范文一:3D水凝胶共培养肿瘤细胞和间质细胞
The role of stroma in tumor progression
The role of stroma in cancer progression is gaining increased attention in research and drug development (Polyak and Kalluri, 2010; Anton and Glod, 2009). 3-D in vitro co-culture of cancer cells and cells of the tumor microenvironment allow the investigation of this important interplay between these cells. Biochemically defined 3-D matrices are crucial to distinguish between effects of matrix components and factors produced by the cells during co-culture.
A tumor-stroma model in 3-D Life Hydrogels
3-D Life Hydrogels are used to co-culture the human breast cancer cell line MCF-7with primary human dermal fibroblasts (Figure 1 A-C). MCF-7 cells cultured alone in hydrogels form tumor-like spheroids (Fig. 1 A), whereas human dermal fibroblasts cultures alone in hydrogel appear in an outstretched phenotype typical for dermal fibroblasts in vivo (Fig. 1 B). The co-culture of both cell types results in a tumor-stroma model that allows the specific manipulation of the culture with additional factors and the analyses of the effects of this co-culture on each cell type (Fig. 1 C).
Methods
Cells were cultured in 30 μl3-D LifeDextran Hydrogels crosslinked with MMP-cleavable CD-Linkat a crosslinking strength of 3 mmol/l maleimide (Maleimide-Dextran) and SH (CD-Link)groups and modified with 0.5 mmol/lRGD peptide. Gels were prepared as described in the3-D LifeUser Guide. 3,000 MCF-7 cells and 10,000 fibroblasts were seeded alone or combined in one gel. Gels were incubated in DMEM (low glucose) containing 4 mmol/l L-Glutamine and DMEM/Ham′s F12 (1:1) containing 2.5 mmol/l L-Glutamine at a ratio of 1:2 supplemented with 10%(v/v)FBS. After 14 days of culture, cells in hydrogels were chemically fixed in 4 % paraformaldehyde in PBS for 1 hour and washed four times for 5 min in PBS. Cells were permeabilized with 0,5 % (v/v) Triton? X-100 in PBS for 10 min and washed three times for 10 min in PBS.
Gels were incubated with 1.7 μg/mlphalloidin-TRITC (Sigma) in PBS for 1.5 hr in the dark and subsequently washed three times for 5 min in PBS. Nuclei were stained by incubation of gels with 17 μmol/lSyto 24 Green? (Invitrogen) for 30 min at room temperature in the dark. Gels were washed three times 5 min with PBS and stored in PBS at 4°C.Cells in the gel were observed by epifluorescence microsopy.
References
Polyak K., Kalluri, R. The role of the microenvironment in mammary gland development and cancer. Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 2010;2:a003244.
Anton, K, Glod, J. Targeting the tumor stroma in cancer therapy. Curr. Pharm. Biotechnol. 2009;10(2):185-191.
Products used
3-D Life Dextran-CD Hydrogel Kit, Cat. No. G91-1
3-D Life RGD Peptide, Cat. No. 09-P-0
Application Note 3:
