母菌是在发酵粉中分离纯化而获得.经形态学观察和糖发酵试验初步鉴定将它归属于汉逊酵母属.试验主要从汉逊酵母菌的生长曲线、蛋白质含量、最适生长温度、生物量等几个方面来研究其生物学特性.结果表明:汉逊酵母菌在室温振荡培养36h时达到生长最高峰.温度28?转速120r/min血恒温振荡培养在144h内生物量随着时间的增加而增大在这个时问段后生物量趋于稳定培养12h后胞外蛋白质含量达到最大为51.32mg/L.温度在25?-30?生长良好.8.学位论文 蒋立文 红茶菌优势微生物的分离、鉴定及抗菌机理的研究 2007 红茶菌发酵液是一种由酵母菌、乳酸菌、醋酸菌等多种微生物发酵而成的一种传统酸性茶饮料。其发酵液中含有多种营养因子 包括茶叶中一些营养成分、活的微生物细胞及其代谢产物。红茶菌来源不同 微生物种类差异很大。本论文对红茶菌优势微生物的分离鉴定、抗菌微生物的筛选、发酵液中蛋白质分析条件优化 培养过程中菌相及发酵液中的物质变化及其抑菌机理进行了研究。 主要研究结果如下 1. 从红茶菌中分离了3类共12株微生物从红茶菌中分离和鉴定的微生物有 6株醋酸菌包括2株液化醋杆菌A.liquefaciens 1株醋化醋杆菌A.aceti 2株重氮营养醋杆菌A.diazot-rophicus 1株甲醇醋杆菌A.metha nolica 4株酵母菌包括克鲁丝假丝酵母Candida Krusei 汉逊德巴利酵母Debaryomyces hansenii 栗酒裂殖酵母Schizosaccharomyces prombe Linder 酿酒酵母Saccharomyces cerivisiae 乳酸菌LALactobacillusA及乳酸菌LPLactobacillus P。其中重氮营养醋杆菌A.diazot-rophicus、甲醇醋杆菌A.metha nolica为首次发现。 2.培养过程中菌相处于动态变化中在培养过程中发现 红茶菌发酵液每毫升的微生物数量比每克菌膜中多。培养至第6d 发酵
液中的醋酸菌的数量比菌膜中的数量高出7倍 酵母菌的数量高2倍。在培养过?讨写姿峋 徒湍妇 纳 で 呦嗨啤,?鸵褐械娜樗峋 勘冉湍妇 痛姿峋 酮 涠允 て谠谂嘌 蟮牡?d 8d 比醋酸菌、酵母菌慢得多。培养时间长短不同 菌的数量存在差异。 从红茶菌中分离出的醋酸菌和酵母菌分别培养 发酵液中的数量变化具有典型的微生物生长曲线 但醋酸菌和酵母菌混合培养 二者的发酵液中的数量变化趋势无显著差异 但其发酵液中的微生物数量高于红茶菌菌膜培养的数量
pH值高于红茶菌发酵液。 3.红茶菌成膜及发酵液中的.
