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范文一：动物细胞贴壁的原理
动物细胞 贴壁的生长机理?
悬赏分:解决时间:提问者:星级少年0 | 2011-3-7 17:50 |
最佳答案
你说的是细胞培养的时候吗,
细胞培养过程添加的血清中会含有贴壁因子，细胞就是考这些贴壁因子而贴壁生长的，一般的，细胞都会贴壁生长，但是经过无血清驯化后的细胞，会从贴壁生长转到悬浮生长，目前在生物工程制药领域，趋势是使用无血清的悬浮培养为主。细胞不贴壁一样可以生长。
如果把贴壁的细胞洗下来最常用的办法就是加入胰酶消化，37?环境下放置3,5min便可，但是残留培养瓶内的胰酶对细胞有毒性作用，所以都会添加低浓度的血清以中和胰酶的。
用超声的办法也可以把细胞分离下来，但是要注意超声的频率不能太大，而且细胞很娇嫩，超声会导致细胞的破裂。
这是由细胞的性质特点决定的
有些细胞是必须要附着在支持物上才可以生长的，比如肝细胞，胃上皮细胞等等 而有些细胞可以悬浮生长，比如骨髓细胞白，血病细胞等等
这些细胞的生长都是需要添加血清的，而不是有些人说的，加入血清后会贴壁。
范文二：动物细胞工程的教案
动物细胞工程
北京四中 编稿老师：毕诗秀 审稿老师：陈月艳 责 编：陈 莉
[知识结构]
（一）动物细胞培养 1．过程：
思考：
1、细胞株和细胞系的区别?
(细胞株的遗传物质与原细胞相比并没有发生改变，而细胞系的遗传物质发生改变，并带有癌变的特点)
2、动物细胞培养液的成分和性质?
(水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、维生素和动物血清，属于液体培养基)
2、动物细胞培养技术的应用：
①生产一些蛋白质生物制品——病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体；
②检测有毒物质；
③烧伤病人的植皮。
思考：
请设计实验，通过细胞培养技术检测某一河流是否受污染以及污染的程度?
（提示：可以将实验分为两大组，一组用蒸馏水配置动物细胞培养液（对照组），一组用河水配置动物细胞培养液（实验组），分别用这两种培养液培养小鼠细胞，过一段时间后，通过显微镜观察两组培养液中细胞的形态，计算畸形率，如果两组培养液中细胞的畸形率大体相等，则说明河水没有被污染，如果实验组的畸形率高于对照组，可以判断河水被污染，可以根据畸形率的大小判断污染程度，畸形率越大，污染越严重）
（二）动物细胞融合
灭活病毒的作用：凝集蛋白质，使膜分子重新排布。
填表比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的异同：
（三）单克隆抗体的制备 1、克隆的概念
“克隆”从英文“clone”音译而来，其定义是无性繁殖系，在生物学领域有3个不同层次的含义。现在引申出的概念：遗传背景完全相同的一个群体。
1）DNA水平，特定DNA片段通过重组DNA技术插入到一个载体（如质粒和病毒等）中，然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同的该DNA片段的“群体”。
2）在细胞水平，克隆是指由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的一个细胞群体。比如：使一个单一细胞在体外的培养液中分裂若干代所形成的一个遗传背景完全相同的细胞集体即为一个细胞克隆。又如，在脊椎动物体内，当有外源物（如细菌或病毒）侵入时，会通过免疫反应产生特异的识别抗体。产生某一特定抗体的所有浆细胞都是由同一个B细胞分裂而成，这样一个浆细胞群体也是一个细胞克隆。
3）在个体水平，克隆是指基因型完全相同的两个或更多的个体组成的一个群体。比如：两个同卵双胞胎即为一个克隆。因为他（她）们来自同一个受精卵细胞，所以遗传背景完全一样。生物个体的克隆可分为植物个体的克隆、动物个体的克隆。
2、传统获得抗体一血清抗体的方法及不足： 产量低、特异性差、纯度低、反应不灵敏
3、单克隆抗体是指通过克隆，形成遗传物质完全相同的细胞群，由该细胞群产生出化学性质单一、特异性强的抗体。
单克隆抗体技术尚处于研究阶段，这项技术包含着细胞培养、动物细胞杂交技术等，是细胞培养和动物细胞杂交技术综合应用。
（1）米尔斯坦和柯勒的实验方案
（2）制备单克隆抗体的意义：疾病的预防、诊断治疗
例如：早早孕试纸、治疗癌症的生物导弹。
（四）哺乳动物和人的胚胎移植和胚胎分割移植 1、试管婴儿
概念：
“试管婴儿”是指分别将卵子、精子取出后，在体外使其受精，并发育成胚胎后，再植回母体子宫内。
试管婴儿进行的步骤：
药物诱发超排卵→监测卵泡→取卵→取精→体外受精→胚胎体外培养→胚胎移植→胚胎移植后补充激素(黄体酮)→胚胎移植后14天验晨尿确定是否妊娠→妊娠后14天，B超检查胎儿数及胚胎着床部位。
补充资料：试管婴儿的发展
试管婴儿如今已发展到第四代。第一代是指常规体外受精一胚胎移植及衍生技术，该技术适应于女性不孕问题，如输卵管性不育、排卵障碍、子宫内膜异位症、宫腔内人工授精失败、抗精子抗体的免疫因素、原因不明的女性不孕症等；第二代是指单精子卵细胞浆内显微注射受精技术，这种技术是帮助少、弱、畸精子的受孕，解决的是男性不育问题；第三代试管婴儿是指胚胎植入前遗传学诊断技术，此技术主要针对单基因遗传病：如地中海贫血症、血友病以及染色体异常等疾病，其胚胎在分裂为8个细胞时做遗传缺陷诊断，其基本理论为：从多个受精卵中选择出基因型最好的移植。如伴Y染色体遗传病，只要通过PGD技术选择生女儿便可以避免遗传病遗传给新生儿。该技术在优生方面有所进步，在不育人群中，需要作第三种试管婴儿的不育患者，相对是比较少的。第四代试管婴儿技术是指卵浆置换，该技术适用于那些排卵功能正常，但因为身体不好或者年龄偏大，致使卵子的质量不高，活力差的女性。具体方法是将妻子的卵细胞的细胞核取出，移植到一位年轻的、身体健康的女性卵子的细胞浆中，形成一个新的、优质的重组卵细胞。
专家认为：应用诱发排卵或超排卵药物后引起的恶心、呕吐、腹部不适、体重增加、少尿、肾衰等的卵巢过度刺激综合征，取卵穿刺的损伤与出血、感染、自然流产等均是试管婴儿的并发症；由于其成功率每例只有30％一40％，因此移植的通常不是一枚受精卵，这种做法在带来较高成功率的同时，也带来如多胎妊娠、婴儿早产、出生时体重过轻、产后出血、妊娠高血压等并发症，严重影响母亲和孩子的健康，同时多胎也不符合国家的计划生育政策，因此医生在尽量减少植入胚胎的同时，面对多胎必然要减胎。