Co-culture of tumor and stroma cells in 3-D Life Hydrogels Fig. 1: Epifluorescence microscopy of mono- and co-culture of MCF-7 cancer cells and human primary dermal fibroblasts in 3-D Life Hydrogels. Cells were cultured for 14 days in Dextran gels modified with 0,5 mmol/l RGD peptide as described in Methods. A: MCF-7 cells cultured alone, B: fibroblasts cultured alone, C: co-culture of MCF-7 and fibroblasts. Red: actin cytoskeleton; green: nuclei. Scale
bar: 100 μm.
范文二:间质细胞的分离
间质细胞的分离
小鼠睾丸间质细胞的分离采用胶原酶消化法,纯化采用 Percoll 等密度梯度离心法
1. 2 间质细胞的分离、纯化和原代培养 SD 大鼠断颈处死,剥除被膜、血管,保持睾丸实 质完整。将除膜睾丸置于 0. 05%的 I 型胶原酶中, 37℃、恒温剧烈震荡消化 1O ~15 min, 最终使睾丸实质散开,但生精小管无明显断裂,然后用 100目钢筛过滤。收集滤液于 4℃、 1 100 r/min 离心 7 min,除去上清,用 0. 01 mol/L PBS(pH 7. 4) 洗 3次 (1 100 r/min , 7 min) ,弃上清。将密度为 1. 173的 Percoll 原液用 1O 倍生理盐水配成等渗,与细胞悬液充 分混匀后配成 6o %浓度混合液,于 4℃、 15 000 r/min 高速离心 60 min,离心后 Percoll 细 胞混合液体在 Percoll Bead的指示下于 1. 068密度 Percoll 层左右小心吸取细胞悬液。加等 量 PBS 洗涤 3次, 4℃离心 (1 100 r/min , 7 min),弃上清。用含 5%胎牛血清的培养液稀释 细胞至 1×10 接种于 96孔板中,在 34 oC、 5%CO ,培养箱中培养。 [1]
优缺点:本研究采取胶原酶、胰蛋白酶联合消化和 Percoll 密度梯度离心分离纯化睾丸间质 细胞,明显缩短了分离时间,避免了因消化时间过长而损伤睾丸间质细胞;消化后的混合 液再用 200目的钢筛过滤,避免了精原细胞的污染,同时也除去筋膜和大量的成纤维细胞, 明显提高了睾丸间质细胞的纯度。
用酶消化法分离大鼠睾丸问质细胞,再用 Percoll 连续密度梯度离心除去生精细胞、支 持细胞等杂细胞,实现进一步纯化
睾丸睾丸间质细胞的分离与纯化:取成年小鼠颈部脱臼法处死, 无菌方法打开腹腔, 从腹股 沟管提拉精索取出左右睾丸;用眼科剪剪去脂肪,不要弄破睾丸白膜,用无钙、镁的 Hank's 液冲洗净表面血液,立即放入冰冷的体积分数 70%乙醇中 15 min ;取出睾丸,放在培养皿 中用 Hank's 液冲洗两三遍;小心剥去睾丸白膜与较大的血管,用镊子小心将曲精小管拉散, 倒入 50 mL 离心管中, 每管加入 5 mL M199培养液,加盖后 34 ℃水浴 15 min ;加入胶原 酶和胰蛋白酶混合分散液 5 mL ,放入恒温摇床中, 34 ℃, 90 r/min , 15 min ;依次使用 200 和 400目不诱钢筛过滤于另一 50 mL 离心管中, 立即加入两三倍 4 ℃的 M199培养液, 4 ℃, 250 g 离心 10 min ,去上清;再加入培养液 15 mL ,轻轻吹打,离心,去上清。 重复一两次,以充分洗去胶原酶,最后加入 4 mL培养液并摇匀制得细胞悬液;将上述细胞 悬液用 2 mL 注射器小心加到 Percoll 梯度液面上, 每管加 2 mL; 用水平转子 4 ℃, 800 g 离心 30 min,在梯度管内可见到 3个离心沉淀带,从上到下,第 3 条带为睾丸间质细胞带, 小心吸取该条带;加入 10 mL 4 ℃培养液,吹打均匀, 4 ℃, 250 g 离心 10 min,重复 清洗一两次后,用 5 mL培养液将获得细胞制成细胞悬液。 [2]
优缺点:
目前,国内很多文献报道的分离纯化方法主要是用 Percoll 液非连续梯度方法分离 。 ,该 方法的离心速度较低, 对睾丸中的各类细胞并不能做到有效的分离, 且在配制和叠加 Percoll 各浓度液层时,方法烦琐,客观性差,并不能形成真正有效的、均匀的各密度液相层,亦无 法取得纯度高的间质细胞;并且没有太多有说服力的图表来佐证实验结果。
通过血管冲洗、Ⅱ型胶原酶消化以及 Percol 梯度离心,建立大鼠睾丸间质细胞分离方法 1) 脱臼处死大鼠, 取出睾丸, 置于 4℃的 F 10 缓冲液中 (每毫升 F 10缓冲液含 F 10粉剂 9. 8 mg、 BSA 为 1 mg、 STL 为 0. 025 mg、 NaHCO3为 0. 71 mg、 Hepes 为 2. 21 mg、 PH7. 2~7. 4) 。 2) 用玻璃微电极针从睾丸背侧动脉插管,缓慢注人 0. 3 ml含Ⅱ型胶原酶 (1 mg/m1) 的 F 10缓冲液, 血液呈聚集状沿睾丸血管汇集处流出, 且睾丸外观变白, 此操作为了减少红细胞污
染。 3) 冲洗完后,剥去睾丸白膜,置于含有 F 10缓冲液 (2. 5 ml/testis) 的锥形培养瓶中, 35℃温培 1O min。 4) 再加入等体积的含有Ⅱ型胶原酶 (0. 5 mg/m1) 的 F 10缓冲液, 于 35℃ 水浴振荡器中 (频率 9O 次/min) 温培 12 rain 。 5) 消化后,加入等体积不含胶原酶 F 10。缓 冲 液稀释中止反应。再先后通过 200目、 100目尼龙 网过滤、离心 (250 g, 10 min),去上 清,细胞沉淀于管底,再加入 F 10。缓冲液 (5ml/testis) ,并摇匀。 6) 用移液管将上述细胞 悬液加至含有 3个密度梯度 Percoll 液面上 (自上而下依次 3O 、 58 和 7O 溶液,各 2 m1), 低速冷冻离心 (4℃, 3 000 rpm, 45 min) 7)离心后,在管内可以看到 3条细胞带,收集 第二条细胞带,用 F 10, 。缓冲液稀释 2倍后,离心去上 清液,获得较纯化的 Leydig 细胞, 加入 F 10。缓冲液, 制备成细胞悬液。
优缺点:该法首先经睾丸动脉冲洗,减少红细胞污染,且Ⅱ型胶原酶渗透到睾丸组织内部, 有利于胶原酶的充分消化间质。后经Ⅱ型胶原酶限时 (12 min)消化,一方面与 I 型胶原酶 (60 min) 消化相比,大大缩短时间。另一方面限时消化,减少精细胞污染。最后经 Percoll 密度 梯度离心, 使纯化的 Leydig 细胞百分率较大提高。 本实验不足之处, 细胞存活率有所下降 (纯 化前存活率可达 98 ),主要原因是操作步骤增多,体外停留时间过长导致。 [3]