范文四:不同果汁发酵液中酵母菌生长曲线的测定及pH值的变化
农产品加工?学刊2009年第4期第4期总第169期农产品加工?学刊No.42009年4月
AcademicPeriodicalofFarmProductsProcessingApr.文章编号1671-9646200904-0026-02收稿日期2008-11-24基金项目武汉市市属高等学校2007年度科学研究项目
2007KB004。作者简介熊海燕1969-女湖北人副教授研究方向生物化工。世界四大水果中苹果和柑橘就占了2位。随着水果种植业的蓬勃发展和产量的迅猛增加对水果进行深加工以提高其附加值已成为迫在眉睫的一项任务苹果、柑橘酿酒就是其深加工的一个重要领域符合国家的酿酒产业政策。苹果酒是以苹果汁发酵而成的含酒精饮料其酒精含量低并含有多种氨基酸、矿物质、多糖等营养物质具有调节人体新陈代谢促进血液循环控制体内胆固醇水平抗衰老等保健作用柑橘对人体的生理有很好的调节作用如所含的类黄酮、类胡萝卜素、类柠檬素、柑橘纤维素和VC等具有很好的抗癌和抗艾滋病作用另外橙皮苷、果胶等对动脉硬化也有较好的预防作用12。果酒发酵离不开菌种以苹果、柑橘榨取的水果汁为天然培养基进行果酒发酵试验了解菌种的生长周期掌握其最佳生长阶段有利于解决果酒发酵存在的某些问题提高产品品质和生产效率。1试验材料1.1材料与试剂柑橘、苹果鲜果无霉变、腐烂成熟市售安琪葡萄酒高活性干酵母湖北安琪酵母股份有限公司提供蔗糖、葡萄糖、柠檬酸食用级市售。1.2实验仪器250—B型生化培养箱国华仪器厂产品HP—600ELA型榨汁机佛山顺德区奇伟电器有限公司提供DZKW—0—2型恒温水浴锅北京市永光明医疗仪器厂产品721分光光度计上海精密科学仪器有限公司提供酒精计3支组0100河北省武强
70?Be河北省武强玻璃仪器厂产品BCD—233型红星玻璃仪表厂产品波美氏比重计0
冰箱伊莱克斯牌。2试验方法2.1发酵工艺?水果?榨汁?过滤?调糖调酸?巴氏杀菌85?5min?冷却?干酵母?加入灭菌葡萄糖溶液?混匀?酵母活化3530min?接种?发酵?检测分析。不同果汁发酵液中酵母菌生长曲线的测定及pH值的变化熊海燕李莹武汉软件工程职业学院湖北武汉430205摘要采用浊度法测量发酵液浓度确定波长为560nm。以新鲜苹果汁、柑橘汁为原料进行生长曲线、pH值的测定发现菌种的生长规律基本保持同一性果汁原料成分的影响不显著苹果汁与柑橘汁发酵醪液中的pH值也均呈逐渐下降的趋势。关键词果汁酵母菌生长曲线pH值中图分类号
TS201.3文献标志码
AMeasurementofYeastGrowthCurveandpHValuesinDifferentFermentedFruitJuicesXiong
HaiyanLiYingWuhanVocationalCollegeofSoftwareandEngineeringWuhanHubei430205C
hinaAbstractNephelometryisadoptedtodetermintothecellconcertrationinfermentativeliquid
theselectedwavelengthis560nm.Applejuiceandorangejuiceareacceptedtodeterminethegro
wthcurveandpHvaluestheresultsshowthatthegrowthofmicroorganismsisidentityandpHofth
efermentationdecreased.Theeffectofdifferentfruitjuiceisnosignificant.Keywordsjuiceyeast
growthcarvepH2009年第4期2.2实验步骤2.2.1培养液预处理及菌种活化1将苹果切成小块开水热烫5min冷却沥干水榨汁16层纱布过滤后待用。2称取6g葡萄糖溶于50mL蒸馏水中灭菌备用。3用蔗糖调糖柠檬酸调酸。4称取6g葡萄酒活性干酵母置于50mL灭菌葡萄糖液中轻轻摇晃使菌体分散开于35?保温30min期间每10min振荡1次至有大量气泡产生时活化完毕。5将菌种接种到苹果汁中入生化培养箱培养培养箱温度为22。2.2.2最大吸收波长的确定菌种经22培养12h后取样10mL调pH值为10以抑制酵母菌的继续生长用移液管分别吸取原果汁和发酵果汁各1mL置于100mL容量瓶中定容稀释100倍。以稀释100倍原果汁的稀释液作参比利用分光光度计对稀释100倍的发酵果汁在波长550570nm进行扫描选出最大吸收峰。吸光度与波长的关系曲线见图1。
由图1可见560nm为最大吸收波长。2.2.3生长曲线的测定取盛有200mL苹果培养液的500mL锥形瓶5个各瓶中加入已活化10h的酵母培养液20mL在28恒温培养。于培养后的第3610121518小时分别用无菌移液管从各瓶中吸取培养液5mL以1cm比色皿比浊以未接种的苹果培养液为参比在波长560nm下分别测定其吸光度A值。2.2.4生长曲线的绘制以培养时间t为横坐标吸光度A为纵坐标绘制A-t标准曲线。苹果汁发酵的酵母菌生长曲线见图2。为探索不同果汁作培养基对酵母生长的影响在进行苹果汁发酵的同时进行了柑橘汁发酵的实验。柑橘汁发酵的酵母菌生长曲线见图3。2.2.5发酵液pH值的变化在发酵过程中对发酵液pH值进行了定时测量。发酵液pH值随时间的变化见表1。3结果与讨论1由图2可见利用苹果汁作底物发酵12h前酵母菌数量增加并不显著12h后酵母菌大量繁殖并在第18小时达到最大值此时酵母菌代谢非常活跃。2由图3可见利用柑橘汁作发酵底物酵母菌代谢规律与图2非常类似只是其递增趋势略显平缓。3果汁的pH值对酵母的生长会产生影响而酵母的代谢反过来也会改变果汁的pH值。由表1可知在发酵过程中由于酵母代谢所产生有机酸的不断积累使得发酵醪液中的pH值逐渐下降苹果汁与柑橘果汁的pH值下降均有相同的趋势。参考文献程绍南柑橘对人体的生理调节机能J中国柑橘1994123-25.乔旭光果品实用加工技术M北京金盾出版社200115-151.图3柑橘汁发酵的酵母菌生长曲线图2苹果汁发酵的酵母菌生长曲线波长λ/nm吸光度
A0.3700.3680.3660.3640.3620.3600.3580.3560.354545550555560565570575????