1978年7月25日，英国首例试管婴儿诞生，女性。
1988年3月10日，中国首例试管婴儿在北医三院诞生，女性。
2、哺乳动物的胚胎移植和胚胎分割移植：
由于哺乳动物如牛、羊等，妊娠时间长，每胎产子数少，繁殖速度比较慢。为解决这一问题，科学家们采用了胚胎移植技术。以优良种牛的繁殖为例：首先用激素促进良种母牛多排卵，然后把卵细胞从母牛体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理、可以接受胚胎植入的母牛子宫内，孕育成小牛产出。用这种方法得到的小牛叫做试管牛，一头良种母牛一年可繁殖这样的试管牛上百头。除了牛之外，羊、兔、猪、马、猫等动物的胚胎移植也获得了成功。
思考：
1、试管婴儿和正常的怀孕生产的异同?
（相同点：都是有性生殖，胚胎都是在母体内发育，由母亲生产幼儿 不同点：试管婴儿是体外授精，而正常情况下是体内受精）
2、试管婴儿和胚胎移植属于有性生殖还是无性生殖?胚胎分割移植呢?
（试管婴儿属于有性生殖，胚胎分割移植属于无性生殖，因为胚胎经过移植后的每部分都是相同的，分割过程中没有受精的过程）
3、试管婴儿和哺乳动物的胚胎移植的目的或意义分别是什么?
（试管婴儿技术是为了解决男性或女性的不育不孕问题以及人类遗传病问题，而哺乳动物的胚胎移植是为了提高优良种畜的繁殖力）
（五）核移植
（1）核移植技术一鲤鲫鱼的培养过程：
20世纪70年代，我国科学家用核移植技术成功地培育出将鲤鱼和鲫鱼优点集于一身的、可正常繁殖的鲤鲫。具体方法是：他们用极细的玻璃管，从鲫鱼未受精的卵细胞中吸出细胞核，再用同样的方法，从鲤鱼的囊胚细胞中吸出细胞核，然后把鲤鱼囊胚细胞的核移植入去核的鲫鱼未受精卵中，形成一个组装细胞，经过精心培育长成鲤鲫，这种鱼已在北京等地推广。核移植实验不仅在鱼类获得了成功，在此之前，国外的科学家用两栖类做实验也获得了成功。科学家用核移植的方法获得了克隆鱼、克隆两栖动物之后，在20世纪80—90年代，又陆续培养出了克隆牛、羊、兔、猴、小鼠等克隆哺乳动物。
思考：
鲤鲫鱼既有鲤鱼的特点又有鲫鱼的特点说明什么?
（说明生物的性状遗传既受细胞核遗传物质的控制，又受细胞质遗传物质的控制）
（2）克隆羊多莉一Dolly的诞生过程
思考：
1、哪只羊可以是公羊?（B羊）
2、Dolly的性状和B羊完全相同说明什么问题? （生物的性状主要受细胞核控制）
3、Dolly体内的遗传物质全部来自B羊吗?为什么?
（不是，因为A羊为Dolly提供了细胞质，所以只有核物质来自于B羊）
4、科学家们设计用B、C羊的目的是什么？如果只用A羊能获得一只小羊吗?（通过此设计来比较Dolly的性状和哪只羊相似，以此证明Dolly的遗传物质主要来自于B羊）
意义：克隆动物不仅可以作为生物学和医学研究的实验动物，而且对于改良动物品种获得更
优秀动物个体用于生产、治疗人类疾病、保护濒危动物等，都有重要的应用价值。
[典型题解析]
1．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
解析：
用纤维素酶处理植物细胞，去掉细胞壁，而B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合需要用物理方法融合、诱导剂或灭活的病毒。
答案：B
2．表现型不同的10头母牛生育出基因型完全相同的小牛，产生这一结果的最可能的技术是（ ）
A．试管动物培养 B．胚胎移植 C．胚胎分割移植 D．受精卵移植
解析：
基因型完全相同的小牛应该来自同一受精卵分裂，产生这一结果的最可能的原因是经过胚胎分割移植。
答案：C
3．下列关于细胞工程的叙述中，错误的是（ ） A．植物细胞融合必须先制备原生质体
B．试管婴儿技术包括人工授精和胚胎移植两方面
C．经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传物质 D．用于培养的植物器官或组织属于外植体
解析：
细胞核移植是将供体细胞的核移植入受体细胞的去核细胞质中，该重组细胞获得的遗传物质来自两部分，一部分来自于供体核物质，一部分来自于受体细胞质，所以将来发育成的个体具有两个亲本的遗传物质。
答案：C
4．已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞尽管没有S途径，但能不断分裂
增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂交瘤细胞，请回答：
（1）试管中除融合的杂交瘤细胞外，还有_____________种融合细胞。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂交瘤细胞，并说明原理。 方法：______________________________________________________________________。 原理：______________________________________________________________________。
（3）将分离出的杂种细胞在不同的条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株，各细胞株内含有的人染色体如下表所示（“＋”有，“－”无）
测定各细胞株内人体所具有的5种酶的活性，结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④c株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的______、_______、_______、_______和_______号染色体上。
解析：