1. 3. 1睾丸间质细胞的原代培养 将小鼠用颈椎脱臼的办法处死, 浸泡于 75%的乙醇 5 min, 取出后放人已消毒的手术盘中,用眼科剪剪开腹部皮肤,取出睾丸,放人 PBS 中浸洗数次, 将睾丸放人平皿中剪碎后,加入 0. 25%胰酶, 37℃水浴振荡消化 30rain 后,弃去上清液, 重新加人 0. 05%胶原酶溶液消化, 45 min后收集上悬液, 重复 3次, 集中所有上悬液, 1 000 r /min 离心 5 min,弃上清液,用 PBS 洗涤沉淀 3次,用 2 ml含 10%FBS 的 DMEM /F12完全培养基混悬细胞,计数,将细胞稀释成 1×10。个/m1浓度的细胞悬液,按种于培养 瓶中或培养板中, 35℃, 5%CO 培养箱培养。 24 h后换液,以后每 2 d换液 1次 . [4]
优缺点 :目前, 对睾丸生殖细胞的分离培养以组织块培养法和胰蛋白酶消化接种法为主, 而 其他分离方法如曲细精管培养法 和钢网过滤筛选法 也有报道。 本实验表明, 这两种方法均 可用于睾丸间质细胞。 分离消化动物组织常用胰蛋白酶或胶原酶。 结缔组织、 肌肉等组织的 细胞基质主要为胶原, 因而分离这些组织细胞用胶原酶效果好。 但在本研究显示, 它用于消 化小鼠睾丸组织时, 虽然对组织块本身消化较彻底, 但回收的单细胞数并不比使用胰蛋白酶 多,而且细胞的存活力较差,这可能是由于消化时间过长,细胞也被破坏, 对其消化时间及 酶浓度还需进一步探索。
采用 胰蛋白酶 胶原酶二步酶消化法结合低速离心分离间质细胞
①脱颈椎处死小鼠, 无菌取出两侧睾丸放入 PBS 中;②去除附睾及白膜,加适量 DMEM 培 养液 (含 50p g/ml 青、链霉素 +2mM谷氨酰胺 +20mM Hepes(PH7. 5)+10%d~牛血清 ) ,用 眼科镊撕碎睾丸组织后移入 15ml 离心管中, 吹打至细胞分散; ③ 800r /min 水平离心 8~10 min ,弃去上层上清液后加适量培养液吹打均匀; @600r/min 离心 2min ,收集上清液,再 往离心管中加适量培养液,吹打均匀;⑤重复上一步骤 3~5次; [5]
优缺点 : 本试验根据问质细胞的结构特点,采用机械撕碎睾丸组织,吹打分散间质细胞,密 度梯度离心等初步分离纯化,操作简单,得到的细胞种类少 (主要是间质细胞,还有一些支 持细胞和精原细胞 ) 且存活率较高 (> 90%) 。
:断头处死大鼠,游离睾丸并用冷磷酸缓冲液冲洗 3遍;祛除白膜和血管后置含有 0. 03 l 型胶元酶的 McCoy 5 A培养基中, 37℃震荡 15 rain,加入等量的 McCoy 5 A培养基终止反 应。消化液用 300目不锈钢网过滤,收集过滤梭 1000 r/min 离心 10 rain,弃上清,沉淀物 用 McCoy 5 A培养基洗 2遍,条件同前。最后沉淀物混悬于 1 ml McCoy 5 A培养基中。用
McCoy 5A培养基将等渗 Percoll 细胞分离液配置成 13个浓度梯度 (20 ~80 ), 并依次加入离 心管中,将 1 ml细胞混悬液 (约 10S 细胞 ) 置细胞分离液顶端, 1 000 g室温离心 30 min,细 胞依据比重不同分为 1 3个层面 间质细胞位于第六个密度层面,吸取该层面细胞并用培养 基洗 2遍 (1 000 r/rain , 10min) , 2 ml培养基悬浮细胞后计数 . [6]
优缺点 :以往 Leydig 细胞的培养所采用的方法是通过胶原酶消化睾丸组织而得到富含 Leydig 细胞的混悬液 “ :,其中不但有所需要的 Leydig 细胞,而且还有大量的各级生精细 胞和支持细胞,常常不能精确计算 Leydig 细胞含量,再者其含量也随消化程度不同有所改 变;若将富含 Leydig 细胞的混悬液用于不同处理组之间的比较,则明显的会影响其结果的 准确性。所以分离、纯化 l eydig细胞是研究其功能变化的基础。 Percol1分离液是由包被着 聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)的二氧化硅胶体微粒构成,无毒,通过高速离心或与常规梯度分离剂 混合而形成不同密度梯度, 依据分离物的密度不同将其分离开. 是一种比较理想的生命物质 分离液。 Kumar 等。 将 Percoll 配置成不同浓度梯度来分离大鼠 Leydig 细胞,细胞纯度可 以达到 85 以上。作者依据文献用 Percol1分离纯化了大鼠 Leydig 细胞,纯度也达到 80 ~ 85 。 富含 Leyd 细胞的混悬液通过 Percol1分离纯化后其纯度大大提高, 为进一步研究 Leydig 细胞形态和功能变化提供了条件。
参考文献
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[13] 内皮素— 1对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的可能作用方式 [J].
[14] 卵泡抑制蛋白对大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响 [J].
[15] 地塞米松上调禁欲的发情雄性小鼠睾丸间质细胞芳香化酶表达 [J].
[16] 壬基酚对体外培养大鼠睾丸间质细胞分泌雄激素影响的研究 [J].
[17] 大鼠睾丸间质细胞发育的形态学研究 [J].
[18] 氯化锰对原代培养大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响 [J].
[19] 牛磺酸对体外培养大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响 [J].
[20] 米非司酮与皮质醇合用对大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响 [J].
[21] 羊睾丸提取液对小鼠受损睾丸间质细胞一氧化氮合酶活性的影响 [J].
[22] 糖皮质激素诱导大鼠睾丸间质细胞凋亡的研究 [J].
[23] 膜联蛋白 5对大鼠睾丸间质细胞中类固醇急性调节蛋白和睾酮合成相关酶表达的影响 [J]. [24] 芹菜素对大鼠睾丸间质细胞的作用 [J].
[25] 芹菜素对雄性大鼠睾丸间质细胞作用机制的研究 [J].
[26] 逆向溶血斑法检测小鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌 [J].
[27] 重金属镉对原代培养大鼠睾丸 Leydig 功能的影响 [J].
[28] 银杏叶提取物对 2型糖尿病大鼠睾丸间质细胞雄激素合成的影响 [J].
[29] Leydig cell transplantation restores androgen production in surgically castrated prepubertal rats[J].