1吸光度与波长的关系曲线培养时间t/h吸光度?????图
A1.00.80.60.40.20.00510152025???????培养时间t/h吸光度
A0.80.70.60.50.40.30.20.10.005101520??????表1发酵液pH值随时间的变化时间t/h36101215183.923.913.893.873.863.833.943.913.913.893.893.89pH值苹果汁柑橘汁12熊海燕等不同果汁发酵液中酵母菌生长曲线的测定及pH值的变化?27?
范文五:2种测定产油酵母菌生长曲线方法的比较
安徽农业科学。JournalofAnhuiA鲥.Sci.201I,39(14):8202—8203。8233
责任编辑常俊香责任校对马君叶
2种测定产油酵母茵生长曲线方法的比较
马勇1’2,季祥1,蔡禄h
(1?内蒙古科技大学生物工程与技术研究所,嘲蒙古包头014010;2?包头师范学院生物科学与技术学院,内蒙古包头014030)
摘要[目的]了解产油酵母茵Y1的生长繁殖规律。[方法]采用分光光度法和直接计数法分别对产油酵母菌Yl的生长曲线进行测定,并对2种方法的测定结果进行比较。[结果]在菌株对数生长期以前,2种方法所测结果基本一致。而在菌株稳定期和衰亡期直接计数法更能真实反映酵母菌的生长情况;在对数生长期和稳定期,产油酵母茵Yl培养液的0D。值与细胞数量之间均存在较好的相关性。[结论1为优化产油酵母茵Yl的产脂发酵条件提供了参考。关键词产油酵母;分光光度法;直接计数法;生长曲线
中图分类号X78
Comparison
on
文献标识码A文章编号0517—66ll(20“)14—08202—02
MAYong014010)
Abstractoleaginous
et
MethodsofGrowthCurveqfOleaginousYeast
al(InstituteofBioengineeringandTechnology,InnerMongoliaUniversityofScienceandTechnology,Baotou,InnerMongolia
theTwoDetermination
purpose
WaSto
[Objective]1118
yeast
learnaboutthegrowthandpropagationlawof
oleaginous
yeast
Y1.[Method]111e
were
growth
curve
of
Y1was
determinedbyspectrophotometryanddirectcounting
of
better
methodresp.andtheirdeterminationresuhs
were
pared.[Re—
methodcould
suit]Beforelogarithmicphaseofthestrain,thedeterminationresultsofthe2methods
status
yeast
in
consistentbasically。thedirect
counting
reflecttheactualgrowthofcultureliquidofthe
Keywords
oleaginousyeast
oil—producingfermentationconditionofoleaginous
Y1andcellnumbershowedbetter
yeast
thestableanddeclinep'haseofthestrain;inlogarithmicphaseandstablephase,the0D600value
correlativity.[Conclusion]TIlisre.archprovidedreferenceforoptimizing
YI.