（1）试管中有人的淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞，在促溶剂的作用下，可能出现以下3种细胞的融合情况，人的淋巴细胞和淋巴细胞融合，小鼠的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合，人的淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合，实验需要的是第3种细胞，即杂交瘤细胞；
（2）要将杂交瘤细胞分离出来，可以在培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞；加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。
（3）B株有a酶活性，通过表格可以看出B株有6号染色体而A、C株没有，说明控制a酶活性的基因位于6号染色体上。控制其它酶的基因所在的染色体位置以此类推。
答案： （1）2；
（2）培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞；加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。
（3）6；1；2；7；8。
范文三：动物细胞工程的应用
动物细胞工程技术的应用
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一、 生产单克隆抗体和细胞因子
(一)生产单克隆抗体
1975年Kohler和Milstein建立B淋巴细胞杂交瘤技术以制备单克隆抗体以来，针对各种抗原的单克隆抗体已被广泛应用于生命科学的各个领域。
B淋巴细胞杂交瘤技术不但将淋巴细胞产生单一抗体的能力和骨髓瘤增生的可能性巧妙地结合起来，并且还可以通过融合进一步的筛选获得具有期望专一的抗体。
单克隆抗体的最主要的优点在于它的专一性、均质性、灵敏性以及无限量制备的可能性。
单抗在生物工程技术中占有很重要的地位，已作为商品进入市场，前景不亚于基因工程产品。其用途有以下几方面:
(1)单抗作为体外试剂:单克隆抗体最广泛的商品用途，目前仍然是用作体外诊断试剂。
(2)单抗作为体内诊断试剂:用同位素标记的单抗，在特定的组织中成像的技术，可用于肿瘤，心血管畸形的体外诊断。
(3)单抗作为导向药物的载体:单克隆抗体最大的应用前景是有可能作为导向药物的载体。导向药物是指以具有导向能力的物质为载体的药物，据信在下一世纪导向药物将普遍取代目前的常规药，特别是抗
癌药物、抗生素等。
(4)作为治疗用的单克隆抗体:它必须具有专一性高、稳定性好、亲合力强、分泌量大、针对非脱落抗原在靶细胞上的分布密度高等特点，但这是很难获得的。
此外，近来报道用单克隆抗体检测工业生产及各种焊缝管道中的早期腐蚀;人为某些化学工业的催化剂等。
(二)T淋巴细胞杂交瘤和淋巴因子
T淋巴细胞在免疫系统中占有极重要的位置，它既是调节细胞又是效应细胞。
目前，使T淋巴细胞长期在体外自下而上的方法有四种:?应用外源性的T生长因子[白细胞介素2(interleukin 2，IL,2)抗原不断再刺激的方法，使T细胞系和T细胞克隆;?应用辐射白血病病毒(radiation leukemia virus)来转化T细胞，以建立永久化的T细胞培养系;?从已建立的淋巴瘤系中来筛选有用的T细胞系;?应用杂交瘤技术来建立T淋巴细胞杂交瘤。
目前，对T淋巴细胞杂交瘤还牌理论研究阶段，为进一步用于诊断和治疗打下基础。 二、生产特殊动物
1. 改良家畜品种
(1)转基因鱼 我国学者朱作岩(1985)是国际上首次将小鼠MT/ 人GH融合基因注入金鱼受精卵中，获得了转基因金鱼。转基因金鱼的F1代比转基因鱼的同代大两倍。至今他的实验室已获得鲫、红鲫、银鲫、红鲤及泥鳅的转入生长激素基因鱼。经放射免疫检测证明，人的生长激素基因能在转基因鱼的体内正常表达，转基因鱼的生长速度明显加快，生长激素基因还能于传至后代。
在国际上，美国、加拿大和日本等国用鱼类的生长激素基因、催化素基因和抗冻蛋白基因等进行了这项研究工作，并获得了转基因虹鳟鱼、转基因鲑鱼等。
(2)转基因鸡 制作转基因鸡的转基因技术不同于哺乳类和鱼类，常用的方法是以逆转录病毒为载体，感染刚产出的受精的胚盘，从而达到目的基因导入种蛋的目的。到目前为止，所有的转基因鸡都是用这种方法制作的。美国农业部地区家畜研究所，以Grittenden为首的研究小组首次采用含有A亚型囊膜基因的、
致病性低的逆转录病毒(RAV-O-A)感染系鸡的胚盘，获得转A亚型囊膜基因鸡，命名为AVI6，系鸡是不含内源性白血病病毒的鸡。AVI6不能产生传染的禽白血病病毒(ALV)，而能编码囊膜糖蛋白，它对致病性A亚型鸡白血病病毒的感染具有高度的抵抗力。这个事实表明，插入病毒囊膜基因可能产生对某些病毒具有抵抗力的转基因家畜。美国农业部的报告认为，如果抗A亚型禽白血病病毒的转基因用于养鸡，每年可使养鸡业减少几亿美元的损失。
(3)转基因猪 人们为了提高猪的生产性能，希望能对瘦肉型猪基因工程育种研究育成生长快、肉质好的新猪种。1985年Harmmer和Berm两人首次分别用显微注射技术把MT为启动子的人生长激素融合基因(MT/hGH)注入猪的受精卵雄原核内，并将这些受精卵移植入假孕母猪，前者得到了11头人生长激素表达的转基因猪，后者得到了1头转基因猪。1987年，Pindert等人和Pursel等人分别用MT为启动子的牛生长激素融合基因(MT/bGH)通过显微注射法，获得了8头可表达牛生长激素的转基因猪。Vize (1988)采用猪生长激素基因与MT启动子的融合基因注入猪受精卵内，获得1头可表达猪生长激素的转基因猪。Ebert等(1988)获得转基因大鼠生长激素基因猪。
2. 遗传病动物模型的研制
我们要以把致癌基因导入受精卵原核内，形成转致癌基因小鼠，它可成为研究某些癌基因的致癌机理和其表达的调控过程的模型。这种转基因动物即为“癌模型鼠”。
用SV40 DNA MT启动子重组成不同的重组DNA产生的转基因小鼠， 发现的成体常出现脑脉络丛乳头瘤(tumors of the choroid plexus)。发生瘤细胞的组织在未产生瘤细胞之前，在组织内检测不到SV40大T抗原，只有在产生癌细胞之后组织内才有SV40大T抗原及其mRNA的存在。这说明在胎儿发育时期T抗原基因是处在非活化状态，而到成体得到激活因子激活T抗原基因后，产生T抗原，导致肿瘤的发生，这项工作是由Brinster等(1984)完成的。Hanahan(1985)用胰岛素基因的强化子与SV40大T抗原基因重组，导入小鼠的受精卵内，则在这种转大T抗原基因小鼠中产生胰腺癌。Steward等(1984)以同样方法把乳腺癌病毒的强化子与myc癌基因接在一起，这种重组DNA所形成的转基因小鼠，在乳腺中可发生癌变，这种致癌性可转给后代。这类建造转基因小鼠模型的工作发展很快，目前已有十多种癌基因被用来建立“癌模型鼠”。