范文三:1组织和细胞的变性是指细胞内或细胞间质中( )
2006-2007学年第一学期期末 2004级临床本科病理学试卷(A) 姓名: 学号: 班级:
注: 所有试题必须写在答题纸上, 否则视为无效
一,选择题(共25分, 45题; 其中A型题40个,每个0.5分;X型题5个,每个1分) A型(1-40题, 共计20分)
1 不属于细胞、组织的适应性变化的病变是: A.萎缩 B.发育不全 C.肥大 D.增生
E.化生
2 肾盂积水导致的肾实质萎缩属于 A. 全身性萎缩 B. 局部性萎缩 C. 废用性萎缩 D. 内分泌性萎缩 E. 压迫性萎缩
3 虎斑心”是指下列哪种病变的肉眼观? A.心肌细胞水肿 B.心肌细胞脂肪变 C.心肌间质粘液样变 D.心肌间质淀粉样变 E.心肌细胞内色素蓄积
4 关于Mallory body下列哪项是正确的? A. 肝细胞玻璃样变 B. 肝细胞凋亡
C. 浆细胞内蓄积的免疫球蛋白小体 D. 肾小管上皮细胞凋亡 E. 肾小管上皮细胞内玻璃样变 5 再生能力最强的细胞是: A. 表皮细胞 B. 肝细胞 C. 心肌细胞 D. 涎腺 E. 神经细胞
6 结核病的主要传染途径是
A. 呼吸道
B. 消化道 C. 输血 D. 皮肤
E. 接触
7炎症时嗜中性粒细胞在炎症局部发挥的主要作用是
A.免疫作用 B.代偿作用 C.吞噬作用 D.纤维性修复作用 E.再生性修复作用
8 判断组织或细胞是否发生坏死的主要标志为 A, 细胞浆的改变 B, 细胞核的改变 C, 细胞间质的改变 D, 细胞膜的改变 E. 核仁的改变
9 下列哪一种疾病是以变质为主的炎症 A 大叶性肺炎
B 流行性脑脊髓膜炎 C 白喉 D 病毒性肝炎 E 细菌性痢疾
10 轻微病变性肾小球肾炎的主要病理变化是 A.肾小管上皮细胞脂肪变性和玻璃样变性 B.肾小球系膜细胞增生
C.肾小球内皮细胞增生 D.肾小球壁层上皮细胞增生 E.足突融合消失
11 槟榔肝镜下的显著病变是 A.肝小叶中央结构破坏
B.中央静脉及血窦扩张充血和肝细胞萎缩及脂肪变性 C.肝细胞脂肪变性 D.肝细胞萎缩
E.小叶中央静脉扩张充血 12 诊断高分化鳞癌的主要依据是 A.癌巢形成
B.癌巢与间质分界清楚 C.出现角化珠
D.癌细胞似鳞状上皮细胞
1
E.癌细胞的异型性
13 血液循环中血栓随血流运行发生相应的血管阻塞的过程称之为 A.梗死 B.血栓形成 C.血栓运行 D.血栓栓塞 E.栓子
14开放性愈合出现于 A.浸润型肺结核 B.局灶型肺结核
C.原发型肺结核
D.慢性纤维空洞型肺结核 E.结核球
15 栓塞中最常见类型为 A. 血栓栓塞 B. 脂肪栓塞 C. 羊水栓塞 D. 气体栓塞 E. 瘤细胞栓塞
16 炎症的变质是指病灶局部实质细胞 A. 增生和变性 B. 萎缩和坏死 C. 增生和坏死 D. 变性和坏死 E. 萎缩和变性
17股静脉内血栓脱落易引起的并发症是 A.下肢坏疽 B.门静脉栓塞
C.肺动脉栓塞 D.肾动脉栓塞
E.脑动脉栓塞
18 类上皮细胞来源于 A.成纤维细胞 B.中性粒细胞 C.巨噬细胞 D.浆细胞 E.淋巴细胞
19 有一病人,两天前突然感冒发热寒战,呼吸困难,今天咳嗽,痰为红色带铁锈样外观,叩诊肺有一大叶实变,该病人病变性质可能为何种疾病
A. 大叶性肺炎 B. 小叶性肺炎 C. 病毒性肺炎 D .肺气肿 E. 肺脓肿
20 股骨粉碎性骨折患者可发生 A.脂肪栓塞 B.羊水栓塞
C.空气栓塞 D.血栓栓塞
E.寄生虫栓塞
21 下列哪一项不符合肿瘤性增生? A.与整个机体不协调 B.生长旺盛
C.增生过程中致瘤因子持续存在 D.具有相对自主性
E.不同程度的丧失了分化成熟的能力 22 动脉粥样硬化主要累及: A.大、中动脉的内膜 B.大、中动脉的中膜 C.小动脉的内膜 D.小动脉的中膜 E.细动脉壁
23 马氏斑(McCallum’s Patch)位于: A.右心房 B.左心房 C.右心室 D.左心室 E.心外膜
24.高血压脑出血常见部位是 A 小脑
B 内囊及基底节 C 蛛网膜下腔 D 大脑皮质 E 脑室
25慢性支气管患者咳痰的病变基础是
A. 支气管壁充血、水肿和以淋巴细胞为主的慢性炎细胞浸润B. 支气管壁腺体肥大、增生,浆液腺的黏液化
2
C. 软骨萎缩、钙化或骨化
D. 支气管黏膜上皮细胞变性、坏死 E. 支气管壁瘢痕形成
26关于干性坏疽的叙述,下列哪项是不正确的? A. 常见于四肢末端 B. 常呈黑褐色
C. 病变处皮肤皱缩 D. 与周围组织分界清楚 E. 全身中毒症状明显
27 关于凋亡,下列哪项是错误的? A. 凋亡的发生与基因调节有关
B. 活体内单个细胞或小团细胞的死亡 C. 细胞质膜破裂,核也碎裂 D. 不破坏组织结构 E. 无急性炎症
28 在寄生虫感染引起的炎症病灶中,最常见的炎细胞是A 淋巴细胞 B 浆细胞 C 中性粒细胞 D 嗜酸粒细胞
E 单核-吞噬细胞
29 慢性胃溃疡的好发部位是: A.胃前壁 B.胃后壁
C.胃底部 D.胃大弯 E.胃小弯
30 下列哪一项不是中晚期食管癌的肉眼类型? A.髓质型 B.蕈伞型 C.隆起型 D.溃疡型
E.缩窄型