Oleaginousyeast;Spectrophotometry;Directcountingmethod;Growth
calve
微生物油脂是石化能源替代品生物柴油的潜在油源…。有0的2个三角瓶取出,立即放入4oC冰箱中贮存。将其余
微生物油脂研究将成为2l世纪油脂工业的一个重要发展方
向B1。在产油酵母的研究中,准确测定所使用菌种的生长量及生长曲线,对于了解菌种发酵产脂过程具有十分重要的意
已接入培养液的18个三角瓶于28
oC、180
r/min条件下震荡
培养,以后每隔4h取出i角瓶,测定菌悬液的OD值。1.2.3酵母菌Yl不同生长时间菌悬液OD值测定。以无
义。笔者采用分光光度法和直接计数法分别测定产油酵母
菌不同生长时间培养液的OD锄值和菌体数量,绘制其生长
菌的液体种子培养摹为空白对照,调节仪器0位和透光率
100%。用1cm比色杯加入未接种的CK样品调仪器0位。在600nm波长下测定酵母菌Y1不同生长时间培养液的OD锄值,每份样品测定3次取平均值。若菌悬液太浓,应适当稀释,使OD值在0.10—0.65。
1.2.4直接计数法测定酵母菌Yl细胞数量。将上述不同生长时间的培养液振荡均匀后作lO倍梯度稀释,稀释度为10一,lO~,10一,10~,10~,10~,分别吸取各稀释度菌液从希里格式血细胞计数板的一侧中间平台与盖玻片接触的边缘处加样,使菌液61行渗入并允满计数室,多余菌液用滤纸吸去,同样方法向男一侧计数窜加样。待酵母细胞全部沉降到计数拳底部后开始在显微镜下计数并记录,以酵母细胞数
曲线,并对2种测定方法所绘制的生长曲线进行了比较。
l材料与方法1.1材料
1.1.1菌种。产油酵母菌Y1,由内蒙古科技大学生物丁程与技术研究所实验拳保藏。
1.1.2培养基。YEPD液体培养基:葡萄糖20g/L,酵母粉
10
g/L,蛋白胨10g/L。液体种子培养基:葡萄糖20.0
5.0g/L,KH2P041.0
s/L,
(NH4)2S04
?7H200.5
g/L,酵母粉0.5
s/L,Mss04
g/L。
1.2方法
1.2.1酵母菌Y1种子液的培养。取活化后斜面酵母菌Y1
1环,接种于100ml液体YEPD培养基中,28培养14h.备用。
1.2.2酵母菌Y1不同生长时间培养液收集。取20个100m1已灭菌的j角瓶分别装入25Illl液体种子培养基,标签编号,其中1个标注为CK,将另外19个三角瓶在0~72h期间每隔4h分别标明培养时间。分别向已装入液体种子培养基的三角瓶中接入上述培养液0.1ml,震荡摇匀后将CK和标
oC、180r/min
量30—300为有效计数梯度,对每个样品重复计数3次,取其
平均值。菌液浓度=(A/4)×16×10×l
000
X
B=40000A
×B(Ⅳ1111)。式中,A为计数板中4个方格内的总菌数;B
为培养液的稀释度。2结果与分析
2.1酵母菌Y1不同生长时间培养液的oD枷值、细胞数量及菌体干重酵母菌Yl不同生长时间培养液的OD。值、细胞数量和菌体干重见表l。
2.2分光光度法测定酵母菌YI的生长曲线
以培养时间
基金项目教育部春晖计划(Z2009?1-01057);内蒙古自然科学基金
(2010MS0521);内蒙古科技大学创新基金项目
(2009NC061)。
为横坐标,OD黜值为纵坐标,绘制酵母菌Y1的生长曲线,结
果她图l。
2.3直接计数法测定酵母菌Y1的生长曲线以培养时间为横坐标,细胞数量为纵坐标,绘制酵母菌Yl的生长曲线,结果见图2。
作者简介马勇(1980一),男,辽宁台安人,硕士,实验师,从事微生物
油脂方面的研究。}通讯作者,博士,教授,从事生物质能、生物信息及分子生物学研究。
收稿日期201l-02-09
39卷14期马勇等2种测定产油酵母茵生长曲线方法的比较
8203
表1酵母菌Yl不同生长时间培养液的oD。值、细胞数量和菌体干重
Table1
YeastYlinedillllmwith
differentgrowth
ti啦offile
01)m
val-
莲
嘣.ceIl
number.cell
dry
weight
4莹-培养时间∥h
平均OD值(稀释倍数)
细胞数量∥107个/ml
宅
CulturetimeAverage
ODvalue
Cellnumber
童
00.106(0)0.1054
0.387(0)0.356吾
嘲
80.791(2)0.941
120.219(10)
1.834羹
暮
16
0.568(10)