3. 生物反应器
把目的基因导入动物体内形成转基因动物，基因在其体内表达，人们可以从其乳汁和血液内获得目的基因产物，使动物像一个活的发酵罐目的基因的产物，我们称它为动物生物反应器叵或个休表达系统。这种途径将发展成为新一代的基因工程，构建新型的工业基地――分子耕作(molecular farming)或基因耕作(gene farming)。
我国著名学者施履吉等人用含乙肝病毒表面抗原S基因与小鼠MT启动pMTSA及含有人生长激素基因SV40启动子小鼠MT启动子的pMTSA注射到兔卵的原核中，注射卵在假孕母兔子宫内发育成兔。虽然，这些转乙肝病毒表面抗原兔的血液中的表达量还很低，但说明用哺乳类(羊、牛、猪)个体可以代替在体外进行酶化学反应装置系统的常规生物反应器。目前，英国正在研究用羊β-乳球蛋白启动子和乳清蛋白启动子控制，在转基因羊体内表达α1抗胰蛋白酶和凝血因子IX。在美国用β-乳球蛋白启动子和乳清蛋白启动子控制tPA基因和促进腺激素基因转基因小鼠、乳羊和乳牛中表达产生tPA和促进腺激素。 三、生产特殊蛋白质和多肽药物
蛋白质及多肽药物的基因工程是生物工程中最活跃和最有成果的领域之一。究其原因，不外两个方面:一是由于蛋白质(多肽)是基因表达的直接产物，便于应用重组DNA技术进行研究和生产;二是在生物体内含量很低。现在人们应用DNA重组技术，将目的基因转入微生物中就可以大幅度增产，降低成本，取得巨大的经济效益，因此，基因工程首先在医药研究方面取得突破是不奇怪的。由于基因工程等生物技术的巨大经济效益和社会效益，世界各国都积极投资去研究和开发生物技术。以1992年为例，美国政府投资38亿美元，日本政府投资8亿美元，大批私人投资尚未计算在内。
世界上现在已有数十种基因工程药吕，其中已被批准临床使用并已商业化的药品列于表11,2。基因工程人胰岛素以可以作为杰出的代表。胰岛素是治疗糖尿病的主要药物。世界上有34万胰岛素患者。过去从猪和牛的胰脏中提了取胰岛素，得率低，而且在临床上有5,的病人有副反应。1979年，美国Genentech基因工程公司将胰岛素基因转入大肠杆菌，1983年已大规模投放市场。人生长激素主要用于治疗侏儒症，同时对烧伤、创伤、骨折等病症也有很好的疗效。由于种族特异性的限制，过去只能从人尸体的垂体中提
取，治疗一个病人需要60个垂体，因此远远无法满足需要。1979年美国Genentech公司成功地将人生长激素基因转入大肠杆菌中，一升培养物在7个小时内就能生成相当于60个垂体的生长激素。另外α-干扰素、β-干扰素、红细胞生成素、凝血因子?、γ-干扰素、人生长激素、人胰岛素等十余种基因工程药物的销售量在全世界具有大幅度上升的趋势。
四、生产特殊器官和组织
1、皮肤组织工程
人工皮肤是发展较快的一个领域，体外制造人工皮肤不再是一个技术难题，目前已有数种产品用于临床治疗。与传统的治疗方法相比，使用人工皮肤的优点包括:在对烧伤的治疗中可减少对供体组织的需求;减少伤口结疤和收缩现象;对大面积急性伤口可实现快速覆盖;可作为传递外界生长因子的载体等。
人工皮肤基本上可分为三个大的类型:表皮替代物、真皮替代物和全皮替代物。表皮替代物由生长在可降解基质或聚合物膜片上的表皮细胞组成。真皮替代物是用含有细胞或不含细胞的基质结构，用来诱导成纤维细胞的迁移、增殖和分泌细胞外基质。而全皮替代物包含以上两种成分，既有表皮又有真皮结构。
由于相对较小的烧伤市场并不足以支持人工皮肤工程的深入发展， 所以目前主要研究方向是针对不同的临床症状，特别是针对不同病因引起的慢性溃疡开发对其最适宜的产品。
2、人工结缔组织
在重建外科领域，通过多种途径已成功地进行了自体软骨、骨、肌腱等的移植。1994年第一次通过移植自体软骨细胞和骨膜瓣修复外伤性关节。同年用可吸收生物材料如PGA(聚羟基乙酸)和间充质细胞构成的人工组织在裸鼠皮下、鸡与兔子的关节缺损中进行了广泛的测试，证明可以形成软骨、骨和肌腱，人工软骨现已在临床上成功应用。应用组织工程技术还可以进行血管化的组织再生，将成骨细胞种植于预制的带血管蒂的生物降解载体上，将它作为一种细胞传送装置，在实验过程中，用新生胎牛的骨膜细胞种植于聚合物支架上，在动物体内培养两周以后，在移植于小鼠的右股动脉部位，六周时见有软骨细胞形成，包围于骨化小岛四周，最后在12个标本中有10个表面有新骨形成，骨化程度及骨形成密度均岁时间推移、血管长入的数量而增加，最终在血管蒂旁形成有小梁结构的新生骨组织。其中用到的生物材料对细胞有诱
导、促进分化及控制组织外形的作用，另外也提供细胞附着面。
3、器官工程
实验中的组织工程已将目标瞄准在人工肝、胰或肾等器官。肝细胞系统的研究目标主要集中在两个方面，即体外系统和体内系统。体外系统适用于肝功正在恢复的病人，或作为移植前的一个“桥梁”。它的优点是可以更好地控制细胞周围系统的介质，例如改善供氧、营养物质及废物的排泄等，另外可控制使用时间及应用阶段降低排异反应;缺点是易诱发血栓形成。植入肝细胞法则有成为肝脏永久性替代物的可能，通过现有技术可在体外培养得到大量肝细胞，然后将其转入到由生物基质构成的细胞生物反应器之类的装置中发挥功能。由于这两个步骤不连续，且不能确知细胞的分化和功能状态，因此功能并不很理想。这种内含培养的肝实质细胞的生物反应器可暂时使病人度过昏迷。
关于研究发展具有生物活性的人工胰方面，具有代表性的是微囊包裹异体细胞，即用半透膜包裹异体胰岛细胞，以便于胰岛细胞分泌的胰岛素进入血液循环及从血液中吸收营养、氧气及其它维持代谢功能必不可少的物质，此也能使胰岛细胞免受细菌和与免疫排斥有关的淋巴细胞、抗体的作用。它可对体内胰岛素的水平变化起灵敏的反应，可长期存活以及分泌胰岛素。胰岛细胞不受体内其它激素堆积的影响，但有一个问题就是胰岛素分泌量太少。
4、人工血管