31关于革囊胃的形成是指: A.范围较大的溃疡型胃癌 B.胃溃疡广泛瘢痕形成 C.胃癌癌细胞弥漫浸润胃壁 D.胃癌伴胃囊性扩张
E.胃粘液腺癌大量粘液满留
32 快速进行性肾小球肾炎最具特征的病变是 A.基底膜增厚 B.肾小球血管拌坏死 C.肾血管内膜纤维化
D.大量新月体形成 E.肾间质炎细胞浸润
33 弥漫性毛细血管内增生性肾小球肾炎增生的细胞主要是 A.内皮细胞和系膜细胞 B.壁层上皮细胞 C.脏层上皮细胞 D.系膜细胞 E.以上都不是
34 原发性良性高血压的特征性病变是 A. 细、小动脉痉挛
B. 细、小动脉的粥样硬化斑 C. 细、小动脉的硬化
D. 细、小动脉的纤维蛋白样坏死 E. 以上都不是
35 流行性乙型脑炎不具有的病变为: A 血管套袖现象
B 卫星现象和嗜神经现象 C 软化灶形成
D 小胶质细胞结节
E 蛛网膜下腔大量中性粒细胞浸润 36 继发性肺结核最常见的临床类型是 A.浸润型肺结核 B.局灶型肺结核 C.肺结核球 D.干酪样肺炎
E.慢性纤维性空洞型肺结核
37 关于溃疡型肠结核病变的叙述,下列哪项是正确的? A. 以横结肠为好发部位
B.溃疡多个、呈圆形或椭圆形,边缘整齐 C.溃疡长径与肠轴相垂直 D.溃疡底部不见结核性肉芽组织 E.溃疡愈合时很少造成肠腔狭窄 38伤寒病的病变属于
3
A变质性炎
B急性增生性炎 C急性渗出性炎 D慢性增生性炎 E假膜性炎
39有关毒性甲状腺肿镜下改变下列哪项错误: A.滤泡上皮多呈高柱状
B.上皮增生向腔内突出形成乳头 C.胶质出现吸收空泡 D.间质血管丰富 E.无淋巴细胞浸润
40.我国门脉性肝硬化的常见原因是: A.慢性酒精中毒 B.营养缺乏 C.毒物中毒 D.病毒性肝炎 E.脂肪肝
X型多项选择题(41-45,共5分) 41 慢性胃溃疡的并发症有: A.出血 B.穿孔 C.癌变
D.梗阻 E.粘连
42 纤维素性炎常发生于: A.肝脏 B.肺脏 C.浆膜 D.脾脏 E.粘膜
43 骨折愈合的基本过程有: A. 血肿形成 B. 纤维性骨痂形成 C. 软骨性骨痂形成 D. 骨性骨痂形成
E 骨痂改建或再塑
44 动脉粥样硬化的泡沫细胞可来源于:
A.巨噬细胞 B.平滑肌细胞 C.纤维母细胞 D.脂肪细胞 E.中性粒细胞
45 二期愈合见于下列哪几种伤口? A.组织缺损较大 B.创缘不整 C.哆开
D.无法整齐对合 E.感染
二 填空(每空1分, 共10分) 注: 所有试题必须写在答题纸上, 否则视为无效 1 肿瘤的生长方式有__________、__________ 、__________ 三种。 2 大叶性肺炎按病变发展过程分 ____期, _____期,_____期,______期. 3 炎症的基本病理变化为__________ 、__________ 、__________ 。 三 判断题 (每题1分,共10分;对的划√,错的划×) 1. 炎症是防御反应,对机体无害
2. 十二脂肠溃疡病很少癌变或不癌变。
3. 浸润型肺结核的常见部位是肺上叶下部或下叶上部。 4. 急性炎症时,组织以淋巴细胞浸润为主
5 肿瘤的异型性愈大,其分化程度愈高,生长速度愈快,肿瘤的恶性程度愈高。6 风湿病是一种与草绿色链球菌感染有关的变态反应性疾病。 7 高分化鳞癌无角化珠, 病理性核分裂象多见. 8 风湿性心内膜炎受累瓣膜以二尖瓣为主
9 动脉粥样斑块中不具备胆固醇结晶及坏死物质 10 小叶性肺炎又叫支气管肺炎, 为急性化脓性炎症. 四 名词解释(每小题2分,共计10分) 1 化生 2 血栓形成 3 炎症
4 肿瘤的异型性 5 病理性钙化
五,简答题(每题5分,共20分) 1 肉芽组织的成分及作用 2 胃溃疡的大体和镜下的病变特点
3 毛细血管内增生性肾小球肾炎大体、光镜和电镜下的病变特点 4 原发性肺结核和继发性肺结核的区别 六 论述题 ( 共15分)
1 试述良恶性肿瘤的区别?(7分)
2试述动脉粥样硬化各期的病变特点及继发性改变。 (8分)
4
2006-2007学年第一学期期末 2004级临床医学本科《病理学》答题纸
姓名:__________ 学号:__________ 班级:__________
(单选20分,每个0.5分; 多选5分,每个1
分)评分人
二 填空题(每题1分,共10分)
1 ____________________、 ____________________ 、____________________ 2
______________期, _______________期, _______________期,
_______________期。
3 __________ 、 __________ 、 __________ 。
三 判断(每题1分,共10分;对的划√,错的划×)
四 名词解释 (每小题2分,共10分)
1 2 3 4
5
5
2006-2007学年第一学期期末 2004级临床医学本科《病理学》答题纸
姓名:__________ 学号:__________ 班级:__________
(单选20分,每个0.5分; 多选5分,每个1
分)评分人
二 填空题(每题1分,共10分)