3.716
20
0.473(20)4.941‰。
24
0.355(30)6.662图3酵母茵Yl对数生长期0D。值与直接计数细胞数量的
28
0.239(50)
6.731320.261(50)6.875
关系
360.265(50)Yl
7.553
矾g.3
Relationship
betw啪yeastODm
valueof
l删thmic
400.279(50)
7.852
向删Onand珊recI咖恤瞎cell珊吼ber
440.284(50)8.475
2.5酵母菌Y1在稳定期的oD如值与直接计数法测得细胞
480.312(50)7.625数量的关系以O巩。值为横坐标,直接计数法测定的细胞数
520.315(50)7.518量为纵坐标,绘制XY散点图,利用Excel软件绘出两者的回归
560.327(50)7.425600.330(50)
6.952曲线,结果见图4。回归方程为Y=一81.4搿+1
518.5x4—
640.354(501
6.35411290x’+41824x2—77187x+56
771(砰=O.9145)。
680.347(50)
6.221
72
0.341(50)4.575
苷
嘲蒜翟熹
%
图4酵母菌Yl稳定期oD‘。值与直接计数细胞数量的关系
Fig.4
Relationship
Y1
oD枷value
of
培养时间Cultureb咖啪yeaststa砌typ
timeⅣh
fiodanddirectcounting
cell
number
图1分光光度法测定酵母菌Yl的生长曲线
3结论与讨论
Fig.1
Growth
CUl'Ve
of
yeast
Yldetermined
byspeetroplaotonletry
酵母菌Yl在适宜生长条件下菌体细胞生长出现4个阶段:延滞期、对数期、稳定器、衰亡期。生长曲线反映了酵母菌在培养过程中的繁殖规律,同一酵母菌在不同培养条件下
的生长曲线不同。不同测定方法测得的生长曲线也不同。试
验结果表明,酵母菌Yl在培养0-4h为延滞期,4—24h为对数生长期,24—68h为稳定期,68h以后进入衰亡期。
.
朗伯一比尔定律是各类低浓度溶液吸光值定量测定的
依据,浓度过高或过低均影响测量结果的准确性¨o,因此该
试验要求样品的OD值在0.1—0.65之间,若OD值大于培养时间Culturethue//h
0.65应对培养液进行相应倍数的稀释H1。该研究中,酵母菌
图2直接计数法测定酵母菌Yl的生长曲线
Yl培养液的吸光度与直接计数细胞数量呈强相关性。分光
Fig.2
Growthcurve
ofYeastY1determined
by
direct
counting
光度法和直接计数法测定的生长曲线在对数期以前基本一method
致。前者所测为包含菌体进入稳定期后因菌体自溶产生的2.4酵母菌Yl在对数生长期的OD‰值与直接计数法测吸光值,稳定期内菌体的自溶速度小于其缓慢的增长速度,得细胞数量的关系以OD。值为横坐标,直接汁数法测定后者所测为实际观察并计数得到的菌体细胞数量。因此,对的细胞数量为纵坐标,绘制XY散点图,利用最小二乘法绘数期以后2种方法的测定结果存在一定差异。-但在菌体稳出两者的回归曲线,结果见图3。回归方程为y=2.349
8x一
定期2种方法测定结果存在相关性,并可建立两者之问的函0.8102(譬=0.9934),显著性检验结果(,=158.82,P=数关系。在严格控制试验条件的情况下,对数生长期可通过
o.000
2<0.01)表明,回归方程具有极显著意义。
(下转第8233页)
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I一7
综『一,不吲的DNA聚合酶2JI'CR.DGGE技术的影ll自姓很大的.选择合适的J卅^聚☆酶是坌兑币要的如果使ⅢL5J高质最的DNA聚合酶,即使t游引物;!JJ口人18bp的“(一r灾,也能够提高利川PCRnccE挂术柬分析微生物群落的可靠性.使研究卉能够型准确地鉴定|JI然生境或人T生境巾的微生物个体,并进行复杂微生物群落结构演替规律、微生物
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21杜自1.g跳璐#酵日堂也自{封蛙酵Pm脂的碳蛳和氰衙选j“】I中
37
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