Weinber等用牛肺动脉的内皮细胞、平滑肌细胞及成纤维细胞成功培养了动脉血管，它包括内皮细胞层、平滑肌细胞胶原层和成纤维细胞胶原层。内皮细胞层由一平滑的单细胞层组成，并覆盖90%以上的面积，此可使血管产生渗透屏障作用，一些大分子如白蛋白不能透过。L’Heureux于1993年采取共培养成纤维细胞、平滑肌细胞和内皮细胞的方法成功得到人工血管。首先使成纤维细胞在三维空间的网状管状物上铺地生长，然后再植上平滑肌细胞和内皮细胞，并灌注培养最后形成人工血管，所承受的压力可超过1000mmHg，可被用来进行搭桥手术用的移植血管。
5、其它
管状组织工程的制作扩展到其它组织和器官的修建，如再造食管、气管、小肠、尿道及肾脏等，最近的实验将尿道表皮细胞移植于用PGA制成的管状体中，然后移植于受体鼠内，20天后在载体上出现2-3
层尿道表皮细胞;同样将狗胎儿小肠移植于共聚物管内，再移植于大鼠体内，几周后观察到分化极佳的小肠表皮细胞的生长，且有分泌肠液的功能。
Khan用细碳丝作为支架研究受损轴突的再生能力，发现神经轴突可在支架引导下进行一定长度的再生生长，所以通过提供神经细胞的生长支架可使神经组织具有一定的恢复功能。事实上，细胞与支架表面相互作用对促进某一类细胞的生长行为是极为
五、细胞治疗
基因治疗可以理解为将正常的有功能的基因转移到患者体内发挥作用，以纠正患者体内所缺乏的蛋白水平或赋予机体新的抗病功能。而基因要转移到体内，大部分是通过以细胞为靶细胞和中介的，所以基因治疗也可称作细胞治疗。
基因治疗得以实施必须具备以下条件:?.成熟的DNA克隆技术，克隆疾病相关基因片段，并进行DNA重组，构建带有靶基因表达的原件;?.合适的基因转移手段，将靶基因转移至患者体内，并使其高效表达。1972年，Berg成功地进行了DNA重组实验，创建了重组DNA技术，从此人们就能很方便地将所需基因不断扩增并克隆到不同的表达质粒上和病毒载体中，目前生命科学领域里的最大的研究项目,,人类基因组计划致力于疾病相关基因的克隆，相信会有越来越多的基因可以用作基因治疗的靶基因。另一方面，人们进行了基因转移方法的探索，磷酸钙、电穿孔及脂质体转移等方法的建立，使得外源DNA能够转移入哺乳动物细胞。目前这些技术仍然在广泛应用，特别是反转录病毒介导的基因转移系统的建立，为人类基因治疗了基础，后来在此基础上发展起来腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒等病毒系统，从生物方法到物理、化学方法，从离体转移到体内直接转移，从随机转移到靶向转移和靶向表达的各个方面都进行了深入的研究。但是目前所有的基因转移系统尚不完善，离临床试验要求还有一定的距离，如果要取得理想的治疗效果，首先要求提高转移效率。对遗传病而言，反转录病毒转移系统因其安全性已得到公认，可列为首选。而对肿瘤疾病矾，基因转移系统应采用更为灵活的方法，其中腺病毒系统具有潜在优越性。
遗传病基因治疗方面，迄今为止已胡20余种遗传病被列为基因治疗的主要对象，如ADA缺乏症、P
NP免疫缺乏症、囊性纤维瘤(CF)、血友病、血红蛋白病等等，其中ADA基因缺乏所致的SCID病等十几种疾病研究已进入临床试验阶段。
肿瘤治疗方面，大多选择恶性程度高，其它方面难以治愈的肿瘤作为研究对象，包括恶性脑胶质瘤、黑色素瘤、肾母细胞瘤、肝癌、胃癌、肠癌、白血病等，采用的治疗基因非常广泛，既有体内缺陷基因的补充，更多的为体内原本不表达或低表达甚至根本不存在的新基因。
对于基因自身研究的深入将有利于基因治疗的研究。目的基因仅能高效转移还不够，还需达到恰当水平的表达并受到生长、发育的调控，这需要研究各种启动子和增强子及基因表达所需的其它各个调控元件的特性;合适的动物模型对基因治疗研究非常重要，可以起到促进作用，因此，应该将制备遗传病动物模型作为基因治疗的必需内容看待，例如FH基因治疗的临床试验得益于遗传性高胆固醇血症，血友病B狗为血友病B基因治疗提供了有益的动物模型。但由于天然的遗传病动物模型有限，因而需要采用基因打靶的方法制备各种遗传病小鼠模型，肿瘤模型同样重要，但其制备相对容易。
六、在基础研究中的应用
细胞工程学的所有方法在运用于生产实践之前，都要经过基础研究的阶段，而在这一研究过程中细胞工程学的某些方法的应用又为基础理论的研究提供了更多、更宽的思路。下面仅以细胞融合为例说明该方法在基础理论研究中的广泛应用。
(一)基因定位
这是细胞融合技术应用最大的成果之一。由于不同细胞，特别是不同种属的细胞融合时，常会出现一个亲本的染色体优先排除，而另一个亲本的染色体却被选择性保留，由此，即可根据杂交细胞某一表型特征是否出现，与某一染色体或其片段是否存在的相关性来确定与此表型特征相对应的基因在特定染色体或其一定区段上的位置。
(二)体细胞杂种的致瘤性分析
通过正常二倍体细胞与致瘤性或病毒转化细胞的融合，来进行致瘤性的遗传分析，是较早应用细胞融合技术的一个重要方面。
Harris和Klein等(1969、1971、1974)的实验证明，一系列高恶变性的小鼠肿瘤，与正常二倍体细胞及低恶变性的小鼠细胞融合后发现，多数杂种细胞的恶变受到抑制，在小鼠体内致瘤率明显降低。说明在正常细胞中确实存在着某种肿瘤抑制机制。对于这种抑制因子的深入研究，必将为癌变分子机理的阐明及癌症的基因，提供极其有价值的资料。
(三)遗传缺陷的基因互补
人类遗传疾病均与基因突变、缺失或异常表达有关。细胞融合技术的建立，则有可能使正常基因取代突变基因或补充缺失基因，或设法使异常基因关闭，或降低其表达水平等进行治疗。
(四)分化功能表达调控的研究
通过细胞融合，可将不同分化状态或组织类型的细胞构建成为能够存活的种内或种间杂种，同时还可对其中纳入的两亲本细胞的基因组和细胞质，如何通过相互作用而最终导致原先表达的分化性状消失或保留，或原先不表达的基因被激活，进行观察和分析。因而这一技术，也已成为真核细胞基因表达和细胞分化机制研究的有效途径之一。特别是在组织特异性分化功能表达的调控机制方面，业也取得不少有意义的结果。
范文四：动物细胞工程的概念图
动物细胞工程的概念图
概念及原理 细胞的增殖
培养基 液体、营养物质、动物血清 动物细胞培养 ?无菌无毒环境:?营养:需加入血清、血浆?适宜温度和pH?气体环境:培养条件 CO2和O2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH
技术过程 胰蛋白酶、细胞悬液、原代培养、传代培养