1 ____________________、 ____________________ 、____________________ 2
______________期, _______________期, _______________期,
_______________期。
3 __________ 、 __________ 、 __________ 。
三 判断(每题1分,共10分;对的划√,错的划×)
四 名词解释 (每小题2分,共10分)
1 2 3 4
5
五 简答题(每题5分,共20分)
1 2 3
4
六 论述题 ( 共15分)
1 2
范文四:炎症性肠病 | 上皮细胞和粘膜间质
提供:石雪迎 北京大学医学部病理学系/北京大学第三医院病理科
整理:芳芸、涣涣
来源:华夏病理学网
上皮细胞
表面上皮
变性:扁平、空泡化或灶状丢失
注:正常淋巴滤泡上方表面上皮为扁平上皮
上皮内淋巴细胞
正常
避开淋巴滤泡上方
杯状细胞
减少、粘液缺失
上皮细胞凋亡
正常时偶见于表面被覆上皮
异常时增多或出现在隐窝底
化生
假幽门腺化生
Paneth细胞化生:出现在左半结肠
粘膜间质
固有成分变化
1、平滑肌增生、复层化
2、脉管异常
3、奇异型间质细胞
按住图片左右滑动
上皮下胶原 submucosal colleagen
1、正常值3-5m,越近直肠越厚。
2、除外斜切:连续4个以上隐窝垂直于。
3、粘膜肌层平行排列。
4、表面上皮细胞核下区胞浆:不可误认为上皮下胶原。
按住图片左右滑动
异常物质沉积
1、玻璃样变(hyalinization)
2、淀粉样变
3、人工色素、虫卵等
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范文五:心脏间质细胞对心肌细胞功能和生长反应的调控作用
心脏脏脏脏胞脏心肌脏胞功能和生脏反脏的脏控作用
龚素珍龚述潘敬运龚校
()中山科大生理室医学教研 ,广龚 中山 510089
摘要 : 心龚由心肌龚胞和龚龚龚胞龚成 。龚龚龚胞通龚龚隙龚接和分泌生物活性物龚影心肌龚胞响
形龚龚和生理功能构 。心龚龚龚龚胞可分泌内皮素 、血管龚龚素 II 等生物活性物龚 ,促龚心肌龚胞肥 和增加
β心肌龚胞的搏龚龚率 。心龚成龚龚龚胞在龚胞因子 TGF2的作用下可改龚其龚胞表型 ,龚化成 有某些心肌龚胞1
特性的龚胞 ,增殖能力下降 。心肌龚胞也影成龚龚龚胞的增生及其反龚响性 ,心龚成
龚龚胞和心肌龚胞之龚存在交互作用 。
: ; ; ; 脏脏脏 龚隙龚接 心肌 心龚 成龚龚龚胞
() 文章龚号 : 100121773 2000文龚龚龚献 : A中脏分脏号 :
0620510203R331
心龚由心肌龚胞和龚龚龚胞龚成 。心肌龚龚隙龚龚形成低龚阻通路 ,有利于龚的龚冲播心龚龚龚体的 75 % ,但龚胞龚占心龚数龚以及龚龚一致的收龚 。
1 . 1非心肌龚胞2心肌龚胞培龚胚胎和新数的 1/ 3 。出生后心肌龚胞龚失增殖能力 ,
生大鼠分的龚心肌龚胞离能自龚活龚重新并形度分化的龚末龚胞 ,主司收龚功能 。龚龚
1 由成龚龚龚胞 、微血管平滑肌龚胞 、神龚龚成龚胞龚系和龚偶龚。且在新生大鼠心龚心 肌龚
, 它 龚 龚 占 心 龚 体 胞和非心肌龚胞混合培龚件条下 ,龚龚性巨 噬 龚 胞 等 龚 成
龚 的但其龚胞占心龚龚胞龚的数数 2/ 3 。成龚收龚的心肌龚胞通常通龚成龚龚龚胞相互来龚胞占龚龚龚胞的 90 %以上 。心龚的成龚龚龚 ,体心龚心肌龚胞和非心肌龚胞也可龚明离
具有增殖能力 ,而无收龚力 ,龚龚心龚的龚龚行 龚 偶 龚 , 在 它 龚 之 龚 也 存 在 龚 隙 龚
2 接 。基龚的龚生和龚沉 。龚胞外基龚是一龚龚和成龚Simp son 等首次龚行龚龚的心肌龚胞
龚龚胞培龚 ,采用 52龚尿龚龚核有效脱氧苷抑 制非三龚龚龚原支持胶网孔 ,它包埋心肌龚胞心肌龚胞特龚是成龚龚龚胞的增殖 ,龚龚 非心肌龚胞龚微血管 。成龚龚龚胞具有分泌功能 , 合能影心肌龚胞的超微龚响构 ,龚龚 心肌龚胞分化以分泌生物活性物龚 ,龚龚自身原的龚胶生β及降低心肌龚胞龚2异丙龚上 腺素的反龚性 ; 而3 龚心肌龚胞的形龚龚和生理功构能 ,心龚非心肌龚胞件培龚液龚条无 效 。Eid 等通龚龚
成年鼠心外膜龚龚龚胞和 心肌龚胞混合培龚龚龚 ,龚龚龚龚胞在心龚的正常生龚和病理重塑中起龚胞可使心肌龚 胞的肌原龚龚排列更龚龚 、心肌龚作用 。胞收龚幅度 更大以及搏龚龚率更快 ,但龚龚龚胞条隙脏接件培龚 液不能龚龚龚些反龚 ,龚是通龚龚龚龚胞和心 肌
龚胞之龚的龚隙龚接完成的 。龚隙龚接是由一龚跨膜通道龚成 , 每个龚
供 其 自 身 膜 上 的 通 道 龚 构 。在
龚 多 龚 龚胞之龚通常通龚龚隙龚接互相交来流 ,龚
的特化龚龚胞提供一直异条接 、无龚龚的
1 . 2心肌龚胞2心肌龚胞心肌龚胞自身的,使一龚胞部个内的子和小离于 1 kD 的小
物龚龚入到一另个龚胞内部 。在心龚体中龚系也影刺激因子龚响其的龚控作用 。培龚的收稿日期 :修回日期 :() 作者龚介 :龚素珍 19652,女 ,广人 龚,中山科大生理室助理究医学教研研龚 ,博士 ,从学研事生理方面的究 。19992092282000209217