动获得细胞产物或细胞等 培养目的
物应用 生产生物制品、检测有毒物质 细概念
胞体细胞核移植和克隆动物 原理 细胞膜的流动性、动物细胞核的全能性 工 技术过程
程
应用
原理 细胞膜的流动性
物理方法、化学方法以及灭活的病毒 诱导方法 动物细胞融合
意义
制备单克隆抗体的技术之一 应用
B淋巴细胞分泌特异性抗体能力与骨髓瘤细胞具无限繁殖能力 制备原理
单克隆抗体
过程
杂交瘤细胞的特点 既能分泌抗体又有无限增殖的特性
特点 特异性强，灵敏度高
诊断(检测)试剂、制成“生物导弹” 应用
注:给小鼠注射特定的抗原，则最终产生相应的特异性抗体，该抗体也能与特定
的抗原发生特异性结合，从而消灭抗原。
范文五：-动物细胞工程
动物细胞工程 刘淑霞
一、单选题
1．关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ）
A.可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B.可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗
C.可以利用基因工程技术生产 D.可以在生物体内生产，不能体外生产
2．利用下列细胞工程技术培育出的新个体中，只具有一个亲本遗传性状的是（ ）
①细胞和组织培养 ②细胞融合 ③动物胚胎移植 ④克隆技术
A.①② B.②③ C.①④ D.②④
3．在动物细胞培养的有关叙述中正确的是（ ）
A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中
B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等
C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌蛋白
D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理
4．下列有关动物胚胎移植叙述，不正确的一项是（ ）
A．从受孕母畜体内取出的受精卵或胚胎均能移植
B．受体母畜必须处于与供体母畜同步发情状态
C．超数排卵技术要使用一定的激素
D．试管婴儿只有受精及早期卵裂过程在试管内进行
5．通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程：
①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 ②选出能产生抗体的B淋巴细胞 ③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群
这三个过程的先后次序是（ ）
A．②③① B．③①② C．②①③ D．①③②
6．某海洋哺乳动物的体温一般保持在40℃左右，现将其组织细胞离体培养，测定细胞在不同温度下耗氧速率，并绘出相应的曲线。该曲线应为（ ）
7．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（ ）
8．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ）
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
9．生产单克隆抗体时，在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，该试剂的作用是（ ）
A．能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 B．能激活淋巴细胞的原癌基因
C．能抑制淋巴细胞的DNA复制 D．能阻止杂交瘤细胞的核糖体上所有蛋白质的合成
10．通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程： ① 在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 ② 选出能产生抗体的效应B细胞 ③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后次序是（ ）
A.②③① B.③①② C.②①③ D.①③②
11．研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（ ）
A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞
B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞
C．抗癌药物在克隆细胞中大量合成
D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合
12．下列关于生物工程中酶的作用的叙述，错误的是（ ）
A．纤维素酶可用于植物体细胞杂交 B．胰蛋白酶可用于动物细胞培养
C．限制酶只用于提取目的基因 D．DNA连接酶只用于DNA拼接重组
13．美国杜克大学医疗中心一个研究小组在《科学》杂志上撰文透露，他们利用成年猪的动脉血管细胞和能够模拟胚胎环境的新型生物效应器，成功地在实验室培育出新的动脉血管。这种血管的外形和功能都与真的血管一样。这一研究成果是生物组织培养工程领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，不正确的是（ ）
A．以上技术属于“克隆”
B．这种技术中可能要利用去核卵细胞
C．这项技术的关键是要激发血管细胞的“全能性”
D．这项技术的关键是要激发血管细胞发育成血管的潜能
14．灭活的仙台病毒（ ）
A．失去抗原性，具有感染力 B．具有抗原性，也具有感染力
C．失去抗原性，也失去感染力 D．具有抗原性，失去感染力
15．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ）
A．不经过免疫的B淋巴细胞 B．经过免疫的T淋巴细胞
C．经过免疫的B淋巴细胞 D．不经过免疫的T淋巴细胞
16．单克隆抗体的制备过程用到了下列哪些细胞工程技术（ ）