pp ET21 mRNA 只在非心肌龚胞中表达 ; BQ123 新生鼠心肌龚胞龚植密度不同龚 ,龚上腺素受
,体介龚心肌龚胞肥大的作用也不同 ,心肌龚胞 密
度龚低龚 ,心肌龚胞龚去甲龚上腺素的肥大 反龚主要ETA 受特性体异拮抗龚及 Bosentan , ET 受体非
α通龚2龚上腺素受介体龚 ,龚植心肌 龚胞密度高龚 ,1特性拮抗龚均能阻非异断心肌龚胞件培龚条液 促β去甲龚上腺素龚龚的肥大反龚 主要通龚2龚上腺素4 心肌龚胞肥大作用 。ET21 在促龚心肌龚胞肥 大受介体龚。Horackova 等 也注意到分的成年离
的同龚 ,也龚心肌龚胞龚生正性龚龚作用 ,增 加心肌龚鼠和豚鼠心肌龚胞之龚的 相互龚系在龚持龚胞龚构 、5 11 龚特性及龚胞生存 中起 重 要 作 用。在 培 胞的搏龚龚率。2 . 2AngII成龚龚龚胞也可能分泌 Ang II ,龚 的 成 年 猫 心 肌 龚 胞 中 ,龚胞龚系定龚龚决+ 1415 6 下龚心肌龚胞膜上的 K,达是否龚通道表蛋白在龚胞中的位置以 及肌原龚龚的定向和排列7 。Clark 等龚龚 , 培龚的成年猫心肌龚胞功能的龚持与心肌龚胞的龚率增加有龚 ,尚清不楚 ,但也有 龚
10 需要高水平 的龚胞龚系以及有效的龚胞搏龚 。培龚道非心肌龚胞不分泌 Ang II。外源性 Ang II 的心肌 龚胞龚机械龚荷及受介体龚的肥大反龚受到龚 未能直接促心肌龚胞肥大 , 其促龚胞肥大作胞龚系龚控 ,龚需要龚胞密度到一定的水达平 。 心
用龚通龚成龚龚龚胞介龚 ,其因是 Ang II 首先 促 肌龚胞密度不龚影培响龚的成年鼠心肌龚胞 的肥大10 反龚和分化表型 ,而且影龚胞的生响存 龚龚 。如龚使 成 龚 龚 龚 胞 分 泌 ET21或 尚 未 知 胞的龚系和分化水平未到要尚达求 龚 ,心肌龚胞即16因,然后通龚龚些物龚促使心肌龚胞肥大 。子β使受到刺激因子如2龚上腺能 激龚龚的刺激 ,龚
周期性的机械龚拉不能直接龚龚心肌龚胞胞也不能龚持收龚活性 ,且肌 原龚龚萎龚 。
肥大反龚 ,但能增加心肌龚胞和非心肌龚胞混2心脏脏脏脏胞的旁分泌
( 合培龚龚的心房利龚龚/ 龚龚龚 atrial natriuretic
) peptide/ brain natriuretic peptide ,ANP/ BNP分泌
龚物 龚 增 多 是 心 肌 龚 胞 肥 大 的 表 龚 之 ,17 一。Ang II 受拮体抗龚 CV11974 能降低机械龚拉状
龚下 、混合龚胞培龚龚的 ANP/ BNP 的分泌增多
龚象 ,但龚龚龚静混合龚胞培龚的 ANP/ BNP 增2. 1ET21心龚龚龚龚胞不龚是心龚的支多龚象无效 ,表明 Ang II 参与在龚胞龚机械龚 拉8 ,910 ,11持龚胞 ,具有自分泌功能 ,且和旁分泌的肥大反龚中的心肌龚胞和非心肌龚胞之龚 的相
17 分泌生物活性物龚影自响身和龚近的心肌龚胞互作用。
的龚和功能构 。早已龚龚心龚非心肌龚胞分泌 生龚龚然心龚的神龚龚内胞数2 . 3其物它龚12 ,13 18 因子促龚心 肌 龚 胞 肥 大。非 心 肌 龚量微 极影心肌龚胞响的生理特性成,但也。
年豚鼠心龚外的星神龚状龚和心龚固有的神龚 元分胞分泌的生龚因子分子量龚 45 50 kD , 特,其龚和心室心肌龚胞混合培龚龚 ,心肌龚胞 的特性改性不同于酸性成龚龚龚胞生龚因子 、性成碱龚 龚龚龚不同 ,与内心神龚元混合培龚的心 肌龚胞收龚龚胞生龚因子 、血小板源生龚因子和龚瘤 坏死因12 率最高 ,与状星神龚龚混合培龚 的心肌龚胞收龚龚αβ子2,其促使心肌龚胞肥大反龚由2龚 上腺素率次之 ,而龚心肌龚胞培龚 龚的收龚龚率最低 。龚通α能受介龚而体非2龚上腺素能受体介 龚 ,同龚 1β道阻龚断 TTX、2龚上 腺能拮抗龚以及烟衰碱减β, 2龚上腺素能受激体龚龚丙龚上异腺 素增加非混合龚胞培龚龚的心 肌龚胞自龚性收龚作用明龚强于β( β) 心肌龚胞中龚化生龚因子2TGF2mRNA 1 1 β衰龚龚胞减培 龚中的心肌龚胞自龚收龚作用 ; 而2β的 表 达 , 而 心 肌 龚 胞 中 的 TGF21 13 10 龚上腺能 激龚龚丙龚上腺素增加异混合培龚的心肌mRNA 表达不受影响。Harada 等龚龚非心龚胞 的搏龚龚率作用大于增加龚培龚的心肌龚胞的 肌龚 胞件培条龚液可龚龚心肌龚胞肥大 ,用放免方 搏龚龚率作用 ; 毒蕈碱激龚龚 bethanechol 和毒 法探龚到孵育 72 h 的非心肌龚胞件培龚液中 条含蕈碱拮抗龚阿托品龚龚心肌龚胞培龚和混合龚( ) 有大量的皮内素 ET21, 而心肌龚胞培龚液 中
尚 未 探 龚 到 ; Northern Blot 方 法 也 龚 龚
到
511
的收龚龚率影无明龚响差龚 ,表明心肌01Jongsma HJ , Masson2pevet M ,Tsjornina L , et al . Cardiol 受神龚元的龚控 ,而支配心肌龚胞的神龚Clin ,β受2龚上腺能 、毒蕈碱碱和烟龚物龚的影1987 ,82 :454 - 564 .0219 Simpson P ,Savion S . Circ Res , 1982 ,50 :101 - 116 .。研究龚龚, PC12 能 分 泌 可 溶 龚胞03Eid H , Larson ML , Springhorn J P , et . Circulation al性促龚新生鼠心肌龚胞表面龚增大 ,蛋白合Research ,04α多以及 ANP 合成增加 ,此作用不能被1992 ,71 :40 - 50 .或α腺能抑制龚 、能抑制胆碱龚所抑制 , 而Bishopric MH , Kedes L . Proc Natl Acad Sci USA , 1991 , 88 :05龚上腺能激龚龚 、能胆碱激龚龚龚 PC12 龚2132 - 2136 .作用 ,神龚龚 Y 和生龚抑素也无作用 ,表明Horackova M , Mapplebeck C . Can J Physiol Pharmacol , 061989 ,龚胞分泌的物龚可能不是神龚龚龚 。
67 :740 - 750 .07非心肌龚胞件培龚条液在促龚培龚的心肌Simpsin DG , Decker ML , Clark WA , et al . J Cell Biol , 肥大同龚可延龚龚作龚位龚程 ,降低短龚1993 ,
08123 :323 - 336 .( ) 龚龚流 Ito的密度以及 KV龚通道的表4. 2 Clark WA , Decker ML , Behnke - Barclay M , et al . J Mol 抗龚龚素生龚因子胰抗能部分抑制非体心Cell09
胞条件培龚液促心肌龚胞肥大作用 ,但龚Cardiol , 1998 ,30 :139 - 155 .20 Yu H , Gallagher AM , Garfin PM , et al . Hypertension , 密度和 KV龚通道的表有影达没响。104. 2 1997 ,龚料龚示心龚成龚龚龚胞通龚龚隙龚接和30 :1047 - 1053 .11生物活性物龚影龚响近心肌龚胞的形龚龚Ashizawa N , Graf K , Do YS , et al . J Clin Invest , 1996 , 98 :生理特性 ,但心肌龚胞也可分泌 ANP 等物122218 - 2227 .龚来影成龚龚龚胞增响殖 ,降低成龚龚龚Harada M , Itoh H , Nakagawa O , et al . Circulation , 1997 ,4 ,2196 :反龚性, 表明成龚龚龚胞和心肌龚胞13
3737 - 3744 .存在交互影响 。Suzuki T , Tsuruda A , Katoh S , et al . J Mol Cell Cardiol , 14胞脏化1997 ,
29 :2087 - 2093 .β当用 TGF2龚 理 离 体 培 龚 的 成 年 1 15兔 龚 融Long CS , Hartogenses WE , Simpson PC. Cell Reg , 1991 龚成龚龚龚胞后 ,龚慢生龚的第二代成龚, 2 :胞可 以 龚 得 一 些 培 龚 的 心 肌 龚 胞 161081 - 1095 .22 大 体 特达肌小龚的肌龚蛋白 果mRNA,Long CS , Hartogenses WE , Simpson PC. J Mol Cell 龚些龚Cardiol ,17一龚可能性 : 心龚成龚龚龚胞可成龚心肌1993 ,25 :915 - 925 .β的干龚胞 。龚一步研究 龚 示 TGF2在 1 Guo WN , Kamiya K , Toyama KJ , et al . J Mol Cell 18龚Cardiol ,龚成龚龚龚胞表型改龚的同龚 ,也改龚了1998 ,30 :1449 - 1455 .龚龚胞的增殖能力 , 使成龚龚龚胞龚 Ang19Guo WN , Kamiya K , Toyama KJ . Heart Vessels , 1997 , Supple状激素等龚裂原物龚的刺激作用降低 ,龚
23 2012 :165 - 167 .殖能力下降。
Kim NN , Villarreal FJ , Printz MP , et al . Am J Physiol , 心龚成 龚 龚 龚 胞 具 有 自 分 泌 和 旁 1995 ,21分 泌 功需了解在心龚生龚和重塑中起重要作用 。269 : E426 - E437 .22Harada M ,Saito Y , Kuwahara K , et al . J Cardiovasc 龚龚胞除分泌 AngII , ET21 外 , 成龚龚物龚Pharmacol ,龚的作用机制 ,并龚一步了解成龚龚龚胞23( ) 1998 ,31 suppl . 1S357 - S359 .肌龚胞之龚的交互作用 。Horackova M , Huang MH , Armour JA , et al . Cardiavasc
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