①动物细胞培养 ②动物细胞融合 ③胚胎移植 ④核移植
A．①②③ B．①②④ C．②④ D．①②
17．下列关于细胞工程的叙述中，错误的是 （ ）
A．植物细胞融合必须先制备原生质体
B．试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面
C．经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状
D．用于培养的植物器官或组织属于外植体
18．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 （ ）
A．动物细胞培养 B．动物细胞融合 C．单克隆杭体 D．胚胎、核移植
19．关于单克隆抗体的不正确叙述是 （ ）
A．化学性质单一 B．用有性繁殖获得
C．特异性强 D．可用于治病、防病
20．细胞株的特点是 （ ）
A．遗传物质没有改变，可以无限传代 B．遗传物质发生改变，不可无限传代
C．遗传物质没有改变，不可无限传代 D．遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代
21．关于杂交瘤细胞的不正确叙述是 （ ）
A．有双亲细胞的遗传物质 B．不能无限增殖
C．可分泌特异性抗体 D．体外培养条件下可大量增殖
22.动物细胞融合技术最重要的用途是 （ ）
A．克服远源杂交不亲和 B．制备单克隆抗体
C．培育新品种 D．生产杂种细胞
23．在动物细胞培养助有关叙述中正确的是 （ ）
A．动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白
B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D．培养至50代后能继续传代的传代细胞叫细胞株
24．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是 （ ）
A．经过兔疫的B淋巴细胞 B．没经过免疫的T淋巴细胞
C．经过免疫的T淋巴细胞 D．没经过兔疫的Ｂ淋巴细胞
25．只能使动物细胞融合的常用诱导方法是 （ ）
A．PEG B．灭活的病毒 C．电刺激 D．离心
26．单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ ）
A．B淋巴细胞 B．T淋巴细胞 C．骨髓瘤细胞 D．杂交瘤细胞
27．用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ）
A．容易产生各种变异 B．具有更强的全能性
C．取材十分方便 D．分裂增殖的能力强
28．在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 （ ）
A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞
29．下列是动物细胞的工具酶的是 （ ）
A．限制酶 B． DNA连接酶 C．胰蛋白酶 D．果胶酶
30．“生物导弹”是指 （ ）
A．单克隆抗体 B．杂交瘤细胞
C．产生特定抗体的B淋巴细胞 D．在单抗上连接抗癌药物
31动物细胞工程技术的基础是 （ ）
A．动物细胞融合 B．单克隆抗体 C．胚胎移植 D．动物细胞培养
32．下列属于单克隆抗体在实践上应用的实例是( )
A．将抗药菌的某基因引入小鼠细胞内
B．培育成功的鲤鲫移核鱼
C．将胚胎经处理后植入母牛子宫内获得试管牛
D．利用免疫毒素清除异体骨髓移植中的供体骨髓T细胞
33．下列关于动物细胞培养的叙述错误的是（ ）
A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B.将所取的组织先用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞
C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离
D.动物细胞培养只能传50代，出现“危机”，这时有部分细胞的遗传物质发生改变，并带有癌变的特点，可在培养条件下无限制的传代下去
34．动物细胞培养的正确过程是（ ）
A.原代培养→传代培养→细胞株→细胞系 B. 原代培养→传代培养→细胞系→细胞株
C.传代培养→细胞系→原代培养→细胞株 D. 原代培养→细胞系→传代培养→细胞株
二、多选题
1．下列关于生物的工程的叙述中，不正确的是（ ）
A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
B．真核细胞基因结构中的非编码序列是位于编码区上游和下游的核苷酸序列
C．与血清抗体相比，单克隆抗体具有特异性强、产量高和灵敏度高等特点
D．植物体细胞杂交可解决让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状问题
2．运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（ ）
A．对小动物注射特定抗原 B．融合并筛选杂交瘤细胞
C．原代培养效应B细胞 D．将胰蛋白酶注入小动物腹腔
3．一只羊的未受精卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育．结果产下一只羊羔。这种克隆技术可以用于（ ）
A．有选择的繁殖某一性别的家畜 B.繁殖家畜中的优秀个体
C．用于保存物种 D.改变动物的基因型
4． 科学家曾试图将神经组织中的施旺细胞移植到受伤的中枢神经区域内以治疗脊髓受损伤截瘫患者，但效果并不理想。2003年，我国中山大学附属二院用嗅神经外面的嗅鞘细胞代替施旺细胞，使截瘫的治疗有了重大的突破，帮助截瘫患者重新恢复活动甚至站起来。以下说法正确的是（ ）
A．施旺细胞的分化程度比嗅鞘细胞低
B．嗅鞘细胞的培养要用到胰蛋白酶
C．高度分化的神经细胞也具有全能性
D．嗅鞘细胞与脊髓细胞的遗传物质的差异比施旺细胞小
5．最近，科学家利用猪的动脉血管以及能够模拟胚胎环境的新型生物反应器，成功的在实验室内培育出新的动脉血管。这种培养新血管的技术可能需要（ ）
A．“克隆”技术 B．去核卵细胞
C．激发血管细胞的“全能性” D．激发血管细胞发育成血管的潜能
6．下列技术可被用于制备单克隆抗体的是
A．动物细胞融合 B．体外受精 C．培育转基因动物 D．核移植
7．下面关于单克隆抗体的叙述中，不正确的是（ ）
A．单克隆抗体产自B淋巴细胞
B．单克隆抗体的制备要经过细胞融合
C．单克隆抗体的获得不需要使细胞癌变
D．单克隆抗体的制备需要使用仙台病毒
8．下列关于杂交瘤细胞的叙述正确的是（ ）
A.有双亲的遗传物质 B.不能无限增殖 C.可分泌特异性抗体 D.体外培养条件下可大量增殖
三、非选题
1．下图为细胞融合的示意图，据图回答：
(1)若A、B是植物细胞，A、B到C的过程中，常用到的化学试剂是__________。融合完成的标志是_________。 将D培育成植株需要应用_________技术。
(2)若A、B用于动物细胞培养，则A、B一般取自___________________________动物的器官或组织。
(3)若该过程用来制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，形成的C有_________种，用来培养符合要求的D细胞应该是_________，与常规抗体相比，单克隆抗体的优点是_________。
(4)用病毒作为融合剂是因为病毒的表面含有___________________________能够与细胞膜发生作用，使细胞凝集并发生融合。
2．据报道：我国科学家在肿瘤疫苗制备和单克隆抗体应用研究方面又获得重大成果：上海研制成功的一种能教会人体免疫系统识别并杀伤肿瘤细胞的新型“双功能抗体制备肿瘤疫苗”，在美国、澳大利亚等多个国家取得专利授权。这种“双功能抗体制备肿瘤疫苗” 是采用细胞融合技术，将病人身体中的肿瘤细胞与抗原提呈细胞进行“杂交”，制备出可广泛应用于恶性肿瘤治疗的高免疫原性肿瘤细胞疫苗，它兼具了肿瘤疫苗和单克隆抗体的优点。
(1)抗原提呈细胞是指能加工、处理抗原，并将抗原呈递给相应特异免疫淋巴细胞的一类免疫细胞。那么下列哪一种细胞属于抗原提呈细胞（ ）
A．吞噬细胞 B．效应T细胞 C．记忆细胞 D．效应B细胞
(2) 有人说：只要注射过一次疫苗，就会一生对此病免疫。这种说法对吗？为什么？
(3) “双功能抗体制备肿瘤疫苗” 能教会人体免疫系统识别并杀伤肿瘤细胞，人体的免疫系统识别肿瘤
细胞主要是通过细胞膜上的 实现的。
(4) 肿瘤细胞与抗原提呈细胞进行“杂交”融合时，诱导剂不同于植物细胞融合的方法是 。
(5)刚刚研制成功的“双功能抗体制备肿瘤疫苗”与常规治疗方法相比，它的优点在于 。
3．2003年1月5日18时28分，已在太空遨游92圈的“神舟四号”运行至主着陆场，随后成功回收。“神舟四号”飞船上曾进行了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、黄花烟草原生质体和“革新”一号烟草原生质体的融合两个科学实验，在电融合仪内经过160min后，终于获得成功。
⑴细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优越性在于 。
⑵动物细胞融合技术最重要的用途是 。
⑶人工诱导动物细胞融合的技术除物理法、化学法外，还可用 作为诱导剂。根据上述材料，你认为在“神舟四号”飞船上所用的诱导方法是 。
4．如下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风
杆菌抗体的实验方案，据图回答：
(1)该方案能达到预期效果吗？_________原因是
_______________________________。
(2)图中②为_________过程，常用___________________作为诱
导剂，该细胞继承了______________，因此不仅能分泌
_________，还有_________________本领。
(3)破伤风杆菌的抗体最终可以从_________和_________中提
取。
(4)该方案的目的是_________________。
6. 下图表示表示人体内各类血细胞生成的途径。a—f表示不同种
类的细胞．①—⑥表示有关过程。
(1)造血干细胞形成各种血细胞，需要经历细胞的 和 过程。成熟红细胞失去全能性的原因是 。
(2)各类血细胞均采自于造血干细胞，但它们的功能各不相同．根本原因是 。
(3)图中f代表的细胞名称是 ，需要抗原刺激才能发生的过程有 (填数字)。
(4)效应B细胞不能无限增殖，若要大量生产某种抗体，可通过细胞工程中的 技术形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞合成抗体的翻译过程需要 作为模板。单克隆抗体具有高度的 ，在疾病的诊断和治疗等方面具有广阔的应用前景。
一、单选题
DCDAC CBCAA DCCDC DCABC BBBAB DDACD DDDA
多选题ABD AB ABC ACD ABD AC ACD ACD
答案：1:(1)聚乙二醇或PEG产生细胞壁植物组织培养或组织培养 (2)动物胚胎或出生不久的幼龄 (3)3 杂交瘤细胞特异性强，灵敏度高 (4)糖蛋白和一些酶
答案：2:(1) A
(2)不对。因为一是有些疾病的病原体如流感病毒变异的频率极高，往往不同时期的流感是由于变异后的不同流感病毒引起的，所以仍然会再次感染；二是有些疫苗注射后产生的抗体和记忆细胞在体内不能保存终生。
(3)糖蛋白 (4)灭活的病毒 (5)特异性强，灵敏度高，不误伤正常细胞。
答案3：⑴克服了远缘杂交不亲和的障碍 ⑵制备单克隆抗体 ⑶灭活的病毒 物理方法
【答案】4: (1)不能 因为没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生此种抗体的效应B细胞 (2)细胞融合 灭活的病毒(或聚乙二醇) 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量繁殖 (3)培养液 小鼠腹水 (4)制备单克隆抗体
答案6：(1)增殖(分裂) 分化 没有细胞核 (2)基因的选择性表达(3)细胞 ⑤和⑥ (4)(动物)细胞融合 mRNA(信使RNA)特异性
